專(zhuān)利名稱(chēng)：：治療糖尿病的鼻腔滴劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明是一種鼻腔滴劑及制備方法，尤其是一種含有艾塞那肽的治療糖尿病的鼻腔滴劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：糖尿病是一種常見(jiàn)的代謝性內(nèi)分泌疾病，因其發(fā)病率、死亡率、致殘率高，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康，而日益受到醫(yī)學(xué)界的廣泛關(guān)注。從臨床發(fā)病情況來(lái)看，其中絕大部分為n型糖尿病，其臨床癥狀是血和尿中的葡萄糖含量超出正常范圍。血糖水平主要受胰島素和胰高血糖素調(diào)節(jié)。胰高血糖素通過(guò)一系列反應(yīng)加快糖原分解。增加體內(nèi)葡萄糖濃度，相反胰島素則加快糖原合成，降低血糖濃度。在體內(nèi)，胰高血糖素首先合成前體物，經(jīng)翻譯加工后形成胰高血糖素樣肽GLP-l和GLP-2。其中GLP-1具有促進(jìn)胰臟中)3細(xì)胞增殖，刺激胰島素生成的生理功能。但是GLP-1在體內(nèi)會(huì)迅速被二肽基肽酶IV(dip印tidylp印tidaseIV，DPPIV)降解失活，其半衰期不足2分鐘。所以在臨床治療II型糖尿病方面不能充分發(fā)揮其應(yīng)有功能。1992年，科學(xué)家從美國(guó)西南部與墨西哥北部地區(qū)的希拉毒蜥(Helodermasuspectum)唾液中分離了天然肽(Exendin-4),exenatide為Exendin-4的人工合成物，其由39個(gè)氨基酸殘基組成(主要成分結(jié)構(gòu)His-Gly"Glu~Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu—Ser-Lys~Gln-Met"Glu"Glu一Glu-Ala-Val-ArgHLeu-Phe—Ile~Glu—Trp-Leu—Lys-Asn~Gly~Gly—Pro—Ser-Sei-Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser-NH2)，不僅與GLP—1具有相同功能，而且對(duì)DPPIV具有很高耐受性，成為具有廣闊應(yīng)用前景的治療II型糖尿病新藥。艾塞那肽(exenatide)已知的藥理作用包括l.顯著增加葡萄糖依賴性促胰島素分泌，在血糖水平正?；虻脱菚r(shí)不刺激胰島素的分泌。2.抑制II型糖尿病患者胰高血糖素分泌，并在高血糖時(shí)降低胰高血糖素濃度，但不減弱正常胰高血糖對(duì)低血糖的反應(yīng)。3.抑制就餐后胃腸道動(dòng)力及分泌功能，延遲胃排空，從而有利于就餐后的血糖控制。4.降低食欲，減少事物攝入。5.刺激p細(xì)胞增生或胚胎胰島素成熟分化，抑制p細(xì)胞凋亡，從而增加P細(xì)胞的數(shù)量。6.恢復(fù)II型糖尿病患者喪失的胰島素第一時(shí)相反應(yīng)，顯著增加第一時(shí)相及第二時(shí)相胰島素的分泌，改善n型糖尿病患者的空腹及就餐后血糖水平。在一項(xiàng)為期3O周的隨機(jī)雙盲安慰劑對(duì)照研究中，733例聯(lián)合使用二甲雙胍和磺酰脲類(lèi)藥物治療不理想的II型糖尿病患者[(HbA"的基線水平在(8.2±1.0%)]，首先2次/日皮下注射艾塞那肽5pg或安慰劑，二甲雙胍治療組仍維持原有劑量，磺酰脲類(lèi)治療組則隨機(jī)分成有效劑量(MAX)和最低推薦劑量(MIN)組。結(jié)果顯示治療30周時(shí)，患者HbA"顯著降低，療效與艾塞那肽有量效關(guān)系，且2個(gè)劑量給藥組患者體重均顯著減輕。目前已有公司將其開(kāi)發(fā)成注射劑型-艾塞那肽(exenatide，商品名Byetta)，能夠有效刺激胰島素分泌、抑制高血糖分泌和減緩胃排空速度，降低食欲，減少事物攝入和減輕體重，可以有效治療II型糖尿病，尤其用于改善和控制二甲雙胍和磺酰脲類(lèi)藥物治療不理想的n型糖尿病患者的治療。該藥獲得FDA批準(zhǔn)并已于2005年上市。但目前僅有此一種劑型上市銷(xiāo)售，給藥方式為為皮下注射。而皮下、肌肉注射造成的醫(yī)療事故是護(hù)理工作中的多發(fā)事故，主要表現(xiàn)形式有1.由于操作不熟練或病人緊張、不配合等造成的斷針。2.器械消毒不徹底、周?chē)h(huán)境污染、注射部位消毒不徹底等導(dǎo)致的注射部位化膿感染。3.注射操作不當(dāng)引發(fā)的神經(jīng)麻痹甚至致殘致死。且糖尿病為慢性疾病，需要長(zhǎng)期給藥，因此市售產(chǎn)品在使用過(guò)程中給患者帶來(lái)持續(xù)性痛苦、不便及安全隱患。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的的目的在于針對(duì)艾塞那肽(exenatide)作為皮下注射在治療糖尿病中存在的弊端，提供一種采用艾塞那肽(exenatide)的治療糖尿病的口服藥物及其制備方法。