專利名稱：Hiv融合抑制劑緩釋微球的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及用于治療HIV感染藥物的緩釋微球及其制備方法。
背景技術(shù)：
艾滋病(AIDS)是現(xiàn)代社會的瘟疫。2004年全世界艾滋病毒(HIV)感染者為4 千萬，死亡300萬，2005年新增感染者500萬。官方統(tǒng)計結(jié)果顯示我國現(xiàn)有HIV感染者約 65萬，其中艾滋病病人約7. 5萬，2005年新發(fā)感染者約6 8萬?，F(xiàn)在我國正處于一個HIV 感染快速增長階段，疫情正在從高危人群向普通人群擴散。HIV感染的預防、控制和治療已 經(jīng)刻不容緩。HIV-I在感染機體時，首先其包膜與宿主靶細胞膜發(fā)生融合，而后進入靶細胞。 HIV-I融合抑制劑正是針對這一最初感染過程而設(shè)計的藥物。HIV-I融合進入靶細胞的主 要步驟為(I)HIV-I表面糖蛋白gpl20同宿主⑶4+T細胞膜上⑶4受體結(jié)合；(2) gpl20結(jié) 合于細胞膜表面輔助受體CCR5和CXCR4，發(fā)生構(gòu)象改變；(3) HIV-I跨膜亞基gp41構(gòu)象改變 形成六螺旋體結(jié)構(gòu)，暴露融合肽(FP)，使病毒包膜與宿主細胞膜發(fā)生融合。抑制該過程的任 何一個環(huán)節(jié)都可抑制HIV-I進入靶細胞，從而阻止感染。根據(jù)對病毒融合的作用機制，可將 HIV-I融合抑制劑分為干擾gpl20結(jié)合的HIV-I附著抑制劑、HIV-I輔助受體抑制劑和阻止 gp41核心結(jié)構(gòu)形成的HIV-I融合抑制劑。gp41是HIV-I包膜糖蛋白的跨膜部分，gpl20結(jié)合輔助受體后其蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)構(gòu)象 發(fā)生轉(zhuǎn)化，并同gp41上的保守性小環(huán)相互作用，拉長小環(huán)兩側(cè)，暴露出gp41上融合肽，融合 肽插入宿主細胞膜內(nèi)，這時gp41被活化，與此同時gpl20從病毒包膜和⑶4上松動脫落。在 融合肽與gp41的跨膜部分之間有2段疏水的七氨基酸殘基重復序列，靠近N端的為NHR，靠 近跨膜部分的為CHR，NHR與CHR都可以形成α 2螺旋結(jié)構(gòu)。gp41活化后，NHR螺旋與CHR螺 旋開始互相向?qū)γ鎻澢瑤铀拗骷毎筒《颈砻嫘纬善叫忻婊ハ嗫拷?，呈發(fā)卡結(jié)構(gòu)，gp41 的三聚體形式則可同時形成3個發(fā)卡結(jié)構(gòu)而緊密排列組成六聚體螺旋束，其中3條NHR螺 旋形成中心的卷曲螺旋，3條CHR螺旋以反平行結(jié)合在卷曲螺旋表面的疏水槽中，形成外層 三聚體螺旋，疏水槽中有深穴。這六聚體螺旋束使病毒與細胞膜并列連接，最終導致膜融 合，病毒內(nèi)容物融入宿主細胞內(nèi)。gpl20的變異性很大，作為HIV疫苗和藥物的作用靶點有 很大的局限性，而作用于CD4、CXCR4、CCR5等受體的化合物有可能干擾機體正常的免疫防 御功能。gp41的組成序列比gpl20保守，而且是病毒自身形成的蛋白，與人體自身蛋白沒有 同源性，因此gp41被公認為更適合作為HIV進入抑制劑研究的靶點。gp41核心結(jié)構(gòu)上的疏 水槽和疏水殘基構(gòu)成的深穴結(jié)構(gòu)對于gp41的構(gòu)象活化和膜融合起關(guān)鍵作用，因此可以將 它們作為抗融合藥物設(shè)計的理想靶位。20世紀90年代早期的研究發(fā)現(xiàn)，衍生于gp41CHR區(qū)域的C2多肽SJ22176能非常 有效地抑制HIV-I感染，其IC50達每升納摩爾水平。