專利名稱：：鼠婦提取物的制備方法及其在消炎鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于含有不分明結(jié)構(gòu)的醫(yī)用配制品
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及到來源于動(dòng)物。
背景技術(shù)：
：自2001年1月1日起，疼痛被確認(rèn)為繼呼吸、脈搏、體溫和血壓之后的"人類第五大生命指征"，尤其是癌性疼痛是中晚期腫瘤患者常見癥狀，直接影響患者生存質(zhì)量。根據(jù)世界衛(wèi)生組織癌癥疼痛控制方案推行的經(jīng)驗(yàn)，只要通過充分的評(píng)估證明治療正確，加之恰當(dāng)?shù)乃幬?，合適的劑量，適時(shí)的間隔，90%以上的疼痛是完全可以控制的。目前應(yīng)用的鎮(zhèn)痛藥，美國食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)發(fā)布非甾體抗炎止痛藥，常用的有阿司匹林、布洛芬等。止痛作用比較弱，用于一般常見的疼痛等非甾體消炎藥均有潛在的心血管風(fēng)險(xiǎn)；以嗎啡、杜冷丁等阿片類藥為代表的麻醉性止痛藥，這類藥物止痛作用很強(qiáng)，但長期使用會(huì)成癮。人工合成的中樞性止痛藥，屬于二類精神藥品，非麻醉性止痛藥有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛作用，但都有明顯的副作用。這類藥物有嚴(yán)格的管理制度，不能隨便使用，因此研究出無成癮性、低毒副作用、鎮(zhèn)痛效果明顯的中藥制劑是熱點(diǎn)課題。鼠婦屬節(jié)肢動(dòng)物門、甲殼綱、軟甲亞綱、等足目，潮蟲亞目的動(dòng)物，是小型陸生的甲殼綱動(dòng)物，也叫潮濕蟲、潮蟲、鼠負(fù)、負(fù)蟠、鼠姑、鼠粘，濕生蟲、地雞，地虱、地虱婆、西瓜蟲、團(tuán)子蟲等。鼠婦是干燥蟲體，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，是治療多種疾病的重要藥物之一。鼠婦具有破瘀，利水，解毒，止痛，用于久瘧瘧母，經(jīng)閉癥瘕，小便不通，驚風(fēng)撮口，鵝口瘡，牙痛等(山東省中藥材標(biāo)準(zhǔn)2002年版)。目前多有鎮(zhèn)痛的中藥成分中含有鼠婦治療中重度癌痛、牙痛及消瘀、骨剌、皮膚病等應(yīng)用的報(bào)道。但多以傳統(tǒng)方劑居多，用于鎮(zhèn)痛的中藥方劑中含有鼠婦。應(yīng)用本方法提取鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊及制劑的制備研究未見報(bào)道。并首次發(fā)現(xiàn)鼠婦具有較強(qiáng)的消炎作用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的一個(gè)技術(shù)問題在于提供一種鼠婦提取物的制備方法。本發(fā)明所要解決的另一個(gè)技術(shù)問題在于為鼠婦提取物提供一種用途。解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是鼠婦提取物的制備方法是由下述步驟組成1、將鼠婦用IO倍量的水浸泡1小時(shí)后，加熱回流提取3次，分別為1.5、1、1小時(shí)。2、合并步驟1提取液，濾過，-0.07-0.08Mpa減壓濃縮至相對(duì)密度為1.031.18(60°C)的浸膏，傾出，放涼。3、將上述浸膏加乙醇使含醇量達(dá)70%85%，靜置1224小時(shí)。4、取上清液，-0.07-0.08Mpa減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.051.15(60°C)的浸膏。5、加入等體積的乙酸乙酯萃取35次，并萃取液，混勻后減壓、干燥，制成干浸膏，得鼠婦提取物。在本發(fā)明的步驟2中，合并步驟1提取液，濾過，-O.07-0.08Mpa減壓濃縮至優(yōu)選相對(duì)密度為1.051.15(60°C)的浸膏，傾出，放涼。在步驟3中，將步驟2制備的浸膏加乙醇使含醇量優(yōu)選達(dá)75%85%，靜置1224小時(shí)。在本發(fā)明的步驟2中，合并步驟1提取液，濾過，-O.07-0.08Mpa減壓濃縮至最佳相對(duì)密度為(60°C)1.15的浸膏，傾出，放涼。在步驟3中，將步驟2制備的浸膏加乙醇使含醇量最佳達(dá)85%，靜置1224小時(shí)。在步驟4中，取上清液，-0.07-0.08Mpa減壓回收乙醇，濃縮至最佳相對(duì)密度為1.08(60°C)的浸膏。鼠婦提取物在制備消炎鎮(zhèn)痛口服藥物中的應(yīng)用。有效成分鼠婦提取物制備在消炎鎮(zhèn)痛藥物用常規(guī)藥用膠囊劑和片劑的形式來使用。所述的常規(guī)藥用膠囊劑和片劑均含作為活性成分的鼠婦提取物與藥學(xué)上可接受的載體如適宜于胃腸內(nèi)給藥的有機(jī)或無機(jī)的固體或液體賦形劑混合。