專利名稱：：宣肺平喘的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種用于宣肺，平喘的中藥組合物及其制備方法和質(zhì)量控制方法，尤其涉及一種用于宣肺，平喘的膠囊劑及其制備方法和質(zhì)量控制方法，屬于中藥
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：慢性阻塞性肺疾病是一種內(nèi)科常見病、多發(fā)病，是一種重要的慢性呼吸系統(tǒng)疾病，患病患者數(shù)多，死率高，由于其病情遷延，嚴(yán)重影響患者的勞動能力和生活質(zhì)量，而受到世界各國的普遍重視。目前，醫(yī)學(xué)界尚無辦法有效地控制慢性阻塞性肺疾病病情的發(fā)展，尋求防止慢性阻塞性肺疾病的有效方法是國內(nèi)外醫(yī)學(xué)界急待解決的課題。慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，目前普遍認(rèn)為慢性阻塞性肺疾病是以氣道、肺實質(zhì)和肺血管的慢性炎癥為特征，在肺的不同部位有肺泡巨噬細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞和中性粒細(xì)胞增加。激活的炎癥細(xì)胞釋放多種介質(zhì)，破壞肺的結(jié)構(gòu)和(或)促進(jìn)中性粒細(xì)胞炎癥反應(yīng)。吸入有害顆粒或氣體可導(dǎo)致肺部炎癥;吸煙可誘導(dǎo)炎癥并直接損害肺臟。除炎癥外，肺部的蛋白酶和抗蛋白酶系統(tǒng)失衡，以及氧化抗氧化失衡也起了重要的作用。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對于慢性阻塞性肺疾病是通過藥物治療，預(yù)防和治療并發(fā)癥，改善癥狀，主要是呼吸困難，提高生活質(zhì)量，去除慢性阻塞性肺疾病急性加重的誘因，囑咐患者戒煙。由于該病患者機(jī)體免疫力降低和呼吸防御機(jī)制受損，容易出現(xiàn)呼吸道感染，反復(fù)感染引起支氣管黏膜充血水腫，腺體增生肥大，分泌功能亢進(jìn)，管壁增厚、狹窄，加重氣流阻塞。感染的病原體常見為細(xì)菌、病毒、支原體等。西醫(yī)藥針對菌主要采用抗菌藥物、激素，而對于病毒所致感染尚無有效藥物，何況抗菌藥物、激素又具有一定的毒副作用，另外，即使急性期經(jīng)治療得到緩解，仍不能有效的控制其復(fù)發(fā)。因此，為了更好的緩解慢性阻塞性肺疾病發(fā)展，控制其復(fù)發(fā)，提高生存質(zhì)量，使慢性阻塞性肺疾病治療更加規(guī)范化，尋找安全、有效的治療慢性阻塞性肺疾病患者的中藥方藥十分必要。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明目的在于提供一種具有宣肺，平喘作用的中藥組合物；本發(fā)明目的還在于提供一種具有宣肺，平喘作用的中藥組合物制備方法；本發(fā)明目的還在于提供一種具有宣肺，平喘作用的中藥組合物的質(zhì)量控制方法。本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的本發(fā)明所述的具有宣肺，平喘作用的中藥組合物是由如下重量比的原料藥制成的麻黃3000-4000重量份、生姜2000-3000重量份、桂枝2000-3000重量份、苦杏仁1000-1500重量份、五味子(制)250-500重量份、炎甘草80-160重量份上述原料優(yōu)選配比為麻黃3000-3200重量份、生姜2800-3000重量份、桂枝2800-3000重量份、苦杏仁1400-1500重量份、五味子(制)300-400重量份、炙甘草100-120重量份上述原料優(yōu)選配比為麻黃3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g本發(fā)明所述中藥組合物的制備方法包括以下步驟以上藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，采用逆流循環(huán)提取工藝加水煎煮1-3次，每次2-4小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置12-36小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(eo7crc)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.010.03kpa/cm2(103°C)，熱壓蒸煮20-40分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品。將上述稠膏與杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)制成臨床接受的制劑，如膠囊劑、片劑、顆粒劑、軟膠囊、丸劑。本發(fā)明所述中藥組合物膠囊劑的制備方法為取原料藥麻黃3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g其特征是該方法包括以下步驟以上藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，采用逆流循環(huán)提取工藝加水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(607(TC)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.010.03kpa/cm2(103°C)，熱壓蒸煮30分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品。將上述稠膏與杏仁炮制品真空干燥，粉碎，加糊精適量，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種(1)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材9-llg，加濃氨試液l-3ml，再加三氯甲垸30-50ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35y1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一濃氨試液(15-25:3-10:0.5-2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105t:加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點。(2)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材200-220g，加乙醚20-40ml，超聲20-40分鐘(功率300W,頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取干姜對照藥材lg，加水80-100ml煎煮1小時，濾過，濾液濃縮至20-30ml，加等體積石油醚(609CTC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(609(TC)一乙酸乙酯(3-7:0.5-2)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材200-220g，加石油醚(6090'C)40-60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，殘渣加甲醇40-60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30-50ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2-4次，每次10-30m1,合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2-4次，每次20-40ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一水(10-15:5-10:1-3)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定(1)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)一乙腈(90-100:0-10)為流動相；檢測波長為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于2500。