專利名稱：：芳香新塔花提取物及其生產(chǎn)方法和心血管藥物的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，是一種芳香新塔花提取物及其生產(chǎn)方法和心血管藥物的應(yīng)用。二、
背景技術(shù)：
芳香新塔花(Z&i//7orach'"op^/j'wWesLam.)，又名唇香草、小葉薄荷，為唇形科新塔花屬植物。我國(guó)分布于新疆，國(guó)外前蘇聯(lián)、蒙古亦有分布。史料記載，芳香新塔花全草可入藥，味辛性寒，具有疏散風(fēng)熱，清利頭目，寧心安神，利水清熱，壯骨強(qiáng)身，清胃消食等功效。芳香新塔花生長(zhǎng)于礫石坡地及半荒漠草灘上，加之其氣味芳香，成為一種良好牧草。目前，還沒(méi)有關(guān)于芳香新塔花的新藥應(yīng)用于臨床。芳香新塔花這一良好的藥用資源尚未引起人們的關(guān)注。心血管疾病(Cardiovasculardiseases,CVD)是包括心臟和血管疾病、肺循環(huán)疾病和腦血管疾病的一組循環(huán)系統(tǒng)疾病。而高血壓、腦卒中和冠心病對(duì)人類健康的危害日趨嚴(yán)重，是當(dāng)今社會(huì)危害人類健康和生命最主要的疾病。世界范圍來(lái)看，其發(fā)病率和死亡率一直呈上升趨勢(shì)。其中冠心病是由于心肌嚴(yán)重缺血而引起心肌的損傷和壞死，其實(shí)質(zhì)是心肌缺血。急性心肌梗死(Acutemyocardialinfarction,AMI)是其臨床的主要表現(xiàn)。AMI在歐美國(guó)家己成為嚴(yán)重的健康問(wèn)題,美國(guó)每年大約有150萬(wàn)人發(fā)生AMI,其中大約有1/3的人死亡，在中國(guó)AMI同樣也是一個(gè)引起廣泛關(guān)注的健康問(wèn)題，流行病學(xué)調(diào)査結(jié)果顯示,心肌梗死患病率在中國(guó)平均為10/10萬(wàn)，死亡率為患病率的10%。因此，尋找開(kāi)發(fā)有效地治療心血管疾病的藥物已日益受到國(guó)內(nèi)外的廣泛重視，成為當(dāng)前醫(yī)藥學(xué)界的主要研究課題之一。目前中國(guó)還沒(méi)有與芳香新塔花提取物有關(guān)的專利文獻(xiàn)公開(kāi)。與芳香新塔花有關(guān)的文獻(xiàn)報(bào)道也較少，主要涉及其植物全草揮發(fā)油化學(xué)成分分析、植化成分等，例如，楊小菊等《芳香新塔花化學(xué)成分的分離與鑒定》(沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)[J]2008，25(6)456458);楊偉俊等《芳香新塔花揮發(fā)油的化學(xué)成分分析》(新疆中醫(yī)藥[J]，2009，27(1):23-24)等文獻(xiàn)。但是，上述已經(jīng)公開(kāi)的各種研究主要針對(duì)其化學(xué)成分的分離，而藥理及藥理活性基礎(chǔ)方面的研究主要是針對(duì)水提取物對(duì)動(dòng)物心肌缺血的作用研究。但水提取物純度低，成分復(fù)雜，且使大量無(wú)效成分包含其中，使服用量大，導(dǎo)致資源嚴(yán)重浪費(fèi)。三、
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供一種芳香新塔花提取物及其生產(chǎn)方法和心血管藥物的應(yīng)用，其克服了上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，解決芳香新塔花被充分利用的問(wèn)題，使提取物的成分更加集中，提高了芳香新塔花資源的利用率，特別是本發(fā)明芳香新塔花提取物在用于制備心血管藥物方面的應(yīng)用。本發(fā)明的技術(shù)方案之一是通過(guò)以下方式得到的一種芳香新塔花提取物，其按下述方法得到將芳香新塔花全草，粉碎并過(guò)IO目篩至50目篩，加入芳香新塔花全草的6倍重量份至20倍重量份的70%至95%乙醇水溶液，浸泡至透心，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第一濾液；濾渣取出晾干后，再加入晾干濾渣的6倍重量份至20倍重量份的30%至70%乙醇水溶液，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第二濾液；合并上述第一濾液和第二濾液，減壓回收乙醇并濃縮和干燥得到固體的總提取物即提取物I。下面是對(duì)上述技術(shù)方案之一的進(jìn)一步優(yōu)化和/或選擇上述減壓回收乙醇并濃縮是在5(TC至70°C、-0.06Mpa至-O.1Mpa下進(jìn)行的。