專利名稱：用于治療阿爾茨海默病的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新制劑，其用于減少tau蛋白的磷酸化或β淀粉樣斑塊的存在，從而預(yù)防和治療認(rèn)知和神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如阿爾茨海默病(Alzheimer’ s Disease, AD)?？筛鶕?jù)本發(fā)明治療的其他神經(jīng)系統(tǒng)疾病包括肌萎縮側(cè)索硬化癥；輕度認(rèn)知障礙；額顳癡呆， 例如與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙相關(guān)的；額顳葉退化，也稱為皮克氏病 (Pick' s disease)；進行性核上性麻痹；腦脊髓炎；多發(fā)性硬化；或皮質(zhì)基底核退化；帕金森病；和其他類型的癡呆。所述制劑包含，例如治療有效量的以下組合姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(印igall0Catechin-3-gallate，EGCG)，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺(benfotiamine)和α -硫辛酸中的一種或多種。該聯(lián)合指向可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)缺陷、退化和疾病的一些或全部通路。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默病(AD)是老年人中癡呆的首要原因。一般特征是認(rèn)知能力喪失(包括記憶力)以及人格和照顧自己的能力迅速退化。目前有超過5百萬美國人被診斷為患有 AD,而隨著人口的老齡化，這一數(shù)字在未來的幾十年內(nèi)將會增至3倍。每10個65歲以上的人中有一個，以及每2個85歲以上的人中有一個患該病。研究者普遍發(fā)現(xiàn)該病本身表現(xiàn)出多種標(biāo)志性病理表現(xiàn)，包括β淀粉樣(Αβ)斑塊(amyloid β plaque)和過磷酸化tau蛋白的積累。也可見大的炎癥應(yīng)答，伴有氧化性損傷的跡象。在AD患者中也經(jīng)常觀察到廣泛的突觸和神經(jīng)元損失。對患有AD的患者的標(biāo)準(zhǔn)護理是用抗膽堿酯酶的抑制劑(anticholinesterase inhibitor)進行治療。膽堿酯酶抑制劑(cholinesterase inhibitor)通過阻止神經(jīng)遞質(zhì)乙酰膽堿降解而增加其的突觸可用性。抗膽堿酯酶抑制劑減緩疾病的進展，尤其是認(rèn)知功能和總體功能的惡化，并經(jīng)常將入院治療的需要延緩數(shù)月。不幸的是，抗膽堿酯酶抑制劑的作用僅是暫時的。美金剛(Memantine)，一種N-甲基-D-天冬氨酸受體拮抗劑，也已被嘗試用于治療AD。然而，抗膽堿酯酶抑制劑和美金剛對AD影響的程度僅產(chǎn)生對AD癥狀的暫時作用，而未顯示出對疾病病因的改變。據(jù)信，尚未有現(xiàn)今使用的治療顯示出預(yù)防、阻止或逆轉(zhuǎn)該神經(jīng)退行性過程。成功治療AD必須要解決聚集性生物分子(如A β和過磷酸化tau)的積聚以及突觸和神經(jīng)元的損失。一種有希望的方法是在第一時間阻止疾病的發(fā)展，其有可能至少延緩疾病的發(fā)作。此治療應(yīng)該是長期使用安全的并可被一般人群良好耐受的。發(fā)明概述在阿爾茨海默病的預(yù)防和治療上，非常需要重大的突破。根據(jù)本發(fā)明，藥物或成分的“聯(lián)合混合物(cocktail)”可成功地延遲阿爾茨海默病的發(fā)病和進展。特別地，已發(fā)現(xiàn)由標(biāo)準(zhǔn)化草藥提取物、維生素和礦物質(zhì)的創(chuàng)造性聯(lián)合所構(gòu)成的聯(lián)合混合物對阿爾茨海默病相關(guān)的生物化學(xué)和病理生理過程有影響。在一些實施方案中，本發(fā)明提供標(biāo)準(zhǔn)化的聯(lián)合混合物，其包含例如姜黃、綠茶、黑胡椒的提取物，維生素和另一些營養(yǎng)成分。所述聯(lián)合混合物已顯示減少AD病理生理標(biāo)志物 (例如tau蛋白過磷酸化和/或Αβ斑塊前體部分)的發(fā)生，并且也治療AD的認(rèn)知和行為作用，例如在新的阿爾茨海默病轉(zhuǎn)基因小鼠模型中所證明的。在一個方面，本發(fā)明提供了聯(lián)合混合物在治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。該聯(lián)合混合物，例如通過減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生或通過減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生，來治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。在一些實施方案中，認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病為阿爾茨海默病。認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病也可為，例如肌萎縮側(cè)索硬化癥、輕度認(rèn)知障礙、帕金森病、具有與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙的客頁聶頁癡呆(frontotemporal dementia with Parkinsonism linked to chromosome 17)、皮克氏病(Pick，s disease)、; tft生核上 f生) 搏(progressive supranuclear palsy)、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎和皮質(zhì)基底核退化(corticcAasal degeneration)。