專利名稱：淫羊藿苷元脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及淫羊藿苷元、脂質(zhì)體及納米技術(shù)。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松癥是一個世界范圍的疾病，隨著社會日趨老齡化，骨質(zhì)疏松癥已列為三大 老年性疾病之一。淫羊藿苷元是從中醫(yī)臨床常用藥物淫羊藿中提取得到的黃酮單體成
分。國內(nèi)外諸多研究表明淫羊藿苷元具有明顯的抗骨質(zhì)疏松藥理活性[參見Jian Huang, Lan Yuan, Xi Wang, et al. Icaritin and its glycosides enhance osteoblastic, but suppress osteoclastic, differentiation and activity in vitro [J]. Life Sciences, 2007， 81:832-840.]。但其水溶性很差，影響其口服吸收及藥效發(fā)揮。臨床尚未有淫羊藿苷元 制劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種制備工藝簡單、藥物利用率高、物理性質(zhì)穩(wěn)、 定、并能顯著提高淫羊藿苷元水溶性的脂質(zhì)體及其制備方法。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下
一種淫羊藿苷元脂質(zhì)體，其特征在于它的質(zhì)量組成為大豆卵磷脂50% 85%，月旦 固醇10% 35%，淫羊藿苷元2%~25%，其表面為磷脂雙分子層，雙分子層外部的親水 基團(tuán)形成一個親水的帽冠，雙分子層內(nèi)部的親水基團(tuán)構(gòu)成一內(nèi)水相，雙分子層間的疏水 基團(tuán)構(gòu)成一疏水區(qū)域，淫羊藿苷元包埋于脂質(zhì)體的磷脂雙層間，所述的脂質(zhì)體水化后 Zeta電位的絕對值大于40mV。
一種制備上述脂質(zhì)體的方法，它由下列步驟組成
步驟l.按如下質(zhì)量百分比配比下列原料大豆卵磷脂50% 85%，膽固醇10% 35。/。，淫羊藿苷元2%~25%;
步驟2.將上述配比的大豆卵磷脂、膽固醇和淫羊藿苷元加入二氯甲垸溶解； 步驟3.將二氯甲烷溶液在攪拌下滴加入水或P-188水溶液中，滴加完后繼續(xù)攪拌 0.5 1小時；步驟4.在步驟3所得的脂質(zhì)體混懸液中加入脂質(zhì)體混懸液體積10% 20%的甘露醇 或乳糖，冷凍干燥，即得淫羊藿苷元脂質(zhì)體。
該制備方法特征在于以生物相容性較好的大豆卵磷脂為膜材，以二氯甲烷為有機
相，以水或P-188水溶液作為分散介質(zhì)，采用改良滴定法制備包載難溶性植物性藥物淫 羊藿苷元的脂質(zhì)體。以甘露醇或乳糖作為凍干保護(hù)劑，制備藥物包封率高達(dá)90%以上， 平均粒徑為200-500nm的淫羊藿苷元脂質(zhì)體。
上述實施例所制備的脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)，其特征在于其表面為磷脂雙分子層，雙分子層 外部的親水基團(tuán)形成一個親水的帽冠，雙分子層內(nèi)部的親水基團(tuán)構(gòu)成一內(nèi)水相，雙分子 層間的疏水基團(tuán)產(chǎn)生一疏水區(qū)域。淫羊藿苷元是疏水性的，其包埋于脂質(zhì)體的磷脂雙層 間。
對淫羊藿苷元進(jìn)行溶解度及油水分配系數(shù)測定表明淫羊藿苷元脂溶性極強。按《中
國藥典》2005版二部規(guī)定，淫羊藿苷元的溶解度可以描述為在二氯甲烷和乙酸乙酯中 略溶，在甲醇、無水乙醇和水等中幾乎不溶或不溶；在不同pH緩沖液中幾乎不溶或不 溶。淫羊藿苷元油水分配系數(shù)測定過程中，淫羊藿苷元在水相中的溶解度低于HPLC檢 測限。淫羊藿苷元脂質(zhì)體載藥量可達(dá)到2mg/mL，極大改善了淫羊藿苷元的溶解度。
淫羊藿苷元脂質(zhì)體凍干前后的形態(tài)通過透射電鏡進(jìn)行表征，結(jié)果見圖3和圖4。本 發(fā)明制備的淫羊藿苷元脂質(zhì)體呈完整的球形，脂質(zhì)體的雙層結(jié)構(gòu)清晰可見。凍干前后淫 羊藿苷元脂質(zhì)體的平均粒徑及Zeta電位用Mahren粒徑分析測定儀進(jìn)行測定，與凍干前 相比，凍干后脂質(zhì)體平均粒徑有所下降，Zeta電位絕對值有所下降。用凝膠柱層析法對 淫羊藿苷元脂質(zhì)體進(jìn)行包封率測定，凍干后脂質(zhì)體包封率由70%左右提高至卯％以上。
