專利名稱：治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及制備和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。

背景技術(shù)：
風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎屬變態(tài)反應(yīng)性疾病，是風(fēng)濕熱的主要表現(xiàn)之一。多以急性發(fā)熱及關(guān)節(jié)疼痛起病，典型表現(xiàn)是輕度或中度發(fā)熱，游走性多關(guān)節(jié)炎，受累關(guān)節(jié)多為膝、踝、肩、肘、腕等大關(guān)節(jié)，常見由一個關(guān)節(jié)轉(zhuǎn)移至另一個關(guān)節(jié)，病變局部呈現(xiàn)紅、腫、灼熱、劇痛，部分病人也有幾個關(guān)節(jié)同時發(fā)病，急性炎癥一般于2-4周消退，不留后遺癥，但常反復(fù)發(fā)作。若風(fēng)濕活動影響心臟，則可發(fā)生心肌炎，甚至遺留心臟瓣膜病變。
目前西醫(yī)治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎主要應(yīng)用非甾抗炎藥、免疫抑制劑及激素等藥物，雖然能夠暫時止痛，緩解癥狀，起到一定的治療作用，然而卻不能從根本上治療該病，而且長期用藥還可能破壞人體免疫系統(tǒng)，最終出現(xiàn)不可逆轉(zhuǎn)的胃、肝、腎等內(nèi)臟器官嚴(yán)重?fù)p傷，其產(chǎn)生的副作用絕對不容忽視。
本病屬中醫(yī)“痹證”范疇。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為居處潮濕，觸冒風(fēng)雨等是產(chǎn)生痹證的外來條件；素體虛弱，氣血不足，腠理不密是產(chǎn)生痹證的內(nèi)在因素。風(fēng)寒熱濕之邪乘虛入侵，留滯經(jīng)絡(luò)肌肉關(guān)節(jié)，氣血閉阻不通，從而產(chǎn)生肢節(jié)酸麻疼痛、屈伸不利諸癥，若以熱盛或濕熱蘊(yùn)蒸為主，則見關(guān)節(jié)紅、腫、熱、痛；若寒濕偏盛則關(guān)節(jié)冷痛，遇寒痛增；若久病不愈，還可出現(xiàn)氣血不足，肝腎虧損或病邪深入內(nèi)臟等變化。
祖國醫(yī)學(xué)長期以來對“風(fēng)濕病”的治療有豐富的經(jīng)驗，積累了許多行之有效的驗方，相較西醫(yī)而言，祖國醫(yī)學(xué)療效確切、使用方便、不良反應(yīng)小等優(yōu)勢明顯，因此更適宜在臨床上推廣應(yīng)用。


發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明另一目的在于提供一種治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物；本發(fā)明的第三個目的在于提供該藥物組合物的制備方法；本發(fā)明的第四個目的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn) 本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為 生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎補(bǔ)(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細(xì)辛50-680重量份、人參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、刺五加50-680重量份、續(xù)斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成還可以為 生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、紅花50-680重量份、骨碎補(bǔ)(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細(xì)辛50-680重量份、紅參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、五加皮50-680重量份、續(xù)斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為 生川烏200-450重量份、生草烏200-450重量份、馬錢子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、烏梢蛇200-450重量份、紅花200-450重量份、骨碎補(bǔ)(制)200-450重量份、烏梅200-450重量份、金銀花200-450重量份、細(xì)辛100-330重量份、紅參200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黃柏200-450重量份、沒藥200-450重量份、廣地龍200-450重量份、地楓皮200-450重量份、老鸛草270-600重量份、五加皮200-450重量份、續(xù)斷200-450重量份、麻黃200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為 生川烏280重量份、生草烏380重量份、馬錢子(制)300重量份、羌活280重量份、烏梢蛇380重量份、紅花300重量份、骨碎補(bǔ)(制)280重量份、烏梅380重量份、金銀花300重量份、細(xì)辛280重量份、紅參380重量份、鹿茸300重量份、黃柏280重量份、沒藥380重量份、廣地龍300重量份、地楓皮280重量份、老鸛草380重量份、五加皮300重量份、續(xù)斷280重量份、麻黃380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為 生川烏200重量份、生草烏200重量份、馬錢子(制)200重量份、羌活200重量份、烏梢蛇200重量份、紅花200重量份、骨碎補(bǔ)(制)200重量份、烏梅200重量份、金銀花200重量份、細(xì)辛100重量份、紅參200重量份、鹿茸130重量份、黃柏200重量份、沒藥200重量份、廣地龍200重量份、地楓皮200重量份、老鸛草270重量份、五加皮200重量份、續(xù)斷200重量份、麻黃200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。
本發(fā)明藥物組合物制備方法為步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A； 步驟2、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B； 步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的劑型。