減少tau蛋白過磷酸化和/或Αβ斑塊前體部分的發(fā)生可導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，包括但不限于記憶喪失、人格改變、焦慮(agitation)、定向障礙(disorientation)、協(xié)調(diào)性喪失(loss of coordination)、無力自我照顧及其組合。在一些實施方案中，減少A β斑塊前體部分的發(fā)生導(dǎo)致Αβ斑塊發(fā)生的減少。Αβ斑塊前體部分可為，例如Ai3 42、C99、低分子量寡聚化Αβ 類型Αβ *56及其組合。在一些實施方案中，tau蛋白過磷酸化包括tau蛋白在231位蘇氨酸的磷酸化。所述聯(lián)合混合物可以單位劑量的形式施用，包括每天一個或多于一個單位劑量。在另一方面，本發(fā)明提供聯(lián)合混合物。在一些實施方案中，聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α -硫辛酸中的一種或多種，其用于治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。所述聯(lián)合混合物可通過減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生或通過減少Aβ斑塊前體部分的發(fā)生來治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病可為，例如阿爾茨海默病，或肌萎縮側(cè)索硬化癥、輕度認(rèn)知障礙、帕金森病、 具有與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙的額顳癡呆、皮克氏病、進行性核上性麻痹、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎和皮質(zhì)基底核退化。減少tau蛋白過磷酸化或Aβ斑塊前體部分的發(fā)生，導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，包括，例如記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、 協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組合。減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生可導(dǎo)致，例如Aβ斑塊發(fā)生的減少。A β斑塊前體部分可為，例如A β 42、C99、低分子量寡聚化A β類型Αβ*56及其組合。在一些實施方案中，tau蛋白過磷酸化包括在231位蘇氨酸處的磷酸化。所述聯(lián)合混合物可以單位劑量的形式施用，包括每天一個或多于一個單位劑量。在另一方面，本發(fā)明提供聯(lián)合混合物用于減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生的用途， 所述聯(lián)合混合物包含，例如姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。在一些實施方案中，tau蛋白過磷酸化包括，例如tau蛋白231位蘇氨酸的磷酸化。在另一方面，本發(fā)明提供聯(lián)合混合物用于減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α -硫辛酸中的一種或多種。附圖簡述

圖1A-1F展示一系列的圖表，所述圖表描述了根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的聯(lián)合混合物在Tg2576轉(zhuǎn)基因小鼠模型中對Morris水迷宮測試中表現(xiàn)的作用。圖2描述根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的聯(lián)合混合物在Tg2576轉(zhuǎn)基因小鼠模型中對新目標(biāo)認(rèn)知的作用。圖3A-3F展示一系列的圖表，所述圖表描述了根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的聯(lián)合混合物在Tg2576轉(zhuǎn)基因小鼠模型中對多種AD病因相關(guān)生物化學(xué)標(biāo)志物的作用。圖4A-4D展示一系列的圖表，所述圖表描述了根據(jù)本發(fā)明一個實施方案的聯(lián)合混合物在3xTg-AD小鼠模型中對Morris水迷宮表現(xiàn)(A-B)以及對AD病因相關(guān)多種生物化學(xué)標(biāo)志物水平(C-D)的作用。發(fā)明詳述下文詳細(xì)討論了本發(fā)明的實施方案。在對實施方案的描述中，為了清楚起見，使用了特定的術(shù)語。然而，本發(fā)明不限于如此選擇的特定術(shù)語。相關(guān)領(lǐng)域中技術(shù)人員會了解，在不脫離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可應(yīng)用其他等同的部分和開發(fā)其他方法。本文引用的所有參考文獻以參考的形式并入本文，如同其每個單獨并入。除非另有說明或提示，百分比一般為重量百分比。在一些實施方案中，本發(fā)明提供了醫(yī)療食品聯(lián)合混合物，所述聯(lián)合混合物可在疾病的早期階段減緩、阻止或逆轉(zhuǎn)阿爾茨海默病或者其他神經(jīng)系統(tǒng)或認(rèn)知疾病的發(fā)展。該聯(lián)合混合物由營養(yǎng)成分構(gòu)成，所述成分已顯示出對阿爾茨海默病相關(guān)的生物化學(xué)或生理過程具有有益的影響，例如減少A β斑塊和tau過磷酸化的發(fā)生，如在公認(rèn)的AD小鼠模型中所證明的。發(fā)明人相信，這是第一次證明和/或在該量級和范圍上證明該作用。這一對生物化學(xué)和/或生理過程的有益影響導(dǎo)致認(rèn)知功能的改善或不再減退。