專利名稱：治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥。

背景技術(shù)：
潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis UC)又稱非特異性潰瘍性結(jié)腸炎，是一種病因尚不十分清楚的直腸和結(jié)腸慢性非特異性炎性疾病。病位主要在大腸，又有稱為潰瘍性大腸炎。病變呈連續(xù)性、彌漫性分布，以結(jié)腸粘膜慢性炎癥和潰瘍形成為病理特點。主要臨床表現(xiàn)是腹瀉、粘液膿血便、腹痛等消化系統(tǒng)表現(xiàn)，可伴有腹脹、乏力、消瘦、發(fā)熱等全身癥狀及口腔粘膜病變、眼損害、肝膽病變、關(guān)節(jié)損害、皮膚病變等腸外表現(xiàn)。本病可發(fā)生在任何年齡，多見于20-40歲的青壯年患者，亦可見于兒童或中老年人。男女發(fā)病率無明顯差別。據(jù)報道西方國家潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病率為(3-14.3)/10萬。本病在我國原本比歐美國家較少見，且病情一般較輕；但近年來隨著我國人民生活習(xí)慣、飲食結(jié)構(gòu)的改變，以及診斷水平的提高，其發(fā)病人數(shù)逐漸增多。該病治愈難度大，且愈后又常易復(fù)發(fā)，并與結(jié)腸癌關(guān)系密切，被世界衛(wèi)生組織列為現(xiàn)代難治病之一。
UC的病因和發(fā)病機制有多種學(xué)說，到目前還沒有完全闡明。由于本病至今原因仍不十分明確，故治療尚不成熟。目前國內(nèi)外西醫(yī)內(nèi)科治療UC的藥物，主要有氨基水楊酸類(如柳氮磺胺吡啶、5-氨基水楊酸及其控釋劑艾迪沙、潘他沙、奧柳氮、巴柳氮等)、皮質(zhì)類固醇類(糖皮質(zhì)激素)、免疫抑制劑(硫唑嘌呤、巰嘌呤、環(huán)孢菌素、甲氨蝶呤)、抗菌藥(喹喏酮類、咪唑類、及嘧啶類)、短鏈脂肪酸、炎性介質(zhì)生成抑制劑(白細(xì)胞活化抑制劑)、腸粘膜保護(hù)劑、苯二氮卓劑等，不可否認(rèn)這些藥物對本病有一定的作用；但長期服用大都有明顯毒、副作用；且難以根治，停藥后易復(fù)發(fā)；且部分藥物還具有價格昂貴、病人難以支持等缺點。目前西醫(yī)外科手術(shù)治療主要是治療重型的暴發(fā)型患者，尤是伴有明顯的并發(fā)癥患者，但不可避免的手術(shù)后并發(fā)癥以及不能根治本病也是面臨的一大難題。而中醫(yī)藥在治療該病上則有著悠久的歷史、較好的療效，研制安全、有效的純中藥制劑具有較大的優(yōu)勢和潛力。
潰瘍性結(jié)腸炎屬祖國醫(yī)學(xué)“泄瀉”“痢疾”、“腸癖”等范疇。歷代醫(yī)籍對其發(fā)病機制有充分詳細(xì)論述，《內(nèi)經(jīng)》對本病發(fā)病機制論述主要有風(fēng)、寒、濕均可引起泄瀉；飲食、起居、情志失宜，可發(fā)生腹瀉；病變臟腑與脾胃、大小腸有關(guān)。這為后世泄瀉理論體系的建立奠定了基礎(chǔ)。目前在我國該病以中醫(yī)藥治療為主，并顯示出一定的優(yōu)勢。但中醫(yī)藥治療本病，多為湯劑，難以推廣。近年來，國內(nèi)圍繞中醫(yī)“泄瀉”、“痢疾”、“滯下”等病，雖然開發(fā)了幾種中成藥，如結(jié)腸靈、腸炎寧、胃腸康、結(jié)腸康、腸康舒等，但療效并不理想。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在為潰瘍性結(jié)腸炎患者提供一種簡便、經(jīng)濟、療程短、療效顯著、愈后復(fù)發(fā)率低且臨床使用無毒副作用的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥。
本發(fā)明的目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于它主要是由下述原料藥按下述重量配比制成的淮山藥25-35份，野麻草25-35份，黨參15-20份，白術(shù)10-15份，白芍10-15份，荷葉15-25份，防風(fēng)4-8份，砂仁4-8份，甘草3-8份。
較之現(xiàn)有技術(shù)而言，本發(fā)明具有下述優(yōu)點 (1)本發(fā)明的中成藥配方用于久瀉、四肢乏力、形體虛贏、飲食不化、面色萎黃、舌苔白膩、脈虛緩，或用于久瀉、食欲銳減、舌苔少、脈虛細(xì)或虛細(xì)數(shù)。經(jīng)臨床長期使用，該驗方補中寓消、不寒不燥、性質(zhì)平和，實為調(diào)理胃腸之良方，對于慢性非特異性潰瘍性結(jié)腸炎、腸功能紊亂、慢性細(xì)菌性或阿米巴痢疾以及慢性萎縮性胃炎伴發(fā)長期慢性腹瀉(中醫(yī)辨證屬于脾腎兩虛、氣陰兩虛夾濕阻、氣滯證型)，臨床治療效果較好。
(2)本發(fā)明的中成藥遵從中醫(yī)藥傳統(tǒng)理論，具有健脾益氣、溫補脾腎以治本，滲濕止瀉、行氣導(dǎo)滯以治標(biāo)，諸藥協(xié)同共奏扶正祛邪之目的。該中成藥具有抑菌消炎、修復(fù)腸粘膜病變組織之功效，從而能使遷延難治的潰瘍性結(jié)腸炎獲得根治。
(3)本發(fā)明具有療程短、療效高、治愈率高等特點，治愈后不易復(fù)發(fā)，經(jīng)過臨床驗證、藥效學(xué)實驗后，觀察指標(biāo)顯示該中成藥治療潰瘍性結(jié)腸炎療效確切。本發(fā)明配方曾于1990年及2000年分別制成糖漿劑與顆粒劑試用于臨床，均證明其療效確切，作用迅速，療效明顯優(yōu)于其它同類藥物，且具有見效快、治愈率高、治愈后復(fù)發(fā)率低的特點。其研制成顆粒劑后，具有服用方便、不易變質(zhì)、體積小、吸收快、易于運輸攜帶與儲藏等特點，可使有效傳統(tǒng)驗方得以推廣，為更廣大患者解除痛苦，將獲得顯著的社會效益與經(jīng)濟效益。
此外，本發(fā)明上述技術(shù)方案還做了以下改進(jìn) 若患者腹瀉日久、大便臭穢、夾有血色，可使上述原料藥中還含有馬鞭草25-35份。若患者出現(xiàn)大便溏薄、里急后重癥狀，可使上述原料藥中還含有馬齒莧25-35份。若患者出現(xiàn)便意頻頻、大便黏滯不爽癥狀，可使上述原料藥中還含有薏苡仁20-30份。若患者兼見胃脘脹、舌苔厚膩癥狀，可使上述原料藥中還含有茯苓10-30份。若患者腹脹明顯，可使上述原料藥中還含有陳皮10-15份。
