專利名稱：：含有高含量異澤蘭黃素的蒿提取物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種蒿提取物，尤其涉及一種用丙醇提取得到的含有高含量異澤蘭黃素的蒿提取物。技術(shù)背景蒿(^Wew&z.a附o"go/z.ca,」.os7.a&ca,爿.vafKon.ewto/Zs,/1or^yz',^4.mo"towa等)是屬于菊科的多年生藥草，自古以來用作強(qiáng)壯補(bǔ)血、婦科病、腹瀉的治療藥，已研究清楚的化學(xué)成分有異香豆素、香豆素、二萜內(nèi)酯等，還證實(shí)有異澤蘭黃素、4',5，7-三羥基-3'，6-二曱氧基黃酮等類黃酮成分。在韓國草藥典(q]&^3到&^(紐^)ff^S)中，將上述蒿的葉及嫩枝稱為艾葉(艾葉，ArtemisiaeargyiHerb)。其中，已知類黃酮成分異澤蘭黃素(eupatilin)具有抗過敏效果(日本特開昭59-155314號(hào)公報(bào))，最近在韓國國內(nèi)也確認(rèn)了其作為胃腸疾病治療藥的效用(韓國專利注冊號(hào)127777)。此外，還有專利報(bào)道另一種黃酮成分4',5，7-三羥基-3',6-二曱氧基黃酮(jaceosidin)也可以作為同樣的胃腸疾病治療藥來使用(韓國專利注冊號(hào)181751)。另一方面，根據(jù)韓國專利注冊號(hào)181751記載，與從蒿中精制出來的異澤蘭黃素或4',5,7-三羥基-3'，6-二曱氧基黃酮的抗胃炎效果相比，蒿提取物本身的抗胃炎效果更好，因此推測在該提取物中有一些未知的物質(zhì)提高了抗胃炎效果。如上所述，即使蒿提取物本身比有效個(gè)別成分異澤蘭黃素或4'，5，7-三羥基-3',6-二甲氧基黃酮效果更好，但是如韓國專利注冊號(hào)181751中所述，蒿提取物中個(gè)別有效成分的含有率越高，相應(yīng)的抑制胃部病變的效果提高的趨勢越明顯，也就是說增加相應(yīng)提取物中有效成分含量的話就可以確保進(jìn)一步提高其治療效果的機(jī)會(huì)。3此外，在韓國專利公開號(hào)2006-0002639中指出，在提取過程中，提取物中將包含蒿中含有的抗凝血?jiǎng)┏煞旨聪愣顾?coumarin)類，尤其是其中將包含雙香豆素(Dicoumarol)成分。如在現(xiàn)有技術(shù)中記載，雙香豆素即使少量給藥也會(huì)急劇減少血小板數(shù)量，據(jù)報(bào)道還有肝臟毒性，因此是即便用于醫(yī)學(xué)用途也需非常慎重給藥的成分。再加上，胃炎或胃潰瘍患者常伴有由胃損傷引起的胃出血的情況，所以必須除去此類成分才能進(jìn)一步期待藥效的增加。另外，在上述現(xiàn)有技術(shù)中指出，從根據(jù)現(xiàn)有的韓國專利注冊號(hào)181751制備的乙醇或乙醇水溶液提取物中很難除去此成分，并且作為除去此成分的方法提供了包括如下步驟的制造方法(1)將艾葉的葉子用乙醇或乙醇水溶液提取的步驟(步驟1)，(2)向在上述步驟1中得到的提取物中添加堿溶液并在80°C反應(yīng)1小時(shí)以上的步驟(步驟2),(3)向在上述步驟2中得到的提取物中添加酸性溶液進(jìn)行中和的步驟(步驟3)，以及(4)對于在上述步驟3中得到的提取物進(jìn)行減壓濃縮后，進(jìn)行冷凍干燥的步驟(步驟4)。即，現(xiàn)有技術(shù)中包括了步驟2及步驟3的堿處理及其中和過程，由此可以容易地除去雙香豆素成分?？梢猿鋈艘饬系卮_保高的異澤蘭黃素含量，而且即使不經(jīng)過另外的追加工序也不會(huì)包含抗凝血成分雙香豆素，從而完成了本發(fā)明。
發(fā)明內(nèi)容發(fā)明要解決的問題本發(fā)明的目的是獲得一種蒿提取物，其特征在于，含有高含量的具有抑制胃部病變效果的異澤蘭黃素，并且無需經(jīng)過另外的除去工序也不含抗凝血成分雙香豆素。解決問題的技術(shù)方案本發(fā)明涉及將蒿(艾葉)用丙醇提取濃縮而得到的含高濃度異澤蘭黃素的蒿的丙醇提取物，其特征在于，即使在提取濃縮過程中不包括另外的除去抗凝血物質(zhì)雙香豆素的工序，也不會(huì)包含雙香豆素。本發(fā)明中使用的蒿包括艾蒿(Artemisiaargyi)、艾草(A.princepsvar.orientalis，A.asiatica)、山地蒿(A.montana)、蒙古蒿(A.mongolica)以及韓國草藥典中定義的同屬植物。本發(fā)明中使用的丙醇包括1-丙醇(正丙醇)或2-丙醇(異丙醇)。