專利名稱：肝素口服納米乳組合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及肝素口服納米乳組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
肝素(Standard Heparin，SH)是一類糖胺聚糖，由糖醛酸和葡萄糖胺以1，4鍵連接的重復(fù)二糖單位組成的多糖鏈混合物，含10～30個(gè)二糖單位不等，分子量為4000～20000Da，平均分子量12000Da。低分子量肝素(Low Molecular WeightHeparin，LMWH)是肝素通過(guò)酶降解或化學(xué)解聚得到的低分子量組分，分子量范圍一般為3000-8000Da。臨床上SH和LMWH主要用于預(yù)防和治療血栓栓塞性疾病如深靜脈血栓、肺栓塞等。深靜脈血栓(Deep Venous Thrombosis，DVT)最常見(jiàn)的是下肢及下腔靜脈血栓形成，尤其是髂一股靜脈血栓形成。DVT可致慢性靜脈功能不全、下肢腫脹甚至潰瘍等，更嚴(yán)重的是22％-29％的DVT患者可并發(fā)致命性的肺栓塞。DVT術(shù)后發(fā)病率更高，特別是人工髖關(guān)節(jié)置換術(shù)后DVT的發(fā)生率高達(dá)40-70％。急性DVT經(jīng)典療法是住院期間靜脈注射肝素或皮下注射低分子量肝素，出院后口服抗凝藥華法林(Warfarin)6個(gè)月。由于華法令血漿蛋白結(jié)合率高達(dá)99％、與其他藥物相互作用多、有易出血等副作用，故患者在出院之前往往要經(jīng)歷數(shù)周時(shí)間進(jìn)行劑量調(diào)整和監(jiān)控，口服該藥期間還要定期檢查血小板及凝血酶原時(shí)間國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)化率，這給DVT患者的治療造成極大的不便。因此研究肝素或低分子量肝素口服制劑以代替口服華法令有利于增強(qiáng)DVT患者治療的安全性與順應(yīng)性。但是肝素或低分子量肝素屬大分子藥物，水溶性極強(qiáng)、分子量大及荷負(fù)電荷的特點(diǎn)使其難以透過(guò)胃腸粘膜吸收。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種肝素口服納米乳組合物及其制備方法。
本發(fā)明旨在通過(guò)納米乳劑型提高肝素或低分子量肝素經(jīng)腸粘膜的吸收。本發(fā)明能提高肝素經(jīng)腸粘膜通透的能力，同時(shí)增加肝素口服生物利用度。
本發(fā)明肝素口服納米乳是由油相、表面活性劑、助表面活性劑及水相按適當(dāng)比例組成的澄清透明溶液。
本發(fā)明所述肝素選自肝素、低分子量肝素、硫酸類肝素或上述成分的混合物。
所述的肝素口服納米乳，其特征在于油相是中鏈三甘酯、中鏈二甘酯或中鏈單甘酯，其中中鏈?zhǔn)侵柑兼湠镃8-C10。
所述的肝素口服納米乳，其特征在于表面活性劑選自聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯(Tween)、聚氧乙烯脂肪醇醚類(芐澤，Brij)、聚氧乙烯脂肪酸酯類(賣澤，Myrj)、氧化乙烯-氧化丙烯嵌段共聚物(泊洛沙姆，Poloxamer)、聚氧乙烯甘醇酸化的天然或氫化蓖麻油(Cremophor或HCO，BASF)、琥珀酸維生素E聚乙二醇酯(TPGS，Eastman)、聚乙二醇-8-甘油辛/癸酸酯(Labrasol，Gattefosse)、卵磷脂、或豆磷脂。在上述表面活性劑中，優(yōu)選Cremophor、Tween、TPGS和Labrasol。
所述的肝素口服納米乳，其特征在于助表面活性劑采用中鏈單甘酯、中鏈二甘酯、中鏈混合單/二甘酯、二乙二醇單乙醚(Transcutol-P)、丙二醇、聚乙二醇(分子量200-600的PEG)、乙醇或上述成分混合物。在上述助表面活性劑中，優(yōu)選中鏈單甘酯、中鏈二甘酯和中鏈混合單/二甘酯。
本發(fā)明所述的中鏈單甘酯商品名是Imwitor988(Sasol Corp.)或CapmulMCM C8(Abitec Corp.)；中鏈混合單/二甘酯商品名是Imwitor742(Sasol Corp.)、CapMumMCM(Abitec Corp.)或CapmulMCM C10(Abitec Corp.)；中鏈三甘酯商品名是Miglycol812N(Sasol Corp.)、Captex355EP、Captex350或Captex300 EP(Abitec Corp.)等。
本發(fā)明肝素口服納米乳，其特征在于所述的油相和表面活性劑的比例為24∶1-1∶6，其中優(yōu)選比例為6∶1-1∶1。
所述的表面活性劑和助表面活性劑的比例為5∶1-1∶5，其中優(yōu)選比例為3∶1-1∶3。
本發(fā)明肝素口服納米乳可以直接口服，也可以裝入硬明膠膠囊或軟明膠膠囊、腸溶硬明膠膠囊或腸溶軟明膠膠囊中，也可與固體載體如二氧化硅、硫酸鈣、海藻酸等混合，而后制成固體片劑或固體顆粒膠囊制劑口服。
