專利名稱：：一種用于制備治療哮喘藥物的植物提取物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于制備抗哞喘藥物的植物提取物的制備方法及應(yīng)用，更具體地說是一種用于制備抗哞喘藥物的中藥材提取物的制備方法及應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：哞喘病是全球常見的慢性病之一，全世界約有一億五千萬哞喘患者，近二十年來，在全世界范圍內(nèi)的發(fā)生率呈逐漸上升的趨勢(shì)，研究其治療具有重要意義。哮喘是呼吸道不適常見的癥狀反應(yīng)，可以出現(xiàn)于許多疾病中，且頑固難愈。其形成有許多原因，其病因有外感內(nèi)傷之別，病機(jī)有寒熱虛實(shí)之分，感冒、吸煙、飲酒等都會(huì)引起咳喘。西醫(yī)對(duì)哮喘的治療多采用抗菌、消炎、脫敏等對(duì)證處理，這些治法雖能控制和改善癥狀，但不能根治，且容易復(fù)發(fā)，不能從根本治愈哮喘。目前，治療譯喘的西藥有l(wèi).腎上腺受體激動(dòng)劑；2.抗過敏藥物；3.茶堿類藥物；4.糖皮質(zhì)激素。上述藥物均存在一定的不良反應(yīng)，且長期使用化學(xué)藥物，有時(shí)會(huì)產(chǎn)生耐受性而使療效下降，有時(shí)會(huì)因?yàn)椴煌∫蛞鸬男⒋y以奏效。以整體觀念和辨證論治為主體思想的中醫(yī)中藥治療該類疾病具有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)。目前市場(chǎng)上常見的治療咳喘的中成藥有喘除根、咳特靈膠嚢、蛇膽川貝散、十味龍膽花顆粒、氣管炎丸等，但這些品種普遍存在制劑工藝落后，有效成分不明確，服用量大，服用不方便及效果不夠理想等缺點(diǎn)。目前由于我國醫(yī)藥工業(yè)發(fā)展水平相對(duì)落后，新技術(shù)和新工藝由于觀念和客觀條件等原因難以推廣普及，以中藥材為原料制備治療哮喘的藥物，主要是采用水煎煮法和水提醇沉法提取原料中的活性成分，然后將得到的藥液直接使用或加工成所需劑型。原料藥的活性成分中易揮發(fā)部位或水溶性部位很難保留，也就是說原料中的活性成分難以最大程度的提取和保留。中藥復(fù)方制劑具有其自身的特點(diǎn)，如毒性小、整個(gè)治療作用體現(xiàn)于各種成分的綜合作用，療效穩(wěn)定等，且通過不同的作用途徑治療疾病，尤其適于慢性病的治療。歷代中醫(yī)藥在譯喘的治療上積累了豐富的臨床經(jīng)-驗(yàn)，留下了經(jīng)典的名方。中藥部頒標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第十九冊(cè)載有如下處方紫花杜鵑和矮地茶各12g,功效祛痰、止咳，用于寒性咳喘。制備方法為取紫花杜鵑矮地茶藥材等量混合，粉碎成粗粉，IO倍量水提兩次，每次2小時(shí)，合并提取液，濾過，濾液濃縮至約100ml,力。乙醇使含醇量至60%,靜置，濾過，濾液回收乙醇，濃縮成稠膏真空干燥即得。以該方為基礎(chǔ)開發(fā)的紫茶顆粒制劑于九十年代末投放市場(chǎng)，并得到了部分患者的認(rèn)可，但不久即被市場(chǎng)淘汰。通過深入的調(diào)查研究，發(fā)現(xiàn)該制劑存在以下缺陷提取精制工藝落后(采用傳統(tǒng)的水提醇沉法)，藥效成分不明確，服用量大，月良用不方便，療效不確切。由于以上原因，原方的療效沒有得到充分的發(fā)揮。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于克服已有技術(shù)的不足，提供一種能最大限度的保留活性成分、去除雜質(zhì)性成分的用于制備抗哞喘藥物的植物提取物。本發(fā)明的另一目的是提供利用上述制備方法制備的植物提取物的應(yīng)用。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)上述目的一種用于制備抗哞喘藥物的植物提取物，是由紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物按任意比例組成的混合物，所述混合物是由紫花杜鵑植物和矮地茶植物混合后制備的提取物，或者是分別制備紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物再將兩種提取物混合制成。所述由紫花杜鵑植物和矮地茶植物混合后制備的提取物的方法為紫花杜鵑植物與矮地茶植物混合，加水浸泡，再用水提耳又，揭:耳又液過濾，濾液中加入殼聚糖水溶液，混勻，靜置，取上清液濃縮、干燥即得。所述紫花杜鵑植物與矮地茶植物混合的質(zhì)量百分比優(yōu)選為紫花杜鵑20%~90%,矮地茶10%~80%;更優(yōu)選的重量百分比為紫花杜鵑50%~70%,矮地茶30%~50%;最佳的重量百分比為紫花杜鵑50%,矮地茶50%。所述加水浸泡的加水量優(yōu)選為混合物體積5-20倍量的水，浸泡時(shí)間優(yōu)選l~4h,|是取次數(shù)1~5次，每次提取0.5-3小時(shí)。所述提取液過濾之前還可先在20-80。C條件下先將提取液放置一段時(shí)間，再用50-300目紗布過濾。本步驟更有利于提高制備的提取物的純度，進(jìn)而提高藥效。所述加入殼聚糖溶液的優(yōu)選濃度為3~30mg/ml的脫乙酰度為50%98%的殼聚糖的水溶液。所述上清液濃縮之前還可先進(jìn)行純化，有利于提高制備的提取物的純度，進(jìn)而提高藥效，所述純化是將上清液通過孔徑為2000~100000(截留的物質(zhì)分子量大小)有機(jī)膜進(jìn)行過濾，待透過液(即濾液已經(jīng)經(jīng)過濾的液體)體積為上清液體積的50%~95%時(shí)，在截留液(即還沒有經(jīng)過過濾但即將被過濾的上清液)中加入其體積15倍量的水，頂洗(即液體濃縮到一定程度后，加水透析，加水的作用在于稀釋截留液，以使得順利過濾)110次，收集所有透過液進(jìn)行濃縮、干燥，即得提取物的混合物。所述分別制備紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物的方法為制備紫花杜鵑提取物用乙醇提取紫花杜鵑，提取液濃縮成浸膏，浸膏用乙醇溶解，濾過，濾液濃縮至干后再加水溶解，用大孔吸附樹脂以水洗脫，棄去水洗液，再以5~20%乙醇洗脫，棄去5~20°/。乙醇洗脫液，最后以25~80%乙醇洗脫，收集25~80%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，干燥即得；制備矮地茶提取物用乙醇提取矮地茶，提取液濃縮成浸膏，浸膏用乙醇溶解，濾過，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH值至8.0-11.0,有沉淀析出，濾過，取沉淀用乙醇洗滌，洗液與過濾所得的濾液合并，除去乙醇，用水溶解，過濾，濾液有沉淀析出，沉淀干燥即得。在上述制備紫花杜鵑提取物的步驟中所述用乙醇提取紫花杜鵑前可先將紫花杜鵑制成粗粉，再加入其體積8~10倍量的體積百分比濃度為60~80%乙醇進(jìn)行提??；提取次數(shù)2~3次，每次才是取0.5~2小時(shí)。