專利名稱：結(jié)晶雷巴米特的水性眼科懸浮液的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及不需要再分散并且表現(xiàn)出顯著透明性和穩(wěn)定性的水性眼科懸浮液，其包括雷巴米特[化學(xué)名稱2-(4-氯苯甲?；被?-3-(2-喹諾酮-4-基)丙酸]作為活性成分，并且涉及制備它的方法。
背景技術(shù)：
在本發(fā)明的水性懸浮液中作為活性成分的雷巴米特或者它的鹽，是以可用作抗?jié)兯幬锼?。另外，雷巴米特具有增加眼中杯狀?xì)胞密度的作用，一種增加眼中粘液的作用，以及增加淚液的作用，并且已知作為治療干眼，即，干眼綜合征的藥劑(JP-A-9-301866)。
Sugimoto和Hirakawa報道了用于提供細(xì)晶粒晶體的方法，其包括在聚合物化合物和/或表面活性劑的存在下，用酸對由不溶性的酸化合物和堿形成的水溶性鹽中和(JP-A-50-121414)。另外，Hirakawa等，詳細(xì)報道了通過上述方法對奧索利酸的微粉化[YAKUGAKUZASSHI 102(10)951-959(1982)，同上103(6)690-695(1983)，同上103(11)1215-1218(1983)，以及同上103(11)1190-1194(1983)]。此外，Hirakawa等報道了他們通過上述方法，成功地將苯妥英和苯巴比妥微粉化為平均粒徑最大僅僅為3-4μm[YAKUGAKU ZASSHI 104(1)91-96(1984)]。Sato等也報道了通過中和，使溶于酸或堿的不溶化合物微粉化的方法(JP-A-55-139319)。
Pranab Bagchi等報道了用于制備納米粒子的方法，其包括用堿溶解藥物化合物，并且在表面改性劑和表面活性劑的存在下用酸對其進(jìn)行中和(US專利5,560,932，5,662,883，5,665,331，和5,716,642)。
如上所述，用于制備微晶粒晶體的方法，包括在聚合物化合物和/或表面活性劑存在下用酸中和由酸性化合物和堿形成的水溶性鹽，是已知的現(xiàn)有技術(shù)。然而，如在上面苯妥英和苯巴比妥微的例子中所示的那樣，微粉化的尺寸可能大體上取決于化合物的種類，因此很難對其進(jìn)行預(yù)計。此外，關(guān)于雷巴米特至今為止沒有任何相似的報道。通常，即使微粉化導(dǎo)致了亞微細(xì)粒水平，該懸浮液將表現(xiàn)出白色的乳狀特征；相應(yīng)地，沒有任何關(guān)于如本發(fā)明所公開的制備適合眼科用途的高透明性溶液的方法的報道。此外，沒有任何關(guān)于通過將由結(jié)晶制備的懸浮液的pH調(diào)整到3-7并且然后攪拌并且/或分散該混合物的方法來制備具有令人驚訝地高透明性的懸浮液的方法的報道。此外，沒有任何關(guān)于通過另外的透析過程制備具有顯著提高的透明性懸浮液的方法的報道。另外，沒有任何關(guān)于制備長標(biāo)距和短標(biāo)距之間的比例不少于4的表現(xiàn)出特定透明性的雷巴米特針狀晶體的方法的報道。
本發(fā)明的公開雷巴米特可以溶解于堿性水溶液中，但是雷巴米特在中性溶液中的溶解度特別低。另一方面，高pH的滴眼液不適合于涉及角膜結(jié)膜傷害的失調(diào)，例如，干眼。另外，即使在含有雷巴米特的堿性溶液的情況下，雷巴米特晶體可能偶爾容易沉淀，因此開發(fā)雷巴米特水性眼科產(chǎn)品被認(rèn)為是困難的。
JP-A-9-301866公開了含有雷巴米特的中性水懸浮液，但是該懸浮液在保留很長時間時可能形成沉淀層。因此，為了再次分散，該懸浮液需要被很好地?fù)u晃。另外，這樣的懸浮液產(chǎn)品可能被認(rèn)為具有一些缺點(diǎn)，例如遭受視力模糊的痛苦，并且當(dāng)泄漏該懸浮液的時侯，由于該懸浮液產(chǎn)品是白色的眼科懸浮液，因此在衣服上形成了一些白點(diǎn)。
因此，希望開發(fā)一種含有雷巴米特的眼科產(chǎn)品，其不必再分散，具有在使用時足夠愜意感覺的透明性，并且表現(xiàn)出不傷害遭受干眼之苦的病人的角膜結(jié)膜的中性至弱酸性的pH。
本發(fā)明的發(fā)明人經(jīng)過深入研究達(dá)到了上述目的并且發(fā)現(xiàn)了，表現(xiàn)出優(yōu)異的再分散性和與其預(yù)期相反的改進(jìn)透明性的含雷巴米特的水性眼科懸浮液可以通過混合至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含有雷巴米特水溶性鹽的水溶液(暴露于超聲波)而制得?；谠撔碌陌l(fā)現(xiàn)，完成了本發(fā)明。
本發(fā)明涉及適用于滴眼液的含結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其包括至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含雷巴米特水溶性鹽的水溶液的混合物。