這些成分現(xiàn)今都被FDA 列為通常認(rèn)為安全的(Generally Recognized As Safe,GRAS)成分，或自我肯定為GRAS成分，或通常用作食品添加劑。本發(fā)明的組合物已被發(fā)現(xiàn)有益于預(yù)防、降低其嚴(yán)重程度或逆轉(zhuǎn)多種神經(jīng)系統(tǒng)疾病或認(rèn)知疾病，所述疾病包括但不限于阿爾茨海默病、帕金森病和輕度認(rèn)知障礙。本文使用的“治療”是指預(yù)防、治愈、逆轉(zhuǎn)、減弱、減輕、最小化、抑制或阻止本文描述的疾病、病癥或狀況的至少一種癥狀或有害作用?！爸委煛焙w治療性治療以及預(yù)防性或防止性措施，而不要求治愈。需要治療的對象包括已經(jīng)患病的或要預(yù)防疾病的對象。因此， 待治療患者可已被診斷為患有疾病或者可傾向于患或易感于疾病?！爸委煛币埠w減少認(rèn)知下降的癥狀，例如記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組
I=I O“有效的”或“治療有效的”意為足以引起患者的至少一種癥狀在頻率和/或強度上降低；一種或多種癥狀的頻率和/或強度的增加速率減緩；或者當(dāng)本來預(yù)期增加時維持相對穩(wěn)定水平的頻率和/或強度。因此受影響的癥狀可包括，例如一種或多種不良的認(rèn)知或生理癥狀?！罢J(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病(cognitive or neurological disorder) ”包括以認(rèn)知功能減退為特征的疾病和病癥，例如引起記憶喪失的疾病，和以神經(jīng)系統(tǒng)功能喪失為特征的疾病，包括但不限于影響整個神經(jīng)系統(tǒng)功能的或者導(dǎo)致神經(jīng)元死亡或神經(jīng)元健康下降的疾病。例如，“認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病”包括阿爾茨海默?。患∥s側(cè)索硬化癥(amyotrophic lateral sclerosis, ALS)；輕度認(rèn)知障礙；額顳癡呆，例如與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙相關(guān)的癡呆；額顳葉退化，也稱為皮克氏病；進行性核上性麻痹 (progressive supranuclear palsy, PSP)；腦脊髓炎；多發(fā)t生硬化(multiple sclerosis, MS)；帕金森??；或皮質(zhì)基底核退化(corticcAasal degeneration, CBD)；或者任何與這些或其他疾病相關(guān)的癥狀。“施用”意為向患者遞送一個或多個劑量的一種所述組合物。本發(fā)明的方法可涉及以與本文所述一種或多種疾病的有效治療相適應(yīng)的任何方式和通過任何施用途徑施用所述組合物。例如，所述方法可涉及經(jīng)口施用所述組合物。本文使用的“患者”包括診斷患有本文所述疾病、病癥或狀況之一，或者傾向于患本文所述疾病、病癥或狀況之一的哺乳動物(例如人)。本發(fā)明的組合物可施用于任何能夠感受到本發(fā)明組合物和方法的有益作用的哺乳動物。任何這樣的哺乳動物被認(rèn)為是“患者”。這樣的患者包括人和非人，例如人、家養(yǎng)和農(nóng)場動物，以及動物園、運動或?qū)櫸飫游?，如犬、馬、貓、牛、小鼠、大鼠等?！安涣颊J(rèn)知癥狀”涵蓋任何不希望的認(rèn)知癥狀，其可被本發(fā)明的組合物和方法有效地治療。不良認(rèn)知癥狀的實例包括但不限于記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧?！安涣忌戆Y狀”涵蓋任何不希望的生理癥狀，其可被本發(fā)明的組合物和方法有效地治療。不良生理癥狀的實例包括但不限于淀粉樣(即Αβ)斑塊的形成或積累，tau 蛋白纏結(jié)的形成或積累，tau蛋白過磷酸化，tau蛋白在231蘇氨酸的磷酸化，微管失穩(wěn) (microtubule destabilization)禾口 / 或突角蟲損失。本文使用的“聯(lián)合混合物”涵蓋包含兩種或多種本文公開之成分的組合物。本文使用的“聯(lián)合混合物”、“聯(lián)合(combination)”和“聯(lián)合飲食(combination diet)”可互換使用?！斑^磷酸化(hyperphosphorylation) ”涵蓋相對于正常水平的磷酸化的任何增加 (即高于健康患者中所發(fā)生的)，例如與認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病(例如AD)相關(guān)的那些水平。 本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會理解，磷酸化的“正?！彼皆诨颊吲c患者之間會顯著地不同，意味著“正?！绷姿峄颉斑^磷酸化”會隨著背景的不同而變化。本文使用的“過磷酸化”也涵蓋異常磷酸化，不論是磷酸化水平、磷酸化位點還是其他的與正常情況的不同，包括與認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病(如AD)相關(guān)的異常磷酸化類型。例如，“過磷酸化”涵蓋231位蘇氨酸的異常磷酸化，這是可引起神經(jīng)元功能障礙和神經(jīng)元死亡的特別毒性的tau過磷酸化形式。在阿爾茨海默病患者中，231位蘇氨酸殘基顯示異常磷酸化。盡管在正常大腦中其在一定程度上也是磷酸化的。聯(lián)合混合物在一些實施方案中，本發(fā)明提供用于治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的聯(lián)合混合物。本文公開的聯(lián)合混合物可包含，例如姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及 N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α -硫辛酸中的一種或多種。