所述將提取液濃縮成浸膏優(yōu)選為濃縮成干浸膏；所述浸膏用乙醇溶解優(yōu)選加入浸膏體積6-12倍量的乙醇(濃度95%)溶解；所述濾過優(yōu)選重復(fù)2~4次。所述濾液濃縮至干后加水溶解的加水量為其體積5-10倍量的水。所述用大孔吸附樹脂以水洗脫的步驟中優(yōu)選以6~14倍樹脂床體積的水洗脫；所述以5~20%乙醇洗脫的步驟中優(yōu)選以6-14倍樹脂床體積的5~20%乙醇洗脫；所述以25~80%乙醇洗脫步驟中優(yōu)選以6~14倍樹脂床體積的25~80%乙醇洗脫。本步驟有利于提高制備的提取物的產(chǎn)率，進(jìn)而節(jié)約成本，提高生產(chǎn)效率。在上述制備矮地茶提取物的步驟中所述用乙醇提取矮地茶前可先將矮地茶制成粗粉，再加入其體積8~10倍量的體積百分比濃度為60~80%乙醇進(jìn)行提取；提取次數(shù)23次，每次提取0.5—2小時(shí)。所述將4是^^液濃縮成浸膏優(yōu)選為濃縮成干浸膏；所述浸膏用乙醇溶解優(yōu)選加入浸膏體積6-10倍量的95%乙醇溶解；所述濾過優(yōu)選重復(fù)2~4次。所述氨7jc優(yōu)選濃氨水(濃度為28%)。所述沉淀用乙醇洗滌時(shí)，用少量乙醇洗滌即可。所述除盡乙醇后加水溶解的加水量為其體積5~10倍量。所述濾液有沉淀析出時(shí)，可先濾出沉淀，濾液繼續(xù)放置，還有沉淀析出，再濾出沉淀，重復(fù)2-5次，合并所有沉淀進(jìn)行干燥。本步驟有利于提高制備的提取物的產(chǎn)率，進(jìn)而節(jié)約成本，纟是高生產(chǎn)效率。本發(fā)明上述制備方法制備的混合提取物中含紫花杜鵑總黃酮5%-60%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素10%~70%;所述的紫花杜鵑總黃酮包括馬特西素、馬特西苷、槲皮素、槲皮苷和/或金絲桃苷。本發(fā)明所述的提取工藝中，介質(zhì)乙醇或水與被提原料的比例采用本領(lǐng)域的習(xí)慣做法，即乙醇或水的用量單位為體積單位，被提原料的用量單位為重量單位。本發(fā)明還提供所述4是取物混合物在制備治療哮喘藥物中的應(yīng)用，特別是在制備治療寒性譯喘藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的植物均為中藥材，紫花杜鵑具有止咳、祛痰功效，矮地茶具有化痰止咳，利濕，活血之功效。本發(fā)明所述的應(yīng)用是由紫花杜鵑和矮地茶的提取物與藥學(xué)上可接受的輔料制成的藥物制劑；所述藥物制劑可以是滴丸劑、片劑、膠嚢劑、顆粒劑或其他任何已有的藥物制劑。所述滴丸劑主要是由紫花杜鵑和矮地茶的混合提取物與PEG4000制成。優(yōu)選的方案是提取物的混合物與輔料按1:3的重量比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成；更具體的制備工藝可參考現(xiàn)有技術(shù)中滴丸劑的制備方法。所述片劑主要是由紫花杜鵑、矮地茶提取物與淀粉制成，優(yōu)選方案是提取物的混合物與淀粉按1:1的重量比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成；更具體的制備工藝可參考現(xiàn)有技術(shù)中片劑的制備方法。本發(fā)明的藥物具有止咳、祛痰的作用，可以綜合緩解孝喘尤其是寒性咳喘的各種癥狀。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果本發(fā)明采用大孔吸附樹脂法提取紫花杜鵑中的有效活性成分(總黃酮)，提取分離效率高，能最大限度的保留活性成分，去除雜質(zhì)性成分。本發(fā)明采用膜分離法精制紫花杜鵑和矮地茶中的有效活性成分(總黃酮、巖白菜素)，精制效率高，能最大p艮度的保留活性成分，去除雜質(zhì)性成分。本發(fā)明的藥物的組分少，制備工藝十分簡單，配方以傳統(tǒng)名方為依托，結(jié)合中醫(yī)藥理論及多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，組方更為科學(xué)合理，治療針對(duì)性強(qiáng)，療效顯著。本發(fā)明引入現(xiàn)代提取精制工藝重新開發(fā)此方，采用大孔吸附樹脂、膜分離等先進(jìn)的提取分離技術(shù)分別提取精制藥材的有效組分。進(jìn)一步將提取精制物與現(xiàn)代制劑技術(shù)相結(jié)合開發(fā)成適宜的中成藥品種，造福于廣大孝喘患者。具體實(shí)施例方式下面通過實(shí)施例的方式進(jìn)一步說明本發(fā)明，并不因此將本發(fā)明限制在這些實(shí)施例的范圍之內(nèi)。所用原料紫花杜鵑藥材購自廣州清平藥材市場(chǎng)，產(chǎn)于廣東；矮地茶藥材購自廣州南北行中藥飲片有限公司，產(chǎn)于福建。實(shí)施例1分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末7kg用60%乙醇回流^是:取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，力卩60%乙醇8倍，提取次數(shù)3次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏12倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加5倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以13倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以8倍樹脂床體積的20%乙醇洗脫，棄去20%乙醇洗脫液，最后以10倍樹脂床體積的30%乙醇洗脫，收集30%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末3kg用60%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加80%乙醇8倍，提取次數(shù)2次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至9，有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入6倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮32%(以,丁計(jì))，巖白菜素12%。將混合提取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成滴丸。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例2分別將紫花杜鵑、矮地茶凈分碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末6kg用70%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，力。