專利名稱：：一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物組合物。
背景技術(shù)：
：糖尿病發(fā)病率仍在逐年增加。根據(jù)世界衛(wèi)生組織(WHO)提供的數(shù)據(jù)，發(fā)達國家糖尿病患病率已高達5%10%，在我國則為3%左右，全世界有1.3億糖尿病患者；到2030年，全世界糖尿病患者人數(shù)將比2000年翻一番。值得注意的是，糖尿病患病率在發(fā)展中國家增加速度特別快，尤其是在那些從窮變富的發(fā)展中國家。糖尿病不只是一個富貴病，在經(jīng)濟和生活水平發(fā)生劇變的地區(qū)，現(xiàn)實地存在著糖尿病爆發(fā)流行的危險。我國糖尿病正處于爆發(fā)性流行。糖尿病并發(fā)癥困擾著患者和醫(yī)務(wù)界糖尿病得不到適當(dāng)?shù)目刂撇l(fā)腎病、視網(wǎng)膜病變、外周神經(jīng)病變、:心臟病變的幾率很高，嚴(yán)重影響生活質(zhì)量。我國每年用于糖尿病的直接醫(yī)療成本超過180億，占醫(yī)療總費用的4%。盡管患者數(shù)量如此之多，但較低的診斷率，疾病的慢性病程，對聯(lián)合治療的需要，缺少有效的長程治療糖尿病的口服藥物以及與注射治療相關(guān)聯(lián)的較差的患者依從性,均意味著目前在該領(lǐng)域中，仍有許多需求未得到滿足。近年來醫(yī)藥工作者開展了大量有關(guān)糖尿病藥物研發(fā)的工作，解決了糖尿病治療中的一些問題，同時也潛在地改變了這種疾病的治療模式。1990年由德國B公司推出第一個a-葡萄糖苷酶抑制劑-阿卡波糖(acarbose)，具有降低餐后血糖的特點，從而調(diào)節(jié)血糖，改善糖代謝異常等，因此被認(rèn)為是抗糖尿病藥物作用的一種新途徑。近年來，同類藥物伏格列波糖(voglibose)及米格列醇(miglitol)也相繼上市。格列酮類藥物(TZDs)是一類新型的胰島素增敏劑，通過激活過氧化物酶增殖物激活受體(PPARs)y而顯著改善2型糖尿病患者的胰島素抵抗?fàn)顟B(tài)，降低血糖，并且可通過活化PPARy,下調(diào)TGF-pl，顯著減少糖尿病患者尿微量白蛋白，從而延緩腎臟損傷。TZDs的腎保護保護作用可以獨立于胰島素增敏和糖脂代謝的調(diào)節(jié)而直接發(fā)揮，如抑制系膜增生、抑制炎癥損害等。TZDs可能通過抑制ox-LDL的受體Lox-l的表達及由其引起的氧化應(yīng)激，從而減輕ox-LDL對腎臟的損傷。其中吡咯列酮(pioglitazone)是格列酮類最暢銷的藥物。AnthologyofMedicine,August2003，Vol.22，第四期《肝素鈣對2型糖尿病的影響》討論了肝素鈣對2型糖尿病人的輔助降糖作用，但肝素的使用劑量很大，而且也沒有給出肝素鈣與其他降糖藥聯(lián)合應(yīng)用的具體實施方案。盡管市面上口服降糖藥種類繁多，但迄今為止，還沒有哪種藥物能夠憑一己之力將2型糖尿病患者的HbAlc水平長期保持在目標(biāo)范圍之內(nèi)。傳統(tǒng)保守的逐步治療模式正是由于容易消耗患者胰島e細胞功能，而成為患者血糖達標(biāo)的"絆腳石"。研究發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)治療從單一用藥到不得不聯(lián)合用藥，平均每名患者要用is個月的時間，從而大大損耗胰島e細胞。目前國際最新治療模式，要求在3個月內(nèi)實現(xiàn)從單藥到聯(lián)合用藥的治療過程，強調(diào)6個月內(nèi)必須使患者血糖達標(biāo)，要保護患者的胰島e細胞，防止其功能衰竭是實現(xiàn)血糖長期穩(wěn)定達標(biāo)并預(yù)防并發(fā)癥的重要途徑。因此，開發(fā)具有療效顯著的復(fù)方降糖藥成為一種趨勢。IshidaH，KatoS等，Beneficialeffectoflong-termcombinedtreatmentwithvogliboseandpioglitazoneonpancreaticisletfunctionofgeneticallydiabeticGKrats.HormMetabRes.1998Nov;30(ll):673-8.報道了長期聯(lián)合伏格列波糖和吡格列酮對糖尿病大鼠胰島功能的促進作用。