本發(fā)明提供的肝素口服納米乳具有提高肝素經(jīng)腸粘膜通透的能力并增加肝素口服生物利用度的作用。


圖1是實(shí)施例1、實(shí)施例2、實(shí)施例3和肝素溶液劑經(jīng)大鼠在體原位給藥后活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)-時(shí)間曲線；圖2是實(shí)施例1、實(shí)施例4、實(shí)施例5和肝素溶液劑經(jīng)大鼠灌胃給藥后活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)-時(shí)間曲線；圖3是肝素各組制劑經(jīng)大鼠灌胃后空腸的組織切片圖。
其中，A溶液劑；B實(shí)施例1；C實(shí)施例4；D實(shí)施例5；E0.1％曲拉通
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 制備納米乳組分量(g)Miglycol 812N 0.2Tween 800.2Imwitor 742 0.15蒸餾水 0.05LMWH0.05精密稱取處方量的LMWH，蒸餾水溶解后，加入Tween 80、Imwitor742，混合均勻，再加入處方量的Miglyol812N，攪拌形成澄清透明的溶液即得。用NicompTM380ZLS型粒度激光散射測(cè)定儀(Santa Barbara，USA)測(cè)定，粒徑為27.1±2.0nm。
實(shí)施例2 制備納米乳組分量(g)Miglycol 812N 0.32Cremophor EL 0.08Imwitor 988 0.15蒸餾水0.05肝素 0.05精密稱取處方量的肝素，蒸餾水溶解后，加入Cremophor EL、Imwitor 988，混合均勻，再加入處方量的Miglyol812N，攪拌形成澄清透明的溶液即得。用NicompTM380ZLS型粒度激光散射測(cè)定儀測(cè)定，粒徑為29.2±3.5nm。
實(shí)施例3 制備納米乳組分 量(g)Miglycol 812N 0.1TPGS 0.2丙二醇0.25蒸餾水0.05LMWH 0.05精密稱取處方量的LMWH，用蒸餾水溶解后，加入TPGS、丙二醇，混合均勻，再加入處方量的Miglyol812N，攪拌形成澄清透明的溶液即得。
實(shí)施例4組分 量(g)Miglycol 812N 0.3Labrasol 0.15Transcutol-P 0.1蒸餾水0.05肝素 0.05納米乳制備時(shí)，精密稱取處方量的肝素，用蒸餾水溶解后，加入Labrasol、Transcutol-P，混合均勻，再加入處方量的Miglyol812N，攪拌形成澄清透明的溶液即得。
實(shí)施例5組分 量(g)Miglycol 812N 0.25Tween 80 0.1Imwitor 742 0.2LMWH 0.05制備時(shí)，將處方量的Miglycol 812N、Cremophor EL和Imwitor742混合并攪拌使形成澄清透明的溶液，加入LMWH，攪拌使形成混懸劑，裝入硬膠囊中即得。
實(shí)施例6本發(fā)明應(yīng)用活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)反映肝素納米乳口服后在體內(nèi)的藥理效應(yīng)，結(jié)果顯示，血漿中肝素濃度越高，APTT越長(zhǎng)。
本發(fā)明肝素口服納米乳進(jìn)行在體原位腸袢實(shí)驗(yàn)取體重250g～280g的SD大鼠24只，隔夜禁食(可自由飲水)，稱重后腹腔注射水合氯醛(6.5％)溶液1ml/100g，麻醉后將其背位固定于手術(shù)臺(tái)板上，作頸動(dòng)脈插管以供取血用。大鼠隨機(jī)分為4組，沿腹中線剪開(kāi)腹部，空腸注射肝素劑量為50mg/kg的各組制劑，分別是肝素生理鹽水溶液(0.2ml)以及本發(fā)明實(shí)施例1-3。上述各組均于給藥前及給藥后不同時(shí)間取血0.45ml，加至已含有3.2％枸櫞酸鈉溶液0.05ml的離心管中，混勻，6000rpm離心10min，取血漿迅速貯存于-20℃冰箱中，應(yīng)用活化部分凝血活酶時(shí)間測(cè)定試劑盒測(cè)定APTT，APTT-時(shí)間曲線見(jiàn)圖1。結(jié)果顯示本發(fā)明肝素口服納米乳實(shí)施例1-3空腸給藥后血漿APTT較溶液劑顯著延長(zhǎng)，表明本發(fā)明肝素納米乳能顯著增加肝素經(jīng)腸粘膜的通透能力。
本發(fā)明肝素口服納米乳進(jìn)行灌胃給藥實(shí)驗(yàn)取體重250g～280g的SD大鼠24只，隔夜禁食，自由飲水，將大鼠隨機(jī)分為4組，每組6只。大鼠灌胃給予肝素劑量為50mg/kg的各組制劑，分別是肝素生理鹽水溶液(0.2ml)以及本發(fā)明實(shí)施例1、實(shí)施例4和實(shí)施例5。分別于給藥前及給藥后不同時(shí)間眼眶取血0.45ml，加至已含有3.2％枸櫞酸鈉溶液0.05ml的離心管中，混勻，6000rpm離心10min，取血漿迅速貯存于-20℃冰箱中，測(cè)定APTT，不同時(shí)間APTT曲線見(jiàn)圖2所示。結(jié)果顯示，較之溶液劑，本發(fā)明肝素口服納米乳實(shí)施例1和實(shí)施例4-5經(jīng)大鼠灌胃后均顯著延長(zhǎng)血漿APTT，表明本發(fā)明肝素口服納米乳能顯著增加肝素口服生物利用度。
