專利名稱：監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的方法，以及用于該方法的制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的方法。本發(fā)明也涉及 設(shè)計(jì)為能夠監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的制劑。發(fā)明背景技術(shù)在醫(yī)療機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢察的病人通常由醫(yī)生開出藥物處方，并在藥房 或診所中進(jìn)行藥物治療。需要根據(jù)處方規(guī)定的用途和劑量來服用藥物 處方上的藥物，如果藥物處方使用錯(cuò)誤，那么他們可能不僅會(huì)導(dǎo)致不 能顯示預(yù)期的功效，而且會(huì)產(chǎn)生對(duì)病人有害的副作用。為了使病人正 確理解與用途有關(guān)的注意事項(xiàng)和藥物處方的副作用，通常會(huì)以口頭和書面形式向病人傳達(dá)藥物說明。在藥物研發(fā)階段實(shí)施的臨床試驗(yàn)中，也會(huì)向受試者解釋副作用及 其他注意事項(xiàng)以保證他們的安全，而且為了準(zhǔn)確評(píng)價(jià)藥物的功效也會(huì) 以口頭和書面形式指示受試者遵照處方規(guī)定的用途和劑量使用。住院病人能夠相對(duì)如實(shí)地遵守藥物治療時(shí)間表，因?yàn)樽o(hù)士能夠通 過給病人施用藥物或通過指示病人在每個(gè)規(guī)定的給藥時(shí)間使用藥物來 控制時(shí)間表，而且醫(yī)生可以根據(jù)需要查看病人以檢査功效和副作用。但是，門診病人和臨床試驗(yàn)受試者需要自己獨(dú)立地遵守他們的藥 物治療時(shí)間表，而且在許多情況下，他們不能正確地服藥。例如門診病人有時(shí)會(huì)忘記服藥，或者會(huì)因?yàn)楦弊饔弥鲃?dòng)停止藥物治療。特別是當(dāng)每日需要服用大量藥物的肺結(jié)核病人或AIDS病人未
遵守他們的藥物治療時(shí)間表或停止藥物治療時(shí)，這些病人可能不能獲 得充分的療效。在連續(xù)施用藥物的臨床試驗(yàn)中，受試者需將制劑帶回家并依照開 處方規(guī)定的藥物治療時(shí)間表服用。因此，受試者因?yàn)榕c門診病人相同 的原因也可能錯(cuò)誤地服用藥物制劑。更進(jìn)一步地，在這種臨床試驗(yàn)中， 受試者可能錯(cuò)誤報(bào)告沒有服用藥物的事實(shí)，最終導(dǎo)致錯(cuò)誤評(píng)價(jià)和和判 斷藥物的功效。為了改善這種醫(yī)療狀況，已經(jīng)研發(fā)了通過因特網(wǎng)(日本未經(jīng)審査的專利出版物No. 1998-91700)或通過便攜式電話(日本未經(jīng)審査的專 利出版物No.2003-296454)傳達(dá)通知提醒病人或受試者服藥的系統(tǒng)。也 研發(fā)了具有藥物管理板(medicine management board)(日本未經(jīng)審查 的專利出版物號(hào)1997-237294)的藥物管理箱，和藥物管理支持裝置(日 本未經(jīng)審査的專利出版物號(hào)2003-310715)，其中如果藥品箱在服藥以 外的時(shí)間被打開藥物管理支持裝置能發(fā)出警報(bào)并能告知服藥的時(shí)間 (日本未經(jīng)審查的專利出版物No. 2003-310715)。但是，在上述任何 措施中，病人或試驗(yàn)對(duì)象仍然需要自主服藥，藥物遵守取決于病人或 受試者的陳述。雖然通過測量血液或尿液樣品中的藥物水平確認(rèn)遵守是可能的， 但收集血液或尿液樣品會(huì)使病人或受試者經(jīng)受疼痛和/或不愉快程序， 而且測量需要很長時(shí)間。因此，這種方法既不容易實(shí)施，也不準(zhǔn)確。發(fā)明概述本發(fā)明的目標(biāo)是提供簡單準(zhǔn)確地監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的 方法。具體地，本發(fā)明的目標(biāo)是提供通過收集病人或受試者的呼出氣 的對(duì)病人或受試者幾乎無負(fù)擔(dān)的簡單準(zhǔn)確地監(jiān)測病人或受試者的遵守 醫(yī)囑的方法。本發(fā)明的另一個(gè)目標(biāo)是提供設(shè)計(jì)為能夠監(jiān)測病人或受試 者對(duì)醫(yī)囑遵守的制劑。
為解決上述問題，本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了廣泛的研究后發(fā)現(xiàn)，當(dāng) 碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和生物活性劑被醫(yī)囑規(guī)定一起服用并被病人或受 試者攝入時(shí)，碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)在體內(nèi)通過/3氧化被代謝，因此可以 在病人或受試者呼出的氣體中檢測到碳同位素標(biāo)記的二氧化碳。發(fā)明 人更進(jìn)一步地發(fā)現(xiàn)碳同位素標(biāo)記的二氧化碳可以用作監(jiān)測病人或受試 者的遵守醫(yī)囑的指標(biāo)。