按照本發(fā)明所述中成藥的配方能制成糖漿劑、顆粒劑等不同劑型。



圖1是各實驗組對UC大鼠血清IL-2的影響對比示意圖。
圖2是各實驗組對UC大鼠血清TNF-α的影響對比示意圖。
圖3是正常對照組的光鏡下病理切片示意圖。
圖4是正常對照組的光鏡下病理切片示意圖。
圖5是UC模型組的光鏡下病理切片示意圖。
圖6是UC模型組的光鏡下病理切片示意圖。
圖7是陽性對照組的光鏡下病理切片示意圖。
圖8是久瀉寧顆粒低劑量組的光鏡下病理切片示意圖。
圖9是久瀉寧顆粒中劑量組的光鏡下病理切片示意圖。
圖10是久瀉寧顆粒高劑量組的光鏡下病理切片示意圖。
圖11是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的心肌病理鏡檢圖。
圖12是空白對照組所做的心肌病理鏡檢圖。
圖13是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的肝病理鏡檢圖。
圖14是空白對照組所做的肝病理鏡檢圖。
圖15是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的脾病理鏡檢圖。
圖16是空白對照組所做的脾病理鏡檢圖。
圖17是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的胃病理鏡檢圖。
圖18是空白對照組所做的胃病理鏡檢圖。
圖19是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的肺病理鏡檢圖。
圖20是空白對照組所做的肺病理鏡檢圖。
圖21是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的腎病理鏡檢圖。
圖22是空白對照組所做的腎病理鏡檢圖。
圖23是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的睪丸病理鏡檢圖。
圖24是空白對照組所做的睪丸病理鏡檢圖。
圖25是久瀉寧顆粒高劑量組給藥3個月后停藥3周所做的卵巢病理鏡檢圖。
圖26是空白對照組所做的卵巢病理鏡檢圖。

具體實施例方式 下面結(jié)合具體實施方式
、實施例、臨床資料等對本發(fā)明內(nèi)容進(jìn)行詳細(xì)說明 具體實施例方式一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，它主要是由下述原料藥按下述重量配比制成的淮山藥25-35份，野麻草25-35份，黨參15-20份，白術(shù)10-15份，白芍10-15份，荷葉15-25份，防風(fēng)4-8份，砂仁4-8份，甘草3-8份。
上述中成藥的原料藥的一種較佳重量配比如下淮山藥30份，野麻草30份，黨參20份，白術(shù)10份，白芍15份，荷葉20份，防風(fēng)6份，砂仁6份，甘草5份。
本發(fā)明上述中成藥是由參苓白術(shù)散與痛瀉要方化裁而來。方中以淮山藥、野麻草共為君藥?；瓷剿幭凳硎毧浦参锸硎毜母稍飰K莖，味甘，性平，歸脾、肺、腎經(jīng)，功可補脾養(yǎng)胃，生津益肺，補腎澀精?；瓷剿幗∑⑶铱梢婺I，善治脾虛泄瀉。早在《神農(nóng)本草經(jīng)》就稱其“主治傷中，補虛贏，除寒熱邪氣，補中益氣力，長肌肉。”《本草綱目》曰“益腎氣，健脾胃，止泄痢，化痰涎，潤皮毛。”《壽世保元·卷一·本草》稱其“理脾止瀉，益腎補中，諸虛可治。”《醫(yī)學(xué)衷中參西錄·上冊·醫(yī)方》云“淮山藥脾腎雙補，在上能清，在下能固，利小便而止大便，真良藥也。”野麻草為大戟科植物鐵莧菜的全草，性味淡平，具有清熱利濕，消腫解毒功能，用于治療痢疾、腸炎等疾病?！恫菽颈惴健贩Q其“止瀉痢、治虛熱、牙痛、腮腫、二便秘結(jié)?！薄侗静萃脐悺吩啤拌F莧菜為有效的止痢藥、止血藥，適用于吐血、下血、刀瘡、跌打損傷，故又有血見愁之名。” 黨參性平，味甘，歸脾肺經(jīng)，有補脾肺氣，補血、生津功效，白術(shù)性溫，味甘、苦，有健脾除濕恢復(fù)脾胃運化功能。脾土既虛，肝木易乘，故久瀉常兼腹痛多是瀉后痛仍不休，所以配合痛瀉要方補脾土而柔肝木，理氣機以緩?fù)礊a。
白芍為毛莨科植物芍藥的干燥根，味苦、酸，性微寒，歸肝、脾經(jīng)，功可平肝止痛，養(yǎng)血調(diào)經(jīng)，斂陰止汗?！墩渲槟摇吩弧吧炙?，白補赤散，瀉肝補脾胃。其用有六安脾經(jīng)，一也；治腹痛，二也；收胃氣，三也；止瀉痢，四也；和血脈，五也；固腠理，六也。”《本草備要》“補血，瀉肝，益脾，斂肝陰，治血虛之腹痛?！薄夺t(yī)方捷徑·卷三》云“白芍……可升可降，陰也。其用有四，扶陽氣，除腹痛，收陰氣，健脾經(jīng)”。荷葉為睡蓮科植物蓮的干燥葉，味苦，性平，歸肝、脾、胃經(jīng)，功能清熱解暑，升發(fā)清陽，涼血止血?！侗静菥V目》云其可“生發(fā)元氣，裨助脾胃，澀精滑，散瘀血，消水腫癰腫”?！冻煞奖阕x·祛風(fēng)之劑·清震湯》云“荷葉色青氣香，形仰象震，能助胃中清陽上行?！薄侗静輳男隆贩Q荷葉“補助脾胃，而升發(fā)陽氣，……能散瘀血，留好血，治吐衄崩淋，損傷產(chǎn)瘀，一切血證?！币陨隙幑矠槌妓帲c君藥配伍，可增強本方健脾滲濕之功。
防風(fēng)、砂仁共為方中佐藥。防風(fēng)為傘形科植物防風(fēng)的干燥根，味辛、甘，性溫，歸膀胱、肝、脾經(jīng)，功可發(fā)表散風(fēng)，勝濕止痛，止痙、止瀉?！镀⑽刚摗吩啤叭粞a脾胃，非此引用不能行?！赜梅里L(fēng)者，取其升浮能發(fā)脾中伏火，又能于土中瀉木也。木盛克土，防風(fēng)能散肝火?！薄堕L沙藥解·卷二》“防風(fēng)辛燥發(fā)揚，最泄?jié)裢炼_(dá)木郁，木達(dá)而風(fēng)自息，非防風(fēng)之發(fā)散風(fēng)邪也?！鄙叭蕿榻浦参镪柎荷?、綠殼砂或海南砂的干燥成熟果實，味辛，性溫，歸脾、胃、腎經(jīng)，功能化濕開胃，溫脾止瀉，理氣安胎。《藥性論》云“主冷氣腹痛，止休息氣痢，勞損。消化水谷，溫暖脾胃?！薄堕_寶本草》曰“治虛勞冷痢，宿食不消，赤白瀉痢，腹中虛痛，下氣?！薄侗静輩R言》記載“砂仁，溫中和氣之藥也。若上焦之氣梗逆而不下，下焦之氣抑遏而不上，中焦之氣凝聚而不舒，用砂仁治之，奏效最捷?！币奥椴萸鍩崂麧瘢c諸藥配伍，可標(biāo)本兼治；脾土既虛，肝木易乘，防風(fēng)散肝舒脾，與白芍等配伍取痛瀉要方之義以補脾土而柔肝木，配伍砂仁溫脾理氣以緩?fù)礊a。