此后，羅氏制藥公司開發(fā)出人工合成 肽T20(恩夫韋肽，enfuvirtide，商品名Fuzeon)。該產(chǎn)品于2003年3月被批準上市，成為第一個作用于HIV與靶細胞融合過程的第3類抗HIV藥物，即HIV融合抑制劑。T20可與gp41NHR三聚體形成的卷曲螺旋表面疏水溝結(jié)合，阻擋3個gp41CHR在卷曲螺旋外周附著， 抑制六聚體螺旋束的形成。它的作用位點是gp41活化時暴露出的存活時間很短的中間體， 并可以結(jié)合gpl20，干擾gpl20與CXCR4的相互作用，拮抗X4型病毒株感染。但恩夫韋肽注 射劑目前需要每天注射兩次，非常不方便?；趯＠?中國發(fā)明專利，01130985. 7，02146006. X)而制備的西夫韋肽是36個 氨基酸組成的多肽，微溶于水，不溶于有機溶劑，是一種新型的HIV融合抑制劑，其抗HIV的 效價比T20高20倍。但西夫韋肽的體內(nèi)半衰期短，目前研制的普通凍干粉針劑需每天注射 1 2次，而一個療程長達52周，患者順應性差，治療成本高。基于專利(中國發(fā)明專利， 03816434. 5)制備的艾博衛(wèi)泰和西夫韋肽類似，也是一個多肽，其抗HIV的效價比T20高，但 同意存在西夫韋肽的問題。上述多肽類HIV融合抑制劑都存在注射次數(shù)多，用藥劑量大的問題。如果制備成 長效緩釋劑型，將有利于給藥和患者接受。微球是基質(zhì)型微小球狀實體的固體骨架物，藥物溶解和/或分散在高分子材料基 質(zhì)中。微球制劑作為一種高度分散的藥物制劑，擁有超越普通制劑的優(yōu)點，如劑量均一、靶 向性、控釋性等。注射后微球通過在體內(nèi)不斷降解，釋放出包裹的藥物而具有緩釋作用。但 上述多肽類HIV融合抑制劑水溶性差，難以獲得高濃度水溶液，因此難以制備成緩釋微球 制劑。生物可降解材料是近30年迅速發(fā)展的新興材料。生物降解通常是指聚合物在生 物環(huán)境中(水、酶、微生物等作用下)大分子的完整性受到破壞，產(chǎn)生碎片或其它降解產(chǎn)物 的現(xiàn)象。降解的特征是分子量下降。生物降解的過程包括水解、氧化、酶解等反應。當被植 入體內(nèi)后，生物可降解高分子材料在完成使命后會自動分解成無毒無害的物質(zhì)，從體內(nèi)排 出，因此不需要再次動手術(shù)取出。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明創(chuàng)造性地制備得到HIV融合抑制劑緩釋微球，因此本發(fā)明公開了一種HIV 融合抑制劑緩釋微球及其制備方法。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，可用于注射、鼻腔給藥、肺吸入給藥、植入， 優(yōu)選的是注射給藥。注射給藥的方式選自皮下注射、肌肉注射、靜脈注射，優(yōu)選的是皮下注 射。HIV融合抑制劑緩釋微球與傳統(tǒng)注射劑(包括注射用粉針或普通注射液)相比，具有突 出的優(yōu)勢。HIV融合抑制劑緩釋微球注射后能在人體內(nèi)保持長時間釋放藥物，從而大大減少 注射次數(shù)，患者順應性好，治療成本大大下降。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，可在體內(nèi)緩釋時間延長至0. 5個月、1個月、 2個月、3個月、6個月或9個月，優(yōu)選的是緩釋時間延長至0. 5個月、1個月、2個月或3個 月，更優(yōu)選的是緩釋時間延長至0. 5個月或1個月。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，其粒徑為1 1000微米，優(yōu)選的是5 200 微米，更優(yōu)選的是10 50微米。