專利名稱：：一種治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑及其制備方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：

背景技術(shù)：
：婦科炎癥是指婦女生殖系統(tǒng)感染所引起的疾病。由于女性生殖器官的特殊性，婦科炎癥為成年女性的常見、多發(fā)病，其臨床表現(xiàn)也多種多樣，臨床常見的婦科炎癥有陰道炎、宮頸炎、盆腔炎、子宮內(nèi)膜炎等，病因復(fù)雜且常伴有多種嚴(yán)重并發(fā)癥，往往經(jīng)久不愈，對女性的生活和工作有很大影響，影響生活質(zhì)量和夫妻生活，并會導(dǎo)致不孕、誘發(fā)腫瘤等，后患無窮。婦科炎癥已成為困擾現(xiàn)代女性的一大疾病。婦科炎癥是婦科病中常見的疾病或癥狀，在我國甚至是全世界的發(fā)病率都是很高的。全世界約87%的成年女性不同程度的感染過婦科炎癥。我國婦科炎癥疾病的發(fā)病率也相當(dāng)高，據(jù)世界衛(wèi)生組織對中國婦女的調(diào)査我國育齡女性約為1.52億，其中約41%的女性患有不同程度的婦科炎癥，已婚女性發(fā)病率更高達(dá)70%。據(jù)南方醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)研究所對局部地區(qū)的流行病學(xué)調(diào)査結(jié)果推算，我國已婚婦女的婦科病患病率為46.1%，其中，農(nóng)村婦女的婦科炎癥患病率達(dá)48.85%，高于城市41.26%的患病率。據(jù)市場調(diào)査分析，2004年婦科炎癥用藥市場規(guī)模約為52.8億元，較2003年增長16.84%，從整個市場的增長趨勢來看，婦科炎癥用藥增長穩(wěn)定，據(jù)預(yù)測2008年婦科炎癥市場規(guī)模將會高達(dá)77.55億元。由于其較高的發(fā)病率，使得我國婦科炎癥用藥市場需求巨大。子宮肌瘤是女性生殖器官中最常見的良性腫瘤，也是人體中常見的腫瘤之一。子宮肌瘤主要由子宮平滑肌細(xì)胞增生而形成。其中有少量結(jié)締組織纖維僅作為一種支持組織而存在。一般子宮肌瘤的主要癥狀有月經(jīng)不調(diào)、腹部腫塊、壓迫癥狀、疼痛、白帶增多、不育、循環(huán)系統(tǒng)癥狀等。除了子宮肌瘤本身對廣大女性造成很大身心傷害之外，臨床實(shí)踐證實(shí)，子宮肌瘤常常并發(fā)卵管卵巢病變，也極易和子宮體腺癌和子宮頸癌同時存在。子宮肌瘤是女性生殖器最常見的一種良性腫瘤，研究發(fā)現(xiàn)，年齡在3050歲之間的婦女，約20%患有子宮肌瘤，據(jù)上海仁愛醫(yī)院婦科李國英主任介紹，此病近年來有增多趨勢。雖然子宮肌瘤為良性腫瘤，大多數(shù)癥狀不明顯，但如發(fā)現(xiàn)不及時，會危及身體多個器官，亦可造成不孕，因此早防早治是十分必要的。子宮肌瘤是危害婦女身心健康的常見腫瘤，隨著診斷手段(B超、磁共振等)的完善，生育期婦女發(fā)病率可高達(dá)2030%。但極少惡變，大多數(shù)病員并無癥狀。因其來自平滑肌細(xì)胞，故稱子宮平滑肌瘤，又因其發(fā)病和女性激素(雌激素、孕激素)有關(guān)，故屬性激素依賴性腫瘤。子宮肌瘤多見于3050歲婦女，30歲以下少見，20歲以下極少見，以4050歲發(fā)生率最高，約占51.260.9。絕經(jīng)以后肌瘤如若長大，一般表示有變性，尤其警惕有肌瘤變性。目前對婦科炎癥的治療主要以外用藥為主，如洗劑、栓劑、泡騰片、泡沫劑、凝膠劑等，該類制劑多是治標(biāo)不治本，攜帶、使用均不方便，而且大多數(shù)婦科藥品仍含有甲硝唑、克霉唑類抗生素，過多使用這類藥品的直接后果就是使病菌產(chǎn)生耐藥性，破壞陰道菌群間的制約關(guān)系，導(dǎo)致真菌生長旺盛，治療周期不斷延長，不斷增加藥品劑量，疾病得不到有效治療，對于急性炎癥，西醫(yī)快，但在慢性期，西醫(yī)無能為力。目前西醫(yī)治療子宮肌瘤有兩種方法:一是采用性激素藥物以強(qiáng)行降低雌激素水平，緩解子宮肌瘤癥狀，但是過多使用激素類藥物對人體不利，可能導(dǎo)自身平衡失調(diào)。二是對于較大瘤體，西醫(yī)主張手術(shù)治療，采用肌瘤摘除術(shù)或子宮切除術(shù)。手術(shù)治療的優(yōu)點(diǎn)是顯效較快，但如果內(nèi)分泌失調(diào)這一根本致病原因未能改變，子宮肌瘤復(fù)發(fā)的可能性很大，同時手術(shù)對病人帶來很大的痛苦，影響器官的完整性及生育能力。當(dāng)患者被確診患有子宮肌瘤，大夫說得開刀或者是必須切除子宮時，絕大多數(shù)患者都認(rèn)為能挺就挺。中藥對子宮肌瘤的治療是從調(diào)理氣血、化淤散結(jié)、補(bǔ)益沖任著手，通過全面調(diào)理女性各臟器功能，調(diào)整內(nèi)分泌，改善微循環(huán)，清除體內(nèi)淤積，從而達(dá)到消除子宮肌瘤的目的。具有安全性高、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn)，根治之后不易復(fù)發(fā)。為了開發(fā)出能有效治療婦女生殖系統(tǒng)炎癥、子宮肌瘤、宮頸癌、卵巢囊腫、盆腔炎性包塊等的中藥，申請人進(jìn)行了大量的探索和研究。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑及其制備方法。本發(fā)明藥物制劑具有清熱解毒、化瘀散結(jié)，消癰止痛的功效，是一種安全、有效、質(zhì)量可控的治療婦科炎癥和子宮肌瘤的中藥新藥。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下的技術(shù)方案治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑主要是由下列重量比例的原料藥制成白英20%50%、白花蛇舌草20%50%和地稔1540%。上述原料藥的重量比例優(yōu)選為白英35.7%、白花蛇舌草35.7%和地稔28.6%。前述治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑的制備方法取白英、白花蛇舌草和地稔，加610倍量水煎煮14次，每次煎煮14小時，濾過，濾液濃縮至6(TC相對密度為1.25的浸膏，即得本發(fā)明藥物的活性組分。為了使本發(fā)明的藥物制劑達(dá)到更好的治療效果，還可以加入原料藥地耳草、一點(diǎn)紅和積雪草，其中各原料藥的重量比例為白英15%35%、白花蛇舌草15%35%、地稔1030%、地耳草5%15%、一點(diǎn)紅1030%和積雪草5%15%。各原料藥的重量比例優(yōu)選為白英23.2%、白花蛇舌草23.2%、地稔18.6%、地耳草7.8%、一點(diǎn)紅19.4%和積雪草7.8%。如果本發(fā)明藥物制劑中還加入地兒草、一點(diǎn)紅和積雪草，則其制備方法為取白英、白花蛇舌草、地耳草、一點(diǎn)紅和積雪草，力的10倍量水煎煮14次，每次煎煮14小時，濾過，濾液濃縮至6(TC相對密度為1.25的浸膏，即得本發(fā)明藥物的活性組分。為了達(dá)到最佳的治療效果，本發(fā)明的藥物制劑中還可以加入一枝黃花、王瓜子和鬼針草，其中各原料藥的重量比例為白英10%30%、白花蛇舌草10%30%、地稔1025%、一點(diǎn)紅5%20%、地耳草510%、積雪草510%、一枝黃花510%、王瓜子510%和鬼針草510%。各原料藥的用量優(yōu)選為白英19.5%、白花蛇舌草19.5%、地稔15.5%、一點(diǎn)紅13%、地耳草6.5%、積雪草6.5%、一枝黃花6.5%、王瓜子6.5%和鬼針草6.5%。如果原料藥中還加入一枝黃花、王瓜子和鬼針草，則本發(fā)明藥物制劑的制備方法為取白英、白花蛇舌草、地稔、地耳草、一點(diǎn)紅、積雪草、一枝黃花、王瓜子、鬼針草，力口610倍量水煎煮14次，每次煎煮13小時，濾過，濾液濃縮至6(TC相對密度為1.25的浸膏，即得本發(fā)明藥物的活性組分。前述的藥物制劑可以為湯劑、顆粒劑、散劑、口服液、糖漿劑、膏滋、丸劑、片劑、膠囊劑。本發(fā)明藥物的活性組分可以加入制備不同劑型時所需的常規(guī)輔料制成藥劑學(xué)意義上的各種劑型。本發(fā)明的方解白英苦，寒，功能清熱解毒，祛風(fēng)利濕，化瘀，主治濕熱黃疸，風(fēng)熱頭痛，白帶過多，風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，水腫，淋病，丹毒，療瘡。白花蛇舌草性味甘、淡，涼，功能清熱解毒，活血止痛，利尿除濕，抗癌消腫，主治腸癰(闌尾炎)，瘡癤腫毒，濕熱黃疸，小便不利等癥；外用治瘡癤癰腫，毒蛇咬傷，現(xiàn)代臨床用于惡性腫瘤、闌尾炎、肝炎、菌痢、支氣管炎、扁桃體炎、喉炎、泌尿系統(tǒng)感染、盆腔炎、附件炎等癥。地稔性味甘、澀，平，功能清熱解毒，祛風(fēng)利濕，補(bǔ)血止血，主治腸炎，痢疾，肺膿瘍，盆腔炎，子宮出血，貧血，白帶，腰腿痛，風(fēng)濕骨痛，外傷出血，蛇咬傷等，可預(yù)防流行性腦脊髓膜炎。地耳草性味苦，甘，涼，歸肝、膽經(jīng)，功能利濕退黃，清熱解毒，活血消腫，主治傳染性肝炎，瀉痢，小兒驚風(fēng)，疳積，喉蛾，腸癰，癤腫，蛇咬傷。一點(diǎn)紅性味苦、涼，功能清熱解毒，消炎，利尿，散瘀消腫，主治上呼吸道感染，咽喉腫痛，口腔潰瘍，結(jié)膜炎，肺炎，急性腸炎，細(xì)菌性痢疾，泌尿系統(tǒng)感染，睪丸炎，乳腺炎，癤腫瘡瘍，皮膚濕疹，跌打扭傷等。積雪草性味苦、辛，寒，功能清熱除濕，解毒利尿，主治濕熱黃疸，中暑腹瀉，砂淋血淋，癰腫瘡毒，跌撲損傷。一枝黃花性味辛苦，功能疏風(fēng)清熱，消腫解毒，主治感冒頭痛，咽喉腫痛，黃疸，百日咳，小兒驚風(fēng)，跌打損傷，癰腫發(fā)背，鵝掌風(fēng)。王瓜子性味酸苦，平，功能清熱利濕，涼血止血，舒筋止吐，主治治肺痿吐血，黃疸，痢疾，腸風(fēng)下血，筋骨攣痛，反胃吐食。鬼針草性味苦、辛，寒，功能清熱除濕，解毒利尿，主治用于濕熱黃疸，中暑腹瀉，砂淋血淋，癰腫瘡毒，跌撲損傷。本方所主證型系由濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)而起，臨床辨證要點(diǎn)是經(jīng)行量多，經(jīng)期延長，帶下量多，色黃或呈膿性，質(zhì)粘稠，有穢臭味，或帶下色白質(zhì)粘，呈豆渣樣，外陰瘙癢；下腹部腫塊，小腹作痛，熱痛起伏，觸之痛劇，痛連腰骶，兼見身熱口渴，心煩不寧，或口苦口膩，胸悶納呆，大便秘結(jié)，小便黃赤；舌紅，或黯紅，有瘀斑，苔黃膩，脈滑數(shù)。