專利名稱：：用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是涉及一種以中藥為原料而制成的治療復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
：復(fù)發(fā)性口瘡(簡稱R0U)，是指具有周期發(fā)作性特點的口腔粘膜局限性潰瘍性損害，發(fā)病率高，一般人群的患病率不低于10%。雖然全身狀況無明顯影響，但經(jīng)過一定間歇期常再復(fù)發(fā)，重者幾天1次，乃至此起彼伏，而無間歇期，妨礙飲食及說話，患者異常痛苦。隨著病程延長，潰瘍面積、數(shù)目可增大、增多，愈合時間亦趨延長。本病致病原因復(fù)雜，尚未得出一致結(jié)論，國內(nèi)外尚無理想的治療藥物和方法。目前的治療現(xiàn)狀是，用藥廣而雜，缺乏特效，尤其是控制口瘡復(fù)發(fā)，尤為困難。治療復(fù)發(fā)性口瘡，根據(jù)治療目的的不同可采用兩種方法。一是采用局部治療，立足于緩解疼痛和促進潰瘍愈合，乃治標之法，不能控制復(fù)發(fā)；二是通過全身治療(口服或注射藥物)調(diào)節(jié)整體功能，逐漸延長復(fù)發(fā)周期，以至完全控制復(fù)發(fā)，此為治本之舉，適用于比較頑固的復(fù)發(fā)性口瘡患者。全身性治療藥物的療效尚不夠理想，用藥后控制復(fù)發(fā)達半年以上者比例不高，如常用的免疫類藥物一般在4050%左右。因此，如何控制口瘡復(fù)發(fā)成為一個全球性的醫(yī)學難題。長期臨床實踐證明，中醫(yī)藥具有解決這一難題的優(yōu)勢。促進潰瘍愈合和控制復(fù)發(fā)，是治療R0U的兩大目標，中醫(yī)專方專藥針對本病的基本病理特征或某一主證而設(shè)，針對性強，可以制成固定劑型，便于長期服用，所以尋求有特效、高效、穩(wěn)效的專方專藥是ROU臨床研究的發(fā)展趨勢，也是發(fā)揮中醫(yī)藥治療ROU優(yōu)勢的有效途徑。因此，本研究對提高中醫(yī)藥防治復(fù)發(fā)性口瘡的水平及加快中藥現(xiàn)代化與產(chǎn)業(yè)化進程，有著極其重要的意義。
發(fā)明內(nèi)容技術(shù)問題本發(fā)明提供一種用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑及其制備方法和應(yīng)用。技術(shù)方案一種用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑，按質(zhì)量份包括以下藥材黃連1-3份、山梔8-10份、丹皮8-10份、麥冬8-10份、升麻4-6份、蘆根12-15份、生蒲黃8-10份。用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，工藝步驟為稱取防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑的各藥味，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物采用P-環(huán)糊精包合得P-環(huán)糊精包合物；其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；醇沉上清液濃縮后與上述水提液I合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;將上步所得濃縮液噴霧干燥成干粉；加上述P_環(huán)糊精包合物和輔料，混勻，干法制粒，分裝，質(zhì)檢，貼簽，即得顆粒劑。P_環(huán)糊精包合工藝為采用飽和水溶液法，以610倍結(jié)晶物質(zhì)量的13_環(huán)糊精包合，306(TC恒溫條件下連續(xù)攪拌13小時，攪拌轉(zhuǎn)速為80120轉(zhuǎn)/分鐘，O5t:冷藏1236小時，所得結(jié)晶物真空干燥28小時，得白色疏松狀包合物粉末，即13_環(huán)糊精包合物。用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于工藝步驟為稱取防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑的各藥味，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物乙醇溶解得醇液II;其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；醇沉上清液濃縮后與上述水提液1、醇液II合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;濃縮液加入輔料，加水稀釋至1000mL，分裝，即得口服液、合劑或水劑。上述水提取工藝為水煎煮二次，第一次812倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時，第二次610倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時。上述乙醇沉淀中乙醇的體積濃度為60%80%，放置1224小時。輔料是淀粉或糊精。用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜病中的應(yīng)用。用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜扁平苔蘚(0LP)、慢性舌炎、舌灼痛綜合征、白塞氏病口腔潰瘍、慢性牙齦炎中的應(yīng)用。有益效果根據(jù)清胃瀉火養(yǎng)陰法，研制防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液。臨床治療復(fù)發(fā)性、頑固性口瘡83例，并與用口炎清顆粒治療的32例作對照觀察。結(jié)果，近期療效方面，藥后4天潰瘍愈合率治療組達58.2%，明顯優(yōu)于對照組的30%，P<0.01?？