專利名稱：：梔子提取物在制備預(yù)防和/或治療抑郁焦慮藥物中的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種梔子提取物及其在制備預(yù)防和/或治療抑郁焦慮的藥物中的用途。
背景技術(shù)：
：抑郁焦慮是危害老年人身心健康的常見(jiàn)病，多發(fā)病。現(xiàn)代社會(huì)科學(xué)技術(shù)的迅猛發(fā)展，每天都給人們帶來(lái)新的成果與驚喜，在享受新世紀(jì)、新生活的同時(shí)，人們也愈來(lái)愈強(qiáng)烈地感受到由競(jìng)爭(zhēng)產(chǎn)生的種種壓力，造成精神上的苦悶和困擾。神經(jīng)癥是一種很常見(jiàn)的心理疾病。《中國(guó)精神疾病分類與診斷標(biāo)準(zhǔn)》第3版把神經(jīng)癥分為神經(jīng)衰弱、焦慮性神經(jīng)癥、強(qiáng)迫性神經(jīng)癥、恐懼性神經(jīng)癥、疑病性神經(jīng)癥、抑郁性神經(jīng)癥、癔癥性神經(jīng)癥等。其中焦慮和抑郁性神經(jīng)癥在診斷標(biāo)準(zhǔn)中是相互獨(dú)立的疾病實(shí)體，然而調(diào)査發(fā)現(xiàn)，兩者共病現(xiàn)象達(dá)80%以上。焦慮性神經(jīng)癥又稱焦慮癥，以焦慮、緊張、恐懼的情緒障礙并伴有植物神經(jīng)系統(tǒng)癥狀和運(yùn)動(dòng)性不安等為特征。其發(fā)作并非由實(shí)際威脅或危險(xiǎn)所引起，或者說(shuō)其緊張不安、驚恐程度與現(xiàn)實(shí)事件很不相稱。該癥較為常見(jiàn)，抑郁癥屬精神疾病類，目前已成為一種普遍性的疾病。據(jù)統(tǒng)計(jì)中國(guó)醫(yī)藥技術(shù)與市場(chǎng)，2006，6(3):65—66)，美國(guó)有1500萬(wàn)成年人患有抑郁癥。世界衛(wèi)生組織不久前公布的年度報(bào)告顯示抑郁癥目前已位居世界十大疾病之第四，預(yù)計(jì)到2020年，將躍至第二，排在心肌梗死之后癌癥之前；在未來(lái)的一年里，將有5.8%的男子和9.5%的女子會(huì)出現(xiàn)抑郁癥癥狀；全球范圍內(nèi)，一生中曾經(jīng)感受到某種精神和神經(jīng)方面不適的人群數(shù)量目前已達(dá)4.5億人，其中5000萬(wàn)人患有癲癇病，2400萬(wàn)人患有精神分裂癥，1000萬(wàn)-2000萬(wàn)人企圖自殺，并有100萬(wàn)人實(shí)施了自殺。國(guó)內(nèi)研究資料顯示抑郁癥1999年的總發(fā)病率為0.64%，估計(jì)我國(guó)約有3600萬(wàn)患者。前往精神病院就醫(yī)的實(shí)際就診率不足1/3，主要原因是"抑郁癥"概念在國(guó)內(nèi)尚未得到廣泛普及。業(yè)內(nèi)人士認(rèn)為，隨著大型跨國(guó)醫(yī)藥公司在國(guó)內(nèi)大規(guī)模地推廣相關(guān)概念，大量的抑郁癥患者將"浮出水面"，確診并接受治療的人數(shù)將大大增加，我國(guó)的抗抑郁藥物市場(chǎng)會(huì)快速膨脹。抑郁癥患病率較高的人群是白領(lǐng)，老年人和就業(yè)與升學(xué)壓力較大的學(xué)生。這些觀察幾乎一致表明，大量人群面臨抑郁或焦慮的困擾。因此，焦慮和抑郁的治療(主要包括藥物治療、心理治療)不僅僅成為精神科也是其它學(xué)科的研究熱點(diǎn)。梔子(Gar^m'fl/os/m'朋W^Ellis)為茜草科梔子屬植物，別名山梔、紅枝子、黃果樹等，廣泛分布于我國(guó)各地，為常用中藥，屬衛(wèi)生部頒布的首批食藥兩用資源?！侗静菥V目》有詳細(xì)記載梔子具有利膽保肝，清熱解毒，降壓和抗菌消炎等作用。中醫(yī)臨床上用于治療黃疸型肝炎，扭挫傷，高血壓，糖尿病等。梔子中的化學(xué)成分很多，其主要成分有藏花素、藏花酸(Ichietal)和京尼平苷(Geniposide)等環(huán)烯醚萜類化合物，其中京尼平苷(Geniposide)是其主要有效成分。京尼平苷可通過(guò)多種途徑發(fā)揮保肝作用，對(duì)藥物代謝和抗氧化系統(tǒng)也具有調(diào)節(jié)作用。京尼平苷能降低鼠膽汁中因高熱量飲食而升高的膽固醇。京尼平苷酸和京尼平具有一定的降壓作用，其機(jī)制可能與細(xì)胞內(nèi)的cAMP水平有關(guān)。京尼平苷可通過(guò)抑制誘導(dǎo)型NO合酶表達(dá)和NO合成而起到抗炎目的。但迄今為止，我們沒(méi)有看到環(huán)烯醚萜類化合物及京尼平苷對(duì)抗抑郁焦慮的研究報(bào)道。