發(fā)明人以對(duì)這些發(fā)現(xiàn)的改進(jìn)為基礎(chǔ)完成了本發(fā) 明。本發(fā)明提供了以下監(jiān)測遵守醫(yī)囑的方法。1. 監(jiān)測病人或受試者的遵守醫(yī)囑的方法，包括步驟(i) 規(guī)定病人或受試者攝入至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素 標(biāo)記的脂質(zhì)，(ii) 獲取病人或受試者呼出的氣體樣品，(iii) 測量樣品中碳同位素標(biāo)記的C02相對(duì)于"C02的比例，禾口(iv) 以C02相對(duì)于"C02的碳同位素標(biāo)記的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了所述的處方規(guī)定的生物活性劑。2. 依照項(xiàng)目l的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于一種或多 種藻類。3. 依照項(xiàng)目l的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)是。C標(biāo)記的脂質(zhì)。4. 依照項(xiàng)目l的方法，其中在步驟(i)中，處方開的是包含至少 一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑。本發(fā)明包括監(jiān)測遵守醫(yī)囑的方法，該方法包括上述方法的步驟(ii) 到(iv)或步驟(iii)和(iv)。因此，本發(fā)明也提供了以下方法。5. 監(jiān)測病人或受試者的遵守醫(yī)囑的方法，所開的處方是至少一 種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，該方法包括步驟(a)獲取病人或受試者呼出的氣體樣品，
(b)測量樣品中碳同位素標(biāo)記的<:02相對(duì)于12(:02的比例，和 (C)以碳同位素標(biāo)記的<:02相對(duì)于120:02的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了所述 的處方規(guī)定的生物活性劑。6. 監(jiān)測病人或受試者的遵守醫(yī)囑的方法，所開的處方是至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，該方法包括步驟(1) 測量從病人或受試者的呼出氣獲得的樣品中碳同位素標(biāo)記的C02相對(duì)于12<:02的比例，和(2) 以碳同位素標(biāo)記的0)2相對(duì)于12(:02的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了所述 的處方規(guī)定的生物活性劑。7. 依照項(xiàng)目5或6的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于一種或多種藻類。8. 依照項(xiàng)目5或6的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)是13<:標(biāo)記的脂質(zhì)。9. 依照項(xiàng)目5或6的方法，其中在步驟(i)中，處方開的是包含 至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑。本發(fā)明也提供以下能夠監(jiān)測病人或受試者遵守醫(yī)囑的制劑。10. 監(jiān)測病人或受試者遵守醫(yī)囑的口服制劑，該制劑包含至少一 種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)。11. 依照項(xiàng)目6的口服制劑，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于一種 或多種藻類。12. 包含至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和至少一種生物活性劑的 口服藥物制劑。13. 依照項(xiàng)目12的口服藥物制劑，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源 于一種或多種藻類。本發(fā)明更進(jìn)一步地提供了碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的下列用途。14. 碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)用于生產(chǎn)監(jiān)測病人或受試者遵守醫(yī)囑的 口服制劑。15.碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)用于生產(chǎn)能夠監(jiān)測病人或受試者遵守醫(yī)囑的 口服藥物制劑。16.碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)用于監(jiān)測病人或受試者對(duì)攝入口服藥物制劑 的醫(yī)囑的遵守。附圖