方中使藥為甘草。甘草為豆科植物甘草、脹果甘草或光果甘草的干燥根及根莖，味甘，性平，歸心、肺、脾、胃經(jīng)，功可補脾益氣，清熱解毒，祛痰止咳，緩急止痛，調(diào)和諸藥?！端幮员静荨吩黄洹爸鞲怪欣渫?，治驚癇，除腹脹慢；補益五臟；制諸藥毒”?！侗静輩R言》云“甘草，和中益氣，補虛解毒之藥也。健脾胃，固中氣之虛贏，協(xié)陰陽，和不調(diào)之營衛(wèi)。故治勞損內(nèi)傷，脾氣虛弱，元氣不足，肺氣衰虛，其甘溫平補，效與參、芪并也。”甘草配伍芍藥，取酸甘化陰以柔肝木之義，增強本方緩急止痛之功。
縱觀全方，以健脾滲濕，調(diào)氣止瀉為法，標(biāo)本兼治，不寒不燥，實為治療慢性泄瀉之良方。
若腹瀉日久、大便臭穢、夾有血色，可在上述藥劑中加馬鞭草25-35份；若大便溏薄、里急后重者，可在上述藥劑中加馬齒莧25-35份；若便意頻頻、大便黏滯不爽者，可在上述藥劑中加薏苡仁20-30份；若兼見胃脘脹、舌苔厚膩者，可在上述藥劑中加茯苓10-30份；若腹脹明顯者，可在上述藥劑中加陳皮10-15份。
本發(fā)明所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥可按常規(guī)制備工藝制作，也可參照下述制備步驟制作 (1)揮發(fā)油提取工藝按照重量份數(shù)比取砂仁4-8份、防風(fēng)4-8份、荷葉15-25份三味藥材粉碎后，加2.5-7.5倍體積量的水，不浸泡，直接進(jìn)行4-10小時的揮發(fā)油提取，提取揮發(fā)油后，剩余濾液A； (2)煎煮液提取工藝按照重量份數(shù)比取白芍10-15份、淮山藥25-35份、黨參15-20份、野麻草25-35份、甘草3-8份、白術(shù)10-15份六味藥材，將其中一味藥材淮山藥的10％磨為細(xì)粉，淮山藥的剩余90％與其余五味藥材混合后，浸泡30-90分鐘，之后加水煎煮1-5次，每次煎煮1-2小時，每次加入的水的數(shù)量是浸泡前藥材的4-12倍體積量，將每次煎煮所得濾液合并得到濾液B； (3)揮發(fā)油的包合工藝將步驟(1)提取的揮發(fā)油用其6-12倍體積量的95％乙醇溶解后，加入體積量為揮發(fā)油的8-12倍的β-環(huán)糊精45-60℃飽和溶液中，先恒溫攪拌1-2小時，再靜置18-28小時，接著抽濾后將濾渣低溫干燥得到白色干燥粉末； (4)濃縮將濾液A和濾液B合并后，加95％的乙醇稀釋至含醇量為70％，靜置18-28小時，抽濾后得到濾液，水浴濃縮后恒溫干燥得干固物，在干固物內(nèi)加入β-環(huán)糊精及步驟(2)制得的淮山藥細(xì)粉，β-環(huán)糊精及淮山藥細(xì)粉的總和量為干固物重量的1-1.5倍，之后噴霧干燥得到干燥粉末； (5)制成顆粒劑將步驟(3)和(4)得到的干燥粉末合并，混合均勻，干壓制粒，分裝，包裝，質(zhì)檢，獲得成品。
(二)實施例下面列舉本發(fā)明的實施例。
第一組實施例如下表所示 第二組實施例如下表所示 第三組實施例如下表所示 第四組實施例如下表所示 第五組實施例如下表所示 第六組實施例如下表所示 采用上述各組實施例對潰瘍性結(jié)腸炎患者進(jìn)行治療，均取得顯著療效。
(三)臨床資料 經(jīng)臨床初步研究證明，本發(fā)明所提供的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥具有健脾滲濕、理氣止瀉之功效，對脾胃虛弱、運化失常、濕阻氣滯之慢性潰瘍性結(jié)腸炎具有確切療效。利用本發(fā)明的中成藥治療潰瘍性結(jié)腸炎，一般服后約三天，腹部悶痛癥狀減輕疼痛或消失，排便次數(shù)減少，約服藥七天后，腹痛消失，大便次數(shù)、糞質(zhì)逐漸趨于正常，續(xù)服兩周后，食少乏力、脘腹不適等癥狀相繼消失，獲得臨床治愈。這樣的治療效果是目前臨床上常用于治療慢性潰瘍性結(jié)腸炎的其他中成藥等所無法比擬的。
本發(fā)明的曾于1990年按具體實施方式
所述中成藥配方制成糖漿劑，治療潰瘍性結(jié)腸炎患者100例，取得總有效率為92％的較為滿意的臨床療效。在100例患者中，男56例，女44例；年齡最大者65歲，年齡最小者22歲，平均年齡37.3歲；病史最長者15年，最短者近2個月。
治療方法全部病例均采用口服糖漿劑。所有患者每次口服該中成藥糖漿劑50ml，每日兩次，于早晚餐后半小時服用，七天為1個療程，治療3個療程。
治療效果100例患者中，除5例僅治1個療程外，其余全部治完3個療程。治療結(jié)果如下 痊愈臨床癥狀全部消失，身體恢復(fù)正常。
好轉(zhuǎn)臨床癥狀基本消失，腹痛、腹瀉基本消除，身體恢復(fù)正常。
有效部分臨床癥狀好轉(zhuǎn)，腹痛、腹瀉次數(shù)減少、逐步消失。
無效治療前后無變化。
治療結(jié)果100例患者中，治愈72例，占72％；好轉(zhuǎn)15例，占15％；有效5例，占5％；無效8例，占8％。另外，少數(shù)經(jīng)前三個療程治療無效的患者在重復(fù)前三個療程的治療療程中亦趨痊愈。
(四)動物實驗研究 概述本發(fā)明專利申請的發(fā)明人按國家中藥新藥六類藥的研制要求采用具體實施方式
所述中成藥配方研制成了治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥(以下簡稱久瀉寧顆粒)，并初步完成了該藥的制劑工藝、急慢性毒性試驗及藥效學(xué)等部分臨床前研究工作。本發(fā)明采用動物試驗手段，從而比較客觀地為“健脾滲濕，理氣止瀉”的功效提供了現(xiàn)代科學(xué)的依據(jù)，揭示了其功效的部分科學(xué)內(nèi)涵，充實了功效內(nèi)容。