將上述提取物I加入1倍重量份至4倍重量份的水，在常溫下攪拌或振搖5分鐘至30分鐘使其溶解或混懸后，在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的石油醚，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集石油醚層；再加入相同量的石油醚，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的石油醚層，并進(jìn)行干燥得到石油醚萃取物即提取物II;同時(shí)還得到石油醚萃取剩余部分。將上述石油醚萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的三氯甲垸，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集三氯甲垸層；再加入相同量的三氯甲烷，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的三氯甲烷層，干燥得到三氯甲烷萃取物即提取物III;同時(shí)還得到三氯甲烷萃取剩余部分。將上述三氯甲烷萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的乙酸乙酯，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集乙酸乙酯層；再加入相同量的乙酸乙酯，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的乙酸乙酯層，干燥得到乙酸乙酯萃取物即提取物IV;同時(shí)還得到乙酸乙酯萃取剩余部分。將上述乙酸乙酯萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的正丁醇，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集正丁醇層；再加入相同量的正丁醇，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的正丁醇層，干燥得到正丁醇萃取物即提取物V。上述干燥是在50'C至8(TC下的鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行的或者干燥是在進(jìn)風(fēng)溫度13(TC至190°C、出風(fēng)溫度30。C至9(TC的噴霧干燥下進(jìn)行的。本發(fā)明的技術(shù)方案之二是通過(guò)以下方式得到的一種芳香新塔花提取物的生產(chǎn)方法，其按下述步驟得到將芳香新塔花全草，粉碎并過(guò)IO目篩至50目篩，加入芳香新塔花全草的6倍重量份至20倍重量份的70%至95%乙醇水溶液，浸泡至透心，加熱回流提取l次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第一濾液；濾渣取出晾干后，再加入晾干濾渣的6倍重量份至20倍重量份的30%至70%乙醇水溶液，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第二濾液；合并上述第一濾液和第二濾液，減壓回收乙醇并濃縮和干燥得到固體的總提取物即提取物I;其中，減壓回收乙醇并濃縮是在50'C至7CTC、-0.06Mpa至-0.1Mpa下進(jìn)行的；將提取物I加入1倍重量份至4倍重量份的水，在常溫下攪拌或振搖5分鐘至30鐘使其溶解或混懸后，在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的石油醚，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集石油醚層；再加入相同量的石油醚，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的石油醚層，并進(jìn)行干燥得到石油醚萃取物即提取物II;同時(shí)還得到石油醚萃取剩余部分；將石油醚萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的三氯甲烷，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集三氯甲烷層；再加入相同量的三氯甲垸，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的三氯甲烷層，干燥得到三氯甲烷萃取物即提取物III;同時(shí)還得到三氯甲烷萃取剩余部分；將三氯甲垸萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的乙酸乙酯，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