發(fā)明內(nèi)容為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問(wèn)題，本發(fā)明提供京尼平苷含量為30%-90%的梔子提取物在制備預(yù)防和/或治療抑郁焦慮的藥物中的用途。本發(fā)明的另一目的是提供該提取物的制備方法。本發(fā)明的再一目的是提供含有該提取物的藥物組合物。為了解決本發(fā)明的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采取如下的技術(shù)方案本發(fā)明提供了梔子提取物的制備方法。梔子原藥材經(jīng)干燥并適當(dāng)?shù)姆鬯?，以利增大與溶劑的接觸面積，提高效率。原藥材的提取溶劑使用水、醇類、或水與醇類的混合物。優(yōu)選的醇類包括甲醇、乙醇。水與醇類的混合物，例如濃度為40-99%(體積比)的醇。提取時(shí)溶劑浸過(guò)藥材為宜，溶劑量為原藥重量的5-20倍。提取的溫度是從室溫(例如2(TC)到溶劑回流溫度的范圍內(nèi)，優(yōu)選在回流的溫度下。提取可連續(xù)或間歇進(jìn)行，間歇提取時(shí)可重復(fù)l-4次，優(yōu)選2-3次。上步結(jié)束后，合并濾液，濾去藥渣，濃縮至無(wú)醇味，合并濃縮液過(guò)濾并稀釋后通過(guò)大孔樹脂(D101)，用水或5%乙醇洗脫除掉雜質(zhì)后，用20-40%乙醇洗脫，得含京尼平苷的有效部位，即含京尼平苷含量為30%-90%的梔子提取物。本發(fā)明還涉及含梔子提取物藥物組合物。該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備。可通過(guò)將梔子提取物與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑結(jié)合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。梔子提取物在其藥物組合物中的含量通常為0.1-95重量％。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，梔子提取物(京尼平苷含量30.5%)連續(xù)給藥7天后，梔子提取物各劑量組對(duì)小鼠的爬格次數(shù)無(wú)顯著影響，其中中劑量組(24.6mg/kg)、高劑量組(49.2mg/kg)與對(duì)照組比較可以顯著減少(PO.05)小鼠在開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)中間四格的停留時(shí)間。梔子提取物(京尼平苷含量50.P/。)低劑量組(7.5mg/kg)及中劑量組(15mg/kg)與對(duì)照組比較，后4min內(nèi)小鼠的絕望時(shí)間明顯減少(P<0.05)，證明梔子提取物對(duì)緩解小鼠的抑郁情緒有顯著作用。氟西汀為增強(qiáng)5-HT系統(tǒng)的抗抑郁藥，對(duì)此模型無(wú)效。梶子提取物(京尼平苷含量89.1%)低劑量組(4.21mg/kg)及中劑量組(8.42mg/kg)與對(duì)照組比較，后5min內(nèi)小鼠的絕望時(shí)間明顯減少(P<0.05)，與陽(yáng)性藥氟西汀作用一致。進(jìn)一步證明了梔子提取物的抗抑郁作用。梔子提取物給藥劑量依照所要預(yù)防或治療疾病的性質(zhì)和嚴(yán)重程度，患者或動(dòng)物的個(gè)體情況，給藥途徑和劑型等可以有大范圍的變化。一般來(lái)講，梔子提取物的每天的合適劑量范圍為0.001-300mg/Kg體重，優(yōu)選為0.1-200mg/Kg體重，更優(yōu)選為l-120mg/Kg體重，最優(yōu)選為4-60mg/Kg體重。上述劑量可以一個(gè)劑量單位或分成幾個(gè)劑量單位給藥。本發(fā)明的梔子提取物可單獨(dú)服用，或與其他治療藥物或?qū)ΠY藥物合并使用。