專利名稱：超臨界二氧化碳萃取北冬蟲夏草黃酮類化合物的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種北冬蟲夏草黃酮類化合物的萃取方法，屬于黃酮類化合物的制取技術(shù)領(lǐng)域。特別是涉及一種通過超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實體黃酮類化合物的方法。
背景技術(shù)：
北冬蟲夏草(Cordyceps militaris(L.ex Fr.)Link)又名蛹蟲草，簡稱北蟲草，屬子囊菌亞門、核菌綱、球殼菌目、麥角菌科、蟲草屬真菌，是與冬蟲夏草極為相似的一個種。北冬蟲夏草是重要的中藥材，其性平味甘，有滋肺補腎、止血化痰的功效。北冬蟲夏草還具有抗疲勞、耐缺氧、抗衰老，特別是具有明顯的增強非特異性免疫系統(tǒng)的作用，增強巨噬細胞的吞噬功能，促進抗體形成。近年來通過大量藥理試驗表明，北冬蟲夏草還具有降血壓降血脂作用，臨床用于治療心率失常，有抗癌、抑菌作用。由于嚴格的寄生性和特殊的生態(tài)地理環(huán)境，蟲草野生資源十分稀少?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究表明人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草含有諸多活性成分如蟲草素、蟲草多糖、蟲草酸、黃酮類化合物、超氧化物歧化酶(SOD)等，其藥理藥效均能與野生蟲草媲美，因此其開發(fā)利用工作得到了相當(dāng)?shù)闹匾?。黃酮類化合物廣泛存在于自然界各類植物和大型真菌中，文獻記載約有20％的中草藥中含有黃酮類化合物，可見資源之豐富，同時大量研究表明黃酮類化合物具有多種生物活性，除利用其抗菌、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、抑制脂肪氧化酶、防治心腦血管疾病等方面也有顯著效果。
目前，有關(guān)制取蟲草黃酮類化合物的方法報道甚少，而且主要采用常規(guī)的化學(xué)溶劑提取。這些方法工藝繁雜，溶劑消耗量大，萃取收率低，產(chǎn)品質(zhì)量也不穩(wěn)定，并且造成資源浪費。因此，探索采用新的提取方法，以提高蟲草黃酮類化合物的提取率及品質(zhì)，在實際生產(chǎn)中是一個非?，F(xiàn)實的問題。
超臨界二氧化碳萃取技術(shù)是一項新興的“綠色”化工分離技術(shù)，處于臨界狀態(tài)的二氧化碳流體對溶質(zhì)具有獨特的溶劑優(yōu)點它不僅對溶質(zhì)具有極高的溶解能力，而且通過改變溫度或壓力就可容易地改變對溶質(zhì)的溶解度。因此，從人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草子實體中通過超臨界二氧化碳萃取蟲草黃酮類化合物作為醫(yī)療原料或功能性保健食品是一種經(jīng)濟可行的方法。目前有關(guān)采用超臨界二氧化碳萃取技術(shù)從人工北冬蟲夏草子實體中提取黃酮類化合物的工藝研究較少，專利未見報道。

發(fā)明內(nèi)容
技術(shù)問題本發(fā)明的目的在于提供一種從人工培養(yǎng)的北冬蟲夏草子實體中提取黃酮類化合物的方法，盡可能提高北冬蟲夏草黃酮類化合物的提取率，較好地保持其生物活性。
技術(shù)方案為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是先將人工北冬蟲夏草子實體烘干，粉碎至一定粒度，置于密閉容器中浸泡數(shù)小時后，在一定條件下，進行超臨界二氧化碳萃取，通過逐級減壓分離獲得北冬蟲夏草黃酮提取液。
本發(fā)明方法的具體步驟如下1.將人工北冬蟲夏草子實體烘干，烘干溫度為40-60℃，烘干時間為1-3小時。
2.將烘干后的人工北冬蟲夏草子實體，粉粹至粒度為40目-80目之間。
3.將粉粹后的人工北冬蟲夏草子實體干粉置密閉容器中于暗處用60-95％乙醇浸泡4-12小時后，投入到超臨界萃取裝置的萃取釜中，用超臨界二氧化碳作為溶劑，60-95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20-35Mpa，溫度為40-60℃的條件下萃取，其中液態(tài)二氧化碳流量為20-60L/h，在流程中循環(huán)使用，超臨界二氧化碳萃取時間為2-7小時。
4.萃取混合物料通入減壓分離釜中，在分離釜中進行一級減壓分離壓力為5-10Mpa，溫度為40-60℃；二級減壓分離壓力為4-7Mpa，溫度為35-50℃。最終獲得所需要的北冬蟲夏草黃酮提取液。
提取液中北冬蟲夏草黃酮類化合物的鑒別采用薄層色譜法，含量測定按分光光度法(中國藥典2005版一部附錄V A)，在510nm處測定吸光度。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)中化學(xué)溶劑提取法相比，具有以下優(yōu)點1.本發(fā)明采用先進的超臨界二氧化碳萃取技術(shù)，使得北冬蟲夏草黃酮類化合物的提取率提高，可提高15％，減少了名貴蟲草資源的浪費。
2.在提取過程中有機溶劑的使用量大大減少，可減少50％甚至更低，降低了成本，使得濃縮過程大大縮短，并且減少了污染。
3.采用傳統(tǒng)的溶劑提取法提取時間為24小時，甚至更長，本法超臨界萃取時間縮短為10小時，甚至更短，提取速率加快。
4.本發(fā)明萃取分離過程溫度低，條件溫和，能夠有效保留蟲草中類黃酮活性成分不受破壞。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步詳細說明。
實施例一取北冬蟲夏草子實體干粉230g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入95％乙醇700mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時后，投入到1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為25Mpa，溫度為45℃；分離條件為一級分離釜壓力為5Mpa，溫度為45℃，二級分離釜壓力為5Mpa，溫度為35℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動態(tài)運行2小時后，從一級分離釜和二級分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液800mL，子實體中黃酮類化合物的提取率為0.331％。