在本發(fā)明中，向蒿加入上述丙醇后，通過通常的生藥提取方法即浸漬法、回流法進(jìn)行提取和/或再提取，并用適當(dāng)方法將其過濾后，無需另外的追加工序即可進(jìn)行濃縮最終得到蒿的丙醇提取物。在使用浸漬法的情況下，向蒿中加入丙醇后，充分浸漬，并用適當(dāng)方法將其過濾后，進(jìn)行減壓濃縮獲得提取物。在使用回流法的情況下，向過濾瓶中加入蒿，使丙醇不斷地在瓶中回流，得到提取液，同樣用適當(dāng)方法將其過濾后，進(jìn)行減壓濃縮最終獲得提取物。發(fā)明效果通過本發(fā)明可以獲得不僅含有高含量的異澤蘭黃素而且藥效更加改善，尤其是即使不包括另外追加的除去工序也不會(huì)包含抗凝血成分的蒿提取物。圖1是根據(jù)實(shí)施例1和比較例1制造的各提取物通過高效液相色語法得到的色譜圖(線1是實(shí)施例1的色譜圖，線2是比較例1的色譜圖)。圖2a和2b是關(guān)于確認(rèn)根據(jù)實(shí)施例1和實(shí)施例3制造的蒿的丙醇提取物中是否含有抗凝血物質(zhì)雙香豆素的色譜圖(圖A是雙香豆素標(biāo)準(zhǔn)樣的色譜圖，圖B是實(shí)施例1中的蒿的2-丙醇提取物的色譜圖，圖C是實(shí)施例3中的蒿的1-丙醇提取物的色譜圖)。圖3a和3b是表示根據(jù)實(shí)施例1制造的蒿提取物的胃部病變抑制效果的圖(圖3a表示實(shí)施例1中的蒿的丙醇提取物對鹽酸-乙醇胃損傷模型的胃部病變抑制效果，圖3b表示實(shí)施例1中的蒿的丙醇提取物對鹽酸-乙醇胃損傷模型的胃部病變抑制效果的示例。圖中G1(組1:11=10)是陰性對照組(非給藥組)；G2(組3:n=10)是實(shí)施例1給藥組(30mg(提取物)/kg);G3(組3:n=10)是實(shí)施例1給藥組(60mg(提取物)/kg);G4(組4:n=10)是實(shí)施例1給藥組(90mg(提取物)/kg);G5(組5:n=10)是陽性對照組(STILLENTAB:60mg(提取物)/kg)。具體實(shí)施方式實(shí)施例1在2kg艾草(ArtemisiaprincepsPamp.var.orientalis)中力口入20kg2陽丙醇，回流提取約24小時(shí)后，將其用400目(mesh)的布進(jìn)行過濾。再向殘?jiān)凶芳?6kg2-丙醇，將其用400目的布進(jìn)行過濾，合并濾液后，將溫度維持在49°C附近的同時(shí)進(jìn)行減壓濃縮，得到蒿的丙醇提取物100g。(收率20:1)實(shí)施例2在2kg艾草(ArtemisiaprincepsPamp.var.orientalis)中力口入20kg的2-丙醇，浸漬提取約24小時(shí)后，將其用1500目的布進(jìn)行過濾。再向殘?jiān)屑尤?6kg的2-丙醇，將其用400目的布進(jìn)行過濾后，合并濾液，將溫度維持在4748。C附近的同時(shí)進(jìn)行減壓濃縮，得到蒿的丙醇提取物100g。(收率20:1)實(shí)施例3在2kg艾草(ArtemisiaprincepsPamp.var.orientalis)中力口入20kg的1-丙醇，回流提取約24小時(shí)后，將其用1500目的布進(jìn)行過濾。再向殘?jiān)屑尤?6kg的2-丙醇，將其用400目的布進(jìn)行過濾，合并濾液后，將溫度維持在4748°C附近的同時(shí)進(jìn)行減壓濃縮，得到蒿的丙醇提取物100g。(收率20:1)實(shí)施例4在3kg艾草(Artemisia.princepsPamp.var.orientalis)中力口入39kg的2-丙醇，回流提取約24小時(shí)后，將其用3|im膜濾器進(jìn)行過濾。再向殘?jiān)屑尤?.5kg的2-丙醇，將其用3pm膜濾器進(jìn)行過濾，合并濾液后，將溫度維持在49~57°C附近的同時(shí)進(jìn)行減壓濃縮，得到蒿的丙醇提取物150g。(收率20:1)比專交例1在lkg艾草(A.asiatica)中加入10kg的乙醇(藥典)提取約24小時(shí)后，將其用400目的布進(jìn)行過濾。再向殘?jiān)屑尤?3kg的乙醇(藥典)，用400目的布進(jìn)行過濾，合并濾液后，將溫度維持在49°C附近的同時(shí)進(jìn)行減壓濃縮，得到蒿的乙醇提取物50g。(收率20:1)[實(shí)驗(yàn)例1]不同提取溶劑的提取物中異澤蘭黃素的含量比較按照與上述實(shí)施例及比較例相同的方法，再各制備1批(batch)而得到的蒿提取物中藥效成分異澤蘭黃素的含量如下。