專利名稱：一種蝎毒的提取凈化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及蝎毒的提取，尤其涉及一種蝎毒的提取凈化方法。
背景技術(shù)：
蝎子在我國中醫(yī)學(xué)上稱為全蝎，是一種珍貴的要用動(dòng)物。全蝎能穿筋透骨、逐濕除風(fēng)。全蝎的藥用價(jià)值很高，用全蝎配成的中藥處方多達(dá)100多種。全蝎是人參再造丸、大活絡(luò)丹、七珍丹、保安萬靈丹、牽正散等30多種中成藥的重要原料，是我國中醫(yī)臨床常用的動(dòng)物藥材。特別是近幾年，全蝎在治療疑難病癥上發(fā)現(xiàn)有顯著的療效，如全蝎可治療脈管炎、血栓閉塞，蝎毒可治療心血管病、各種腫瘤、三叉神經(jīng)痛等。這些應(yīng)用使蝎子的需求量急劇增加。除藥用外，全蝎還可以制成滋補(bǔ)食品。隨著社會(huì)物質(zhì)文明的進(jìn)步，蝎子作為治療、保健佳品，倍受人們關(guān)注。
經(jīng)科學(xué)驗(yàn)證，蝎子的有效成分是蝎毒，而蝎毒的藥用價(jià)值遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蝎子本身。蝎子中的藥用精華主要在于蝎毒，蝎毒的研究日益為各國科學(xué)家所重視，在國際市場上價(jià)格昂貴。蝎毒具有兩大毒素，即神經(jīng)毒素和細(xì)胞毒素，它在神經(jīng)分子、分子免疫、分子進(jìn)化、蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能等方面有著廣闊的應(yīng)用前景。蝎毒對神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)、心腦血管系統(tǒng)、癌癥、皮膚病等多種疾病、以及對人類危害極大的各種病毒均有預(yù)防和抑制作用?？梢灶A(yù)料蝎毒將會(huì)為人類醫(yī)療保健事業(yè)發(fā)揮巨大作用。
目前，已經(jīng)有很多關(guān)于蝎毒提取方法的報(bào)道。例如，中國專利號(hào)98102385.1的專利公開了一種藥用蝎毒素的提取方法，包括提毒前飼養(yǎng)、檢選滅菌、提毒、檢驗(yàn)、沉淀過濾和干燥研磨。還例如，中國專利號(hào)97119704.0的專利公開了一種晶體蝎毒的提取方法，所提取蝎毒在整個(gè)提取、去雜、干燥及封裝的過程中，始終在臨界溫度0℃條件下進(jìn)行，有效地保留了蝎毒酶的活性，蝎毒毒蛋白質(zhì)不會(huì)受到破壞，毒力強(qiáng)，可直接用于制藥，用途廣泛。還例如，中國專利號(hào)01106166.9的專利公開了一種獲取無毒有效蝎毒的生產(chǎn)工藝，其包括①采集蝎毒(SV)；②加蒸餾水后，分離，取上清液；③加熱上清液，加熱溫度為100攝氏度，加熱時(shí)間至少為2.5小時(shí)，加熱方式為煮沸，即將盛裝上清液的容器置于沸水中，武火煮沸，制度無毒SV水提液；④將上述無毒SV水提液與藥材輔料制成片劑或膠囊。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種蝎毒的提取凈化方法，使用該方法可以提取更大量的蝎毒。
本發(fā)明提供了一種蝎毒的提取凈化方法，該方法包括將潔凈蝎子在高于30℃的溫度下在無菌環(huán)境中，用電脈沖刺激使蝎子排毒，其中電脈沖的頻率為139赫茲，電壓為8～10V，刺激時(shí)間不超過1秒，用溫度約為-2～2℃范圍內(nèi)的容器收集蝎毒液，過濾，收集純凈蝎毒液。
上述蝎毒的提取凈化方法中，提取蝎毒時(shí)的環(huán)境溫度一般高于30℃，優(yōu)選在30～30℃范圍內(nèi)，更優(yōu)選在30～35℃范圍內(nèi)，最優(yōu)選在約35℃。在該溫度范圍內(nèi)，尤其是在約35℃時(shí)，蝎子排毒液的量較大，而且所排出蝎毒液的質(zhì)量較高。
上述蝎毒的提取凈化方法中，用電脈沖進(jìn)行刺激的時(shí)間一般不超過1秒，更優(yōu)選不超過0.5秒，這樣可以減少對蝎子的傷害，使其能更頻繁的排毒，從而整體上提高蝎毒產(chǎn)量。