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，對其中HIV融合抑制劑的量、輔料的量沒有 限制，只要能產(chǎn)生相應緩釋作用就可以，優(yōu)選的緩釋微球中含有0.5 40%重量比的HIV融合抑制劑、60 99. 5%重量比的聚合物、O 10%重量比的其它在藥學上可接受的輔料。其它在藥學上可接受的輔料選自吸附劑、增溶劑、助溶劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、凍干保護劑、表面 活性劑中的一種或多種。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，其中HIV融合抑制劑沒有限制，優(yōu)選自多肽 類HIV融合抑制劑，更優(yōu)選自恩夫韋肽、西夫韋肽、艾博衛(wèi)泰，最優(yōu)選的是西夫韋肽。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，其中微球基質(zhì)選自各種能起到緩釋作用的 材料，具體選自聚合物、水難溶無機材料，優(yōu)選自聚合物。聚合物選自生物可降解聚合物和 生物難或不降解聚合物，優(yōu)選自生物可降解聚合物。水難溶性無機材料選自碳酸鈣、磷酸 鈣、硫酸鈣、乳酸鈣、硅酸鹽、二氧化硅。生物可降解聚合物選自天然聚合物、合成聚合物， 優(yōu)選的是合成聚合物。天然聚合物選自多糖、多肽、蛋白質(zhì)。多糖選自葡聚糖、殼聚糖、海 藻酸鹽、淀粉、微晶纖維素。蛋白質(zhì)選自明膠、牛血清白蛋白。合成聚合物選自聚酯、聚酐、 聚磷腈、聚酰胺，優(yōu)選自聚酯、聚酐，更優(yōu)選的是聚酯。聚酯選自聚乳酸羥基乙酸(PLGA)、 聚丙交酯乙交酯、聚乳酸、聚乙醇酸、聚-3-羥基丁酸酯、聚乳酸乙醇酸、聚鄰酯、聚內(nèi)酯、聚 酐、聚羥基丁酸酯羥基戊酸酯共聚物、聚丙烯葡聚糖、羥基乙酸、聚乳酸羥基乙酸聚乙二醇 (PLGA-PEG)、聚乳酸聚乙二醇(PLA-PEG)、聚羥乙酸聚乙二醇；優(yōu)選自聚乳酸羥基乙酸、聚 丙交酯乙交酯、聚乳酸、聚乳酸乙醇酸、聚羥基丁酸酯羥基戊酸酯共聚物、聚乳酸羥基乙酸 聚乙二醇；更優(yōu)選自聚乳酸羥基乙酸、聚乳酸羥基乙酸聚乙二醇；最優(yōu)選的是聚乳酸羥基 乙酸。聚乳酸羥基乙酸優(yōu)選的是分子量在3，000 50，000道爾頓之間，乳酸和羥基乙酸聚 合比例在10 90 90 10之間的聚合物。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，含有添加劑，選自能吸附HIV融合抑制劑的 吸附劑、能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑。能吸附HIV融合抑制劑的吸附劑選自明膠、 牛血清白蛋白。能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑選自尿素、環(huán)糊精、聚乙二醇、海藻糖、 乳糖、蔗糖、甘露醇、乙酸，優(yōu)選自尿素、乙酸。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，其制備方法選自單乳_液中干燥法、復 乳-液中干燥法、噴霧干燥法、低溫噴霧提取法、相分離法、超臨界流體技術(shù)，優(yōu)選自單 乳_液中干燥法、復乳_液中干燥法、噴霧干燥法、相分離法，更優(yōu)選的是復乳_液中干燥 法。這些制備方法可以參考相關(guān)專業(yè)書籍和文獻，由專業(yè)技術(shù)人員設(shè)計和操作完成。