發(fā)明內(nèi)容我們魯南制藥集團緊跟降糖藥物的研究前沿，根據(jù)近來的臨床試驗和糖尿病及其并發(fā)癥治療的最新理念，我們結(jié)合現(xiàn)有降糖藥物的療效特點，創(chuàng)造性地提出將肝素或低分子肝素或其可藥用鹽與其它降糖藥聯(lián)合使用，用于臨床上血糖水平控制不佳，產(chǎn)生胰島素抵抗的患者?；蛘哂糜谔悄虿〔l(fā)癥患者的治療，比如糖尿病腎病。經(jīng)過大量的藥效學(xué)試驗，取得了很好的效果。本發(fā)明提供的一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物組合物，其特征在于它含有糖苷酶抑制劑、鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽。其中，本發(fā)明的所有技術(shù)方案和實施例中涉及的肝素或其可藥用鹽的效價均為179U/mg，低分子肝素或其可藥用鹽的效價為104.4U/mg，另外，糖苷酶抑制劑優(yōu)選米格列醇、伏格列波糖、阿卡波糖。并且我們發(fā)現(xiàn)，當(dāng)所述藥物組合物中糖苷酶抑制劑、鹽酸吡格列酮和肝素鈉或低分子肝素鈉在1-90:0.5-9:0.9-50范圍時，本發(fā)明具有較好的效果。更具體地，當(dāng)本發(fā)明藥物組合物米格列醇、鹽酸吡格列酮和肝素鈉或低分子肝素鈉的重量比為1-45:0.5-9:0.9-50時，具有更好的效果。我們根據(jù)肝素、低分子肝素的鈉鹽和鈣鹽、鹽酸吡格列酮、米格列醇、伏格列波糖和阿卡波糖的理化性質(zhì)和便于廣大患者的用藥，將其制成固體制劑，包括膠囊、普通片劑、泡騰片、腸溶片、緩釋片、胃漂浮片等劑型。本發(fā)明在確保降低血糖水平的前提下增強胰島素的敏感性，并且可以減輕對胰島e細胞刺激，對胰島P細胞有一定的保護作用。本復(fù)方通過三種不同降血糖藥物的科學(xué)組合，達到機制互補、相互協(xié)同、提高療效、合理用藥的目的。由實施例IO、11.12可以看出，在動物糖尿病模型的長期給藥中，我們發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明不僅在降糖方面具有很好的協(xié)同作用，更重要地，本發(fā)明在預(yù)防糖尿病并發(fā)癥發(fā)面也表現(xiàn)出顯著的協(xié)同作用，這對糖尿病患者的預(yù)后帶來了福音。具體實施例方式實施例處方肝素鈉鹽酸吡格列酮米格列醇微晶纖維素乳糖2%羥丙基甲基纖維素水溶液低取代羥丙基纖維素0.9g0.5glg38g40g8g0.8g制備工藝肝素鈉、鹽酸吡格列酮和米格列醇過100目篩，微晶纖維素、乳糖以及低取代羥丙基纖維素過80目篩，然后稱取處方量的肝素鈉、鹽酸吡格列酮、米格列醇采用等量遞增法與低取代羥丙基纖維素、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入2%羥丙基甲基纖維素溶液適量，然后制粒，6CTC干燥，16目篩整粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂混勻，壓片即得。實施例2低分子肝素鈉50g鹽酸吡格列酮9g伏格列波糖90g微晶纖維素150g乳糖90g2%羥丙基甲基纖維素水溶液適量交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮35g硬脂酸鎂2g制備工藝低分子肝素鈉、鹽酸吡格列酮和伏格列波糖過100目篩，微晶纖維素、乳糖以及交聯(lián)聚乙烯吡咯垸酮過80目篩，然后稱取處方量的肝素鈉、鹽酸吡格列酮、米格列醇與交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮素、乳糖、微晶纖維素混合均勻，加入2%羥丙基甲基纖維素溶液適量，然后制粒，6(TC干燥，16目篩整粒，干顆粒中加入處方量的硬脂酸鎂混勻，壓片即得。實施例3低分子肝素鈉15g鹽酸吡格列酮3g阿卡波糖10g預(yù)膠化淀粉60g乳糖35g羧甲基纖維素鈣14g1%羧甲基纖維素鈉溶液適量硬脂酸鎂lg腸溶包衣粉適量制備工藝按常規(guī)片劑工藝制作成所需規(guī)格的片劑(丸芯)，再用腸溶包衣粉包衣即可。實施例4低分子肝素鈣8g鹽酸吡格列酮3g米格列醇20g預(yù)膠化淀粉70g乳糖羧甲基纖維素鈣6%聚乙二醇4000水溶液硬脂酸鎂制備工藝同實施例2。31g16glg實施例5肝素鈣20g鹽酸吡格列酮3g米格列醇30g預(yù)膠化淀粉60g甘露醇38g羧甲基纖維素鈣16g5%PVP的95%乙醇溶液適量微粉硅膠1.4g制備工藝將處方中的肝素鈣、鹽酸吡格列酮、米格列醇、預(yù)膠化淀粉、甘露醇和微粉硅膠分別過100目篩，混勻，加5%PVP的95%乙醇溶液適量制粒，60。C烘干，18目篩整粒，膠囊充填即可。實施例6低分子肝素鈉加g鹽酸吡格列酮3g阿卡波糖50g微晶纖維素100g乳糖50g羧甲基纖維素鈣20g5%PVP的95%乙醇溶液適量微粉硅膠制備工藝同實施例5。1.4g實施例7低分子肝素鹽酸吡格列酮阿卡波糖羧甲基纖維素鈣交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮微晶纖維素乳糖甘露醇5%聚乙二醇4000水溶液碳酸氫鈉枸櫞酸硬脂酸鎂40g3g50g81080302553g80g2.5g制備工藝按常規(guī)泡騰片的制備工藝制備成所需的泡騰片即可(實施例8肝素鈉10g鹽酸吡格列酮.lg伏格列波糖60g微晶纖維素56g交聯(lián)羧甲基淀粉鈉10g乙基纖維素15g維生素E5g硬脂酸鎂lg制備工藝按緩釋片的制備工藝制備成緩釋片即可。實施例98肝素鈉5g鹽酸吡格列酮3g米格列醇15g交聯(lián)羧甲基淀粉鈉8g微晶纖維素15g可壓性淀粉45維生素E3g硬脂酸鎂0.8g制備工藝直接壓片制備成普通片劑即可。