專利名稱：從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種天然產(chǎn)物提取工藝，特別是提取甜味絞股藍中多種有效成分的工 藝。
背景技術(shù)：
Sf Πτ^^Ι^^,Gynostemma pentaphyllum(Thunb. )Makino ^J^|^f4Cucurbitaceae 絞股藍屬Gynostemma多年生草質(zhì)藤本植物。目前，全世界有報道的甜味絞股藍三個日 本的沖繩201、，中國的恩五葉蜜、恩七葉甜。其含人參皂苷5. 5%以上，多糖12%，黃酮 1%-4%,不僅就有很高的醫(yī)藥保健價值，還有工業(yè)提取價值。1976年日本人永井正博等在絞股藍中分離得到了人參二醇和2α-羥基人參二 醇，首次揭示了絞股藍中含有達瑪烷(dammarane)型皂苷類成分。隨后，人們對絞股藍的 化學成分進行了大量的研究，迄今發(fā)現(xiàn)的絞股藍皂苷136種，其中有絞股藍皂苷(Gyp)III、 IV、VIII、VII與人參皂苷(Gin)-Rbl，-Rb3，-Rd和-F2完全相同，此外還分離得到了人參皂 Rd3，K，其余為人參皂苷的類似物。由于絞股藍的產(chǎn)地不同，其中的皂苷成分和含量也有很 大的不同。覃章錚等曾經(jīng)對1990年以前發(fā)現(xiàn)的84種皂苷成分進行過綜述性報道。由于絞 股藍皂苷具有較好的藥理療效，因此，對絞股藍皂苷成分的研究一直是熱點。1990年后，又 有52種絞股藍皂苷被相繼報道。根據(jù)苷元結(jié)構(gòu)相近的程度，這52種皂苷分為11類。其母核上的糖苷鍵帶有β -D-吡喃葡萄搪基，β -D-吡喃木糖基，α -L-吡喃鼠李 糖基，α-L-吡喃阿拉伯糖基等組成低聚糖并結(jié)合有β-D-來蘇糖基，乙?；谆?，分子 550-1064。原有的84種皂苷分為6類，它們僅是與母核連接的基團和連接的低聚糖的種類數(shù) 有差別。新的絞股藍皂苷在結(jié)構(gòu)上有很大的差別。第1類、第4類、第5類、第6類、第7類、 第10類和第11類在二十位碳上成環(huán)，但是在其成環(huán)的類型上又存在著很大的差別。第11 類所成的環(huán)為含氧的雙環(huán)。第1類、第4類、第6類、第7類和第10類所成的環(huán)為五元環(huán)，而 其中的第1類、第4類和第7類為含氧的五元環(huán)，第6類和第10類為不含氧的五元環(huán)，而且 即使在含氧的五元環(huán)中氧所在的位置也有所不同。第5類為含氧的六元環(huán)。此外，碳碳雙 鍵的有無和位置也有很大的區(qū)別，第4類、第5類、第6類和第11類不含碳碳雙鍵，其他的 幾類都含有碳碳雙鍵，第1類、第2類、第3類、第7類和第12類的碳碳雙鍵在24和25位 碳上，第8類的碳碳雙鍵在23和24位碳上，第9類和第10類的碳碳雙鍵在25和26位碳 上。毒性研究表明，絞股藍人參皂苷無毒無副作用，無三致，可大量長期使用，其含抗腫癌的 皂甙為15、21、22、33、34、55、Tashio，其對S-180肉瘤抑制率為87%，同時對腫瘤細胞有直 接殺滅作用，殺滅率高達91%，比抗癌西藥“環(huán)磷酰胺”作用更明顯；臨床治療腫癌、胃癌、 甲狀腺癌有明顯療效；其含皂甙22、30、31、32、33、35、36、37、38、39、40、51，對胃潰瘍、十二 指潰瘍有明顯治療作用，其總皂苷是細胞活化劑，降血脂、血糖，平衡血壓，延長離體細胞壽 命15. 7% -22. 7%，延長果蠅壽命53. 4% ；防治心肌梗塞和壞死；增強肝解毒功能和有促 肝細胞再生的能力，防治肝炎(能治療空洞性肝炎)；清洗體液和血液，維持機體弱堿性，增