集乙酸乙酯層；再加入相同量的乙酸乙酯，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的乙酸乙酯層，干燥得到乙酸乙酯萃取物即提取物IV;同時(shí)還得到乙酸乙酯萃取剩余部分；將乙酸乙酯萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的正丁醇，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集正丁醇層；再加入相同量的正丁醇，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的正丁醇層，干燥得到正丁醇萃取物即提取物V。下面是對(duì)上述技術(shù)方案之二的進(jìn)一步優(yōu)化和/或選擇上述干燥是在50。C至8(TC下的鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行的或者干燥是在進(jìn)風(fēng)溫度130'C至190°C、出風(fēng)溫度3(TC至90。C的噴霧干燥下進(jìn)行的。本發(fā)明的技術(shù)方案之三是通過(guò)以下方式得到的上述芳香新塔花提取物在制備心血管藥物方面的應(yīng)用。本發(fā)明所得芳香新塔花的各提取物都能在制備心血管藥物方面得到應(yīng)用，并使收率降低(服用劑量降低，即達(dá)到同樣的藥效所使用的藥材量降低)，在提高療效的同時(shí)，大大節(jié)約了芳香新塔花資源、降低了成本。四附圖1為本發(fā)明的生產(chǎn)方法流程圖。附圖2為本發(fā)明的芳香新塔花不同提取部位對(duì)離體血管環(huán)張力的影響，其中橫坐標(biāo)刻度分別代表陽(yáng)性對(duì)照藥普奈洛爾的5個(gè)濃度級(jí)別(即1-5分別代表為0.001-0.10g/l5個(gè)濃度級(jí)別)，及受試藥5個(gè)濃度級(jí)別(即1-5分別代表為0.03-3.Og/15個(gè)濃度級(jí)別)。附圖3為本發(fā)明的芳香新塔花的各提取物對(duì)腦垂體后葉素致大鼠心肌缺血模型J點(diǎn)的影響。五具體實(shí)施例方式本發(fā)明不受下述實(shí)施例的限制，可根據(jù)上述本發(fā)明的技術(shù)方案和實(shí)際情況來(lái)確定具體的實(shí)施方式。1、芳香新塔花提取物的得到生產(chǎn)方法(流程見(jiàn)附圖l):將芳香新塔花全草，粉碎并過(guò)IO目篩至50目篩，加入芳香新塔花全草的6倍重量份至20倍重量份的70%至95%乙醇水溶液，浸泡至透心，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第一濾液；濾渣取出晾干后，再加入晾干濾渣的6倍重量份至20倍重量份的30%至70%乙醇水溶液，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第二濾液；合并上述第一濾液和第二濾液，減壓回收乙醇并濃縮和千燥得到固體的總提取物即提取物I;其中，減壓回收乙醇并濃縮是在50'C至7(TC、-0.06Mpa至-0.1Mpa下進(jìn)行的；將提取物I加入1倍重量份至4倍重量份的水，在常溫下攪拌或振搖5分鐘至30分鐘使其溶解或混懸后，在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的石油醚，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集石油醚層；再加入相同量的石油醚，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的石油醚層，并進(jìn)行干燥得到石油醚萃取物即提取物II;同時(shí)還得到石油醚萃取剩余部分；將石油醚萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的三氯甲烷，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集三氯甲垸層；再加入相同量的三氯甲烷，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的三氯甲垸層，干燥得到三氯甲烷萃取物即提取物m;同時(shí)還得到三氯甲烷萃取剩余部分；將三氯甲烷萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的乙酸乙酯，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集乙酸乙酯層；再加入相同量的乙酸乙酯，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的乙酸乙酯層，干燥得到乙酸乙酯萃取物即提取物IV;同時(shí)還得到乙酸乙酯萃取余部分；將乙酸乙酯萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的正丁醇，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集正丁醇層；再加入相同量的正丁醇，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的正丁醇層，干燥得到正丁醇萃取物即提取物V。