簡述圖l顯示了測試實(shí)施例l的結(jié)果，在測試實(shí)施例1中以8小時(shí)的間隔攝入實(shí)施例1的制劑3天，隨著時(shí)間測量呼出氣中的130:02/ ^C02度比(S13c值)。圖2顯示了測試實(shí)施例2的結(jié)果，在測試實(shí)施例2中以24小時(shí)的間隔 攝入實(shí)施例3的制劑3天，隨著時(shí)間測量呼出氣中的"C02/ 12002濃度比 (^C值)。圖3顯示兩個(gè)健康志愿者(VIt-I和Vlt-2)以24小時(shí)的間隔攝入實(shí)施 例3的制劑3天(每天在早餐之前攝入)的結(jié)果，以及隨著時(shí)間測量呼 出氣中的13002/12(302濃度比(S。C值)。在圖中，O顯示VIt-I攝入實(shí)施 例3的制劑的結(jié)果；0顯示Vlt-2攝入實(shí)施例3的制劑的結(jié)果。發(fā)明公開的內(nèi)容本發(fā)明的詳細(xì)描述如下。在本發(fā)明的方法中，監(jiān)測的對(duì)象是病人或受試者。這里使用的"病 人"用來指需要用藥物來治療疾病和/或減輕癥狀的那些人；"受試者"用 來指需要用藥物來預(yù)防和/或診斷疾病的那些人，以及在臨床試驗(yàn)和/或 其他測試中服用藥物以證實(shí)藥物功效的那些人。本發(fā)明的方法的步驟如下所述。步驟(i)在本發(fā)明的方法中，開處方規(guī)定病人或受試者攝入至少一種碳同 位素標(biāo)記的脂質(zhì)連同至少一種生物活性劑(步驟(i))。
生物活性劑是對(duì)預(yù)防、治療和/或診斷人和/或非人動(dòng)物有用的制 劑。生物活性劑包括通過酶解或水解能夠很容易地轉(zhuǎn)變?yōu)樯锘钚詣?的前體，例如前體藥物。生物活性劑的實(shí)例包括抗感染藥物(例如， 抗生素、抗真菌劑和抗病毒藥物)、抗癌藥、免疫調(diào)節(jié)劑(例如，抗 組胺劑、免疫強(qiáng)化劑和免疫抑制劑)、抗心絞痛藥、止痛藥、解熱藥、 安眠藥、鎮(zhèn)靜劑、抗酸劑、抗炎藥物、抗躁狂藥、血管擴(kuò)張劑、精神 治療藥物、麻醉藥、興奮劑、止瀉藥、止吐藥、生長促進(jìn)劑、解痙藥、 神經(jīng)肌肉藥物、血管加壓藥、降血壓藥、利尿藥、細(xì)胞毒性化合物、 抗驚厥齊IJ、關(guān)節(jié)炎治療劑、子宮松弛藥、抗肥胖齊IJ、驅(qū)蟲劑(Anthelmintics)、 緩瀉藥、激素、疫苗、維生素、膳食補(bǔ)充劑等等。這種生物活性劑可 以單獨(dú)或組合使用?？梢砸罁?jù)病人的癥狀和疾病，以及其他因素適當(dāng) 選擇待使用的生物活性劑。碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)是其中至少一個(gè)碳原子被碳同位素取代的脂 質(zhì)。用于本發(fā)明的碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)在體內(nèi)通過/3氧化分解，這導(dǎo)致 分解產(chǎn)物以同位素標(biāo)記的二氧化碳出現(xiàn)在呼出氣中，同位素標(biāo)記的二 氧化碳可用作監(jiān)測病人或受試者遵守醫(yī)囑的指標(biāo)。因此，碳同位素標(biāo) 記的脂質(zhì)優(yōu)選包含比例足以允許代謝的產(chǎn)物-同位素標(biāo)記的二氧化碳 很容易被檢測到的碳同位素。具體地，碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)總碳中碳 同位素的比例是，例如至少10%、優(yōu)選至少50%、更優(yōu)選至少90%。碳同位素可以是，例如13<:、 "c或wc，其中"C是非放射性的，因此從安全角度來說是更優(yōu)選的。碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的結(jié)構(gòu)不受限制，只要它在體內(nèi)能夠代謝并 能以二氧化碳的形式從體內(nèi)排出就可以。這種脂質(zhì)的實(shí)例包括甘油酯、 磷脂、糖脂、脂肪酸等等。具體地，甘油酯包括甘油一酯、甘油二酯、甘油三酯、聚甘油酯等等。磷脂包括磷脂酰乙醇胺、磷脂酸、磷脂酰 膽堿、磷脂酰絲氨酸及其他甘油磷脂；鞘磷脂及其他鞘磷脂；等等糖 脂包括腦苷脂類及其他鞘糖脂；甘油糖脂等等。脂肪酸包括短鏈脂肪
酸(碳數(shù)目2-4)、中鏈脂肪酸(碳數(shù)目5-10)、長鏈脂肪酸(碳 數(shù)目ll以上)等等。碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的烴鏈可以是飽合或不飽和的。烴鏈中碳原子的數(shù)目沒有限制，可以是，例如1-36，優(yōu)選10-30，更優(yōu)選16-18。脂 質(zhì)烴鏈末端在體內(nèi)被/5氧化連續(xù)切斷，因此攝取后，具有有上述數(shù)目的 碳的烴鏈的脂質(zhì)會(huì)導(dǎo)致具有脂質(zhì)衍生碳的二氧化碳連續(xù)地從呼出氣中 排出?？蓛?yōu)選使用的這種脂質(zhì)是至少一種選自由月桂酸、棕櫚酸、硬脂 酸、棕櫚油酸、油酸和亞油酸的脂肪酸；和/或至少一種選自由甘油酯、 磷脂和糖脂的成員，每個(gè)都包含來自所述至少一種脂肪酸的至少一個(gè) 酰基。特別優(yōu)選的是至少一種選自由棕櫚酸、棕櫚油酸、油酸和亞油 酸的脂肪酸；和/或至少一種選自由甘油酯、磷脂和糖脂的成員，每個(gè) 都包含來自所述至少一種脂肪酸的至少一個(gè)?；８貏e優(yōu)選的是至 少一種包含來源于至少一種脂肪酸的?；母视腿?，其中脂肪酸選 自由棕櫚酸、棕櫚油酸、油酸和亞油酸。上述脂質(zhì)可以單獨(dú)或組合使用。可以利用迄今已知的方法制備碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)。