專利名稱：：蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于藥物制劑的質(zhì)量控制
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
：蒼耳子鼻炎滴丸是根據(jù)蒼耳子鼻炎膠囊進(jìn)行改劑而來的新劑型藥物。蒼耳子鼻炎膠囊收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十四冊(cè)中，具有疏風(fēng)、清肺熱、通鼻窮、止頭痛的功效;用于風(fēng)熱型鼻疾，包括急、慢性鼻炎，鼻竇炎，過敏性鼻炎等。蒼耳子鼻炎膠囊是以蒼耳子浸膏粉180g、石膏浸膏粉l.76g、白芷浸膏粉62.lg、冰片30g、辛夷花揮發(fā)油4ml、薄荷腦15g、辛夷花浸膏粉72.2g、黃芩浸膏粉25.3g為原料制得的膠囊制劑，其制備方法為除辛夷花揮發(fā)油外，冰片、薄荷腦與適量淀粉混合，研成細(xì)粉，與上述各浸膏粉混合，噴入辛夷花揮發(fā)油，充分混勻，過篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得。通過發(fā)明人改劑后的蒼耳子鼻炎滴丸，是以蒼耳子油2.14g、石膏浸膏粉O.125g、白芷浸膏粉2.98g、冰片2.14g、辛夷揮發(fā)油0.29ml、薄荷腦l.07g、辛夷浸膏粉3.44g、黃芩浸膏粉1.81g為原料制得的滴丸制劑，其制備方法為取聚乙二醇600028.66g，加熱使熔融，加入冰片、薄荷腦至全溶，再加入各藥物浸膏粉、蒼耳子油和辛夷揮發(fā)油，攪拌、混勻，滴入冷卻劑甲基硅油中，制成1000丸，包薄膜衣，即得。上述蒼耳子鼻炎滴丸的配方中各種浸膏粉或揮發(fā)油的制備方法分別如下1.黃芩浸膏粉取黃芩加8倍量水煎煮二次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度l.13-1.15(75-85。C測定)，用鹽酸調(diào)pH值至1-2，于8(TC保溫1小時(shí)，靜置，濾過，沉淀物用水洗至中性，在6(TC烘干，粉碎，過六號(hào)篩，即得黃芩浸膏粉。2.蒼耳子油取蒼耳子粉碎成粗粉，加入5倍量的乙醇回流提取二次，每次2小時(shí)，濾過，合并濾液，回收乙醇，加10倍量水?dāng)嚢?，靜置后取油層，即得蒼耳子油。3.辛夷揮發(fā)油和辛夷浸膏粉取辛夷置揮發(fā)油提取器中加入10倍量水提取揮發(fā)油3小時(shí)，將揮發(fā)油另器保存(即得辛夷揮發(fā)油)。殘?jiān)?倍量水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，濾過，濾液濃縮干燥(60-8CTC)，粉碎，過六號(hào)篩，即得辛夷浸膏粉。4.白芷浸膏粉將白芷加8倍量水煎煮二次，每次1.5小時(shí)，靜置，濾過，合并濾液，濃縮至相對(duì)密度1.23-1.25(75-85。C測定)，加乙醇使含醇量達(dá)45%，混勻，靜置過夜，取上清液回收乙醇，濃縮干燥(60-8CTC)，粉碎，過六號(hào)篩，即得白芷浸膏粉。5.石膏浸膏粉將石膏加8倍量水煎煮二次，每次2小時(shí)，靜置，濾過，濾液濃縮干燥(60-8CTC)，粉碎，過六號(hào)篩，即得石膏浸膏粉。藥典中記載蒼耳子鼻炎膠囊的質(zhì)量控制方法中，除應(yīng)符合膠囊劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定外，只對(duì)黃芩、白芷、辛夷花、蒼耳子、冰片等五味進(jìn)行了薄層色譜定性鑒別，卻沒有任何含量測定指標(biāo)。作為其改劑產(chǎn)品的蒼耳子鼻炎滴丸，通常情況下，可參考原劑型的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。但是，由于藥品質(zhì)量問題與人類健康緊密相關(guān)，如今對(duì)藥品質(zhì)量控制的要求也越來越高，安全和療效同等重要；很顯然，原來僅限于薄層色譜定性鑒別的蒼耳子鼻炎膠囊的質(zhì)量控制方法對(duì)于蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制是不夠準(zhǔn)確可靠的，不符合現(xiàn)代醫(yī)藥發(fā)展的需要，有待于進(jìn)一步提高。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的主要目的是提供一種蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，在原劑型藥物蒼耳子鼻炎膠囊只進(jìn)行薄層色譜定性鑒別的基礎(chǔ)上，增加含量測定方法及相應(yīng)的含量指標(biāo)，使蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制準(zhǔn)確有效，從而更有利于確保其臨床療效的發(fā)揮。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，采用高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)對(duì)黃芩苷(CnH^On)進(jìn)行含量測定，確定相應(yīng)的含量指標(biāo)；相關(guān)條件及操作方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；體積比為47:53:0.2的甲醇-水-磷酸溶液為流動(dòng)相，流速lml/min;檢測波長為280nm;柱溫4(TC。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2500。對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對(duì)照品適量，加30-70%甲醇(指甲醇水溶液，體積百分比，下同)制成每lml含黃芩苷約40-50yg的溶液，即得。供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密稱定，置50ml量瓶中，加30-70%甲醇30-50ml，超聲處理或加熱回流提取30-60分鐘，放冷，加入同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，加入同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，根據(jù)測定結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，即得蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷的含量。蒼耳子鼻炎滴丸中，含黃芩苷(CnH^0n)重量百分比為1.86-4.79%。