從中醫(yī)病因病機(jī)分析可見，濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)均可能造成婦科炎癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、盆腔炎性包塊，按中醫(yī)辨證論治，當(dāng)以清熱利濕，清熱解毒，行氣，活血，化瘀為主法。本方主治功能的核心是清熱、利濕、解毒、活血化瘀，軟堅(jiān)散結(jié)，組方論治合理，與中醫(yī)辨證論治原則相一致。婦科炎癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、盆腔炎性包塊雖分屬中醫(yī)"帶下"、"癥瘕"范疇，但若辨證分型屬濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)類型者，因病因病機(jī)相同，按中醫(yī)異病同治的辨證論治原則，均可采用本方同治。濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)均可能造成婦科炎癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、盆腔炎性包塊，方中以白英、一枝黃花、一點(diǎn)紅清熱解毒；以白花蛇舌草、地稔、地耳草活血化瘀，軟堅(jiān)散結(jié)；以王瓜子、鬼針草、積雪草、除濕利尿，諸藥合用，共收清熱、利濕、解毒、活血化瘀，軟堅(jiān)散結(jié)之功，可使熱得清，濕得祛，毒得解，堅(jiān)得消，結(jié)得散，濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)之婦科炎癥、子宮肌瘤、卵巢囊腫、盆腔炎性包塊諸癥得治。本發(fā)明的功能主治本發(fā)明藥物具有清熱解毒、化瘀散結(jié)，消癰止痛之功效，用于濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)所致的婦科炎癥，子宮肌瘤，宮頸癌，卵巢囊腫，盆腔炎性包塊等；癥見赤白帶下，月經(jīng)量多，夾有大小血塊，經(jīng)期延長，或有腹痛等。為了驗(yàn)證本發(fā)明藥物具有良好的治療效果，申請人進(jìn)行了一系列試驗(yàn)研究，具體如下一、初步藥效學(xué)試驗(yàn)試驗(yàn)單位遵義醫(yī)學(xué)院藥理學(xué)教研室，貴州省基礎(chǔ)藥理重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，受本發(fā)明申請人委托，采用大鼠陰道、宮頸炎模型和體外抑菌方法對本發(fā)明藥物進(jìn)行了初步藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)觀察，現(xiàn)將其實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下(一)實(shí)驗(yàn)材料1、藥品與試劑受試藥本發(fā)明藥物制劑，批號:無，規(guī)格50g/袋，深褐色粉狀，臨用時稱取所需量用蒸餾水稀釋至一定濃度；液體苯酚為廣東汕頭市西隴化工廠產(chǎn)品，批號:0402041;阿拉伯塑膠粉為天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心產(chǎn)品，批號20020728。2、實(shí)驗(yàn)動物SD大鼠，雌性，體重220士20g，由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號SCXK(渝)2002003。3、主要儀器BS110S精密電子天平(北京賽多利斯股份公司)，SHA-C控溫水浴震蕩器(深圳天南海北實(shí)業(yè)公司)。(二)實(shí)驗(yàn)方法1、本發(fā)明藥物對大鼠陰道炎及子宮頸炎模型的治療作用1.1模型制作通過錐形靜脈切開針，陰道深部注入25。/。苯酚膠漿0.5ml/只，制作大鼠陰道及宮頸炎模型。1.2分組及給藥制模大鼠32只，隨機(jī)分為4組正常對照組、模型對照組、本發(fā)明藥物低(0.8g/kg)、本發(fā)明藥物高劑量組(4.0g/kg)，每組8只。正常對照組大鼠8只，不制模。其余各組制模后第7天開始灌胃給藥10ml/kg，每天一次，連續(xù)14天。模型組和正常對照組給予同體積蒸餾水。1.3觀察項(xiàng)目連續(xù)給藥14天后，將大鼠以3%戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉，解剖陰道及子宮后取出組織①觀察并記錄肉眼所見。②將取出的陰道及子宮分角處組織，置于10%甲醛溶液中固定，3天后將組織自中線縱形切開，做常規(guī)石蠟切片，HE染色，鏡下觀察陰道及子宮組織形態(tài)學(xué)變化。2、本發(fā)明藥物體外抗菌實(shí)驗(yàn)2.1根據(jù)不同菌種選用不同液體培養(yǎng)基，按倍比稀釋法將本發(fā)明藥物稀釋成125、62.5、31.25、15.625、7.6125、3.90625、1.953125mg/ml濃度。2.2根據(jù)不同菌種的培養(yǎng)要求用不同的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)時間進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束，以麥?zhǔn)媳葷醿x測定試管內(nèi)培養(yǎng)物混濁情況，MIC表示藥物最低抑菌濃度。2.3取MIC終點(diǎn)以上未長菌的各管培養(yǎng)液分別移種于不含該藥的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，無菌生長的藥物最低濃度用MBC(最低殺菌濃度)表示。(三)結(jié)果l對大鼠陰道炎及子宮頸炎模型的治療作用1.1肉眼觀察模型組大鼠陰道外口紅腫明顯，分泌物多，活動少。本發(fā)明藥物低、高劑量組大鼠僅見陰道紅腫較輕，陰道外口有少量分泌物。1.2組織形態(tài)學(xué)觀察正常對照組陰道血管擴(kuò)張，子宮頸組織細(xì)胞未見明顯異常。模型組大鼠陰道、宮頸血管擴(kuò)張充血，小灶狀被覆上皮消失、脫落，腺體磷化，粘膜鱗狀上皮增生，宮頸鱗柱交界處可見柱狀上皮化生，上皮糜爛，間質(zhì)粘膜見慢性炎性細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞浸潤。與模型組比較，本發(fā)明藥物0.8g/kg大鼠陰道、宮頸血管輕度擴(kuò)張充血，個別見粘膜鱗狀上皮增生，少量淋巴細(xì)胞和嗜酸性細(xì)胞浸潤。4.0/kg組病變較模型組明顯減輕，鱗狀上皮形態(tài)與正常組相似，炎性細(xì)胞浸潤明顯減少，被覆上皮組織結(jié)構(gòu)存在，未見明顯缺失。2.體外抗菌結(jié)果表l體外抗菌結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>(四)結(jié)論1、本發(fā)明藥物4.0g/kg對實(shí)驗(yàn)性陰道炎、子宮頸炎可產(chǎn)生治療作用，能降低炎癥反應(yīng)，減輕炎癥引起的病理學(xué)變化。本發(fā)明藥物0.8g/kg對苯酚膠漿所致陰道炎、宮頸炎治療作用不及4.0g/kg組。2、本發(fā)明藥物在體外抗菌實(shí)驗(yàn)中，對女性生殖道常見致病菌，如金葡菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、白色念珠菌、新型念珠菌等均有抗菌作用，提示本發(fā)明藥物對上述致病菌所致生殖道感染可能產(chǎn)生防治作用。二、處方配伍篩選試驗(yàn)采用動物實(shí)驗(yàn)，對本發(fā)明不同配方的體外抗菌、抗炎作用進(jìn)行了對比實(shí)驗(yàn)。1、實(shí)驗(yàn)材料1.1實(shí)驗(yàn)動物昆明種小鼠，雌性，清潔級，體重18-22g。1.2藥品與試劑受試藥本發(fā)明配方l:白英30g、白花蛇舌草30g、地稔24g;本發(fā)明配方2:白英30g、白花蛇舌草30g、地稔24g、地耳草10g、一點(diǎn)紅25g、積雪草10g;本發(fā)明配方3:白英30g、白花蛇舌草30g、地稔24g、一點(diǎn)紅20g、地耳草10g、積雪草10g、一枝黃花10g、王瓜子10g、鬼針草10g。以上三方均為水提物，臨用時用蒸餾水配成混懸液備用；二甲苯。1.3實(shí)驗(yàn)器材BS110S精密電子天平，SHA-C控溫水浴震蕩器，計(jì)時器。2、方法與結(jié)果2.1體外抗菌試驗(yàn)2.l.l方法采用體外抗菌試驗(yàn)，測定不同配方提取物對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、白色念珠菌、新型念珠菌的最低抗菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)。2.1.2結(jié)果體外抑菌試驗(yàn)顯示，本發(fā)明不同組合配方對金黃色葡萄球菌、產(chǎn)氣桿菌、變形桿菌、大腸桿菌、糞鏈球菌均有抑菌作用。試驗(yàn)對比結(jié)果表明，配方3優(yōu)于配方1和配方2，結(jié)果分別見表2表7。表2本發(fā)明不同配方對金黃色葡萄球菌的抑菌作用<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>表5本發(fā)明不同配方對乙型鏈球菌的抑菌作用序號組別菌種來源最低抑菌濃度(MICmg/ml)最低殺菌濃度23配方l配方2配方3乙型璉球菌CMCC322640.041250.041250.021130.1650.1650.0825表6本發(fā)明不同配方對白色念珠菌的抑菌作用序號組別菌種來源最低抑菌濃度(MICmg/ml)最低殺菌濃度(HBCmg/ml)23配方l配方2配方3白色念珠菌ATCC102130.08250.08250.041250.330.330.165表7本發(fā)明不同配方對新型隱球菌的抑菌作用序號組別菌種來源最版抑菌濃度(MICms/ml)最低殺菌濃度23配方l配方2配方3新型隱球菌ATCC322640.123750.123750.08250.4950.4950.332.2不同配方對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響2.2.1方法取小鼠30只，體重為2022g，隨機(jī)分為3組，每組10只，分別給本發(fā)明配方l、配方2、配方3的提取物。