75%乙醇10倍，提取次數(shù)3次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏7倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液濃縮至干，加5倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以9倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以9倍樹脂床體積的10%乙醇洗脫，棄去10%乙醇洗脫液，最后以11倍樹脂床體積的35%乙醇洗脫，收集35%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末4kg用70%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加65%乙醇9倍，提取次數(shù)3次，每次l小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏7倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至8,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入8倍量水，溶解，過濾，濾液室溫;故置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)4次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮20%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素15%。將混合提取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例3分別將紫花杜鵑、矮地茶4分碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末2kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，力。75%乙醇8~10倍，提:取次數(shù)2次，每次1.5小時(shí)；將^是耳又液濃縮至干浸膏，加干浸膏8倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)4次，濾液濃縮至干，加10倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以7倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以13倍樹脂床體積的5%乙醇洗脫，棄去5°/。乙醇洗脫液，最后以10倍樹脂床體積的25°/。乙醇洗脫，收集25%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末8kg用80%乙醇回流才是取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加70%乙醇9倍，提取次數(shù)2次，每次1.0小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至10，有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入7倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)5次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮8%(以,丁計(jì))，巖白菜素30%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例4分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末3kg用75%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加60%乙醇9倍，提取次數(shù)2次，每次2小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏11倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)4次，濾液濃縮至干，加6倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以7倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以10倍樹脂床體積的15%乙醇洗脫，棄去15%乙醇洗脫液，最后以12倍樹脂床體積的40%乙醇洗脫，收集40°/。乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末7kg用規(guī)定濃度乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加80°/。乙醇10倍，提取次數(shù)3次，每次l小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏IO倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至11.0,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入9倍量水，溶解，過濾，濾液室溫;故置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮10%(以,丁計(jì))，巖白菜素22%。將各藥材4是取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例s分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末4kg用65%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加65%乙醇8倍，提取次數(shù)2次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏7倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加10倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以8倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以10倍樹脂床體積的20%乙醇洗脫，棄去20%乙醇洗脫液，最后以14倍樹脂床體積的50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末6kg用65%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加60%乙醇8倍，提取次數(shù)2次，每次2小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液力。