對照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解制成每lml含50ug的溶液，作為對照品溶液，即得。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材3-5g，精密稱定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的鹽酸溶液lml，再加甲醇至刻度，塞緊，超聲處理20-40分鐘，放冷，微孔濾膜(0.45Mm)過濾，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5ul10ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明藥物日用計量含麻黃以鹽酸麻黃堿(d。HwNOHC1)量計，不得少于8.Omg。(2)照高效液相色譜法(附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-甲醇-O.1%磷酸(35-40:15-20:40-50)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品1.5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻—，即得(每lml含五味子醇甲0.03mg)。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材100-110g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)10-30min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mm)濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試溶液各10ixl，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明藥物含五味子醇甲(C24H3207)不得少于0.40%。本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別方法和/或含量測定中的一種或幾種(1)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材10.8g，加濃氨試液2ml，再加三氯甲烷40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取鹽酸麻黃堿，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一濃氨試液(20:5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105t加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點。(2)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(609(TC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15ixl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(609(TC)—乙酸乙酯(5:1)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。(3)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加石油醚(6090。C)50ml，加熱回流1小時，濾過，殘渣加甲醇50ml，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各3~5"1，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一水(13:7:2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。含量測定(1)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)一乙腈(97:3)為流動相；檢測波長為210nm。理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于2500。對照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解制成每lml含50ug的溶液，作為對照品溶液，即得。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材4.3g，精密稱定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的鹽酸溶液lml，再加甲醇至刻度，塞緊，超聲處理30分鐘，放冷，微孔濾膜(0.45Mm)過濾，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5ul10wl，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明藥物日用計量含麻黃以鹽酸麻黃堿(d。HwNOHC1)量計，不得少于8.Omg。(2)照高效液相色譜法(附錄VID)測定。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈-甲醇-O.1%磷酸(39:16.7:44.3)為流動相；檢測波長為250nm。理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000。對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品1.5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml含五味子醇甲0.03mg)。供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材108.lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)20min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mm)濾過，取續(xù)濾液，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液與供試溶液各10nl，注入液相色譜儀，測定，即得。本發(fā)明藥物含五味子醇甲(C24H320不得少于0.40%。具體實施方式下述實驗例和實施例進(jìn)一步說明但不下限于本發(fā)明實驗例l.本發(fā)明中藥組和物膠囊制備工藝的優(yōu)選實驗1.水提加水量的篩選配置5份藥材每份648.8g，分三組進(jìn)行試驗，第一組加水量6倍量、4倍量，第二組加水量8倍量、6倍量，第三組加水量10倍量、8倍量，第四組逆流循環(huán)提取工藝加水2倍量，第五組逆流循環(huán)提取工藝加水4倍量，第六組逆流循環(huán)提取工藝加水6倍量，以水提后出清膏量為指標(biāo)，確定加水量，結(jié)果見表l:表l:水提加水量<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>以出膏量為指標(biāo)，可以看出逆流循環(huán)提取工藝的用水量明顯減少，出膏率得以提高，并且可以減少濃縮時間，生產(chǎn)中選用逆流循環(huán)提取工藝加水4倍量。