本發(fā)明藥物組合物制備方法優(yōu)選為步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，加水量為藥材體積的8倍，第二次1.5小時，加水量為藥材體積的6倍，第三次1小時，加水量為藥材體積的6倍，合并煎液，濾液濃縮至80℃時相對密度為1.20～1.30的清膏A； 步驟2、生川烏、生草烏、制馬錢子、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成100目的細(xì)粉，過篩，得藥粉B； 步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的劑型。
本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種 a.人參的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚20-30ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇40-60ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液用氨試液25-35ml提取，棄去下層液，用水15-30ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸漬20-40min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水3-10ml濕潤，加三氯甲烷20-40ml，超聲處理20-30分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸氣飽和10-20分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密稱重，回流提取50-75分鐘，放涼后，用40-60％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下檢測方法中的一種或幾種 a.人參的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
本發(fā)明藥物組合物舒筋活血，祛風(fēng)鎮(zhèn)痛，益氣養(yǎng)血，滋補(bǔ)肝腎，溫經(jīng)散寒，化淤通絡(luò)，消腫止痛。用于筋骨麻木，手足拘攣，腰腿疼痛，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎。故方中取大辛、大熱、大毒之生川烏、生草烏合而為君，生川烏祛風(fēng)溫里散寒，即可發(fā)熱肌表之寒濕，善療寒濕阻絡(luò)之痹病，又可溫通臟腑之陰寒。功具溫陽通絡(luò)以開痹，故除內(nèi)外之寒濕生草烏功用略同生川烏，但其長于搜風(fēng)出寒祛濕，且其止痛除痹功較強(qiáng)，合而用之，溫通表里，直中寒濕阻絡(luò)癥機(jī)，故為君。馬錢子(制)苦、溫，功擅通絡(luò)止痛，散結(jié)消腫“能搜筋骨入骱之風(fēng)濕，祛皮里膜外凝結(jié)之痰毒”尤其是“其開通經(jīng)絡(luò)，透達(dá)關(guān)節(jié)之力實遠(yuǎn)勝于他藥也。”故與二烏相伍，側(cè)重舒筋止痛亦為君。伍以大隊濕補(bǔ)通經(jīng)之淫羊藿、鹿茸、細(xì)辛、牛膝、槲寄生、骨碎補(bǔ)(制)、五加皮、烏梢蛇、羌活、續(xù)斷、紅參、老鸛草、地楓皮以加強(qiáng)三君藥溫陽祛寒、舒筋通絡(luò)、消腫止痛之力；寒主收引，濕阻氣機(jī)均易生瘀，故取廣地龍、沒藥、紅花活血化瘀以通達(dá)痹阻之經(jīng)絡(luò)。麻黃、桂枝相互辛溫走表，宣肺以化濕，共為臣，君藥諸藥多為辛、香、燥烈之品，耗氣傷津之味，故取烏梅生津斂液，開中寓合，以防止辛散之品傷津燥血，溫郁氣機(jī)，易伴郁熱，故取金銀花、黃柏清熱燥濕，又可防止君藥辛溫太過之弊，共為佐。甘草調(diào)和諸藥為使，本方藥味雖多，但多而不雜，君臣有序，佐使分明，祛邪為主兼扶正，溫通之中佐清透開合又寓收斂。故而諸藥合用共奏舒筋活血，祛風(fēng)鎮(zhèn)痛之佳效。
本發(fā)明藥物組合物經(jīng)實驗研究證實有效成份可通過神經(jīng)系統(tǒng)間接刺激腦垂體，使腎上腺皮質(zhì)機(jī)能亢進(jìn)，皮質(zhì)激素分泌增加，抗組織胺分泌以止痛；方中制川烏、制草烏對風(fēng)濕，類風(fēng)濕因子有較強(qiáng)的親和力，可以直接殺傷致病因子，祛風(fēng)除濕，溫經(jīng)止痛，消腫排膿；抑制關(guān)節(jié)滑膜細(xì)胞增殖，阻斷病情持續(xù)發(fā)展；改善人體微循環(huán)、抑制炎癥反應(yīng)，減輕疼痛；迅速增強(qiáng)骨髓的免疫機(jī)能，激活骨髓健康循環(huán)系統(tǒng)，消除風(fēng)濕疼痛。
通過對比試驗發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明組合物對風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥效顯著，并且本發(fā)明所述的范圍在可以實現(xiàn)本發(fā)明藥效的同時，經(jīng)過篩選，意外的發(fā)現(xiàn)，在組合物的某些范圍內(nèi)，具備更為突出的藥效。
本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過大量具體創(chuàng)造性試驗篩選后得到，鑒別方法中通過對樣品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測定方法中通過對樣品、供試品處理方法的篩選，展開劑的選擇，使得含量測定方法可以很有效的對產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控制，并且用該方法測定的產(chǎn)品相比其他方法測定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。

具體實施例方式 以下實驗例和實施例用于進(jìn)一步說明本發(fā)明但不限于本發(fā)明 實驗例1片劑的工藝研究 水提加水量 按處方配置黃柏、骨碎補(bǔ)(制)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃、甘草、槲寄生3份藥材，分三組進(jìn)行試驗，第一組加水量6倍量、4倍量、4倍量，第二組加水量8倍量、6倍量、6倍量，第三組加水量10倍量、8倍量、8倍量，以出膏量為指標(biāo)，確定加水量。結(jié)果見表1 表1水提加水量
以出膏量為指標(biāo)，可以看出加水8倍量、6倍量、6倍量出膏量較好，生產(chǎn)中選用加水量8倍量、6倍量、6倍量。
表2主要技術(shù)參數(shù)
表3三批中試生產(chǎn)數(shù)據(jù)
從上述試驗可以看出，本發(fā)明制備工藝成品率高，穩(wěn)定可行。
實驗例2人參的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a.取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細(xì)，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細(xì)，加三氯甲烷25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，上層液蒸干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。