灌胃給予生理鹽水，給藥濃度受試藥3組均為1.5g/kg，給藥容積10ml/kg，連續(xù)給藥5d，每天一次，末次給藥lh后，將動物右耳前后兩面涂二甲苯0.02ml/只，左耳不做任何處理。4h后將動物斷椎處死，剪下雙耳，用9mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，精密電子天平稱重，每鼠右耳重量減去左耳重量為腫脹程度，并按公式計(jì)算腫脹抑制率。試驗(yàn)結(jié)果以平均值標(biāo)準(zhǔn)差表示，結(jié)果采用t檢驗(yàn)，P〈0.05顯示具有顯著性。2.2.2結(jié)果如表8所示，各組比較，本發(fā)明組方1和組方2對二甲苯致小鼠耳腫脹均有一定的抑制作用，但本發(fā)明配方3優(yōu)于配方1和配方2。2.3不同配方對大鼠棉球肉芽腫的影響2.3.l實(shí)驗(yàn)方法及動物分組雌性大鼠30只，分組及給藥方法同2.2。大鼠3%戊巴比妥鈉腹腔麻醉后，常規(guī)消毒皮膚，腹部側(cè)切口，將兩個滅菌棉球(40mg，高壓滅菌，各加氨芐青霉素lmg/0.lml，5(TC烘箱烤干)分別植入大鼠兩側(cè)腹股溝皮下。于術(shù)后當(dāng)天開始灌胃給藥，連續(xù)給藥7天，每天一次，末次給藥后lh，處死動物，取出棉球，6(TC烤箱放置12h后，用電子天平稱重，按公式計(jì)算肉芽腫重量(肉芽腫重量=取出的棉球重量-原棉球重量)。3.2結(jié)果如表9所示，各組比較，本發(fā)明組方1和組方2對大鼠棉球肉芽腫均有一定的抑制作用，但本發(fā)明配方3優(yōu)于配方1和配方2。表8本發(fā)明不同配方對二甲苯致小鼠耳腫脹的影晌組別<table>tableseeoriginaldocumentpage12</column></row><table>3.1本發(fā)明不同組合配方在體外抗菌對比實(shí)驗(yàn)中，各組合配方均對婦科生殖系統(tǒng)炎癥等常見致病菌金黃色葡萄球菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、白色念珠菌、新型念珠菌有抗菌作用，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示配方3(白英19.5%、白花蛇舌草19.5%、地稔15.5%、一點(diǎn)紅13%、地耳草6.5%、積雪草6.5%、一枝黃花6.5%、王瓜子6.5%和鬼針草6.5%)對上述致病菌所致泌尿道感染等能產(chǎn)生更好的防治作用。3.2本發(fā)明不同組合配方在對二甲苯所致小鼠耳腫脹和大鼠棉球肉芽腫的影響實(shí)驗(yàn)中，各組合均對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和大鼠棉球肉芽腫產(chǎn)生一定的抑制作用，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明配方3(白英30g、白花蛇舌草30g、地稔24g、一點(diǎn)紅20g、地耳草10g、積雪草10g、一枝黃花10g、王瓜子10g、鬼針草10g)對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹和大鼠棉球肉芽腫產(chǎn)生較明顯的抑制作用，提示該組合配方具有較好的抗炎作用。三、主要藥效學(xué)試驗(yàn)(一)對生殖器管炎癥的藥效學(xué)試驗(yàn)藥品與試劑受試藥本發(fā)明膠囊劑由貴陽春科藥業(yè)技術(shù)研發(fā)公司提供，批號2006001，規(guī)格為O.3g/粒。受試藥臨用時用蒸餾水制成2.5%，5%，10%濃度；陽性對照藥抗婦炎膠囊為貴州遠(yuǎn)程制藥有限公司產(chǎn)品，批號20061120;液體苯酚為廣東汕頭市西隴化工廠產(chǎn)品，批號0402041;阿拉伯樹膠粉為天津市科密歐化學(xué)試劑開發(fā)中心產(chǎn)品，批號20020728。實(shí)驗(yàn)動物SD大鼠，體重220士20g;由第三軍醫(yī)大學(xué)大坪醫(yī)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供，合格證號SCXK(渝)2002003;昆明種雌性小鼠，體重1822g，由重慶市中藥研究院實(shí)驗(yàn)動物研究室提供，合格證號SCXK(渝)20020004。1、本發(fā)明膠囊劑對大鼠陰道炎及子宮頸炎的影響1.1模型制作通過錐形靜脈切開針，陰道深部注入25。/。苯酚膠漿1.5ml/只，制作大鼠陰道及宮頸炎模型。1.2分組及給藥制模大鼠50只，隨機(jī)分為5組模型對照組，本發(fā)明膠囊劑高(1.2g/kg)、中(0.6g/kg)、低(0.3g/kg)劑量組及對抗婦炎膠囊組(1.4g/kg)，每組IO只。正常對照組大鼠10只，不制模。制模后第7天開始灌胃給藥10ml/kg，每天一次，連續(xù)14天。模型組和正常對照組給予同體積蒸餾水。1.3觀察項(xiàng)目連續(xù)給藥14天后處死各組動物，解剖陰道及子宮后取出組織①觀察并記錄肉眼所見。②將取出的陰道及子宮分角處組織，置于10%甲醛溶液中固定，3天后將組織自中線縱形切開，做常規(guī)石蠟切片，HE染色，鏡下觀察陰道及子宮組織形態(tài)學(xué)變化觀察粘膜、粘膜下間質(zhì)炎癥變化。炎癥程度的判定-為無改變；+為輕度改變；++為中度改變；+++為重度改變，結(jié)果如表IO。1.4結(jié)果1.4.1肉眼觀察制模后大鼠陰道外口紅腫明顯，分泌物多，大鼠扎堆，活動少。本發(fā)明膠囊劑各給藥組、抗婦炎膠囊組大鼠僅見陰道輕度紅腫，陰道外口有少量分泌物。1.4.2組織形態(tài)學(xué)觀察模型組大鼠陰道粘膜鱗狀上皮層次增厚，宮頸鱗柱交界處可見柱狀上皮化生，上皮糜爛，少數(shù)可見粘膜潰瘍，粘膜下層毛細(xì)血管擴(kuò)張充血，炎性細(xì)胞浸潤明顯。本發(fā)明藥物高、中劑量組與模型組比較，病變均明顯減輕，鱗狀上皮形態(tài)與正常組相似，粘膜下炎性細(xì)胞浸潤較模型組明顯減少。表10本發(fā)明膠棄劑對大鼠陰道及子宮頸炎癥的影響<table>complextableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>2、本發(fā)明膠囊劑對大鼠子宮炎的影響2.1模型制備大鼠3。/。戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉，腹部常規(guī)消毒，腹正中切口2cm，暴露子宮，在左側(cè)子宮距分叉lcm處切開一小口，將一塑料小管(長2mm，直徑O.5mm，重2mg，已酒精消毒)放入子宮內(nèi)，并與子宮切口縫合固定，以防滑脫。傷口滴入氨芐青霉素O.lmg(0.05%，0.2ml)以防感染，關(guān)腹，消毒手術(shù)區(qū)。2.2分組及給藥將造模3天的大鼠50只隨機(jī)分為模型組，本發(fā)明膠囊低劑量組(0.3g/kg)，中劑量組(0.6g/kg)，高劑量組(1.2g/kg)，抗婦炎膠囊對照組(1.4g/kg)，每組10只。正常大鼠對照組10只，不造模。灌胃給藥10ml/kg，每天一次，連續(xù)2周，模型組和正常對照組給予同體積蒸餾水。2.3觀察指標(biāo)給藥2周后將動物用3。/。戊巴比妥鈉30mg/kg腹腔麻醉，取出左側(cè)子宮，用濾紙輕輕沾去血液，精密天平稱重，計(jì)算子宮炎癥腫脹度(左右兩側(cè)子宮重量差)，并按下轔狀上皮増厚往狀上皮増生脫落糜爛炎性細(xì)胞浸潤列公式計(jì)算腫脹率和腫脹抑制率(％)。腫脹率(％)=(Vt-Vn)/VnX100%;(式中Vt:為致炎子宮重量，Vn:未致炎子宮重量)；腫脹抑制率(％)=(a-b)/aX100%;a:模型組平均腫脹率，b:給藥組平均腫脹率2.4結(jié)果結(jié)果表明，模型組與正常對照組比較，子宮腫脹程度明顯增加。本發(fā)明膠囊各給藥組與模型組比較，子宮腫脹程度明顯減輕(表ll)。表11本發(fā)明膠棄對大鼠子宮炎癥的影晌<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>3、本發(fā)明藥物膠囊對慢性輸卵管炎的影響3.1模型制備大鼠3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔麻醉，腹部常規(guī)消毒，腹正中切口暴露子宮，沿子宮找到雙側(cè)輸卵管，在子宮角近輸卵管處進(jìn)針，向輸卵管-卵巢方向，輸卵管內(nèi)注入0.05ml混合菌液，注畢，分層關(guān)腹，消毒手術(shù)區(qū)，分籠飼養(yǎng)。3.2分組與給藥雌性造模大鼠80只，隨機(jī)分為模型組，本發(fā)明膠囊高(1.2g/kg)、中(0.6g/kg)、低(0.3g/kg)劑量組及陽性藥對照藥抗婦炎膠囊組(1.4g/kg)，每組16只。正常對照組大鼠16只，不制模。制模后第二天開始灌胃給藥，每天一次，連續(xù)21天，模型組和正常對照組給予同體積蒸餾水。3.3指標(biāo)觀察給藥21天后將動物用3%戊巴比妥鈉(30mg/kg)腹腔麻醉，肉眼觀察輸卵管變化，并切取輸卵管放入4%甲醛液中固定，用做病理組織學(xué)檢査。每項(xiàng)檢査指標(biāo)按病理學(xué)改變分為正常、輕度、中度及重度，分別用-、+、++、+++表示。"-"無明顯變性，炎性細(xì)胞浸潤，組織增生等病理改變；"+"顯示細(xì)胞由柱狀變?yōu)榱⒎綘?，纖毛消失，少量結(jié)締組織增生，少量炎性浸潤；"++"表示細(xì)胞由柱狀變?yōu)楸馄綘睿Y(jié)締組織增生，部分炎性細(xì)胞浸潤，管腔粘連；+++表示細(xì)胞上皮和纖毛完全消失，大量細(xì)胞增生和炎性細(xì)胞浸潤，管腔粘連嚴(yán)重。采用等級序值法檢驗(yàn)，分析各樣本的病理結(jié)果。3.4結(jié)果3.4.1肉眼觀察正常組大鼠輸卵管外觀粗細(xì)均勻，光滑圓潤，色澤紅潤，富有彈性，與周圍組織無粘連，無水腫現(xiàn)象。模型大鼠輸卵管增粗，色澤變暗，與周圍部分粘連，少數(shù)可見積水或膿腫。本發(fā)明藥物膠囊高、中劑量組及陽性藥組較模型組有不同程度的好轉(zhuǎn)(表12)。表12本發(fā)明藥物膠襄對慢性輸卵管炎的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>3.4.2組織學(xué)檢査HE染色光鏡下觀察，正常對照組大鼠輸卵管壁組織結(jié)構(gòu)清晰，管腔通暢，遠(yuǎn)端纖毛豐富，近端管壁清晰，纖毛較少。