實施例10米格列醇吡格列酮肝素鈉復(fù)方對糖尿病大鼠模型的影響1動物模型的制備隨機取出5只大鼠作為對照組，其余55只大鼠禁食12h后，尾靜脈注射四氧嘧啶60mg/kg，72h后，禁食5h測血糖，剔出造模未成功者。2分組與給藥將造模成功大鼠按照血糖水平隨機分為模型組，肝素組，米格列醇+吡格列酮組，肝素+米格列醇+吡格列酮復(fù)方高、中、低組，每組8只。各組分別灌胃給藥如下模型組相同體積的生理鹽水肝素組3mg/(kg.d)肝素鈉米+吡組15mg/(kg.d)米格列醇+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮復(fù)方高組45mg/(kg.d)米格列醇+9mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+9mg/(kg.d)肝素鈉復(fù)方中組15mg/(kg.d)米格列醇+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+3mg/(kg.d)肝素鈉復(fù)方低組5mg/(kg.d)米格列醇+lmg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+lmg/(kg.d)肝素鈉每天灌胃兩次，連續(xù)10周。每次灌胃前8小時禁食，灌胃后即刻給予飼料。采血測定空腹血糖。3檢測指標(biāo)3.1血糖的測定將造模成功大鼠隨機分組后，按劑量灌胃給藥，連續(xù)10周，正常詞養(yǎng)。所有大鼠分別于給藥后4周、6周、8周、IO周取尾靜脈血檢測空腹血糖(FBG)。將取出的血樣放入蛋白沉淀劑中，室溫放置7min后，離心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法測全血糖。實驗結(jié)果由表l可以看出，自第4周開始，復(fù)方高組和復(fù)方中組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，自第7周開始，復(fù)方低組與模型組比較有顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的降糖作用。另外，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與米+吡組比較都有顯著差異，與肝素組比較有極顯著性差異，由此可以說明，米格列醇吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的協(xié)同作用。表l復(fù)方對糖尿病大鼠空腹血糖的影響(mmol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>*與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;*與米+吡組比較，P<0,05;^與米+吡組比較，P<0,01;&與肝素組比較，P<0.05;"與肝素組比較，P<0.013.2尿中微量清蛋白的測定試劑1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸緩沖液(PH3.0):稱取22.72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀釋成1000ml，加NaN3l00mg，室溫密封可穩(wěn)定1年。3、溴酚藍(1.924mmol/L)貯存液精確稱取257、36mgBPB,用先水乙醇溶至200ml，4'C冰箱可穩(wěn)定1年。4、溴酚藍(0.231咖ol/L)顯色劑取60mlBPB貯存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸緩沖液稀釋至500ml，室溫密封可保存1年。標(biāo)本的采集和檢測于第2、4、7和10周將大鼠分別放于代謝籠中飼養(yǎng)，收集隔夜12小時尿，準(zhǔn)確記錄尿量。取4ml，疊氮鈉處理后，離心(2000r/min)10min，取上清液置一2(TC冰箱保存待測尿白蛋白。取相應(yīng)濃度的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液400于對應(yīng)的杯內(nèi)，各加200顯色劑，混勻(防止產(chǎn)生氣泡)，用紫外分光光度計，于600nm下測定吸光度A。實驗結(jié)果由表2可以看出，自第7周開始，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的腎功能保護作用。另外，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與米+吡組或肝素組比較都有顯著差異，由此可以說明，米格列醇吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的協(xié)同作用。