2、醇沉加醇量的篩選配置3份藥材每份648.8g，分三組進(jìn)行試驗，第一組加乙醇量0.5倍量，第二組加乙醇量1倍量，第三組加乙醇量2倍量，以醇沉后出稠膏量為指標(biāo)，確定加醇量，結(jié)果見表2:_表2:醇沉加醇量_<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>以出膏量為指標(biāo)，可以看出加乙醇l倍量出膏量較好，生產(chǎn)中選用加乙醇量l倍量。表3:主要技術(shù)參數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>3、中試表4:批中試生產(chǎn)數(shù)據(jù)<table>tableseeoriginaldocumentpage13</column></row><table>實驗例2.本發(fā)明中藥組和物中苦杏仁的炮制工藝的優(yōu)選實驗中藥苦杏仁含有止咳成份苦杏仁苷，在適當(dāng)條件下，如受潮、煎煮和水浸等，其本身所含有的苦杏仁苷酶易使苦杏仁苷分解，從而降低甚至失去藥效。因此，苦杏仁需經(jīng)炮制達(dá)到滅酶保苷的目的。由于目前傳統(tǒng)的炮制方法:水煎煮法和清炒法滅酶保苷效果不佳，且質(zhì)量難于控制，故本文中引入蒸汽熱壓法與傳統(tǒng)方法進(jìn)行對比實驗，以探索更好的炮制方法。1儀器和試藥1.1儀器:YXQ.GY22.600型臥式圓形壓力蒸汽消毒器(衡陽醫(yī)療器械廠)。1.2試藥:硝酸銀為AR級;碘化鉀，濃氨溶液均為CP級;苦杏仁生品及制品。2方法和結(jié)果2.l苦杏仁中苦杏仁苷的含量測定。取苦杏仁(生品)粗粉約15g，精密稱重，置凱氏燒瓶中，加水150ml，立即密塞，置37。C水浴中保溫2h，連接冷凝管，通水蒸汽蒸餾，餾出液導(dǎo)入水10ml和氨試液2ml的吸收液中，接受瓶置冰浴中冷卻，至餾出液達(dá)60ml時停止蒸餾，餾出液中加碘化鉀試液(16.5%)21!11,用硝酸銀液(0.1mol/L)緩緩滴定，至溶液顯出的黃色渾濁不消失。lml硝酸銀液(O.lmol/L)相當(dāng)于91.48mg苦杏仁苷(C2。H27N0u)。結(jié)果見表5。表5苦杏仁中苦杏仁苷含量測定<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>*硝酸銀滴定液為0.1008mol/L由表1可知，生苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量為4.343%。2.2傳統(tǒng)炮制法制品中苦杏仁苷和含量測定分別將水煎煮法制和清炒法制苦杏仁碾成粗粉，各取粗粉約15g。照上述方法進(jìn)行含量測定。結(jié)果見表6。表6苦杏仁傳統(tǒng)炮制法苦杏仁苷測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由表2可知，清炒法制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量為3.061%;水煎煮法制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量為2.989%。2.3蒸汽熱壓法制品中苦杏仁苷的含量測定苦杏仁200g凈選后漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.03kpa/Cm2(103°C)，熱壓蒸煮30分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干。并按上述方法測定苦杏仁苷的含量，結(jié)果見表7。表7蒸汽熱壓法炮制苦杏仁后苦杏仁苷測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage15</column></row><table>由表3可知，蒸汽熱壓法炮制苦杏仁中苦杏仁苷的平均含量為4.059%。3結(jié)果3.1苦杏仁目前常用的炮制方法為水煎煮法及清炒法，該兩種方法簡便易行，適用性強，但滅酶效果差，殘酶還能繼續(xù)分解苷。水煎煮法炮制苦杏仁投入沸水中，造成水溫下降，嚴(yán)重者可降至7(TC，這為酶解作用提供了機(jī)會，用水量大，部分苷溶于水而損失。清炒法要炒至全黃，才能達(dá)到滅酶效果，且火候溫度不易控制，制品外觀變成黃色，影響藥品質(zhì)量。由于操作時人為因素(溫度、時間由人為判定)影響較大，品質(zhì)難于均一。3.2蒸汽熱壓滅酶法炮制苦杏仁，溫度較水煎煮法高，且不用水浸泡，滅酶效果好，苷流失極少。根據(jù)實驗結(jié)果，熱壓(103。C)滅酶30min，滅酶率可達(dá)97.5%。實驗例3.藥效學(xué)實驗為了證明本發(fā)明的療效，我們進(jìn)行了以下藥效學(xué)實驗。以下藥效試驗所用本發(fā)明藥物組為依實施例4制備的膠囊劑；陽性對照藥以下方法制得的顆粒劑麻黃1200g、生姜1200g、五味子(制)150g、炙甘草45g蔗糖627g、糊精260g制成1000g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，減壓回收乙醇并濃縮至相對密度為1.34~1.40(6(T7(TC)的稠膏。加蔗糖、糊精，混勻，制成顆粒，干燥，即得。1材料1.1試劑氨水、拘椽酸、苯酚紅、磷酸組織胺、氯化乙酰膽堿、磷酸組織胺。1.2儀器721分光光度計，上海第三分析儀器廠出品。1.3動物昆明種小鼠，雌雄各半，體質(zhì)量18-22g;大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量200-250g。豚鼠150200g，罕^兼用。2鎮(zhèn)咳作用對小鼠氨水所致咳嗽的影響。小鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組，按下表劑量灌胃給藥，第1天上、下午各1次，第2天給藥后30min時將小鼠置于5000ml玻璃鐘罩內(nèi)，恒壓將氨水(28%)噴人鐘罩，噴霧5s，觀察小鼠的咳嗽潛伏期及咳嗽次數(shù)(3min)。結(jié)果見表8。表8本發(fā)明藥物組對小鼠因氨水所致咳嗽的影響(x士s)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>結(jié)果本發(fā)明藥物組可使小鼠氨水所致咳嗽潛伏期延長，3min咳嗽次數(shù)減少。3祛痰作用對小鼠呼吸道酚紅排痰量的影響，小鼠48只，雌雄各半，隨機(jī)分成4組，按表l的不同劑量灌胃藥，第1天上、下午各1次，第2天給完藥后0.5h腹腔注射酚紅溶液0.5ml/只。30min后，脫椎處死，從甲狀軟骨處插人氣管內(nèi)約0.3cm，用lml注射器吸取NaHC03溶液0.5ml推注入氣管內(nèi)，反復(fù)連續(xù)推抽3次，最后用注射器將灌洗液抽出注人試管中，按上述方法操作3次，沖洗9次，共吸取碳酸鈉溶液1.5ml，合并洗出液約1.2-1.5ml，離心后取上清液，721分光光度計測氣管酚紅分泌量，結(jié)果見表9。表9本發(fā)明藥物組對小鼠呼吸道酚紅排痰量的影響(x土s)<table>tableseeoriginaldocumentpage16</column></row><table>注與生理鹽水組相比較*P〈0.05，**P<0.01，與陽性對照組比較※P〈0.05。結(jié)果本發(fā)明藥物組可使小鼠呼吸道酚紅排痰量增加。4平喘作用4.2本發(fā)明藥物組對豚鼠引喘潛伏期的影響豚鼠哮喘模型制備按噴霧致喘法，選用幼年豚鼠，體重〈200g，置入20cmX20cmX150cm的有機(jī)玻璃箱內(nèi)，超聲霧化噴入2%乙酰膽堿和0.2%磷酸組胺混合液155，進(jìn)行篩選，引喘潛伏期超過120s者不予選用。次日，豚鼠隨機(jī)分組，用藥組經(jīng)口給予本發(fā)明藥物組和陽性對照組(按生藥量計算，下同)，陰性對照組給予等容積的生理鹽水，氨茶堿組腹腔注射氨茶堿(25mg'kg—》。用藥后lh超聲霧化噴入2%乙酰膽堿和0.2%磷酸組胺混合液15s測定引喘潛伏期(即從噴霧開始到哮喘發(fā)作，呼吸困難，直至抽搐倒地的時間)，結(jié)果見表io。表IO本發(fā)明藥物組對豚鼠哮喘潛伏期的影響(x士s，n=8)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>與生理鹽水組比較"P〈0.01結(jié)果本發(fā)明藥物組可使豚鼠哮喘潛伏期明顯延長，對組織胺乙酰膽堿混合刺激所致哮喘有對抗作用。