除對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測定外，還可對(duì)原料藥材黃芩、白芷、辛夷、蒼耳子、冰片等五味進(jìn)行薄層色譜(TLC)定性鑒別，操作方法分別如下(1)、黃芩和白芷TLC鑒別:A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸5g，加質(zhì)量百分比濃度為9.5-10.5。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取l小時(shí)，放冷，濾過，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，水溶液備用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，揮干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液I;B、對(duì)照藥材溶液的制備取黃芩對(duì)照藥材、白芷對(duì)照藥材各lg，同供試品溶液制備方法制成黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液；C、薄層鑒別照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB，下同)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液I、黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:3:1:2，體積比，下同)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與白芷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；再噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與黃芩對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(2)、辛夷TLC鑒別A、供試品溶液的制備取"(1)、黃芩和白芷TLC鑒別"制備供試品溶液時(shí)的備用水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液濃縮至2ml，作為供試品溶液II;B、對(duì)照藥材溶液的制備取辛夷對(duì)照藥材lg，磨碎，加質(zhì)量百分比濃度為9.5-10.5。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取1小時(shí)，放冷，濾過，取濾液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供試品溶液制備方法制成辛夷對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液II和辛夷對(duì)照藥材溶液各10y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(8:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；供試品色譜中，在與辛夷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(3)、蒼耳子TLC鑒別A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸4g，置錐形瓶中，加10X氫氧化鈉液20ml，加熱回流提取l小時(shí)，濾過，濾液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并濃縮至2ml，作為供試品溶液m;B、對(duì)照藥材溶液的制備取蒼耳子對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成蒼耳子對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液m和蒼耳子對(duì)照藥材溶液各10y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(16:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏5-10分鐘；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(4)、冰片TLC鑒別A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸O.2-0.25g，加乙醇3ml，超聲提取5分鐘，取出，靜置，取上清液作為供試品溶液IV;B、對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作為冰片對(duì)照品溶液；C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液IV和冰片對(duì)照品溶液各5y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-三氯甲烷(15:2:6)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。蒼耳子鼻炎滴丸的各原料藥材中蒼耳子含蒼耳苷(Xanthostrumarin)等苷類；白芷含歐前胡素、異歐前胡素、佛手柑內(nèi)酯等香豆素類；辛夷含枸緣醛、丁香油酚等；黃芩含黃芩苷、黃芩素等黃酮類化合物；石膏主要成分為含水硫酸鈣；冰片主要成分是龍腦；薄荷腦主要成分即為薄荷腦。通過逐一分析比較及探索性的試驗(yàn)研究，本發(fā)明初步篩選出擬對(duì)黃芩提取物中的主要有效成分黃芩苷進(jìn)行含量測定。再通過大量文獻(xiàn)分析及試驗(yàn)研究，進(jìn)一步從薄層層析-紫外分光光度法、薄層掃描法、高效液相色譜法、超臨界流體層析法、膠束動(dòng)電層析法等黃芩苷的含量測定方法中進(jìn)行篩選，最終確定了以高效液相色譜法對(duì)黃芩提取物中主要有效成分黃芩苷進(jìn)行含量測定。為了盡可能準(zhǔn)確的測定出黃芩苷在蒼耳子鼻炎滴丸中的含量，從而更精確的控制藥物質(zhì)量，保證藥物的臨床療效，發(fā)明人對(duì)藥物的前處理方法及色譜條件等進(jìn)行了大量的試驗(yàn)研究及對(duì)比分析，現(xiàn)將一些主要的研究情況略舉如下(1)儀器與試藥高效液相色譜儀日本島津LC-10AT;SPD-10AVP紫外檢測器；LC2000數(shù)據(jù)工作站(中國科學(xué)院成都分院);Kromasilds柱(4.6X250mm，5ym);3200超聲波清洗機(jī)(昆山市超聲儀器有限公司)。