當(dāng)本發(fā)明的梔子提取物與其它治療藥物存在協(xié)同作用時(shí)，應(yīng)根據(jù)實(shí)際情況調(diào)整它的劑量。具體實(shí)施方式實(shí)施例l梔子l公斤10L70。/。乙醇回流提取3遍，每遍1小時(shí)，合并提取液，提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，合并濃縮液過(guò)濾并稀釋10倍后，緩慢通過(guò)預(yù)先處理好的2kg大孔樹脂柱(DIOI)，藥液全部通過(guò)大孔樹脂柱后用蒸餾水洗滌，再用5%乙醇洗脫，除掉雜質(zhì)，再用10倍柱體積20%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干，得固形物即為梔子提取物。梔子提取物中京尼平苷含量為30.5%(液相外標(biāo)法測(cè)定)。實(shí)施例2:梔子1公斤10L70M甲醇回流提取3遍，每遍1小時(shí)，合并提取液，提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，合并濃縮液過(guò)濾并稀釋10倍后，緩慢通過(guò)預(yù)先處理好的2kg大孔樹脂柱(DIOI)，藥液全部通過(guò)大孔樹脂柱后，用5%乙醇洗脫，除掉雜質(zhì)，再用5倍柱體積40%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干，得固形物即為梔子提取物。梔子提取物中京尼平苷含量為50.1%(液相外標(biāo)法測(cè)定)。實(shí)施例3:梔子1公斤20L無(wú)水乙醇回流提取3遍，每遍1小時(shí)，合并提取液，提取液減壓濃縮至無(wú)醇味，合并濃縮液過(guò)濾并稀釋10倍后，緩慢通過(guò)預(yù)先處理好的2kg大孔樹脂柱(DIOI)，藥液全部通過(guò)大孔樹脂柱后，用5%乙醇洗脫，除掉雜質(zhì)，再用5倍柱體積25%乙醇洗脫，收集洗脫液，減壓蒸干，得固形物即為梔子提取物。取上述梔子提取物10g，以100g柱層析硅膠(200-300目)，裝柱，以氯仿甲醇(20:1，v:v)洗脫，薄層TLC檢査，收集含京尼平苷的洗脫液，合并，蒸干，即得，其中京尼平苷含量為89.1%(液相外標(biāo)法測(cè)定)。實(shí)施例4:稱取梔子提取物(京尼平苷含量30.5%)10g，混勻，過(guò)80目篩，加入微晶纖維素200g、淀粉90g作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75%乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，混勻，壓片，制成1000片，包衣，即得，每片梔子提取物100mg。實(shí)施例5:稱取梔子提取物(京尼平苷含量50.1%)10g，混勻，過(guò)80目篩，加入預(yù)膠化淀粉190g，微晶纖維素50g，作為稀釋劑組成制劑配方，混勻，噴入75%乙醇為粘合劑制軟材，用24目篩制粒，干燥后整粒，混勻，裝膠囊，制成1000粒，即得，每粒含梔子提取物10nig。實(shí)驗(yàn)例6:梔子提取物(京尼平苷含量89.1%)緩釋包衣微丸的制備。丸心處方梔子提取物20mg維性素Clmg氯化鈉8mg羧甲基淀粉鈉25mg乳糖42mg包衣液處方(每100ml用量)乙基纖維素3gPEG4002g鄰苯二甲酸二乙酯0.6g乙醇至100ml按丸心處方所列的比例稱取原料及輔料，混合均勻，過(guò)80目篩，以3XHPMC水溶液離心造粒，顆粒過(guò)18目篩，整粒，6CTC下1小時(shí)，得丸心。取上述處方的包衣液包衣，得包衣微丸。試驗(yàn)例l1.材料受試品梔子提取物，淡黃色粉末，使用時(shí)用蒸鎦水配制成京尼平苷含量為3.75mg/kg、7.5mg/kg、15mg/kg水溶液。陽(yáng)性對(duì)照藥氟西汀，2mg/kg。動(dòng)物ICR小鼠，雄性，體重20-24克。購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，合格證號(hào)SCXK(京)2002-0003。儀器小鼠開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱定制2.