制備 得到的微球混懸液，可進一步干燥可形成粉末。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球，采用復乳-液中干燥法時，其制備工藝可包 括下面步驟(1)用有機溶劑溶解生物可降解聚合物，作為油相；(2)用添加劑的水溶液溶解HIV融合抑制劑，作為內(nèi)水相；(3)將油相和內(nèi)水相混合，通過機械力或壓力形成油包水(W/0)型乳液；(4)將W/0乳液加入外水相中形成水包油包水(W/0/W)型復乳；(5)將復乳揮干有機溶劑，使微球固化，然后離心、洗滌、干燥，得到微球固體粉末。上述制備工藝是用復乳_液中干燥法制備HIV融合抑制劑緩釋微球的一個一般過 程。在實際制備中，根據(jù)需要，還可以進一步限制制備工藝條件，具體包括如下方面。上述制備工藝中的油相中生物可降解聚合物在有機溶劑中的濃度為10 1000mg/mL,HIV融合抑制劑在內(nèi)水相中的濃度為10 500mg/mL。有機溶劑選自二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲基亞砜、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙醇、乙腈、三乙胺中的一種或其中的兩種或兩種以上的混合物。添加劑選自能吸附HIV融合抑制 劑的吸附劑、能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑。能吸附HIV融合抑制劑的吸附劑選自 明膠、牛血清白蛋白。能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑選自尿素、環(huán)糊精、聚乙二醇、海 藻糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、乙酸，優(yōu)選自尿素、乙酸。外水相中溶解有下面一種或多種材料， 選自聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚甲基丙烯酸鈉、聚丙烯酸鈉、聚甲基纖維素鈉、氯化鈉、 甘露醇、海藻糖，濃度為0. 5 15%重量比。實施機械力或壓力的方法可以利用各種機械設(shè) 備，如果采用高速勻漿器，可以每分鐘5000 50000轉(zhuǎn)高速攪拌0. 5 5分鐘；如果采用超 聲分散方法，可用100W 1000W超聲探頭超聲1 5分鐘。揮干有機溶劑的方法，可通過 減壓揮發(fā)、加熱、室溫揮發(fā)等方法，如果是室溫揮發(fā)方法，可以在每分鐘100 1000轉(zhuǎn)攪拌 下?lián)]發(fā)有機溶劑。如果采用噴霧干燥法制備HIV融合抑制劑緩釋微球，用有機溶劑將生物可降解聚 合物溶解得到油相，其中所述的有機溶劑選自于二氯甲烷、三氯甲烷、二甲基甲酰胺、二甲 基亞砜、乙酸乙酯、二氧六環(huán)、乙醚、丙酮、四氫呋喃、乙醇、乙腈、三乙胺其中的一種或其中 的兩種或兩種以上的混合物，用含添加劑的水溶液將HIV融合抑制劑溶解形成水相。其中 生物可降解聚合物在有機溶劑中的濃度為10 1000mg/mL，HIV融合抑制劑在水相中的濃 度為10 500mg/mL。制備時，采用高速勻漿器或超聲探頭，在室溫以每分鐘5000 25000 轉(zhuǎn)高速攪拌0. 5 5分鐘或間歇式超聲1 3分鐘，形成W/0乳液，采用噴霧干燥制得微球。 添加劑選自能吸附HIV融合抑制劑的吸附劑、能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑。本發(fā)明中的HIV融合抑制劑緩釋微球的形態(tài)可以是混懸液或注射用粉末?；鞈乙?