3強機體排毒功能，提高免疫力；增加胰腺NK細胞活力；防治糖尿??；防治胸腺和腎腺萎縮； 防止輻射；降低低密度蛋白和低密度脂肪、抑制30%脂肪合成、白嫩肌膚；并顯著治療失眠 和偏頭疼；輔助治療糖尿病、防治急慢性支氣管炎；可改善睡眠，抗衰防老，益壽延年，抗血 栓、降血脂、抗?jié)?、抗疲勞、增加機體耐缺氧、耐高溫能力、對心肌梗塞及心肌缺氧再灌注 損傷的保護作用及防治糖皮質(zhì)激素的副作用；并具鎮(zhèn)靜、增加記憶力、防治便秘，防治老年 癡呆癥和提高藥物療效和降低藥物毒性功效。目前絞股藍人參皂苷在抗癌、提高免疫力、防 治心腦血管疾病，治療氣管炎、傳染性肝炎、血壓高、勞肌虛損以及防治神經(jīng)、循環(huán)、血液、內(nèi) 分泌、消化系統(tǒng)疾病、抗衰老、美容等方面廣泛應用于臨床。生產(chǎn)有片劑、針劑等具有降脂、 癌癥防治、治療心腦血管疾病、消化道疾病等多種醫(yī)藥品。近年研究發(fā)現(xiàn)絞股藍有3種絞股藍多糖GPS_2，GPS-3和GPS-4，并對其中的兩種 GPS-2，GPS-3進行了深入的研究，確定了 GPS-2的分子量為10700Dal，GPS-3的分子量為 9100Dal。GPS-2成分中含有鼠李糖和木糖，GPS-3成分中含有鼠李糖、木糖、阿拉伯糖、半乳 糖、果糖和葡萄糖。多糖具有抑制S-100肉瘤及艾氏腹水瘤等細胞生長的生物學效應，明顯 促進肝臟蛋白質(zhì)和核酸合成及骨髓造血功能，促進體細胞免疫和體液免疫功能。絞股藍多 糖為水溶性多糖，臨床具有提高免疫、抗癌、促進肺器官氧氣吸收，增強并穩(wěn)定肺器官血液 循環(huán)，增強肺器官排除淤滯、和毒素絞股藍多糖抗腫瘤、對肝損傷有保護作用、提高免疫力、 抗癌功、降血糖、對質(zhì)粒DNA有保護作用、對神經(jīng)細胞谷氨酸損傷有保護作用、抗氧化。絞股藍還含有黃酮類化合物(商陸素、蘆丁、商陸苷及丙二酸等十多種黃酮類物 質(zhì))、有鎮(zhèn)痛、抗氧化(抗衰老)、抗疲勞的作用?，F(xiàn)代研究證明絞股藍所含有效成分是生產(chǎn)畜禽抗變飼料最理想原料。之外，絞股藍還含有萜類、有機酸、生物堿、多糖、蛋白質(zhì)、鞣質(zhì)、黏液質(zhì)等以及鋅、 銅、鐵、錳、硒等微量元素。絞股藍適合在我國西南地區(qū)生長和日本的沖繩地區(qū)生長。絞股藍人參皂苷已開發(fā) 出國家二類新藥，絞股藍多糖、黃酮也已開發(fā)成藥品和保健品在市場銷售。對于絞股藍多糖、黃酮生產(chǎn)提取技術(shù)，相關(guān)的專利文獻有一種絞股藍多糖的提取 方法CN03157680. X ；一種絞股藍總?cè)藚⒃碥盏闹迫》椒?；CN03134505. 0 ；CN 03114470. 5 ； CN 03114471. 3 ；絞股藍總苷的制備方法CN200610065788. X ；絞股藍總皂甙的制備工藝 93105470. 2。非專利文獻則較多主要是人參皂苷(覃潔萍等，中國現(xiàn)代應用藥學雜志，2000， No. 3 ；李衛(wèi)等，食品科學，2004，No. 11，等)；其次是絞股藍多糖方面的相關(guān)文獻(羅祖友等， 食品科學，2007，No. 1，等)；關(guān)于絞股藍黃酮的研究報道不多(熊皓平等，中國食品學報， 2004，No. 3)。上述專利文獻和非專利文獻技術(shù)都不能很好的解決產(chǎn)品中殘留和有效成分活性 降解，及達到低成本高收率高純度連續(xù)快速提取分離絞股藍多糖、黃酮、人參皂苷的先進技 術(shù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法。 本發(fā)明提供一種用去離子水替代有機溶劑；整個提取分離過程為常溫和不超過50°C的物理提取分離干燥技術(shù)。針對當前提取甜味絞股藍有效成分生產(chǎn)工藝中使用化學試劑提取和用大孔樹脂 柱層析分離，成本高，生產(chǎn)周期長，產(chǎn)品中殘留有害化學殘基；高溫提取，降低有效活性；提 取分離時間長，效率低；單一提取某一種生物活性成分，資源利用效益低等問題；采用物理 方法連續(xù)對同批原料提取分離多種成分的提取方法，獲得甜味絞股藍中人參皂苷、黃酮、多 糖3種生物活性成分，該方法低成本高、收率高、純度高，大幅度縮短生產(chǎn)時間，產(chǎn)品綠色有 機，廢棄物生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)飼料精，生產(chǎn)過程環(huán)保，適合工業(yè)化連續(xù)生產(chǎn)，可實現(xiàn)甜味絞股藍資源 的綜合開發(fā)利用和經(jīng)濟效益的提高。