采用活性成分鼠婦提取物制備成膠囊劑、片劑，成人口服，常用劑量一次56mg。1日3次共168mg，溫水吞服，兒童用藥酌情減量。采用本發(fā)明得到的鼠婦提取物制備的膠囊劑經(jīng)過主要藥效學(xué)、急性毒性、成癮性實(shí)驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明鼠婦提取物制備的膠囊劑對(duì)大鼠慢性炎性機(jī)械痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，對(duì)大鼠慢性炎性熱痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用；鼠婦提取物制備的膠囊劑經(jīng)急性毒性試驗(yàn)，劑量相當(dāng)于人臨床擬用劑量的462.5倍，無明顯中毒反應(yīng)發(fā)生；鼠婦提取物制備的膠囊劑經(jīng)抗炎與改善血漿黏度實(shí)驗(yàn)，可顯著抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎性腫脹程度，12mg/kg劑量對(duì)血淤大鼠血槳黏度的抑制與阿司匹林(300mg/kg)相當(dāng)，48mg/kg劑量對(duì)血淤大鼠血漿黏度的抑制作用強(qiáng)于阿司匹林(300mg/kg)。具體實(shí)施方法下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步詳細(xì)說明，但本發(fā)明不限于這些實(shí)施例。實(shí)施例1以中藥原料鼠婦100g為例，鼠婦提取物的制備方法如下1、取鼠婦100g，加1000g水浸泡1小時(shí)后，加熱回流提取3次，每次加水1000g，分別提取1.5、1、1小時(shí)。2、合并上述提取液，濾過，減壓(-0.07-0.08Mpa)濃縮至相對(duì)密度為1.031.20(60°C)的浸膏，傾出，放涼。3、將上述浸膏加乙醇使含醇量達(dá)70%85%，靜置1224小時(shí)。4、取上清液，減壓(-0.07-0.08Mpa)回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.051.15(60°C)的浸膏。5、加入等體積的乙酸乙酯萃取35次，合并萃取液，混勻后減壓、干燥，制成干浸膏，得鼠婦提取物。實(shí)施例2以中藥原料鼠婦100g為例，鼠婦提取物的制備方法如下在本發(fā)明的步驟2中，合并步驟1提取液，濾過，-0.07-0.08Mpa減壓濃縮至相對(duì)密度為(6(TC)1.03的浸膏，傾出，放涼。在步驟3中，將步驟2制備的浸膏加乙醇使含醇量達(dá)70%，靜置1224小時(shí)。在步驟4中，取上清液，-0.07-0.08Mpa減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.05(60°C)的浸膏。其它步驟與實(shí)施例l相同。制備成鼠婦提取物。實(shí)施例3以中藥原料鼠婦100g為例，鼠婦提取物的制備方法如下在本發(fā)明的步驟2中，合并步驟1提取液，濾過，-0.07-0.08Mpa減壓濃縮至相對(duì)密度為(60°C)1.18的浸膏，傾出，放涼。在步驟3中，將步驟2制備的浸膏加乙醇使含醇量達(dá)85%，靜置1224小時(shí)。在步驟4中，取上清液，-0.07-0.08Mpa減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.15(60°C)的浸膏。其它步驟與實(shí)施例l相同。制備成鼠婦提取物。實(shí)施例4以生產(chǎn)鼠婦提取物膠囊制劑1000粒為例所用的鼠婦提取物和輔料及其配比如下鼠婦提取物28g微晶纖維素73.5g氫氧化鋁凝膠粉49g硬脂酸鎂2.24g可溶性淀粉226g制備方法為將鼠婦提取物干浸膏加入質(zhì)量濃度為95%的乙醇至其溶解，得樣品醇溶液；加入微晶纖維素、氫氧化鋁凝膠粉、硬脂酸鎂及可溶性淀粉，混勻，制成軟材；過40目篩制粒，置鼓風(fēng)干燥箱于608(TC干燥，過40目篩整粒，裝入一號(hào)膠囊中，制成膠囊。每粒重0.226g，每粒含鼠婦提取物28mg。用法用量一次2粒，一日3次，溫水吞服。實(shí)施例5以生產(chǎn)鼠婦提取物片劑1000片為例所用的鼠婦提取物和輔料及其配比如下鼠婦提取物28g微晶纖維素73.5g氫氧化鋁凝膠粉49g硬脂酸鎂2.24g可溶性淀粉加至300g其制備方法按制劑學(xué)片劑的制備方法進(jìn)行，包衣所用原料以及原料配比按制劑學(xué)常規(guī)制備方法進(jìn)行。每片重0.3g，每片含鼠婦提取物28mg。用法用量口服，一次2片，一天3次，飯前服用。