本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的一種治療糖尿病的鼻腔噴霧劑，包括溶劑和輔料，其特征在于溶劑中含有磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為110:0.1~10，溶劑中艾塞那肽的含量為0.01~0.5mg/ml，溶劑的pH=6~7。在本發(fā)明中磷酸鈣納米粒子由濃度為0.001-lmol/L的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液按照1~20:1~20:l-10的體積比混合后獲得。在本發(fā)明中所述的鈣鹽可以是硫酸鈣、氯化鈣等鈣鹽，所述的磷酸鹽可以是磷酸納、磷酸二氫納、磷酸氫二納、磷酸二氫銨、磷酸一氫鈉等磷酸鹽，所述的枸櫞酸鹽為枸櫞酸鉀、枸櫞酸鎂、枸櫞酸納等枸櫞酸鹽，所述的溶液為水性溶液。在本發(fā)明中所述的溶劑為注射用水，溶劑中添加水劑藥物常用的輔料。一種上述鼻腔噴霧劑的制備方法，其特征在于a)將所述的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液混合，超聲處理后獲得磷酸鈣納米粒子，再與艾塞那肽濃度為0.01~50mg/mL的水性溶液進(jìn)行混合；b)在室溫下攪拌1~3天，超聲處理，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為1~10:0.1~10;C)將b步驟獲得的復(fù)合物用注射用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.01~0.5mg/ml;d)在c步驟獲得的藥物溶劑中添加水劑常用的輔料，混合均勻后檢測(cè)pH，當(dāng)pH^6^7時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整后，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。另一種上述鼻腔噴霧齊J的制備方法，其特征在于a)將濃度為0.001-lmol/L的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液和濃度為0.01-50mg/mL的艾塞那肽水性溶液按照體積比1~10:1~10:1~5:0.01~1混合攪拌；b)在室溫下攪拌1~3天，超聲處理，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，復(fù)合物中磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的重量比為1-10:0.1-10;c)將b步驟獲得的復(fù)合物用注射用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.010.5mg/ml;d)在c步驟獲得的藥物溶劑中添加水劑常用的輔料，混合均勻后檢測(cè)pH,當(dāng)pH-67時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整后，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于通過(guò)載體技術(shù)攜帶艾塞那肽(exenatide)透過(guò)鼻腔黏膜屏障進(jìn)入血液循環(huán)從而起到治療作用，避免目前皮下注射給藥方式給患者帶來(lái)的痛苦和不便。同時(shí)，原料中磷酸鹽和鈣鹽為人體骨骼、牙齒主要主成部分，為人體必須物質(zhì)，極大程度避免了由于載體不能被生物降解或者降解產(chǎn)物具有毒副作用給人體帶來(lái)的安全隱患。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l精密稱(chēng)取氯化鈣l.Og溶解于500ml去離子水中制成氯化鈣溶液；精密稱(chēng)取磷酸氫二納l.Og溶解于500ml去離子水中制成磷酸氫二納溶液；精密稱(chēng)取枸櫞酸納0.4g溶解于80ml去離子水中制成枸櫞酸納溶液，氯化鈣溶液、磷酸氫二納溶液和枸櫞酸納溶液按照2:2:l的體積比混合后室溫?cái)嚢?8小時(shí)，超聲處理后，離心，棄去上清，形成含有磷酸鈣納米粒子溶液，溶液中的磷酸銬納米粒子的濃度為0.5mg/ml。將磷酸鈣納米粒子溶液與20mg/mL艾塞那肽水溶液按重量比l:l混合攪拌2小時(shí)，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物；將所述的復(fù)合物用注釋用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.01~0.5mg/ml;在藥物溶劑中添加水劑藥物常用的下列輔料焦亞硫酸鹽、氯化鈉，其中焦亞硫酸鹽的加入量為藥物溶劑的0.05%(體積百分比，下同)，新潔爾滅的加入量為藥物溶劑的0.01%,氯化鈉的加入量為藥物溶劑的0.9%，混合均勻后檢測(cè)pH，當(dāng)pH-67時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整到pH-6~7，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。pH調(diào)節(jié)劑可以選擇鹽酸，或氫氧化鈉，或三乙醇胺，或氨丁三醇。