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一種制備納豆激酶環(huán)糊精包合物的方法

文檔序號(hào):998474閱讀:376來源:國(guó)知局
專利名稱:一種制備納豆激酶環(huán)糊精包合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種制備納豆激酶的環(huán)糊精包合物的方法,屬于生物合成領(lǐng)域。
背景技術(shù)
納豆激酶是納豆在發(fā)酵過程中由納豆枯草桿菌(Bacillus subtilis/natto)產(chǎn)生的一種絲氨酸蛋白酶,可水解纖維蛋白成小肽和氨基酸,和蚯蚓纖溶酶、蛇毒纖溶酶一樣可直接溶解血栓,研究發(fā)現(xiàn),納豆激酶具有纖溶活性,能夠預(yù)防和抑制血栓產(chǎn)生與擴(kuò)增,是治療血栓和預(yù)防血栓病的具有潛在藥用價(jià)值的物質(zhì)。環(huán)糊精系淀粉經(jīng)酶解環(huán)合后得到的由6個(gè)以上葡萄糖分子連結(jié)而成的環(huán)狀低聚化合物,本身基本無毒、無刺激性,因具有環(huán)狀中空?qǐng)A筒狀結(jié)構(gòu)而呈現(xiàn)一系列特殊性質(zhì),具有疏水性的內(nèi)腔和親水性的外表,是藥物制劑、食品工業(yè)、化妝品工業(yè)等方面應(yīng)用較廣的新型包合材料。藥物經(jīng)環(huán)糊精包合后,由于其“外殼”的屏障作用,可改善環(huán)境因素對(duì)藥物的降解,包合后不僅有利于溶液型制劑的制備,而且可提高口服制劑的生物利用度,減少服藥劑量,藥物經(jīng)包合后提高了其親脂性,易于通過血腦屏障到達(dá)組織,因此提高了納豆激酶對(duì)腦血栓的治療效果。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種制備納豆激酶的環(huán)糊精包合物的方法。該方法工藝簡(jiǎn)單,可提高納豆激酶的生物利用度、親脂性和療效。本發(fā)明的技術(shù)方案為1)原料的選取β -環(huán)糊精、羥丙基-β -環(huán)糊精和納豆激酶(酶活為 28000-30000IU/mg)2)納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000-3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾, 濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz和60hz,功率是600w。3)通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定,包合率為92. 15%,包合比為6 1。本發(fā)明的益處1、有利于溶液型制劑的制備,而且可提高口服制劑的生物利用度,減少服藥劑量;2、提高了其親脂性,易于通過血腦屏障到達(dá)組織,因此提高了納豆激酶對(duì)腦血栓的治療2、提高了其親脂性,易于通過血腦屏障到達(dá)組織,因此提高了納豆激酶對(duì)腦血栓的治療效果;3、提高了納豆激酶的穩(wěn)定性;
4、提高了納豆激酶在體內(nèi)的半衰期,提高了用藥安全性,延長(zhǎng)了納豆激酶的作用時(shí)間,控制了溶栓速度以防止缺血再灌注損傷的發(fā)生。本發(fā)明制備的包合物經(jīng)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明具有明顯的溶栓效果,效果明顯優(yōu)于相同劑量的納豆激酶。
具體實(shí)施例方式下面通過具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明1、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。2、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。3、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為2000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。4、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為2000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。5、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。6、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。7、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。8、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶- β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基- β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。9、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-β -環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為2000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶- β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基- β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。10、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為2000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。11、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率40hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。12、納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物。所使用的超聲條件是頻率60hz,功率是600w。通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定。
權(quán)利要求
1.應(yīng)用環(huán)糊精制備納豆激酶包合物的方法,其特征在于包括如下制備過程1)原料的選取β-環(huán)糊精、羥丙基-β -環(huán)糊精和納豆激酶(酶活為^000-30000IU/mg)2)納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶(酶活為1000-3000IU/ml),常溫下超聲振蕩,再攪拌lh,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β -環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β -環(huán)糊精包合物;3)鑒定通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定,測(cè)定包合率和包合比。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備納豆激酶包合物的方法,其特征在于選擇的包合材料是 β -環(huán)糊精、羥丙基-β -環(huán)糊精。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備納豆激酶包合物的方法,其特征在于選擇的納豆激酶的酶活為 28000-30000IU/mg。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備納豆激酶包合物的方法,其特征在于所使用的超聲條件是頻率40hz和60hz,功率是600wo
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備納豆激酶包合物的方法,其特征在于通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定,包合率為92. 15%,包合比為6 1。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種制備納豆激酶的環(huán)糊精包合物的方法,利用β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精作為包合材料制備納豆激酶環(huán)糊精包合物。其特征在于它包括如下步驟1)原料的選取β-環(huán)糊精、羥丙基-β-環(huán)糊精和納豆激酶(28000-30000IU/mg);2)納豆激酶包合物的制備分別配制飽和的β-環(huán)糊精和羥丙基-β-環(huán)糊精水溶液和一定濃度的納豆激酶,常溫下超聲振蕩,再攪拌1h,過濾,濾液冷凍干燥得納豆激酶-β-環(huán)糊精或納豆激酶-羥丙基-β-環(huán)糊精包合物;3)鑒定通過差示掃描量熱法和X射線衍射法對(duì)包合物進(jìn)行鑒定,測(cè)定包合率和包合比。
文檔編號(hào)A61P7/02GK102406942SQ20101028791
公開日2012年4月11日 申請(qǐng)日期2010年9月21日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月21日
發(fā)明者張?jiān)品? 曹曉琴, 李軍, 陳曉煒 申請(qǐng)人:湖北國(guó)力生物技術(shù)開發(fā)有限公司
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