模型大鼠輸卵管壁結(jié)構(gòu)分界不清，纖毛和肌層結(jié)締組織增生，粘膜上皮細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，呈柱狀或卵圓形，細(xì)胞深染濃縮，膠原纖維增生，間質(zhì)明顯水腫，炎性細(xì)胞浸潤明顯，部分管腔阻塞嚴(yán)重。本發(fā)明膠囊高和中劑量組與模型組比較，病變明顯減輕，肌層結(jié)締組織增生較輕，管腔阻塞較少，漿膜下炎性細(xì)胞較模型組明顯減少(表12)。4、本發(fā)明膠囊的抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱作用4.1本發(fā)明膠囊對二甲苯所致小鼠耳腫脹的影響4.1.1實(shí)驗(yàn)方法及動物分組雌性小鼠50只，隨機(jī)分為5組本發(fā)明藥物膠囊低(0.3g/kg)、中(0.6g/kg)、高劑量(1.2g/kg)組，抗婦炎對照組(1.4g/kg)，生理鹽水對照組(同容量生理鹽水)。灌胃給藥，連續(xù)給藥7天，每天一次，末次給藥lh后，將動物右耳前后兩面涂二甲苯0.02ml/只，左耳不做任何處理。4h后將動物斷椎處死，剪下雙耳，用9mm直徑打孔器分別在同一部位打下圓耳片，電子天平稱重，每鼠右耳重量減去左耳重量為腫脹度。各參數(shù)用t檢驗(yàn)判斷給藥組與生理鹽水對照組間有無顯著性差異。4.1.2結(jié)果本發(fā)明膠囊高劑量對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹有明顯抑制作用，中、低劑量組雖有減輕小鼠耳腫脹的趨勢，但差異無顯著性(表13)。表13本發(fā)明藥物膠棄對小鼠耳腫脹的影晌<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>4.2本發(fā)明藥物膠囊對小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的影響4.2.1實(shí)驗(yàn)方法及動物分組雌性未孕小鼠50只，分組方法同l.l。灌胃給藥，連續(xù)給藥3天，每天一次，末次給藥后lh，各鼠尾靜脈注射伊文思藍(lán)生理鹽水O.lml/10g，隨即腹腔注射0.6。/。醋酸0.2ml/只。20min后小鼠脫臼處死，剖開腹腔，用6ml生理鹽水(NS)數(shù)次沖洗腹腔，收集并合并沖洗液于離心管內(nèi)，加入NS至于10ml，以3000轉(zhuǎn)/分鐘，離心15min，取出上清液于721型分光光度計(jì)590nm波長處比色，以吸光度表示伊文思藍(lán)滲出量，用t檢驗(yàn)判斷其顯著性。4.2.2結(jié)果結(jié)果表明，與生理鹽水組比較，本發(fā)明藥物膠囊高、中、低三個劑量組均能明顯抑制醋酸所致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性的增高，減少滲出(表14)。表14本發(fā)明藥物膠棄對小鼠HAC所致毛細(xì)血管通透性的影晌<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>4.3本發(fā)明膠囊對大鼠棉球肉芽腫的影響4.3.l實(shí)驗(yàn)方法及動物分組雌性大鼠50只，分組及給藥方法同l.l。大鼠3%戊巴比妥鈉腹腔麻醉后，常規(guī)消毒皮膚，腹部側(cè)切口，將兩個滅菌棉球(40mg，高壓滅菌，各加氨芐青霉素lmg/0.lml，5(TC烘箱烤干)分別植入大鼠兩側(cè)腹股溝皮下。于術(shù)后當(dāng)天開始灌胃給藥，連續(xù)給藥7天，每天一次，末次給藥后lh，處死動物，取出棉球，6(TC烤箱放置12h后，用電子天平稱重，按公式計(jì)算肉芽腫重量(肉芽腫重量=取出的棉球重量-原棉球重量)。4.3.2結(jié)果本發(fā)明膠囊中、高劑量能顯著抑制肉芽組織增生，低劑量組減輕棉球肉芽腫的作用不明顯(p〉0.05);陽性對照藥婦炎康能明顯抑制肉芽組織增生(表15)。表15本發(fā)明藥物膠棄對大鼠棉球肉芽腫的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.4本發(fā)明膠囊的鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)4.4.1小鼠熱板法實(shí)驗(yàn)取雌性小鼠50只，分組及給藥方法l.l。將小鼠放在55'C金屬板上，以小鼠舔后足或跳躍反應(yīng)潛伏期為痛閾指標(biāo)，記錄在金屬板上停留的時間。結(jié)果顯示，生理鹽水對照組給藥前后小鼠疼痛潛伏期無明顯區(qū)別。本發(fā)明藥物高、中劑量均能明顯延長疼痛潛伏期，與生理鹽水對照組相比差異顯著(表16)。表16本發(fā)明膠棄對熱板法所致小鼠疼痛的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>4.4.2小鼠扭體法實(shí)驗(yàn)取小鼠50只，雌性，分組同l.l。灌胃給藥，l次/天，連續(xù)3天，末次給藥lh后，腹腔注射0.6。/。醋酸0.2ml/只，觀察小鼠15min內(nèi)發(fā)生的扭體次數(shù)，并計(jì)算抑制率。抑制率(％)=(生理鹽水組扭體次數(shù)-試藥組扭體次數(shù))/生理鹽水組扭體次數(shù)。結(jié)果顯示，本發(fā)明藥物高、中劑量及陽性藥婦炎康均能明顯減少醋酸所致小鼠扭體次數(shù)，本發(fā)明藥物低劑量作用不明顯(表17)。表17本發(fā)明藥物膠棄對醒酸所致小鼠疼痛的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>4.5.本發(fā)明藥物膠囊對2，4-二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱的影響4.5.l實(shí)驗(yàn)方法及動物分組大鼠50只，分組及給藥同l.l。末次給藥后lh，測定各組大鼠肛溫后，每鼠皮下注射2，4-二硝基苯酚15mg/kg(1.5mg/ml，lml/100g體重)引起大鼠體溫升高(體溫20min即升高，至lh達(dá)高峰，持續(xù)3小時以上)，1h后測定每組大鼠體溫變化4.5.2結(jié)果本發(fā)明藥物膠囊高劑量組對2，4-二硝基苯酚所致大鼠發(fā)熱有一定影響，中、低劑量組無明顯影響。5、本發(fā)明藥物膠囊體外抗菌實(shí)驗(yàn)5.1試驗(yàn)方法(1)根據(jù)不同菌種選用不同液體培養(yǎng)基，按倍比稀釋法將本發(fā)明藥物膠囊稀釋成125、62.5、31.25、15.625、7.6125、3.90625、1.953125mg/ml濃度。(2)根據(jù)不同菌種的培養(yǎng)要求用不同的培養(yǎng)方法和培養(yǎng)時間進(jìn)行培養(yǎng)。培養(yǎng)結(jié)束，以麥?zhǔn)媳葷醿x測定試管內(nèi)培養(yǎng)物混濁情況，MIC表示藥物最低抑菌濃度。(3)取MIC終點(diǎn)以上未長菌的各管培養(yǎng)液分別移種于不含該藥的固體培養(yǎng)基上培養(yǎng)，無菌生長的藥物最低濃度用MBC(最低殺菌濃度)表示。5.2試驗(yàn)結(jié)果表18本發(fā)明膠棄體外抗菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果細(xì)菌名稱菌種5最低抑菌濃度最低殺菌濃度金黃色葡萄球菌CMCC2S0034.1251S.5大腸桿菌ATCC441858.25033.0詗綠假単胞菌4.12516.5乙型鏈球菌CMCC322048.25033.0白色念珠菌ATCC102138.25033.0新型隱球菌ATCC322648.25033.0破傷風(fēng)桿菌CMCC6頓116.5066.0產(chǎn)氣莢膜桿菌CMCC鵬Ol8.25033.0新型念珠菌本室分萬8.25033.05、結(jié)論5.1本發(fā)明膠囊0.6g/kg，1.2g/kg對實(shí)驗(yàn)性陰道炎、子宮頸炎及輸卵管炎產(chǎn)生明顯的治療作用，能降低炎癥反應(yīng)，減輕炎癥引起的病理學(xué)變化。5.2本發(fā)明膠囊在體外抗菌實(shí)驗(yàn)中，對女性生殖道常見致病菌，如金葡菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、新型念珠菌、白色念珠菌等有抗菌作用，提示本發(fā)明藥物膠囊對上述致病菌所致生殖道感染可能產(chǎn)生防治作用。5.3本發(fā)明膠囊0.6g/kg，1.2g/kg對二甲苯所致小鼠耳廓腫脹及大鼠肉芽腫均產(chǎn)生明顯的抑制作用，并能降低毛細(xì)血管通透性，減少炎癥滲出，表明本發(fā)明藥物膠囊具有明顯的抗炎作用。5.4本發(fā)明膠囊0.6g/kg及1.2g/kg對熱板法及醋酸所致小鼠疼痛有明顯的抑制作用，提示本發(fā)明藥物膠囊對炎癥引起的疼痛有緩解作用。綜上所述，本發(fā)明膠囊對實(shí)驗(yàn)性陰道炎、子宮頸炎及輸卵管炎產(chǎn)生明顯的治療作用，為其臨床實(shí)驗(yàn)及使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。(二)對生殖器管腫瘤的藥效學(xué)試驗(yàn)1、實(shí)驗(yàn)材料1.1實(shí)驗(yàn)動物(1)昆明KM小鼠68周齡，體重20士2g。(2)S180瘤株。1.2藥物同(一)。對照藥宮瘤消膠囊。2、實(shí)驗(yàn)方法2.1動物模型制備無菌取第7天鼠轉(zhuǎn)移癌S180腹水，用生理鹽水l:3(lXl(Z/ml)稀釋，取0.2ml稀釋液，右腋皮下注射KM小鼠。2.2給藥方式和劑量(1)正常對照組IO只昆明KM小鼠，用生理鹽水灌胃14d。(2)荷瘤對照組(模型組)IO只昆明KM小鼠，用生理鹽水灌胃14d。(3)本發(fā)明藥物膠囊治療組(實(shí)驗(yàn)組)30只昆明KM小鼠，分別用本發(fā)明藥物膠囊低(0.3g/kg)、中(0.6g/kg)、高劑量(1.2g/kg)組灌胃14d。(4)對照藥宮瘤消膠囊IO只昆明KM小鼠，用宮瘤消膠囊(2.0g/kg)灌胃14d。以上模型組和實(shí)驗(yàn)組均在灌胃第7天造模。2.3小鼠體內(nèi)抑瘤實(shí)驗(yàn)于實(shí)驗(yàn)第15天取荷瘤對照組和本發(fā)明藥物膠囊治療組小鼠各IO只頸椎脫位法處死，剝離瘤體，測瘤重，計(jì)算抑瘤率。抑瘤率(％)=(對照組平均瘤重-治療組平均瘤重)/對照組平均瘤重X100。/。2.4生命延長率的測定記錄正常對照組、荷瘤對照組、本發(fā)明藥物膠囊治療組低(0.3g/kg)、中(0.6g/kg)、高劑量(1.2g/kg)和宮瘤消膠囊對照組(2.0g/kg)各10只小鼠的生存的天數(shù)，觀察荷瘤小鼠的生活狀態(tài)，計(jì)算生命延長率。