本發(fā)明的技術(shù)方案是從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法，按 照如下步驟操作(一 )原料粉碎將甜味絞股藍干全草粉碎至80-105目；( 二)除離子水浸潤將粉碎的原料用離子水浸潤2小時，甜味絞股藍干全草與離 子水的重量比為1 4.5-5.5;(三)過濾空氣加壓機破壁用過濾空氣加壓機對浸潤后的原料破壁，壓力為 14-16MPa,時間14-16分鐘，然后快速釋放氣體到0. 9-1. 1個大氣壓，讓甜味絞股藍原料的 細胞壁在很大的氣壓差下快速破壁；(四)超聲波提取機低功率提取破壁原料在40°C-50°C溫度條件下發(fā)射 19-21KHZ聲波頻率的超聲波，時間14-16分鐘，將甜味絞股藍細胞壁和細胞內(nèi)的人參皂苷 及多糖提取到在水中；(五)提取液ZTC1+1沉淀取ZTC1+1-II除雜劑，將A除雜劑用除離子水配成 0. 9-1. 濃度溶解23-25小時；將B除雜劑用0. 9-1. 醋酸水配成0. 9-1. 濃度溶解 23-25小時備用；提取液膜濃縮至1 4.5-5.5，加熱至55-651，配好的4』澄清劑分別按 提取液質(zhì)量4. 5-5. 5%用量，先B后A的次序加入提取液中，將提取液中色素、蛋白質(zhì)、粘液 質(zhì)、鞣質(zhì)等膠質(zhì)物和大分子物質(zhì)完全吸附沉淀；(六)離心除雜提取液為澄清液后，把提取后的液體放入到離心機，以 15000-17000轉(zhuǎn)/分鐘速度除雜，除雜溫度55-65°C，除雜時間各1. 4-1. 6小時，離心機轉(zhuǎn)速 170-190轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，殘渣生產(chǎn)抗變飼料精；(七)超濾膜、納濾膜、離子膜復合分離使用1.4-1. 6萬分子超濾膜超濾分離出 多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸；將含有人參皂苷、黃酮、氨基酸的混合物用離子膜機除去氨 基酸和礦物離子；將含有人參皂苷、黃酮的混合物用390-410分子納濾膜將人參皂苷與黃 酮分離開；(八)膜濃縮脫水使用脫水膜濃縮機，減壓0.45-0. 55PMa，溫度55_65°C分別將 含水的皂苷、黃酮、多糖濃縮到干物質(zhì)含水量為9-11% ；(九)冷凍干燥將冷凍干燥機溫度控制在-550C至-65 °C，減壓到 0. 0014-0. 0016MPa，干燥人參皂苷、黃酮，多糖含水量為0. 7-0. 9%。本發(fā)明的創(chuàng)新點在于(一 )破壁-超聲波_壓榨聯(lián)用提取，提取率高，提取時間短，減少試劑用量、降低 濃縮成本。使用自創(chuàng)的過濾空氣加壓破壁技術(shù)，使原料細胞壁在15分鐘內(nèi)完成100%破碎，利用超聲波機在超聲頻率28KHz，超聲峰值功率300W，溫度50°C，提取24min，快速徹底將 細胞壁和細胞內(nèi)的人參皂苷和多糖萃取并溶在水中并結(jié)合每次分離提取后的殘渣進行壓 榨，保證了熱敏性的人參皂苷、多糖、黃酮在提取過程中不降解變性，提取出的人參皂苷和 多糖不降解，保持原有活性，在減少溶劑后能保證了人參皂苷、黃酮、多糖提取率分別達到 99%。因整個提取中用除離子水代替了傳統(tǒng)的有機溶劑，大大降低了成本并避免了化學有 害殘基在產(chǎn)品中的殘留，提取生產(chǎn)成本減低2/3。(二)ZTC1+1吸附除雜聯(lián)用離心除雜技術(shù)，無有害化學殘留，成本低，除雜時間快。每噸干原料僅需400元就徹底除去大分子雜質(zhì)色素、鞣質(zhì)、蛋白質(zhì)，黏液質(zhì)。大大 降低除雜成本并為后續(xù)工藝膜分離順利進行創(chuàng)造了很好的條件，克服了大孔樹脂分離除雜 時間長并溶出大孔樹脂合成物和使用化學試劑及成本高等缺點?？朔嘶瘜W試劑萃取除雜 使用試劑大，增加產(chǎn)品有害化學殘基及生產(chǎn)成本很高的缺點，除雜成本降低2/3。(三)創(chuàng)造性的實現(xiàn)了低成本、快速度，不用合成化學試劑，用物理方法分離出無 有害物的高純度的甜味絞股藍人參皂苷、多糖、黃酮產(chǎn)品。根據(jù)研究的提取純化甜味絞股藍人參皂苷、多糖、黃酮工藝流程研究參數(shù)，將儲液 罐、空氣加壓破壁罐、超聲波機、壓榨機、離心除雜機、納濾機、超濾機、膜濃縮機、反饋式離 子膜機、冷凍干燥機等設(shè)備整合設(shè)計成一條物理提取分離純化甜味總?cè)藚⒃碥?