6<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>結(jié)果顯示，與乙醇4是:取物相比丙醇提取物中的藥效成分異澤蘭黃素約增加了2倍。而且如圖l所示，不僅是異澤蘭黃素，其它成分也是以類似的比率增力口，因此考慮到象現(xiàn)有技術(shù)中公知的那樣非單一藥效成分的提取物本身的藥效更增加的情況，揭示本發(fā)明可以確保得到其它藥效成分含有率也大幅度增加了的蒿提取物?？鼓煞蛛p香豆素的測定為了確定由本發(fā)明得到的丙醇提取物中是否含有雙香豆素，通過如下的實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行了測定。實(shí)驗(yàn)方法高效液相色譜法(HPLC法)柱Capcell—pakC18(4.6x250mm:5|im)流速l.OmL/min檢測UV350nm注入量10|il流動(dòng)相流動(dòng)相A5mM曱基磺酸鈉和1OmM磷酸鉀的混合液(pH3.0)流動(dòng)相B乙腈表2流動(dòng)相洗脫梯度<table>tableseeoriginaldocumentpage7</column></row><table>實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，在實(shí)施例1和3的提取物中完全沒有檢測出雙香豆素成分。因此可知，對于本發(fā)明的蒿的丙醇提取物來說，即使除了利用丙醇提取的工序以外不增加另外的追加工序，也與現(xiàn)有乙醇提取物不同，不會(huì)含雙香豆素成分。蒿的丙醇提取物的胃炎病變抑制效果將根據(jù)實(shí)施例1制造的蒿提取物加入到相當(dāng)于約1.5倍的賦形劑(微細(xì)蟲膠)中進(jìn)行稀釋、干燥，以該稀釋千燥物為對象，在通常的鹽酸-乙醇誘發(fā)的胃損傷大鼠(rat)模型上進(jìn)行胃黏膜保護(hù)效果的評(píng)價(jià)。對照組中則對于含有根據(jù)比較例1制造的蒿的乙醇提取物的東亞制藥制造的STILLENTAB(^曰^§，藥品名)進(jìn)行粉末化來使用。如圖3所示，根據(jù)實(shí)施例1制造的蒿的丙醇提取物對胃損傷的抑制效果突出，并且顯示出了量效關(guān)系。尤其比較以相同劑量給藥的提取物與含蒿的乙醇提取物的市售STILLENTAB即組3與組5的話，可以知道胃部病變抑制效果更加得到改善。8權(quán)利要求1.一種蒿的丙醇提取物，它是用丙醇對蒿進(jìn)行提取而得到的對胃部病變有效的蒿的丙醇提取物，其特征在于，在制造該提取物時(shí)不包括另外的除去雙香豆素的工序。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒿的丙醇提取物，其特征在于，所述的蒿是從由艾蒿(Artemisiaargyi)、艾草(A.princepsvar.orientalis,A.asiatica)、山地蒿(A.montana)、蒙古蒿(A.mongolica)以及在韓國草藥典中定義的同屬植物組成的組中選出。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒿的丙醇提取物，其特征在于，所述的丙醇為1-丙醇或2-丙醇。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蒿的丙醇提取物，其特征在于，所述蒿提取物的收率為20:1。5.—種蒿的丙醇提取物的制造方法，其特征在于，包括用丙醇提取蒿的工序和對上述提取液進(jìn)行減壓濃縮的工序，但不包括另外的除去雙香豆素的工序。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的蒿的丙醇提取物的制造方法，其特征在于，所述蒿提取物的收率為20:1。全文摘要本發(fā)明提供一種用丙醇提取得到的蒿提取物，由此可以得到不僅比現(xiàn)有技術(shù)以高含量含有抗胃炎物質(zhì)異澤蘭黃素，而且無需另外的除去工序就已完全除去了抗凝血物質(zhì)的蒿提取物。本發(fā)明提供的蒿的丙醇提取物，是用丙醇對蒿進(jìn)行提取而得到的對胃部病變有效的蒿的丙醇提取物，其特征在于，在制造該提取物時(shí)不包括另外的除去雙香豆素的工序。文檔編號(hào)A61K36/282GK101518558SQ20091000718公開日2009年9月2日申請日期2009年2月13日優(yōu)先權(quán)日2008年2月14日發(fā)明者吳真燮,廉大一,樸俊相,王塤植申請人:Gl醫(yī)藥科技公司