專利名稱：：牛角瓜中的強(qiáng)心苷化合物的抗腫瘤新用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體是牛角瓜中的強(qiáng)心苷化合物Frugoside在治療腫瘤方面的新用途。
背景技術(shù)：
：牛角瓜[Ca/ofro;7/sgz'ga"fea(L.)DryandexAit.f.]為蘿摩禾斗(Asclepiadaceae)牛角瓜屬(Oz/Wra/^)植物。別名五狗臥花、羊浸樹、斷腸草。牛角瓜屬植物全世界共有6個(gè)種，分布于東南亞。我國(guó)產(chǎn)牛角瓜和白花牛角瓜兩種，分布于海南、云南、廣東和廣西等地，生長(zhǎng)于低海拔向陽(yáng)山坡、曠野和海邊。牛角瓜根、莖、葉、果各部及白色汁液均有大毒和強(qiáng)烈的剌激性，食少量能引起嘔吐和下瀉，食大量則會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的腹痛及腸炎，以致死亡，妊娠的人畜中毒引起流產(chǎn)。牛角瓜入藥可用作發(fā)汗劑、除痰劑、驅(qū)蟲劑、驅(qū)風(fēng)劑和強(qiáng)心劑，用于治療濕疹、麻瘋病、梅毒、象皮病、哮喘等病癥。牛角瓜根、莖、葉的主要成分為強(qiáng)心苷類化合物。強(qiáng)心苷類化合物是治療心力衰竭不可缺少的重要藥物，臨床上用以治療心力衰竭及節(jié)律障礙等心臟疾病。發(fā)明人對(duì)牛角瓜中的強(qiáng)心苷類化合物進(jìn)行了分離和抗腫瘤活性測(cè)試，發(fā)現(xiàn)了牛角瓜中的強(qiáng)心苷化合物Frugoside在抗腫瘤方面的新用途。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于公開強(qiáng)心苷化合物Frugoside在制備抗腫瘤藥物中的新用途。強(qiáng)心苷化合物Frugoside可以從牛角瓜中利用包括吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析、反相硅膠柱層析，減壓柱層析等多種常規(guī)分離手段獲得，或者通過(guò)合成以及半合成手段獲得。與適宜的賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成各種劑型。用于制備治療包括口腔癌、鼻咽癌、肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、膽癌、膽道癌、膽管癌、腎癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌、急性白血病、惡性淋巴瘤、腦瘤、骨腫瘤、黑素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等多種癌癥疾病的藥物。強(qiáng)心苷化合物Frugoside的結(jié)構(gòu)如下<formula>formulaseeoriginaldocumentpage4</formula>FrugosideR二6-去氧阿洛糖(6-deoxyallose)本發(fā)明對(duì)化合物進(jìn)行了抗腫瘤活性測(cè)試，結(jié)果表明該化合物對(duì)多種腫瘤細(xì)胞株具有較強(qiáng)的抑制作用。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不限制本發(fā)明。實(shí)施例1:強(qiáng)心苷化合物Frugoside的提取分離牛角瓜根(26.7kg)用95%的乙醇室溫浸提3次，減壓回收乙醇至無(wú)醇味。將乙醇提取物分散于水中成懸濁液，經(jīng)石油醚萃取得到石油醚部分(236.1g)，剩下的水液經(jīng)過(guò)濾后上大孔吸附樹脂(D-101)柱層析，先后用水和甲醇洗脫，收集甲醇洗脫液，經(jīng)濃縮得到甲醇部分(256.1g)。得到的甲醇部分過(guò)減壓柱分成若干餾分，再經(jīng)硅膠柱、反相硅膠柱和葡聚糖凝膠柱反復(fù)柱層析得到化合物Frugoside(12.46g)。實(shí)施例2:強(qiáng)心苷化合物Frugoside的結(jié)構(gòu)鑒定利用光譜技術(shù)，包括紫外、紅外、核磁共振及高分辨質(zhì)譜分析，鑒定了實(shí)施例1中的強(qiáng)心苷化合物Fmgoside的結(jié)構(gòu)。運(yùn)用2D-NMR技術(shù)對(duì)化合物糖上的13C-NMR，^-NMR數(shù)據(jù)首次進(jìn)行了歸屬。(見附表l、2)實(shí)施例3:強(qiáng)心苷化合物Frugoside的體外抑瘤實(shí)驗(yàn)采用MTT法測(cè)試了強(qiáng)心苷化合物Frugoside，對(duì)人體的胃癌細(xì)胞SGC-7901、慢性骨髓性白血病細(xì)胞K562、人口腔表皮癌細(xì)胞KB、骨纖維肉瘤HT-1080、骨肉瘤(G-292、KHOS/NP)、前列腺癌LNCap、胃腺癌(KKLS、MKN-28、MKN-45)等細(xì)胞株的體外抑瘤活性(結(jié)果見附表3)。