上述干燥是在50。C至8(TC下的鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行的或者干燥是在風(fēng)溫度13(TC至190'C、出風(fēng)溫度3(TC至9(TC的噴霧干燥下進(jìn)行的。本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)上述5個(gè)提取物具有抗心肌缺血作用。因此，本發(fā)明提供的所述提取物能夠用于制備治療和/或預(yù)防某些心血管疾病的心血管藥物方面的應(yīng)用，如冠心病，其包括心絞痛、冠脈粥樣硬化、心肌缺血等病癥；以及其它相關(guān)病癥。本發(fā)明的所述提取物與藥學(xué)上可接受的載體組成治療和/或預(yù)防某些心血管疾病的心血管藥物，并以適合藥用的制劑形勢(shì)存在，這些制劑形式可以是片劑、糖衣片劑、薄膜衣片劑、腸溶衣片劑、緩釋片劑、膠囊劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、緩釋膠囊劑、口服液、合劑、口含劑、顆粒劑、沖劑、丸劑、散劑、膏劑、丹劑、混懸劑、溶液劑、注射劑、粉針劑、凍干粉針劑、栓劑、軟膏劑、硬膏劑、霜?jiǎng)婌F劑、滴劑、貼劑等。2、芳香新塔花提取物對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈舒張作用實(shí)驗(yàn)冠心病又稱缺血性心臟病，是由于冠狀動(dòng)脈功能性或器質(zhì)性病變導(dǎo)致冠脈供血和心肌需求之間不平衡所致的心肌損害，其實(shí)質(zhì)是心肌缺血。而通過(guò)藥物舒張血管，從而增加血流量是改善心肌供血的主要途徑之一，本試驗(yàn)采用離體血管張力記錄法觀察芳香新塔花提取物對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈血管反應(yīng)性的影響，提示芳香新塔花提取物對(duì)血管有明顯舒張作用。本試驗(yàn)的原理在于血管平滑肌細(xì)胞內(nèi)鈣離子(Ca2+)濃度增高是血管收縮的必要條件，平滑肌細(xì)胞興奮有兩條鈣通道參與鈣離子內(nèi)流電壓依賴性鈣通道(VDC)和受體操縱性鈣通道(ROC)。KC1可使細(xì)胞膜去極化，開(kāi)放VDC，導(dǎo)致細(xì)胞外Ca2+內(nèi)流，平滑肌收縮。血管環(huán)在預(yù)加入高濃度K+的無(wú)鈣K-H液中孵育后，細(xì)胞膜處于去極化狀態(tài)，電壓依賴性鈣通道處于活化狀態(tài)，此時(shí)所引起的血管環(huán)收縮主要是細(xì)胞外Ca2+通過(guò)鈣通道流入細(xì)胞內(nèi)所引起。此實(shí)驗(yàn)考察芳香新塔花不同提取部位對(duì)KC1所刺激的血管收縮的舒張作用。實(shí)驗(yàn)材料(l)藥品與試劑芳香新塔花提取物I、芳香新塔花提取物II(石油醚提取物)、芳香新塔花提取物III(三氯甲垸提取物)、芳香新塔花提取物IV(乙酸乙酯提取物)、芳香新塔花提取物V(正丁醇提取物)，均由本實(shí)驗(yàn)室制備；普萘洛爾，山西云鵬制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H14020768;NaCl、KC1、CaCl2、KH2P04、MgSO"Na線、葡萄糖、乙二胺四乙酸，均由上海冠戈實(shí)業(yè)有限公司生產(chǎn)。K-H生理液配方NaCl6.92g，KC10.35g，CaCl20.28g，KH2P040.16g、MgS040.29g、NaHC032.1g、葡萄糖2.0g，溶于1L雙蒸水中，pH=7.4。(2)器材BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)、FT-100生物張力傳感器，均由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；DL-501型超級(jí)恒溫器，上海試驗(yàn)設(shè)備廠制造；混合氣體(95%02+5%C02)，烏魯木齊西明特種氣體有限公司提供。