诏徲蠒r間明顯縮短，治療組藥后潰瘍愈合時間4.24±2.36天，明顯短于對照組的5.47±1.81天，P<0.01。遠期療效方面，治療組愈顯率(治療后半年至l年不復(fù)發(fā))達60.2%，總有效率達91.6%，明顯優(yōu)于對照組的34.4%和81.3%，P<0.01。治療組即使有50例仍有復(fù)發(fā)，但間歇期延長到169±123.3天，明顯優(yōu)于對照組的114.7±96.5天，P<0.05。復(fù)發(fā)病例的局部癥狀改善程度明顯優(yōu)于對照組，如潰瘍數(shù)目治療后減少為1.7±0.9個，明顯少于對照組的2.14±0.64個；潰瘍直徑治療后縮小為2.1±1.3mm，明顯小于對照組的2.7±0.8mm;疼痛積分減少為1.1±0.6分，明顯低于對照組的1.6±0.5分；潰瘍愈合天數(shù)減少至6.1±2.2天，明顯短于對照組的7.3±1.6天，P均<0.01。在改善口中熱臭、口干渴、大便干結(jié)等全身癥狀及病理性舌質(zhì)方面，也優(yōu)于對照組。防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對心脾積熱和陰虛火炎型口瘡效果最為顯著。兩證型的愈顯率分別達66.7%和64.5%。用藥療程以2個月為最佳，其愈顯率達77.3%，總有效率達100%。臨床免疫功能檢查，發(fā)現(xiàn)防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液具有調(diào)節(jié)人體整體和口腔局部免疫功能的作用。能明顯降低血清IgG、補體C3水平，調(diào)節(jié)T淋巴細胞亞群的平衡，提高CD4和CD4/CD8比值；能明顯降低口腔唾液中IgG、IgM含量，升高補體Q含量，提示藥物能抑制過亢的體液免疫反應(yīng)，增強細胞免疫功能。研究表明該制劑具有較好的臨床療效，且藥源豐富、價格低廉、服用方便、無明顯毒副作用，在國內(nèi)外有廣闊的市場和良好的開發(fā)前景，推廣應(yīng)用后將會取得顯著的社會效益和經(jīng)濟效益。該制劑的治療特征是內(nèi)外合治、標本兼顧。防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑水溶性好，患者可通過特殊的服藥方法-發(fā)作期服藥含漱后咽下，從而做到局部治療和全身治療的結(jié)合。通過內(nèi)外合治，標本兼顧達到控制口瘡復(fù)發(fā)，減少復(fù)發(fā)次數(shù)，延長復(fù)發(fā)周期，減輕發(fā)作程度的目的。該制劑的另一治療特征是能夠上清下導(dǎo)，予邪出路。防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑能顯著地改善口中熱臭、心煩發(fā)熱、大便干結(jié)、小便黃赤等癥狀，既可使內(nèi)郁之火從上而清、從外而發(fā)，又能使之通過兩便下導(dǎo)。該制劑還具有異病同治的特征，適合于多種口腔粘膜病，如復(fù)發(fā)性口腔潰瘍、口腔粘膜扁平苔蘚(OLP)、慢性舌炎、舌灼痛綜合征、白塞氏病口腔潰瘍、慢性牙齦炎等多種口腔粘膜病。該制劑在緩解期堅持服藥，可以鞏固療效，防止復(fù)發(fā)。圖1兩組近期療效(潰瘍愈合時間)對比圖。圖2兩組遠期療效(潰瘍愈合時間)對比圖。圖3治療組治療前后口瘡局部癥狀比較。圖4兩組治療后口瘡局部癥狀比較。具體實施例方式實施例1:防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液的制備方法丹皮2Kg，加20L水，浸泡30min，水蒸氣蒸餾提取蒸餾液8.0小時，所得蒸餾液低溫靜置24小時后，減壓抽濾得結(jié)晶物0.55Kg和抽濾液，抽濾液低溫減壓(-0.085Mpa，708(TC)濃縮后得水提液I;所得結(jié)晶物置干燥器干燥，稱重，按1:6(結(jié)晶量無水乙醇)加入無水乙醇分散結(jié)晶，得無水乙醇分散溶液，采用飽和水溶液法以io倍量e-環(huán)糊精包合，45t:恒溫條件下連續(xù)攪拌1.5小時，攪拌轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分鐘，O5t:冰箱冷藏24小時，析晶，抽濾，少量純化水和乙酸乙酯洗滌沉淀至滴液澄清，所得結(jié)晶物真空干燥4小時，得白色疏松狀包合物粉末，即P-環(huán)糊精包合物5.85Kg，備用；黃連等其余六味10Kg，加水煎煮二次，第一次100L水，煎煮2.0小時，第二次80L水，煎煮1.5小時，煎液濾過，濾液合并，減壓濃縮至相對密度為1.051.IO(室溫)，放冷至室溫，緩緩加入乙醇使含醇量體積濃度達到80%，充分攪拌，靜置12小時，濾過，濾液減壓(-0.085Mpa，7080°C)回收乙醇至無醇味，得清膏II;合并上述水提液I和清膏II，加水稀釋至相對密度1.021.06(室溫)，噴霧干燥，得干粉，加入上述P_環(huán)糊精包合物、適量糊精480克，混勻，干法制粒(滾壓法，20-60目)，整粒，分裝(每袋重8.0g)，即得。實施例2:防治復(fù)發(fā)性口瘡藥效試驗結(jié)果—、防治復(fù)發(fā)性口瘡對石碳酸所致金黃地鼠口腔潰瘍病理形態(tài)學及免疫器官指數(shù)的影響取金黃地鼠120只，隨機分為6組，每組20只(空白對照組為16只)。除空白對照組外，各組動物于攻毒前36小時、12小時給予相應(yīng)治療藥物。攻毒時，以乙醚麻醉金黃地鼠，用兩把止血鉗輕輕拉出右側(cè)頰囊，固定，用一個長6cm、內(nèi)徑0.8cm的玻璃管，內(nèi)置一小棉球，使小棉球的底部與玻璃管下口取平，繼而在管內(nèi)滴入90%的石碳酸溶液至剛浸透小棉球為止，然后將內(nèi)有石碳酸棉球的玻璃管下端平置于5金黃地鼠右側(cè)口角內(nèi)2mm處的頰粘膜上，燒灼45秒鐘。攻毒后繼續(xù)按分組給予相應(yīng)治療藥物或生理鹽水。