活性測(cè)試方法如下實(shí)驗(yàn)設(shè)陰性對(duì)照組(水)、DMSO溶劑對(duì)照組、陽(yáng)性對(duì)照組(絲裂霉素C)和8個(gè)不同濃度(0.8,1.6，3.2，6.3，12.5,25,50,100)的待測(cè)樣品，每個(gè)濃度設(shè)2個(gè)平行。收集對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，按每孔4500個(gè)癌細(xì)胞量接種于96孔平底細(xì)胞培養(yǎng)板中，置于5%(302、濕度90%以上、37。C溫箱中培養(yǎng)。24h后取出加入一定量的待測(cè)樣品，繼續(xù)培養(yǎng)3d后取出置于顯微鏡下觀察每孔細(xì)胞形態(tài)，記錄細(xì)胞形態(tài)變化情況，接著每孔加入5mg/mL的MTT溶液(溶于平衡鹽溶液PBS)50^L,37。C反應(yīng)4h后，將細(xì)胞培養(yǎng)液吸出，每孔加入lOOiaLDMSO將Formazane充分溶解，將細(xì)胞培養(yǎng)板置于MK3酶標(biāo)儀上，用570nm波長(zhǎng)測(cè)各孔的吸光度(A)，按下列公式求生長(zhǎng)抑制率。生長(zhǎng)抑制率(％)=(1——用鄉(xiāng)，頓直)xl00%、陰性對(duì)照組平均A值^以樣品濃度為橫坐標(biāo)，以抑制率為縱坐標(biāo)，作圖并求出抑制率為50%時(shí)樣品的濃度(1(35();)，樣品活性結(jié)果即以半數(shù)抑制濃度(ICso)表示。實(shí)施例4:強(qiáng)心苷化合物Fmgoside8g與微晶纖維素78g及硬脂酸鎂8g混合，混合物用單沖壓片機(jī)打成直徑5mm，重量100mg的片劑。本片劑中每片含F(xiàn)rugoside10mg。結(jié)合病癥，每次l-2片，每日服用2-3次。實(shí)施例5:強(qiáng)心苷化合物Frugoside20g與乳糖100g及硬脂酸鎂8g混合，以每300mg填充膠囊。本膠囊劑中，每個(gè)膠囊含F(xiàn)rugoside50mg。結(jié)合病癥，每次1-2個(gè)，每日服用3-4次。附表l、實(shí)施例2中強(qiáng)心苷化合物Frugoside的理化常數(shù)Frugoside:白色針狀結(jié)晶，mp165-169°C;IR(KBr)3435,2935，1737cm";FAB-MS(pos.)m/z(%):559([M+Na]+,8),537([M+H]+，4).附表2、實(shí)施例2中強(qiáng)心苷化合物Frugoside的"C-NMR數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>附表3、實(shí)施例1-3中強(qiáng)心苷化合物Frugoside的體外抑瘤結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1、牛角瓜中強(qiáng)心苷化合物的抗腫瘤新用途，其特征在于利用多種常規(guī)分離手段從牛角瓜中分離獲得或者通過(guò)合成以及半合成手段獲得的強(qiáng)心苷化合物Frugoside在制備腫瘤治療藥物中的用途。Frugoside的結(jié)構(gòu)FrugosideR＝6-去氧阿洛糖(6-deoxyallose)2、如權(quán)利要求l所述的強(qiáng)心苷化合物Frugoside在制備腫瘤治療藥物中的新用途，其特征在于將化合物Frugoside與適宜的賦形劑相結(jié)合，按照常規(guī)方法制成各種劑型在制備癌癥治療藥物中的應(yīng)用。3、如權(quán)利要求1所述的強(qiáng)心苷化合物Frugoside在制備腫瘤治療藥物中的用途，其特征在于Frugoside制成的制劑，可用于制備治療包括口腔癌、鼻咽癌、肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、膽癌、膽道癌、膽管癌、腎癌、胰腺癌、結(jié)腸直腸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮癌、卵巢癌、急性白血病、惡性淋巴瘤、腦瘤、骨腫瘤、黑素瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤等多種癌癥疾病的藥物。全文摘要本發(fā)明涉及醫(yī)藥
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體為強(qiáng)心苷化合物Frugoside在制備腫瘤治療藥物中的新用途。Frugoside可利用多種常規(guī)分離手段從牛角瓜中分離獲得或者通過(guò)合成以及半合成手段獲得。文檔編號(hào)A61K36/27GK101336924SQ20081013782公開日2009年1月7日申請(qǐng)日期2008年7月3日優(yōu)先權(quán)日2008年7月3日發(fā)明者嬌吳,戴好富,晏小霞,曾艷波,梅文莉,王建榮,王祝年,王茂媛申請(qǐng)人:中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶作物品種資源研究所;中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院熱帶生物技術(shù)研究所