(3)動(dòng)物Wistar大鼠，雄性250土26.3g，由新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)新醫(yī)動(dòng)字SYXK(新)2003-0001。實(shí)驗(yàn)方法Wistar大鼠，雄性250土26.3g。斷頭處死，開(kāi)胸迅速取出胸主動(dòng)脈，置于預(yù)先混合氣體飽和4t:的K-H液，小心去除外周的結(jié)締組織，并剪成23mm長(zhǎng)的血管環(huán)，將血管環(huán)置于盛有15mlK-H液(37'C恒溫，并持續(xù)通入95%02和5%(302的混和氣體，p^7.4)的恒溫套瓶中，每一個(gè)血管環(huán)用兩個(gè)L型掛鉤貫穿血管環(huán)管腔，一端固定，另一端連接于張力傳感器，張力變化由BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)采集并記錄。血管環(huán)加靜息張力2g，穩(wěn)定90min，期間每15min用預(yù)溫至37'C的K-H液更換液體。待血管環(huán)完全穩(wěn)定后，用60mraol/L的KCl重復(fù)刺激3次，誘發(fā)血管的最大收縮幅度，連續(xù)3次同樣的刺激所引起的收縮幅度差別<10%時(shí)，正式實(shí)驗(yàn)，并以此做為100%收縮張力。按濃度梯度分別加入芳香新塔花各提取物(終濃度為0.03，0.10，0.30，1.00，3.00g/L)(由于石油醚部位在K-H液中溶解度極低，此實(shí)驗(yàn)未對(duì)其考察)、普萘洛爾陽(yáng)性對(duì)照藥(終濃度為0.001，0.003，0.01，0.03，0.10g/L)，生理鹽水組給予同體積的生理鹽水，記錄加入藥物10分鐘張力變化，本試驗(yàn)用舒張率表示。舒張率越大，表明作用越顯著。舒張率=[(加受試藥前張力-加受試藥后張力)/(藥物剌激后張力-藥物刺激前張力)化100%實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1和表2。從表l可見(jiàn)，用KC1刺激血管造成血管收縮模型后，給予生理鹽水組對(duì)舒張血管的作用極其微弱，最大不超過(guò)1.5%，說(shuō)明生理鹽水不能有效舒張血管；陽(yáng)性對(duì)照藥普萘洛爾在終濃度O.lg/L的最大舒張率為122.00%，說(shuō)明其舒張血管作用非常顯著，作為臨床廣泛認(rèn)可的治療心血管疾病的化學(xué)藥物，本試驗(yàn)以它做對(duì)照，具有說(shuō)服力。從表2可見(jiàn)，用KC1刺激血管造成血管收縮模型后，給予芳香新塔花提取物在終濃度3g/L時(shí)，對(duì)血管均有一定的舒張作用，其中提取物III組(三氯甲烷組)最大舒張率可達(dá)到103.77%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，芳香新塔花各提取物對(duì)KC1刺激的血管收縮都有較好的舒張效果，當(dāng)提取物濃度達(dá)0.3g/L以上時(shí)，與生理鹽水組比較均有顯著性差異，提取物III組(三氯甲垸組)對(duì)血管舒張效果在所有部位中效果最為顯著。下圖2(圖2為對(duì)表1和表2的直觀表示)表示了各實(shí)驗(yàn)組濃度(橫坐標(biāo)，g/L)與血管舒張率的關(guān)系示意圖。從圖可見(jiàn)，隨著給藥濃度的增加，除生理鹽水組未變化外，其他各組的血管舒張率呈上升趨勢(shì)，提示芳香新塔花改善血管供血能力與劑量呈正相關(guān)。3、芳香新塔花提取物對(duì)腦垂體后葉素致大鼠心肌缺血模型的影響用垂體后葉素致大鼠心肌缺血?jiǎng)游锬Ｐ?，給予0.8U/Kg垂體后葉素后心電圖主要表現(xiàn)為心率減慢、T波的高聳或倒置、各心肌酶譜異常，臨床上主要以ST段異常來(lái)判定心肌缺血。由于大鼠ST段表現(xiàn)不明顯，其變化用J點(diǎn)表示。本實(shí)驗(yàn)采用注射垂體后葉素復(fù)制大鼠心肌缺血模型，觀察芳香新塔花提取物對(duì)心肌缺血模型的影響。研究表明，注射大劑量垂體后葉素可誘發(fā)動(dòng)物冠狀動(dòng)脈發(fā)生痙攣而引起急性心肌缺血，與臨床上人的冠狀動(dòng)脈供血不足所致心絞痛相似，多年來(lái)被廣泛用于抗心肌缺血藥物的篩選研究。本試驗(yàn)的原理是動(dòng)物反復(fù)給予試驗(yàn)藥物后，再靜脈注射腦垂體后葉素，導(dǎo)致心率減慢、T波的高聳或倒置、各心肌酶譜異常。計(jì)算試驗(yàn)組給予腦垂體后葉素后各時(shí)間段J點(diǎn)與正常J點(diǎn)差值，得到J點(diǎn)變化值，加和各時(shí)段變化值，得到總變化值，各時(shí)段變化值及總變化值與模型組相應(yīng)各點(diǎn)比較。