為了驗(yàn)證本發(fā)明藥物消炎鎮(zhèn)痛的治療效果，發(fā)明人采用本發(fā)明實(shí)施例1制備的鼠婦提取物并用該提取物制備成膠囊劑(試驗(yàn)時(shí)名稱為鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊)進(jìn)行了藥效學(xué)、急性毒性、成癮性實(shí)驗(yàn)，各種試驗(yàn)情況如下受試藥品鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊；生理鹽水；鹽酸嗎啡注射液，由沈陽第一制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)080403);鹽酸腎上腺素，由天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司生產(chǎn)，批號(hào)為0904041;肝素，由上海生化制藥廠生產(chǎn)，批號(hào)為080121，終濃度為200U/ml生理鹽水溶液；鹽酸納洛酮，由北京四環(huán)制藥有限公司，批號(hào)20081001，規(guī)格0.4mg/ml。實(shí)驗(yàn)儀器紅外全自動(dòng)甩尾儀，型號(hào)為YLS-12A，由山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)設(shè)備站生產(chǎn)；vonFrey纖維絲，由美國Stoelting公司生產(chǎn)；熱痛剌激儀，型號(hào)為BME2410A，由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；電子計(jì)時(shí)器，由陜西寶泰克公司生產(chǎn)；有機(jī)玻璃箱(22X12X22cm);7mm直徑打孔器；微量電子天秤，由日本島津生產(chǎn)；全自動(dòng)血液流變快測儀，型號(hào)為ZL9000C，由北京眾馳偉業(yè)科技發(fā)展有限公司生產(chǎn)；SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，由博易智訊(北京)信息技術(shù)有限公司提供。實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)價(jià)以下試驗(yàn)數(shù)據(jù)均采用oneiayAN0VA方差分析總體均數(shù)間差異，均數(shù)間多重比較采用Post-Hoc-TestsDunnett檢驗(yàn)。所有統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。—、主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重18-22g，合格證編號(hào)為SCXK(軍)2002-003雌雄各半；Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，體重180_220g，合格證編號(hào)為SCXK(軍)，2002-005。飼養(yǎng)條件每籠4只，飼養(yǎng)于空調(diào)恒溫室內(nèi)，室溫24±21:，濕度40%-60%，自動(dòng)控制晝夜各12小時(shí)。滅菌全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料(由第四軍醫(yī)大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心提供)喂養(yǎng)，自由飲用自來水。試驗(yàn)開始前飼養(yǎng)觀察1周，選擇健康無孕動(dòng)物用于試驗(yàn)。給藥方式口服灌胃給藥，每日上午9時(shí)和下午5時(shí)給藥2次，連續(xù)2天，于第3天上午末次給藥后30分鐘進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。1、慢性痛敏試驗(yàn)慢性炎性痛實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ蚐D大鼠60只，于第一日上午8-9時(shí)在大鼠左后足跖皮下注射1%角叉菜膠0.lml，隨后口服灌胃給藥，每日上午9時(shí)和下午5時(shí)給藥2次，連續(xù)2天，于第3天上午末次給藥后30分鐘進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將60只模型鼠隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半。分別為模型對(duì)照組，鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊初始劑量組、鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊小劑量組12mg/kg、鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊中劑量組24mg/kg、鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊大劑量組48mg/kg，嗎啡陽性對(duì)照組8mg/kg。