上述蝎毒的提取凈化方法中，所述過濾可以使用減壓(負(fù)壓)過濾，這樣能提高過濾速度，降低蝎毒液暴露在空氣中的時(shí)間，從而防止蝎毒毒蛋白變質(zhì)。所用過濾網(wǎng)的孔徑優(yōu)選為約180～220目，更優(yōu)選約為200目。如果孔徑低于180目，則仍有雜質(zhì)通過而成為蝎毒液中的雜質(zhì)，如果孔徑大于220目，則過濾速度太慢。
本發(fā)明吸毒的提取凈化方法，在蝎子更易于排毒的高溫環(huán)境中，使用了高頻脈沖對蝎子進(jìn)行較短時(shí)間的刺激，蝎子排毒快、排毒量大，而且對被電刺激排毒的蝎子傷害較小，蝎子經(jīng)合理喂養(yǎng)恢復(fù)后可在短周期內(nèi)重復(fù)進(jìn)行排毒。
本發(fā)明蝎毒的提取凈化方法還可以包括對要進(jìn)行提取蝎毒的蝎子進(jìn)行的預(yù)處理過程，該預(yù)處理過程可以包括將蝎子用約35℃的溫水噴琳清洗，去除泥沙等，然后用約35℃的5wt％的生理鹽水進(jìn)行噴琳消毒、滅菌；然后將洗凈、消毒后的蝎子干燥，如將其置于干燥海綿上并且其上使用棉布進(jìn)行披覆而使蝎子自然干燥。整個(gè)預(yù)處理過程中優(yōu)選環(huán)境溫度高于30℃，更優(yōu)選在30～39℃范圍內(nèi)，還更優(yōu)選在約30～35℃范圍內(nèi)，最優(yōu)選在約35℃。
經(jīng)過上述預(yù)處理過程，要進(jìn)行提毒的蝎子被充分清洗、消毒和干燥，從而蝎子本身外表是潔凈的，因此在提毒過程中，所提取的蝎毒液不會(huì)被蝎子身體所攜帶的泥沙、細(xì)菌或水份等污染，從而在極大程度上保證所提取的蝎毒液的純凈度。
本發(fā)明蝎毒的提取凈化方法還可以包括將過濾所得的純凈蝎毒液冷凍(例如，在低于-24℃的溫度下進(jìn)行冷凍)、干燥(例如，在約0℃真空干燥)的過程，由此，可以將蝎毒液制成凍干粉，從而提高蝎毒的保質(zhì)期，并提高蝎毒的可保藏性。
本發(fā)明提供的方法可以快速提取蝎毒，而且蝎毒的提取率高，所得蝎毒提取液或蝎毒凍干粉品質(zhì)好，其中毒蛋白含量高，生理活性物質(zhì)基本沒有變質(zhì)。
具體實(shí)施例方式
以下通過具體實(shí)施例來進(jìn)一步描述本發(fā)明，本發(fā)明的特點(diǎn)和優(yōu)點(diǎn)將隨著以下描述而變得更清楚。但這些實(shí)施例僅是范例性的，用于解釋說明本發(fā)明，并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不違背本發(fā)明精神和范圍的情況下，對本發(fā)明的細(xì)節(jié)進(jìn)行任何修改或等價(jià)替代方案都落入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
實(shí)施例11)選擇2600條個(gè)體大、色澤好、體力強(qiáng)、運(yùn)動(dòng)快的良種蝎子；2)將這2600條蝎子單獨(dú)隔離飼養(yǎng)一周，期間只喂養(yǎng)一次；3)在約35℃的環(huán)境溫度下，將這些選好的蝎子用約35℃的溫水噴琳清洗，除去蝎子體上的塵土等，而后用約35的5％食鹽水噴琳消毒、殺菌，然后將潔凈的蝎子放在墊有干燥海綿的盆中，蝎子體上蓋有干棉布，蝎體自然干燥；4)在約35℃的環(huán)境中，用139Hz的電脈沖刺激蝎子尾部1秒使其排毒，用置于0℃冰浴環(huán)境中的容器收集蝎毒液；5)每小時(shí)將在冰浴環(huán)境中收集的蝎毒液仍在此環(huán)境下在容器中沉淀約10分鐘，然后用清潔注射器抽取上層毒液并將其使用200目的減壓過濾器進(jìn)行過濾(減壓0.5公斤)，濾除雜質(zhì)，收集得到3g濾液；6)將上述濾液在-24℃冷凍2小時(shí)，然后在0℃真空干燥3小時(shí)，得到1g蝎毒凍干粉，將其裝于棕色廣口瓶中，用蠟密封。
該蝎毒凍干粉的保質(zhì)期-30℃密封保持，6年內(nèi)不變質(zhì)；在密封避光條件下常溫保藏，2年不變質(zhì)。
其中，提毒后的蝎子立即喂食。6-8月份，每只蝎子可每隔10天提毒一次，而不傷害蝎子。