(1)模型組給予生理鹽水5ml/只；(2)防治復(fù)發(fā)性口瘡高劑量組給予防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液10.8g生藥/kg體重(相當于人臨床用藥劑量的10倍)；(3)防治復(fù)發(fā)性口瘡中劑量組給予防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液5.4g生藥/kg體重(相當于人臨床用藥劑量的5倍)；(4)防治復(fù)發(fā)性口瘡小劑量組給予防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液2.7g生藥/kg體重(相當于人臨床用藥劑量的2.5倍)；(5)陽性藥物對照組給予口炎清顆粒3.5g/kg體重(相當于人臨床用藥劑量的5倍)；(6)空白對照組給予生理鹽水5ml/只。各組動物均灌胃組藥，給藥體積為5ml/只，l次/日，連續(xù)7日。觀察小鼠病理形態(tài)學及免疫器官指數(shù)，結(jié)果見表1-1、1-2.表1-1攻毒用藥后各組不同階段口腔潰瘍面積(X±S)比較<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與模型組相比較，**P<0.05、*P<0.01。表1-2對金黃地鼠免疫器官指數(shù)的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>注與模型組組相比，*P<0.05、**P<0.01。肉眼觀察結(jié)果表明，攻毒后第2日，4個用藥組動物潰瘍面積與模型組相比，無顯著性差異。攻毒第4日起，模型組病灶逐漸擴大、加深，炎癥反應(yīng)加重，而治療組病變?yōu)檩p，其潰瘍面積未見擴大，而有逐漸縮小之趨勢，尤其以防治復(fù)發(fā)性口瘡高、中劑量組為明顯。表明防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液通過抗炎、抗?jié)B出，減輕其變性、壞死的病理過程，從而顯著縮小由石炭酸所致的金黃地鼠口腔潰瘍面積，加速其修復(fù)愈合。防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液三個劑量組及口炎清組均可使模型動物胸腺和脾臟等免疫器官的指數(shù)增加，提示藥物對機體具有免疫調(diào)節(jié)作用。二、防治復(fù)發(fā)性口瘡對石碳酸所致金黃地鼠口腔潰瘍組織中炎癥介質(zhì)的影響動物分組及攻毒、給藥同實驗一。處死動物，迅速分離金黃地鼠右側(cè)頰囊病損處粘膜，取病變組織約O.3g，濾紙吸干水分后，即刻液氮冷凍固定。測定PGE2、TXB2及組織胺。結(jié)果見表2-l、2-2。表2-1對病變粘膜組織TXB2、PG2E含量(X±S)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>注與空白對照組相比，##P<0.01;與模型組相比，**P<0.01、*P<0.05。本項研究結(jié)果表明，動物造模后，口腔粘膜病損組織中PGE2、TXB2含量明顯高于正常值，提示動物造模后，炎癥介質(zhì)大量產(chǎn)生。防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液給藥組口腔粘膜組織PGE2、TXB2含量明顯低于模型組，表明其通過抑制PEG2、TXB2炎癥介質(zhì)釋放而減輕炎癥反應(yīng)，從而減輕粘膜組織的變性壞死過程。表2-2對病變粘膜組織中組織胺含量(X±S)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注與空白對照組相比，#P<0.01;與模型組相比較，*P<0.05。本項研究結(jié)果模型組動物病變組織中組織胺含量明顯升高，與形態(tài)學變化如重度水腫、血管擴張、充血等早期炎癥反應(yīng)相吻合。防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液治療組組織胺變化不大，結(jié)合其形態(tài)學變化，可以認為防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液通過清除致炎因子而間接抑制了組織胺的釋放，從而減輕粘膜組織的變性壞死過程。三、防治復(fù)發(fā)性口瘡對石碳酸所致金黃地鼠口腔潰瘍模型的抗氧化作用研究動物分組及攻毒、給藥同實驗一。最后一次給藥后1小時，金黃地鼠眼眶取血lml，3000轉(zhuǎn)/分離心10分鐘，取血清0.25ml待測。S0D、MDA含量測定方法按試劑盒的操作要求進行。結(jié)果見表3-1.表3-1對血清S0D、MDA含量(X±S)的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>組別動物數(shù)SOD(NU/ml)MDA(Nmol/ml)防治復(fù)發(fā)性口瘡中劑量16150.24±14.58**10.17±3.78*防治復(fù)發(fā)性口瘡小劑量15129.36±12.7313.61±2.42口炎清組15146.82±13.6310.92±2.75*空白對照組16152.43±14.734.20±1.04注與空白對照組相比，##P<0.01;與模型組相比，**P<0.01、*P<0.05。本研究結(jié)果表明金黃地鼠經(jīng)石碳酸造成口腔粘膜損害后，模型組動物血清超氧化物歧化酶活力明顯下降，丙二醛含量明顯升高，與空白對照組比較，有顯著性差異。4個給藥組血清SOD活力未見下降、MDA含量雖有升高，但明顯低于模型組，其中防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液高、中劑量組與模型組相比，有顯著性差異。表明防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對石碳酸所致的金黃地鼠口腔粘膜動物模型也有一定的抗氧化和清除氧化代謝產(chǎn)物的作用。