表2復(fù)方對糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影響組別n2周4周7周10周模型組80.427±0.0860.646±0.0890.538±0.0930.513±0.108肝素組80.392±0.1510.573±0.1160.418±0.0840.382±0.078米+吡組80.423±0.0650.605±0.0940.399±0.0710.393±0.073復(fù)方低組80.414±0.0730.617±0,0990.402±0.098*0.321±0.09廣復(fù)方中組80.436±0.0740.598±0.0720.376±0.182'0.249±0.125，復(fù)方高組80.398±0.1580.584±0.0610.361±0.067**0.237±0.086，*與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;"與米+吡組比較，P<0.05;'與肝素組比較，P<0.053.3臟器指數(shù)給藥10周后，稱大鼠體重，取肝臟、腎臟，計算肝指數(shù)、腎指數(shù)。計算方法臟器指數(shù)=(臟器重量/體重)*100%實驗結(jié)果由表3可以看出，無論是肝指數(shù)還是腎指數(shù)，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的預(yù)防糖尿病大鼠并發(fā)癥的作用；復(fù)方各組與米+吡組或肝素組比較都有顯著性差異，由此可以說明，米格列醇吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于預(yù)防糖尿病大鼠并發(fā)癥方面有很好的協(xié)同作用。表3復(fù)方對糖尿病大鼠臟器指數(shù)的影響組別n—體重(g)肝指數(shù)(％)腎指數(shù)(％)模型組8307.5士20.25.16±0.110.871±0.13肝素組8301.8±15.74.69±0.360.840±0.09米+吡組8310.5±27.14.85±0.400.852±0.12復(fù)方低組8315.7±19.64.58±0.18*0.787±0.08*復(fù)方中組8322.9±23.54.25±0.29*督0.763±0.07**#&復(fù)方高組8321.0±21.44.22±0.23，0.755±0.07"#&、模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;s與米+吡組比較，P<0.05;4與肝素組比較，P<0.05實施例11伏格列波糖吡格列酮低分子肝素鈉復(fù)方對糖尿病大鼠模型的影響1動物模型的制備方法同實施例102分組與給藥將造模成功大鼠按照血糖水平隨機分為模型組，低分子肝素組，伏格列波糖+吡格列酮組，低分子肝素+伏格列波糖+吡格列酮復(fù)方高、中、低組，每組8只。各組分別灌胃給藥如下模型組相同體積的生理鹽水低分子肝素組4.5mg/(kg.d)低分子肝素鈉伏+吡組30mg/(kg.d)伏格列波糖+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮復(fù)方高組60mg/(kg,d)伏格列波糖+9mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+13.5mg/(kg.d)低分子肝素鈉復(fù)方中組30mg/(kg.d)伏格列波糖+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+4.5mg/(kg.d)低分子肝素鈉復(fù)方低組15mg/(kg.d)伏格列波糖+lmg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+1.5mg/(kg.d)低分子肝素鈉每天灌胃兩次，灌胃前8小時禁食，灌胃后即刻給予飼料，連續(xù)10周。采血測定空腹血糖。3檢測指標(biāo)3.1血糖的測定將造模成功大鼠隨機分組后，按劑量灌胃給藥，連續(xù)10周，正常飼養(yǎng)。所有大鼠分別于給藥后4周、6周、8周、10周取尾靜脈血檢測空腹血糖(FBG)。將取出的血樣放入蛋白沉淀劑中，室溫放置7min后，離心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法測全血糖。實驗結(jié)果由表4可以看出，自第2周開始，復(fù)方高組和復(fù)方中組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，自第7周開始，復(fù)方低組與模型組比較有顯著性差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的降糖作用。另外，在給藥7周后，復(fù)方高組與伏+吡組或低分子肝素組比較都有顯著差異，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與伏+吡組比較都有顯著差異，與低分子肝素組比較有極顯著性差異，由此可以說明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的協(xié)同作用。