制備"C標(biāo)記的脂質(zhì)的方法的具體實(shí)例包括從一種或多種在^C標(biāo) 記的二氧化碳環(huán)境中培養(yǎng)的藻類中收集脂質(zhì)，其中通過用"C標(biāo)記的二氧化碳曝氣培養(yǎng)基可以創(chuàng)造13<:標(biāo)記的二氧化碳環(huán)境。用來曝氣的總二氧化碳中"C標(biāo)記二氧化碳的比例對(duì)應(yīng)于待從培養(yǎng)藻類中收集的"C標(biāo) 記的脂質(zhì)總碳中13(3標(biāo)記的碳的比例，因此適當(dāng)確定總二氧化碳中"C標(biāo)記的二氧化碳的比例可以獲取想得到的13(:標(biāo)記的碳比例?？梢圆捎脴?biāo) 準(zhǔn)的分離和純化過程處理培養(yǎng)的藻類以收集脂質(zhì)?？捎糜谥苽?c標(biāo)記的脂質(zhì)的藻類沒有限制，包括藍(lán)綠藻及其他種類。可以以較低的成本
生產(chǎn)這種來源于藻類的"C標(biāo)記的脂質(zhì)，而且這種脂質(zhì)的安全性高，因 此可優(yōu)選用于本發(fā)明的方法中。為病人或受試者所開的處方上的生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂 質(zhì)可以單獨(dú)或一起配制。也就是說，在前一種情況下，所開處方是分別包含生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的兩種制劑，在后一種情況 下，所開處方是包含生物活性劑和碳同位素碳標(biāo)記的脂質(zhì)的單個(gè)制劑。 為了防止不成功地?cái)z入生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)中的一種， 制備包含生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的制劑是優(yōu)選的。依照制劑的種類，病人的癥狀、病人或受試者的性別和年齡、代 謝能力等等可以適當(dāng)選擇生物活性劑的劑量，劑量通常是，例如一個(gè)成年人大約10-3000 mg/天，或者是對(duì)于成年人而言固定劑量或可變劑 量(mg/kg或mg/BSA)。依照碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的種類，病人或受試者的性別和年齡、 收集呼出氣樣品的時(shí)間、每日攝入的次數(shù)等等可以適當(dāng)選擇碳同位素 標(biāo)記的脂質(zhì)的劑量，劑量通常是，例如一個(gè)成年人每天大約1-1000毫克， 優(yōu)選10-500mg，更優(yōu)選100-200mg。如下詳細(xì)描述的是在步驟(i)中使用的"包含生物活性劑的藥物制 劑"、"包含碳同位素標(biāo)記的的脂質(zhì)的制劑"和"包含生物活性劑和碳同位 素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑"。包含生物活性劑的藥物制劑包含生物活性劑的藥物制劑的形式不受限制，只要可以口服就行， 可以是粉末、顆粒、片劑、藥丸或其他固體形式，或液體形式。它也 可以是膠囊或包衣制劑?？梢酝ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)方法配制該制劑具體地，通 過將有效量的生物活性劑和根據(jù)需要的適當(dāng)量的藥學(xué)可接受的添加劑 和/或載體配制到制劑中可以配制該制劑。說明書可以依照生物活性劑的劑量適當(dāng)選擇藥物制劑中生物活性劑的比例。包含碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的制劑包含至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的制劑的形式也不受限制，只 要可以口服就行。可以是粉末、顆粒、片劑、藥丸或其他固體形式， 或液體形式。它也可以是膠囊或包衣制劑?？梢酝ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)方法配制該 制劑具體地，通過將有效量的碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和根據(jù)需要的適當(dāng)量的藥學(xué)可接受添加劑和/或載體配制到制劑中可以配制該制劑。更 具體地說，通過，例如使碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)吸附到賦形劑或添加劑 上，然后進(jìn)行如磨碎的處理可以獲取固體制劑?？商娲氖?，通過， 例如用標(biāo)準(zhǔn)方法將碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和表面活性劑配制到一起可以 獲取液體制劑。在該制劑中，優(yōu)選依照攝入的間隔、收集呼出氣樣品的時(shí)間、碳 同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的代謝速度等等適當(dāng)控制碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的釋 放速度?？梢酝ㄟ^標(biāo)準(zhǔn)方法，具體地通過添加不溶于水的物質(zhì)、高粘 性水溶性物質(zhì)和/或類釋放速度控制載體到制劑中，和/或包覆該制劑以 依靠釋放速度控制載體和/或涂層的量控制同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的釋放速 度可以控制釋放速度。釋放控制載體的具體實(shí)例包括乙基纖維素、氨烷基異丁烯酸共聚 物RS、氫化油、巴西棕櫚蠟、單硬脂酸甘油酯及其他不溶于水的物質(zhì)； 羥丙纖維素、羥丙基甲基纖維素、甲基纖維素、黃原膠、刺槐豆膠、 藻酸及其他高粘性水溶性物質(zhì)等等。可以依照碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的劑量適當(dāng)選擇制劑中碳同位素標(biāo) 記的脂質(zhì)的比例。