四、防治復(fù)發(fā)性口瘡對小鼠免疫功能的影響1、防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對小腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響取小鼠80只，體重1822g，雌雄各半，隨機分成5組。各組按表2劑量、分別按20ml/kg灌胃給藥，每日一次，連續(xù)15日。最后一次給藥后1小時，每只小鼠腹腔注射10%蛋白胨0.2ml，32小時后腹腔注射2%新鮮雞紅細胞0.2ml，30分鐘后，脫頸椎處死小鼠，打開腹腔，洗出腹腔液，置試管中，37t:水浴中溫存15min，隔5min搖動一次，離心，棄上清液。取紅細胞懸液涂片，自然干燥后，用甲醛固定10min，再用姬姆薩染色7min，油鏡下計數(shù)200個巨噬細胞。以巨噬細胞吞噬雞紅細胞的吞噬百分數(shù)和吞噬指數(shù)為指標來表示藥物對小鼠巨噬細胞吞噬功能的影響。結(jié)果見表4-l。表4-1對小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能的影響(X±S)組別劑量(g/kg)吞噬百分率(％)吞噬指數(shù)空白組34.42±2.090.53±0.04防治復(fù)發(fā)性口瘡高劑量5654.29±5.99**1.10±0.10**防治復(fù)發(fā)性口瘡中劑量2850.13±6.40**0.96±0.11**9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與空白組相比，*P<0.05、**P<0.01。實驗結(jié)果表明防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液三個劑量組均能明顯提高小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬百分數(shù)和吞噬指數(shù)，與空白組相比，有顯著性差異(P<0.05，P〈0.01)，提示防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液能增強小鼠腹腔巨噬細胞的吞噬能力。2、防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對小鼠空斑形成細胞(PFC)數(shù)的影響取小鼠80只，體重1822g，雌雄各半，隨機分成5組。各組按表9劑量分別按20ml/kg灌胃給藥，每日一次，連續(xù)10日。于給藥第6日，每鼠腹腔注射綿羊紅細胞0.2ml，4天后放血處死，用PBS制成5X106脾細胞懸液。取0.5ml此懸液，加入0.2%綿羊紅細胞和1:10豚鼠血清各0.5ml，混勻。另設(shè)不加補體的空白對照組，置37t:水浴中溫育1小時，3000轉(zhuǎn)/分離心5min。取上清液在波長413nm處測定其上清液中紅細胞裂解釋放的血紅蛋白(以0D值表示)，結(jié)果見表4-2。表4-2防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對小鼠空斑形成細胞的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注與空白組相比，*P<0.05、**P<0.01。實驗結(jié)果表明防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液三個劑量組均能使小鼠PFC數(shù)增加。3、防治復(fù)發(fā)性口瘡對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響取小鼠80只，體重1822g，雌雄各半，隨機分成5組。各組按表10劑量分別按20ml/kg灌胃給藥，每天一次，連續(xù)15天。最后一次給藥后1小時，小鼠眼球采血，用肝素抗凝。取0.lml加入1.8ml滅菌的RPM11640(含20%小牛血清30.Og/LL-谷氨酰胺1.Oml)，再加入PHA0.lml，置37t:水浴中溫育三天，每天搖動一次，取出后吸出大部分血清，加入8.5g/LNH4CL4ml，混勻后置37"水浴中10min，2500轉(zhuǎn)/分離心10min，棄上清液。沉淀物輕輕搖勻后滴加于玻片上，使其均勻鋪開，自然干燥后用Giemsa染色，油鏡下觀察200個淋巴細胞，計算其母細胞轉(zhuǎn)化率。轉(zhuǎn)化的淋巴細胞*巴細胞轉(zhuǎn)化率=^-(轉(zhuǎn)化+未轉(zhuǎn)化)淋巴細胞結(jié)果見表4-3。表4-3防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液對小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率的影響(X±S)<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注與空白組相比，*P<0.05、**P<0.01。實驗結(jié)果表明防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液高劑量能提高小鼠淋巴細胞轉(zhuǎn)化率，與空白組比較，有顯著性差異。(三)實施例三防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液的急性毒性試驗——最大給藥量測定(MTD)取昆明種小鼠40只，體重1822g，雌雄各半。隨機均分為2組，每組20只。即(1)口疫口服液組；(2)空白對照組。實驗前禁食不禁水12小時后，用防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液一次給小鼠灌胃給藥40ml/kg;空白對照組給等量生理鹽水。連續(xù)觀察2周，記錄受試小鼠行為、活動、攝食量、體重、糞便、死亡等情況，未死亡小鼠于2周后處死進行尸檢。