專利名稱：一種富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食用菌的加工，具體而言涉及含中藥功能性成分、真菌多糖 成分的口服液的制備方法。
背景技術(shù)：
灰樹花(^r/尸o/a /><9/ 0^^3 )又名貝葉多孑L菌(/7。///w〃51 /"ro/70^犯i1)， 灰樹花是一種營養(yǎng)價值豐富且具有較強抗腫瘤活性的真菌，其深層發(fā)酵后的 灰樹花多糖是發(fā)揮抗腫瘤作用的主要成分。近年來，尤其是2000年以來， 灰樹花在防治腫瘤上的應(yīng)用受到了人們的關(guān)注，涉及灰樹花的專利申請多達(dá) 50多件，其中大多數(shù)是2000年以后的申請件。在這些申請件中，利用藥用 真菌灰樹花深層發(fā)酵生產(chǎn)灰樹花口服液的有2件，即ZL200410083062. X號 "一種灰樹花口服液及其生產(chǎn)方法"和200510062057.5號"一種微米灰樹 三花靈芝孢抗腫瘤突變口服液制備方法"。
近年來人們研究表明，天麻對學(xué)生增智、健腦，保持良好的學(xué)習(xí)狀態(tài)、 腦力勞動者保持清醒的頭腦和充沛的精力、老年人延緩衰老等有良好作用； 在體內(nèi)硒和維生素E協(xié)同，能夠保護細(xì)胞膜，防止不飽和脂肪酸的氧化；微 量硒具有防癌作用及保護肝臟的作用。
可見如果將灰樹花與天麻素、微量元素硒復(fù)合，就會得到具有更強的抗 腫瘤作用的產(chǎn)品。然而，迄今為止，尚無將灰樹花與天麻素、微量元素竭復(fù) 合制成的口服液問世。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種富含天麻素、有機竭的灰樹花口服液，具有 更強的抗肺瘤作用，為人類的健康服務(wù)。
本發(fā)明的另一目的在于提供富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液的制備 方法，使其能夠?qū)崿F(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)、供應(yīng)市場需要。
發(fā)明人提供的富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液，是將新鮮天麻及苦 蒜經(jīng)過預(yù)處理、干燥、粉碎，以粉狀形式參與灰樹花深層發(fā)酵，所制備得到 富含天麻素量、粗多糖和有機硒的口服液。
發(fā)明人指出新鮮天麻含有的天麻素(^^"(^//"e)是一種葡萄糖香， 分子式(:13111807,為中藥天麻的有效成分；苦蒜是生長在貴州的一種野菜，苦 蒜中有機硒含量為0. 21 x 10-6 ( 0. 21ppm)是一種有機竭含量相對多的物質(zhì)。
本發(fā)明的富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液的制備方法包括
(1) 灰樹花斜面菌種培養(yǎng)從斜面母種中接出黃豆大小的菌絲塊，置于 PDA斜面培養(yǎng)基中央，培養(yǎng)7-IO天；
(2) 液體種子培養(yǎng)將培養(yǎng)好的灰樹花斜面菌種接入裝有種子培養(yǎng)基的 搖瓶中；在500mL的三角瓶中裝液150ml,培養(yǎng)7天；
(3) 天麻、苦蒜原料處理采用粉碎機將干天麻、苦蒜粉碎，備用；
(4) 發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級液體種子接入15L發(fā)酵罐中罐裝液9L,在攪 拌下培養(yǎng)3天；
(5) 產(chǎn)品后處理放罐后，發(fā)酵液用乳化機乳化，裝于容器內(nèi)，密封， 滅菌，冷卻，即制得本發(fā)明的口服液。
上述方法的第一步中，培養(yǎng)溫度為25。C。
上述方法的第二步中， 一支斜面接種一瓶；培養(yǎng)基組成為葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L,麩皮粉IO g/L, K2HP04 1.5 g/L， KH2P04 1 g/L， MgSO, 1 g/L;培養(yǎng)的工藝條件為初始pH6. 5~7. 0，接種量為8%~12%，搖瓶轉(zhuǎn)
速為130 - 160 r/min，培養(yǎng)溫度25。C。
上述方法的第三步中，干天麻、苦蒜粉碎后的粒度為過60目篩。