該制劑用作監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的口服制劑是有用的。
包含生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑 包含至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物 制劑的形式也不受限制，只要可以口服就行?？梢允欠勰?、顆粒、片 劑、藥丸或其他固體形式，或液體形式。它也可以是膠囊或包衣制劑。 通過標(biāo)準(zhǔn)方法，具體地，通過將有效量的生物活性劑和碳同位素標(biāo)記 的脂質(zhì)和根據(jù)需要的適當(dāng)量的藥學(xué)可接受添加劑和/或載體配制到制劑 中可以生產(chǎn)該制劑。更具體地說，通過，例如使碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì) 吸附到賦形劑或添加劑上，然后進(jìn)行如磨碎的處理并與生物活性劑混 合，最后通過標(biāo)準(zhǔn)過程讓混合物成型可以獲取固體制劑?？商娲?， 通過，例如用標(biāo)準(zhǔn)方法將碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和生物活性劑與表面活 性劑和/或其他添加劑配制到一起可以獲取液體制劑。
優(yōu)選依照攝入的間隔、收集呼出氣樣品的時(shí)間、碳同位素標(biāo)記的 脂質(zhì)的代謝速度等等適當(dāng)控制碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的釋放速度。可以 用與包含碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的制劑相同的方式控制釋放速度，具體 地可以通過添加釋放速度控制載體到制劑中，和/或包覆該制劑從整體 上控制制劑的釋放速度?？商娲?，與生物活性劑混合之前的碳同位 素標(biāo)記的脂質(zhì)可以與釋放速度控制載體混合和/或與涂層一起提供，這 樣可以只控制碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的釋放速度。
可以依照生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的劑量適當(dāng)確定制劑 中他們的比例。
該制劑用作顯示出藥物制劑是有用的，其由于生物活性劑而顯示 藥理學(xué)活性，而且因?yàn)樘纪凰貥?biāo)記的脂質(zhì)可以監(jiān)測病人或受試者對(duì) 醫(yī)囑遵守?？梢员辉黾拥缴鲜鲋苿┲械奶砑觿┖洼d體的實(shí)例包括賦形劑、粘 合劑、pH調(diào)節(jié)劑、崩解劑、吸收促進(jìn)劑、潤滑劑、著色劑、矯正劑、 調(diào)味劑、芳香劑、水介質(zhì)等等。具體的實(shí)例包括乳糖、蔗糖、甘露醇、 氯化鈉、葡萄糖、碳酸鈣、高嶺土、結(jié)晶纖維素、硅酸鹽及其他賦形 劑；水、乙醇、單糖漿、葡萄糖溶液、淀粉溶液、明膠溶液、羧甲基 纖維素、羧甲基纖維素鈉、蟲膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、 羥丙纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、明膠、糊精、支鏈淀粉及 其他粘合劑；檸檬酸、檸檬酐、檸檬酸鈉、檸檬酸鈉二水化物、脫水 的磷酸一氫鈉、脫水的磷酸二氫鈉、磷酸一氫鈉及其他pH調(diào)節(jié)劑；羧 甲醚纖維素鈣、低取代的羥丙纖維素、羧甲醚纖維素、交聯(lián)羧甲醚纖 維素鈉、羧甲基淀粉鈉、交聯(lián)聚維酮、聚山梨酯80及其他崩解劑；季 銨堿、十二烷基硫酸鈉及其他吸收促進(jìn)劑；純滑石、硬脂酸鹽、聚乙 二醇、膠體硅酸、脂肪酸蔗糖酯及其他潤滑劑；黃色氧化鐵、黃色三 氧化二鐵、三氧化二鐵、/3胡蘿卜素、二氧化鈦、食品著色劑(例如， 食品藍(lán)l號(hào))、葉綠素銅、核黃素及其他著色劑；抗壞血酸、阿斯巴甜、 Hydrangeae Dulcls Folium、氯化鈉、果糖、糖精、糖粉及其他矯正劑； 水、生理鹽水及其他水介質(zhì)等等。步驟(ii)在處方規(guī)定的制劑攝入時(shí)間之后，本發(fā)明的方法隨后收集病人或 受試者的呼出氣樣品(步驟(ii))。采樣時(shí)間沒有限制，只要是在處方規(guī)定的制劑攝入時(shí)間之后就可 以，可以依照碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的種類、碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)在體 內(nèi)的代謝速度等等適當(dāng)?shù)卮_定采樣的時(shí)間。取樣時(shí)間具體地可以是處 方規(guī)定的制劑攝入時(shí)間之后的0-24小時(shí)。步驟(iii)隨后，測量收集的呼出氣樣品中碳同位素標(biāo)記的C02和12002 (此 后稱為"S碳同位素標(biāo)記的C02值")的濃度比(步驟(iii))。