按256g/kg[6.4g(生藥)/mlX40ml/kg]劑量一次灌胃給藥的20只小鼠，當天以及給藥后2周內(nèi)，見小鼠毛色光滑、活動、攝食正常，與空白對照組比較無明顯差異；給藥當天，給藥組小鼠糞便質(zhì)較稀，色黃，但于第2日開始轉(zhuǎn)向正常。給藥小鼠兩周內(nèi)無死亡及其它異?，F(xiàn)象發(fā)生。2組小鼠同時處死后進行尸檢，各主要臟器(心、肝、脾、肺、腎)經(jīng)肉眼觀察未見異常改變，與空白組比較無明顯差異。防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液一次經(jīng)口給藥的最大耐受量試驗結(jié)果表明20只小鼠給藥后均無明顯的毒性反應(yīng)，2周內(nèi)亦無死亡。因此，防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液一次經(jīng)口給藥的小鼠最大耐量為256g生藥/kg體重，相當于臨床成人用量的236倍(按成人每日用量65g/kg計算)。(四)實施例四臨床試驗采用隨機數(shù)字表法將患者分為兩組，治療組(83例，服用防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液)、對照組(32例，服用口炎清顆粒)，以l個月為l療程，共治療2個療程。觀察兩組患者主要癥狀與體征、口瘡復(fù)發(fā)情況、口瘡發(fā)作規(guī)律，檢測體液免疫功能、T淋巴細胞亞群、唾液免疫球蛋白及補體。1治療方法治療組口服防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液(由黃連、生山梔、生蒲黃、蘆根、升麻麥冬、牡丹皮、組成)每劑制成30ml，分裝3支，每支10ml，lml含生藥2.17g。心脾積熱、陰虛火炎證患者每次l支(lOml)，l日2次，口服。發(fā)作期口瘡局部癥狀較重者，加大劑量為l日3040ml，分次口服，并在口腔內(nèi)含片刻后咽下，潰瘍局部有明顯剌激痛者用溫開水適當稀釋后含咽。對某些非屬典型的心脾積熱證、陰虛火炎證，或有兼夾證候者，在使用防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液的同時，進行必要的辨證治療，加用中藥湯齊U，每日l劑，l日2次。一般使用714日。常用加減法舌質(zhì)、口唇、頰粘膜鮮紅，舌苔光少，口干不甚渴飲，加涼血清熱藥水牛角、紫草、赤芍、甘中黃、知母等；若服用防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液后出現(xiàn)脘腹不適、隱痛，腹中鳴響，大便稀溏，則先以炒黨參、炮姜、焦白術(shù)、炒苡仁、懷山藥等藥物溫中健脾，再用防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液治療；若濕熱壅盛，口中熱臭，粘膩發(fā)甜，舌苔黃膩，加法半夏、黃芩、荷葉、藿香、佩蘭、白殘花等化濕清熱藥；女性患者伴有情志不舒，隨情緒波動或月經(jīng)周期而口瘡發(fā)作者，加白蒺藜、制香附、夏枯草、龍膽草、綠萼梅等泄肝理氣藥。對照組服用口炎清顆粒(廣州白云山制藥廠生產(chǎn))，l包20g。由天冬、麥冬、玄參、金銀花、甘草等藥物組成。每次l包(20g)，l日2次，溫開水沖服。發(fā)作期口瘡局部癥狀較重者，加大劑量為1日3次。若是發(fā)作期服藥，則在口腔內(nèi)含片刻后咽下。2診斷標準與病例收集標準2.l西醫(yī)診斷標準2.1.1主要癥狀體征①口腔粘膜有散在潰瘍，直徑在110mm之間，表面有灰白色或灰黃色假膜，邊界清楚，周圍充血。②有灼痛，進食或語言時加重。③有復(fù)發(fā)性。④有周期性，一月或數(shù)月不等。⑤全身癥狀伴低熱。以上有①③項者即可診斷。2.1.2臨床分型①輕型口瘡潰瘍數(shù)目少，一至數(shù)個，直徑25mm，一般無全身癥狀。②腺周口瘡單個潰瘍，直徑1020mm，呈彈坑狀，邊緣隆起，基底不平呈小結(jié)節(jié)狀，愈合緩慢，可達數(shù)月之久?？砂榘l(fā)熱或淺表淋巴結(jié)腫大等全身癥狀。③皰疹樣口瘡潰瘍數(shù)目小而多，達10個以上，直徑小，僅12mm，可有頭痛發(fā)燒等全身癥狀。2.2中醫(yī)診斷標準2.2.1主要臨床表現(xiàn)口腔粘膜潰瘍、疼痛。實證者起病急，病程短。虛證者，發(fā)病緩，病程長，而且反復(fù)發(fā)作不休。1211/21頁2.2.2次要臨床表現(xiàn)低熱不適，胃納不香，夜寐不安。凡具有口腔粘膜潰瘍，反復(fù)發(fā)作不休者，即可診斷。2.2.3中醫(yī)辨證標準心脾積熱證口瘡數(shù)目較多，周圍充血明顯，如黃豆大小，淡黃色，表面有少許分泌物，有灼痛感，說話或進食時加重?？诳?、口臭、心煩，或有低熱，大便秘結(jié)，溲赤，舌紅，苔薄黃或黃膩，脈數(shù)。陰虛火炎證口瘡數(shù)目不多，周圍粘膜輕度充血，如綠豆大小，淡白色，表面無分泌物，微痛感，飲食時較明顯，大便偏干，小便正常，舌偏紅，苔薄少，脈細數(shù)。2.3試驗病例標準2.3.l納入病例標準符合中、西醫(yī)復(fù)發(fā)性口瘡病名診斷標準，中醫(yī)辨證屬心脾積熱、陰虛火炎證為主，病史在1年以上，發(fā)作頻繁，特別是近半年來每月發(fā)作1次以上，甚至不間斷者，納入試驗病例。2.3.2排除病例標準(包括不適應(yīng)癥或剔除標準)(1)近3個月來使用過糖皮質(zhì)激素或免疫增強劑、免疫調(diào)節(jié)類藥物。(2)感染性疾病所致的口腔粘膜病、創(chuàng)傷性潰瘍、藥物性口炎、扁平苔癬、口腔白斑、白塞氏病口腔潰瘍、系統(tǒng)性紅斑狼瘡口腔病變。(3)合并有肝、腎和造血系統(tǒng)等嚴重原發(fā)性疾病者。(4)符合納入標準，但未按規(guī)定用藥，療程在l個月以下，無法判斷療效，或因資料不全等原因影響療效判斷者。3療效評定標準3.l近期療效臨床治愈用藥后4天潰瘍及疼痛充血水腫消除、自覺癥狀消失。3.2遠期療效3.2.1臨床治愈治療后口腔潰瘍1年內(nèi)基本未復(fù)發(fā)。