濃氨水調(diào)節(jié)pH值至8.0,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入10倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)5次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮20%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素16%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例6分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末5kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，力口70%乙醇8倍，提取次數(shù)2次，每次l小時(shí)；將提耳又液濃縮至干浸膏，加干浸膏11倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加6倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以14倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以8倍樹脂床體積的10%乙醇洗脫，棄去10%乙醇洗脫液，最后以ll倍樹脂床體積的50%乙醇洗脫，收集50%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末5kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加80%乙醇10倍，提取次數(shù)3次，每次1.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至8.0,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入5倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)4次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮26%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素9%。將混合提取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例7分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。取紫花杜鵑、矮地茶粗粉4:6混合，加17倍體積的水，浸泡3.5h，提取次數(shù)3次，每次1.2小時(shí)；將提取液放置1小時(shí)(60°C),用紗布150目過濾得紫茶水提液。水提液加入濃度為22mg/ml殼聚糖(脫乙酰度為70%)溶液，攪勻靜置過夜。棄去沉淀，將上清液依次通過孔徑為膜50000、5000、2000的膜，待透過液體積為上樣液60%的時(shí)，加入截留液3倍體積的水，進(jìn)行頂洗8次，收集所有透過液，濃縮，最后減壓干燥，即得提^4勿。以上所得提取物中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮27%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素12%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例8分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末9kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，力。80%乙醇9倍，提取次數(shù)3次，每次l小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏11倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加7倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以13倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以8倍樹脂床體積的20%乙醇洗脫，棄去20%乙醇洗脫液，最后以10倍樹脂床體積的80%乙醇洗脫，收集80%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末lkg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加80%乙醇10倍，提取次數(shù)2次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至11,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入10倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮48%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素3%。將各藥材才是取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例9分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。取紫花杜鵑、矮地茶粗粉2:8混合，加10倍體積的水，浸泡1.5h,提取次數(shù)2次，每次3小時(shí)；將提取液放置3小時(shí)(80°C),用紗布(300目)過濾得紫茶水提液。水提液加入濃度為30mg/ml殼聚糖(脫乙酰度為98%)溶液，攪勻靜置過4復(fù)。棄去沉淀，將上清液依次通過孔徑為100000、50000、5000的膜，待透過液體積為上樣液70%的時(shí)，加入截留液4倍體積的水，進(jìn)行頂洗4次，收集所有透過液，濃縮，最后減壓干燥，即得纟是取物。以上所得提取物中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮6%(以，丁計(jì))，巖白菜素18%。將提取物與與淀粉按l:1.5的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例10分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末5kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加60%乙醇9倍，提取次數(shù)3次，每次1.