狀態(tài)是HIV融合抑制劑微球直接在分散介質(zhì)中分散的狀態(tài)，一般放置后會有沉降現(xiàn)象，振 搖后能混懸均勻。分散介質(zhì)選自水、水溶液、丙二醇，水一般采用注射用水。水溶液中溶解 電解質(zhì)、滲透壓調(diào)節(jié)劑、PH調(diào)節(jié)劑、混懸劑等一種或多種成分，選自氯化鈉、葡萄糖、甘露醇、 磷酸鹽緩沖劑、醋酸鹽緩沖劑、羧甲基纖維素鈉。混懸液狀態(tài)的HIV融合抑制劑緩釋微球用 于注射時稱為緩釋微球注射液。注射用粉末是HIV融合抑制劑緩釋微球的干燥狀態(tài)，一般 經(jīng)過適當處理，經(jīng)過噴霧干燥或冷凍干燥得到。粉末狀態(tài)的HIV融合抑制劑緩釋微球用于 注射時稱為注射用緩釋微球。


圖1.復乳法制備西夫韋肽緩釋微球顯微鏡照片圖2.相分離法制備西夫韋肽緩釋微球顯微鏡照片圖3.西夫韋肽微球加速體外釋放率和時間的關(guān)系圖4.西夫韋肽微球體外釋放率和時間的關(guān)系
具體實施例方式實施例1.復乳法制備西夫韋肽微球?qū)OOmg西夫韋肽溶于1. 5mL 30mg/mL尿素水溶液中，1. Og聚乳酸-羥基乙酸(MW =10000，乳酸羥基乙酸摩爾比=75 25)溶于2mL 二氯甲烷中，將二者合并，在室溫下 用超聲探頭(輸出功率100W)間歇式超聲lmin，形成W/0乳液，將W/0乳液倒入IOOOmL含0.2%聚乙烯醇的外水相中，形成W/0/W復乳，在500rpm的攪拌下攪拌4h，揮發(fā)有機溶劑，離 心分離，用蒸餾水洗滌3次，冷凍干燥20h，得到流動性良好的白色粉末，平均粒徑48. 9 μ m, 外觀為圓整的球形。棚列2. 軒睡艦觸鋪賺薩將l.Og西夫韋肽溶于15mL人血清白蛋白(HSA)水溶液中，IOg聚乳酸-羥基乙酸 (MW = 20000，乳酸羥基乙酸摩爾比=50 50)溶于20mL 二氯甲烷中，將二者合并，冰浴 條件下高速勻漿器高速攪拌5分鐘(lOOOOrpm)，形成W/0乳液。冷至室溫后采用噴霧干燥 設(shè)備制備微球。噴霧過程參數(shù)為空氣進出口溫度分別為41 46°C和34 35°C，料液速 度7. 5mL/min，氣流壓力73Psi，氣流速度400NL/h。棚列3.才目備去艦觸鋪賺薩將IOOmg西夫韋肽和30mg乳糖溶于水中作為水相，Ig聚乳酸-羥基乙酸(MW = 10000，乳酸羥基乙酸摩爾比=50 50)溶于1.5mL 二氯甲烷中作為油相。在冰浴條件 下用超聲探頭(輸出功率100W)間歇式超聲Imin制成W/0乳液；將硅油勻速滴入攪拌著的 W/0乳液中，由于二氯甲烷與硅油的互溶性，PLGA很快沉淀出來形成載藥微球。加入正己烷 /乙醇(1 1)固化，4°C條件下攪拌2h，真空干燥得到微球粉末。棚列4.碰編翻傾韓隨■薩Ig聚乳酸-羥基乙酸(MW= 10000，乳酸羥基乙酸摩爾比=75 25)溶于30mL 乙腈，加入IOOmg西夫韋肽，經(jīng)超聲(100W)分散均勻后緩緩加入到含2% (W/W) Span40的礦 物油中制成0/0乳液，55°C水浴下以3000rpm速度攪拌30min，再以440rpm繼續(xù)攪拌60min 以蒸發(fā)殘余的有機溶劑。將乳液冷至35°C (防止Span40析出)，使微球硬化，分離微球并 于真空條件下干燥。^mm 5. Mmm^mjiMimmt將50mg艾博衛(wèi)泰溶于1. 5mL 25mg/mL尿素水溶液中，1. Og聚乳酸-羥基乙酸(麗 =10000，乳酸羥基乙酸摩爾比=75 25)溶于2mL 二氯甲烷中，將二者合并，在室溫下 用超聲探頭(輸出功率100W)間歇式超聲lmin，形成W/0乳液，將W/0乳液倒入IOOOmL含 0. 2%聚乙烯醇的外水相中，形成W/0/W復乳，在500rpm的低速攪拌下攪拌4h，揮發(fā)有機溶 齊IJ，離心分離，用蒸餾水洗滌3次，冷凍干燥15h，得到流動性良好的白色粉末。