淫羊藿苷元脂質(zhì)體穩(wěn)定性考察(參照《中國藥典2005版》加速實驗)將凍干前后 淫羊藿苷元脂質(zhì)體置于40°C，濕度為75%條件下密封儲存。儲存三個月后外觀及色澤 均無明顯變化，它們的粒徑和Zeta電位變化見表1和表2,說明淫羊藿苷元脂質(zhì)體能在 較長時間內(nèi)保存，具有良好的物理穩(wěn)定性。
本發(fā)明的淫羊藿苷元脂質(zhì)體在大鼠體腸灌流模型實驗表明淫羊藿苷元脂質(zhì)體的滲 透系數(shù)>3，吸收良好。
4表1 凍干前后淫羊藿苷元脂質(zhì)體o月樣品分析結(jié)果表
編號 平均粒徑(nm)~Zeta電位(mV) S率(n/c)
平整、光滑、淡 ^n/1 ," ^，
黃色粉末 皿4 9"Q 平整、光滑、淡
1:、+ 225.0229.7 -44.7 -47.2 91.58 92.35
黃色粉末
平整、光滑、淡
黃色粉末 2(>3'8 _51'2 9"6
表2凍干前后淫羊藿苷元脂質(zhì)體3月樣品分析結(jié)果表
編號 外觀 平均粒徑(nm) Zeta電位(mV) 包封率(％)
采用本發(fā)明的淫羊藿苷元脂質(zhì)體及其制備方法具有以下特點
1、 該制備方法簡單易行，原材料大豆卵磷脂具有良好的生物相容性，可生物降解， 來源廣，成本低。
2、 利用納米化技術(shù)將中藥活性成分淫羊藿苷元包裹于脂質(zhì)體的磷脂雙層間，提高 其水溶性。
3、 淫羊藿苷元脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性較好，放置較長時間后，未見分層，絮凝。


圖1為實施例1制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖2為實施例1制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
圖3為實施例1制備的淫羊藿苷元未凍干脂質(zhì)體透射電鏡圖。
圖4為實施例1制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體透射電鏡圖。
圖5為實施例2制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖6為實施例2制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
平整、光滑、淡 黃色粉末
平整、光滑、淡 黃色粉末
平整、光滑、淡 黃色粉末
238.3
312.6300.8 -37.5
351.4
-35.5 卯.13
-37.8 卯.24 卯.40 -40.3 卯.83
2 3
凍干后
12 3
凍干后
5圖7為實施例3制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖8為實施例3制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
圖9為實施例4制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖10為實施例4制備的淫羊藿苷元凍千脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
圖11為實施例5制備的淫羊藿苷元凍千脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖12為實施例5制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
圖13為實施例6制備的淫羊藿苷元凍千脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖14為實施例6制備的淫羊藿苷元凍千脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
圖15為實施例7制備的淫羊藿苷元凍干脂質(zhì)體粒徑分布圖。
圖16為實施例7制備的淫羊藿苷元凍千脂質(zhì)體Zeta電位分布圖。
具體實施例方式
實施例1:
稱取淫羊藿苷元20mg,大豆卵磷脂200mg，膽固醇100 mg，用20mL二氯甲烷 溶解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲烷溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL0.5%P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì)體 混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸液體積的20。/。的甘露醇，冷凍干燥，即得淫羊藿苷 元脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖1，圖2。其凍干前、后的透射電鏡圖見圖3， 圖4.