另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數(shù)分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點情況。結(jié)果見表4 表4供試品溶液提取溶劑的選擇 組別 ab c 展開效果 好 有干擾 斑點不清晰 結(jié)果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為紅參鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的回流時間 取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細(xì)，加乙醚25ml，按下表所列時間超聲處理，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數(shù)分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表5 表5超聲處理時間的優(yōu)選試驗結(jié)果 由表5可以看出，回流提取時間選定為15min，能有效檢測樣品中所含的人參甙Re。
(3)供試品溶液的超聲時間 取實施例12所制成品25片，除去糖衣，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，按下表所列時間超聲處理，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數(shù)分鐘。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表6 表6超聲處理時間的優(yōu)選實驗結(jié)果 由表6可以看出，回流提取時間選定為30min，能有效檢測樣品中所含的人參甙Re。
(4)本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水配比為10∶40∶20∶10，15∶40∶22∶10，25∶40∶22∶10，15∶30∶22∶10的10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數(shù)分鐘，觀察顏色變化。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表7 表7展開劑用量配比優(yōu)選實驗結(jié)果 從表7可以看出展開劑配比為15∶40∶22∶10時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點分離不好等現(xiàn)象。
(5)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選 分別取供試品溶液各1μl、2μl、5μl、8μl、15μl，點于同一硅膠G薄層板上，用石油醚(60～90℃)-苯-乙酸乙酯-冰醋酸10∶20∶7∶0.5的展開劑展開，取出，晾干，噴以1％香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表8 表8樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果 從表8可以看出供試品點樣量在5μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(6)陰性對照試驗 取缺人參的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強(qiáng)。
根據(jù)以上實驗確定本發(fā)明制劑中紅參的定性檢測方法為 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液。另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液。再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水(15∶40∶22∶10)10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘干數(shù)分鐘。供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例3金銀花的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b.取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加甲醇5ml，放置12小時，濾過，取濾液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c.取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加50％甲醇25ml超聲處理30分鐘，濾過，取濾液作為供試品溶液。
另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點情況。結(jié)果見表9 表9供試品溶液提取溶劑的選擇 結(jié)果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為金銀花鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的浸漬時間 取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列時間浸漬，取上清液作為供試品溶液。另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表10 表10浸漬時間的優(yōu)選實驗結(jié)果 由表10可以看出，浸漬時間選定為30min，能有效檢測樣品中所含的金銀花(綠原酸)。
(3)本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為9∶2，9∶3，8∶3，7∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表11 表11展開劑用量配比優(yōu)選實驗結(jié)果 從表11可以看出展開劑配比為8∶3時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點分離不好等現(xiàn)象。