一、藥效學(xué)動物實驗 目的觀察久瀉寧顆粒對大鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型的影響，為臨床用藥的有效性提供實驗依據(jù)。方法采用異種異體結(jié)腸黏膜組織致敏法和三硝基苯磺酸(TNBS)和無水乙醇局部灌腸相結(jié)合。將SD大鼠隨機分為空白對照組，模型對照組，陽性對照組，久瀉寧顆粒高、中、低劑量組。連續(xù)給藥20天，末次給藥后24h，大鼠腹主動脈取血，采用ELI SA法測定大鼠細(xì)胞因子IL-2、TNF-a以及免疫球蛋白IgG、IgM含量。結(jié)果久瀉寧顆粒中、高劑量組可升高IL-2，與UC模型組比較，差異非常顯著(P＜0.01)；久瀉寧顆粒各劑量組可降低TNF-q，與UC模型組比較，差異有顯著意義(P＜0.05～P＜0.01)。久瀉寧顆粒中劑量組可顯著降低IgG水平，久瀉寧顆粒中、高劑量組可顯著降低IgM水平，與UC模型組比較，差異有顯著意義(P＜0.05)。結(jié)論久瀉寧顆粒對潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠有顯著的治療作用。
1.實驗材料 1.1實驗動物 清潔級SD種大鼠60只，雌雄各半，體重為200±20g，上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供，許可證號SCXK(滬)2003-0002。大耳白家兔6只，體重2.0kg-2.5kg，福建中醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供。
1.2主要實驗藥品 久瀉寧顆粒，實驗用藥為顆粒劑成劑前之藥液。補脾益腸丸，批號Z44022627，廣州陳李濟藥廠提供。弗氏完全佐劑，批號Lot 102K8930，美國Sigma提供。2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)，批號Lot 42K5002，美國Sigma提供。無水乙醇，批號030518，上海聯(lián)試化工試劑有限公司提供。乙醚，批號CY030805，國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司提供。
1.3實驗試劑 大鼠白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF-α)試劑盒由大連泛邦化工技術(shù)開發(fā)有限公司提供。一氧化氮(NO)試劑盒由南京建成生物工程研究所提供。補體C3、C4試劑盒由上海太陽生物技術(shù)公司提供。大鼠免疫球蛋白IgG、IgM試劑盒由美國Bethy1提供?？偟鞍自噭┖杏缮虾s盛生物技術(shù)有限公司提供。
1.4實驗儀器 TGL-16G高速冷凍離心機上海安亭科學(xué)儀器廠 4020型 自動生化分析儀日立 BS210S 電子天平 北京賽多利斯天平有限公司 TDL-4 低速臺式離心機上海安亭科學(xué)儀器廠 MDF-V5410 深低溫冰箱日本 HH-2 數(shù)顯恒溫水浴鍋國華電器有限公司 ELX808 酶聯(lián)免疫檢測儀美國寶特公司生產(chǎn) 2.實驗方法 2.1實驗動物分組 清潔級SD大鼠60只，雌雄各半，體重為200±20g，隨機分為6組，每組10只。各組分別為正常組，UC模型對照組，UC模型+補脾益腸丸陽性對照組，UC模型+久瀉寧顆粒高劑量組、中劑量組和低劑量組。
2.2模型所需藥物的制備 (1)異種異體抗原參照徐叔云方法稍作改進(jìn)，取家兔新鮮結(jié)腸粘膜組織，勻漿充分后，-20℃下冷凍24h，溶凍后以4000r/min速度離心30min，取上清夜提純，用總蛋白試劑盒雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量。
(2)抗原乳化液異種異體抗原與弗氏完全佐劑等體積配比。
(3).灌腸液2，4，6-三硝基苯磺酸(TNBS)與無水乙醇等體積配比，濃度為2.5％(w/v)。
(4)麻醉劑乙醚。
2.3UC大鼠模型的制備 (1)在大鼠一側(cè)足趾皮下注射抗原乳化液，使大鼠獲得8mg異種蛋白。
(2)14天后，在大鼠腹股溝部位皮下注射抗原乳化液，同樣使大鼠獲得8mg異種蛋白。
(3)將免疫刺激40天的大鼠用乙醚麻醉。
(4)用硅膠管插入大鼠肛門深約8cm，局部灌腸1ml灌腸液。
(5)拔出硅膠管后迅速捏緊大鼠肛門8min，其間不斷搖擺大鼠，使液體在腸道均勻分布。
(6)待液體不再從肛門流出，把大鼠放回籠中常規(guī)飼養(yǎng)。
三天后，大部分大鼠出現(xiàn)稀便，甚至稀水、膿血，肛門周圍潮濕、污穢，精神萎靡，瘦弱拱背。造模1周后隨機取2只大鼠處死取其部分結(jié)腸，肉眼可見結(jié)腸粘膜層變黑，腸壁增厚，管腔變粗，病理分析示粘膜糜爛壞死，但仍較完整，粘膜層可見炎性滲出壞死物，各層均見炎細(xì)胞浸潤；2周后取2只大鼠結(jié)腸病理分析示粘膜脫落，潰瘍明顯；3周后大部分大鼠可見稀便或粘液便、精神萎靡等癥狀，模型大鼠結(jié)腸病理分析示仍有明顯潰瘍，腺體及腸壁各層可見大量急、慢性炎細(xì)胞，鏡下可見血管增生、炎性肉芽腫及淋巴濾胞結(jié)構(gòu)。實驗中模型組大鼠的免疫球蛋白IgM、IgG和補體C3、C4以及IL-2、TNF-α等免疫和炎癥指標(biāo)較正常組都發(fā)生明顯變化，說明大鼠體內(nèi)存在免疫異常。以上表明造模成功。
2.4給藥方法 正常組和UC模型對照組給等量的飲用水，各給藥組分別給予久瀉寧顆粒高劑量30g/kg、中劑量15g/kg(相當(dāng)于60kg人的等效劑量)、低劑量7.5g/kg(以上濃度均為生藥含量)，補脾益腸丸2g/kg(相當(dāng)于60kg人的等效劑量)，每天1次，連續(xù)灌胃20天。
2.5標(biāo)本采集及處理 大鼠灌胃第20天后，禁食不禁水24小時，第21天用氯胺酮麻醉，腹主動脈采血6ml左右，以3000r/min離心10min，分離血清，冰凍保存待測，所有血清樣本在1小時內(nèi)分離完畢。取脾臟、胸腺、腎上腺、結(jié)腸(肛門處向上8cm，洗凈內(nèi)容物，用濾紙吸干)稱重。取結(jié)腸潰瘍明顯處作病理分析。
2.6實驗指標(biāo)檢測與方法 白介素-2(IL-2)、腫瘤壞死因子(TNF-α)的測定采用ELISA法。