表4復(fù)方對糖尿病大鼠空腹血糖的影響(mraol/L)組別n2周4周7周10周模型組823.7±4.320.4±4.318.8±3.117.0±2.9低分子肝素組821.7±3.617.3±2.815.9±2.313.2±2.1伏+吡組818.1±3.417.6±2.115.8±2.414.3±2.3復(fù)方低組820.5±3.717.4±2.513.5±1.9*9.6±2.9**&復(fù)方中組818.9±2.4*15.8±2.9*11.6±1.8**8.0±1.4纖復(fù)方高組817.3±2.8*13.5±1.7*站10.7±2.5**戰(zhàn)77ii2**#她'與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;"與伏+吡組比較，P<0.05;'與肝素組比較，P<0.05;"與低分子肝素組比較，P<0.013.2尿中微量清蛋白的測定試劑1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。:2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸緩沖液(PH3.0):稱取22.72g貨氨酸，用10%冰醋酸溶液稀釋成1000ml，加NaN3l00mg，室溫密封可穩(wěn)定1年。3、溴酚藍(1.924mmol/L)貯存液精確稱取257、36mgBPB，用無水乙醇溶至200ml，4'C冰箱可穩(wěn)定1年。4、溴酚藍(0.231咖ol/L)顯色劑取60mlBPB貯存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸緩沖液稀釋至500ml，室溫密封可保存l年。標(biāo)本的采集和檢測于第2、4、7和10周將大鼠分別放于代謝籠中飼養(yǎng)，收集隔夜12小時尿，準(zhǔn)確記錄尿量。取4ml，疊氮鈉處理后，離心(2000r/min)10min,取上清液置一2(TC冰箱保存待測尿白蛋白。取相應(yīng)濃度的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液400于對應(yīng)的杯內(nèi)，各加200顯色劑，混勻(防止產(chǎn)生氣泡)，用紫外分光光度計，于600nm下測定吸光度A。實驗結(jié)果由表5可以看出，自第4周開始，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的腎功能保護作用。另外，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與伏+吡組或低分子肝素組比較都有顯著差異，由此可以說明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的協(xié)同作用。表5復(fù)方對糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影響組別n2周4周7周10周模型組80.463±0.070.521±0.100.494±0.080.460±0.10低分子肝素組8伏+吡組8復(fù)方低組8復(fù)方中組8復(fù)方高組80.407±0.280.439±0,110.438±0.160.305±0.07*'0.313±0.15*'0.412±0.11*0.486±0.080.496±0.230.311±0.17*0.302±0.18*0,406±0.190.417±0.070.415±0.080.298±0.15*0.231±0.16*0.357±0.080.403±0.090.391±0.15*0.232±0.07*#&0.205±0.25**#&*與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;a與伏+吡組比較，P<0.05;&與低分子肝素組比較，P<0.053.3臟器指數(shù)給藥10周后，稱大鼠體重，取肝臟、腎臟，計算肝指數(shù)、腎指數(shù)。計算方法臟器指數(shù)=(臟器重量/體重)*100%實驗結(jié)果由表6可以看出，無論是肝指數(shù)還是腎指數(shù)，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的預(yù)防糖尿病大鼠并發(fā)癥的作用；復(fù)方各組與伏+吡組或低分子肝素組比較都有顯著性差異，由此可以說明，伏格列波糖吡格列酮低分子肝素鈉復(fù)方對于預(yù)p糖尿病大鼠并發(fā)癥方面有很好的協(xié)同作用。