本發(fā)明還涉及下列
上述含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其中用堿將該pH值調(diào)節(jié)到5-7的范圍；含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其可以通過將堿加入到上述懸浮液中來將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，并且然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)來生產(chǎn)；含有結(jié)晶雷巴米特的無菌水性眼科懸浮液，其可以通過將堿加入到上述懸浮液中來將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)，并且過濾該混合物用來滅菌而生產(chǎn)；上述含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其中用水將通過透析濃縮的懸浮液中的雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5；上述含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其中結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液在640nm處具有不低于20％的透射因數(shù)；以及上述含有結(jié)晶雷巴米特的水性眼科懸浮液，其中結(jié)晶雷巴米特的形狀是標(biāo)準(zhǔn)的針狀晶體，其長標(biāo)距少于1000nm并且短標(biāo)距長度少于60nm，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之比不少于4。
此外，本發(fā)明涉及用于制備結(jié)晶瑞巴特水性懸浮液的方法，其包括混合至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含雷巴米特水溶性鹽的水溶液；一種用于制備含有結(jié)晶瑞巴特的水性眼科懸浮液的方法，其包括向由上述方法制備的水性懸浮液中加入堿將pH值調(diào)節(jié)到3-7的范圍，分散并且/或透析該混合物，并且然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)；以及一種用于制備結(jié)晶瑞巴特的無菌的水性眼科懸浮液的方法，其包括向由上述方法制備的水性懸浮液中加入堿將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)，并且過濾該混合物用于滅菌。
通過下面的描述確定了其它發(fā)明。
本發(fā)明的含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液可以通過混合至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含雷巴米特水溶性鹽的水溶液，并且使該結(jié)晶雷巴米特結(jié)晶來制備。此外，含有結(jié)晶雷巴米特的水性眼科懸浮液可以通過將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)來制備。
上述雷巴米特的結(jié)晶化可以通過下面的方式來進(jìn)行(i)使含有至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物的水性酸溶液與含有雷巴米特水溶性鹽的水溶液混合，或者(ii)使水性酸溶液與含有雷巴米特水溶性鹽和至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物的水溶液混合，或者(iii)使含有至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物的水性酸溶液與含有雷巴米特水溶性鹽和至少一種選自相同水溶性聚合物和表面活性劑的化合物的水溶液混合。
在本發(fā)明的水性酸溶液中所使用的酸可以是常規(guī)的酸例如鹽酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸、檸檬酸等，優(yōu)選鹽酸。
本發(fā)明的雷巴米特鹽可以用常規(guī)的堿例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙醇胺、tromethanol(三-[羥甲基]氨基甲烷)、甲基葡氨、二乙醇胺等形成，并且并且優(yōu)選使用作為水溶性鹽的氫氧化鈉的鹽。雷巴米特可以被用作上述鹽的形式或者用作游離酸，只是當(dāng)用作游離酸的時侯，其應(yīng)該與等摩爾或更多量的上述堿一起使用。上述酸的量優(yōu)選至少是需要中和上述堿所需的量。用于混合上述溶液的方法優(yōu)選包括，但不限于，在通常用于配制藥物的攪拌/分散機(jī)，例如分散器、均混器和均化器中，伴隨剪切力的混合程序。另外，該方法可以包括在混合過程中暴露于超聲波下。