(4)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選 分別取供試品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為8∶3為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表12 表12樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果 從表12可以看出供試品點樣量在3μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(5)陰性對照試驗 取缺金銀花的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強(qiáng)。
根據(jù)以上實驗確定本發(fā)明制劑中金銀花的檢測方法為 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(8∶3)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例4沒藥的鑒別方法試驗 (1)供試品溶液的提取溶劑選擇 供試品溶液的提取溶劑選擇方法a取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法b.取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加乙醚，超聲20分，濾過，揮干，殘渣加甲醇溶解做供試品溶液。
供試品溶液的提取溶劑選擇方法c.取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加乙醇，超聲30分，濾過，濃縮，做供試品溶液。
另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點情況。結(jié)果見表13 表13供試品溶液提取溶劑的選擇 結(jié)果表明，供試品溶液制備方法a的效果最佳，因此，選用制備方法a作為沒藥鑒別的供試品溶液制備方法。
(2)供試品溶液的浸漬時間 取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取1.4g，加石油醚(30-60℃)3ml，按下表所列時間浸漬，取上清液作為供試品溶液。另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表14 表14浸漬時間的優(yōu)選實驗結(jié)果 由表14可以看出，浸漬時間選定為30min，即能有效檢測樣品中所含的沒藥。
(3)本檢測方法中展開劑用量配比的優(yōu)選 取上述供試品溶液、對照藥材溶液及對照品溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為8∶2.0，9∶1.5，10∶1.0，11∶0.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表15 表15展開劑用量配比優(yōu)選實驗結(jié)果 從表15可以看出展開劑配比為9∶1.5時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點分離不好等現(xiàn)象。
(4)本檢測方法中樣品溶液點樣量的優(yōu)選 分別取供試品溶液各1μl，2μl，3μl，5μl，7μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯配比為9∶1.5為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。觀察供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，斑點顯色情況。結(jié)果見表16 表16樣品溶液點樣量優(yōu)選實驗結(jié)果 從表16可以看出供試品點樣量在2～3μl時，在薄層板上顯色效果較好，適合試驗要求。
(5)陰性對照試驗 取缺沒藥的陰性樣品，照上述檢測方法中供試品溶液制備方法制備陰性對照溶液，展開后在對照品溶液對應(yīng)位置上沒有出現(xiàn)相應(yīng)斑點，說明所選取的檢測實驗專屬性強(qiáng)。
根據(jù)以上實驗確定本發(fā)明制劑中沒藥的檢測方法為 取金銀花鑒別項下的供試品溶液作為供試品溶液。另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。
實驗例5烏頭堿的限量檢查 (1)供試品制備方法 取實施例12所制成品除去糖衣，研細(xì)，稱取三份，每份7g，加10％氨水5ml濕潤，分別加三氯甲烷20，25，30，35，40ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液。
另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。觀察供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點比較斑點顏色，并相互比較。結(jié)果見表17 表17溶劑用量考察結(jié)果 從表17可以看出三氯甲烷的用量在30ml以上的溶出無明顯變化，且斑點均淺于對照品溶液斑點。
(2)展開劑的選擇 取上述供試品溶液、對照品溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇配比為10∶0.1，9∶0.5，9∶1，8∶2(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深。結(jié)果見表18 表18展開劑用量配比優(yōu)選實驗結(jié)果 從表18可以看出展開劑配比為9∶0.5時，供試品溶液展開效果最好，沒有出現(xiàn)拖尾、主斑點分離不好等現(xiàn)象，斑點最均勻。
根據(jù)以上實驗確定本發(fā)明制劑中烏頭堿的限量檢測方法為 烏頭堿限量 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液。另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液。照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇(9∶0.5)(氨蒸氣飽和15分鐘)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深。
實驗例6綠原酸的含量測定方法試驗 檢測儀器島津公司SPD-10ATvp型高效液相色譜儀 色譜柱迪瑪公司(Zorbax C18 4.6×150mm，5μm)與C18保護(hù)柱 流動相乙睛-0.4％磷酸(v/v)(9∶91)(乙睛為色譜級，磷酸為分析級，水為重蒸水) 檢測波長327nm流速1.000ml/min柱溫室溫 對照品綠原酸 購于中國藥品生物制品檢定所 批號753-200210 測定方法取實施例12所制成品按定量檢測項下供試品溶液的制備方法制備樣品液；并按本發(fā)明制備方法制備缺金銀花的空白樣品，制備陰性對照液，用微孔濾膜(0.45μm)過濾。分別精密吸取陰性對照液，對照品液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
含量測定方法考察 (1)空白試驗 空白溶液的制備是按處方中藥味的比例，自配不含金銀花、紅花、馬錢子、淫羊藿的群藥，按其工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制備，上述色譜條件測定，結(jié)果空白溶液在與綠原酸對照品相同保留時間處未顯色譜峰，故認(rèn)為無干擾。