認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病可為，例如阿爾茨海默病，但是任何以A β斑塊和/或tau纏結(jié)為特征的疾病、病癥或狀況可用本文所述聯(lián)合混合物進行治療。這樣的認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的實例包括但不限于肌萎縮側(cè)索硬化癥(ALS)；輕度認(rèn)知障礙；額顳癡呆，例如17號染色體連鎖的帕金森氏神經(jīng)機能障礙相關(guān)的癡呆；額顳葉退化，也稱為皮克氏??；PSP ；腦脊髓炎；MS ；帕金森??；或CBD。本文公開的組合物和方法可用于治療，例如阿爾茨海默病。盡管阿爾茨海默病的單一原因尚未確定，但是被診斷患有AD的人的腦通常表現(xiàn)出由β淀粉樣蛋白沉積物(即斑塊)構(gòu)成的粘性斑塊，以及tau蛋白過磷酸化所引起的tau蛋白纏結(jié)。本發(fā)明的組合物和方法帶來了對斑塊和纏結(jié)的預(yù)防和/或逆轉(zhuǎn)/降低(如果已形成)。根據(jù)本發(fā)明的組合物已顯示出減少淀粉樣斑塊、tau蛋白纏結(jié)、微管失穩(wěn)、突觸損失和tau蛋白過磷酸化，并且可預(yù)防認(rèn)知減退，從而有效地治療AD患者中的記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、無力自我照顧和協(xié)調(diào)性喪失。β淀粉樣(本文也稱為Aβ或Abeta)肽多年來一直是AD研究的核心。Αβ肽的存在以及由其形成的斑塊一般被認(rèn)為是上游原因因素。這一位置的證據(jù)源自對三個基因的分子遺傳學(xué)研究一淀粉樣前體蛋白(amyloid precursor protein，APP)，早老素 1 (preseni 1 in 1，PSl)和早老素2 (preseni 1 in 2，PS2)-解釋了一些AD病例，因為它們都調(diào)節(jié)Αβ代謝的一些方面，增加Αβ聚集的傾向。此外，載脂蛋白E的Ε4變體(Αρο Ε4)基因影響Αβ的聚集速率，所述基因是與晚期發(fā)病的疾病相關(guān)的調(diào)節(jié)基因。Apo Ε4可促進從Αβ 肽形成β-片層，從而促進從本來可溶的肽形成斑塊。在所有晚期AD發(fā)病的人中約40%出現(xiàn)Apo Ε4，并且其在人群的約25-30%中存在?；加蠥D的人比不發(fā)生AD的人更可能具有 Apo Ε4等位基因。然而，很多患有AD的人沒有Apo Ε4等位基因。APP是神經(jīng)元跨膜蛋白，其對神經(jīng)元的生長、存活和損傷后修復(fù)至關(guān)重要。APP可被α -分泌酶降解成肽部分C83和N末端片段，或者被β -分泌酶降解成C99部分和N末端片段。當(dāng)產(chǎn)生C99時，其可進一步地被Y-分泌酶切割成與淀粉樣斑塊形成相關(guān)的Aβ 42。 目前α -分泌酶通路未顯示出導(dǎo)致任何與AD病因相關(guān)的化合物的形成。淀粉樣斑塊在細(xì)胞外形成。淀粉樣斑塊的形成與例如鈣離子內(nèi)穩(wěn)態(tài)的破壞，神經(jīng)元凋亡的誘導(dǎo)，特定酶功能的抑制以及神經(jīng)元對葡萄糖利用的干擾相關(guān)。淀粉樣斑塊也可通過刺激活性氧物質(zhì)的形成與疾病狀態(tài)相關(guān)。AD也以tau纏結(jié)的形成為特征。tau蛋白是由位于17號染色體的單基因(MAPT) 編碼的，盡管它在成體腦中選擇性剪接產(chǎn)生6種主要蛋白同工型。tau基因含15個外顯子， 外顯子2、3和10可選擇性剪接。外顯子9-12編碼4個不完全串聯(lián)重復(fù)，因此，外顯子10 的選擇性剪接產(chǎn)生具有3或4個重復(fù)結(jié)構(gòu)域的同工型(3R和4R tau)，其分別依賴于外顯子10的存在與否。外顯子2和3的選擇性剪接獲得在氨基末端含有0 (ON)，1 (IN)或2 (2N) 個插入的變體，從而形成6個tau同工型3R0N、3R1N、3R2N、4R0N、4R1N和4R2N。在成體腦中，3R與4R tau的比例為 1 1，而在成體小鼠腦中，4R tau是所存在的唯一 tau同工型?？筛鶕?jù)纏結(jié)是否是由3R或4R tau異構(gòu)體構(gòu)成對Tau病進一步地分類。例如，在AD中， 3R和4R tau都在神經(jīng)纖維纏結(jié)中積累；另一些疾病則僅以3R tau (例如皮克氏病)或4R tau (例如PSP和CBD)為特征。在AD中，tau病理限于神經(jīng)元，但在某些其他tau病中，例如4R tau病CBD和PSP中，在神經(jīng)膠質(zhì)中也觀察到tau包涵體(inclusion)。在其正常狀態(tài)下，tau是可溶性蛋白，其功能是通過促進微管組裝和穩(wěn)定來協(xié)助細(xì)胞骨架正確發(fā)揮功能。相反，病理性tau蛋白表現(xiàn)出改變的溶解度性質(zhì)，形成纖維狀結(jié)構(gòu)， 并且其過磷酸化或在特定殘基異常磷酸化。病理性tau顯示對微管的親和力降低，干擾了其促進微管組裝的能力。tau的過磷酸化被認(rèn)為是先于組裝成PHF的早期事件。
過磷酸化或異常磷酸化的tau引起tau纏結(jié)的形成。tau纏結(jié)的特征是形成成對的螺旋細(xì)絲(paired helical filament, PHF)，其聚集成神經(jīng)纖維纏結(jié)(neurofibrillary tangle，NFT)。NFT是纖維狀包涵體(filamentous inclusion)，其在患AD個體的腦中選擇性神經(jīng)元中積累，但其也在另一些神經(jīng)退行性疾病中出現(xiàn)，包括具有與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙的額顳癡呆(frontotemporal dementia with Parkinsonism linked to chromosome 17，F(xiàn)TDP-17)、皮克氏病、PSP和CBD。認(rèn)為纏結(jié)的形成干擾神經(jīng)元細(xì)胞骨架正確發(fā)揮功能，在一些情況下導(dǎo)致微管網(wǎng)絡(luò)的崩潰，影響細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運和其他細(xì)胞功能。