3.2.2顯效治療后口腔潰瘍半年內(nèi)未復(fù)發(fā)。半年后即使有復(fù)發(fā)，次數(shù)、程度也明顯減輕(減輕2/3以上)。3.2.3好轉(zhuǎn)①治療后3月內(nèi)未復(fù)發(fā)；②治療后半年內(nèi)口瘡復(fù)發(fā)次數(shù)、程度減輕1/2以上，或間隔期延長一倍以上；③復(fù)發(fā)次數(shù)未減少，但發(fā)作時間較前縮短1/2。3.2.4無效口瘡復(fù)發(fā)次數(shù)、程度基本無變化。4治療結(jié)果4.l兩組療效比較4.1.l近期療效用藥后近期(當前口瘡復(fù)發(fā)周期內(nèi))有詳細病案記錄者，治療組79例，對照組30例。治療組79例中有46例在用藥后4天內(nèi)潰瘍愈合，愈合率達58.2%，明顯高于對照組的9例(30.0%)，經(jīng)卡方檢驗，x2=6.93，兩組之間有非常顯著性差異。治療組潰瘍愈合時間由治療前的12.42±6.38天縮短至8.72±4.91天，治療前后比較，P<0.01;對照組由1311.72±4.03天縮短至9.62±3.08天，治療前后比較，P<0.05。治療組用藥后潰瘍愈合時間為4.24±2.36天，明顯短于對照組的5.47±1.81天，兩組比較，P<0.01。見表5_1、圖1。表5-1兩組近期療效比較組別例數(shù)艇4充絲觸歡(％)潰瘍愈合時間(天)藥后漬瘍愈合時間(天)治療前治療后治療組7946(58,2%),12,42±6,388.72.:—4"廣4,24±2,36##對照組309(30.0%)11.72±4.03().62+3.08*5,47±1.81注(1)與對照組比，ftftP<0.05;與同組治療前比/P<0.05、**P<0.01;(2)首次用藥治療后第一個復(fù)發(fā)周期內(nèi)，部分病例的口瘡愈合天數(shù)不詳，故病例數(shù)比治療前為少。4.1.2遠期療效(1)總療效(口瘡復(fù)發(fā)控制率)治療組痊愈率為27.7%、顯效率為32.5%、好轉(zhuǎn)率為31.3%、痊愈顯效率(愈顯率)為60.2%，總有效率為91.6%，明顯優(yōu)于對照組的9.4%、25%、46.9%、34.4%、81.3%。兩組療效之間經(jīng)Ridit檢驗，u=2.64，P<0.01;兩組之間的痊愈率和愈顯率比較，有顯著性差異，見表5-2、圖2。表5-2兩組總療效比較組別例數(shù)痊愈顯效好轉(zhuǎn)無效痊愈顯效率總有效率例數(shù)(％)例數(shù)(％)例數(shù)(％)例數(shù)(％)治療組83(27,7)27(32,5)26(31,3)7(8.4)60f對照組32(9.4%)15(46.9%)6(汰7%)34,481.3注與對照組比較，#P<0.05，抑P<0.01。(2)口瘡局部癥狀改善情況兩組治療后除部分病例(治療組23例、對照組3例)的口瘡復(fù)發(fā)獲得控制外，其余尚有復(fù)發(fā)的病例(治療組60例、對照組29例)，其潰瘍數(shù)目、直徑、疼痛、充血程度等局部癥狀明顯減輕，與治療前比較，P<0.01。治療組局部癥狀改善的程度又優(yōu)于對照組，P<0.05、P<0.01。治療組潰瘍愈合時間，由治療前的12.42±6.38天縮短至治療后的6.1±2.2天，對照組由11.72±4.03天縮短至7.3±1.6天，兩組治療前后比較，P值均〈0.01;治療后治療組的潰瘍愈合時間又明顯短于對照組，P<0.01。見表5-3、圖3、圖4。潰瘍周圍水腫程度相應(yīng)改善，由于不易把握好定量指標，故未作積分統(tǒng)計。表5-3兩組治療前后口瘡局部癥狀比較14<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注①與同組治療前比較，**P<0.01;與對照組治療后比較，#P<0.05、##P<0.01。②疼痛程度計分法靜息狀態(tài)感覺疼痛記3分，語言狀態(tài)感覺疼痛記2分，進食狀態(tài)感覺疼痛記1分，疼痛不明顯或無疼痛記0分。③充血程度計分法潰瘍周圍紅暈廣泛、色質(zhì)較深計2分，潰瘍周圍紅暈范圍較小、色質(zhì)不深計1分，潰瘍周圍無紅暈計0分。(3)口瘡復(fù)發(fā)間歇期延長情況治療前兩組口瘡復(fù)發(fā)的間歇時間分別為16.0±14.7天、18.7±12.3天，P>0.05。治療后兩組口瘡復(fù)發(fā)間歇時間均明顯延長，與治療前比較，P值均〈0.01。治療組口瘡復(fù)發(fā)間歇期延長至近5個月，對照組延長至近3個月，兩組比較，有顯著性差異。見表5-4。表5-4兩組治療前后口瘡發(fā)作間歇時間(天)比較<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>注與同組治療前比較，**P<0.01;與對照組比較，#P<0.05。4.2療效與療程的關(guān)系結(jié)果見表5-5。治療組83例中，療程不足2個月者33例，占39.8%;達2個月者22例，占26.5%;大于2個月者28例，占33.7%。不同療程之間的療效，經(jīng)卡方檢驗，P>0.05，無顯著性差異。但不同療程的愈顯率之間有顯著性差異，其中以"2個月療程"為最佳，其愈顯率達77.3%，明顯優(yōu)于">2個月療程"的42.9%，P<0.05;也優(yōu)于"<2個月療程"的63.6%，但無顯著性差異。對照組也以"2個月療程"的療效為最好，其總有效率達100%，但不同療程的療效之間無顯著性差異。對照組"<2個月療程"的愈顯率為31.3%，明顯低于治療組的63.6%，兩者比較，P<0.05，有顯著性差異。表5-5兩組療效與療程的關(guān)系<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注:與治療組">2個月"比較JP<0.05;與對照組"<2個月"比較，ftP<0.05。4.3療效與證候的關(guān)系防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液以治療復(fù)發(fā)性口瘡心脾積熱證、陰虛火炎證的療效為最佳，兩證型的愈顯率分別達66.7%和64.5%，總有效率分別達95.2%和93.5%，優(yōu)于"其它"類證型的30%和70%。