(2)穩(wěn)定性試驗 取綠原酸對照品溶液(0.16mg/ml)，分別于配制后0、2、4、6、12、24小時進(jìn)樣3ul，依法測定，結(jié)果表明，其在24小時內(nèi)基本穩(wěn)定，結(jié)果見表19 表19穩(wěn)定性試驗結(jié)果
(3)線性關(guān)系考察 取綠原酸對照品溶液(0.16mg/ml)搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、7μl注入高效液相色譜儀，測定峰面積，結(jié)果見表20，表明綠原酸對照品在0.16μg-1.12μg間呈線性關(guān)系，其回歸方程為 Area＝2963859.729*Amt-129002.2925(r＝0.999966789) 表20線性關(guān)系考察結(jié)果
(4)精密度試驗 精密吸取對照品溶液3μl，重復(fù)進(jìn)樣5次，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差＜2％，結(jié)果見表21 表21精密度試驗結(jié)果
(5)重現(xiàn)性試驗 按正文方法，取實施例12所制成品5份，對每份進(jìn)行測定，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差＜2％，結(jié)果見表22 表22重現(xiàn)性試驗結(jié)果
(6)回收率試驗 取實施例12所制成品粉末1g，精密稱定，再精密加入綠原酸(0.16mg/ml)對照品5ml，50％甲醇20ml，按正文供試品溶液的制備方法操作，測定其含量，并計算其回收率，測定結(jié)果見表23 表23回收率試驗結(jié)果
2.含量測定結(jié)果見表24 根據(jù)以上數(shù)據(jù)，將含量限度定為片劑每1g含綠原酸，不得少于0.5mg。
實驗例7療效實驗 本發(fā)明藥物組I(根據(jù)實施例5處方比例及制法所得藥物) 本發(fā)明藥物組II(根據(jù)實施例6處方比例及制法所得藥物) 1、性別與年齡 男性239例，女性261例，最小16歲，最大65歲，以20-50歲年齡組最為多見。
2、病程 最短者25天，最長者20年，三年以內(nèi)最多，共500例。
治療方法按說明書服用，伴月為一療程，一般需服2-3個療程，共分為兩組，本發(fā)明藥物組I 200例、本發(fā)明藥物組II 200例和對照藥物組(風(fēng)濕筋骨片)100例。
3、療效判定標(biāo)準(zhǔn) (1)臨床治愈 癥狀全部消失，功能活動恢復(fù)正常，主要參考指標(biāo)(血沉，抗鏈O，類風(fēng)濕因子)正常。
(2)顯效 全部癥狀消失或主要癥狀消除，關(guān)節(jié)功能基本恢復(fù)，能參加正常工作和勞動，主要參考指標(biāo)(各種理化檢查)基本正常。觀察結(jié)果見表25 表25總療效統(tǒng)計分析
本發(fā)明組與對照藥物組比較P＜0.05 表25結(jié)果表明本發(fā)明藥物組I與本發(fā)明藥物組II治療效果顯著，有效率分別為93％、93.5％，治愈率分別為25.5％、25.0％。
(3)療程與療效比較 表26療效與療程比較分析表

本發(fā)明藥物組與對照藥物組比較P＜0.05 表26結(jié)果表明本發(fā)明藥物組I與本發(fā)明藥物組II與對照組藥物比較對本病治療效果不論病程長短，療效均有顯著提高。
(4)主癥指標(biāo)與療效比較 表27主癥指標(biāo)與療效比較表
本發(fā)明組與對照藥物組比較*P＜0.05 從表27治療前后癥狀對比分析，可見本發(fā)明藥物組I與本發(fā)明藥物組II與對照組藥物比較對消除關(guān)節(jié)疼痛，減輕紅腫熱，恢復(fù)運動機(jī)能等方面均有顯著療效，可使抗0和血沉下降或恢復(fù)正常，部分類風(fēng)濕因子試驗轉(zhuǎn)陰，對有環(huán)形紅斑或硬結(jié)者，有消除作用。
4、副作用 本觀察組200例使用本藥均無副作用。
下述實施例均能夠?qū)崿F(xiàn)上述實驗例所述的效果 實施例1 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細(xì)辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的丸劑10000g。
實施例2 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛200g、紅參200g、鹿茸200g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草200g、五加皮200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的膠囊10000粒。
實施例3 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的顆粒劑10000袋。
實施例4 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細(xì)辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的滴丸10000粒。
實施例5 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(bǔ)(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細(xì)辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續(xù)斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的合劑1000瓶。
實施例6 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g A、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A； B、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B； C、清膏A與藥粉B混勻，干燥，粉碎，制粒，壓制成10000片，干燥，包衣，即得。
實施例7 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(bǔ)(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細(xì)辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續(xù)斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例1中方法制成丸劑。
實施例8 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細(xì)辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 本藥物組合物實施例2中方法制成膠囊劑。