、總多糖?生產(chǎn)線。聯(lián)用納濾機、超濾機、膜濃縮機、反饋式離子膜機、冷凍干燥機設(shè)備技術(shù)連續(xù)低成本 的分別快速提取出高純度人參皂苷、多糖、黃酮，實現(xiàn)了現(xiàn)代化物理分離高純度人參皂苷、 總多糖、黃酮的創(chuàng)新生產(chǎn)技術(shù)，產(chǎn)品無化學殘基，保持了生物活性，比傳統(tǒng)工藝生產(chǎn)時間縮 短 2/3。生產(chǎn)出的未精制的人參皂苷產(chǎn)品提取率99%、收率91.9%、純度92% ；多糖產(chǎn)品 提取率99 %、收率80 %、純度82 %。黃酮產(chǎn)品提取率99 %、收率80 %、純度80 %，比目前使 用生產(chǎn)工藝生產(chǎn)時間縮短100%，由原有工藝生產(chǎn)時間6天生產(chǎn)一批次產(chǎn)品縮短到3天生產(chǎn) 一批次產(chǎn)品，成本降低60 %以上。本提取分離工藝，用水代替了有機試劑，大幅度節(jié)省費用，防止了化學有害殘基在 產(chǎn)品中殘存，提高了中間體產(chǎn)品的安全性。提取分離濃縮干燥都采用低溫物理方法，產(chǎn)品不 降解不變性，生產(chǎn)成本低，生產(chǎn)速度快，生產(chǎn)出的人參皂苷、黃酮、總多糖產(chǎn)品不僅達到綠色 有機出口標準并在防病保健功效顯著。分離殘渣因富含蛋白質(zhì)(23% -25% )未被污染，可以生產(chǎn)抗變飼料精。不污染環(huán) 境，提高了產(chǎn)品的市場競爭力和公司的抗風險能力，保證產(chǎn)品質(zhì)量并可滿足國際市場的需 求。
具體實施例方式下面用最佳的實施例對本發(fā)明作詳細的說明。實施例一從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法，按照如下步驟操作(1)將新鮮絞股藍莖葉干燥、粉碎80目-100目作為提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除離子水)比置儲存罐常溫20°C-30°C浸潤2h。充分吸漲的材料置破壁罐升 溫60°C，罐壓控制15MPa，恒壓時間15min放壓破壁。(3)離心分離收集破壁液，殘渣用壓榨
6機榨干水分集并到離心分離收集的破壁液中。(4)干殘渣加5倍(除離子水)，吸漲2h，置 超聲波機超聲頻率28KHz，超聲峰值功率300W，溫度50°C提取24min。離心分離超聲波機 提取液集并到離心分離收集的破壁液中，殘渣用壓榨機榨干水分集并到離心分離收集的破 壁液中。(5)干殘渣加5倍(除離子水)，保溫30°C并攪拌，50轉(zhuǎn)/min，吸漲2h，離心分離 浸泡提取液集并到離心分離收集的破壁液中，殘渣用壓榨機榨干收集水分集并到離心分離 收集的破壁液中。(6)檢驗殘渣中多糖、黃酮、人參皂苷含量，多糖、黃酮、人參皂苷的提取率 達到99%后(殘渣烘干作為生產(chǎn)抗變飼料原料)。(7)提取的合并液置除雜罐中，加溫到 75°C，取ZTC1+1-II除雜劑(配好的A、B澄清劑將A除雜劑用除離子水配成濃度溶解 24h ；將B除雜劑用1 %醋酸水配成1 %濃度溶解24h備用)。提取液膜濃縮至干材料1 5 除離子水，加熱至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不斷攪拌，待提 取液變很透明時停止加溫和攪拌，上離心機離心分離殘雜(色素、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)生 產(chǎn)飼料)，得透明總提取液。(8)透明液輸入12萬分子超濾膜超濾分除去少量雜質(zhì)減壓、干 燥，干燥器內(nèi)夾層蒸汽工作壓力0. 005MPa，干燥器內(nèi)真空度真空度60KPa生產(chǎn)飼料和分離 出多糖、人參皂苷、黃酮、氨基酸、礦物離子混合液。(9)分離出的混合液輸入2. 5萬分子超 濾膜超濾分離出一部分多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸、礦物離子混合液。多糖置儲存罐中。 (10)分離得到的混合液用2000分子超濾膜分離出小分子多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸， 礦物離子等混合液，多糖集并儲存罐中，使用膜濃縮機，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0. 3MPa，溫度 60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥多糖，溫度控制在-60°C，真空度 IOPa,干燥至浸膏時用精制糧食酒精95%沉淀多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干含水 量8%得多糖產(chǎn)品；回收酒精得干燥物集并到混合液中。(11)混合液用450分子納濾膜分 離出人參皂苷和黃酮、氨基酸，礦物離子混合液。人參皂苷使用脫水膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參 數(shù)操作壓力0. 3(MPa)，溫度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥人 參皂苷，溫度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥含水量8%得人參皂苷產(chǎn)品。(12)混合液用 離子膜機分離出黃酮和氨基酸、礦物離子混合液，黃酮使用膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參數(shù)操作 壓力0.3(MPa)，溫度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥黃酮，溫度 控制在-60°C，真空度IOPa干燥含水量8%得黃酮產(chǎn)品。(13)氨基酸、礦物離子混合液減 壓濃縮干燥，生產(chǎn)參數(shù)溫度80°C，真空度60KPa，蒸餾水回收用于提取前干材料浸潤，氨基 酸、礦物離子混合液濃縮液生產(chǎn)參生產(chǎn)飼料。實施例二(1)將新鮮絞股藍莖葉干燥、粉碎200目-300目作為提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除離子水)比置儲存罐常溫20°C-30°C浸潤2h。充分吸漲的材料置破壁罐升 溫60°C，罐壓控制15MPa，恒壓時間15min放壓破壁。(3)離心分離收集破壁液，殘渣用壓 榨機榨干水分集并到離心分離收集的破壁液中。(4)干殘渣加5倍(除離子水)，吸漲2h， 置超聲波機超聲頻率28KHz，超聲峰值功率300W，溫度50°C提取24min。離心分離超聲波 機提取液集并到離心分離收集的破壁液中，殘渣用壓榨機榨干水分集并到離心分離收集的 破壁液中。(5)檢驗殘渣中多糖、黃酮、人參皂苷含量，多糖、黃酮、人參皂苷的提取率達到 99%后(殘渣烘干作為生產(chǎn)抗變飼料原料)。(6)提取的合并液置除雜罐中，加溫到75°C，取 ZTC1+1-II除雜劑(配好的A、B澄清劑將A除雜劑用除離子水配成濃度溶解24h ；將B 除雜劑用醋酸水配成濃度溶解24h備用)。提取液膜濃縮至干材料1 5除離子水，
7加熱至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不斷攪拌，待提取液變很透 明時停止加溫和攪拌，上離心機離心分離殘雜(色素、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)生產(chǎn)飼料)，得 透明總提取液。(7)透明液輸入12萬分子超濾膜超濾分除去少量雜質(zhì)減壓、干燥，干燥器內(nèi) 夾層蒸汽工作壓力0. 005MPa，干燥器內(nèi)真空度真空度60KPa生產(chǎn)飼料和分離出多糖、人參 皂苷、黃酮、氨基酸、礦物離子混合液。(8)分離出的混合液輸入2. 5萬分子超濾膜超濾分離 出一部分多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸、礦物離子混合液。多糖置儲存罐中。(9)分離得到 的混合液用2000分子超濾膜分離出小分子多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸，礦物離子等混 合液，多糖集并儲存罐中，使用膜濃縮機，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0. 