(1)測定機(jī)械痛敏域值采用vonFrey纖維絲測定。有機(jī)玻璃箱(22X12X22cm)置于金屬篩網(wǎng)上，大鼠在其中適應(yīng)環(huán)境15分鐘，用vonFrey纖維細(xì)絲垂直剌激大鼠術(shù)側(cè)足底中部，持續(xù)時(shí)間不少于4秒，大鼠出現(xiàn)抬足或舔足行為視為陽性反應(yīng)，否則為陰性反應(yīng)。從最小折力開始測定，連續(xù)測定5次，每次剌激間隔30秒，5次當(dāng)中有3次或3次以上的陽性反應(yīng)視為有機(jī)械痛敏，以u(píng)p-down法推算50%縮足閾值。最大力度為15g，大于此值時(shí)記為15g。慢性炎癥大鼠機(jī)械痛敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表l。表1鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)慢性炎癥大鼠熱痛敏的影響(mean士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>由表1可見，除鼠婦膠囊初試劑量組外，其余三個(gè)劑量組縮腿潛伏期與對(duì)照相比均顯著延長。表明鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑對(duì)大鼠慢性炎性機(jī)械痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，有效鎮(zhèn)痛劑量為12mg/kg、24mg/kg，、48mg/kg，鎮(zhèn)痛作用具呈劑量依賴性增加。(2)測定熱縮腿潛伏期(thermalwithdrawallatency,TWL)將有機(jī)玻璃箱置于3mm厚的玻璃板上，按Hargreaves法用熱痛剌激儀照射大鼠足底，照射開始至出現(xiàn)抬腿回避時(shí)為TWL。自動(dòng)切斷時(shí)間為25秒，以防止組織損傷，熱剌激強(qiáng)度在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中維持一致。每只動(dòng)物測定5次，每次間隔5分鐘，取后3次平均值為大鼠TWL值。慢性炎癥大鼠熱剌痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。表2鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)慢性炎癥大鼠熱痛敏的影響(mean士SD，n=10)<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>由表2可見，除初試劑量組外，其余三個(gè)劑量組縮腿潛伏期與對(duì)照相比均顯著延長。表明鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)大鼠慢性炎性熱痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，有效鎮(zhèn)痛劑量為12mg/kg、24mg/kg、48mg/kg，鎮(zhèn)痛作用具呈劑量依賴性增加。2、抗炎與改善血漿黏度實(shí)驗(yàn)(1)鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響取昆明種小鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為5組，每組10只，即鹽水對(duì)照組、鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑12mg/kg、24mg/kg、48mg/kg劑量組、阿司匹林300mg/kg劑量組?？诜辔附o藥，每日上午9時(shí)和下午5時(shí)給藥2次。連續(xù)給藥3天，第4日上午末次灌胃給藥后30分鐘，所有小鼠用棉簽醮適量二甲苯(約0.lmL)涂于受試小鼠右耳前后兩面致炎。致炎4小時(shí)后，小鼠脫椎處死，沿耳廓基線剪下兩耳。用7mm直徑打孔器，分別在兩耳的同一部位打下左、右耳片。用微量電子天秤分別稱取和記錄左右兩片的重量，計(jì)算腫脹度和腫脹抑制率。抑制率(％)=(1-給藥組兩耳重量之差/對(duì)照組兩耳重量之差)X100%。實(shí)驗(yàn)和計(jì)算結(jié)果見表3。表3鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)二苯所致小鼠耳腫脹的影響(mean士SD)組另lj例數(shù)耳片腫脹值(mg)鹽水對(duì)照1012.4±1.9鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑12mg/kg1011.7±1.7鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑24mg/kg109.6±3.0*鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑48mg/kg105.6±3.0**阿司匹林300mg/kg105.6±3.3林T與鹽水對(duì)照組比較，*p<0.05，**p<0.01。