4.3對豚鼠離體氣管平滑肌條收縮的影響豚鼠離體氣管平滑肌條收縮試驗制備豚鼠離體氣管條，置于盛有充氧克-亨氏液離體器官測定浴槽內(nèi)(37'C)，負(fù)荷2.0g平衡，分別注入膽堿或組胺(終濃度分別為2.5X1(T和5X10—7mmolL—》，記錄最大收縮高度，在此基礎(chǔ)上分別加入本發(fā)明藥物組和陽性對照組、氨茶堿組，平衡后記錄收縮高度，結(jié)果見表ll。在此基礎(chǔ)上，按一定的比例分設(shè)4個劑量組，記錄其收縮高度。以口服液的對數(shù)劑量與其對應(yīng)的收縮抑制率進(jìn)行回歸計算，得出其IC50分別為0.095g*L—'(膽堿，n=4，r=0.989)和0.345gL—、組胺，n=4，r=0.965)。表ll本發(fā)明藥物組對豚鼠離體氣管平滑肌收縮的影響(x土s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table>乙酰膽堿終濃度2.5X10—7ramolL—1;組胺終濃度5X10—7ramolL—';與生理鹽水組比較本P〈0.05，**P〈0.01結(jié)果乙酰膽堿或組織胺可引發(fā)氣管平滑肌條強烈收縮，而本發(fā)明藥物組對痙攣的氣管平滑肌具有明顯的松弛作用。4.4對豚鼠離體回腸平滑肌條收縮的影響豚鼠離體回腸平滑肌條收縮試驗制備豚鼠離體回腸2cm，置于盛有充氧臺氏液器官測定浴槽內(nèi)(37'C)，描記其收縮曲線，待腸管自發(fā)舒縮穩(wěn)定平衡后開始實驗，分別注入膽堿或組胺(終濃度均為5X10—7mm0l'r1)，記錄最大收縮高度，在此基礎(chǔ)上分別加入本發(fā)明藥物組和陽性對照組、阿托品組，平衡后記錄收縮高度，結(jié)果見表12。在此基礎(chǔ)上，按一定的比例分設(shè)4個劑量組，記錄其收縮高度，以本發(fā)明藥物組的對數(shù)劑量和其相對應(yīng)的收縮抑制率進(jìn)行回歸計算，得出其IC50分別為0.183gL—、膽堿，n=4，r=0.982)和0.249gL—、組胺，n=4，r=0.948)。表12本發(fā)明藥物組對豚鼠離體回腸平滑肌收縮的影響(x土s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>乙酰膽堿終濃度5X10—7mmol!/、組胺終濃度5X10—7mmol*L—、與對照組比較**P〈0.01結(jié)果本發(fā)明藥物組可對抗乙酰膽堿或組織胺所致離體回腸平滑肌的收縮作用，具有明顯的舒張作用。4.5對乙酰膽堿致豚鼠離體氣管容積的影響豚鼠離體氣管容積試驗仿離體完整氣管毛細(xì)管法，擊昏豚鼠，制備離體完整氣管標(biāo)本，置于恒溫(37'C)的充氧克-亨氏液的浴槽中，觀察連接0.1cm毛細(xì)管內(nèi)液面高度。注入膽堿后，氣管收縮，氣管容積減少，液面抬高，再注入本發(fā)明藥物組或生理鹽水，記錄給藥后5min的液面高度差，結(jié)果見表13。表13本發(fā)明藥物組對乙酰膽堿致豚鼠離體氣管容積的影響(x士s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>乙酰膽堿終濃度2.5X10—7ramolL—';與對照組比較*P〈0.05，**P〈0.01結(jié)果乙酰膽堿使氣管平滑肌收縮，容積減小，本發(fā)明藥物組可使抬高的液面下降，有對抗乙酰膽堿所致豚鼠離體氣管容積縮小的顯著作用。4.6對離體豚鼠肺支氣管灌流的影響離體豚鼠肺支氣管灌流試驗豚鼠擊暈，頸動脈放血，分離氣管并連同心肺一并取出，以37'C，予含氧樂氏液進(jìn)行灌流，通過灌流瓶高度調(diào)節(jié)灌流量(10ml'rain—'左右)。待灌流量穩(wěn)定后，注入一定量的乙酰膽堿溶液(3X10—7mmol*L—0，灌流量明顯減少，再分別注入一定量的本發(fā)明藥物組(O.16g*L—》和氨茶堿(0.025g，L—')，觀察灌流量的變化，結(jié)果見表14。表14本發(fā)明藥物組對豚鼠離體肺支氣管灌流的影響(x士s，n=6)<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table>膽堿濃度3X10—7mmol'L—1;本發(fā)明藥物組濃度:0.16g'ml—1;氨茶堿濃度0.025g'ml—1;與對照組+膽堿組比較**P〈0.01。結(jié)果加入膽堿后，因氣管和支氣管平滑肌收縮離體肺支氣管灌流量明顯減少，本發(fā)明藥物組具有明顯對抗乙酰膽堿收縮而增加肺支氣管灌流量的作用。實驗例4鑒別試驗篩選一、干姜鑒別試驗篩選供試品溶液的制備供試品溶液一取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；供試品溶液二取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加石油醚(6090°C)50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；供試品溶液三取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；供試品溶液四取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加石油醚(6090°C)30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(6090。C)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15Wl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(609(TC)—乙酸乙酯(5:1)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，結(jié)果見表15。表15供試品溶液的篩選結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>對照藥材溶液的制備-對照藥材溶液一干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(609(TC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；對照藥材溶液二干姜對照藥材lg，加石油醚(6090'C)50ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液一、二各5Pl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(609(TC)—乙酸乙酯(5:1)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，結(jié)果見表16。表16對照藥材溶液的篩選結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table>展開劑的選擇展開劑一石油醚(609(TC)一乙酸乙酯(5:1)展開劑二石油醚(6090。C)—乙酸乙酯(5:1)展開劑三環(huán)己烷一乙醚(1:1)展開劑四環(huán)己垸一乙醚(i:i)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮1小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(6090。C)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，在四塊硅膠G薄層板上，點對照藥材溶液5pl、供試品溶液15wl，分別以展開劑一、二、三、四，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，結(jié)果見表17。表17展開劑的篩選結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>二、甘草鑒別試驗篩選，展開劑的選擇展開劑一三氯甲垸一甲醇一水(13:7:2)的下層溶液；展開劑二正丁醇-3mol/L氨溶液-乙醇(5:2:1);展開劑三三氯甲烷一甲醇一水(13:7:2)的上層溶液。