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏11倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加5倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以7倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以7倍樹脂床體積的5%乙醇洗脫，棄去5%乙醇洗脫液，最后以14倍樹脂床體積的40%乙醇洗脫，收集40%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末5kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加60%乙醇10倍，提取次數(shù)3次，每次2小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏6倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至10,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入9倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)5次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮26%(以,丁計(jì))，巖白菜素13%。將混合提取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g，口服。實(shí)施例11分別將紫花杜鵑、矮地茶4分碎成20目粗粉。取紫花杜鵑、矮地茶粗粉等量混合，加12倍體積的水，浸泡2h，l是取次數(shù)3次，每次1.5小時(shí)；將提取液放置10小時(shí)(20°C),用紗布50目過濾得紫茶水提液。該水提液加入濃度為15mg/ml殼聚糖(脫乙酰度為60%)溶液，攪勻靜置過夜。棄去沉淀，將上清液依次通過孔徑為100000和5000的膜;待透過液體積為上樣液80%的時(shí)，加入截留液4倍體積的水，進(jìn)行頂洗3次，收集所有透過液，濃縮，最后減壓干燥，即得提^F又物。所得提取物中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮20%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素15%。將藥材提取物與PEG4000按1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例12分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末9kg用80°/。乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加60%乙醇9倍，提取次數(shù)2次，每次2小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏8倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加7倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以8倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以12倍樹脂床體積的15%乙醇洗脫，棄去15%乙醇洗脫液，最后以13倍樹脂床體積的75%乙醇洗脫，收集75%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末lkg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加60%乙醇10倍，纟是取次數(shù)2次，每次l小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至9，有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入9倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮55%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素4%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例13分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。耳又紫花杜鵑、矮地茶粗粉按8:2混合，加6倍體積的水，浸泡4h,提取次數(shù)5次，每次3小時(shí)；將提取氣改置24小時(shí)(25°C),用紗布(150目)過濾得紫茶水才是液。水」提液加入濃度為5mg/ml殼聚糖(脫乙酰度為50%)溶液，攪勻靜置過夜。棄去沉淀，將上清液依次通過孔徑為50000和5000的膜，，待透過液體積為上樣液90%的時(shí)，加入截留液5倍體積的水，進(jìn)行頂洗5次，收集所有透過液，濃縮，最后減壓干燥，即得提取物。所得提取物中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮44%(以,丁計(jì))，巖白菜素4%。將才是取物與PEG40004姿1:3的比例混合，再熔融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成。該制劑的用量為每天兩次，每次0.5g,口服。實(shí)施例14分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末2kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加60%乙醇8倍，提:取次數(shù)2次，每次l小時(shí)；將才是耳又液濃縮至干浸膏，加干浸膏7倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加6倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以8倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以10倍樹脂床體積的15%乙醇洗脫，棄去15%乙醇洗脫液，最后以6倍樹脂床體積的65%乙醇洗脫，收集65%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末8kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加70%乙醇9倍，提取次數(shù)2次，每次0.