呼出氣樣品中包含的標(biāo)記的C02的測定方法可以依靠使用的同位 素是放射性的，還是非放射性的來進(jìn)行選擇。常規(guī)分析技術(shù)，例如液 體閃爍計(jì)數(shù)、質(zhì)譜分析法、紅外光譜法、發(fā)射光譜法和磁共振光譜分 析都可以用于測量。從測量精度方面來說，優(yōu)選紅外光譜法和質(zhì)譜分析法。當(dāng)使用。C作為碳同位素時(shí)，可以使用紅外分光計(jì)(POCone或 UB1T-IR300， Otsuka Electronics Co,， Ltd.)來進(jìn)行簡單容易的測量。步驟(iv)測量的S碳同位素標(biāo)記的C02值被用來證實(shí)病人或受試者是否攝 取了生物活性劑(步驟(iv))。如果已經(jīng)攝取碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，那么它會(huì)在體內(nèi)分解導(dǎo)致碳同位素標(biāo)記的C02從呼出氣中排出。結(jié)果，呼出氣中S碳同位素標(biāo)記的C02的值就會(huì)連續(xù)升高。如果沒有攝取碳同 位素標(biāo)記的脂質(zhì)，那么根據(jù)給藥劑量要求呼出氣中將有較少的碳同位 素標(biāo)記的C02被排出，這樣S碳同位素標(biāo)記的C02值就降低。優(yōu)選在施用生物活性劑之前，讓病人或受試者依照與施用生物活 性劑相同的藥物治療時(shí)間表攝取僅僅包含碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的制劑 以測量呼出氣中隨時(shí)間變化的S碳同位素標(biāo)記的C02值，并依照時(shí)間表 制備呼出氣中S碳同位素標(biāo)記的C02的值的標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過將標(biāo)準(zhǔn)曲線 與處方規(guī)定的生物活性劑和碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的攝入時(shí)間之后獲取 的S碳同位素標(biāo)記的C02值的曲線比較，不僅有可能證實(shí)是否已經(jīng)攝取或沒有攝取生物活性劑，而且還可能證實(shí)是否在適當(dāng)?shù)臅r(shí)間攝取生物 活性劑。這樣的話，本發(fā)明的方法就能夠證實(shí)藥物攝入的狀態(tài)，使檢測對(duì) 醫(yī)囑遵守也成為可能。工業(yè)實(shí)用性用于本發(fā)明的碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的烴鏈的末端在體內(nèi)通過/3氧 化被連續(xù)地代謝轉(zhuǎn)變?yōu)槎趸?。因此，在攝取碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)
之后，碳同位素標(biāo)記的C02會(huì)連續(xù)地從呼出氣中排出。本發(fā)明的方法利用碳同位素標(biāo)記的C02作為攝入藥物的指標(biāo)，使我 們能夠非常容易地確認(rèn)病人或受試者是否已經(jīng)正確地?cái)z取了生物活性 劑。如果用碳同位素標(biāo)記的糖或氨基酸代替碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，那 么代謝速度會(huì)太快以至于不能在呼出氣中緩釋碳同位素標(biāo)記的C02，這 樣就難以監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑的遵守。實(shí)施例下列實(shí)施例和測試實(shí)例用來舉例說明本發(fā)明，決不是用來限制本 發(fā)明的范圍。參考實(shí)施例l生產(chǎn)來源于藻類的^C標(biāo)記的脂質(zhì)。利用已知方法制備碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)。具體地，在^C標(biāo)記的二氧化碳存在的情況下培養(yǎng)藻類細(xì)胞(藍(lán)綠藻種類)。然后，通過離心收集細(xì)胞，并用MeOH和CH2Cl2的混合物抽提細(xì)胞以獲取碳同位素標(biāo)記 的脂質(zhì)的粗制品。粗制品(1.45kg)溶于1.08kg氫氧化鈉的9L水溶液 中。在5(TC加熱溶液幾天，然后回流加熱8小時(shí)，接著讓溶液冷卻到室 溫，并用二乙醚(2L)抽提溶液五次以除去雜質(zhì)。將濃鹽酸添加到水 層調(diào)整pH到2，實(shí)施用二乙醚(2L)抽提5次的過程以收集有機(jī)層中想 要的產(chǎn)物。將有機(jī)層蒸干，并溶于二乙醚中(5L)。將活性碳(30 g) 添加到溶液中，并在室溫下攪拌混合物2小時(shí)，然后通過硅膠層析(Si02: 3-4L)以脫色。將收集的醚溶液蒸干，從而獲得450-500 g的最終產(chǎn)物。實(shí)施例l參考實(shí)施例1中獲取的。C標(biāo)記的脂質(zhì)的100 mg部分被包裝在明膠 膠囊(日本藥典，大小#0，MatsuyaCo.，Ltd.)中以獲取膠囊制劑。實(shí)施例2參考實(shí)施例1中獲取的"C標(biāo)記的脂質(zhì)的100 mg部分被放在玻璃瓶