本發(fā)明肝素口服納米乳毒性考察取隔夜禁食的體重250g～280g的SD大鼠數(shù)只，用肝素溶液劑(0.2ml)、本發(fā)明實(shí)施例1和實(shí)施例4-5經(jīng)大鼠灌胃(肝素50mg/kg)后1h，用乙醚麻醉大鼠至死，剪開(kāi)腹部，取出空腸段，用pH6.8PBS沖洗后置于多聚甲醛溶液中，作石蠟切片，用蘇木精和曙紅染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察小腸絨毛變化，觀察空腸粘膜是否有絨毛融合、脫落等損傷，結(jié)果見(jiàn)圖3。圖3A顯示口服肝素溶液劑后絨毛保持完整；圖3B顯示口服本發(fā)明實(shí)施例1后腸絨毛沒(méi)有損傷；圖3C和3D顯示口服本發(fā)明實(shí)施例4和實(shí)施例5后腸絨毛略有變短及脫落現(xiàn)象，但總體上保持絨毛較完整的形態(tài)；圖3E為陽(yáng)性對(duì)照，顯示口服0.1％曲拉通后腸絨毛已經(jīng)嚴(yán)重融合并且脫落。以上實(shí)驗(yàn)表明肝素口服納米乳對(duì)腸粘膜幾乎沒(méi)有毒性。
權(quán)利要求
1.一種肝素口服納米乳組合物，其特征是由油相、表面活性劑、助表面活性劑和/或水相制成澄清透明溶液，所述的油相與表面活性劑的比例為24∶1-1∶6，所述的表面活性劑與助表面活性劑的比例為5∶1-1∶5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素口服納米乳組合物，其特征是所述肝素選自肝素、低分子量肝素、硫酸類肝素或上述成分的混合物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述油相是中鏈三甘酯、中鏈二甘酯、中鏈單甘酯或上述混合物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述油相其中中鏈?zhǔn)翘兼淐8-C10。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述表面活性劑選自聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、聚氧乙烯脂肪醇醚類、聚氧乙烯脂肪酸酯類、氧化乙烯-氧化丙烯嵌段共聚物、聚氧乙烯甘醇酸化的天然或氫化蓖麻油、琥珀酸維生素E聚乙二醇酯、聚乙二醇-8-甘油辛酸/癸酸酯、卵磷脂或豆磷脂。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述表面活性劑是聚氧乙烯甘醇酸化的天然或氫化蓖麻油、聚氧乙烯失水山梨醇脂肪酸酯、琥珀酸維生素E聚乙二醇酯或聚乙二醇-8-甘油辛/癸酸酯。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述的助表面活性劑選自中鏈單甘酯、中鏈二甘酯、中鏈混合單/二甘酯、二乙二醇單乙醚(Transcutol P)、丙二醇、聚乙二醇(分子量200-600的PEG)、乙醇或上述混合物。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述的助表面活性劑是中鏈單甘酯、中鏈二甘酯或中鏈混合單/二甘酯。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述及的肝素口服納米乳組合物，其特征在于油相與表面活性劑的比例為6∶1-1∶1。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述及的肝素口服納米乳組合物，其特征在于表面活性劑與助表面活性劑的比例為3∶1-1∶3。
11.根據(jù)權(quán)利要求1所述及的肝素口服納米乳組合物，其特征在于所述肝素口服納米乳直接口服，或裝入硬明膠膠囊或軟明膠膠囊或腸溶硬明膠膠囊或腸溶軟明膠膠囊；或與固體載體二氧化硅、硫酸鈣或海藻酸混合制成固體片劑或固體顆粒膠囊制劑口服。
全文摘要
本發(fā)明屬藥物制劑領(lǐng)域，涉及肝素口服納米乳組合物及其制備方法。本發(fā)明由油相、表面活性劑、助表面活性劑和(或)水相按適當(dāng)比例制成澄清透明溶液，其中油相與表面活性劑的比例為24∶1－1∶6，表面活性劑和助表面活性劑的比例為5∶1－1∶5。本發(fā)明肝素口服納米乳能顯著提高肝素經(jīng)腸粘膜通透的能力并增加肝素口服生物利用度，且對(duì)腸粘膜幾乎沒(méi)有損傷。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1839876SQ20061002350
公開(kāi)日2006年10月4日 申請(qǐng)日期2006年1月18日 優(yōu)先權(quán)日2006年1月18日
發(fā)明者沈騰, 徐惠南, 翁偉宇, 張建芳 申請(qǐng)人:復(fù)旦大學(xué)