其中治療心脾積熱證的愈顯率、總有效率及治療陰虛火炎證的總有效率明顯高于"其它類"證，P值均〈0.05。見表5-6。對照組以治療陰虛火炎證的療效為最佳，其愈顯率達53.8%、總有效率達92.3%，其53.8%的愈顯率與治療心脾積熱證18.8X的愈顯率比較，P<0.05。見表5-6。表5-6兩組不同證型之間的療效比較<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>注與"其它"類比較，*P<0.05;與同組心脾積熱證比較，#P<0.05。4.4兩組治療前后全身癥狀改善情況防治復(fù)發(fā)性口瘡口服液治療后主要全身癥狀明顯改善，其中口中熱臭、口干口渴、心煩發(fā)熱、大便干結(jié)、小便黃赤等5個主癥的陽性率與治療前比較，有顯著性差異(P<0.05，P<0.01)。對治療前后口中熱臭、口干口渴、口苦、心煩發(fā)熱等陽性主癥的嚴重程度進行定量計算(癥狀明顯計2分、癥狀一般計1分)，結(jié)果治療后各主癥明顯減輕，積分減少，與治療前比較，P值均〈0.01。見表5-7。對照組治療后主要全身癥狀也有明顯改善，其中口中熱臭、口干渴、煩熱三個主癥的陽性率與治療前比較，有顯著性差異，P<0.05。治療前后口干渴的積分值比較，P<0.05，治療后其它全身癥狀的積分值均有不同程度的下降，但與治療前比較無顯著性差異。見表5-7。表5-7兩組治療前后主要全身癥狀改善情況<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>4.6治療組用藥前、后體液免疫功能的變化治療組用藥前選擇了病程在5年以上，復(fù)發(fā)頻繁，每月發(fā)作2次以上，且口瘡局部癥狀較重的患者，測定其血清免疫球蛋白和補體，計20例。其中IgG高于正常范圍者(615g/L)9例，平均值15.2士4.18g/L;用藥后測定了14例，仍高于正常范圍者減少至2例，平均值降至12.7±2.22g/L，與用藥前比較，P<0.05，有顯著性差異。用藥前C3有11例高于正常范圍(0.61.2g/L)，平均值為1.42±0.57g/L;用藥后仍高于正常范圍者減少至4例，平均值降至1.04±0.32g/L，與用藥前比較，P<0.05，有顯著性差異。見表5_9。用藥前IgM、IgA、Q各有4例、5例、5例高于正常范圍(0.62g/L、0.73.4g/L、0.30.7g/L)，但其平均值均在正常范圍內(nèi)。用藥后分別有1例、1例、2例仍未恢復(fù)正常，其平均值雖有下降，但與用藥前比較，經(jīng)統(tǒng)計處理均無顯著性差異。表5-9治療組用藥前后Ig和C3、Q(士S，g/L)的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注,與治療前比較，P<0.05。4.7治療組治療前后細胞免疫功能(T細胞亞群)的變化治療組治療前CD4值為38.3±4.8%(正常值為3553%)，治療后增高至42.9±4.6%，P<0.05。CD3治療后略有增高、CD8治療后略有降低，但經(jīng)統(tǒng)計學處理無顯著性差異。CD4/CD8比值治療前為1.19±0.34，低于正常值(1.31.9)，治療后升高至1.49±0.27，與治療前有顯著性差異，P<0.05。見表5-10。表5-10治療前后兩組T細胞亞群(％，±S)的變化<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>注與治療前比較廣P<0.05。4.8治療組用藥前后唾液免疫球蛋白及補體含量的變化治療組選擇了病程在5年以上，復(fù)發(fā)頻繁，每月發(fā)作2次以上，且口瘡局部癥狀較重的患者，測定其唾液免疫球蛋白和補體。用藥前測定了19例，用藥后測定了18例，并選擇11例正常人作對照。治療前IgG、IgM含量與正常人對照組比較，顯著增高(P<0.05、P<0.01)，治療后均有下降，其中IgG降幅較大，與治療前比較，P<0.05。見表5-11。治療前補體Q與正常人對照組比較明顯為低(P〈0.01)，治療后略有增高。見表5-11。表5_11治療組用藥前后唾液Ig、C(士s、mg/L)變化<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>實施例4用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，工藝步驟為稱取黃連1-3份、山梔8-10份、丹皮8-10份、麥冬8-10份、升麻4-6份、蘆根12-15份、生蒲黃8-10份，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物采用P_環(huán)糊精包合得P-環(huán)糊精包合物；其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；醇沉上清液濃縮后與上述水提液I合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;將上步所得濃縮液噴霧干燥成干粉；加上述13_環(huán)糊精包合物和輔料，混勻，干法制粒，分裝，質(zhì)檢，貼簽，即得顆粒劑。P-環(huán)糊精包合工藝為采用飽和水溶液法，以610倍結(jié)晶物質(zhì)量的13-環(huán)糊精包合，306(TC恒溫條件下連續(xù)攪拌13小時，攪拌轉(zhuǎn)速為80120轉(zhuǎn)/分鐘，O5t:冷藏1236小時，所得結(jié)晶物真空干燥28小時，得白色疏松狀包合物粉末，S卩e-環(huán)糊精包合物。水煎煮二次，第一次812倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時，第二次610倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時。乙醇沉淀中乙醇的體積濃度為60%80%，放置1224小時。