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏9倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至8,有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入8倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮8%(以,丁計(jì))，巖白菜素50%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例15分別將紫花杜鵑、矮地茶粉碎成20目粗粉。將粉碎紫花杜鵑粉末8kg用75%乙醇回流提取并進(jìn)一步用大孔吸附樹脂純化，加70%乙醇9倍，提取次數(shù)3次，每次1.5小時(shí)；將提取液濃縮至干浸膏，加干浸膏IO倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)3次，濾液濃縮至干，加7倍量水溶解，上大孔吸附樹脂，以14倍樹脂床體積的水洗脫，棄去水洗液，再以7倍樹脂床體積的10%乙醇洗脫，棄去10%乙醇洗脫液，最后以13倍樹脂床體積的60%乙醇洗脫，收集60%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，減壓干燥即得；將矮地茶粉末2kg用80%乙醇回流提取并進(jìn)一步用濃氨水調(diào)節(jié)pH值精制，加60%乙醇9倍，纟是取次數(shù)3次，每次2小時(shí)；將提:f又液濃縮至干浸膏，加干浸膏7倍量乙醇溶解，濾過，重復(fù)2次，濾液加濃氨水調(diào)節(jié)pH值至9，有沉淀析出，濾過，沉淀用少量乙醇洗滌，洗液與濾液合并，減壓濃縮除盡乙醇后，加入9倍量水，溶解，過濾，濾液室溫放置過夜，有沉淀析出，濾過，濾液放置，仍有沉淀析出，反復(fù)3次。合并沉淀干燥即得。將以上所得的紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物混合后，其中主要有效成分的質(zhì)量百分含量為紫花杜鵑總黃酮42%(以蘆丁計(jì))，巖白菜素4%。將混合提取物與與淀粉按1:1的比例混合，加水適量后整粒，再加入羧甲基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。該制劑的用量為每天兩次，每次3片，口服。實(shí)施例16本發(fā)明提取物對(duì)組胺、乙酰膽堿致豚鼠離體氣管收縮的影響豚鼠，體重300士50g，雄性。擊斃后立即在腹面正中切開頸部皮膚和皮下組織，分離氣管，自曱狀軟骨下至氣管分叉處剪下全部氣管，置水冷充氧的克-亨氏液中剪除氣管周圍結(jié)締組織，然后在氣管的腹面(軟骨環(huán)面)縱行切開，再以2-3個(gè)軟骨環(huán)的間隔行橫切，將取下的氣管平分3段，每段氣管片在其縱切口處用針線縫上，相互連成一串，即成氣管片標(biāo)本。將標(biāo)本放入盛有40ml克-亨氏液的浴槽中。下端固定于通氣鉤上，上端以手術(shù)線連至張力換能器上，使用大華記錄儀記錄張力變化。浴槽內(nèi)溫度控制在37度并持續(xù)供氧，標(biāo)本前負(fù)荷為lg法碼。標(biāo)本在營養(yǎng)液中平衡l小時(shí)，其中換液3次。待張力穩(wěn)定后，向浴槽中加入0.5ml濃度為320ug/ml的組胺(His)(浴槽內(nèi)組織胺終濃度為4ug/ml),使氣管條收縮至最大效應(yīng)處，隨后加入HS100ul(浴槽內(nèi)終濃度為50ug/ml),待氣管舒張并穩(wěn)定后用營養(yǎng)液沖洗三次,再穩(wěn)定15分鐘。同法加入實(shí)施例1的^是取物混合物，使浴槽內(nèi)終濃度為10ug/ml,20ug/ml,40ug/ml，80ug/ml,分別記錄其曲線高度，求抑制率，用Bliss程序計(jì)算出提取物的ICso。用乙酰膽堿(Ach),重復(fù)上述實(shí)驗(yàn)。求出提取物抑制率(％)及ICso值。試驗(yàn)結(jié)果如表l、表2所示表l提取物對(duì)組胺引起離體氣管收縮的影響(；±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>表2提取物對(duì)Ach引起離體氣管收縮的影響(；±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>實(shí)施例17本發(fā)明提取物對(duì)豚鼠過敏性津喘的保護(hù)作用(引喘法)將體重150-200g的豚鼠，置于容積為4L的噴霧箱內(nèi)，以53.3-66.6KPa(400-500mmHg)壓力噴入2%氯化乙酰膽堿和0.1%磷酸組織胺等溶劑混合液，噴入持續(xù)時(shí)間15s。觀察豚鼠引喘潛伏期并記錄，大于120s的刪除。按引喘潛伏期大小將動(dòng)物均衡分為6組，每組10只。即空白對(duì)照組(0.5。/。CMC-Na),實(shí)施例2^是取物低、中、高劑量組(30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg),百喘朋片組(85mg/kg),克喘王組(120mg/kg)。各組動(dòng)物連續(xù)灌胃給予相應(yīng)藥物l周，每天l次(給藥容積為lml/100g),末次給藥后1小時(shí)測(cè)引喘潛伏期。<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>給藥組與空白組比較"P〈0.05"PO.01試驗(yàn)結(jié)果如表3所示,連續(xù)l周灌胃給予提取物，60、120mg/kg劑量組對(duì)氯化乙酰膽堿和磷酸組織胺等溶劑混合液引發(fā)的豚鼠哞喘潛伏期有顯著延長作用。實(shí)施例18本發(fā)明藥物對(duì)肺溢流量的影響選取性Wistar大白鼠180士20g,腹腔注射卵白蛋白O.lmg和氬氧化鋁凝膠l.Omg,空白對(duì)照組注射等體積生理鹽水。2周后用戊巴妥鈉麻醉(30mg/kg),頸部手術(shù)，氣管插管，連人工呼吸機(jī)(潮氣量，5ml，頻率為80次/分)接肺溢流裝置，(瓶內(nèi)液面高度為10cm),胸壁造瘺，造成人工氣胸，以抑制自發(fā)呼吸，通過呼吸換氣器與記錄儀相連，待溢流氣量(曲線)穩(wěn)定后，夾閉氣管觀察記錄曲線的變化，待恢復(fù)正常后，靜脈注射卵白蛋白1.5mg/kg進(jìn)行抗原攻擊，空白對(duì)照組給等體積生理鹽水，在攻擊前提前7天灌胃給藥，每天一次?？瞻讓?duì)照組和模型對(duì)照組灌胃0.5CMC-Na(20ml/kg)、實(shí)施例3的提取物設(shè)三劑量組，分別為35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg,另設(shè)咳喘王140mg/kg,百喘朋100mg/kg組。連續(xù)給藥7天，于末次給藥后60分鐘進(jìn)行抗原攻擊。試驗(yàn)結(jié)果如表4所示，在所選劑量范圍內(nèi)，藥材總提取物70mg/kg和140mg/kg顯著降低肺溢流量，與對(duì)照組比較有非常顯著差異。表4總提取物對(duì)致敏麻醉大鼠肺溢流的影響(^±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>給藥組與模型組比較"P0.05"PO.01實(shí)施例19本發(fā)明提取物對(duì)小鼠咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)的影響將120只昆明種小白鼠按體重、性別均衡分為6組，每組20只。