本發(fā)明的水溶性聚合物或表面活性劑包括，例如，聚乙烯醇、羥丙基纖維素、羥乙基纖維素、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇(Macrogol)、聚山梨醇酯80、羧甲基纖維素鈉、羧基乙烯基聚合物、水溶性殼聚糖、軟骨素硫酸鈉、藻酸鈉、聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇(例如，聚氧乙烯[160]聚氧丙烯[30]二醇、聚氧乙烯[196]聚氧丙烯[67]二醇)、聚氧乙烯氫化蓖麻油40、聚氧乙烯氫化蓖麻油60、聚氧化40硬脂酸酯等。
在上述例子中，羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮和聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇是優(yōu)選的，并且更優(yōu)選的是羥丙基甲基纖維素和聚乙烯吡咯烷酮，特別優(yōu)選的是羥丙基甲基纖維素。
使用于本發(fā)明的羥丙基甲基纖維素中的甲氧基含量和羥丙基含量分別優(yōu)選為19-30％和4-12％，更優(yōu)選為28-30％和7-12％。羥丙基甲基纖維素的粘度等級(2％(w/v)水溶液)優(yōu)選少于50mm2/s，更優(yōu)選不超過15mm2/s，甚至更優(yōu)選6mm2/s。在所制備的懸浮液中所加入的羥丙基甲基纖維素的濃度優(yōu)選為0.1-10％(w/v)，更優(yōu)選0.5-5％(w/v)，甚至更優(yōu)選1-3％(w/v)。雷巴米特和羥丙基甲基纖維素的濃度比優(yōu)選為20∶1-1∶20，更優(yōu)選2∶1-1∶6。
本發(fā)明的聚乙烯吡咯烷酮的分子量優(yōu)選不超過200,000，更優(yōu)選不超過40,000。在所制備的懸浮液中所加入的聚乙烯吡咯烷酮的濃度優(yōu)選為0.1-10％(w/v)，更優(yōu)選0.3-5％(w/v)，進(jìn)一步優(yōu)選0.5-3％(w/v)。雷巴米特和聚乙烯吡咯烷酮的濃度比優(yōu)選為20∶1-1∶20，更優(yōu)選為4∶1-1∶6。
本發(fā)明中所使用的聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇是聚氧乙烯[160]聚氧丙烯[30]二醇和聚氧乙烯[196]聚氧丙烯[67]二醇。在所制備的懸浮液中，聚氧乙烯-聚氧丙烯乙二醇或者聚山梨醇酯80的加入量優(yōu)選為0.001％-1％(w/v)，更優(yōu)選0.01％-0.1％(w/v)。
另外，優(yōu)選應(yīng)用羥丙基甲基纖維素與聚山梨醇酯80或者聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇的組合以及聚乙烯吡咯烷酮和聚山梨醇酯80或聚氧乙烯聚氧丙烯乙二醇的組合。
本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過經(jīng)過向如上所述的結(jié)晶化制備的含結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液中加入堿來將pH調(diào)節(jié)到3-7，然后攪拌并且分散該混合物進(jìn)一步提高了水性懸浮液的再分散性和透明性。
在這里所使用的堿可以與上述堿相同。
在這里所使用的攪拌和分散機(jī)是用于藥物配制的常規(guī)攪拌和分散機(jī)，例如分散器、均混器和均化器，優(yōu)選使“液體中的聚集顆?！庇行Х稚⒌臄嚢韬头稚C(jī)。優(yōu)選的例子包括旋轉(zhuǎn)均化器例如ROBOMICS(TOKUSHU KIKA KOGYO CO.，LTD)和CLEARMIX，濕型噴射碾磨和高壓均化器。特別是，在使用篩子與轉(zhuǎn)子以高速反向旋轉(zhuǎn)來產(chǎn)生強(qiáng)液液剪切力的CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)中，如上所制備的含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液的透明度被顯著提高。具體而言，結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液與作為添加劑的羥丙基甲基纖維素一起表現(xiàn)出令人驚訝地高透明度。
本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，通過附加地透析(即，透析濾過法)通過前面的結(jié)晶化制備的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，進(jìn)一步提高了透明度。