上述方法的第四步中，發(fā)酵罐培養(yǎng)基組成為葡萄糖20 g/L，玉米粉 20 g/L，薏米粉10 g/L,天麻粉10 g/L，苦蒜粉7.5 g/L， K2HP04 0.60 -0.80 g/L， KH2P04 0.65 - 0.85 g/L， MgS04 0.60 — 0.85 g/L;培養(yǎng)的工藝條 件為初始pH 6.5-7.0,接種量為10%;攪拌機轉(zhuǎn)速130 ~ 160r/min，罐壓 為O. 05MPa，空氣流速9L/min (標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))，空氣壓力為O. 2Mpa;培養(yǎng)溫度 為25°C。
上述方法的第五步中，滅菌溫度121。C，滅菌時間20min。
本發(fā)明方法所制備得到的口服液中，天麻素含量為2. 2~2. 8mg/100mL， 粗多糖含量4. 0 ~ 4. 8mg/L,有機硒含量為0. 11 x i(T6 ~ 0. 21 x 10 —6。
發(fā)明人在制備研究中發(fā)現(xiàn)添加天麻及苦蒜后，灰樹花發(fā)酵的多糖產(chǎn)量 隨發(fā)酵時間可繪出一條曲線，從曲線可看出，發(fā)酵第四天時，灰樹花多糖產(chǎn) 量最高，以后逐天遞減；培養(yǎng)基中添加天麻及苦蒜后，可使灰樹花多糖產(chǎn)量 提高至3. 2g/L，且最適宜的添加比例為4: 3。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液能夠發(fā) 揮更強的抗腫瘤作用，增強人體免疫力，在抑制、殺滅癌細(xì)胞的同時不傷及 人體正常細(xì)胞，為人類的健康服務(wù)；本發(fā)明方法可以將天麻、苦蒜與灰樹花 共同發(fā)酵，制備富含天麻素量、粗多糖和有機硒的口服液，使其能夠?qū)崿F(xiàn)規(guī) 模化生產(chǎn)、供應(yīng)市場需要。
具體實施例方式
實施例
灰樹花(菌種編號50404 )菌種購自中國微生物菌種保藏管理委員會 普通微生物中心中科院微生物研究所。發(fā)酵工藝為(l)斜面菌種培養(yǎng)用PDA培養(yǎng)基在試管內(nèi)培養(yǎng)斜面菌種， 溫度25°C，時間8天，pH6. 5 ~ 7. 0; (2)搖瓶種子培養(yǎng)液體種子培養(yǎng)基為 葡萄糖20g/L,玉米粉20g/L，麩皮粉10g/L， K風(fēng)1.5g/L, KH2P04lg/L， MgS04lg/L;培養(yǎng)條件將已活化的斜面菌種切割成黃豆大小的菌塊，接種 2-3塊于液體種子培養(yǎng)基中，于500ml三角瓶裝液量150ml,旋轉(zhuǎn)式搖床培 養(yǎng)，轉(zhuǎn)速150r/min，培養(yǎng)溫度25。C， pH6. 5-7. 0，培養(yǎng)時間7天；(3)天 麻、苦蒜原料處理采用粉碎機將干天麻、苦蒜粉碎，過60目篩；(4)15L 發(fā)酵罐發(fā)酵培養(yǎng)基成分葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L,薏米粉10 g/L, 天麻粉IO g/L,苦蒜粉7. 5 g/L, K2HP04 0.75 g/L， KH2P04 0.75 g/L, MgS04 0.75g/L;培養(yǎng)條件將培養(yǎng)好的種子培養(yǎng)基按體積分?jǐn)?shù)10 %的接種量接入 裝有9L發(fā)酵培養(yǎng)基的全自動15L發(fā)酵罐中，攪拌轉(zhuǎn)速150r/min,發(fā)酵溫度 25°C，通氣量39 L/min(標(biāo)準(zhǔn)狀態(tài))，氣壓0. 2MPa,罐壓0. 05MPa，發(fā)酵過 程溶解氧(OD)值由溶氧電極在線檢測，發(fā)酵時間至120h時，溶解氧下降至 35 % ~ 40 % ，即可終止發(fā)酵。
灰樹花口服液的制備即上述發(fā)酵產(chǎn)物的后處理放罐后，發(fā)酵液用乳化 機乳化，裝于容器內(nèi)，密封，在12rC下進行滅菌20min，冷卻，即制得本 發(fā)明的口服液。
權(quán)利要求
1一種富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液，其特征在于該口服液是將新鮮天麻及苦蒜經(jīng)過預(yù)處理、干燥、粉碎，以粉狀形式參與灰樹花深層發(fā)酵，所制備得到富含天麻素量、粗多糖和有機硒的口服液。