實施例9 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例3中方法制成顆粒劑。
實施例10 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、紅花200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛100g、紅參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、五加皮200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例4中方法制成滴丸劑。
實施例11 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(bǔ)(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細(xì)辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續(xù)斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例5中方法制成合劑。
實施例12 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細(xì)辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
實施例13 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、紅花350g、骨碎補(bǔ)(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細(xì)辛650g、紅參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、五加皮420g、續(xù)斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
實施例14本發(fā)明制劑的質(zhì)量控制方法 取實施例13制成品進(jìn)行限量檢測和定量檢測 d.烏頭堿的限量檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例15本發(fā)明制劑的質(zhì)量控制方法 取實施例12制成品進(jìn)行定性檢測 a.人參的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； 實施例16本發(fā)明制劑的質(zhì)量控制方法 取實施例6內(nèi)容物進(jìn)行檢測 a.人參的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例17 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)300g、羌活280g、烏梢蛇380g、紅花300g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花300g、細(xì)辛280g、紅參380g、鹿茸300g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍300g、地楓皮280g、老鸛草380g、五加皮300g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草300g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝300g、桂枝280g 以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，第二次1.5小時，第三次1小時，合并煎液，濾液濃縮至相對密度為1.20～1.30(80℃)的清膏A；生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，干燥，粉碎，制粒，壓制成10000片，干燥，包衣，即得。
a.人參的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； b.金銀花的定性檢測 取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； c.沒藥的定性檢測 取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點； d.烏頭堿的限量檢測 取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深； e.綠原酸的定量檢測 照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000； 對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得； 測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得； 本品每克含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
實施例18 生川烏200g、生草烏200g、馬錢子(制)200g、羌活200g、烏梢蛇200g、三七200g、骨碎補(bǔ)(制)200g、烏梅200g、金銀花200g、細(xì)辛100g、人參200g、鹿茸130g、黃柏200g、沒藥200g、廣地龍200g、地楓皮200g、老鸛草270g、刺五加200g、續(xù)斷200g、麻黃200g、甘草200g、槲寄生200g、淫羊藿200g、牛膝200g、桂枝200g 本藥物組合物實施例2中方法制成膠囊劑。
實施例19 生川烏280g、生草烏380g、馬錢子(制)480g、羌活280g、烏梢蛇380g、三七480g、骨碎補(bǔ)(制)280g、烏梅380g、金銀花480g、細(xì)辛280g、人參380g、鹿茸480g、黃柏280g、沒藥380g、廣地龍480g、地楓皮280g、老鸛草380g、刺五加480g、續(xù)斷280g、麻黃380g、甘草480g、槲寄生280g、淫羊藿380g、牛膝480g、桂枝280g 本藥物組合物實施例4中方法制成丸劑。
實施例20 生川烏680g、生草烏600g、馬錢子(制)450g、羌活50g、烏梢蛇180g、三七350g、骨碎補(bǔ)(制)80g、烏梅100g、金銀花370g、細(xì)辛650g、人參620g、鹿茸210g、黃柏550g、沒藥50g、廣地龍680g、地楓皮320g、老鸛草580g、刺五加420g、續(xù)斷200g、麻黃550g、甘草680g、槲寄生560g、淫羊藿680g、牛膝500g、桂枝50g 本藥物組合物實施例6中方法制成片劑。
權(quán)利要求
1、一種治療風(fēng)濕病的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、三七50-680重量份、骨碎補(bǔ)(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細(xì)辛50-680重量份、人參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、刺五加50-680重量份、續(xù)斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