表6復(fù)方對糖尿病大鼠臟器指數(shù)的影響組別n體重(g)肝指數(shù)(％)腎指數(shù)(％)模型組8398.5±30.74.83±0.890.93±0.088低分子肝素組8415±31.24.61±0.840.81±0.087伏+吡組8422±28.44.53±0.680.84±0.094復(fù)方低組8419±35.64.50±0.710.78±0.083*復(fù)方中組8434±33.54.17±0,72*#&0.73±0.076*#&復(fù)方高組8428±31.64.13±0.67*'#&0.71±0.047**#&*與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;#與伏+吡組比較，P〈0.05;&與低分子肝素組比較，P<0.05實施例12阿卡波糖吡格列酮肝素鈉復(fù)方對糖尿病大鼠模型的影響1動物模型的制備方法同實施例102分組與給藥將造模成功大鼠按照血糖水平隨機分為模型組，肝素組，阿卡波糖+吡格列酮組，肝素H阿卡波糖+吡格列酮復(fù)方高、中、低組，每組8只。各組分別灌胃給藥如下模型組相同體積的生理鹽水肝素組3mg/(kg.d)肝素鈉阿+吡組:30mg/(kg.d)阿卡波糖+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮復(fù)方高組15mg/(kg.d)阿卡波糖+9mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+9mg/(kg.d)肝素鈉復(fù)方中組30mg/(kg.d)阿卡波糖+3mg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+3mg/(kg.d)肝素鈉復(fù)方低組60mg/(kg.d)阿卡波糖+lmg/(kg.d)鹽酸吡格列酮+lmg/(kg.d)肝素鈉每天灌胃兩次，灌胃前8小時禁食，灌胃后即刻給予飼料，連續(xù)10周。采血測定空腹血糖。3檢測指標(biāo)3.1血糖的測定將造模成功大鼠隨機分組后，按劑量灌胃給藥，連續(xù)10周，正常飼養(yǎng)。所有大鼠分別于給藥后2周、4周、7周、10周取尾靜脈血檢測空腹血糖(FBG)。將取出的血樣放入蛋白沉淀劑中，室溫放置7min后，離心5min(3000r/min)，取上清液，用葡萄糖氧化酶法測全血糖。實驗結(jié)果由表7可以看出，自第2周開始，復(fù)方高組和復(fù)方中組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，自第7周開始，復(fù)方低組與模型組比較有顯著性差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的降糖作用。另外，在給藥4周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與肝素組比較都有顯著差異，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與阿+吡組比較都有顯著差異，與肝素組比較有極顯著性差異，由此可以說明，阿卡波糖吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠的血糖有很好的協(xié)同作用。表7復(fù)方對糖尿病大鼠空腹血糖的影響(ramol/L)<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>'與模型組比較，P<0.05，"與模型組比較，P<0.01;與阿+吡組比較，p<0.05，"#與阿+吡組比較，P<0.01;4與肝素組比較，P<0.05,"與肝素組比較，P<0.01.3.2尿中微量清蛋白的測定試劑1、10%(v/v)的冰醋酸溶液(PH2.8)。2、0.303mol/L甘氨酸-冰醋酸緩沖液(PH3.0):稱取22.72g甘氨酸，用10%冰醋酸溶液稀釋成1000ml，加NaN3l00mg，室溫密封可穩(wěn)定1年。3、溴酚藍(1.924mmol/L)貯存液精確稱取257、36mgBPB，用無水乙醇溶至200ml，4t冰箱可穩(wěn)定1年。4、溴酚藍(0.231mmol/L)顯色劑取60mlBPB貯存液，加入2.5mlTritonX-100，用甘氨酸-冰醋酸緩沖液稀釋至500ml，室溫密封可保存1年。標(biāo)本的采集和檢測于第2、4、7和10周將大鼠分別放于代謝籠中詞養(yǎng)，收集隔夜12小時尿，準(zhǔn)確記錄尿量。取4ml，疊氮鈉處理后，離心(2000r/min)10min，取上清液置一2(TC冰箱保存待測尿白蛋白。取相應(yīng)濃度的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液400于對應(yīng)的杯內(nèi)，各加200顯色劑，混勻(防止產(chǎn)生氣泡)，用紫外分光光度計，于600nm下測定吸光度A。實驗結(jié)果由表8可以看出，自第2周開始，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的腎功能保護作用。