生命延長率=(用藥組平均天數(shù)-荷瘤對照組平均天數(shù))/荷瘤對照組平均天數(shù)X100呢3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果3.1本發(fā)明藥物膠囊對小鼠體內(nèi)S180肉瘤生長的抑制作用如表19所示用藥組瘤重顯著低于模型組(P〈0.05)，說明本發(fā)明藥物膠囊有抑制腫瘤生長的作用。此外從實(shí)驗(yàn)中觀察到用藥組小鼠進(jìn)食多動作靈活。而荷瘤對照組小鼠體重增加，較慢，，少動，進(jìn)食少。顯示用藥組小鼠生長狀況生活質(zhì)量優(yōu)于荷瘤對照組。表19本發(fā)明藥物膠棄對S180腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長的抑制效果<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>3.2本發(fā)明藥物膠囊對荷瘤小鼠生命延長率的影響如表20所示，用藥組與荷瘤對照組比較生存天數(shù)明顯延長，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理后兩者有顯著性差異(P〈0.01)，表明本發(fā)明藥物膠囊能延長荷瘤小鼠生存期。此外，用藥組生存狀態(tài)也優(yōu)于荷瘤對照組。表20本發(fā)明藥物膠棄對荷瘤小鼠生命延長率的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>4、結(jié)論本發(fā)明藥物膠囊對實(shí)驗(yàn)性S180腫瘤細(xì)胞體內(nèi)生長的具有很好的抑制效果，能延長荷瘤小鼠生存期，為其臨床實(shí)驗(yàn)及使用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。四、急性毒性實(shí)驗(yàn)摘要觀察本發(fā)明藥物對小鼠的急性毒性。小鼠單次灌胃給藥無死亡，無法求出半數(shù)致死量，采用最大給藥量80g/kg.d(l日三次灌胃)連續(xù)觀察14天，未見小鼠死亡，一般狀況良好，無異常發(fā)現(xiàn)，表明本發(fā)明藥物對小鼠急性毒性甚低。1.實(shí)驗(yàn)材料1.1動物昆明種小鼠，體重1822g。由重慶市中藥研究院實(shí)驗(yàn)動物研究室提供，合格證號SCXK(渝)20020004。1.2藥物本發(fā)明藥粉。實(shí)驗(yàn)前用研缽磨成細(xì)粉，用蒸餾水配制成混懸液備用。2、方法2.1測定半數(shù)致死量(LD5o):雌性小鼠40只，體重1822g，隨機(jī)分成4組(10只/組):分別為本發(fā)明藥物20g/kg.d—、22g/kg.d—、24g/kg.d—、26g/kg.d—1(最大混懸濃度)，禁食(不禁水)12小時后單次灌胃給藥，每次0.4ml/10g，觀察小鼠的一般情況(體重變化、飲食、皮毛、行為、分泌物、排泄物等)及中毒、死亡情況，連續(xù)觀察14天。2.2最大給藥量實(shí)驗(yàn)雌性小鼠20只，體重1822g，給藥容積O.4ml/10g，80g/kg.d分三次灌胃給藥，觀察小鼠的一般活動情況及死亡數(shù)，連續(xù)觀察14天。3、結(jié)果3.1本發(fā)明藥物各組小鼠試驗(yàn)期間未見死亡，一般狀況良好(體重、飲食、皮毛、行為、分泌物、排泄物等)，無法求出LD50。3.2采用最大給藥量80g/kg.d(約相當(dāng)于臨床每日給藥量的250倍)灌胃，試驗(yàn)期間小鼠體重均增加(見表21)，飲食及活動正常，皮毛光滑，口、鼻、眼等未見異常分泌物，給藥后僅第l天呈褐色軟便，小便未見異常。4.結(jié)論最大給藥量實(shí)驗(yàn)表明本發(fā)明藥物對小鼠急性毒性甚低。表21本發(fā)明藥物最大給藥m實(shí)驗(yàn)小鼠體重的比較<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>五、長期毒性試驗(yàn)SD大鼠連續(xù)灌胃給予本發(fā)明膠囊1.94g/kg、9.7g/kg、19.4g/kg6個月，觀測給藥期間和停藥恢復(fù)期2周的毒性。每天觀察給藥后大鼠的飲食、活動、體重、攝食量。于給藥6個月和停藥2周(恢復(fù)期)定期測定動物的血液學(xué)、血清生化學(xué)，并進(jìn)行剖檢和組織病理學(xué)檢査。結(jié)果表明，本發(fā)明藥物膠囊1.94g/kg、9.7g/kg、19.4g/kg灌胃給藥3個月對大鼠無明顯的毒性。(1)動物SD大鼠(合格證號SCXK(渝)2002003)，級別清潔級。動物數(shù)和性別SD大鼠80只，雌性。體重給藥前l(fā)周的體重范圍220士20g。健康狀況給藥前1周，觀察大鼠一般狀況，未見異常。飼養(yǎng)條件清潔級動物房，溫度22士3'C，每籠飼養(yǎng)5只大鼠。飼料鈷60放射滅菌大鼠用顆粒飼料喂食每日自由攝食。飲用水自來水經(jīng)滅菌后，動物從飲水瓶中自由攝取。(2)分組和給藥分組按體重80只大鼠分為4組，分別為對照組、本發(fā)明膠囊(高劑量組、中劑量組、低劑量組)，每組20只。分組方法按體重均衡分組。給藥期每周6天，連續(xù)給藥6個月。給藥方式灌胃給藥，20ml/kg，每天一次(早上8點(diǎn))?；謴?fù)期停止給藥后，每天觀測一次，連續(xù)2周。(3)劑量劑量組別低劑量組1.94g/kg(相當(dāng)于臨床用量5倍)，中劑量組9.7g/kg(相當(dāng)于臨床用量的25倍)，高劑量組19.4g/kg(相當(dāng)于臨床用量的50倍)，空白對照組給予同體積蒸餾水。設(shè)計(jì)依據(jù)本發(fā)明膠囊小鼠灌胃未測出小鼠LD5()，采用最大容積給藥。本發(fā)明膠囊對大鼠作用的有效劑量為O.6g/kg。根據(jù)研發(fā)者提供的臨床人擬給藥量每人每天為3.6g，按公斤體重計(jì)算為O.0375g/kg/d。本發(fā)明膠囊3個月長期毒性給藥劑量計(jì)算根據(jù)體表面積折算，大鼠劑量為1.94g/kg、9.7g/kg、19.4g/kg，分別為臨床給藥量的5、25、50倍(4)觀察內(nèi)容一般狀態(tài)的觀察從購入動物日起到停藥恢復(fù)期結(jié)束，通常每天觀察一次，但給藥期間每天觀察23次。給藥前、后全部實(shí)驗(yàn)動物。體重測定給藥前、給藥開始直至停藥恢復(fù)期結(jié)束，每周測定體重l次。另外，在解剖前先測定動物的體重。給藥前和給藥后全部動物。攝食量測定給藥前1周、給藥開始，直至停藥恢復(fù)期結(jié)束，每周l次測定攝食量(24小時食物消耗量)。每周二上午9時將每籠(5只大鼠)的飼料取出，并放入500克飼料。周三上午9時將每籠(5只大鼠)剩余飼料取出，稱量并計(jì)算每天平均每只大鼠攝食量(g/rat/d)。給藥前和給藥后全部動物。采血和標(biāo)本制備給藥后6個月和恢復(fù)期結(jié)束的每次剖檢前摘單眼球法采血，進(jìn)行凝血時間、血液學(xué)、血清生化等標(biāo)本制備和檢査。血液學(xué)檢査進(jìn)行l(wèi)l項(xiàng)指標(biāo)，白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞、凝血時間，血細(xì)胞檢査。血清生化檢査采用全血經(jīng)離心所得血清，進(jìn)行l(wèi)l項(xiàng)生化指標(biāo)(AST，ALT，ALP，GLU，BUN，TCHO，TBIL，CRE，TP，ALB，A/G)的觀使。尸檢試驗(yàn)全部實(shí)驗(yàn)組動物(包括實(shí)驗(yàn)期間死亡動物)進(jìn)行剖檢。尸檢試驗(yàn)在給藥3個月和停藥2周時進(jìn)行，采用切斷頸動脈放血處死大鼠。解剖肉眼檢査和稱臟器重量解剖時肉眼仔細(xì)觀察各臟器和組織的異常變化。稱重的器官心臟、肝臟、脾臟、肺、腎臟、腦、腎上腺、胸腺、甲狀腺(含甲狀旁腺)、子宮、卵巢，并計(jì)算臟器重量系數(shù)(臟器重/體重X100%)。組織和器官的固定固定的組織器官如下腦、心、肝、脾、肺、腎、胰腺、腎上腺、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、食道、胃、十二指腸、空腸、回腸和結(jié)腸及病變部位等。組織病理學(xué)檢査臟器和組織經(jīng)福爾馬林固定12小時后，換新福爾馬林繼續(xù)固定48小時，胃組織修塊為沿胃小彎縱行分別修46塊約2cm長的組織，包括噴門、胃小彎、胃大彎、幽門、十二指腸及前胃。組織經(jīng)常規(guī)脫水，石蠟包埋，切5yM薄片，HE染色，光鏡檢査。(5)試驗(yàn)結(jié)果①一般狀況對照組在6個多月的實(shí)驗(yàn)過程中，對照組20只大鼠進(jìn)食與活動狀況正常，未發(fā)現(xiàn)異?，F(xiàn)象。低劑量組(1.94g/kg):在整個試驗(yàn)過程中，20只大鼠進(jìn)食與活動狀況正常，未發(fā)現(xiàn)呼吸、嘔吐、流涎、腹瀉等異?，F(xiàn)象。中劑量組(9.7g/kg):僅4號大鼠6周時發(fā)現(xiàn)鼻紅色分泌物，三天后自行恢復(fù)正常，其余大鼠無異常。高劑量組(19.4g/kg):1號大鼠于給藥后第2周發(fā)現(xiàn)腹瀉，二天后自行恢復(fù)正常，其它均未出現(xiàn)異常。②體重在整個試驗(yàn)過程中，各給藥組大鼠的體重增長均正常。與對照組比較，未見明顯差異，未發(fā)現(xiàn)與藥物相關(guān)的體重變化。③攝食量在整個試驗(yàn)過程中，大鼠的攝食量與對照組比較，未見明顯差異，未發(fā)現(xiàn)與藥物相關(guān)的攝食量變化。④對血液學(xué)的影響給藥6個月血液學(xué)檢査給藥6個月血液學(xué)11項(xiàng)指標(biāo)(白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和凝血時間)檢査結(jié)果。白細(xì)胞總數(shù)本發(fā)明藥物膠囊高劑量組白細(xì)胞總數(shù)為4.68乂109/^比對照組5.67X1(^/L有所減少，但無顯著差異。PLT:本發(fā)明藥物膠囊高劑量組的血小板數(shù)為989.64乂109/1^，比對照組1018.23X1(^/L有所減少，但無顯著差異；中劑量、低劑量組與對照組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其它血液學(xué)指標(biāo)，給藥組與對照組比較未見明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。