方法2.1動(dòng)物分組雄性ICR成年小鼠75只(北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司)20-24g，隨機(jī)分為5組對(duì)照組給蒸餾水，梔子提取物低劑量組，梔子提取物中劑量組，梔子提取物高劑量組，氟西汀組(2mg/kg)。2.2實(shí)驗(yàn)方法所有動(dòng)物均飼養(yǎng)于SPF級(jí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心。動(dòng)物中心內(nèi)環(huán)境為12hr明暗光照，室溫為25土rC，濕度為50±5%?？诜o藥7天后，于該中心SPF級(jí)行為學(xué)實(shí)驗(yàn)室，進(jìn)行相關(guān)的行為學(xué)評(píng)定。在實(shí)驗(yàn)的全過(guò)程中，動(dòng)物可自由進(jìn)食、飲水。2.1.1開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)梔子提取物(京尼平苷含量30.5%)，使用時(shí)用蒸餾水配制成梔子提取物低劑量組(12.3mg/kg)，梔子提取物中劑量組(24.6mg/kg)，梔子提取物高劑量組(49.2mg/kg)。將小鼠置于開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱中心點(diǎn)，記錄5min內(nèi)小鼠的跨格次數(shù)和中間四格停留時(shí)間。2.1.2強(qiáng)迫小鼠游泳實(shí)驗(yàn)梔子提取物(京尼平苷含量50.1%)，使用時(shí)用蒸餾水配制成梔子提取物低劑量組(7.5mg/kg)，梔子提取物中劑量組(15mg/kg)，梔子提取物高劑量組(30mg/kg)。有機(jī)玻璃缸高30cm，直徑18cm，水深10cm，水溫23士2。C。小鼠放入水中游泳6min，用秒表記錄后4min內(nèi)累計(jì)不動(dòng)的時(shí)間。2.1.3懸尾實(shí)驗(yàn)梔子提取物(京尼平苷含量89.1%)，使用時(shí)用蒸餾水配制成梔子提取物低劑量組(4.21mg/kg)，梔子提取物中劑量組(8.42mg/kg)，梔子提取物高劑量組(16.8mg/kg)。小鼠在懸尾狀態(tài)下很快會(huì)出現(xiàn)絕望行為，表現(xiàn)為不再掙扎，呈現(xiàn)特有的安靜不動(dòng)狀態(tài)。將小鼠懸尾掛好后，適應(yīng)lmin，用秒表記錄后5min內(nèi)累計(jì)的不動(dòng)時(shí)間。2.3數(shù)據(jù)分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果以(均值土標(biāo)準(zhǔn)差)表示，各組間結(jié)果進(jìn)行單因素方差分析。3.結(jié)果3.1.開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)_表1梔子提取物對(duì)小鼠開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)的影響_Hl動(dòng)物數(shù)(n)~~給藥劑量(mg/kg)~"爬格次數(shù)(次)~~中間四格停留時(shí)間(s)對(duì)照組15蒸餾水110.83±18.1836.36±14.52氟西汀組152mg/kg106.65±29.092楊士16.87511梔子提取物1412.3mg/kg122.60±22.4430.05±12.30低劑量組梔子提取物1524.6mg/kg128.67±33.6122.33±10.34**中劑量組梔子提取物1449.2mg/kg119.58±24.3224.22士13，高劑量組P<0.05，**P<0.01，與對(duì)照組比較。3.2.強(qiáng)迫游泳表2梔子提取物對(duì)小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)中絕望時(shí)間的影響組別動(dòng)物數(shù)(n)給藥劑量(mg/kg)絕望時(shí)間(s)對(duì)照組15蒸餾水108.66±37.26氟西汀組152mg/kg104.15±61.40梔子提取物低劑量組147.5mg/kg65.62+28.72*梔子提取物中劑量組1415mg/kg55.52±31.25**梔子提取物高劑量組1330mg/kg105.89±53.28*P<0.05，**P<0.01，與對(duì)照組比較。