NFT形成也與突觸損失、神經(jīng)炎性萎縮和神經(jīng)元死亡有關(guān)。已知在PHF tau中存在超過30個磷酸化位點。相反，在健康的腦中，tau —般在這些殘基中8和10個處磷酸化。目前，越來越多的研究者認(rèn)為tau過磷酸化是AD疾病的核心原因。Αβ的形成被認(rèn)為在一些情況下能夠貢獻于tau過磷酸化的引發(fā)。例如，細(xì)胞外淀粉樣物可導(dǎo)致細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶Cdk5的失調(diào)，該酶與腦的發(fā)育有關(guān)，而這一失調(diào)可導(dǎo)致tau過磷酸化。另一些證據(jù)表明tau和淀粉樣病獨立地來自共同的內(nèi)在機制。例如，一些研究表明磷酸化APP與非磷酸化形式相比，更有可能通過導(dǎo)致Αβ形成的途徑而被加工。可磷酸化APP的激酶也可磷酸化tau。還提示另一個通用因子，比如wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的缺失，可誘導(dǎo)斑塊和纏結(jié)。Wnt信號轉(zhuǎn)導(dǎo)是一種細(xì)胞-到-細(xì)胞形式的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，涉及復(fù)雜的蛋白質(zhì)網(wǎng)絡(luò)，在成年動物中參與正常的生理過程，盡管它們也被認(rèn)為參與胚胎發(fā)生和癌癥。也很清楚，tau過磷酸化和相關(guān)的神經(jīng)元病理可獨立于A β斑塊的形成而發(fā)生。例如，在以神經(jīng)退行性病變和癡呆為特征的額顳癡呆中，tau纏結(jié)在沒有Αβ斑塊的情況下形成。在一些轉(zhuǎn)基因小鼠模型中，淀粉樣物的生成不會誘導(dǎo)預(yù)期的被認(rèn)為導(dǎo)致tau過磷酸化的級聯(lián)反應(yīng)，提示在這些模型中tau過磷酸化通過其他機制產(chǎn)生。此外，人腦的這些最易于發(fā)生神經(jīng)纖維變化(例如tau過磷酸化所產(chǎn)生的那些)的部分，一般對β -淀粉樣物沉積最有抗性。例如，內(nèi)嗅皮質(zhì)和海馬在AD進展的早期受到神經(jīng)纖維病變的影響，但它們一般不產(chǎn)生Αβ斑塊，直到疾病的晚期階段。氧化應(yīng)激已顯示導(dǎo)致生物化學(xué)通路的破壞，其繼而導(dǎo)致神經(jīng)元退化，這很可能是通過獨立于Aβ斑塊形成的tau過磷酸化而引起的。因為所述聯(lián)合混合物已顯示有效地減少認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病(例如AD)的一種或多種生理標(biāo)志物的發(fā)生，所以使用本文公開的聯(lián)合混合物和方法治療認(rèn)知性神經(jīng)系統(tǒng)疾病。例如，在本發(fā)明的一些實施方案中，包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中一種或多種的聯(lián)合混合物可用于治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病，這是因為其可以減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生，例如通過減少tau蛋白在231位蘇氨酸的磷酸化，這是AD和另一些認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的重要生理標(biāo)志物。本文使用的“減少發(fā)生”涵蓋例如與聯(lián)合混合物治療開始之前測量的相同值相比， 所述生理標(biāo)志物的數(shù)目、濃度、水平或其他度量減少；減緩標(biāo)志物增加的速率；使得在沒有治療的情況下預(yù)期會增加的水平保持穩(wěn)定；和/或預(yù)防、抑制或干擾生理標(biāo)志物的起始和發(fā)展。本文使用的“發(fā)生”涵蓋存在和形成。在一些實施方案中，所述聯(lián)合混合物通過減少tau蛋白磷酸化的發(fā)生來治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。Tau過磷酸化的例子包括，例如與正常條件下所見的相比231位蘇氨酸異常磷酸化，和/或tau磷酸化水平增加，和/或磷酸化位點數(shù)目的增加。
根據(jù)一些實施方案，減少tau蛋白過磷酸化(例如231位蘇氨酸)的發(fā)生，可治療神經(jīng)系統(tǒng)或認(rèn)知疾病，以及改善一種或多種認(rèn)知癥狀。這樣的癥狀可包括，例如記憶喪失、 人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組合。在一些實施方案中，本文公開的聯(lián)合混合物通過減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病。本文使用的“Αβ斑塊前體部分”意為任何能夠或確實貢獻于Aβ 斑塊形成的部分。A β斑塊前體部分的例子包括，例如肽A β 42和C99，以及另一些低分子量寡聚物，例如A β *56。減少A β斑塊前體部分的發(fā)生可導(dǎo)致A β斑塊發(fā)生的減少，而因此減少與A β斑塊的存在或形成相關(guān)的不良生理事件。如同tau過磷酸化那樣，減少A β斑塊前體部分的發(fā)生可導(dǎo)致與認(rèn)知和神經(jīng)系統(tǒng)疾病相關(guān)的一種或多種認(rèn)知癥狀的改善。這樣的癥狀可包括， 例如記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組合。聯(lián)合混合物也可包含一種或多種額外的成分，例如維生素&、維生素 、維生素 B12、葉酸、維生素C、維生素E、L-肌肽和蛋白水解酶。在一些實施方案中，本發(fā)明的組合物將以約15mg/kg/天至約500mg/kg/天的劑量施用。在一些實施方案中，本發(fā)明的組合物可以從約1050mg/天至約35000mg/天的劑量施用。