3MPa，溫度60°C，濃縮到 干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥多糖，溫度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥至 浸膏時用精制糧食酒精95%沉淀多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干含水量8%得多糖 產(chǎn)品；回收酒精得干燥物集并到混合液中。(10)混合液用450分子納濾膜分離出人參皂苷 和黃酮、氨基酸，礦物離子混合液。人參皂苷使用脫水膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力 0. 3 (MPa)，溫度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥人參皂苷，溫度控 制在-60°C，真空度10Pa，干燥含水量8%得人參皂苷產(chǎn)品。(11)混合液用離子膜機分離出 黃酮和氨基酸、礦物離子混合液，黃酮使用膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0. 3 (MPa)， 溫度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥黃酮，溫度控制在-60°C，真 空度IOPa干燥含水量8%得黃酮產(chǎn)品。(12)氨基酸、礦物離子混合液作魚塘飼料使用。實施例三(1)將新鮮絞股藍莖葉干燥、粉碎200目-300目作為提取原料；(2)原料粉末以 1 5料液(除離子水)比置儲存罐常溫20°C-30°C浸潤2h。充分吸漲的材料置破壁罐 升溫60°C，罐壓控制15MPa，恒壓時間15min放壓破壁。(3)離心分離收集破壁液，殘渣用 壓榨機榨干水分集并到離心分離收集的破壁液中。(4)干殘渣加5倍除離子水，吸漲2h， 置超聲波機超聲頻率28KHz，超聲峰值功率300W，溫度50°C提取24min。離心分離超聲波 機提取液集并到離心分離收集的破壁液中，殘渣用壓榨機榨干水分集并到離心分離收集的 破壁液中。(5)檢驗殘渣中多糖、黃酮、人參皂苷含量，多糖、黃酮、人參皂苷的提取率達到 99%。(殘渣烘干作為生產(chǎn)抗變飼料原料)。(6)提取的合并液置除雜罐中，加溫到75°C，取 ZTC1+1-II除雜劑(配好的A、B澄清劑將A除雜劑用除離子水配成濃度溶解24h ；將B 除雜劑用醋酸水配成濃度溶解24h備用)。提取液膜濃縮至干材料1 5除離子水， 加熱至75°C按提取液5%用量，先B后A的次序加入提取液中并不斷攪拌，待提取液變很透 明時停止加溫和攪拌，上離心機離心分離殘雜(色素、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)生產(chǎn)飼料)，得 透明總提取液。(7)透明液輸入12萬分子超濾膜超濾分除去少量雜質(zhì)減壓、干燥，干燥器內(nèi) 夾層蒸汽工作壓力0. 005MPa，干燥器內(nèi)真空度真空度60KPa生產(chǎn)飼料和分離出多糖、人參 皂苷、黃酮、氨基酸、礦物離子混合液。(8)分離得到的混合液用2000分子超濾膜分離出小 分子多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸，礦物離子等混合液，小分子多糖集并儲存罐中，使用膜 濃縮機，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0. 3MPa，溫度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干 燥機干燥多糖，溫度控制在-60°C，真空度10Pa，干燥至浸膏時用精制的95%糧食酒精沉淀 大分子多糖和小分子多糖，收集酒精液，沉淀多糖75°C烘干得含水量8%多糖產(chǎn)品；回收酒 精所得浸膏集并到混合液中。(9)混合液用450分子納濾膜分離出人參皂苷和黃酮、氨基 酸，礦物離子混合液。人參皂苷使用脫水膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0. 