^MM 6. Bty干‘燥法泡丨備周、夫韋fl始1釋微王求將1. Og恩夫韋肽溶于15mL人血清白蛋白(HSA)水溶液中，IOg聚乳酸-羥基乙酸 (MW = 20000，乳酸羥基乙酸摩爾比=50 50)溶于20mL 二氯甲烷中，將二者合并，冰浴 條件下高速勻漿器高速攪拌5分鐘(lOOOOrpm)，形成W/0乳液。冷至室溫后采用噴霧干燥 設(shè)備制備微球。噴霧過程參數(shù)為空氣進出口溫度分別為41 46°C和34 35°C，料液速 度7. 5mL/min，氣流壓力75Psi，氣流速度400NL/h。以下是關(guān)于HIV融合抑制劑緩釋微球緩釋效果證明的實驗例。實驗例1.西夫韋肽緩釋微球的加速體外釋放試驗微球制劑在體內(nèi)緩釋時間很長，我們采用體外加速釋放的方法評價其釋放效果， 并預測其體內(nèi)緩釋情況。試驗樣品用實施例1所述的方法制備的西夫韋肽微球。試驗試劑0· 02 %的吐溫80水溶液。
試驗儀器水浴恒溫振蕩器、離心機。
試驗條件溫度，50°C ；轉(zhuǎn)速，160rpm。試驗方法精密稱取實驗樣品約IOmg微球置于容積為IOOml的具蓋血清瓶中，加 90ml釋放介質(zhì)(0. 02%的Tween80水溶液)，置于水浴恒溫振蕩器中，保持一定的溫度和轉(zhuǎn) 速按時取樣。取樣方法吸取5ml溶液，3000rpm離心lOmin，再補加5ml釋放介質(zhì)(0.02% Tween-80水溶液)，上清液HPLC檢測。取樣時間點(小時):1、4、7、20、30。試驗結(jié)果本發(fā)明所制備的微球加速釋放試驗1小時的累積釋放率為9%，30小時 的累積釋放率為79%。普通片劑在此條件下在15分鐘內(nèi)全部釋放完全，而我們制備的微球 的釋放長達30小時以上。因此證明其有強烈的緩釋效果，在體內(nèi)能達到長效緩釋目的。微 球加速釋放試驗效果圖見圖3。棚列2.膽微試驗樣品采用實施例2所述的方法制備的微球。試驗試劑0. 02 %的吐溫80水溶液。試驗儀器水浴恒溫振蕩器、離心機。試驗條件溫度37°C，轉(zhuǎn)速100rpm。試驗方法精密稱取實驗樣品約IOmg置于容積為IOOml的具蓋血清瓶中，加90ml 釋放介質(zhì)(0. 02 %的Tween-80水溶液)，置于水浴恒溫振蕩器中，保持一定的溫度和轉(zhuǎn)速按 時取樣。取樣方法精密量取5ml溶液，3000轉(zhuǎn)條件下離心lOmin，再補加5ml的釋放介質(zhì) (0. O2 %的Tween-8O水溶液)，上清液用HPLC檢測。取樣時間點(天):1、4、7、20、30。試驗結(jié)果本發(fā)明所制備的微球加速釋放試驗第1天的累積釋放率為12%，第30 天的累積釋放率為86%。普通片劑在此條件下在30分鐘內(nèi)全部釋放完全，而我們制備的微 球的釋放長達30天以上。因此證明其有強烈的緩釋效果，在體內(nèi)能達到長效緩釋目的。微 球釋放試驗效果圖見圖4。實驗例3.艾博衛(wèi)泰緩釋微球的體外釋放試驗試驗樣品用實施例5所述的方法制備的微球。試驗方法同實驗例2。試驗結(jié)果本發(fā)明所制備的微球加速釋放試驗第1天的累積釋放率為10%，第30 天的累積釋放率為89%。證明其有緩釋效果，在體內(nèi)能達到長效緩釋目的。實驗例4.恩夫韋肽緩釋微球的體外釋放試驗試驗樣品用實施例6所述的方法制備的微球。試驗方法同實驗例2。試驗結(jié)果本發(fā)明所制備的微球加速釋放試驗第1天的累積釋放率為12%，第30 天的累積釋放率為95%。證明其有緩釋效果，在體內(nèi)能達到長效緩釋目的。5.試驗藥品實施例1制備的西夫韋肽微球