輔料是淀粉或糊精。實施例5用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，工藝步驟為稱取黃連1-3份、山梔8-10份、丹皮8-10份、麥冬8-10份、升麻4-6份、蘆根12-15份、生蒲黃8-10份，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物乙醇溶解得醇液II;其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；醇沉上清液濃縮后與上述水提液1、醇液II合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;濃縮液加入輔料，加水稀釋至1000mL，分裝，即得口服液、合劑或水劑。水煎煮二次，第一次812倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時，第二次610倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時。乙醇沉淀中乙醇的體積濃度為60%80%，放置1224小時。輔料是淀粉或糊精。權(quán)利要求一種用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑，其特征在于按質(zhì)量份包括以下藥材黃連1-3份、山梔8-10份、丹皮8-10份、麥冬8-10份、升麻4-6份、蘆根12-15份、生蒲黃8-10份。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于工藝步驟為a.稱取防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑的各藥味，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物采用P_環(huán)糊精包合得P_環(huán)糊精包合物；其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；b.醇沉上清液濃縮后與上述水提液I合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;c.將步驟b所得濃縮液噴霧干燥成干粉；d.加上述e-環(huán)糊精包合物和輔料，混勻，干法制粒，分裝，質(zhì)檢，貼簽，即得顆粒劑。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于P_環(huán)糊精包合工藝為采用飽和水溶液法，以610倍結(jié)晶物質(zhì)量的13-環(huán)糊精包合，306(TC恒溫條件下連續(xù)攪拌13小時，攪拌轉(zhuǎn)速為80120轉(zhuǎn)/分鐘，O5t:冷藏1236小時，所得結(jié)晶物真空干燥28小時，得白色疏松狀包合物粉末，即13-環(huán)糊精包合物。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于工藝步驟為a.稱取防治復(fù)發(fā)性口瘡制劑的各藥味，將丹皮用水蒸氣蒸餾法提取，得結(jié)晶物和抽濾液，抽濾液濃縮得水提液I，結(jié)晶物乙醇溶解得醇液II;其余藥味混合后加水煎煮后，水提液減壓薄膜濃縮至相對密度1.051.IO，用乙醇沉淀；b.醇沉上清液濃縮后與上述水提液1、醇液II合并，減壓薄膜濃縮至相對密度1.021.06;c.濃縮液加入輔料，加水稀釋至1000mL，分裝，即得口服液、合劑或水劑。5.根據(jù)權(quán)利要求2或5所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于水提取工藝為水煎煮二次，第一次812倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時，第二次610倍藥材質(zhì)量水，煎煮13小時。6.根據(jù)權(quán)利要求2或5所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于乙醇沉淀中乙醇的體積濃度為60%80%，放置1224小時。7.根據(jù)權(quán)利要求2或4所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑的制備方法，其特征在于輔料是淀粉或糊精。8.權(quán)利要求1所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜病中的應(yīng)用。9.權(quán)利要求l所述用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜扁平苔蘚(OLP)、慢性舌炎、舌灼痛綜合征、白塞氏病口腔潰瘍、慢性牙齦炎中的應(yīng)用。全文摘要本發(fā)明涉及中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是涉及一種以中藥為原料而制成的治療復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑及其制備方法。所述制劑按質(zhì)量份包括以下藥材黃連1-3份、山梔8-10份、丹皮8-10份、麥冬8-10份、升麻4-6份、蘆根12-15份、生蒲黃8-10份。改制劑可用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜病。也可用于防治復(fù)發(fā)性口瘡的中藥復(fù)方制劑在治療口腔粘膜扁平苔蘚(OLP)、慢性舌炎、舌灼痛綜合征、白塞氏病口腔潰瘍、慢性牙齦炎中。文檔編號A61P1/00GK101693086SQ20091003604公開日2010年4月14日申請日期2009年10月16日優(yōu)先權(quán)日2009年10月16日發(fā)明者卞慧敏,朱華旭,李璘,袁園,過偉峰申請人:南京中醫(yī)藥大學;