黃芩苷對(duì)照品(中國藥品生物制品檢定所，批號(hào)715-200211)。(2)色譜條件及系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)色譜條件的選擇最終選定流動(dòng)相甲醇-水-磷酸(47:53:0.2，體積比)；波長280nm，柱溫40。C，流量1.Oml/min。色譜柱的選擇Kromasilds柱(4.6X250mm，5ym)進(jìn)行分析的分離效果最好，理論塔板數(shù)高。(3)對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對(duì)照品11.2mg，置50ml量瓶中，以50%甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為貯備液(224yg/ml)。精密吸取貯備液2ml，轉(zhuǎn)移至10ml量瓶中，以50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得每lml含黃芩苷44.8yg的對(duì)照品溶液。(4)提取條件的考察通過對(duì)藥典中含有黃芩的制劑(包括黃芩藥材)含量測定項(xiàng)下的供試品溶液制備方法進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)一般采用甲醇、50%甲醇、乙醇、70%乙醇進(jìn)行提??；但是，由于不同制劑不同輔料可能對(duì)提取效果產(chǎn)生某些不定的影響，其適宜于茉一特定藥物制劑的提取溶劑也不能任意選擇。因此，為了找到適合蒼耳子鼻炎滴丸的提取溶劑，發(fā)明人對(duì)上述四種溶劑的提取效果進(jìn)行了比較，并研究了不同溶劑提取、提取方式和提取時(shí)間等因素對(duì)提取效果的影響。①提取溶劑的考察取蒼耳子鼻炎滴丸樣品(批號(hào)小試041101)約0.5g，共4份，精密稱定，置50ml量瓶中，分別加入50%甲醇、甲醇、乙醇、70。/。乙醇各45ml，超聲處理(功率不低于150W)30分鐘，用相應(yīng)溶劑稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，用相應(yīng)溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得四種不同溶劑的樣品溶液。及對(duì)照品溶液各10yl，注入高效液相色譜儀，測定，結(jié)果見下述表l。表l不同溶劑提取樣品中黃芩苷含量提取溶劑樣品中黃芩苷含量(mg/g)50%甲醇41.32甲醇33.3870%乙醇39.13乙醇37.13以上結(jié)果表明，以50%甲醇、70%乙醇溶液作為溶劑提取效果較好，尤以50%甲醇更好。②不同濃度溶劑的提取考察取蒼耳子鼻炎滴丸樣品(批號(hào)小試041101)約0.5g，共2份，分別精密稱定，置250ml圓底燒瓶中，精密加入30%、70。/。甲醇各50ml，稱定重量，超聲處理(功率不低于150W)30分鐘，放置至室溫，再稱定重量，用相同溶劑補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，用相同溶劑稀釋至刻度，搖勻，即得樣品溶液。精密吸取上述樣品溶液及對(duì)照品溶液各10yl，注入高效液相色譜儀，測定，與50%甲醇提取的結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果見下述表2。表2不同濃度溶劑提取的樣品中黃芩苷含量提取方法30%甲醇70%甲醇50%甲醇黃芩苷含量(mg/g)40.9741.0841.32^以上結(jié)果表明，用30%甲醇和70%甲醇溶劑提取的樣品，結(jié)果差異不大，都適用于樣品制備。③提取方式的考察取蒼耳子鼻炎滴丸樣品(批號(hào)小試041101)約O.5g，精密稱定，置250ml圓底燒瓶中，精密加入50。/。甲醇50ml，稱定重量，加熱回流提取30分鐘，放置至室溫，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得用加熱回流提取方式得到的樣品溶液。精密吸取上述樣品溶液及對(duì)照品溶液各10yl，注入高效液相色譜儀，測定，與超聲提取的結(jié)果進(jìn)行比較，結(jié)果見下述表3。表3不同提取方法樣品中黃芩苷含量<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>以上結(jié)果表明，兩種方法提取的樣品，結(jié)果差異不大，以超聲提取法操作更為方便。④提取時(shí)間的考察取蒼耳子鼻炎滴丸樣品約O.5g，共3份，精密稱定，置50ml量瓶中，加入50。/。甲醇45ml，分別超聲處理(功率不低于150W)20、40、60分鐘，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。精密取上述溶液和對(duì)照品溶液10yl，注入高效液相色譜儀，用正文方法測定，結(jié)果見下述表4。表4提取時(shí)間的考察試驗(yàn)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>提取30min后含量基本穩(wěn)定，綜合考慮，可選擇提取時(shí)間為30-60min。綜上所述，蒼耳子鼻炎滴丸供試品溶液的制備方法為取蒼耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密稱定，置50ml量瓶中，加入30-70。/。甲醇30-50ml，超聲處理30-60分鐘，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。下述試驗(yàn)中采用的供試品溶液制備方法為取蒼耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，取O.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，力n50。/。甲醇45ml，超聲處理(功率250W，頻率50KHz)30分鐘，放冷，用50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，離心，即得。⑤精密度實(shí)驗(yàn)精密吸取黃芩苷對(duì)照品溶液(44.8yg/ml)10yl，注入液相色譜儀，按前述色譜條件進(jìn)行分析，重復(fù)測定5次，測定峰面積，結(jié)果見下述表5。表5精密度試驗(yàn)結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>由表5可見，黃芩苷對(duì)照品峰面積的RSD〈2"/。，精密度良好。