J的變化值越小，說(shuō)明心肌損害的保護(hù)作用越強(qiáng)。因此本實(shí)驗(yàn)主要觀察J點(diǎn)變化值，從而得到給藥組各時(shí)段與模型組比較的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。實(shí)驗(yàn)材料(l)藥品與試劑芳香新塔花提取物I、芳香新塔花提取物II(石油醚提取物)、芳香新塔花提取物III(三氯甲垸提取物)、芳香新塔花提取物IV(乙酸乙酯提取物)、芳香新塔花提取物V(正丁醇提取物)，均由本實(shí)驗(yàn)室制備；普萘洛爾，山西云鵬制藥有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H14020768;腦垂體后葉素，上海第一生化藥業(yè)有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H31022259。(2)器材BL-410生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)，由成都泰盟科技有限公司生產(chǎn)；超氧化歧化酶(SOD)、乳酸脫氫酶(LDH)、丙二醛(MDA)測(cè)試盒，均為IOOT，南京建成生物工程研究所。(3)動(dòng)物Wistar大鼠，雄性198士23.2g，由新疆醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供，動(dòng)物合格證號(hào)新醫(yī)動(dòng)字SYXK(新)2003-0001。所有大鼠均做心電圖，將心電圖異常大鼠剔除，選取正常心電圖大鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)方法將正常大鼠按體重、性別分為7組，分別為模型組，陽(yáng)性對(duì)照藥單硝酸異山梨酯組，各提取物組，每組10只，每日一次，連續(xù)7天；模型組給予同體積生理鹽水，陽(yáng)性對(duì)照藥給于單硝酸異山梨酯10.1mg/kg，各受試藥組均給予0.3g/kg。各組造模前均記錄II導(dǎo)聯(lián)心電圖，并于末次給藥30分鐘后，股靜脈注射腦垂體后葉素0.8U/kg，做II導(dǎo)聯(lián)心電圖，記錄5s、10s、30s、60s、180s、300s、600s心電圖，觀察各時(shí)間段的心率、J點(diǎn)變化。注射腦垂體后葉素45分鐘后斷頸取血，3500r/分鐘離心取血清，按照試劑盒說(shuō)明書(shū)測(cè)定SOD、LDH、MDA指標(biāo)。上述實(shí)驗(yàn)得到如下結(jié)果(1)從表3可見(jiàn)，與模型組比較，各給藥組在大多數(shù)時(shí)段J點(diǎn)變化值均有所降低，其中陽(yáng)性對(duì)照組(單硝酸異山梨酯組)、提取物III組(三氯甲烷組)、提取物II組(石油醚組)總變化值與模型組相比較有顯著性差異，說(shuō)明各提取物對(duì)腦垂體后葉素所引起的心肌缺血J點(diǎn)變化有很好的保護(hù)作用，提示各提取物對(duì)心肌缺血具有改善作用，其中石油醚組(在60s時(shí)J點(diǎn)變化值僅為0.08±0.07)、三氯甲垸組(在60s時(shí)J點(diǎn)變化值僅為0.07±0.07)最為顯著，效果較陽(yáng)性對(duì)照組(單硝酸異山梨酯組)還要優(yōu)。而單硝酸異山梨酯組作為臨床公認(rèn)的治療心肌缺血的藥物，本試驗(yàn)為芳香新塔花提取物用于治療心肌缺血提供了可靠證據(jù)。下圖3(圖3為對(duì)表3的直觀表示)表示了各實(shí)驗(yàn)組不同時(shí)間(橫坐標(biāo)，s)與J點(diǎn)變化的關(guān)系示意圖。從圖可見(jiàn)，各組的J點(diǎn)變化值均小于模型組，其中石油醚組和三氯甲烷組較陽(yáng)性對(duì)照藥的作用還要好，提示芳香新塔花改善心肌缺血的作用。(2)計(jì)算試驗(yàn)組給予腦垂體后葉素后各時(shí)間段心率與正常心率差值，得到心率變化值，各時(shí)段變化值與模型組相應(yīng)各點(diǎn)比較。表4結(jié)果表明，與模型組比較，各給藥組對(duì)腦垂體后葉素所引起的心肌缺血心率變化無(wú)明顯影響，均小于模型組。(3)從表5知，大鼠血清測(cè)定LDH、SOD、MDA，所得數(shù)值與模型組比較，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，提示各給藥組對(duì)腦垂體后葉素所引起的心肌酶的變化無(wú)影響。