3 (MPa)J^度60°C，濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥人參皂苷，溫度控制在-60°C， 真空度10Pa，干燥含水量8%得人參皂苷產(chǎn)品。(10)混合液用離子膜機分離出黃酮和氨基 酸、礦物離子混合液，黃酮使用膜濃縮機濃縮，生產(chǎn)參數(shù)操作壓力0.3(MPa)，溫度60°C， 濃縮到干物質(zhì)水為1 10時，用冷凍干燥機干燥黃酮，溫度控制在_60°C，真空度IOPa干 燥含水量8%得黃酮產(chǎn)品。(12)氨基酸、礦物離子混合液作魚塘飼料使用。
以上實施例是本發(fā)明較優(yōu)選具體實施方式
的一種，本領(lǐng)域技術(shù)人員在本技術(shù)方案 范圍內(nèi)進行的通常變化和替換應包含在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法，其特征在于，按照如下步驟操作(一)原料粉碎將甜味絞股藍干全草粉碎至80 105目；(二)除離子水浸潤將粉碎的原料用離子水浸潤2小時，甜味絞股藍干全草與離子水的重量比為1∶4.5 5.5；(三)過濾空氣加壓機破壁用過濾空氣加壓機對浸潤后的原料破壁，壓力為14 16MPa，時間14 16分鐘，然后快速釋放氣體到0.9 1.1個大氣壓，讓甜味絞股藍原料的細胞壁在很大的氣壓差下快速破壁；(四)超聲波提取機低功率提取破壁原料在40℃ 50℃溫度條件下發(fā)射19 21KHz聲波頻率的超聲波，時間14 16分鐘，將甜味絞股藍細胞壁和細胞內(nèi)的人參皂苷及多糖提取到在水中；(五)提取液ZTC1+1沉淀取ZTC1+1 II除雜劑，將A除雜劑用除離子水配成0.9 1.1％濃度溶解23 25小時；將B除雜劑用0.9 1.1％醋酸水配成0.9 1.1％濃度溶解23 25小時備用；提取液膜濃縮至1∶4.5 5.5，加熱至55 65℃，配好的A、B澄清劑分別按提取液質(zhì)量4.5 5.5％用量，先B后A的次序加入提取液中，將提取液中色素、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)等膠質(zhì)物和大分子物質(zhì)完全吸附沉淀；(六)離心除雜提取液為澄清液后，把提取后的液體放入到離心機，以15000 17000轉(zhuǎn)/分鐘速度除雜，除雜溫度55 65℃，除雜時間各1.4 1.6小時，離心機轉(zhuǎn)速170 190轉(zhuǎn)/分鐘攪拌，殘渣生產(chǎn)抗變飼料精；(七)超濾膜、納濾膜、離子膜復合分離使用1.4 1.6萬分子超濾膜超濾分離出多糖和人參皂苷、黃酮、氨基酸；將含有人參皂苷、黃酮、氨基酸的混合物用離子膜機除去氨基酸和礦物離子；將含有人參皂苷、黃酮的混合物用390 410分子納濾膜將人參皂苷與黃酮分離開；(八)膜濃縮脫水使用脫水膜濃縮機，減壓0.45 0.55PMa，溫度55 65℃分別將含水的皂苷、黃酮、多糖濃縮到干物質(zhì)含水量為9 11％；(九)冷凍干燥將冷凍干燥機溫度控制在 55至 65℃，減壓到0.0014 0.0016MPa，干燥人參皂苷、黃酮，多糖含水量為0.7 0.9％。
全文摘要
從甜味絞股藍中提取分離人參皂苷、黃酮、多糖的方法，涉及一種天然產(chǎn)物提取工藝，特別是提取甜味絞股藍中多種有效成分的工藝。本發(fā)明的技術(shù)方案是按照如下步驟操作(一)原料粉碎將甜味絞股藍干全草粉碎至80-105目；(二)除離子水浸潤；(三)過濾空氣加壓機破壁；(四)超聲波提取機低功率提取；(五)提取液ZTC1+1沉淀；(六)離心除雜；(七)超濾膜、納濾膜、離子膜復合分離；(八)膜濃縮脫水；(九)冷凍干燥，干燥人參皂苷、黃酮，多糖含水量為0.7-0.9％。本發(fā)明提供一種用去離子水替代有機溶劑，整個提取分離過程為常溫和不超過50℃的物理提取分離干燥技術(shù)。
文檔編號A61P35/00GK101961371SQ20101051273
公開日2011年2月2日 申請日期2010年10月20日 優(yōu)先權(quán)日2010年10月20日
發(fā)明者劉金龍, 周大寨, 武蕓, 畢文鋼, 田國政, 肖強, 肖浩, 趙梅軒, 趙玉宏, 鄭小江 申請人:劉金龍