待施用的劑量可包含，例如至少約5mg/kg患者體重的量的姜黃素；或約15到約 170mg/kg患者體重；或約17到約50mg/kg體重；或者最多或至少約15、16、17、18、19、20、 21、22、23、24、25、30、35、40、50、50、55mg/kg患者體重或更多。例如，姜黃素的劑量可為至少約350mg，約1050到約12000mg ；約1200到約3600mg ；或者最多或至少約1000、1050、1100、 1150、1200、1250、1300、1350、1400、1450、1500、1600、1700、1800、1900、2000、2100、2200、 2300、2400、2500、2600、2700、2800、2900、3000、3100、3200、3300、3400、3500、3600、3700、 3800、3900、4000mg姜黃素或更多。待施用的劑量可包含，例如至少約3. Omg/kg患者體重的量的EGCG ；或約7. 5到約85mg/kg患者體重；或約8. 5到約25mg/kg患者體重，或者最多或至少約 7. 0,7. 5,8. 0、8，5、9· 0,9. 5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、 25、26、27、28J9、30mg/kg患者體重或更多。例如，EGCG的劑量可為至少約210mg ；約525到約 6000mg ；約 600 到約 1800 ；或者最多或至少約 500、550、600、650、700、750、800、850、900、 950、1000、1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000mg EGCG 或更多。待施用的劑量可包含，例如至少約2. 5mg/kg患者體重的量的N-乙酰半胱氨酸，或約6. 4到約 71mg/kg患者體重，或約7. 0到約21mg/kg患者體重；或者最多或至少約6. 0,6. 5,7. 0,7. 5、 8. 0,8. 5,9. 0,9. 5、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25 或更多 mg/kg 患者體重。例如，N-乙酰半胱氨酸的劑量可為至少約175mg，或約450到約5000mg，或約500到約 1500，或者最多或至少約 400、450、500、550、600、650、700、750、800、850、900、950、1000、 1100、1200、1300、1400、1500、1600、1700、1800、1900、2000 或更多 mg 的 N-乙酰半胱氨酸。 待施用的劑量可包含例如，至少約1. 5mg/kg患者體重的量的α -硫辛酸；或者約3. 5mg/ kg患者體重到約43mg/kg患者體重；或者約％ig/kg患者體重到約i:3mg/kg患者體重；或者最多或至少約 3. 0,3. 5,4. 0,4. 5,5. 0,5. 5,6. 0,6. 5,7. 0,7. 5,8. 0,8. 5,9. 0,9. 5、10、11、12、 13、14、15mg/kg患者體重或更多。例如，α -硫辛酸的劑量可為至少約IOOmg ；約270mg到約 3000mg ；約 300 到約 900mg ；或者最多或至少約 200、250、300、350、400、450、500、550、600、 700、800、900、1000、1100、1200或更多mg的α-硫辛酸。例如，可使用R型α-硫辛酸。待施用的劑量可包含，例如至少約0. 05mg/kg患者體重的量的胡椒堿；約0. 1到約1. 5mg/kg 患者體重；或約0. 14到約0. 43mg/kg患者體重；或者最多或至少約0. 1,0. 11,0. 12,0. 13、
0.14,0. 15,0. 16,0. 17,0. 18,0. 19,0. 2,0. 25,0. 3,0. 35,0. 4,0. 45,0. 5mg/kg 患者體重或更多。例如，胡椒堿的劑量可為至少約3. 5mg ；或約9mg到約IOOmg ；或約IOmg到約30mg ；或者最多或至少約 l、2、3、4、5、6、7、8、9、10、ll、12、13、14、15、16、17、18、19、20、25、30、35、40mg 或更多的胡椒堿。胡椒堿可以以例如包含約98%黑胡椒的Bioperine: 的形式提供。待施用的劑量可包含例如至少約0. 5mg/kg患者體重的量的維生素B1 ；或約1. 2mg/kg患者體重到約14mg/kg患者體重；或約1. 4到約4. 3mg/kg患者體重；或者最多或至少約1. 0、1· 1、
1.2、1· 3、1· 4、1· 5、1· 6、1· 7、1· 8、1· 9、2· 0、2· 3、2· 5、2· 8、3· 0、3· 5、4· 0、4· 5、5. Omg/kg 體重或更多。例如，維生素B1的劑量可為至少約35mg ；或約90到約IOOOmg ；或約100到約300mg ； 或者最多或至少約 75、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、220、M0、 ^0J80、300、325、350、375、400mg或更多的維生素B:。維生素B1可以例如苯磷硫胺的形式提供。這些劑量可例如每天施用。待施用的劑量可包含，例如至少約0. 6mg/kg患者體重的量的維生素B6，或約 1. 2mg/kg患者體重到約14. 3mg/kg患者體重，或約1. 4到約4. 3mg/kg患者體重；或至少約 40mg，或約90mg到約lOOOmg，或約IOOmg到約300mg?？墒褂萌魏涡问降木S生素 。待施用的劑量可包含，例如，至少約2. 0mg/kg患者體重的量的維生素E，或約4. 5到約50mg/kg 患者體重，或約5mg/kg體重到約15mg/kg體重；或至少約150mg，或約315到約3500mg，或約350到約1050mg?？梢岳珑晁嵘拥男问绞┯镁S生素Ε。待施用的劑量可包含， 例如，至少約1. 0 μ g/kg患者體重的量的維生素B12，或約2. 5到約28. 5 μ g/kg患者體重，或約2. 8 μ g/kg患者體重到約8. 5 μ g/kg患者體重；或至少約70 μ g,或約180到約2000 μ g, 或約200到約600 μ g?？墒褂萌魏涡问降木S生素B12。