⑥重復(fù)性試驗(yàn)取蒼耳子鼻炎滴丸(批號(hào)小試0411Q1)平行6次試驗(yàn)，按前述方法分別制備樣品供試品溶液與對(duì)照品溶液，并進(jìn)行含量測定，結(jié)果下述表6。表6重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果次數(shù)I^^^^^平均值RSD(%)^黃苳苷含量(mg/g)^41.2641.83^40.53^41.24^40.8441.06^41.127IT(^由表6可見，黃芩苷含量平均值為41.127mg/g，RSD為1.07。/。，重復(fù)性好。⑦供試品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)取蒼耳子鼻炎滴丸供試品溶液，分別在第0、2、4、6、8小時(shí)進(jìn)樣，每次10ul，記錄峰面積積分值，結(jié)果見下述表7。表7樣品溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果時(shí)間(h)02468RSD(%)峰面積積分值279094027723802791679281282927991790.79由表7可見，RSD為0.79%，表明供試品溶液中黃芩苷在8小時(shí)內(nèi)測定有良好穩(wěn)定性。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是本發(fā)明提供了蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷的含量測定方法，并采用更適用于蒼耳子鼻炎滴丸的樣品處理方法(供試品溶液的制備方法)，使蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制更為準(zhǔn)確有效，從而更有利于確保其臨床療效的發(fā)揮；并且該含量測定方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性等良好。進(jìn)一步提供的黃芩苷含量指標(biāo)及薄層色譜鑒定方法等，可進(jìn)一步提高蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量可控性。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述。但不應(yīng)將此理解為本發(fā)明上述主題的范圍僅限于下述實(shí)施例。實(shí)施例l本實(shí)施例為采用本發(fā)明方法對(duì)10批蒼耳子鼻炎滴丸(批號(hào)041201、041202、041203、041204、041205、041206、041207、041208、041209、041210，均由四川禾邦陽光制藥股份有限公司提供)進(jìn)行黃芩苷含量測定，具體方法如下色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-水-磷酸(47:53:0.2，體積比)溶液為流動(dòng)相，流速lml/min;檢測波長為280nm;柱溫4CTC。理論板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算不低于2500。對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對(duì)照品適量，力陽0%甲醇制成每11111含黃芩苷約45yg的溶液，即得。供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸O.4-0.6g，精密稱定，置50ml量瓶中，力陽0%甲醇45ml，超聲處理(功率160W，頻率50KHz)30分鐘，放冷，力陽0%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取lml續(xù)濾液，置10ml量瓶中，力陽0%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，根據(jù)測定結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，即得蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷(CnH^On)的含量，結(jié)果見下述表8。表8樣品中黃芩苷含量測定結(jié)果表IPI黃芩苷含量(mg/丸)平均值(mg/丸)0412011.541.531.540412021.731.751.740412031.851.891.870412042.032.092.060412051.942.011.980412061.471.481.480412071.421.471.450412081.831.841.840412091.391.391.390412100.910.870.89實(shí)施例2本實(shí)施例為采用本發(fā)明方法對(duì)10批蒼耳子鼻炎滴丸(批號(hào)041201、041202、041203、041204、041205、041206、041207、041208、041209、041210，均由四川禾邦陽光制藥股份有限公司提供)進(jìn)行TLC鑒別，具體方法如下(1)、黃芩和白芷TLC鑒別:A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸5g，加質(zhì)量百分比濃度為10。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取l小時(shí)，放冷，濾過，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，水溶液備用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，揮干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液I;另取缺黃芩和白芷藥材的陰性樣品5g，同法制得陰性供試品溶液I;B、對(duì)照藥材溶液的制備取黃芩對(duì)照藥材、白芷對(duì)照藥材各lg，同供試品溶液制備方法制成黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液；C、薄層鑒別照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB，下同)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液I、陰性供試品溶液I、黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(10:3:1:2，體積比，下同)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；結(jié)果各批次供試品色譜中，在與白芷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；再噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，各批次供試品色譜中，在與黃芩對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性供試品色譜中無相應(yīng)的斑點(diǎn)。