7實(shí)施例2精密稱(chēng)稱(chēng)取氯化鈣l.Og溶解于500ml去離子水中制成氯化鈣溶液；精密稱(chēng)取磷酸氫二納l.Og溶解于500ml去離子水中制成磷酸氫二納溶液；精密稱(chēng)取枸櫞酸納0.4g溶解于80ml去離子水中制成枸櫞酸納溶液，精密稱(chēng)稱(chēng)取艾塞那肽50mg溶解于5mL去離子水中制成艾塞那肽水溶液，將上述溶液混合攪拌48小時(shí)，超聲處理后，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物；將所述的復(fù)合物用注釋用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.010.5mg/ml;在藥物溶劑中添加水劑藥物常用的下列輔料焦亞硫酸鹽、氯化鈉，其中焦亞硫酸鹽的加入量為藥物溶劑的0.05%(體積百分比，下同)，新潔爾滅的加入量為藥物溶劑的0.01%，氯化鈉的加入量為藥物溶劑的0.9%，混合均勻后檢測(cè)pH，當(dāng)pH^6^7時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整到pH=6~7，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。pH調(diào)節(jié)劑可以選擇鹽酸，或氫氧化鈉，或三乙醇胺，或氨丁三醇。實(shí)施例3鼻腔藥物代謝實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物SD大鼠，180200g，雄性，8只實(shí)驗(yàn)藥物試驗(yàn)組將實(shí)施例2獲得的鼻腔滴劑，鼻腔滴劑中的艾塞那肽濃度16mg/ml。對(duì)照組將艾塞那肽用注射用水稀釋?zhuān)♂尯笥行幬锇请臐舛?6mg/mL實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)大鼠預(yù)養(yǎng)3天，試驗(yàn)前一天禁食12h。將大鼠分成A、B、C、D平行四組，每組2只，其中，A、B、C組為試驗(yàn)組，D組為對(duì)照組，各組均滴鼻給藥5jd/只，給藥劑量為100pg/200g。各組中，一只于給藥后5、10、20、30分鐘眼眶采血0.3ml，將血液在4°C，3000轉(zhuǎn)每分鐘條件下離心IO分鐘，收集上層血清，-20°(:冰箱保存，待測(cè)，另一只于給藥后l,1.5，2，3，4，6小時(shí)眼眶采血0,3ml，將血液在4。C，3000轉(zhuǎn)每分鐘條件下離心IO分鐘，收集上層血清，-20°(:冰箱保存，待測(cè)。用ELA方法對(duì)檢測(cè)待測(cè)血清樣本中艾塞那肽的含量，結(jié)果見(jiàn)表1表1時(shí)間-血液中藥物濃度列表<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>可見(jiàn)，沒(méi)有與納米顆粒結(jié)合的艾塞那肽在血液中的藥物濃度和滯留時(shí)間遠(yuǎn)低于與磷酸鈣納米粒子的艾塞那肽。實(shí)施例4滴鼻藥物的藥效實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物ICR小鼠，1822g，雄性，30只實(shí)驗(yàn)藥物試驗(yàn)組將實(shí)施例1獲得的滴鼻藥物粉劑用水稀釋?zhuān)♂尯笥行幬锇请臐舛?.5mg/ml;葡萄糖。陰性對(duì)照組葡萄糖。陽(yáng)性對(duì)照組皮下注射艾塞那肽水溶液(0.5mg/ml);葡萄糖。實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)ICR小鼠預(yù)養(yǎng)3天。ICR小鼠分為3組試驗(yàn)組(n-lO)，陽(yáng)性對(duì)照組(11=10)陰性對(duì)照組(11=10);小鼠試驗(yàn)前一天禁食12h不禁水并在試驗(yàn)前使用電子血糖測(cè)試儀(羅康全優(yōu)越型德國(guó)羅氏診斷有限公司)測(cè)量血糖濃度。試驗(yàn)組給實(shí)施例1獲得的滴鼻藥物粉劑以后灌胃葡萄糖(葡萄糖劑量為2.5g/kg，濃度為10%，下同)；陰性對(duì)照組只灌胃葡萄糖；陽(yáng)性對(duì)照組皮下注射艾塞那肽水溶液(0.5mg/ml)后灌胃葡萄糖；使用電子血糖測(cè)試儀(羅康全優(yōu)越型德國(guó)羅氏診斷有限公司)檢測(cè)給藥后O小時(shí)，0.5小時(shí)，1小時(shí)，2小時(shí)，3小時(shí)血糖濃度，并將各組檢測(cè)數(shù)據(jù)的平均值列于表2。表2試驗(yàn)組/陰性對(duì)照組/陽(yáng)性對(duì)照組檢測(cè)數(shù)據(jù)對(duì)照時(shí)間券黏膜給藥陽(yáng)性對(duì)照陰性對(duì)照(min)(mmol/U(咖ol/L)(mmol/L)04.17.696.88305.77.2915.96604.25.759.621203.65.096.481803.95.025.82由表2可見(jiàn)，試驗(yàn)組與陰性對(duì)照組相比，本發(fā)明對(duì)治療糖尿病是有效的，試驗(yàn)組與陽(yáng)性對(duì)照組相比，其治療效果明顯優(yōu)于使用皮下注射艾塞那肽水溶液的陽(yáng)性對(duì)照組。