由表3可見，鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊可顯著抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎性腫脹程度，有效劑量為12mg/kg、24mg/kg、48mg/kg，抗炎作用具呈劑量依賴性增加；大劑量抗炎作用與阿司匹林(300mg/kg)相當(dāng)。(2)鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊對(duì)血淤大鼠血液流變學(xué)的影響取SD大鼠60只，隨機(jī)分為6組，即正常對(duì)照組、模型組、鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑12mg/kg、24mg/kg、48mg/kg劑量組，阿司匹林300mg/kg劑量組，連續(xù)給藥14天，除正常對(duì)照組外，其余各組皮下注射0.1%的鹽酸腎上腺素0.08ml/100g體重共2次，間隔4小時(shí)，第一次注射腎上腺素后將大鼠浸人水溫為4t:的冰水中5分鐘，造成血瘀模型。于第14日晚8:00禁食，第15天上午末次給藥后1小時(shí)，乙醚麻醉大鼠，開腹，腹主動(dòng)脈取血4毫升迅速注入含肝素的抗凝管內(nèi)，搖勻靜置，用于檢測血流變學(xué)指標(biāo)，采用全自動(dòng)流變快測儀測定，先測定全血粘度后，將其低速離心(1500rmp離心10分鐘)分離出血漿，然后測血漿粘度。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表4表4鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑對(duì)血淤大鼠血液流變學(xué)的影響(mean士SD，n=10)組別低切(ls)中切(30s)高切(200s)血漿黏度正常對(duì)照組35.20±1.996.97±0.344.80±0.281.35±0.17模型組41.06±5.797.41±0.714.92±0.421.59±0.05鼠婦膠囊小劑量組35.08±3.297.ll士O.394.93±0.291.48±0.10*鼠婦膠囊中劑量組41.73±5.147.69±0.705.15±0.491.38±0.14**鼠婦膠囊大劑量組37.61±5.187.21±0.754.90±0.471.27±0.15*械阿司匹林300mg/kg35.15±2.91*6.27±0.50**4.14±0.44氺氺1.48±0.06**從表4中可見，鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑為12mg/kg、24mg/kg、48mg/kg劑量時(shí)，可顯著抑制血淤大鼠血漿黏度，但對(duì)全血黏度無顯著影響。鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑小劑量(12mg/kg)時(shí)對(duì)血淤大鼠血槳黏度的抑制與阿司匹林(300mg/kg)相當(dāng)；大劑量(48mg/kg)對(duì)血淤大鼠血漿黏度的抑制作用強(qiáng)于阿司匹林(300mg/kg)(p<0.05)。二、急性毒性試驗(yàn)8實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠24只，雌、雄各半，體重26-30g。動(dòng)物合格證號(hào)為陜醫(yī)動(dòng)字08-13。實(shí)驗(yàn)條件昆明種小鼠滅菌全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料喂食，分籠飼養(yǎng)于空調(diào)室內(nèi)，室溫23±2°〇(:，相對(duì)濕度50%60%，過濾送風(fēng)，光照12小時(shí)，自由飲用自來水。給藥前適應(yīng)性飼養(yǎng)三天。樣品含量鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑lg相當(dāng)于含生藥量37g貯存條件4t:避光保存，給藥前配制。溶劑生理鹽水。配制方法用0.9%生理鹽水溶解至所需濃度。1、急性毒性預(yù)試驗(yàn)取健康昆明種小鼠12只，雌雄各半，隨機(jī)分為3組，禁食12小時(shí)后分別灌胃給予0.2g/ml的鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑10、20、40ml/kg體重，給藥劑量為2、4、8g/kg，按生藥量計(jì)算為74g/kg、148g/kg、296g/kg，連續(xù)觀察48小時(shí)，未見明顯毒性反應(yīng)。