一氧化氮(NO)的測定采用硝酸還原酶法。
補體C3、C4的測定采用免疫濁度法。
免疫球蛋白IgG、IgM的測定采用ELISA法。
總蛋白的測定采用雙縮脲法。
3.統(tǒng)計學(xué)處理 數(shù)據(jù)均用SPSS11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行分析，用t檢驗作統(tǒng)計學(xué)處理，以顯著性差異界定在0.05水平，結(jié)果以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示。
4.實驗結(jié)果(見表1～6) 4.1久瀉寧顆粒對UC模型大鼠脾臟、胸腺、腎上腺的影響 表1久瀉寧顆粒對UC大鼠脾臟、胸腺、腎上腺的影響(x±S)
注t檢驗，與UC模型組比較，▲P＜0.05；與陽性對照組比較，●P＜0.05。
表1結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，脾臟和腎上腺的臟器指數(shù)增高，胸腺指數(shù)降低，但差異均不顯著(P＞0.05)。藥物治療組與UC模型組比較，久瀉寧低劑量組可顯著增高脾臟指數(shù)(P＜0.05)；久瀉寧高劑量組可顯著增高胸腺指數(shù)(P＜0.05)，且和陽性對照組比較，差異有顯著意義(P＜0.05)。
4.2久瀉寧顆粒對UC模型大鼠細(xì)胞因子的影響 表2久瀉寧顆粒對UC大鼠IL-2、TNF-α的影響(x±s)

注t檢驗，與正常對照組比較，**P＜0.01；與UC模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01， 與陽性對照組比較，●P＜0.05，●●P＜0.01。
表2結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，IL-2降低與TNF-α升高，差異非常顯著(P＜0.01)。藥物治療組與UC模型組比較，久瀉寧中、高劑量組可升高IL-2，差異非常顯著(P＜0.01)；久瀉寧各劑量組和陽性對照組可降低TNF-α，差異有顯著意義(P＜0.05～P＜0.01)。與陽性對照組比較，久瀉寧中、高劑量組可顯著升高IL-2(P＜0.05～P＜0.01)；久瀉寧中劑量組可顯著降低TNF-α(P＜0.05)。(具體可參見圖1-圖2。) 4.3久瀉寧顆粒對UC模型大鼠免疫球蛋白的影響 表3久瀉寧顆粒對UC大鼠IgG、IgM的影響(x±s)
注t檢驗，與正常對照組比較，**P＜0.01；與UC模型組比較，▲P＜0.05，▲▲P＜0.01； 與陽性對照組比較，●P＜0.05，●●P＜0.01。
表3結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，UC模型組IgG、IgM均升高，差異有顯著意義(P＜0.05～P＜0.01)。藥物治療組與UC模型組比較，久瀉寧中、高劑量組可顯著降低IgG水平(P＜0.05～P＜0.01)；久瀉寧中劑量組可顯著降低IgM水平(P＜0.01)。與陽性對照組比較，久瀉寧顆粒中劑量組可顯著降低IgG、IgM水平(P＜0.05～P＜0.01)。
4.4久瀉寧顆粒對UC模型大鼠補體C3、C4的影響 表4久瀉寧顆粒對UC大鼠C3、C4的影響(x±s)

注t檢驗，與正常對照組比較，*P＜0.05；與UC模型組比較，▲P＜0.05. 表4結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，UC模型組C3、C4均升高，差異有顯著意義(P＜0.05)。藥物治療組與UC模型組比較，久瀉寧中劑量組可顯著升高C3水平(P＜0.05)；久瀉寧高劑量組可顯著升高C4水平(P＜0.05)。
4.5久瀉寧顆粒對UC模型大鼠一氧化氮(NO)的影響 表5久瀉寧顆粒對UC大鼠NO的影響(x±s)
注t檢驗，與正常對照組比較，**P＜0.01；與UC模型組比較，▲▲P＜0.01。
表5結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，UC模型組NO升高，差異非常顯著(P＜0.01)。藥物治療組與UC模型組比較，陽性對照組和久瀉寧高劑量組可非常顯著升高NO水平(P＜0.01)。
4.6久瀉寧顆粒對UC模型大鼠結(jié)腸重量的影響 表6久瀉寧顆粒對UC大鼠結(jié)腸重量的影響(x±s)

注t檢驗，與正常對照組比較，**P＜0.01；與UC模型組比較，▲P＜0.05；與陽性對照組比較，●P＜0.05。
表6結(jié)果顯示UC模型組與正常對照組比較，結(jié)腸重量明顯增加，差異非常顯著(P＜0.01)。藥物治療組與UC模型組比較，久瀉寧中劑量組可顯著降低結(jié)腸重量(P＜0.05)。與陽性對照組比較，久瀉寧中劑量組可顯著降低結(jié)腸重量(P＜0.05)。
4.7久瀉寧顆粒對UC模型大鼠結(jié)腸組織的影響 光鏡下病理切片觀察正常對照組大鼠結(jié)腸粘膜上皮完整，連續(xù)，腺體排列規(guī)則，結(jié)構(gòu)清楚。UC模型組大鼠結(jié)腸粘膜脫落，潰瘍明顯。陽性對照組可見腺體結(jié)構(gòu)出現(xiàn)，一層上皮組織蓋住潰瘍。久瀉寧低劑量組可見兩邊上皮組織向中間愈合。久瀉寧中劑量組上皮組織基本完整，腺體排列欠規(guī)則，潰瘍基本愈合。久瀉寧高劑量組上皮組織基本完整，腺體排列較規(guī)則，潰瘍基本愈合。(參見圖3-圖10所示，圖3-圖10分別反映了各實驗組對UC模型大鼠結(jié)腸組織的影響。) 5.討論 5.1潰瘍性結(jié)腸炎的中醫(yī)認(rèn)識潰瘍性結(jié)腸炎在祖國醫(yī)學(xué)中屬“泄瀉”、“休息痢”、“腹痛”等證的范疇?！毒霸廊珪ば篂a》提出“泄瀉之本，無不由于脾胃”；“凡遇怒氣便作泄瀉者，…此肝脾二臟之病也。蓋以肝木克土，脾氣受傷而然”。因此，我們認(rèn)為脾腎虧虛是對UC病因病機的根本反映，是貫穿UC發(fā)生發(fā)展與轉(zhuǎn)歸的一條主線，濕邪、肝郁是重要的病理因素。久瀉寧顆粒配方由淮山藥、白芍、炒白術(shù)等組成，全方以補益脾腎為主，調(diào)氣行濕為輔，標(biāo)本兼治，不寒不燥，為治療慢性泄瀉之良方。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為，UC發(fā)病主要與免疫以及遺傳有關(guān)，而遺傳素質(zhì)和免疫失調(diào)與中醫(yī)脾腎關(guān)系密切。腎藏精，主生殖，先天稟賦差異主要歸于腎，而腎特別是腎陽與神經(jīng)內(nèi)分泌密切相關(guān)；脾為元氣生成之所，主衛(wèi)，機體免疫功能與脾的功能狀態(tài)相關(guān)。沈自尹研究表明，通過長期健脾補腎，可以影響神經(jīng)內(nèi)分泌免疫網(wǎng)絡(luò)，調(diào)節(jié)激素、神經(jīng)遞質(zhì)、細(xì)胞因子的變化與基因表達(dá)，從而影響活性物質(zhì)的釋放，改善機體免疫失衡狀態(tài)。