病毒HIV-1動物免疫缺陷小鼠(SCID)小鼠)經(jīng)放射抑制免疫，靜脈注射人T淋巴細胞。感染途徑尾靜脈注射HIV-I病毒感染移植人淋巴細胞免疫缺陷小鼠。陽性藥西夫韋肽普通注射劑。觀察指標血漿中P24抗原滴度，HIV-I病毒負荷(HIV-IRNA)和人淋巴細胞。操作將移植人淋巴細胞的免疫缺陷小鼠分組，設(shè)正常對照組、病毒對照組、陽性藥物對照組和西夫韋肽微球組。用i-iotcid5(1hiv-i病毒尾靜脈注射感染小鼠，感染后2h 按西夫韋肽注射液皮下注射lmg/kg，每天1次，連續(xù)給藥30天；西夫韋肽微球30mg/kg， 單次皮下注射。取抗凝血分離血漿、測定P24滴度，用PCR方法測定病毒核酸病毒負荷 (HIV-IRNA)。計算病毒對照組和藥物治療組血人淋巴細胞，判斷治療效果。結(jié)果西夫韋肽微球顯示與西夫韋肽注射劑組相同治療效果，病毒滴度和RNA在 第20天已非常低。
權(quán)利要求
一種HIV融合抑制劑緩釋微球。
2.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，用于注射。
3.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，在體內(nèi)緩釋時間延長至0.5個月、1 個月、2個月或3個月。
4.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，其粒徑為10 50微米。
5.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，HIV融合抑制劑選自恩夫韋肽、西夫 韋肽、艾博衛(wèi)泰。
6.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，HIV融合抑制劑是西夫韋肽。
7.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，其特征在于微球基質(zhì)選用生物可降 解聚合物。
8.如權(quán)利要求7所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，其中的生物可降解聚合物為聚乳酸羥基乙酸。
9.如權(quán)利要求1所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，含有添加劑，選自能吸附HIV融合抑 制劑的吸附劑、能增加HIV融合抑制劑溶解的助溶劑。
10.如權(quán)利要求17所述的HIV融合抑制劑緩釋微球，其制備工藝包括下面步驟(1)用有機溶劑溶解生物可降解聚合物，作為油相；(2)用添加劑的水溶液溶解HIV融合抑制劑，作為內(nèi)水相；(3)將油相和內(nèi)水相混合，通過機械力或壓力形成W/0型乳液；(4)將W/0乳液加入外水相中形成W/0/W型復乳；(5)將復乳揮干有機溶劑，使微球固化，然后離心、洗滌、干燥，得到微球固體粉末。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種HIV融合抑制劑緩釋微球。HIV融合抑制劑選自恩夫韋肽、西夫韋肽、艾博衛(wèi)泰。HIV融合抑制劑緩釋微球采用生物可降解聚合物作為微球基質(zhì)，粒徑為1～1000微米，可用于注射，在體內(nèi)可緩釋0.5～3個月或更長時間。本發(fā)明還公開了HIV融合抑制劑緩釋微球的制備方法。
文檔編號A61K38/16GK101810583SQ20101014257
公開日2010年8月25日 申請日期2010年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2010年4月9日
發(fā)明者佟麗, 咸洪軍 申請人:佟麗;咸洪軍