即空白對(duì)照組(0.5%CMC-Na)、實(shí)施例4的提取物高、中、低(50mg/kg、100mg/kg、200mg/kg)劑量組、克喘王組(200mg/kg)。各組動(dòng)物每天灌胃給予相應(yīng)藥物，連續(xù)7天，末次給藥后30分鐘，將動(dòng)物置于倒置的500ml燒杯內(nèi)，放一棉球(內(nèi)含0.5ml氨水)，觀察和記錄小鼠的咳嗽潛伏期和3min內(nèi)咳嗽次數(shù)。試驗(yàn)結(jié)果如表5所示，結(jié)果表明藥材總提取物IOO、200mg/kg劑量與對(duì)照組比較能顯著延長小鼠咳嗽潛伏期，顯著降低3min內(nèi)咳嗽次數(shù)。表5總提取物對(duì)氨水致小鼠咳嗽次數(shù)和咳嗽潛伏期的影響(x±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>給藥組與空白組比較""p0.05**p<0.01*"p<0.001實(shí)施例20本發(fā)明提取物對(duì)卵白蛋白氣霧吸入致喘豚鼠的影響取150-200g健康豚鼠50只，按體重、性別均衡分為5組，分別為空白對(duì)照組(0.5%CMC-Na)、實(shí)施例5的提取物高、中、低(30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg)劑量組，克喘王(120mg/kg)組。給藥前各組豚鼠腹腔注射4°/0氪氧化鋁凝膠0.2mL,用4。/。卵白蛋白生理鹽水0.2mL作大腿外側(cè)肌肉注射致敏動(dòng)物連續(xù)3天，致敏第8天起灌胃給藥，連續(xù)7天，末次給藥后1小時(shí)每鼠放入5000mL大小玻璃罩內(nèi)，用2%卵白蛋白生理鹽水進(jìn)行超聲霧化，向玻璃罩內(nèi)均勻噴霧lmin,記錄6min內(nèi)動(dòng)物出現(xiàn)喘息性抽搐的潛伏期及發(fā)生i^失倒i"木克的動(dòng)物數(shù)，各組間差別分別采用f檢驗(yàn)和^檢驗(yàn)。結(jié)果見表6。表6總提取物對(duì)卵白蛋白氣霧吸入致喘豚鼠的影響(x±SD)組別動(dòng)物數(shù)劑量抽搐潛伏期跌倒休克數(shù)(n)(mg/kg)(s)(只)對(duì)照組10一136.3±38.591030149.6±25.68提取物1060178.4±35.2'10120184.0±51.3*3克喘王10120140.6±37.96與空白組比較*P<0.05結(jié)果表明提取物30mg/kg、60mg/kg、120mg/kg連續(xù)灌胃7天對(duì)卵白蛋白氣霧吸入致喘豚鼠抽搐潛伏期有顯著延長作用，并減少發(fā)生跌倒休克的動(dòng)物數(shù)。實(shí)施例21本發(fā)明提取物的祛痰作用取18-22g健康昆明種小鼠50只，雌雄各半，按體重、性別均衡分5組，空白組對(duì)照組(0.5CMC-Na)、實(shí)施例6的提取物高、中、低劑量組(50mg/kg，100mg/kg,200mg/kg)、復(fù)方甘草片組(180mg/kg)。連續(xù)灌胃給藥7天，末次給藥后30min腹腔注射5%酚紅生理鹽水0.2ml/10g，30分后處死小鼠并分離氣管，剪下自曱狀軟骨至氣管分支處的一段氣管，放入盛有3ml生理鹽水的試管中，再加入O.lml5%碳酸氫鈉溶液，離心后耳又上清液，于546nm處測(cè)OD值。根據(jù)酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線，折算出酚紅含量。結(jié)果見表7。酚紅標(biāo)準(zhǔn)曲線Y=0175X-0.112,r=0.9976Y:OD值X:酚紅含量(ug/ml)由表7可以看出藥材總提取物200mg/kg能夠增加小鼠氣管酚紅排泌量，與空白對(duì)照組比較差異顯著,提示其具有祛痰作用。表7總提取物對(duì)小鼠氣管酚紅排泌量的影響(^±SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>與空白組比4交*P<0.05實(shí)施例22新工藝提取物與原工藝提取物藥效比較本實(shí)施例中拔_取物A為2005版《中華人民共和國藥典》規(guī)定的方法制得的提耳又物，提取物B為實(shí)施例8制得的提取物，提取物C為實(shí)施例7制得的提取物。(1)小鼠濃氨水噴霧引咳法雄性NIH小鼠50只，18~22g,隨機(jī)分為5組，分組和給藥情況見表8。灌胃給藥(l次)l小時(shí)后，將受試小鼠放入誘咳引喘儀(型號(hào)YLS-8A)中，每次在霧化杯內(nèi)加濃氨水(25%)lml誘咳，刺激5秒鐘后，觀察記錄2min內(nèi)小鼠首咳時(shí)間和咳嗽次數(shù)，將觀測(cè)指標(biāo)統(tǒng)計(jì)為均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差(7±幼)后進(jìn)行組間差異的t-檢驗(yàn)，結(jié)果見表8。表8新舊工藝提取物對(duì)濃氨水引起的小鼠咳嗽的止咳作用(X±S￡>)<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>由上表可知，提取物A、B、C首咳時(shí)間與溶媒對(duì)照組比較，提取物C(P<0.05)，提取物B(P<0.01)顯著延長；2min內(nèi)咳嗽次數(shù)，各組與溶媒對(duì)照組比較，均顯著減少(P〈0.05);陽性對(duì)照藥組首咳時(shí)間和2min內(nèi)咳嗽次數(shù)與溶々某對(duì)照組比較，也顯著延長或減少(分別為P<0.001，P<0.05)。(2)豚鼠枸櫞酸噴霧引咳法健康豚鼠，體重170~200g，雌雄不拘，各受試豚鼠逐一用誘咳引喘儀誘咳，每次在霧化杯中加入17.5%枸櫞酸溶液2ml,噴霧30秒，5min內(nèi)咳嗽次數(shù)少于IO次者淘汰。合格者隨機(jī)分為5組，分組和給藥情況見表2。灌胃給藥(1次)lh后，相同條件下再次引咳，記錄首咳時(shí)間和5min內(nèi)咳嗽次凄t,將首咳時(shí)間和5min內(nèi)咳嗽次數(shù)統(tǒng)計(jì)為均值土標(biāo)準(zhǔn)偏差(歹±幼)后進(jìn)行組間差異的t-檢驗(yàn)，結(jié)果見表9。表9新舊工藝提取物對(duì)枸櫞酸溶液引起的豚鼠咳嗽的止咳作用(X±5^)<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>由上表可知，不同工藝提取物與溶媒對(duì)照組比較，首咳時(shí)間和5min內(nèi)咳嗽次數(shù)均顯著延長或減少(P<0.05);陽性對(duì)照組與溶媒對(duì)照組比較，首咳時(shí)間和5min內(nèi)咳軟次凄t均才及顯著地延長或減少(P<0.001)。(3)豚鼠組胺噴霧引喘法實(shí)驗(yàn)健康豚鼠，150g~180g,雌雄不拘，逐一用誘咳引喘儀引喘，每次在霧化杯中加入lmg/ml組胺lml,噴霧時(shí)間15秒，觀察時(shí)間150秒，超過150秒不出現(xiàn)抽搐、跌倒者視為不敏感，予以剔除。