5.2潰瘍性結(jié)腸炎與IL-2白細(xì)胞介素(IL)是一組具有多種生物學(xué)活性的淋巴因子，主要由免疫細(xì)胞產(chǎn)生，并在免疫細(xì)胞的發(fā)育、分化、免疫應(yīng)答及某些細(xì)胞的激活過程中具有重要調(diào)節(jié)作用。目前研究表明，IL-2在UC發(fā)生中的作用非常重要，UC患者外周血清及外周血培養(yǎng)液中IL-2的濃度均明顯低于正常者。近年來，諸多實驗研究證實UC模型組大鼠血清IL-2水平比正常組大鼠顯著降低。本實驗觀察到UC模型大鼠血清IL-2水平比正常大鼠顯著降低，而通過久瀉寧顆粒治療后隨癥狀體征的好轉(zhuǎn)，IL-2水平顯著升高。可見，久瀉寧顆?？稍鰪奣細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫和體液免疫功能，增強NK細(xì)胞的細(xì)胞毒功能，減弱自身免疫反應(yīng)，從而減輕組織損傷而趨向愈合。
5.3潰瘍性結(jié)腸炎與TNF αTNF-α是一種主要由活化的單核-巨噬細(xì)胞所產(chǎn)生的一種具有多種生物活性的細(xì)胞因子。TNF-α不僅對腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞毒性和生長抑制作用，在感染、創(chuàng)傷、燒傷及自身免疫性疾病時，TNF-α水平可有不同程度的增高。有研究顯示，TNF-α可以促使腸上皮內(nèi)淋巴細(xì)胞增殖、分化及移行。這一過程會釋放大量特異性或非特異性炎癥分子，起到局部免疫破壞作用，反映到UC，則是腸局限性潰瘍的出現(xiàn)和延續(xù)。近年來，諸多文獻(xiàn)報道活動期UC病人血清TNF-α水平明顯增高，提示TNF-α參與了UC的病理過程。其機理可能與UC病人體內(nèi)多種異常抗體、免疫復(fù)合物產(chǎn)生及合并感染時病原體抗原通過不同途徑刺激單核-巨噬細(xì)胞產(chǎn)生并釋放TNF-α至血循環(huán)中，導(dǎo)致血中TNF-α水平增高有關(guān)。本實驗發(fā)現(xiàn)模型組大鼠血清中TNF-α水平明顯高于正常組，經(jīng)久瀉寧顆粒治療后其水平顯著下降，說明久瀉寧顆粒可以通過抑制TNF-α的產(chǎn)生，減少特異性或非特異性炎癥分子的釋放，緩解腸道免疫破壞作用。
5.4潰瘍性結(jié)腸炎與IgG和IgM 潰瘍性結(jié)腸炎的組織學(xué)改變顯示有B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞混合浸潤。正常腸組織的淋巴細(xì)胞以IgA分泌型B細(xì)胞為主，而UC腸組織中IgG分泌型B細(xì)胞明顯增加。在胃腸道疾病中，當(dāng)免疫復(fù)合物IgG大量增多或沉淀在有病損的器官中時，則給機體帶來不良的影響，造成局部腸黏膜損傷。潰瘍性結(jié)腸炎患者在腸黏膜受到炎癥侵犯時，其腸黏膜具有多種抗原如結(jié)腸上皮細(xì)胞抗原，酵母菌抗原，O14型大腸桿菌的酯多糖抗原等可能刺激機體免疫B細(xì)胞產(chǎn)生IgM。UC患者免疫學(xué)檢查可見血清免疫球蛋白IgG和IgM在活動期增高。實驗給予大鼠久瀉寧顆粒治療后，其血清IgG和IgM明顯下降。提示久瀉寧顆粒可改善機體體液免疫功能，減輕腸道組織損傷。
綜上而言，久瀉寧顆?？梢愿纳芔C模型大鼠失衡的免疫水平，減輕自身免疫反應(yīng)，減少特異性或非特異性炎癥分子的釋放，緩解腸道免疫破壞作用。
二、急性毒性動物實驗 目的觀察久瀉寧一日內(nèi)小鼠灌胃1～3次后的毒性反應(yīng)和死亡情況，測定最大耐受量；方法久瀉寧小鼠灌胃，一日2-3次，觀察急性毒性反應(yīng)。測定最大耐受量；結(jié)果久瀉寧小鼠灌胃給藥的最大耐受藥量為750g/kg(含生藥)。相當(dāng)臨床日擬用量(2.5g/kg)的300倍；結(jié)論久瀉寧無明顯毒性，安全范圍大。
實驗方法及結(jié)果 1.實驗動物清潔級昆明種小鼠50只，體重20±2g，雌雄各半，上海斯萊克實驗動物有限責(zé)任公司提供，合格證書SCXK(滬)2003-0003。
2.實驗藥物久瀉寧顆粒，實驗用藥為顆粒劑成劑前之藥液。
3.實驗方法取小鼠10只進(jìn)行預(yù)試驗，試驗前禁食不禁水16h。用久瀉寧顆粒實驗用藥最大濃度12.5g/ml，最大劑量0.3ml/10g一次性灌胃，不足引起小鼠死亡，測不出LD50，則改用測定最大耐受量(MTD)。
取小鼠40只，隨機分為2組，每組20只，雌雄各半。小鼠禁食16h(不禁水)后，一日內(nèi)用小鼠能耐受的最大濃度和最大容積，分別給一組小鼠一日灌胃2次，累計劑量為750g/kg；一組小鼠一日灌胃3次，累計劑量為1125g/kg，連續(xù)觀察7d，測定MTD。
4.觀察指標(biāo) 4.1神經(jīng)系統(tǒng)方面①行為及反應(yīng)包括不正常叫聲、煩躁、不安、易怒、少動、嗜睡/昏迷或死亡等；②運動包括肌肉抽搐、僵硬、強迫運動、松弛、麻痹等；③眼有無眼瞼下垂，眼球突出、震顫等。
4.2呼吸及心血管方面呼吸狀態(tài)、鼻分泌、觸心前區(qū)心率快慢等。
4.3胃腸方面腹部脹氣或收縮，大便性狀和色澤。
4.4泌尿生殖系統(tǒng)陰唇、乳腺腫脹、會陰部骯臟。
4.5皮膚和毛顏色、完整性、有無充血、紫紺、蒼白、發(fā)疹、毛松散等。