停藥恢復(fù)期血液學(xué)檢査停止給藥后2周，血液學(xué)上述ll項(xiàng)指標(biāo)檢査結(jié)果。給藥組與對照組比較未見統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的差異。⑤對血清生化的影響給藥6個月血清生化變化給藥6個月(24周)檢査血清生化ll項(xiàng)指標(biāo)(AST,ALT,ALP，GUJ，BUN，TCHO，TBIL，CRE，TP，ALB，A/G)。Na+:本發(fā)明藥物膠囊高劑量(19.4g/kg)組的血清Na+為155.46mmol/L、中劑量(9.7g/kg)組的Na+為152.17mmol/L，比對照組148.27mmol/L有所增加，但無顯著差異，低劑量組與對照組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。TBLL:本發(fā)明藥物膠囊高劑量組(19.4g/kg)的總膽紅素為2.47ymol/L，明顯低于對照組(5.84ymol/L，P〈0.05);中、低劑量組與對照組比較無明顯差異。GLU:本發(fā)明藥物膠囊低劑量組(1.94g/kg)的血糖為7.78mmol/L，明顯高于對照組5.86mmol/L(P〈0.05)，但中、高劑量組未見明顯變化。其它項(xiàng)血清生化指標(biāo)，給藥組與對照組比較未見明顯差異。停藥恢復(fù)期血清生化檢察停止給藥后2周，檢査血清生化ll項(xiàng)指標(biāo)(AST，ALT，ALP，GUJ，BUN，TCHO，TBIL，CRE，TP，ALB，A/G)。TBLL:本發(fā)明藥物膠囊高劑量組TBLL為6.55±0.93、中劑量組為5.51±0.82，均明顯高于比對照組的3.32±0.93(P〈0.05)。TG:本發(fā)明藥物膠囊高劑量組TG含量為l.12mmol/L、中劑量組為l.03mmol/L，均略高于對照組(0.77mmol/L)，但無顯著差異(P〉0.05)。其它血清生化指標(biāo)，給藥組與對照組比較未見明顯差異。⑥系統(tǒng)尸解解剖時肉眼檢査各個階段(6個月、恢復(fù)期)的所有動物的組織、器官的異常情況。給藥6個月系統(tǒng)尸解對照組12只大鼠被毛光滑，頭部器官、會陰部均未見異常，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、睪丸、附睪、前列腺、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、氣管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胸腔及腹腔均未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的病變?？瞻讓φ战M12只大鼠中1只動物見肝囊腫，其余未見異常高劑量組(19.4g/kg):12只大鼠中僅1只脾大外，其余各臟器和組織未見異常。中劑量組(9.7g/kg):12只大鼠中2只脾大外，其余各臟器和組織未見異常。低劑量組(1.94g/kg):12只大鼠中1只動物雙腎囊腫外，其余各臟器和組織未見異?；謴?fù)期系統(tǒng)尸解對照組8只大鼠被毛光滑，頭部器官、會陰部均未見異常，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、氣管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胸腔及腹腔均未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的病變。高劑量組(19.4g/kg):8只大鼠被毛光滑，頭部器官、會陰部均未見異常，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、氣管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胸腔及腹腔均未均未發(fā)現(xiàn)肉眼可見的病變。中劑量組(9.7g/kg):8只大鼠中1例見胸腺較小。8只大鼠被毛光滑，頭部器官、會陰部均未見異常，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、氣管、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胸腔及腹腔均未見到肉眼病變。低劑量組(1.94g/kg):8只大鼠被毛光滑，頭部器官、會陰部均未見異常，心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、腦、卵巢、子宮、甲狀腺、胸腺、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱、胸骨、脊髓、視神經(jīng)、腦垂體、氣管、胃、十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸、胸腔及腹腔均未見到肉眼病變。⑦對臟器重量的影響給藥6個月臟器重量變化脾臟本發(fā)明藥物膠囊中劑量組(9.7g/kg)平均脾臟重量為1.35士0.69(g)，比對照組0.63士0.13(g)明顯增加(P〈0.05);高劑量組、低劑量組與對照組比較無明顯差異。胸腺本發(fā)明藥物膠囊中劑量組(9.7g/kg組)平均胸腺重量為O.18g，比對照組(0.24g)明顯減少(P〈0.05)。給藥各組對其它臟器(心臟、肺、腦、肝臟、腎臟、腎上腺、甲狀腺、子宮、卵巢)重量與對照組無明顯差異。表22本發(fā)明藥物膠棄大鼠長羞試驗(yàn)12周臟器重重系數(shù)(Mean士SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>停藥恢復(fù)期臟器重量的檢測本發(fā)明藥物膠囊給藥各組停藥2周，大鼠臟器重量與對照組無明顯差異。表23本發(fā)明藥物膠棄大鼠長羞試驗(yàn)恢復(fù)期臟器重重及臟器系數(shù)(Mean土SD)<table>tableseeoriginaldocumentpage28</column></row><table>(6)本發(fā)明藥物用藥6個月對SD大鼠的毒性作用①對攝食量和體重增長的影響大鼠分別灌胃本發(fā)明藥物膠囊1.94g/kg、9.7g/kg、19.4g/kg連續(xù)6個月，其體重增長率和攝食量與空白對照組比較均未見明顯差異，說明本發(fā)明藥物膠囊在l.94g19.4g/kg范圍內(nèi)對攝食和體重增長無明顯影響。②對血液學(xué)的影響在給藥6個月(24周)的血液學(xué)ll項(xiàng)指標(biāo)(白細(xì)胞、紅細(xì)胞、血紅蛋白、血小板、網(wǎng)織紅細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、嗜中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞、嗜堿性粒細(xì)胞、單核細(xì)胞和凝血時間)檢査結(jié)果和分析如下白細(xì)胞總數(shù)本發(fā)明藥物膠囊高劑量組白細(xì)胞總數(shù)為4.68乂109/^比對照組5.67X1(^/L有所減少，但無顯著差異。PLT:本發(fā)明藥物膠囊高劑量組的血小板數(shù)為989.64X10VL，比對照組1018.23X107L有所減少，但無顯著差異；中劑量、低劑量組與對照組比較無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③對血清學(xué)的影響GLU:給藥24周，本發(fā)明藥物膠囊低劑量組的血糖為7.78mmol/L，比對照組5.86mmol/L明顯升高；而本發(fā)明藥物膠囊高劑量組、中劑量組與空白對照均無明顯差異，推測低劑量組血糖的升高可能與個別動物食量過大有關(guān)，且在停藥恢復(fù)期未見升高，故推測非藥物所致。④對臟器重量的影響給藥24周，本發(fā)明藥物膠囊中劑量組脾臟的重量1.35g，比對照組0.63g明顯增加；胸腺臟器的重量為O.18g，比對照組0.24g明顯減少，但高劑量組脾和胸腺沒有發(fā)現(xiàn)明顯變化。恢復(fù)期各給藥組與空白對照組比較，各臟器指數(shù)均未見統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。提示，本發(fā)明藥物膠囊中劑量組脾和胸腺重量的變化與藥物的毒性關(guān)系不大。⑤對組織病理學(xué)的影響用藥6個月，高、中劑量組可見A、少數(shù)動物發(fā)生肝組織少許脂肪變性和水樣變性，肝組織間質(zhì)內(nèi)見慢性炎細(xì)胞浸潤。B、少數(shù)動物發(fā)生氣管、支氣管粘膜及肺泡輕度慢性炎癥改變。C、個別動物淋巴結(jié)、腸粘膜、子宮頸及膀胱有炎癥變化。這些改變與對照組相似，均屬二級動物常見病變，與藥物的毒性關(guān)系不大?；謴?fù)期未見特殊改變。(7)結(jié)論大鼠灌胃給予本發(fā)明藥物膠囊1.94g/kg、9.7g/kg及19.4g/kg，(分別相當(dāng)于臨床用量的5、25、50倍)，連續(xù)6個月的毒性研究結(jié)果表明，本品對主要器官和組織未見明顯毒性。六、臨床資料(一)湯劑的臨床應(yīng)用1、用于婦科炎癥(1)一般資料本發(fā)明湯劑在民間進(jìn)行了試用，經(jīng)收集整理用該組方治療婦科炎癥60例，其中最小年齡20歲，最大年齡65歲；發(fā)病時間最短3天，最長5年；其中陰道炎24例，宮頸炎14例，盆腔炎16例，附件炎6例，其中病發(fā)尿潴留3例，繼發(fā)前列腺感染者6例。(2)治療方法本組60例均以本發(fā)明煎劑為主方。處方組成白英15g、白花蛇舌草15g、地稔12g、地耳草10g、一點(diǎn)紅10g、積雪草10g、一枝黃花15g、王瓜子10g、鬼針草10g。用法為水煎，每日1劑，分3次服，連續(xù)服用2周。(3)治療結(jié)果60例患者中，治愈16，顯效22例，有效18例，無效4例。本治療總有效率為93.3%，療效較為滿意，說明本發(fā)明組方具有很好的開發(fā)價值。2、用于婦科生殖道腫瘤(1)一般資料本發(fā)明湯劑在民間進(jìn)行了試用，經(jīng)收集整理用該組方治療婦科生殖道腫瘤24例，其中最小年齡32歲，最大年齡65歲；發(fā)病時間最短l年，最長8年；其中子宮肌瘤10例，宮頸癌5例，盆腔炎性包塊9例。(2)治療方法本組24例均以本發(fā)明煎劑為主方。