2 按照權(quán)利要求1所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征包括(1) 灰樹花斜面菌種培養(yǎng)從斜面母種中接出黃豆大小的菌絲塊，置于 PDA斜面培養(yǎng)基中央，培養(yǎng)7-10天；(2) 液體種子培養(yǎng)將培養(yǎng)好的灰樹花斜面菌種接入裝有種子培養(yǎng)基的 搖瓶中；在500mL的三角瓶中裝液150ml,培養(yǎng)7天；(3) 天麻、苦蒜原料處理采用粉碎機將干燥后的天麻、苦蒜粉碎，備用；(4) 發(fā)酵將培養(yǎng)好的一級液體種子接入15L發(fā)酵罐中罐裝液9L，在攪 拌下培養(yǎng)3天；(5) 產(chǎn)品后處理放罐后，發(fā)酵液用乳化機乳化，裝于容器內(nèi)，密封， 滅菌，冷卻，即制得本發(fā)明的口服液。3按照權(quán)利要求2所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征在于所述 方法的第一步中，培養(yǎng)溫度為25。C。4按照權(quán)利要求2所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征在于所述方法的第二步中， 一支斜面接種一瓶；培養(yǎng)基組成為葡萄糖20g/L,玉米 粉20 g/L,麩皮粉10 g/L， K2HP04 1.5 g/L， KH2P04 1 g/L, MgS04 1 g/L; 培養(yǎng)的工藝條件為初始pH 6. 5~7. O，接種量為8% ~ 12%,搖弁瓦轉(zhuǎn)速為130 ~ 160r/min,培養(yǎng)溫度25。C。。5按照權(quán)利要求2所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征在于所述方法的第三步中，干天麻、苦蒜粉碎后的粒度為過60目篩。6按照權(quán)利要求2所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征在于所述 方法的第四步中，發(fā)酵罐培養(yǎng)基組成為葡萄糖20 g/L，玉米粉20 g/L， 薏米粉IO g/L，天麻粉IO g/L,苦蒜粉7. 5 g/L， K2HP04 0.60 - 0.80 g/L, KH2P04 0.65 - 0.85 g/L, MgS04 0.60-0- 85 g/L;培養(yǎng)的工藝條件為初始pH 6.5-7.0，接種量為10%;攪拌機轉(zhuǎn)速130 - 60r/min，罐壓為0. 05MPa,標(biāo)準(zhǔn) 狀態(tài)下空氣流速9L/min，空氣壓力為O. 2MPa;培養(yǎng)溫度為25°C。7按照權(quán)利要求2所述的灰樹花口服液的制備方法，其特征在于所述 方法的第五步中，滅菌溫度12rC,滅菌時間20min。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種富含天麻素、有機硒的灰樹花口服液及其制備方法，該口服液是將新鮮天麻及苦蒜經(jīng)過預(yù)處理、干燥、粉碎，以粉狀形式參與灰樹花深層發(fā)酵，制得富含天麻素量、粗多糖和有機硒的口服液。制備方法包括(1)灰樹花斜面菌種培養(yǎng)；(2)液體種子培養(yǎng)；(3)天麻、苦蒜原料處理；(4)發(fā)酵；(5)產(chǎn)品后處理。本發(fā)明的口服液中，天麻素含量2.2～2.8mg/100mL，粗多糖含量4.0～4.8mg/L，有機硒含量0.11×10<sup>-6</sup>～0.21×10<sup>-6</sup>，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的口服液能發(fā)揮更強的抗腫瘤作用，增強人體免疫力，抑制、殺滅癌細(xì)胞，同時不傷及人體正常細(xì)胞，為人類健康服務(wù)；本發(fā)明方法可以將天麻、苦蒜與灰樹花共同發(fā)酵，制備富含天麻素量、粗多糖和有機硒的口服液，使其能規(guī)?；a(chǎn)。
文檔編號A61K36/06GK101194917SQ20071007801
公開日2008年6月11日 申請日期2007年11月21日 優(yōu)先權(quán)日2007年11月21日
發(fā)明者吳天祥 申請人:貴州大學(xué)