合格者隨機(jī)分為5組，分組和給藥情況見表3。實(shí)驗(yàn)第一日，按上述條件逐一測(cè)定、記錄豚鼠出現(xiàn)譯喘反應(yīng)的時(shí)間(引喘潛伏期)。第二日灌胃給藥(l次)l小時(shí)后，再次在相同條件下逐一測(cè)定豚鼠的引喘潛伏期，大于6min按6min計(jì)算。將引喘潛伏期統(tǒng)計(jì)為均值士標(biāo)準(zhǔn)偏差(f土幼)后進(jìn)行組間差異的t-檢驗(yàn)，結(jié)果見表10。表10新舊工藝提取物對(duì)豚鼠組胺噴霧引喘的平喘作用(義土幼)組別動(dòng)物數(shù)(n)劑量組量(mg/kg)引喘潛伏期(s)給藥前給藥后溶媒對(duì)照1010ml/kg95.10±13.1492.80±11.82提取物A1030071.20±9.82140.60±12.99*提取物B1030081.90±9.95209.80±111.60**提取物C1030087.70±9.71149.90±77.56*氨茶堿組105087.60±8.2136o±o***注與溶i某對(duì)照組相比，*:P<0.05,**:P<0.01,***:P<0.001由上表可知，提取物A、C與溶媒對(duì)照組比較，引喘潛伏期顯著延長(P<0.05);提取物B與溶媒對(duì)照組比較，引喘潛伏期極顯著延長(P<0.01);氨茶堿(0.05g/kg)組與溶媒對(duì)照組比較，引喘潛伏期也極顯著地延長(P<0.001)。權(quán)利要求1.一種用于制備抗哮喘藥物的植物提取物，其特征在于由紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物按任意比例組成的混合物，所述混合物是由紫花杜鵑植物和矮地茶植物混合后制備的提取物，或者是先分別制備紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物再將兩種提取物混合制成。2.如權(quán)利要求1所述植物提取物，其特征在于所述將紫花杜鵑植物和矮地茶植物混合后制備提取物的步驟為紫花杜鵑植物與矮地茶植物混合，加水浸泡，再用水提取，提取液過濾，濾液中加入殼聚糖水溶液，混勻，靜置，取上清液濃縮、干燥即得。3.如權(quán)利要求2所述的提取物，其特征在于所述紫花杜鵑植物與矮地茶植物混合的質(zhì)量百分比為紫花杜鵑20%~90%，矮地茶10%~80%;所述加水浸泡的加水量優(yōu)選為混合物體積5~20倍量的水，浸泡時(shí)間優(yōu)選l~4h,提耳又次婆tl5次，每次提取0.53小時(shí)。4.如權(quán)利要求2所述的提取物，其特征在于所述加入殼聚糖溶液是加入濃度為3~30mg/ml的脫乙酰度為50%~98%的殼聚糖水溶液。5.如權(quán)利要求2所述的揭:取物，其特征在于所述上清液濃縮之前先進(jìn)行純化，所述純化是將上清液通過孔徑為2000~100000的有機(jī)膜過濾，當(dāng)透過液體積為上清液體積的50%95%時(shí)，在截留液中加入其體積15倍量的水，頂洗110次，收集所有透過液。6.如權(quán)利要求1所述植物提取物，其特征在于所述分別制備紫花杜鵑提取物和矮地茶纟是取物的方法為制備紫花杜鵑提取物用乙醇提取紫花杜鵑，提取液濃縮成浸膏，浸膏用乙醇溶解，濾過，濾液濃縮至干后再加水溶解，用大孔吸附樹脂以水洗脫，棄去水洗液，再以5~20。/o乙醇洗脫，棄去5~20%乙醇洗脫液，最后以25~80%乙醇洗脫，收集25~80%乙醇洗脫液，揮盡乙醇，干燥即得；制備矮地茶提取物用乙醇提取矮地茶，提取液濃縮成浸膏，浸膏用乙醇溶解，濾過，濾液用氨水調(diào)節(jié)pH值至8.0-11.0,有沉淀析出，濾過，濾液除去乙醇，加水，過濾，濾液有沉淀析出，沉淀干燥即得。7.如權(quán)利要求6所述植物提取物，其特征在于所述制備紫花杜鵑提取物的步驟中所述用乙醇提取紫花杜鵑前先將紫花杜鵑制成粗粉，再加入其體積8~10倍量的體積百分比濃度為60-80%乙醇進(jìn)行提取；提取次數(shù)2-3次，每次提取0.5~2小時(shí)；所述將提取液濃縮成浸膏是濃縮成干浸膏；所述浸膏用乙醇溶解是加入浸膏體積6~12倍量的乙醇溶解；所述濾液濃縮至干后加水溶解的加水量為其體積5~10倍量的水；所述用大孔吸附樹脂以水洗脫的步驟中是以6~14倍樹脂床體積的水洗脫；所述以5~20%乙醇洗脫的步驟中是以6-14倍樹脂床體積的5~20%乙醇洗脫；所述以25~80%乙醇洗脫步驟中是以6-14倍樹脂床體積的25~80%乙醇洗脫。8.如權(quán)利要求6所述植物提取物，其特征在于所述制備矮地茶提取物的步驟中所述用乙醇提取矮地茶前先將矮地茶制成粗粉，再加入其體積8~10倍量的體積百分比濃度為60~80%乙醇進(jìn)行提取;提取次數(shù)2~3次，每次提取0.5~2小時(shí)；所述將提取液濃縮成浸膏是為濃縮成干浸膏；所述浸膏用乙醇溶解是加入浸膏體積6~10倍量的乙醇溶解；所述氨水是濃氨水；所述除去乙醇后加水的量為濾液體積的5-10倍量。9.權(quán)利要求1所述提取物在制備治療哞喘藥物中的應(yīng)用，是將權(quán)利要求1所述提^4勿與藥學(xué)上可接受的輔料制成的藥物制劑；所述藥物制劑是滴丸劑、片劑、膠嚢劑、顆粒劑或其他常規(guī)藥物制劑。10.如權(quán)利要求要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述滴丸劑是由權(quán)利要求1所迷提取物與PEG4000和其他常規(guī)輔料按提取物輔料=1:3的重量比例混合，再炫融，滴入冷卻劑液體石蠟中制成；所述片劑是權(quán)利要求1所述提取物淀粉按l:1的重量比例混合，加水后整粒，再加入羧曱基淀粉鈉和硬脂酸鎂壓片、包衣制成。全文摘要本發(fā)明提供了一種用于制備抗哮喘藥物的植物提取物，是由紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物按任意比例組成的混合物，所述混合物是由紫花杜鵑植物和矮地茶植物混合后制備的提取物，或者是先分別制備紫花杜鵑提取物和矮地茶提取物再將兩種提取物混合制成。本發(fā)明還提供所述提取物在制備治療哮喘藥物中的應(yīng)用，是將所述提取物與藥學(xué)上可接受的輔料制成的藥物制劑；所述藥物制劑是滴丸劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑或其他常規(guī)藥物制劑。本發(fā)明的提取物的組分少，制備工藝十分簡單，配方以傳統(tǒng)名方為依托，結(jié)合中醫(yī)藥理論及多年的臨床經(jīng)驗(yàn)，組方更為科學(xué)合理，治療針對(duì)性強(qiáng)，療效顯著。文檔編號(hào)A61K36/45GK101543524SQ20091003898公開日2009年9月30日申請(qǐng)日期2009年4月24日優(yōu)先權(quán)日2009年4月24日發(fā)明者馮毅凡,青孟,石忠峰,亮韓申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院