取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g,加石油醚(609(TC)50ml，加熱回流1小時，濾過，殘渣加甲醇50ml，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液。另取甘草對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，取以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板兩個，吸取上述兩種溶液各3、!xl，分別點于薄層板上，分別以展開劑一、二、三，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點，結(jié)果見表18。表18展開劑的篩選結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table>實驗例4麻黃含量測定方法學(xué)考察檢測儀器島津公司SPD-10ATvp型高效液相色譜儀色譜柱迪瑪公司(ZorbaxC184.6X250mm，5Mm)流動相0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)_乙腈(97:3)檢測波長210nm柱溫室溫流速1.000ml/min對照品來源鹽酸麻黃堿對照品，購于中國藥品生物制品檢定所測定方法取制備樣品液；并制備缺麻黃的空白制劑，制備陰性對照液。用微孔濾膜(0.45Mrn)過濾，分別精密吸取陰性對照液、對照品溶液與供試品溶液各510W，注入液相色譜儀，測定，即得。l.含量測定方法考察(1)空白試驗空白溶液的制備是取缺麻黃的群藥，按工藝制成空白制劑，再按供試品溶液制備方法制備，上述色譜條件測定，結(jié)果空白溶液在與鹽酸麻黃堿對照品溶液相同保留時間處無色譜峰，故認(rèn)為無干擾。(2)穩(wěn)定性試驗取供試品溶液，分別于配制后0、2、4、6、12、24小時，依法測定，注射相同體積，結(jié)果見表19。表19穩(wěn)定性試驗結(jié)果時間(hr)02461224峰面積407855412587408692414970408236406238RSD(%)0.81結(jié)果表明，鹽酸麻黃堿在24小時內(nèi)基本穩(wěn)定。(3)線性關(guān)系考察取對照品溶液(51.28Pg/ml)搖勻，分別精密吸取2、4、6、8、10W注入高效液相色譜儀，測定峰面積，結(jié)果見表20，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果表明鹽酸麻黃堿在0.103化0.513Pg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，其回歸方程為Y=1942305X+23805(r=0.9995)。表20線性關(guān)系考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>(4)精密度試驗精密吸取鹽酸麻黃堿對照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣5次，每次5W，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差<2%，結(jié)果見表21:表21精密度試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>峰面積529750530128528650532047528320RSD(%)一一:■■■■■=—.，，j二28，—，_.■，—.................................................................(5)重現(xiàn)性試驗按正文方法，取小試同一批樣品5份，對每份進(jìn)行測定，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差〈2%，結(jié)果見表22:表22重現(xiàn)性試驗結(jié)果次數(shù)—1234^含量(mg/g)9.799.869.659.729.57平均含量(mg/g)9.72RSD(%)1.17(6)回收率試驗稱取己知含量的小試樣品0.2g，精密稱定，精密加入鹽酸麻黃堿對照品溶液(0.4024mg/ml)5ml，按正文供試品溶液的制備方法操作，測定其含量，并計算其回收率，測定結(jié)果見表23:表23回收率試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>結(jié)果表明回收率試驗合格，本試驗方法可用于檢測本品中鹽酸麻黃堿的含量。2、樣品含量測定照正文含量測定方法測定實施例5所制備的3批樣品。結(jié)果見表24:表24鹽酸麻黃堿含量測定結(jié)果表<table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>結(jié)論通過3批實施例5中鹽酸麻黃堿的含量測定，每粒制劑中，麻黃以鹽酸麻黃堿量計為2.70mg2.85mg，本發(fā)明藥物組日用計量中含麻黃以鹽酸麻黃堿量計，不得少于8.Omg?！嶒灷?五味子含量測定方法學(xué)考察1.儀器與試藥日本島津LC-10AT高效液相色譜儀；SPD-10A紫外檢測器；KQ-250型超聲波處理器；五味子醇甲對照品；甲醇為色譜純，其他試劑均為分析純。2.方法與結(jié)果2.1色譜條件色譜柱Shim-pack-C18柱(5Mm，4.6mmX150mm)，流動相乙腈_甲醇-0.1%磷酸(39:16.7:44.3);流速lml/min;檢測波長為250nm;理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000;柱溫為30°C。2.2對照品溶液的制備精密稱取五味子醇甲對照品適量，加甲醇配制成每lml含0.03mg溶液，即得。2.3供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材108.1g,精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理20min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mm)濾過，取續(xù)濾液，即得。2.4陰性對照溶液的制備按處方比例制備不含五味子藥材的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。分別精密吸取陰性對照溶液、供試品溶液及對照品溶液各10W，注入液相色譜儀中，按液相色譜條件測定，結(jié)果表明，陰性對照溶液色譜圖中與對照品相同保留時間處無干擾。2.5線性關(guān)系考察精密吸取五味子醇甲對照品溶液(0.03mg/ml)4、8、12、16、20W，分別注入高效液相色譜儀中進(jìn)行分析，以對照品進(jìn)樣量(M)為橫坐標(biāo)，以對照品的鋒面積積分值為縱坐標(biāo)作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，其回歸方程為Y=1327476.55X-9683.109，r=0.9998，結(jié)果表明，五味子醇甲在0.11792—0.5896Pg間呈良好的線性關(guān)系。表25線性關(guān)系考察結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage24</column></row><table>2.6精密度試驗精密吸取供試品溶液連續(xù)6次重復(fù)進(jìn)樣，每次IOW，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差〈2%，結(jié)果見表26:表26精密度試驗結(jié)果　<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>2.7穩(wěn)定性試驗取供試品溶液，于放置0、2、4及6h，分別進(jìn)樣10W，記錄色譜圖，結(jié)果五味子醇甲峰面積的RSD=0.49%，結(jié)果見表27。表27穩(wěn)定性試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>結(jié)果表明，五味子醇甲在6小時內(nèi)基本穩(wěn)定。