另外在給藥7周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與肝素組比較都有顯著差異，在給藥10周后，復(fù)方高組和復(fù)方中組與阿+吡組或肝素組比較都有顯著差異，由此可以說明，阿卡波糖吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于降低糖尿病大鼠尿微量白蛋白方面有很好的協(xié)同作用。表8復(fù)方對糖尿病大鼠尿微量白蛋白的影響組別n2周4周7周10周模型組80.514±0.1410.621±0.1580.540±0.0510.483±0.114肝素組80.442±0.1370.533±0.0750.421±0.0830.366±0.093*阿+吡組80.477±0.0830.557±0.0480.465±0.0720.430±0.099復(fù)方低組80.485±0.0330.568±0.1470.458土O.035*0.403±0.135復(fù)方中組80.405±0.0310.373±0.139**#0.361±0.032**#0.294±0.027*:復(fù)方高組80.400±0.0280.464±0.080*0.345±0.028**她0,267±0.025*:*與模型組比較，P<0.05;"與模型組比較，P<0.01;"與阿+吡組比較，P<0.05;&與肝素組比較，P<0.05.3.3臟器指數(shù)給藥10周后，稱大鼠體重，取肝臟、腎臟，計算肝指數(shù)、腎指數(shù)。計算方法臟器矛;數(shù)=(臟器重量/體重)*100%實驗結(jié)果由表9可以看出，無論是肝指數(shù)還是腎指數(shù)，復(fù)方各組與模型組比較，有顯著差異或極顯著性差異，這說明各復(fù)方組有很好的預(yù)防糖尿病大鼠并發(fā)癥的作用；復(fù)方各組與阿+吡組或肝素組比較都有顯著性差異，由此可以說明，阿卡波糖吡格列酮肝素鈉復(fù)方對于預(yù)防糖尿病大鼠并發(fā)癥方面有很好的協(xié)同作用。表9復(fù)方對糖尿病大鼠臟器指數(shù)的影響組別n體重(g)肝指數(shù)(％)腎指數(shù)(％)模型組8352.1±27.85.02±0.810.92±0.091肝素組8377.5±25.64.46±0.620.79±0.068阿+吡組8384.8±29.24.70±0,590.88±0.061復(fù)方低組8378.0±24.34.44±0.51*0.79±0.076*復(fù)方中組8391.4±26.74.11±0.47**#0.74土0.063"#&復(fù)方高組8388.6±27.34.06±0.36**#&0.72±0.057**#&與模型組比較，P<0.05;**與模型組比較，P<0.01;與阿+吡組比較，P<0.05;&與肝素組比較，P<0.05.權(quán)利要求1.一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物組合物，其特征在于它含有糖苷酶抑制劑、鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽。2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于糖苷酶抑制劑、鹽酸吡格列酮和肝素或低分子肝素或其可藥用鹽的重量比是1-90:0.5-9:0.9-50，其中肝素或其可藥用鹽的效價為179U/mg，低分子肝素或其可藥用鹽的效價為104.4U/mg。3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于糖苷酶抑制劑是米格列醇、伏格列波糖、阿卡波糖。4.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于糖苷酶抑制劑是米格列醇。5.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它含有肝素鈉或低分子肝素鈉、鹽酸吡格列酮和米格列醇。6.如權(quán)利要求5所述的藥物組合物，其特征在于米格列醇、鹽酸吡格列酮和肝素鈉或低分子肝素鈉的重量比為1-45:0.5-9:0.9-50。7.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于它是固體制劑。8.如權(quán)利要求7所述的藥物組合物，其特征在于它是膠囊、普通片劑、泡騰片、腸溶片、緩釋片、胃漂浮片。全文摘要本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，具體提供了一種治療糖尿病及其并發(fā)癥的藥物組合物，含有肝素或低分子肝素或可藥用鹽、鹽酸吡格列酮和糖苷酶抑制劑，并將其制成固體制劑，包括膠囊、普通片劑、泡騰片、腸溶片、緩釋片、胃漂浮片等劑型。本發(fā)明通過三種不同降血糖藥物的科學(xué)組合，達到機制互補、相互協(xié)同、提高療效、合理用藥的目的。文檔編號A61K31/133GK101584688SQ200810098469公開日2009年11月25日申請日期2008年5月24日優(yōu)先權(quán)日2008年5月24日發(fā)明者趙志全申請人:魯南制藥集團股份有限公司