可用包含約維生素B12的來源提供維生素B12，在這種情況下，將以約比上述維生素B12的量高100倍的量包含來源。待施用的劑量可包含例如至少約3. 0 μ g/kg患者體重的量的葉酸，或約10到約115 μ g/kg患者體重，或約11到約35 μ g/kg患者體重；或至少約200 μ g,或約720 μ g到約8000 μ g,或約 800 μ g到約M00 μ g。葉酸可用包含約10%葉酸的來源提供，在這種情況下，將以約比上述葉酸的量高10倍的量包含來源。待施用的劑量可包含，例如至少約0. 3mg/kg患者體重的量的維生素C，或約0. 6到約7. 2mg/kg患者體重，或約0. 7到約2. lmg/kg體重；或至少約 20mg，或約45到約500mg，或約50到約150mg。這些劑量可例如每天施用。該組合物可制備成提供每天經(jīng)口劑量的形式，所述劑量包含例如最少約1200mg 姜黃素，至少約IOmg胡椒堿，至少約600mg表沒食子兒茶素_3_沒食子酸酯，以及至少約 500mg N-乙酰半胱氨酸、至少約IOOmg苯磷硫胺和至少約300mg α -硫辛酸中的一種或多種。該組合物可另外包含IOOmg維生素 、200 μ g維生素Β12、800 μ g葉酸、50mg維生素C 和/或350mg維生素E中的一種或多種。根據(jù)本發(fā)明的組合物在患者中有效地治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如AD。如所知的，包含本文所述每日量的組合物可存在于單個劑量單位(例如單個片劑或膠囊)中，或者兩個、三個或更多劑量單位中。在單個劑量單位的情況下，最小每日劑量可每天一次使用。在多個劑量單位的情況下，總每日劑量可通過同時使用多個劑量單位而每天一次施用，或者單劑量單位可在該天的不同時間應(yīng)用來提供每天指定的劑量。
組合物的實例列在表1中，其中濃度以總重量百分比形式表示。表 1示例聯(lián)合混合物
權(quán)利要求
1.聯(lián)合混合物用于通過減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生來治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。
2.聯(lián)合混合物用于通過減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生來治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病為阿爾茨海默病。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其中所述認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病為肌萎縮側(cè)索硬化癥、輕度認(rèn)知障礙、帕金森病、具有與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙的額顳癡呆、肌萎縮側(cè)索硬化癥、皮克氏病、進行性核上性麻痹、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎和皮質(zhì)基底核退化。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，所述認(rèn)知癥狀選自記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組合。
6.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，所述認(rèn)知癥狀選自記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、無力自我照顧及其組合。
7.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生導(dǎo)致Αβ斑塊發(fā)生的減少。
8.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中Aβ斑塊前體部分選自A β 42、C99、A β *56及其組合。
9.根據(jù)權(quán)利要求2的用途，其中Αβ斑塊前體部分為低分子量寡聚化Aβ種類Αβ*56。
10.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其中tau蛋白過磷酸化包括在tau蛋白231位蘇氨酸上的磷酸化。
11.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的用途，其中所述聯(lián)合混合物包含至少約IOSOmg 姜黃素、至少約9mg胡椒堿、至少約MOmg表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及至少約 450mgN-乙酰半胱氨酸、至少約90mg苯磷硫胺和至少約270mg α -硫辛酸中一種或多種。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的用途，其中所述聯(lián)合混合物還包含選自下列的一種或多種組分至少約90mg量的維生素 ；至少約315mg量的維生素E ；至少約180 μ g量的維生素B12 ；至少約720 μ g量的葉酸；至少約45mg量的維生素C ；及其組合。
13.根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的用途，其中所述聯(lián)合混合物還包含 至少約450mg量的N-乙酰半胱氨酸；至少約270mg量的α -硫辛酸； 至少約90mg量的苯磷硫胺； 至少約90mg量的維生素 ； 至少約315mg量的維生素E ； 至少約180 μ g量的維生素B12 ； 至少約720 μ g量的葉酸；和至少約45mg量的維生素C。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項的用途，其中所述聯(lián)合混合物以包含每日一個單位劑量的單位劑量形式施用。