3.3.懸尾實(shí)驗(yàn)表3梔子提取物對(duì)小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)中絕望時(shí)間的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>PO.05,PO.Ol，與對(duì)照組比較。4.結(jié)論4.1開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，梔子提取物(京尼平苷含量30.5%)連續(xù)給藥7天后，各給藥組對(duì)小鼠的爬格次數(shù)無(wú)顯著影響，其中氟西汀組、中劑量組(24.6mg/kg)、高劑量組(49.2mg/kg)與對(duì)照組比較可以顯著減少小鼠在開(kāi)場(chǎng)實(shí)驗(yàn)箱內(nèi)中間四格的停留時(shí)間。4.2強(qiáng)迫游泳結(jié)果表明梔子提取物(京尼平苷含量50.1%)低劑量組(7.5mg/kg)及中劑量組(15mg/kg)與對(duì)照組比較，后4min內(nèi)小鼠的絕望時(shí)間明顯減少(P<0.05)，證明梔子提取物對(duì)緩解小鼠的抑郁情緒有顯著作用。氟西汀為增強(qiáng)5-HT系統(tǒng)的抗抑郁藥，對(duì)此模型無(wú)效。4.3懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明梔子提取物(京尼平苷含量89.1%)低劑量組(4.21mg/kg)及中劑量組(8.42mg/kg)與對(duì)照組比較，后5min內(nèi)小鼠的絕望時(shí)間明顯減少(P<0.05)，與陽(yáng)性藥氟西汀作用一致。進(jìn)一步證明了梔子提取物的抗抑郁作用。權(quán)利要求1、一種梔子提取物在制備用于預(yù)防和/或治療抑郁抗焦慮的藥物中的用途。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于提取物中京尼平苷的含量為30%-卯％。3、一種藥物組合物，其特征在于，含有治療有效劑量的梔子提取物及藥用輔料。4、根據(jù)權(quán)利要求3的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸劑、緩釋制劑、控釋制劑或各種微粒給藥系統(tǒng)。5、一種制備梔子提取物的方法，其特征在于包含下列步驟1)梔子經(jīng)干燥并粉碎，過(guò)40目篩；2)以5-20倍(體積/重量，ml/g)的水或醇類或水醇混合溶液提取藥材，提取溫度可以從室溫到溶劑回流溫度范圍之內(nèi)，重復(fù)1-3次；3)提取液過(guò)濾，合并濾液，濃縮回收至無(wú)醇味；4)濃溶液稀釋后過(guò)大孔吸附樹脂，以水或5%乙醇洗脫除雜質(zhì)；5)以20-40%乙醇洗脫，收集洗脫液；6)蒸干，即得梔子提取物；7)步驟6)所得的梔子提取物，經(jīng)常規(guī)硅膠柱層析，以氯仿甲醇洗脫體系洗脫，收集含京尼平苷的洗脫液，回收溶劑，可得精制的梔子提取物。6、根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備梔子提取物的方法，其特征在于步驟2)中的醇指甲醇或乙醇。7、根據(jù)權(quán)利要求5所述的制備梔子提取物的方法，其特征在于步驟4)中的大孔吸附樹脂，其型號(hào)為DIOI、AB—8、ADS—5、ADS—7、ADS—8、ADS一F8、HPD—100A、HPD—100B、HPD—100、HPD—200A、HPD—200B、HPD—300、HPD—700或HPD—72全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了梔子提取物的新用途，即從梔子中獲得的梔子提取物可以用于制備預(yù)防和/或治療抑郁抗焦慮的藥物的用途。文檔編號(hào)A61P25/22GK101596248SQ200810016679公開(kāi)日2009年12月9日申請(qǐng)日期2008年6月5日優(yōu)先權(quán)日2008年6月5日發(fā)明者付穎穎,珂劉,劉軍鋒申請(qǐng)人:山東靶點(diǎn)藥物研究有限公司