在這里所使用的透析機(jī)包括用于藥物配制的常規(guī)透析機(jī)例如Pellicon(Millipore Japan)，Prostak(Millipore Japan)，和Sartocon(Sartorius)。在透析的過程中，當(dāng)含有結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液的pH低的時侯，由于聚集作用，透析膜上的流動很低；然而，當(dāng)pH高的時侯，雷巴米特被溶解，因此含量被降低。因此，希望在pH為3-7，優(yōu)選pH4-7，更優(yōu)選pH5-7的懸浮液中進(jìn)行該透析程序。
當(dāng)用透析機(jī)除去鹽的時侯，結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液與作為添加劑的羥丙基甲基纖維素一起表現(xiàn)出令人驚訝地高透明度。因此，有可能配制適合于即使在升高的溫度下外貌也不發(fā)生變化的穩(wěn)定滴眼液的懸浮液。
上述透析過程和分散/攪拌過程可以在每一個過程中單獨(dú)進(jìn)行或者結(jié)合進(jìn)行；或者分散/攪拌過程可以在透析過程之后進(jìn)行；或者相反透析過程可以在分散/攪拌過程之后進(jìn)行。
該懸浮液通過透析過程被濃縮，因此，通過用純凈水稀釋該濃縮的懸浮液可以制得濃度在0.1％(w/v)-10％(w/v)，優(yōu)選0.5％(w/v)-5％(w/v)中的任一濃度的結(jié)晶雷巴米特懸浮液。
此外，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)懸浮液中雷巴米特的晶體形狀是通過上述方法控制的并且所形成的懸浮液的外觀通過該方法得到了改進(jìn)。
在懸浮液中可以優(yōu)選給出長標(biāo)距低于1000nm，短標(biāo)距低于60nm，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之比不少于4的結(jié)晶雷巴米特。
例如，當(dāng)使用聚乙烯吡咯烷酮作為添加劑的時侯，通過上述制備方法可以制備標(biāo)準(zhǔn)針狀晶體的懸浮液，其具有少于300nm的長標(biāo)距和低于60nm的短標(biāo)距，優(yōu)選約200nm的長標(biāo)距和約40nm的短標(biāo)距，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之比約為5。并且該懸浮液表現(xiàn)出優(yōu)選的分散性和良好的通過0.2μm過濾器的濾過率。此外，例如當(dāng)使用羥丙基甲基纖維素作為添加劑的時侯，通過上述制備過程可以制備規(guī)則的超針狀晶體，其具有少于1000nm的長標(biāo)距和低于30nm的短標(biāo)距，優(yōu)選少于50nm-少于1000nm的長標(biāo)距和5-20nm的短標(biāo)距，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之比大于7。并且當(dāng)將該懸浮液與分散過程和透析過程結(jié)合的時侯，可以給出具有非常高的透明度并且能夠通過0.2μm過濾器的懸浮液。
例如，上面所制備的結(jié)晶雷巴米特的懸浮液可以含有通過鹽酸與氫氧化鈉的中和所制備的氯化鈉，這使得有可能制備滲透壓為約1的眼科懸浮液。當(dāng)該懸浮液由于透析過程或其它過程而張力減退的時候；為了使其與淚液等張力，使用了通常使用于滴眼液中的氯化鈉、氯化鉀、甘露醇、甘油、山梨醇和/或葡萄糖，特別優(yōu)選甘油。
通過加入pH調(diào)節(jié)劑例如酸，例如鹽酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸和檸檬酸；或者堿，例如，氫氧化鈉、氫氧化鉀、三乙醇胺、tromethanol(三[羥甲基]氨基甲烷)、甲基葡胺和二乙醇胺來將該制劑的pH調(diào)節(jié)到5-7，以至于可以降低對眼睛的刺激。
另外，可以進(jìn)一步向該制劑中加入通常使用于滴眼液中的各種添加劑，例如緩沖劑、防腐劑(殺菌劑)、穩(wěn)定劑等。緩沖劑的例子包括乙酸和醋酸鹽例如醋酸鈉、檸檬酸和檸檬酸鹽；磷酸鹽例如磷酸二氫鈉，磷酸氫鈉、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀等；氨基酸鹽例如ε-氨基己酸、谷氨酸鈉等；硼酸和硼酸鹽。
防腐劑的例子包括季銨鹽例如苯扎氯銨、苯索氯銨等；陽離子化合物例如葡糖酸氯己定等，對羥基苯甲酸酯例如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯等；醇類化合物例如氯丁醇、苯甲醇等；脫氫乙酸鈉、乙基汞硫代水楊酸鈉；等。