比較實(shí)施例2根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)，專利號(hào)98102385.1所公開的方法，將3300只與實(shí)施例1相同的蝎子進(jìn)行提毒，共得到1g蝎毒凍干粉。在6-8月份，每只蝎子可每隔20～30天提毒一次，而不傷害蝎子。
從實(shí)施例和比較實(shí)施例2可以看出，使用本發(fā)明方法每次可提取的蝎毒比現(xiàn)有技術(shù)至少高15％，而且提取頻率為現(xiàn)有技術(shù)的2～3倍，從而對于確定量的蝎子而言，使用本發(fā)明方法提取的蝎毒量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于使用現(xiàn)有技術(shù)所提取的蝎毒量。
試驗(yàn)例1將實(shí)施例1的蝎毒凍干粉于制備后第三天、比較實(shí)施例2的蝎毒凍干粉于制備后第三天送到衛(wèi)生部上海生物制品研究所進(jìn)行檢測，結(jié)果如下表1所示表1 實(shí)施例1和比較實(shí)施例2蝎毒凍干粉檢測結(jié)果

從上表內(nèi)容可知，本發(fā)明所得蝎毒凍干粉，相較現(xiàn)有技術(shù)所得的蝎毒凍干粉而言，其毒性更強(qiáng)、蛋白質(zhì)含量更高、酶活性更高，說明其品質(zhì)更好。
權(quán)利要求
1.一種蝎毒的提取凈化方法，該方法包括將潔凈蝎子在高于30℃的溫度下在無菌環(huán)境中，用電脈沖刺激使蝎子排毒，其中電脈沖的頻率為139赫茲，電壓為8～10V，刺激時(shí)間不超過1秒，用溫度約為-2～2℃范圍內(nèi)的容器收集蝎毒液，過濾，收集純凈蝎毒液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述環(huán)境溫度在30～30℃范圍內(nèi)，優(yōu)選在30～35℃范圍內(nèi)，最優(yōu)選為約35℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述刺激時(shí)間不超過0.5秒。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，所述過濾為減壓過濾，過濾網(wǎng)的孔徑為180～220目，更優(yōu)選為200目。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，該方法還包括對要進(jìn)行提取蝎毒的蝎子進(jìn)行的預(yù)處理過程，該預(yù)處理過程包括將蝎子用約35℃的溫水噴琳清洗，去除泥沙等，然后用約35℃的5wt％的生理鹽水進(jìn)行噴琳消毒、滅菌；然后將洗凈、消毒后的蝎子干燥，如將其置于干燥海綿上并且其上使用棉布進(jìn)行披覆而使蝎子自然干燥。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，預(yù)處理過程中環(huán)境溫度高于30℃，更優(yōu)選在30～39℃范圍內(nèi)，還更優(yōu)選在約30～35℃范圍內(nèi)，最優(yōu)選在約35℃。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)所述的方法，其特征在于，該方法還括將過濾所得的純凈蝎毒液冷凍、干燥的過程。
全文摘要
本發(fā)明一種蝎毒的提取凈化方法，該方法包括將潔凈蝎子在高于30℃的溫度下在無菌環(huán)境中，用電脈沖刺激使蝎子排毒，其中電脈沖的頻率為139赫茲，電壓為8～10V，刺激時(shí)間不超過1秒，用溫度約為－2～2℃范圍內(nèi)的容器收集蝎毒液，過濾，收集純凈蝎毒液。該方法還可以包括預(yù)處理過程和后續(xù)的冷凍、干燥過程。該方法可以快速提取蝎毒，而且蝎毒的提取率高，所得蝎毒提取液或蝎毒凍干粉品質(zhì)好，其中毒蛋白含量高，生理活性物質(zhì)基本沒有變質(zhì)，蝎子受損較小，可在短期內(nèi)重復(fù)提毒。
文檔編號(hào)A61P29/00GK101028287SQ20071006531
公開日2007年9月5日 申請日期2007年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2007年4月11日
發(fā)明者張學(xué)義 申請人:張學(xué)義