白英30g、白花蛇舌草30g、地稔24g、一點(diǎn)紅20g、地耳草10g、積雪草10g、一枝黃花10g、王瓜子10g、鬼針草10g。用法為水煎，每日1劑，分3次服，連續(xù)服用l個月。(3)治療結(jié)果24例患者中，治愈4，顯效7例，有效10例，無效3例。本治療總有效率為87.5%，療效較為滿意，說明本發(fā)明組方具有很好的開發(fā)價值。(二)制劑臨床應(yīng)用1、本發(fā)明藥物在婦科炎癥的臨床應(yīng)用1.1臨床資料臨床選擇確診為婦女生殖器官炎癥，又具有中醫(yī)婦科的帶下病、月經(jīng)失調(diào)、痛經(jīng)、癥瘕等病例。1.1.1病例情況觀察臨床100例患者，其中盆腔炎28例、附件炎18例、子宮內(nèi)膜炎12例、宮頸炎10例、宮旁組織炎10例、陰道炎22例；按中醫(yī)分型為濕熱內(nèi)侵型26例、濕毒瘀結(jié)型38例、肝經(jīng)濕熱型20例、肝腎兩虛型16例；患者最小20歲，最大65歲，2535歲有48例(占48%)，小于25歲有16例(占16%)，大于35歲有36例(占36%)，可見，婦女內(nèi)生殖器官炎癥多發(fā)病于2535歲之間。1.1.2病程最短1天，最長10年，幾個月至幾年占多數(shù)，病例中除44例未作過專門治療外，其余56例均作過治療，其中用西藥為主治療者和中藥治療為主者約各一半，部分人有效，但復(fù)發(fā)率高。1.1.3臨床癥狀I(lǐng)OO例患者均有明顯的臨床癥狀及體征。1.2診斷標(biāo)準(zhǔn)和中醫(yī)辯證分型1.2.1診斷標(biāo)準(zhǔn)(1)凡有赤白帶下量多，外陰瘙癢紅腫，下腹部一側(cè)或兩側(cè)疼痛，伴腰痛或腰骶痠墜痛等癥狀，且常在勞累或性交后及月經(jīng)前后加重；或月經(jīng)失調(diào)；或伴有繼發(fā)不孕史。(2)婦科檢査①附件炎一側(cè)或兩側(cè)附件增粗變厚，有觸痛。②宮旁組織炎雙側(cè)附件及子宮無異常，僅是子宮旁結(jié)締組織一側(cè)或二側(cè)增厚或條索狀增粗并有壓痛。③盆腔炎子宮位置多半是后位，活動受限或固定，兩側(cè)附件增粗或呈條索狀，有壓痛。④子宮內(nèi)膜炎有流產(chǎn)史或分娩史，檢査時子宮有觸痛，以及活動受限。⑤宮頸炎可見宮頸有亮紅色細(xì)顆粒糜爛區(qū)及頸管分泌膿性粘液樣白帶，有的則宮頸局部充血、肥大。⑥陰道炎鏡下可見少量上皮細(xì)胞外主要是膿細(xì)胞與雜菌。1.2.2中醫(yī)辯證分型(1)濕熱內(nèi)侵型本型具有下腹疼痛，或脹，或滿，帶下量多，色黃質(zhì)稠、有臭味，或月經(jīng)先期，量多色鮮紅、痛經(jīng)等、小便黃赤、或有發(fā)熱，舌質(zhì)紅苔膩黃，脈滑數(shù)。(2)濕毒瘀結(jié)型本型具有少腹及腰骶部疼痛而脹，少腹有包塊，帶下量多，色黃嗅穢或伴月經(jīng)量多，經(jīng)期延長，痛經(jīng)等，小便黃赤，舌質(zhì)紅苔黃厚膩，脈洪或滑數(shù)。(3)肝經(jīng)濕熱型本型具有少腹一側(cè)或兩側(cè)脹痛，日久不愈，時發(fā)時止，以月經(jīng)中期或月經(jīng)前期脹痛明顯，伴月經(jīng)先后不定期，量多少不一，經(jīng)前乳房脹痛等，脈弦數(shù)。(4)肝腎兩虛型本型具有腹痛腰酸，帶下質(zhì)稀色白、日久不愈，伴體弱氣短，頭暈神倦，納少便溏，小便清長，腰酸肢軟，脈沉弱。1.3治療方法口服本發(fā)明藥物膠囊，用法為一次24粒，一日3次。以服藥7日為一療程，必要時連服23個療程。1.4療效判斷標(biāo)準(zhǔn)1.4.1臨床治愈臨床癥狀全部消失，婦科盆腔檢査(如壓痛、附件增厚、子宮粘連固定，炎癥包塊)全部消失。1.4.2顯效臨床癥狀明顯改善，婦科盆腔檢査(如壓痛、附件增厚、子宮粘連固定，炎癥包塊)明顯改善或縮小。1.4.3有效臨床癥狀有改善，婦科盆腔檢査(如壓痛、附件增厚、子宮粘連固定，炎癥包塊)有所改善或縮小。1.4.4無效臨床癥狀與體征均無改變者。1.5治療結(jié)果結(jié)果痊愈24例，顯效38例，有效32例，無效6例，總有效率94.0%。表24本發(fā)明藥物膠棄臨床總療效結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage31</column></row><table>1.5.1中醫(yī)辨證分型與療效關(guān)系濕熱內(nèi)侵型26例痊愈6例，顯效11例，有效8例，無效1例，總有效率100%。濕毒瘀結(jié)型38例痊愈11例，顯效18例，有效9例，無效0例，總有效率100%。肝經(jīng)濕熱型20例痊愈5例，顯效7例，有效7例，無效1例，總有效率91.7%。肝腎兩虛型16例痊愈2例，顯效2例，有效8例，無效4例，總有效率87.5%。表25中醫(yī)分型療效結(jié)果<table>complextableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>1.5.2炎癥病種與療效的關(guān)系附件炎18例痊愈5例，顯效7例，有效5例，無效1例，總有效率94.4%。宮旁組織炎10例痊愈4例，顯效4例，有效2例，無效0例，總有效率100%。盆腔炎28例痊愈7例，顯效12例，有效8例，無效1例，總有效率96.4%。子宮內(nèi)膜炎12例:痊愈4例，顯效4例，有效4例，無效O例，總有效率100%。宮頸炎10例痊愈2例，顯效3例，有效4例，無效1例，總有效率90.0%。陰道炎22例痊愈2例，顯效8例，有效9例，無效3例，總有效率86.4%。表26病癥療效結(jié)果<table>complextableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>1.6不良反應(yīng)IOO例患者服藥期間均未發(fā)現(xiàn)有任何毒性反應(yīng)或副作用，說明本發(fā)明藥物膠囊為治療婦女生殖器官炎癥安全有效的藥物，安全無明顯毒副作用患者服藥期間均未發(fā)現(xiàn)有任何毒性反應(yīng)或副作用。2、本發(fā)明藥物在婦科生殖器管腫瘤的臨床應(yīng)用2.1臨床資料30例患者，年齡2651歲，平均34歲，未婚者6例，已婚者24例，病程最短半年，最長5年。2.2診斷標(biāo)準(zhǔn)參照《中藥治療子宮肌瘤的指導(dǎo)原則》，《婦產(chǎn)科學(xué)》第5版中有關(guān)女性生殖系統(tǒng)腫瘤及《中醫(yī)婦科學(xué)》第6版中癥瘕的診斷標(biāo)準(zhǔn)。2.2.1西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)綜合臨床癥狀、婦科檢査及兩次以上，B超臨床診斷為子宮壁間肌瘤或漿膜下肌瘤。2.2.2中醫(yī)辨證標(biāo)準(zhǔn)下腹部包塊，固定不移，小腹腰骶墜脹隱痛，白帶增多，色黃有異味，月經(jīng)量多或經(jīng)期延長，經(jīng)色鮮紅或暗紅，經(jīng)期腹痛加重，尿黃，舌質(zhì)暗紅，邊有瘀斑點(diǎn)，舌下經(jīng)絡(luò)增粗增長，苔白厚或黃膩，脈數(shù)或滑數(shù)。2.3治療方法口服本發(fā)明藥物膠囊，每次2粒，每天3次。以服藥30天為一療程，必要時連服23個療程。2.4觀察指標(biāo)2.4.1癥狀按積分法觀察小腹骶墜脹，小腹隱痛，月經(jīng)量多，經(jīng)期延長，白帶色黃，舌下經(jīng)絡(luò)等，分別于治療前后觀察癥狀的改變情況。2.4.2B超采用定人定機(jī)法于月經(jīng)干凈l周內(nèi)測定肌瘤大小和子宮體積，兩者均按不規(guī)則橢圓計(jì)算，多發(fā)性子宮肌瘤按多個肌瘤體積之和計(jì)算。2.4.3實(shí)驗(yàn)室檢査；治療前后測定血、尿常規(guī)，肝、腎功能，性激素，血液流變學(xué)，胰島素樣生長因子等指標(biāo)，測定時間均于月經(jīng)干凈后第35天進(jìn)行。2.4.4不良反應(yīng)觀察用藥期間患者的不良反應(yīng)及持續(xù)時間等。2.5、療效判定標(biāo)準(zhǔn)癥狀積分變化痊愈癥狀消失，月經(jīng)(量、周期)恢復(fù)正常顯效癥狀積分較治療前下降〉2/3;有效癥狀積分較治療前下降l/32/3;無效癥狀積分較治療前下降小于1/3瘤體大小變化痊愈B超檢査肌瘤消失，子宮大小恢復(fù)正常；顯效B超檢査肌瘤體積縮小l/2以上；有效B超檢査肌瘤體積縮小l/4l/2;無效B超檢査肌瘤體積縮小，小于1/4改善臨床癥狀采用癥狀積分法收集臨床癥狀觀察小腹墜脹，小腹隱痛，月經(jīng)量多，經(jīng)期延長，白帶色黃，舌下經(jīng)絡(luò)等的輕重程度，癥狀明顯且持續(xù)時間長，影響工作的計(jì)3分，持續(xù)時間短且不影響工作的計(jì)2分，癥狀較輕的計(jì)1分，觀察治療前后觀察組與對照組的癥狀改善情況。2.6治療結(jié)果結(jié)果治療30例，其中痊愈4例，顯效12例，有效10例，無效4例，總有效率86.7%。表27本發(fā)明藥物膠棄臨床總療效結(jié)巣<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>2.6.1中醫(yī)癥狀的改善較明顯。經(jīng)期延長9例，醛愈3例，顯效2例，有效3例，無效1例，總有效率88.9%;月經(jīng)量多12例，醛愈5例，顯效4例，有效1例，無效2例，總有效率83.3%;小腹墜脹5例，醛愈2例，顯效l例，有效1例，無效1例，總有效率80.0%;小腹隱痛12例，醛愈2例，顯效4例，有效2例，無效4例，總有效率66.7%;白帶色黃20例，醛愈9例，顯效6例，有效2例，無效3例，總有效率85.0%;舌下經(jīng)絡(luò)19例，醛愈7例，顯效5例，有效3例，無效4例，總有效率79.0%;表28冶療后中醫(yī)癥狀療效比較<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>2.6.2對子宮肌瘤的療效分析在月經(jīng)干凈l周內(nèi)檢査肌瘤大小和子宮體體積，結(jié)果表明本品對縮小肌瘤體積有明顯作用。治療30例，其中痊愈4例，顯效12例，有效10例，無效4例，總有效率86.7%。表29治療前后瘤體大小變化<table>tableseeoriginaldocumentpage34</column></row><table>2.6.3對血流變學(xué)的影響血流的緩慢、血液的濃、粘、聚、凝的狀態(tài)是導(dǎo)致血管內(nèi)血栓形成的主要因素。中醫(yī)認(rèn)為濕熱、氣滯均可導(dǎo)致血瘀。本品可改善子宮肌瘤濕熱瘀結(jié)型的微循環(huán)，改善血流變學(xué)，緩解血液粘聚狀態(tài)，從而使肌瘤縮小。