(2)、辛夷TLC鑒別A、供試品溶液的制備取"(1)、黃芩和白芷TLC鑒別"制備供試品溶液時(shí)的備用水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液濃縮至2ml，作為供試品溶液II;另取缺辛夷藥材的陰性樣品5g，同法制得陰性供試品溶液II;B、對(duì)照藥材溶液的制備取辛夷對(duì)照藥材lg，磨碎，加質(zhì)量百分比濃度為10。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取l小時(shí)，放冷，濾過，取濾液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供試品溶液制備方法制成辛夷對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液II、陰性供試品溶液II和辛夷對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(8:2:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈(365nm)下檢視；結(jié)果各批次供試品色譜中，在與辛夷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；陰性供試品色譜中無相應(yīng)的斑點(diǎn)。(3)、蒼耳子TLC鑒別A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸4g，置錐形瓶中，加10X氫氧化鈉液20ml，加熱回流提取l小時(shí)，濾過，濾液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并濃縮至2ml，作為供試品溶液m;另取缺蒼耳子藥材的陰性樣品4g，同法制得陰性供試品溶液m;B、對(duì)照藥材溶液的制備取蒼耳子對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成蒼耳子對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液m、陰性供試品溶液m和蒼耳子對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸(16:4:1)為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏5-10分鐘；結(jié)果各批次供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性供試品色譜中無相應(yīng)的斑點(diǎn)。(4)、冰片TLC鑒別A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸5丸(約0.215g)，加乙醇3ml，超聲提取5分鐘，取出，靜置，取上清液作為供試品溶液IV;另取缺冰片藥材的陰性樣品5丸，同法制得陰性供試品溶液IV;B、對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作為冰片對(duì)照品溶液；C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液IV、陰性供試品溶液IV和冰片對(duì)照品溶液各5yl，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)己烷-乙酸乙酯-三氯甲烷(15:2:6)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；結(jié)果各批次供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，均顯相同顏色的斑點(diǎn)；陰性供試品色譜中無相應(yīng)的斑點(diǎn)。權(quán)利要求1.蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于采用高效液相色譜法對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測定，相關(guān)條件及操作方法如下色譜條件用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；體積比為47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸溶液為流動(dòng)相，流速1ml/min；檢測波長為280nm；柱溫40℃；對(duì)照品溶液的制備精密稱取黃芩苷對(duì)照品，加30-70％甲醇制成每1ml含黃芩苷40-50μg的溶液，即得；供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸0.4-0.6g，精密稱定，置50ml量瓶中，加30-70％甲醇30-50ml，超聲處理或加熱回流提取30-60分鐘，放冷，用同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加入同濃度甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得；測定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，記錄色譜圖，根據(jù)測定結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，即得蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷的含量。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于所述的蒼耳子鼻炎滴丸中，黃芩苷的重量百分含量為l.86-4.79%。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于還進(jìn)行黃芩和白芷TLC鑒別，操作方法如下A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸5g，加質(zhì)量百分比濃度為9.5-10.5。