實施例二取北冬蟲夏草子實體干粉250g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入85％乙醇750mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時后，投入1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為30Mpa，溫度為50℃；分離條件為一級分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，二級分離釜壓力為5Mpa，溫度為40℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動態(tài)運行2.5小時后，從一級分離釜和二級分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液874mL。北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的提取率為0.345％。
實施例三取北冬蟲夏草子實體干粉280g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入80％乙醇900mL攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡6小時后，投入1L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為35Mpa，溫度為55℃；分離條件為一級分離釜壓力為7Mpa，溫度為50℃，二級分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，液態(tài)二氧化碳流量為30L/h，在流程中循環(huán)使用。動態(tài)運行3小時后，從一級分離釜和二級分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液1170mL。北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的提取率為0.311％。
實施例四取北冬蟲夏草子實體干粉1000g，粉碎至粒度為40目-80目之間，加入95％乙醇2L攪拌均勻，在密閉容器中置于避光暗處浸泡10小時后，投入10L的超臨界流體萃取釜內(nèi)，萃取條件為萃取壓力為35Mpa，溫度為55℃；分離條件為一級分離釜壓力為6Mpa，溫度為45℃，二級分離釜壓力為5Mpa，溫度為45℃，液態(tài)二氧化碳流量為60L/h，在流程中循環(huán)使用。動態(tài)運行6小時后，從一級分離釜和二級分離釜里得到北冬蟲夏草黃酮提取液6.89L。北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的提取率為0.316％。
權(quán)利要求
1.一種超臨界二氧化碳萃取人工培養(yǎng)北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的方法，具體步驟如下1)將人工北冬蟲夏草子實體烘干；2)將烘干后的人工北冬蟲夏草子實體粉粹；3)將粉粹后的人工北冬蟲夏草子實體干粉置密閉容器中于暗處浸泡4-12小時后，投入到超臨界萃取裝置的萃取釜中，用超臨界二氧化碳作為溶劑，60-95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20-35Mpa，溫度為40-60℃的條件下萃取，其中液態(tài)二氧化碳流量為20-60L/h，在流程中循環(huán)使用，超臨界二氧化碳萃取時間為2-7小時；4)萃取混合物料通入減壓分離釜中，在分離釜中進行一級減壓分離壓力為5-10Mpa，溫度為40-60℃；二級減壓分離壓力為4-7Mpa，溫度為35-50℃，最終獲得所需要的北冬蟲夏草黃酮提取液。
2.按照權(quán)利要求1所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實體烘干溫度為40-60℃，烘干時間為1-3小時。
3.按照權(quán)利要求1或2所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實體烘干粉碎粒度為40-80目。
4.按照權(quán)利要求1或2所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實體烘干粉用60-95％乙醇置于密閉容器中浸泡4-12小時。
5.按照權(quán)利要求3所述的超臨界二氧化碳萃取人工北冬蟲夏草子實體中黃酮類化合物的方法，其特征在于北冬蟲夏草子實體烘干粉用60-95％乙醇置于密閉容器中浸泡4-12小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種北冬蟲夏草黃酮類化合物的萃取方法，屬于黃酮類化合物的制取技術(shù)領(lǐng)域。將人工北冬蟲夏草子實體烘干粉粹后浸泡，用60－95％的乙醇做夾帶劑，在壓力為20－35Mpa，溫度為40－60℃的條件下萃取2－7小時；在分離釜中進行一級減壓分離壓力為5－10Mpa，溫度為40－60℃；二級減壓分離壓力為4－7Mpa，溫度為35－50℃，從超臨界二氧化碳萃取裝置的分離釜中獲得產(chǎn)品。本發(fā)明具有萃取溫度低、速度快、萃取率高、所得產(chǎn)品能夠有效保留蟲草中類黃酮活性成分等特點。
文檔編號A61K36/06GK1951931SQ20061009784
公開日2007年4月25日 申請日期2006年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2006年11月15日
發(fā)明者李大婧, 劉春泉, 宋江峰, 韓晨 申請人:江蘇瑞迪生科技有限公司