2.8重現(xiàn)性試驗取同一批樣品，按本文方法獨立測定五次，依次進(jìn)樣測定，樣品中五味子醇甲含量，，求得相對標(biāo)準(zhǔn)偏差<2%，見表28。表28重現(xiàn)性試驗結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>結(jié)果表明其重現(xiàn)性良好。2.9回收率試驗取五味子醇甲對照品適量，加入到已測五味子醇甲含量的本發(fā)明藥物組樣品中，按供試品溶液的制備方法制備，并測得五味子醇甲含量，計算回收率，測定結(jié)果見表29。表29加樣回收率測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>平均回收率=98.22%，RSD=0.60%2.10樣品測定按本文2.2與2.3項下制備對照品溶液和供試品溶液，按上述色譜條件，依法進(jìn)行測定，共測定三批樣品，結(jié)果見表30。表30<table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>(1)五味子是本發(fā)明藥物組中的主要藥味，其所含五味子醇甲是主要有效成分之一，因此以本品五味子醇甲含量作為本發(fā)明藥物組質(zhì)量控制指標(biāo)。在本文中采用高效液相色譜法測定制劑中五味子醇甲的含量，此法操作簡單，重現(xiàn)性好，回收率高。(2)有關(guān)五味子醇甲HPLC含量測定方法的報導(dǎo)中，流動相多采用甲醇、水等系統(tǒng)。我們通過實驗摸索，確定以甲醇、乙腈、0.1%磷酸三種系統(tǒng)為流動相，在樣品色譜中，五味子醇甲分離效果較為滿意，分離度高，峰形對稱性較好。下述實施例均能實現(xiàn)以上發(fā)明效果(實施例缺少質(zhì)量控制方法)實施例l麻黃3000g生姜3000g五味子(制)375g炙甘草112.5g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏。真空干燥，粉碎，依照本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)制成臨床接受的制劑，如膠囊劑、片劑、顆粒劑、軟膠囊、丸劑。實施例2麻黃3000g、生姜3000g、桂枝2800重量份、苦杏仁1000重量份、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，加水煎煮3次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(607(TC)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.03kpa/cm2(103。C)，熱壓蒸煮30分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品。將上述稠膏與杏仁炮制品真空千燥，粉碎，依照本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)制成臨床接受的制劑，如膠囊劑、片劑、顆粒劑、軟膠囊、丸劑。實施例3麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入糊精300g、蔗糖粉600g，混勻，得藥物混合物，制成顆粒，干燥，制成1000袋，即得。實施例4片劑麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上四味藥材，采用逆流循環(huán)提取技術(shù)加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070。C)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入羧甲基纖維素納20g，混勻，得藥物混合物，制成顆粒，干燥，整粒，壓片，包衣，制成1000片，即得。實施例5膠囊劑麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入糊精150g，混勻，得藥物混合物，制粒、裝膠囊，制成1000粒，即得。實施例6軟膠囊麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g、以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏，減壓干燥，粉碎，與細(xì)粉混勻，加入植物油200g，攪勻，制成軟膠囊660粒，即得。實施例7顆粒劑麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏。真空干燥，粉碎，加入蔗糖粉600g、糊精300g，混勻，得藥物混合物，制成顆粒，干燥，制成1000g，即得。實施例8丸劑麻黃3000g、生姜3000g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g以上四味藥材，加水煎煮二次，第一次3小時，第二次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏。60。C減壓干燥，粉碎，與上述細(xì)粉混勻以396PVP的乙醇溶液為粘合劑制成1000丸，即得。權(quán)利要求1、一種具有宣肺，平喘作用的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為麻黃3000-4000重量份、生姜2000-3000重量份、桂枝2000-3000重量份、苦杏仁1000-1500重量份、五味子(制)250-500重量份、炙甘草80-160重量份。2、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物中的原料藥組成為麻黃3000-3200重量份、生姜2800-3000重量份、桂枝2800-3000重量份、苦杏仁1400-1500重量份、五味子(制)300-400重量份、炎甘草100-120重量份。3、如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為麻黃3000g、生姜3000g、桂枝3000g、苦杏仁1500g、五味子(制)375g、炙甘草112.5g。4、如權(quán)利要求1-3任意一項所述中藥組合物的制備方法，其特征在于該方法為藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，采用逆流循環(huán)提取工藝加水煎煮1-3次，每次2-4小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(60°C)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置12-36小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.010.03kpa/cm2(103°C)，熱壓蒸煮20-40分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品；將上述稠膏與杏仁炮制品真空干燥，粉碎，依照本領(lǐng)域常規(guī)技術(shù)制成臨床接受的制劑，如膠囊劑、片劑、顆粒劑、軟膠囊、丸劑。5、如權(quán)利要求4所述中藥組合物膠囊劑的制備方法，其特征在于該方法為藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，采用逆流循環(huán)提取工藝加水煎煮2次，每次2小時，合并煎液，濾過，濾液減壓濃縮至相對密度為1.08(6(TC)的清膏，放冷至室溫，加入等量乙醇，攪勻，靜置24小時，取上清液，回收乙醇并濃縮至相對密度為1.341.40(6070°C)的稠膏；苦杏仁漂洗去灰土，瀝干水分置盤上，放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，控制蒸汽壓力為0.010.03kpa/Cm2(103°C)，熱壓蒸煮30分鐘，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品；將上述稠膏與杏仁炮制品真空干燥，粉碎，加糊精適量，混勻，裝入膠囊，制成1000粒，即得。