中，并通過超聲波處理溶解在乙醇(1.0ml)中。該乙醇溶液被添加到 放入研缽中的50 mg硅酸鈣(FLORITE-RE, Eisai Co" Ltd.)中，利用研 棒混合使脂質(zhì)吸附到硅酸鈣上。風(fēng)干20分鐘后，添加200 mg顆粒化的 乳糖(DILACTOSE, Freund)并進(jìn)行混合。更進(jìn)一步地將混合物與50 mg 低取代羥丙纖維素(LH-31, Shin-Etsu Chemical Co.，Ltd.)混合，制備供 壓片機(jī)壓片的樣品。利用配備了9.5 mm直徑的平面沖壓機(jī)的 AUTOGRAPH AG-I (Shimazu Co.， Ltd.)在1噸的擠壓力下將400 mg的 樣品部分壓片以形成速溶片劑。實(shí)施例3利用與實(shí)施例2相同的方式制備緩釋片劑，除了用高粘性羥丙基甲 基纖維素(Metorose 90SH4000， Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)替換低取 代羥丙纖維素外。實(shí)施例4利用與實(shí)施例2相同的方式制備比實(shí)施例3的片劑具有更快的同位 素碳標(biāo)記的脂質(zhì)釋放速度的緩釋片劑，除了高粘性羥丙基甲基纖維素 的量降低為25mg外。測試實(shí)施例l實(shí)施下列步驟以測量攝入實(shí)施例l的膠囊制劑后， 一個(gè)健康志愿者的呼出氣中S"C02值的變化。首先將基線呼吸樣品收集到容量為大約1.2 L的襯有鋁的袋中。在 禁食10小時(shí)之后，每天以8小時(shí)的間隔(上午6:00、下午2:00和晚上10:00) 口服施用實(shí)施例l的膠囊制劑，持續(xù)3天。在第一次給藥之后的24、 48 和72小時(shí)將呼出氣樣品收集到容量為大約300 ml的襯有鋁的袋中(時(shí)間 表l)。在停止藥物治療l周后，再次以8小時(shí)的間隔口服施用實(shí)施例1 的膠囊制劑3天，但是給藥期間，在第一次給藥之后的16、 40、 64和72 小時(shí)不施用制劑。 利用紅外分光計(jì)(UbiT-IR300, Otsuka Electronics Co., Ltd.)測量呼出氣樣品中的13(:02和120:02的濃度。依照下列方程計(jì)算代表攝入制劑前后收集的呼出氣樣品中130:02/12(:02比例變化的313(:02值(DOB)。 DOB= (13C02/12C02)給藥后-(13C02/12CO)基線樣品圖l顯示了結(jié)果。當(dāng)每天以8小時(shí)的間隔(時(shí)間表l)施用實(shí)施例l 的膠囊制劑3次時(shí)，每24小時(shí)測量的S 13(302值的變化基本上是線性的。 與此相反，當(dāng)在第一次給藥后16、 40、 64和72小時(shí)不施用制劑時(shí)(時(shí) 間表2) ， S 13(:02值大大降低。結(jié)果表明通過施用實(shí)施例l的制劑并測 量呼出氣中的5 13002值可以確定藥物攝入的狀態(tài)。測試實(shí)施例2實(shí)施下列步驟以測量攝入實(shí)施例3的制劑后， 一個(gè)健康志愿者的呼 出氣中0130)2值的變化。首先將基線呼吸樣品收集到容量為大約3L的襯有鋁的袋中。在禁 食10小時(shí)之后，以24小時(shí)的間隔(每天上午6:00)口服施用實(shí)施例3的制 劑3天。在給藥后，從上午8:00到下午10:00每2小時(shí)，以及第一次給藥 后的72小時(shí)立即將呼出氣樣品收集到容量為大約300 ml的襯有鋁的袋 中。采用和測試實(shí)施例1相同的方式測量呼出氣樣品的5 13(302值。圖2顯示了結(jié)果。結(jié)果顯示，當(dāng)施用實(shí)施例3的制劑3天時(shí)，在這3 天期間，013(:02值每天的變化相似，這表明通過測量S 13002值可以確 認(rèn)對(duì)藥物攝入的遵守。測試實(shí)施例3實(shí)施下列步驟以測量攝入實(shí)施例3和4的制劑后，兩個(gè)健康志愿者 (VIt-I和Vlt-2)的呼出氣中S "C02值的變化。
首先將基線呼吸樣品收集到容量為大約1.2 L的襯有鋁的袋中。在禁食10小時(shí)之后，以24小時(shí)的間隔(每天上午6:00)口服施用實(shí)施例3的 制劑3天。隨后，在停止藥物治療至少l周之后，以24小時(shí)的間隔(每 天上午6力0)口服施用實(shí)施例4的制劑3天。在施用每種制劑期間，以24 小時(shí)間隔將呼出氣樣品收集到容量為大約300 ml的襯有鋁的袋中。采用 和測試實(shí)施例1相同的方式測量呼出氣樣品的S"C02值。圖3顯示了兩個(gè)志愿者攝入實(shí)施例3的制劑的結(jié)果。圖3顯示在施用 實(shí)施例3的制劑期間，從第一次給藥后的24小時(shí)，經(jīng)過給藥后的48小時(shí)， 直到給藥后的72小時(shí)，S。C02值基本上呈線性增加，這表明該制劑特別 適合于監(jiān)測連續(xù)使用的藥物的攝入狀態(tài)。類似地，在施用實(shí)施例4的制劑期間，513002值也逐步增加。這些 結(jié)果表明實(shí)施例4的制劑，其是緩釋片劑，能夠監(jiān)測以24小時(shí)間隔施用 的藥物的攝入狀態(tài)。
權(quán)利要求