以上結(jié)果提示，該藥的毒性較低，故進(jìn)行最大負(fù)荷量試驗(yàn)，設(shè)計(jì)最大給藥體積為小鼠灌胃40ml/kg，按制劑在生理鹽水中最大溶解能力0.25g/ml計(jì)算，最大負(fù)荷劑量為10g/kg，根據(jù)體表面積換算為人臨床用藥劑量的462.5倍。2、鼠婦鎮(zhèn)痛劑灌胃給藥最大耐受試驗(yàn)取健康小鼠24只，雌雄各半，禁食12小時(shí)，不禁水，按10g/kg的制劑劑量和40m1/kg的給藥體積灌胃給予鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑。灌胃后密切觀察小鼠的毒性反應(yīng)和死亡情況，4小時(shí)后，改為每天觀察一次，連續(xù)14天。灌胃給予鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑后，4小時(shí)內(nèi)未見明顯異常。14天內(nèi)，小鼠毛色光亮，飲食、尿便及行為活動(dòng)都與對(duì)照組無顯著差異。觀察結(jié)束時(shí)，脫頸處死動(dòng)物解剖，肉眼觀察心、肝、脾、肺、腎、睪丸、子宮等臟器，均未發(fā)現(xiàn)明顯病理變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果小鼠口服鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑，單次給藥劑量10g/kg，根據(jù)體表面積換算，該劑量相當(dāng)于人臨床擬用劑量的462.5倍，無明顯中毒反應(yīng)發(fā)生。三、成癮性實(shí)驗(yàn)樣品含量鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑lg制劑相當(dāng)于含生藥量37g貯存條件4t:避光保存，給藥前配制。溶劑生理鹽水。配制方法用0.9%生理鹽水溶解至所需濃度。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物昆明種小鼠，體重18-22g，雌雄各半(選擇健康雌性無孕動(dòng)物用于試驗(yàn))。合格證為SCXK(軍)2002-003，Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠，體重180-220g，合格證為SCXK(軍)，2002-005。實(shí)驗(yàn)條件每籠4只，飼養(yǎng)于空調(diào)恒溫室內(nèi)，室溫24±21:，濕度40%-60%，自動(dòng)控制晝夜各12小時(shí)。滅菌全價(jià)營養(yǎng)顆粒飼料(由第四軍醫(yī)大學(xué)試驗(yàn)動(dòng)物中心提供)喂養(yǎng)，自由飲用自來水。試驗(yàn)開始前飼養(yǎng)觀察1周，選擇健康雌性無孕動(dòng)物用于試驗(yàn)。表5鹽酸納洛酮催促后10分鐘內(nèi)小鼠跳躍次數(shù)組別例數(shù)跳躍次數(shù)鹽水對(duì)照組120.0±0.0鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑組120.0±0.0嗎啡組128.5±6.2承承表6鹽酸納洛酮催促后30分鐘，60分鐘小鼠體重降低值組別例數(shù)30分鐘體重降低(g)60分鐘體重降低(g)鹽水對(duì)照組120.65±0.300.97±0.35鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑組120.60±0.300.76±0.51嗎啡組121.1±0.17**1.24±0.21*2、大鼠條件性位置偏愛模型試驗(yàn)(精神依賴性試驗(yàn))SD大鼠，180-220g，雄性，隨機(jī)分為對(duì)照組、嗎啡組(10mg/kg，sc)和鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑組小劑量24mg/kg，大劑量48mg/kg(口服i.g.)，每組10只。試驗(yàn)分訓(xùn)練期和測試期，在訓(xùn)練期，以白盒為伴藥盒(生理鹽水lml/kg，sc;嗎啡10mg/kg，sc;凡痛定小劑量8g/kg，大劑量16g/kg，i.g.)，黑盒為非伴藥盒(生理鹽水0.8ml/100g，sc)，訓(xùn)練周期5天。每天上午進(jìn)行伴藥盒訓(xùn)練，下午進(jìn)行非伴藥盒訓(xùn)練，每次訓(xùn)練30分鐘。伴藥盒訓(xùn)練和非伴藥盒訓(xùn)練之間的間隔為5-6小時(shí)。連續(xù)訓(xùn)練5天，第6天進(jìn)行測試，將黑、白盒之間的門打開，將大鼠放入白盒內(nèi)，測定15分鐘內(nèi)大鼠在黑盒和白盒停留的時(shí)間，并計(jì)算出在白盒停留時(shí)間占黑白盒停留總時(shí)間的百分率和穿越次數(shù)。