5.實驗結(jié)果 預(yù)試驗結(jié)果顯示12.5g/ml的久瀉寧實驗用藥一次給小鼠灌胃，不足以引起小鼠死亡；故改用小鼠能耐受的最大濃度和最大容積一日灌胃2-3次測定MTD，發(fā)現(xiàn)3次組小鼠灌胃后自發(fā)性活動減少，腹部膨脹，第2天觀察大部分小鼠出現(xiàn)腹瀉，第4天以上癥狀消失，死亡8只；2次組小鼠灌胃后自發(fā)性活動減少，腹部膨脹，第2天恢復(fù)正常，無腹瀉，無死亡。
6.小結(jié) 測得MTD為750g/kg，相當(dāng)臨床日用量的296倍(臨床日用量2.53g/kg)，說明該藥安全范圍大。
三、長期毒性動物實驗 目的觀察久瀉寧給大鼠連續(xù)灌胃3個月，對機體產(chǎn)生的毒性反應(yīng)、嚴(yán)重程度及可逆性，確定無毒劑量。方法久瀉寧高、中、低三個劑量組和一個對照組。大鼠連續(xù)灌胃3個月，觀察外觀行為和體質(zhì)量變化。試驗期結(jié)束。每組取1/2動物活殺，檢測血常規(guī)、血液生化、病理組織；1/2動物停藥進(jìn)行3周的恢復(fù)期觀察后。同法檢測上述指標(biāo)。結(jié)果久瀉寧大鼠連續(xù)3個月灌胃給藥的無毒劑量為125g/kg(含生藥).相當(dāng)臨床擬用量50倍。結(jié)論久瀉寧無明顯毒性，安全范圍大。臨床日擬用量2.5g/kg、療程1個月是安全的。
實驗方法和結(jié)果 1.實驗動物6周齡清潔級SD大鼠80只，雌雄各半，上海西普爾-必凱實驗動物有限公司提供，許可證號SCXK(滬)2003-0002。
2.實驗藥物久瀉寧顆粒，實驗用藥為顆粒劑成劑前之藥液。
3.主要實驗儀器 4020型自動生化分析儀日立 BM-A(Q/EF4) 生物顯微鏡上海徠卡顯微鏡有限公司 RM 2125/RM 2128 輪轉(zhuǎn)式切片機 上海徠卡儀器有限公司 TN-100B 托盤扭力天平 上海精密科學(xué)儀器有限公司 BS210S電子天平 北京賽多利斯天平有限公司 4.動物分組 上述大鼠80只，按性別、體重分層隨機分為4組，每組20只，雌雄各半，分別設(shè)對照組，給飲用水；久瀉寧顆粒高劑量組125g/kg、中劑量組62.5g/kg、低劑量組31.25g/kg(相當(dāng)于臨床日用量的50倍、25倍、12.5倍)，用蒸餾水配成12.5g/ml、6.25g/ml、3.125g/ml的濃度。
5.實驗方法和觀察指標(biāo) 按體重分別給飲用水和不同濃度的久瀉寧顆粒之藥液1ml/100g，每天上午灌胃1次，每周稱體重及飼料消耗量，并觀察大鼠的外觀行為等變化，連續(xù)3個月。末次給藥后，所有大鼠禁食過夜(不禁水)，次日各組大鼠1/2斷頭、1/2眼眶取血(雌雄各半)測定血常規(guī)(血紅蛋白Hb、紅細(xì)胞RBC、白細(xì)胞WBC、白細(xì)胞分類)、血清總蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、血糖(GLU)、血脂(膽固醇TC、甘油三酯TG)和肝、腎功能(血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、堿性磷酸酶ALP、尿素氮BUN、肌酐Cr)，同時解剖各組斷頭大鼠，取心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胃、腸、胸腺、睪丸或卵巢進(jìn)行病理鏡檢，并對主要臟器稱濕重，計算臟器指數(shù)(臟器濕重/動物體重×100％)。各組眼眶取血的大鼠停藥3周后，重復(fù)上述指標(biāo)的測定。
6.統(tǒng)計學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS11.0統(tǒng)計軟件分析。各變量用t檢驗分析，結(jié)果用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x±S)表示。
7.實驗結(jié)果(見表1～14) 7.1一般情況各組大鼠在給藥期間，未見因藥物中毒而死亡的情況，毛具有光澤，無稀便等。但久瀉寧高、中、低各劑量組大鼠不同程度的出現(xiàn)飲食減少、活動減少的情況。對大鼠體重及進(jìn)食量的影響見下表 表1久瀉寧顆粒對大鼠體重的影響(x±S，n＝20)

表2停藥3周后對大鼠體重的影響(x±S，n＝10)
注t檢驗，與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01. 表1結(jié)果顯示與對照組比較，久瀉寧高、中劑量組對雄性大鼠體重的增長有抑制作用，差異顯著(P＜0.05～P＜0.01)；對雌性大鼠體重的增長無明顯影響(P＞0.05)。表2結(jié)果顯示停藥3周各組大鼠體重比較無顯著性差異(P＞0.05)。表明久瀉寧顆粒對大鼠體重的增長無遲發(fā)性影響。
表3久瀉寧顆粒對大鼠進(jìn)食量的影響(x±s，n＝20)
續(xù)表3
表4停藥3周后對大鼠進(jìn)食量的影響(x±s，n＝10)
注t檢驗，與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01. 表3結(jié)果顯示與對照組比較，久瀉寧高、中、低劑量組對大鼠的進(jìn)食量有不同程度的抑制作用，差異顯著(P＜0.05～P＜0.01)，以高劑量最為明顯。表4結(jié)果顯示與對照組比較，停藥后第1周久瀉寧高劑量組大鼠飲食量較少，差異顯著(P＜0.05)，停藥2、3周大鼠的飼料消耗量各組比較無顯著差異(P＜0.05)。
7.2久瀉寧顆粒對大鼠主要臟器的影響 表5久瀉寧顆粒對大鼠主要臟器指數(shù)的影響(x±s，n＝10)
表6停藥3周后對大鼠主要臟器指數(shù)的影響(x±s，n＝10)

注t檢驗，與對照組比較，**P＜0.01， 表5結(jié)果顯示與對照組比較，久瀉寧高劑量組可升高大鼠肝指數(shù)和腎指數(shù)，差異非常顯著(P＜0.01)；久瀉寧中劑量組可升高大鼠肝指數(shù)，差異非常顯著(P＜0.01)；久瀉寧各劑量組對其他臟器指數(shù)無顯著影響。表6結(jié)果顯示停藥3周后，各組大鼠臟器指數(shù)比較差別不顯著(P＜0.05)，表明久瀉寧顆粒對大鼠臟器指數(shù)無遲發(fā)性影響。