6、如權(quán)利要求1-3任一項所述中藥組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法中的一種或幾種鑒別(1)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材9-llg，加濃氨試液1-3ml，再加三氯甲垸30-50ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各3^ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一濃氨試液(15-25:3-10:0.5-2)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；(2)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材200-220g，加乙醚20-40ml，超聲20-40分鐘(功率300W,頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取干姜對照藥材lg，加水80-100ml煎煮1小時，濾過，濾液濃縮至20-30ml，加等體積石油醚(609(TC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(6090。C)一乙酸乙酯(3-7:0.5-2)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105匸加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材200-220g，加石油醚(6090。C)40-60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，殘渣加甲醇40-60ml，加熱回流0.5-2小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水30-50ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2-4次，每次10_30ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌2-4次，每次20-40ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材O.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一水(10-15:5-10:1-3)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。7、如權(quán)利要求6所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法中的一種或幾種鑒別(1)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材10.8g，加濃氨試液2ml，再加三氯甲烷40ml，加熱回流1小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一濃氨試液(20:5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；(2)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(609(TC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(609(TC)一乙酸乙酯(5:1)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加石油醚(609(TC)50ml，加熱回流1小時，濾過，殘渣加甲醇50ml，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一水(13:7:2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。8、如權(quán)利要求l-3所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下含量測定中的一種或幾種(1)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)一乙腈(90-100:0-10)為流動相；檢測波長為210nm;理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于2500;對照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解制成每lml含50!ig的溶液，作為對照品溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材3-5g，精密稱定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的鹽酸溶液lml，再加甲醇至刻度，塞緊，超聲處理20-40分鐘，放冷，微孔濾膜(0.45m)過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5ul10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明藥物日用計量含麻黃以鹽酸麻黃堿(Cu^5N0HC1)量計，不得少于8.Omg;(2)照高效液相色譜法(附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；乙腈-甲醇-O.1%磷酸(35-40:15-20:40-50)為流動相；檢測波長為250nm;理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000;對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品1.5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml含五味子醇甲0.03mg);供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材100-110g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)10-30min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mffl)濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得;本發(fā)明藥物含五味子醇甲(C24H3207)不得少于0.40%。9、如權(quán)利要求8所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下含量測定方法中的一種或幾種(1)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)一乙腈(97:3)為流動相；檢測波長為210nm;理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于2500;對照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解制成每lml含50ug的溶液，作為對照品溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材4.3g，精密稱定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的鹽酸溶液lml，再加甲醇至刻度，塞緊，超聲處理30分鐘，放冷，微孔濾膜(0.45Mm)過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5yl10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明藥物日用計量含麻黃以鹽酸麻黃堿(Cu^5NOHC1)量計，不得少于8.Omg;(2)照高效液相色譜法(附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；乙腈-甲醇-O.1%磷酸(39:16.7:44.3)為流動相；檢測波長為250nm;理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000;對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品1.5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml含五味子醇甲0.03mg);供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材108.lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)20min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mm)濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明藥物含五味子醇甲(C24H3207)不得少于0.40%。