2、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于其中三七50-680重量份、人參50-680重量份、刺五加50-680重量份分別用如下原料藥替代紅花50-680重量份、紅參50-680重量份、五加皮50-680重量份。
3、如權(quán)利要求2所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏50-680重量份、生草烏50-680重量份、馬錢子(制)50-680重量份、羌活50-680重量份、烏梢蛇50-680重量份、紅花50-680重量份、骨碎補(bǔ)(制)50-680重量份、烏梅50-680重量份、金銀花50-680重量份、細(xì)辛50-680重量份、紅參50-680重量份、鹿茸50-680重量份、黃柏50-680重量份、沒藥50-680重量份、廣地龍50-680重量份、地楓皮50-680重量份、老鸛草50-680重量份、五加皮50-680重量份、續(xù)斷50-680重量份、麻黃50-680重量份、甘草50-680重量份、槲寄生50-680重量份、淫羊藿50-680重量份、牛膝50-680重量份、桂枝50-680重量份。
4、如權(quán)利要求3所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏200-450重量份、生草烏200-450重量份、馬錢子(制)200-450重量份、羌活200-450重量份、烏梢蛇200-450重量份、紅花200-450重量份、骨碎補(bǔ)(制)200-450重量份、烏梅200-450重量份、金銀花200-450重量份、細(xì)辛100-330重量份、紅參200-450重量份、鹿茸130-360重量份、黃柏200-450重量份、沒藥200-450重量份、廣地龍200-450重量份、地楓皮200-450重量份、老鸛草270-600重量份、五加皮200-450重量份、續(xù)斷200-450重量份、麻黃200-450重量份、甘草200-450重量份、槲寄生200-450重量份、淫羊藿200-450重量份、牛膝200-450重量份、桂枝200-450重量份。
5、如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏280重量份、生草烏380重量份、馬錢子(制)300重量份、羌活280重量份、烏梢蛇380重量份、紅花300重量份、骨碎補(bǔ)(制)280重量份、烏梅380重量份、金銀花300重量份、細(xì)辛280重量份、紅參380重量份、鹿茸300重量份、黃柏280重量份、沒藥380重量份、廣地龍300重量份、地楓皮280重量份、老鸛草380重量份、五加皮300重量份、續(xù)斷280重量份、麻黃380重量份、甘草300重量份、槲寄生280重量份、淫羊藿380重量份、牛膝300重量份、桂枝280重量份。
6、如權(quán)利要求4所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為生川烏200重量份、生草烏200重量份、馬錢子(制)200重量份、羌活200重量份、烏梢蛇200重量份、紅花200重量份、骨碎補(bǔ)(制)200重量份、烏梅200重量份、金銀花200重量份、細(xì)辛100重量份、紅參200重量份、鹿茸130重量份、黃柏200重量份、沒藥200重量份、廣地龍200重量份、地楓皮200重量份、老鸛草270重量份、五加皮200重量份、續(xù)斷200重量份、麻黃200重量份、甘草200重量份、槲寄生200重量份、淫羊藿200重量份、牛膝200重量份、桂枝200重量份。
7、如權(quán)利要求2-6中任意一項所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為
步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A；
步驟2、生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B；
步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的劑型。
8、如權(quán)利要求7所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為
步驟1、以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮三次，第一次2小時，加水量為藥材體積的8倍，第二次1.5小時，加水量為藥材體積的6倍，第三次1小時，加水量為藥材體積的6倍，合并煎液，濾液濃縮至80℃時相對密度為1.20～1.30的清膏A；
步驟2、生川烏、生草烏、制馬錢子、羌活、烏梢蛇、紅花、烏梅、金銀花、細(xì)辛、紅參、鹿茸、沒藥、桂枝十三味，粉碎成100目的細(xì)粉，過篩，得藥粉B；
步驟3、清膏A與藥粉B混勻，再加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的劑型。
9、如權(quán)利要求2-6中任意一項所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種
a.人參的定性檢測
取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚20-30ml，超聲處理10-20分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇40-60ml，超聲處理25-35分鐘，濾過，濾液用氨試液25-35ml提取，棄去下層液，用水15-30ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以13-18∶35-50∶20-25∶8-12比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，100-110℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
b.金銀花的定性檢測
取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)2-5ml，浸漬20-40min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
c.沒藥的定性檢測
取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以7-10∶1-3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，100-110℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
d.烏頭堿的限量檢測