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取l小時(shí)，放冷，濾過，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，水溶液備用，合并乙醚提取液，用水洗至中性，揮干，殘?jiān)右掖糽ml使溶解，作為供試品溶液I;B、對(duì)照藥材溶液的制備取黃芩對(duì)照藥材、白芷對(duì)照藥材各lg，同供試品溶液制備方法制成黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液；C、薄層鑒別吸取上述供試品溶液I、黃芩對(duì)照藥材溶液和白芷對(duì)照藥材溶液各10ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為10:3:l:2的甲苯-乙酸乙酉^甲醇-甲酸溶液為展開齊lJ，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與白芷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；再噴以2%三氯化鐵乙醇溶液，供試品色譜中，在與黃芩對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。4根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于還進(jìn)行辛夷TLC鑒別，操作方法如下A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸5g，加質(zhì)量百分比濃度為9.5-10.5。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取l小時(shí)，放冷，濾過，濾液用乙醚振搖提取2次，每次20ml，合并水溶液，用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，乙酸乙酯提取液濃縮至2ml，作為供試品溶液II;B、對(duì)照藥材溶液的制備取辛夷對(duì)照藥材lg，磨碎，加質(zhì)量百分比濃度為9.5-10.5。/。的稀鹽酸20ml，加熱回流提取1小時(shí)，放冷，濾過，取濾液，自"用乙酸乙酯提取2次"起，同供試品溶液制備方法制成辛夷對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液II和辛夷對(duì)照藥材溶液各10y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為8:2:l的甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈365nm下檢視；供試品色譜中，在與辛夷對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。5根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于還進(jìn)行蒼耳子TLC鑒別，操作方法如下A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸4g，置錐形瓶中，加10X氫氧化鈉液20ml，加熱回流提取l小時(shí)，濾過，濾液用乙酸乙酯提取2次，每次20ml，合并乙酸乙酯提取液，用水洗至中性，回收乙酸乙酯并濃縮至2ml，作為供試品溶液m;B、對(duì)照藥材溶液的制備取蒼耳子對(duì)照藥材lg，同供試品溶液制備方法制成蒼耳子對(duì)照藥材溶液。C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液m和蒼耳子對(duì)照藥材溶液各10y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為16:4:l的甲苯-乙酸乙酯-冰乙酸溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置碘蒸氣中熏5-10分鐘；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。6根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，其特征在于還進(jìn)行冰片TLC鑒別，操作方法如下A、供試品溶液的制備取蒼耳子鼻炎滴丸O.2-0.25g，加乙醇3ml，超聲提取5分鐘，取出，靜置，取上清液作為供試品溶液IV;B、對(duì)照品溶液的制備取冰片對(duì)照品，加乙醇制成每lml含10mg的溶液，作為冰片對(duì)照品溶液；C、薄層鑒別照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液IV和冰片對(duì)照品溶液各5y1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以體積比為15:2:6的環(huán)己烷-乙酸乙酉^三氯甲烷溶液為展開齊IJ，展開，取出，晾干，噴以5%磷鉬酸乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。全文摘要本發(fā)明公開了一種蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制方法，采用高效液相色譜法對(duì)黃芩苷進(jìn)行含量測定，用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；體積比為47∶53∶0.2的甲醇-水-磷酸溶液為流動(dòng)相，流速1ml/min；檢測波長為280nm；柱溫40℃；分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液，注入液相色譜儀，測定，根據(jù)測定結(jié)果進(jìn)行計(jì)算，即得蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷的含量。該質(zhì)量控制方法提供了蒼耳子鼻炎滴丸中黃芩苷的含量測定方法，使蒼耳子鼻炎滴丸的質(zhì)量控制更為準(zhǔn)確有效，從而更有利于確保其臨床療效的發(fā)揮；并且該含量測定方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確，精密度、重復(fù)性、穩(wěn)定性等良好。文檔編號(hào)A61K36/185GK101647863SQ20091030629公開日2010年2月17日申請(qǐng)日期2009年8月28日優(yōu)先權(quán)日2009年8月28日發(fā)明者伍江蓉,劉文旭,波宋,悅張,華肖申請(qǐng)人:四川禾邦陽光制藥股份有限公司