大鼠條件性位置偏愛模型試驗(yàn)鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑分為小劑量8g/kg和大劑量16g/kg(i.g.)，黑盒為非伴藥盒(生理鹽水0.8ml/100g，sc)，連續(xù)給藥訓(xùn)練周期為5天。第6天進(jìn)行測試，結(jié)果發(fā)現(xiàn)鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊小劑量組(8g/kg)和大劑量組(16g/kg)動(dòng)物在白10盒停留時(shí)間與對(duì)照組相比無顯著差別，而陽性嗎啡對(duì)照組動(dòng)物在白盒停留時(shí)間與對(duì)照組相比有顯著差異；各組動(dòng)物黑白盒間穿越次數(shù)無顯著差別。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表7。表7連續(xù)給藥后大鼠在伴藥盒內(nèi)停留時(shí)間<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)論連續(xù)口服治療劑量鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑未見軀體依賴性和精神依賴性，表明治療劑量鼠婦鎮(zhèn)痛膠囊制劑無成癮性。采用本發(fā)明制備的鼠婦提取物制成膠囊劑、片劑功能消炎鎮(zhèn)痛。規(guī)格膠囊劑每粒重O.226g，含鼠婦提取物28mg;片劑每片重O.3g，含鼠婦提取物28mg。用法用量溫水吞服，常用劑量膠囊劑一次2粒，一日3次；片劑一次2片，1日3次，兒童用藥酌情減量。權(quán)利要求一種鼠婦提取物的制備方法，其特征在于它是由下述步驟組成(1)將鼠婦用10倍量的水浸泡1小時(shí)后，加熱回流提取3次，分別為1.5、1、1小時(shí)；(2)合并上述提取液，濾過，-0.07～-0.08Mpa減壓60℃濃縮至相對(duì)密度為1.03～1.18的浸膏，傾出，放涼；(3)將上述浸膏加乙醇使含醇量達(dá)70％～85％，靜置12～24小時(shí)；(4)取上清液，-0.07～-0.08Mpa減壓回收乙醇，60℃濃縮至相對(duì)密度為1.05～1.15的浸膏；(5)加入等體積的乙酸乙酯萃取3～5次，合并萃取液，混勻后減壓、干燥，制成干浸膏，得鼠婦提取物。2.按照權(quán)利要求l所述的鼠婦提取物的制備方法，其特征在于在步驟(2)中，合并步驟(1)提取液，濾過，-0.07-0.08Mpa減壓6(TC濃縮至相對(duì)密度為1.051.15的浸膏，傾出，放涼；在步驟(3)中，將步驟(2)制備的浸膏加乙醇使含醇量達(dá)75%85%，靜置1224小時(shí)。3.按照權(quán)利要求l所述的鼠婦提取物的制備方法，其特征在于在步驟(2)中，合并步驟(1)提取液，濾過，-0.07-0.08Mpa減壓6(TC濃縮至相對(duì)密度為1.15的浸膏，傾出，放涼；在步驟(3)中，將步驟(2)制備的浸膏加乙醇使含醇量最佳達(dá)85%，靜置1224小時(shí)；在步驟(4)中，取上清液，-0.07-0.08Mpa減壓回收乙醇，6(TC濃縮至最佳相對(duì)密度為1.08的浸膏。4.鼠婦提取物在制備消炎鎮(zhèn)痛口服藥物中的用途。全文摘要一種鼠婦提取物的制備方法，將鼠婦用用水加熱回流提取、提取液減壓濃縮成浸膏、浸膏加乙醇提純、上清液減壓濃縮成浸膏、加入等體積的乙酸乙酯萃取3～5次減壓、干燥，制成干浸膏，得鼠婦提取物。鼠婦提取物在制備消炎鎮(zhèn)痛口服藥物中的用途。鼠婦提取物制備的膠囊劑經(jīng)過主要藥效學(xué)、急性毒性、成癮性實(shí)驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表明鼠婦提取物制備的膠囊劑對(duì)大鼠慢性炎性機(jī)械痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用，對(duì)大鼠慢性炎性熱痛敏具有顯著的鎮(zhèn)痛作用；無明顯中毒反應(yīng)發(fā)生；可顯著抑制二甲苯所致小鼠耳廓炎性腫脹程度，12mg/kg劑量對(duì)血淤大鼠血漿黏度的抑制與阿司匹林(300mg/kg)相當(dāng)，48mg/kg劑量對(duì)血淤大鼠血漿黏度的抑制作用強(qiáng)于阿司匹林(300mg/kg)。文檔編號(hào)A61P29/00GK101708190SQ200910219528公開日2010年5月19日申請(qǐng)日期2009年12月16日優(yōu)先權(quán)日2009年12月16日發(fā)明者姚敏娜,張偉,招明高,文愛東,楊建忠,樊代明,湯海峰,郭宏舉申請(qǐng)人:中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué);陜西三誠生物科技有限責(zé)任公司