綜上，本試驗(yàn)主要從兩個(gè)方面驗(yàn)證了芳香新塔花提取物的新血管活性，結(jié)果提示各提取物對(duì)腦垂體后葉素所引起的心肌缺血具有顯著的保護(hù)作用；對(duì)KC1刺激的血管收縮都有一定的舒張效果，對(duì)正常心律、血清測(cè)定LDH、SOD、MDA等無(wú)影響。以上藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示此藥材各提取物均具有較好的抗心肌缺血活性。<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>表4各提取物對(duì)腦垂體后葉素致大鼠心肌缺血模型心率的影響(x±s)<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>權(quán)利要求1、一種芳香新塔花提取物，其特征在于按下述方法得到將芳香新塔花全草，粉碎并過(guò)10目篩至50目篩，加入過(guò)篩后的芳香新塔花全草的6倍重量份至20倍重量份的70％至95％乙醇水溶液，浸泡至透心，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第一濾液；濾渣取出晾干后，再加入晾干濾渣的6倍重量份至20倍重量份的30％至70％乙醇水溶液，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第二濾液；合并上述第一濾液和第二濾液，減壓回收乙醇并濃縮和干燥得到固體的總提取物即提取物I。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的芳香新塔花提取物，其特征在于減壓回收乙醇并濃縮是在50。C至70°C、-0.06Mpa至-0.1Mpa下進(jìn)行的。3、根據(jù)權(quán)利要求1和2所述的芳香新塔花提取物，其特征在于將提取物I加入1倍重量份至4倍重量份的水，在常溫下攪拌或振搖5分鐘至30分鐘使其溶解或混懸后，在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的石油醚，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集石油醚層；再加入相同量的石油醚，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的石油醚層，并進(jìn)行干燥得到石油醚萃取物即提取物II;同時(shí)還得到石油醚萃取剩余部分。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的芳香新塔花提取物，其特征在于將石油醚萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的三氯甲垸，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集三氯甲烷層；再加入相同量的三氯甲垸，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的三氯甲烷層，干燥得到三氯甲烷萃取物即提取物III;同時(shí)還得到三氯甲垸萃取剩余部分。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的芳香新塔花提取物，其特征在于將三氯甲烷萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的乙酸乙酯，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集乙酸乙酯層；再加入相同量的乙酸乙酯，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的乙酸乙酯層，干燥得到乙酸乙酯萃取物即提取物IV;同時(shí)還得到乙酸乙酯萃取剩余部分。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的芳香新塔花提取物，其特征在于將乙酸乙酯萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的正丁醇，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集正丁醇層；再加入相同量的正丁醇，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的正丁醇層，干燥得到正丁醇萃取物即提取物V。7、根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5所述的芳香新塔花提取物，其特征在于干燥是在50'C至80。