表30治療前后血流變指標(biāo)變化<table>tableseeoriginaldocumentpage35</column></row><table>2.7不良反應(yīng)30例患者服藥期間均未發(fā)現(xiàn)有任何毒性反應(yīng)或副作用，說明本發(fā)明藥物膠囊為治療婦女生殖器官炎癥安全有效的藥物，安全無明顯毒副作用患者服藥期間均未發(fā)現(xiàn)有任何毒性反應(yīng)或副作用。3、結(jié)論3.1本發(fā)明藥物以苗族民間草藥白英、白花蛇舌草等為主藥，并運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)手段提取精制而成。具有清熱解毒、化瘀散結(jié)，消癰止痛功效。3.2藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)證明本藥物對女性生殖道常見致病菌，如金葡菌、大腸桿菌、銅綠假單胞菌、乙型鏈球菌、新型念珠菌、白色念珠菌等有抗菌作用。臨床對急性膀胱類、尿路感染、急慢性腎盂腎炎、尿道炎、前列腺炎有較好的治療效果。3.3本藥湯劑用于60例尿婦科炎癥患者治療后，治愈顯效共38例，占63.3%;有效18例，占30%，總有效率達(dá)93.3%。說明本發(fā)明藥物是治療婦科炎癥有良好效果的藥物。3.4本藥湯劑用于24例婦科生殖道腫瘤患者治療后，治愈顯效共ll例，占45.8%;有效IO例，占41.7%，總有效率達(dá)87.5%。說明本發(fā)明藥物是治療婦科生殖道腫瘤有良好效果的藥物。3.5用本發(fā)明藥物(膠囊)治療100例婦科炎癥患者，結(jié)果痊愈顯效共62例，占62.0%，有效32例，占32.0%，總有效率94.0%。說明本發(fā)明藥物對治療婦科炎癥有很好的作用，與湯劑比較，臨床療效相近，無明顯差異。3.6用本發(fā)明藥物(膠囊)治療30例婦科子宮肌瘤患者，結(jié)果痊愈顯效共16例，占53.3%，有效10例，占33.3%，總有效率86.7%。說明本發(fā)明藥物對治療婦科子宮肌瘤有很好的作用，與湯劑比較，臨床療效相近，無明顯差異。3.7本藥物在治療214例患者中，均無不良反應(yīng)發(fā)生，說明本藥物是安全的。3.8本發(fā)明藥物是治療婦科科生殖系統(tǒng)炎癥及尿腫瘤的有效藥物，尤其對婦女盆腔炎、附件炎、子宮內(nèi)膜炎、宮旁組織炎、子宮肌瘤以及盆腔炎性包塊療效更佳，同時對宮頸炎、陰道炎及卵巢囊腫、宮頸癌等亦有一定療效，而且服用安全，無毒副作用，值得推廣運(yùn)用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明藥物具有清熱解毒、化瘀散結(jié)，消癰止痛的功效，不僅對濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)所致的婦科炎癥，子宮肌瘤，宮頸癌，卵巢囊腫，盆腔炎性包塊等有良好的療效，而且可防止其反復(fù)發(fā)作，無明顯毒副作用，不會產(chǎn)生耐藥性，是一種安全、有效、質(zhì)量可控的中藥新藥，具有良好的社會價值和經(jīng)濟(jì)價值。具體實(shí)施例方式實(shí)施例l:白英300g、白花蛇舌草300g、地稔240g、一點(diǎn)紅200g、地耳草100g、積雪草100g、一枝黃花100g、王瓜子100g、鬼針草100g。取以上九味藥材，力Q2倍量水煎煮2次，每次煎煮2小時，合并藥液，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入淀粉100g，混勻，干燥(60°C)，粉碎，過40目篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得膠囊劑。規(guī)格每粒裝0.3g;用法用量口服，一次24粒，一日3次。實(shí)施例2:白英450g、白花蛇舌草450g、地稔360g。取以上三味藥材，加水煎煮3次，每次煎煮2小時，合并藥液，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入淀粉100g和糊精50g，混勻，制粒，6(TC干燥，整粒，加入硬脂酸鎂5g，混勻，壓制成1000片，包薄膜衣，即得片劑。規(guī)格每片重0.3g;用法用量口服，一次24片，一日3次。實(shí)施例3:白英300g、白花蛇舌草300g、地稔240g、地耳草100g、一點(diǎn)紅250g、積雪草100g。取以上六昧藥材，加水煎煮4次，每次煎煮l小時，合并藥液，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入糊精850g(或糊精250g、蔗糖600g)，混勻，制成顆粒1000g，干燥，即得顆粒劑。規(guī)格每袋裝5g;用法用量口服，一次1袋，一日3次。實(shí)施例4:白英400g、白花蛇舌草400g、地稔240g、一點(diǎn)紅100g、地耳草80g、積雪草80g、一枝黃花80g、王瓜子80g、鬼針草80g。取以上九味藥材，加水煎煮3小時，藥液靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，干燥(60°C)，粉碎，過120目篩，得浸膏粉。另取大豆油144g和蜂蠟6g，于8(TC加熱熔融，冷至室溫后，加入上述浸膏粉，經(jīng)膠體磨混合均勻，灌裝，制成1000粒軟膠囊，定形，干燥，即得本發(fā)明的軟膠囊劑。規(guī)格每粒裝0.3g;用法用量口服，一次24粒，一日3次。實(shí)施例5:白英150g、白花蛇舌草150g、地稔120g、地耳草100g、一點(diǎn)紅100g、積雪草100g。取以上六味藥材，加水煎煮3次，每次煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)50%，搖勻，靜置24小時，濾過，濾液回收乙醇并濃縮至約900ml，濾過，加入單糖漿100g、阿司帕坦lg、苯甲酸鈉2g、香精2ml，加水至1000ml，攪勻，濾過，灌裝，即得本發(fā)明口服劑。規(guī)格每瓶裝10ml;用法用量口服，一次10ml，一日3次。實(shí)施例6:白英400g、白花蛇舌草400g、地稔460g。取以上三味藥材，加水煎煮2次，每次煎煮3小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入淀粉150g，混勻，真空(60°C)干燥，粉碎，過40目篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得本發(fā)明膠囊劑。規(guī)格每粒裝0.3g;用法用量口服，一次24粒，一日3次。實(shí)施例7:白英35g、白花蛇舌草35g、地稔14g取以上三味藥材，按常規(guī)方法加水煎成湯劑服用。用法用量每日1劑，分3次服。實(shí)施例8:白英20g、白花蛇舌草20g、地稔18g、一點(diǎn)紅15g、地耳草10g、積雪草10g。取以上六味藥材，按常規(guī)方法加水煎成湯劑服用。用法用量每日1劑，分3次服。實(shí)施例9:白英15g、白花蛇舌草15g、地稔12g、一點(diǎn)紅10g、地耳草10g、積雪草10g、一枝黃花15g、王瓜子10g、鬼針草10g。取以上九味藥材，按常規(guī)方法加水煎成湯劑服用。用法用量每日1劑，分3次服。實(shí)施例10:白英120g、白花蛇舌草120g、地稔96g取以上三味藥材，加水煎煮3次，每次煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)60%，搖勻，靜置48小時，取上清液回收乙醇并濃縮至適量，冷卻至7(TC，備用；另取聚乙二醇(6000)800g加熱熔化，冷卻至7(TC。將上述藥液緩緩加入聚乙二醇(6000)中，混勻，滴入二甲基硅油中成型，除去表面油跡，制成1000粒，即得本發(fā)明滴丸劑。規(guī)格每丸重50mg;用法用量口服，一次10粒，一日3次。實(shí)施例ll:白英360g、白花蛇舌草360g、地稔288g、一點(diǎn)紅240g、地耳草120g、積雪草120g、一枝黃花120g、王瓜子120g、鬼針草120g。取以上九味藥材，加水煎煮2次，每次煎煮2小時，合并藥液，靜置24小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入淀粉100g，混勻，干燥(60°C)，粉碎，過40目篩，裝入膠囊，制成1000粒，即得本發(fā)明膠囊劑。規(guī)格每粒裝0.4g;用法用量口服，一次3粒，一日3次。實(shí)施例12:白英600g、白花蛇舌草600g、地稔480g、一點(diǎn)紅400g、地耳草200g、積雪草200g、一枝黃花200g、王瓜子200g、鬼針草200g。取以上九味藥材，加水煎煮3次，每次煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，加入乙醇使含醇量達(dá)60%，搖勻，靜置48小時，濾過，取上清液回收乙醇并濃縮至相對密度為1.25(60°C)的浸膏，干燥(60°C)，粉碎，過120目篩，得浸膏粉。另取大豆油290g和蜂蠟10g，于8(TC加熱熔融，冷至室溫后，加入上述浸膏粉，經(jīng)膠體磨混合均勻，灌裝，制成1000粒軟膠囊，定形，干燥，即得本發(fā)明軟膠囊劑。規(guī)格每粒裝0.5g;用法用量口服，一次2粒，一日3次。權(quán)利要求1.一種治療婦科炎癥和子宮肌瘤的藥物制劑，其特征在于它主要是由下列重量比例的原料藥制成白英20％～50％、白花蛇舌草20％～50％和地稔15～40％。全文摘要本發(fā)明提供了一種治療婦科炎癥及腫瘤的苗藥組合及藥物制備方法，它主要是由白英、白花蛇舌草、地稔為原料藥制成的，或者與地耳草、一點(diǎn)紅、積雪草、一枝黃花、王瓜子、鬼針草藥材中的部分或全部配伍使用。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明藥物具有清熱解毒、化瘀散結(jié)，消癰止痛之功效，對濕熱濕毒、痰濕瘀結(jié)所致的婦科炎癥，子宮肌瘤，宮頸癌，卵巢囊腫，盆腔炎性包塊等有很好療效，而且無明顯毒副作用，不會產(chǎn)生耐藥性，是一種安全、有效、質(zhì)量可控的中藥新藥，值得臨床推廣應(yīng)用，具有良好的社會價值和經(jīng)濟(jì)價值。文檔編號A61K36/74GK101167842SQ20071020237公開日2008年4月30日申請日期2007年11月5日優(yōu)先權(quán)日2007年11月5日發(fā)明者強(qiáng)周,李世祿,王井洪,王利平,皮海燕申請人:貴陽春科藥業(yè)技術(shù)研發(fā)有限公司