穩(wěn)定劑的例子包括抗壞血酸和它的鹽、生育酚、硫代硫酸鈉、亞硫酸氫鈉、依地酸鈉等。
本發(fā)明的眼科懸浮液還可以作為沒有受到微生物污染的單劑量型(無防腐劑型)提供。
應(yīng)該注意到，迄今為止，不可能制備出不需要再分散并且表現(xiàn)出顯著透明度的包括雷巴米特的水性眼科懸浮液。然而，首先，通過混合至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液例如鹽酸和含有雷巴米特水溶性鹽的水溶液來給出表現(xiàn)出pH1-3的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液；并且接下來，向所述的懸浮液中加入堿來調(diào)節(jié)該pH；然后攪拌/分散該混合物并且通過透析方法除去鹽分；最后有可能制備含有雷巴米特作為活性成分的水性眼科懸浮液，其是中性至弱酸性并且不需要被再分散，具有有利的透明度和穩(wěn)定性。根據(jù)本發(fā)明的方法，有可能通過過濾除菌來使該懸浮液無菌并且因此考慮到防腐劑活性成分不是必要的，這是很大的工業(yè)優(yōu)勢。另外，通過本發(fā)明的方法制備的雷巴米特水性眼科懸浮液有可能足夠穩(wěn)定而作為藥物產(chǎn)品。
本發(fā)明的眼科懸浮液可以除去病人的視力模糊或者不舒適，因此將預(yù)期遭受干眼之苦的病人容易接受該懸浮液，并且本發(fā)明可以對醫(yī)藥領(lǐng)域提供巨大的貢獻(xiàn)。
附圖簡述

圖1顯示了在CLEARMIX分散后起始溶液的透射因數(shù)。
圖2顯示了在透射電子顯微鏡下，來自實施例6(1)中所示的2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)HPMC[TC-5E]的結(jié)晶雷巴米特的形狀。
圖3顯示了在透射電子顯微鏡下，來自實施例7(1)中所示的2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)PVPK 25的結(jié)晶雷巴米特的形狀。
圖4顯示了在透射電子顯微鏡下，來自實施例13中所示的2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E]的結(jié)晶雷巴米特的形狀。
實施本發(fā)明的最佳方式在下文中，通過下面的實施例進(jìn)一步描述了本發(fā)明，但是不應(yīng)該認(rèn)為受到這些實施例的限制。
在這些實施例中所應(yīng)用的縮寫如下羥丙基甲基纖維素(HPMC，Shin-Etsu Chemical Co.，LTD，級別TC-5E)HPMC(TC-5E)或TC-5E。
聚乙烯吡咯烷酮(PVP，BASF，級別Kollidon25)PVP(K-25)。
聚乙烯吡咯烷酮(PVP，BASF，級別Kollidon17PF)PVP(K-I7PF)。
聚氧乙烯[160]聚氧丙烯[30]二醇(PluronicF68[PF68]，BASF，級別Lutrol F68)PluronicF68或PF68。
聚氧乙烯[196]聚氧丙烯[67]二醇(PluronicF127，Asahi DenkaCo.，LTD.)PluronicF127或PF127。
實施例1通過下列程序制備1L包括2％(w/v)結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液。
使12ML 10N鹽酸(14.2g，0.12mol)、68mL純凈水和200mL含有表1中所列的一些添加劑的水溶液(添加劑的濃度是將被制備的希望的懸浮液產(chǎn)品的5倍)混合來制備鹽酸添加劑溶液。向700mL通過將純凈水加入到4.4g氫氧化鈉(0.11mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入20g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYOCO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用Ultrasonic Disrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波。然后，將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到6.0-6.5。通過將該液體的體積增加到1L而制備了含有2％(w/v)結(jié)晶雷巴米特和添加劑的希望的水性懸浮液。該懸浮液包括約0.7％(w/v)氯化鈉(約0.12mol)，其是通過鹽酸和氫氧化鈉之間的中和形成的。
實施例2用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYO CO.，LTD)，以10,000rpm，對800ML通過例子1的程序制備的含有2％(w/v)結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液攪拌10分鐘。