C下的鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行的或者干燥是在進(jìn)風(fēng)溫度13(TC至190°C、出風(fēng)溫度3(TC至9(TC的噴霧干燥下進(jìn)行的。8、一種芳香新塔花提取物的生產(chǎn)方法，其特征在于按下述步驟得到將芳香新塔花全草，粉碎并過(guò)IO目篩至50目篩，加入芳香新塔花全草的6倍重量份至20倍重量份的70%至95%乙醇水溶液，浸泡至透心，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第一濾液；濾渣取出晾干后，再加入晾干濾渣的6倍重量份至20倍重量份的30%至70%乙醇水溶液，加熱回流提取1次至3次，每次提取0.5小時(shí)至2小時(shí)，過(guò)濾得到第二濾液；合并上述第一濾液和第二濾液，減壓回收乙醇并濃縮和干燥得到固體的總提取物即提取物I;其中，減壓回收乙醇并濃縮是在50。C至70°C、-0.06Mpa至-0.1Mpa下進(jìn)行的；將提取物I加入1倍重量份至4倍重量份的水，在常溫下攪拌或振搖5分鐘至30分鐘使其溶解或混懸后，在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的石油醚，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集石油醚層；再加入相同量的石油醚，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的石油醚層，并進(jìn)行干燥得到石油醚萃取物即提取物II;同時(shí)還得到石油醚萃取剩余部分；將石油醚萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的三氯甲垸，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集三氯甲烷層；再加入相同量的三氯甲烷，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的三氯甲垸層，干燥得到三氯甲烷萃取物即提取物III;同時(shí)還得到三氯甲烷萃取剩余部分；將三氯甲烷萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的乙酸乙酯，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集乙酸乙酯層；再加入相同量的乙酸乙酯，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的乙酸乙酯層，干燥得到乙酸乙酯萃取物即提取物IV;同時(shí)還得到乙酸乙酯萃取剩余部分；將乙酸乙酯萃取剩余部分在常溫下加入提取物I的1倍重量份至4倍重量份的正丁醇，攪拌或振搖5分鐘至30分鐘，靜置2小時(shí)至12小時(shí)，收集正丁醇層；再加入相同量的正丁醇，如此反復(fù)萃取3次至5次，合并3次至5次萃取所得到的正丁醇層，干燥得到正丁醇萃取物即提取物V。9、根據(jù)權(quán)利要求8所述的芳香新塔花提取物的生產(chǎn)方法，其特征在于干燥是在50°C至80'C下的鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)進(jìn)行的或者干燥是在進(jìn)風(fēng)溫度13(TC至19(TC、出風(fēng)溫度3(TC至9(TC的噴霧干燥下進(jìn)行的。10、一種根據(jù)權(quán)利要求1或2或3或4或5或6所述的芳香新塔花提取物在制備心血管藥物方面的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明提供了一種芳香新塔花提取物及其生產(chǎn)方法和心血管藥物的應(yīng)用，該芳香新塔花提取物通過(guò)乙醇提取得到總提取物即提取物I，再依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取得到相應(yīng)的提取物。本發(fā)明所得芳香新塔花的各提取物都能在制備心血管藥物方面得到應(yīng)用，并使收率降低(服用劑量降低，即達(dá)到同樣的藥效所使用的藥材量降低)，在提高療效的同時(shí)，大大節(jié)約了芳香新塔花資源、降低了成本。文檔編號(hào)A61K36/185GK101623324SQ20091011341公開(kāi)日2010年1月13日申請(qǐng)日期2009年8月6日優(yōu)先權(quán)日2009年8月6日發(fā)明者江何,楊偉俊,滿爾哈巴,峰石,阿不都沙拉木申請(qǐng)人:新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所