1.監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的方法，包括步驟(i)醫(yī)囑病人或受試者攝入至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，(ii)獲取病人或受試者呼出氣體的樣品，(iii)測量樣品中碳同位素標(biāo)記的CO2相對(duì)于12CO2的比例，和(iv)以碳同位素標(biāo)記的CO2相對(duì)于12CO2的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了所述醫(yī)囑的生物活性劑。
2. 依照權(quán)利要求i的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于一種 或多種藻類。
3. 依照權(quán)利要求l的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)是"C標(biāo)記的脂質(zhì)。
4. 依照權(quán)利要求l的方法，其中在步驟(i)中，醫(yī)囑的是包含至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑。
5. 監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑的遵守的方法，醫(yī)囑的是至少一種生 物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)，包括步驟(I) 測量從病人或受試者呼出的氣體獲得的樣品中碳同位素標(biāo)記的C02相對(duì)于"C02的比例,和(2)以碳同位素標(biāo)記的0:02相對(duì)于12(:02的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了 所述醫(yī)囑的生物活性劑。
6. 依照權(quán)利要求5的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于一種 或多種藻類。
7. 依照權(quán)利要求5的方法，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)是13(:標(biāo)記的脂質(zhì)。
8. 依照權(quán)利要求5的方法，其中在步驟(1)中，醫(yī)囑的是包含至 少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)的藥物制劑。
9. 監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑的遵守的口服制劑，該制劑包含至少 一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)。
10. 依照權(quán)利要求9的口服制劑，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)來源于 一種或多種藻類。
11. 包含至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)和至少一種生物活性劑的 口服藥物制劑。
12. 依照權(quán)利要求ll的口服藥物制劑，其中碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì) 來源于一種或多種藻類。
13. 碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)在生產(chǎn)監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑的遵守 的口服制劑中的應(yīng)用。
14. 碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)在生產(chǎn)能夠監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑的 遵守的口服藥物制劑中的應(yīng)用。
15. 碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)用于監(jiān)測病人或受試者對(duì)攝入口服藥物 制劑的醫(yī)囑的遵守。
全文摘要
本發(fā)明提供了通過收集呼出氣體樣品監(jiān)測病人或受試者對(duì)醫(yī)囑遵守的高度準(zhǔn)確的方法。本發(fā)明的方法容易實(shí)施，對(duì)病人或受試者沒有什么負(fù)擔(dān)。該方法包括步驟(i)醫(yī)囑病人或受試者攝入至少一種生物活性劑和至少一種碳同位素標(biāo)記的脂質(zhì)、(ii)獲取病人或受試者呼出的氣體樣品、(iii)測量樣品中碳同位素標(biāo)記的CO₂相對(duì)于¹²CO₂的比例；和(iv)以¹²CO₂相對(duì)于碳同位素標(biāo)記的CO₂的比例為基礎(chǔ)確認(rèn)攝入了醫(yī)囑的生物活性劑。
文檔編號(hào)A61B5/083GK101128736SQ200680005640
公開日2008年2月20日 申請(qǐng)日期2006年2月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年2月23日
發(fā)明者入江康夫, 向井正志, 阿尼爾·莫達(dá)克 申請(qǐng)人:大塚制藥株式會(huì)社