10、如權(quán)利要求3或5所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該質(zhì)量控制方法包括如下方法鑒別(1)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材10.8g，加濃氨試液2ml，再加三氯甲烷40ml，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取鹽酸麻黃堿，加甲醇制成每lml含lmg的溶液，作為對照品溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷一甲醇一濃氨試液(20:5:0.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以5%茚三酮乙醇溶液，在105。C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紫紅色斑點；(2)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加乙醚30ml，超聲30分鐘(功率300W，頻率50kHz)，濾過，濾液揮干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取干姜對照藥材lg，加水80ml煎煮l小時，濾過，濾液濃縮至20ml，加等體積石油醚(609(TC)萃取，取上層液，蒸干，殘渣加lml甲醇使溶解，作為對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取對照藥材溶液5ul、供試品溶液15ul，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(6090'C)—乙酸乙酯(5:1)為展開劑，二次展開，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，在105'C加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；(3)取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材216.25g，加石油醚(609(TC)50ml，加熱回流1小時，濾過，殘渣加甲醇50ml，加熱回流l小時，濾過，濾液蒸干，殘渣加水40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次20ml，合并正丁醇液，用正丁醇飽和的水洗滌3次，每次30ml，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇lml使溶解，作為供試品溶液；另取甘草對照藥材0.5g，同法制成對照藥材溶液；照薄層色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VIB)試驗，吸取上述兩種溶液各35ul，分別點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲垸一甲醇一水(13:7:2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105卩加熱至斑點顯色清晰；供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點；含量測定(1)照高效液相色譜法(中國藥典2005年版一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅垸鍵合硅膠為填充劑；以0.1%磷酸(含0.1%三乙胺)一乙腈(97:3)為流動相；檢測波長為210nm;理論板數(shù)按鹽酸麻黃堿峰計算應(yīng)不低于2500;對照品溶液的制備取鹽酸麻黃堿對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解制成每lml含50yg的溶液，作為對照品溶液，即得；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材4.3g，精密稱定，至50ml容量瓶中，精密加入0.5mol/L的鹽酸溶液lml，再加甲醇至刻度，塞緊，超聲處理30分鐘，放冷，微孔濾膜(0.45Mm)過濾，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液及供試品溶液各5nl10wl，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明藥物日用計量含麻黃以鹽酸麻黃堿(d。HJOHC1)量計，不得少于8.Omg;(2)照高效液相色譜法(2005版藥典一部附錄VID)測定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八垸基硅垸鍵合硅膠為填充劑；乙腈-甲醇-O.1%磷酸(39:16.7:44.3)為流動相；檢測波長為250nm;理論板數(shù)按五味子醇甲峰計算應(yīng)不低于3000;對照品溶液的制備取五味子醇甲對照品1.5mg，精密稱定，置50ml量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得(每lml含五味子醇甲0.03mg);供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物相當(dāng)于原藥材108.lg，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率20kHz)20min，取出，放冷，再稱定重量，加甲醇補足減少的重量，濾過，精密吸取續(xù)濾液20ml，蒸干，殘渣加甲醇使溶解，并定溶至5ml，用微孔濾膜(0.45Mm)濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法分別精密吸取對照品溶液與供試溶液各10ul，注入液相色譜儀，測定，即得；本發(fā)明藥物含五味子醇甲(C24H3207)不得少于0.40%。全文摘要本發(fā)明公開了一種用于宣肺，平喘的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。本發(fā)明的藥物組合物原料藥組成為麻黃、生姜、桂枝、苦杏仁、五味子(制)、炙甘草組成，制備方法為以上藥材除苦杏仁外，其他五味藥材，通過逆流循環(huán)提取工藝加水煎煮，減壓濃縮至清膏，加入乙醇，攪勻，靜置，取上清液，回收乙醇并濃縮至稠膏；苦杏仁放入熱壓滅菌鍋內(nèi)，熱壓蒸煮，取出即放入少量冷水中浸泡，除去種皮，曬干，即得杏仁炮制品，其質(zhì)量控制方法為對麻黃、生姜、甘草進(jìn)行薄層鑒別，對麻黃中麻黃堿、五味子中五味子醇甲進(jìn)行含量測定。本發(fā)明藥物組合物具備很好宣肺，平喘作用。文檔編號A61K36/9068GK101396544SQ200710122488公開日2009年4月1日申請日期2007年9月26日優(yōu)先權(quán)日2007年9月26日發(fā)明者付建家,付立家申請人:北京亞東生物制藥有限公司