7.3久瀉寧顆粒對大鼠血常規(guī)的影響 表7久瀉寧顆粒對大鼠血常規(guī)的影響(x±s，n＝10)
表8停藥后3周后對大鼠血常規(guī)的影響(x±s，n＝10)
注t檢驗，與對照組比較，*P＜0.05。
表7結(jié)果顯示與對照組比較，除久瀉寧中劑量組可顯著降低大鼠Hb外(P＜0.05)，其他各組大鼠Hb、RBC、WBC及其分類比較差異不顯著(P＞0.05)。
表8結(jié)果顯示停藥3周后，各組大鼠Hb、RBC、WBC及其分類比較差別不顯著(P＞0.05)，表明久瀉寧顆粒對大鼠血常規(guī)無遲發(fā)性影響。
7.4久瀉寧顆粒對大鼠血生化的影響 表9久瀉寧顆粒對大鼠TP、ALB、GLU、TC、TG的影響(x±s，n＝10)
表10停藥3周后對大鼠TP、ALB、GLU、TC、TG的影響(x±s，n＝10)
注t檢驗，與對照組比較，**P＜0.01， 表9結(jié)果顯示與對照組比較，久瀉寧高、中、低劑量組可非常顯著降低GLU(P＜0.01)；久瀉寧各劑量組對TP、ALB、TC、TG無顯著影響(P＞0.05)。表10結(jié)果顯示停藥3周后，各組大鼠TP、ALB、GLU、TC、TG比較無顯著性差異(P＞0.05)，表明久瀉寧顆粒對大鼠TP、ALB、GLU、TC、TG無遲發(fā)性影響。
表11久瀉寧顆粒對大鼠ALT、AST、ALP、BUN、Cr的影響(x±s，n＝10)
表12停藥3周后對大鼠ALT、AST、ALP、BUN、Cr的影響(x±s，n＝10)

注t檢驗，與對照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
表11結(jié)果顯示與對照組比較，除久瀉寧中劑量組可非常顯著降低ALP外(P＜0.01)，其他各組大鼠ALT、AST、BUN、Cr比較無顯著性差異(P＞0.05)。表12結(jié)果顯示停藥3周后，與對照組比較，久瀉寧高劑量組可非常顯著升高ALT和Cr(P＜0.01)；久瀉寧低劑量組可顯著升高BUN和Cr(P＜0.05～P＜0.01)。
7.5久瀉寧顆粒對大鼠主要臟器的影響 表13久瀉寧顆粒對大鼠主要臟器組織影響(n＝10)
表14停藥3周后對大鼠主要臟器組織影響(n＝10)
上兩表結(jié)果示組織鏡檢(+)為肝細(xì)胞濁腫變和小灶性脂變、肺小灶性出血變、腎小管上皮細(xì)胞輕度濁腫，組間差異不明顯，說明久瀉寧顆粒對大鼠臟器組織無明顯影響。
8.小結(jié) 8.1久瀉寧顆粒125g/kg、62.5g/kg、31.25g/kg分別給大鼠灌胃3個月，對大鼠體重增長及進(jìn)食量有一定的抑制作用，以久瀉寧高、中劑量組顯著，原因可能為藥液過于濃稠，大鼠難以消化，影響其進(jìn)食量及體重的增長。對血常規(guī)，心、肝、脾、肺、腎等主要臟器無明顯影響；對肝、腎指數(shù)(升高)、血紅蛋白(降低)、血糖(降低)、堿性磷酸酶(降低)有一定影響，但均在正常范圍波動，且停藥后均恢復(fù)正常。血糖低于正常組，可能是其藥理作用的結(jié)果。
8.2停藥3周后，再次檢測各項指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)久瀉寧顆粒與對照組比較，大鼠血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT、尿素氮BUN、肌酐Cr升高有顯著意義。
8.3久瀉寧顆粒給藥3個月后停藥3周，對心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胃、腸、胸腺、睪丸或卵巢臟器組織進(jìn)行病理鏡檢，未見由藥物所引起的各組織細(xì)胞和間質(zhì)變性、壞死等異常病理變化(參見圖11-圖26)。
8.4停藥3周后ALT、BUN、Cr明顯升高。其升高值雖在正常范圍，但長期大劑量服用久瀉寧顆粒時，應(yīng)密切觀察肝、腎功能的變化。
權(quán)利要求
1.一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于它主要是由下述原料藥按下述重量配比制成的淮山藥25-35份，野麻草25-35份，黨參15-20份，白術(shù)10-15份，白芍10-15份，荷葉15-25份，防風(fēng)4-8份，砂仁4-8份，甘草3-8份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于它主要是由下述原料藥按下述重量配比制成的淮山藥30份，野麻草30份，黨參20份，白術(shù)10份，白芍15份，荷葉20份，防風(fēng)6份，砂仁6份，甘草5份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于原料藥中還含有馬鞭草25-35份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于原料藥中還含有馬齒莧25-35份。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于原料藥中還含有薏苡仁20-30份。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于原料藥中還含有茯苓10-30份。
7.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于原料藥中還含有陳皮10-15份。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥，其特征在于它主要是由下述原料藥按下述重量配比制成的淮山藥25-35份，野麻草25-35份，黨參15-20份，白術(shù)10-15份，白芍10-15份，荷葉15-25份，防風(fēng)4-8份，砂仁4-8份，甘草3-8份。本發(fā)明旨在為潰瘍性結(jié)腸炎患者提供一種簡便、經(jīng)濟、療程短、療效顯著、愈后復(fù)發(fā)率低且臨床使用無毒副作用的治療潰瘍性結(jié)腸炎的中成藥。
文檔編號A61K36/88GK101732652SQ201010103238
公開日2010年6月16日 申請日期2010年1月29日 優(yōu)先權(quán)日2010年1月29日
發(fā)明者阮時寶 申請人:阮時寶