以上各實(shí)施例不是對(duì)本發(fā)明的具體限制，任何熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明技術(shù)方案范圍情況下，利用上述揭示的方法內(nèi)容對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做出許多可能的變動(dòng)和修飾，均屬于權(quán)利要求書(shū)保護(hù)的范圍。10權(quán)利要求1、一種治療糖尿病的鼻腔滴劑，包括溶劑和輔料，其特征在于溶劑中含有磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為1～10∶0.1～10，溶劑中艾塞那肽的含量為0.01～0.5mg/ml。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療糖尿病的的鼻腔滴劑，其特征在于磷酸鈣納米粒子由濃度為0.001-lmol/L的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液按照120:1~20:l-10的體積比混合后獲得。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的治療糖尿病的的鼻腔滴劑，其特征在于所述的鈣鹽可以是硫酸鈣、氯化鈣等鈣鹽，所述的磷酸鹽可以是磷酸納、磷酸二氫納、磷酸氫二納、磷酸二氫銨、磷酸一氫鈉等磷酸鹽，所述的枸櫞酸鹽為枸櫞酸鉀、枸櫞酸鎂、枸櫞酸納等枸櫞酸鹽，所述的溶液為水性溶液，溶劑的pH=6~7。4、根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的治療糖尿病的的鼻腔滴劑，其特征在于所述的溶劑為注射用水，溶劑中添加水劑藥物常用的輔料。5、一種如權(quán)利要求4所述鼻腔滴劑的制備方法，其特征在于a)將所述的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液混合，超聲處理后獲得磷酸鈣納米粒子，再與艾塞那肽濃度為0.01~50mg/mL的水性溶液進(jìn)行混合；b)在室溫下攪拌1~3天，超聲處理，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為1~10:0.1~10;c)將b步驟獲得的復(fù)合物用注射用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.01~0.5mg/ml;d)在c步驟獲得的藥物溶劑中添加水劑常用的輔料，混合均勻后檢測(cè)pH，當(dāng)pH^67時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整后，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。6、一種如權(quán)利要求4所述鼻腔滴劑的制備方法，其特征在于a)將濃度為0.001-lmol/L的鈣鹽溶液、磷酸鹽溶液、枸櫞酸鹽溶液和濃度為0.01-50mg/mL的艾塞那肽水性溶液按照體積比1~10:1~10:1~5:0.01-1混合攪拌；b)在室溫下攪拌1~3天，超聲處理，離心，棄去上清，獲得磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，復(fù)合物中磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的重量比為110:0.1~10;C)將b步驟獲得的復(fù)合物用注射用水稀釋形成藥物溶劑，稀釋后的藥物溶劑中的艾塞那肽的含量為0.01~0.5mg/ml;d)在c步驟獲得的藥物溶劑中添加水劑常用的輔料，混合均勻后檢測(cè)pH，當(dāng)pH^67時(shí)，通過(guò)pH調(diào)節(jié)劑調(diào)整后，獲得治療糖尿病藥物的鼻腔滴劑。全文摘要本發(fā)明是一種治療糖尿病的鼻腔滴劑及制備方法，鼻腔滴劑中包括溶劑和輔料，其特征在于溶劑中含有磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為1～10∶0.1～10，溶劑中艾塞那肽的含量為0.01～0.5mg/ml。其制備方法是將所述的鈣鹽、磷酸鹽、枸櫞酸鹽、艾塞那肽的水性溶液混合制備磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽的復(fù)合物，磷酸鈣納米粒子與艾塞那肽在復(fù)合物中的重量比為1～10∶0.1～10，稀釋后艾塞那肽的含量為0.01～0.5mg/ml，添加水劑常用的輔料后檢測(cè)并調(diào)整pH，最終形成鼻腔滴劑。文檔編號(hào)A61K38/17GK101601646SQ200910181748公開(kāi)日2009年12月16日申請(qǐng)日期2009年7月22日優(yōu)先權(quán)日2009年7月22日發(fā)明者馮振卿,馮魯中,張學(xué)智,清河,管曉虹,袁偉民申請(qǐng)人:南京凱瑞爾納米生物技術(shù)有限公司