實施例2:
稱取淫羊藿苷元20 mg，大豆卵磷脂200 mg，膽固醇100 mg，用10 mL 二氯甲烷溶 解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲烷溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL 0.5% P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì) 體混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸液體積的15%的甘露醇，冷凍干燥，即得淫羊藿 苷元脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖5，圖6。
實施例3:
6稱取淫羊藿苷元20 mg，大豆卵磷脂600 rag，膽固醇100 mg，用10 mL 二氯甲烷溶 解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲垸溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL 0.5% P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì) 體混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸液體積的10%的甘露醇，冷凍干燥，即得淫羊藿 苷元脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖7，圖8。
實施例4:
稱取淫羊藿苷元20 mg，大豆卵磷脂600 mg,膽固醇100mg,用20mL二氯甲烷 溶解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲垸溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL0.5%P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì)體 混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸液體積的10%的乳糖，冷凍干燥，即得淫羊藿苷元 脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖9，圖IO。
實施例5:
稱取淫羊藿苷元100 mg，大豆卵磷脂200 mg，膽固醇100 mg，用10 mL二氯甲垸 溶解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲烷溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL0.5%P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì)體 混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸液體積的10%的乳糖，冷凍干燥 ，即得淫羊藿苷元 脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖11，圖12。
實施例6:
稱取淫羊藿苷元IOO mg，大豆卵磷脂600 mg，膽固醇100 mg，用10 mL二氯甲烷 溶解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲垸溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入 25mL 0.5% P-188 (南京威爾化工提供)水溶液中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì) 體混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入餛懸液體積的10%的甘露醇，冷凍干燥，即得淫羊藿 苷元脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖13,圖14。
實施例7:
稱取淫羊藿苷元IOO mg，大豆卵磷脂600 mg，膽固醇100 mg，用20 mL二氯甲垸溶解，將二氯甲烷溶液轉(zhuǎn)移至注射器，將二氯甲烷溶液在電動增力攪拌條件下緩慢注入50mL水中，加完后繼續(xù)水化0.5小時，得脂質(zhì)體混懸液。在脂質(zhì)體混懸液中加入混懸、液體積的10%的甘露醇，冷凍干燥，即得淫羊藿苷元脂質(zhì)體，其粒徑分布及Zeta電位見圖15,圖16。
實施例8:
麻醉SD大鼠，置于小電熱毯上和燈光下，保持正常的體溫，沿腹中線切口4cm打開腹腔，靠近十二指腸處插入膽汁導(dǎo)管，分別在十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸兩端插聚乙烯管，用手術(shù)線固定，實驗時用等滲生理鹽水浸漬的紗布覆蓋于腸組織表面以保濕。以HBSS溶液配制淫羊藿苷元脂質(zhì)體溶液作為灌流液。用等滲生理鹽水沖洗腸內(nèi)容物后換灌流液，用一恒速泵灌流腸腔。每隔30min收集出口管中灌流液，灌注后測量小腸的長度。出口管中藥物濃度用HPLC檢測。
8
權(quán)利要求
1. 一種淫羊藿苷元脂質(zhì)體，其特征在于它的質(zhì)量組成為大豆卵磷脂50％～85％，膽固醇10％～35％，淫羊藿苷元2％～25％，其表面為磷脂雙分子層，雙分子層外部的親水基團(tuán)形成一個親水的帽冠，雙分子層內(nèi)部的親水基團(tuán)構(gòu)成一內(nèi)水相，雙分子層間的疏水基團(tuán)構(gòu)成一疏水區(qū)域，淫羊藿苷元包埋于脂質(zhì)體的磷脂雙層間，所述的脂質(zhì)體水化后Zeta電位的絕對值大于40mV。
2. —種制備上述脂質(zhì)體的方法，其特征是它由下列步驟組成步驟l.按如下質(zhì)量百分比配比下列原料大豆卵磷脂50% 85%，膽固醇10% 35%，淫羊藿苷元2%~25%;步驟2.將上述配比的大豆卵磷脂、膽固醇和淫羊藿苷元加入二氯甲垸溶解；步驟3.將二氯甲烷溶液在攪拌下滴加入水或P-188水溶液中，滴加完后繼續(xù)攪拌 0.5 1小時；步驟4.在步驟3所得的脂質(zhì)體混懸液中加入脂質(zhì)體混懸液體積的10% 20%的甘露 醇或乳糖，冷凍干燥，即得淫羊藿苷元脂質(zhì)體。
全文摘要
一種淫羊藿苷元脂質(zhì)體，它的質(zhì)量組成為大豆卵磷脂50％～85％，膽固醇10％～35％，淫羊藿苷元2％～25％，其表面為磷脂雙分子層，雙分子層外部的親水基團(tuán)形成一個親水的帽冠，雙分子層內(nèi)部的親水基團(tuán)構(gòu)成一內(nèi)水相，雙分子層間的疏水基團(tuán)構(gòu)成一疏水區(qū)域，淫羊藿苷元包埋于脂質(zhì)體的磷脂雙層間，所述的脂質(zhì)體水化后Zeta電位的絕對值大于40mV。本發(fā)明的淫羊藿苷元脂質(zhì)體具有以下特點1.該制備方法簡單易行，原材料大豆卵磷脂具有良好的生物相容性，可生物降解，來源廣，成本低；2.利用納米化技術(shù)將中藥活性成分淫羊藿苷元包裹于脂質(zhì)體的磷脂雙層間，提高其水溶性；3.淫羊藿苷元脂質(zhì)體的物理穩(wěn)定性較好，放置較長時間后，未見分層，絮凝。本發(fā)明公開了其制法。
文檔編號A61K9/127GK101485630SQ20091002504
公開日2009年7月22日 申請日期2009年2月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月17日
發(fā)明者蘭雪蓮, 娥 孫, 賈曉斌, 彥 陳 申請人:賈曉斌