取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水3-10ml濕潤，加三氯甲烷20-40ml，超聲處理20-30分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗2-4次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以7-10∶0.5-3比例氨蒸氣飽和10-20分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深；
e.綠原酸的定量檢測
照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以7-10∶90-95比例的乙睛-0.4％磷酸為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000；
對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加40-60％甲醇20-30ml，精密稱重，回流提取50-75分鐘，放涼后，用40-60％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
10、如權(quán)利要求9所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下檢測方法中的一種或幾種
a.人參的定性檢測
取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加乙醚25ml，超聲處理15分鐘，濾過，藥渣揮去溶劑，加水飽和正丁醇50ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液用氨試液30ml提取，棄去下層液，用水20ml洗滌，棄去水層，回收正丁醇至干，殘渣加甲醇1ml使溶解，作為供試品溶液；另取紅參對照藥材1g，同法制成對照藥材溶液；再取人參甙Re對照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以15∶40∶22∶10比例的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10％硫酸乙醇溶液，105℃烘數(shù)分鐘；供試品色譜中，在與對照藥材及對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
b.金銀花的定性檢測
取相當(dāng)于含生藥量2.45g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加石油醚(30-60℃)3ml，浸漬30min，取上清液作為供試品溶液；另取金銀花對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以8∶3比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
c.沒藥的定性檢測
取鑒別b項下的供試品溶液作為供試品溶液；另取沒藥對照藥材0.1g，加1ml石油醚(30-60℃)同法制成對照藥材溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述三種溶液各2-3μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以9∶1.5比例的正己烷-乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5％香草醛硫酸溶液，105℃烘至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；
d.烏頭堿的限量檢測
取相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加10％氨水5ml濕潤，加三氯甲烷30ml，超聲處理25分鐘，濾過，殘渣用少量三氯甲烷清洗三次，合并三氯甲烷溶液，濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取烏頭堿對照品，加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液，作為對照品溶液；照《中國藥典》2005版一部附錄VI B薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一含0.2％氫氧化鈉溶液的硅膠G薄層板上，以9∶0.5比例氨蒸氣飽和15分鐘的三氯甲烷-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以改良碘化鉍鉀試液顯色；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)位置的斑點上，不得比對照品斑點顏色深；
e.綠原酸的定量檢測
照《中國藥典》2005版一部附錄VI D高效液相色譜法測定；
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙睛-0.4％磷酸(9∶91)為流動相；檢測波長為327nm；理論板數(shù)按綠原酸峰計算應(yīng)不低于2000；
對照品溶液的制備 精密稱取綠原酸對照品適量，加甲醇溶解，制成每1ml中含綠原酸0.15mg，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
供試品溶液的制備 取相當(dāng)于含生藥量3.5g的制劑內(nèi)容物，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加50％甲醇25ml，精密稱重，回流提取60分鐘，放涼后，用50％甲醇補(bǔ)失重量，搖勻，取此液用微孔濾膜過濾，即得；
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜儀，測定，即得；
相當(dāng)于含生藥量12.25g的制劑內(nèi)容物含綠原酸(C16H18O9)計，不得少于0.5mg。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物組合物及制備和質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的藥物組合物原料藥組成為生川烏、生草烏、馬錢子(制)、羌活、烏梢蛇、三七、骨碎補(bǔ)(制)、烏梅、金銀花、細(xì)辛、人參、鹿茸、黃柏、沒藥、廣地龍、地楓皮、老鸛草、刺五加、續(xù)斷、麻黃、甘草、槲寄生、淫羊藿、牛膝、桂枝。制備方法為以上二十五味，黃柏、骨碎補(bǔ)、廣地龍、牛膝、地楓皮、老鸛草、五加皮、續(xù)斷、淫羊藿、麻黃，甘草、槲寄生十二味煎煮一到三次，合并煎液，濾液濃縮得清膏A；生川烏、生草烏等其余十三味，粉碎成細(xì)粉，過篩，得藥粉B；清膏A與藥粉B混勻，制成制劑。
文檔編號A61P29/00GK101569682SQ200810105198
公開日2009年11月4日 申請日期2008年4月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月29日
發(fā)明者付立家, 付建家 申請人:北京亞東生物制藥有限公司