15.根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項的用途，其中所述聯(lián)合混合物以包含每日多于一個單位劑量的單位劑量形式施用。
16.通過減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生而用于治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的聯(lián)合混合物，其包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。
17.通過減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生而用于治療認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病的聯(lián)合混合物，其包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。
18.根據(jù)權(quán)利要求16或17的聯(lián)合混合物，其中所述認(rèn)知或神經(jīng)系統(tǒng)疾病為阿爾茨海默病。
19.根據(jù)權(quán)利要求16或17的聯(lián)合混合物，其中所述認(rèn)知和神經(jīng)系統(tǒng)疾病為肌萎縮側(cè)索硬化癥、輕度認(rèn)知障礙、帕金森病、具有與17號染色體連鎖之帕金森氏神經(jīng)機能障礙的額顳癡呆、皮克氏病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、進行性核上性麻痹、多發(fā)性硬化、腦脊髓炎和皮質(zhì)基底核退化。
20.根據(jù)權(quán)利要求16的聯(lián)合混合物，其中減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，所述認(rèn)知癥狀選自記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、 無力自我照顧及其組合。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的聯(lián)合混合物，其中減少Aβ斑塊前體部分的發(fā)生導(dǎo)致一種或多種認(rèn)知癥狀的改善，所述認(rèn)知癥狀選自記憶喪失、人格改變、焦慮、定向障礙、協(xié)調(diào)性喪失、 無力自我照顧及其組合。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的聯(lián)合混合物，其中減少Aβ斑塊前體部分的發(fā)生導(dǎo)致Αβ斑塊發(fā)生的減少。
23.根據(jù)權(quán)利要求17的聯(lián)合混合物，其中所述Αβ斑塊前體部分選自Αβ42、C99、 Αβ*56及其組合。
24.根據(jù)權(quán)利要求17的聯(lián)合混合物，其中所述Αβ斑塊前體部分為低分子量寡聚化 A β 種類 Αβ*56。
25.根據(jù)權(quán)利要求16的聯(lián)合混合物，其中tau蛋白過磷酸化包括在tau蛋白231位蘇氨酸上的磷酸化。
26.根據(jù)權(quán)利要求16-25中任一項的聯(lián)合混合物，其中配制所述聯(lián)合混合物以提供每日劑量，其包含至少約1080mg姜黃素、至少約9mg胡椒堿、至少約MOmg表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及至少約450mg N-乙酰半胱氨酸，至少約90mg苯磷硫胺和至少約 270mg α -硫辛酸中一種或多種。
27.根據(jù)權(quán)利要求16-25中任一項的聯(lián)合混合物，其還包含一種或多種選自下列的成分提供每日劑量至少約90mg量的維生素B6 ； 提供每日劑量至少約315mg量的維生素E ； 提供每日劑量至少約180 μ g量的維生素B12 ； 提供每日劑量至少約720 μ g量的葉酸； 提供每日劑量至少約45mg量的維生素C ；及其組合。
28.根據(jù)權(quán)利要求16-25中任一項的聯(lián)合混合物，其還包含 提供每日劑量至少約450mg量的N-乙酰半胱氨酸； 提供每日劑量至少約270mg量的α-硫辛酸；提供每日劑量至少約90mg量的苯磷硫胺； 提供每日劑量至少約90mg量的維生素 ； 提供每日劑量至少約315mg量的維生素E ； 提供每日劑量至少約180 μ g量的維生素B12 ； 提供每日劑量至少約720 μ g量的葉酸；和提供每日劑量至少約45mg量的維生素C。
29.聯(lián)合混合物用于減少tau蛋白過磷酸化的發(fā)生的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α -硫辛酸中的一種或多種。
30.根據(jù)權(quán)利要求四的用途，其中tau蛋白過磷酸化包含tau蛋白在231位蘇氨酸的磷酸化。
31.聯(lián)合混合物用于減少Αβ斑塊前體部分的發(fā)生的用途，所述聯(lián)合混合物包含姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。
全文摘要
預(yù)防和治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病和認(rèn)知缺陷(即阿爾茨海默病(AD)、帕金森病、肌萎縮側(cè)索硬化癥、輕度認(rèn)知障礙和其他類型的癡呆)的制劑，包含治療有效量的姜黃素、胡椒堿、表沒食子兒茶素-3-沒食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate，EGCG)，以及N-乙酰半胱氨酸、苯磷硫胺和α-硫辛酸中的一種或多種。該聯(lián)合指向可導(dǎo)致神經(jīng)系統(tǒng)缺陷、退化和疾病的一些或全部通路。
文檔編號A61K31/353GK102271657SQ200980153795
公開日2011年12月7日 申請日期2009年6月3日 優(yōu)先權(quán)日2008年12月1日
發(fā)明者庫爾特·亨德里克斯 申請人:康可斯健康科學(xué)有限責(zé)任公司