對實施例1和實施例2的評價用激光衍射粒徑分布分析儀(SALD 3000J，Shimadzu Corporation)測量在分散程序之前和之后的懸浮液的粒徑。在超聲波下，使用0.2％(w/v)HPC-SL溶液作為分散介質(zhì)，在用于分析的循環(huán)池中測量的粒徑被稱為“初級粒徑”；而不在超聲波下，使用純凈水作為分散介質(zhì)，在間歇式電解池中測量的粒徑被稱為“次級粒徑”。測量這兩種粒徑。次級粒徑顯示了與初級粒徑相比更有效的懸浮液凝聚性。為了評價這些試樣的透明度，用純凈水將2％(w/v)懸浮液稀釋10倍(稀釋成0.2％(w/v)溶液)，并且用分光光度計(Shimadzu Recording分光光度計，UV-240)測量稀釋溶液在640nm處的透射因數(shù)。
結(jié)果顯示于表1中。含有再結(jié)晶體的不含添加劑的溶液的初級粒徑是1μm，并且次級粒徑是約7μm。當(dāng)將1％(w/v)HPMC(TC-5E)加入到含有再結(jié)晶體的不含添加劑的溶液中并且用ROBOMICS分散該混合物的時侯，則初級粒徑降低到0.3μm并且次級粒徑降低到0.6μm。從這些結(jié)果，清楚地發(fā)現(xiàn)溶液中含有再結(jié)晶體的顆粒被凝聚。
向含有再結(jié)晶雷巴米特的懸浮液中加入了水性聚合物或表面活性劑，在10倍的稀釋液(0.2％(w/v)溶液)中，與沒有添加劑的溶液的情況相比，表現(xiàn)出顯著改進(jìn)的透明度。此外，含有水性聚合物或表面活性劑的懸浮液的初級粒徑，在用ROBOMICS分散后，變得小于沒有添加劑的懸浮液的粒徑。
表1.對實施例1和2中含有2％(w/v)雷巴米特的水性懸浮液的評價

*當(dāng)上述添加劑的濃度沒有表示在上表中的時侯，其意味著在制備該懸浮液之后，該濃度是1％(w/v)。
**僅僅向用ROBOMICS分散的而沒有任何添加劑的懸浮液加入1％(w/v)HPMC(TC-5E)，然后用ROBOMICS對其分散。
實施例3用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對800ML通過實施例1的程序制備的含有2％(w/v)結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液攪拌30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約17,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)。用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Microtrac UPA and OtsukaElectronics Co.，Ltd.ELS-8000)測量分散的懸浮液的平均粒徑。在640nm處用分光光度計(Shimadzu Recording spectrophotometer，UV-240)測量用純凈水稀釋2％(w/v)溶液10倍所制備的溶液(0.2％(w/v)溶液)和原始溶液2％(w/v)懸浮液的平均粒徑來給出透射因數(shù)，并且結(jié)果顯示于表2中。當(dāng)使用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUECO.，LTD.)用于分散的時候，與使用ROBOMICS以10,000rpm分散的懸浮液的情況相比，懸浮液的粒徑變小并且透射因數(shù)顯著增加。另外，分散的懸浮液變得可能通過0.2μm過濾器被過濾。
表2

實施例4根據(jù)實施例1的程序?qū)?-4L含有2％(w/v)雷巴米特的水溶液進(jìn)行結(jié)晶。通過與1L制劑的量成比例計算來安排每一種材料的量。另外，在結(jié)晶的過程中制備沒有超聲波處理的懸浮液。用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包括2％(w/v)雷巴米特的水性懸浮液進(jìn)行分散，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)。用動態(tài)光散射粒徑分析儀(MalvernNano-ZS)測量分散的懸浮液的平均粒徑。用分光光度計(Shimadzu記錄光譜儀，UV-240)測量用純凈水稀釋2％(w/v)溶液10倍所制備的溶液(0.2％(w/v)溶液)和原始溶液2％(w/v)懸浮液的平均粒徑來給出在640nm處的透射因數(shù)，并且結(jié)果顯示于表3和圖1中。
在結(jié)晶程序過程中加入了HPMC(TC-5E)的產(chǎn)品，當(dāng)在結(jié)晶的過程中暴露于超聲波的時侯，表現(xiàn)出增加的透明度和改進(jìn)的過濾性。在640nm的透射因數(shù)與所加入的HPMC(TC-5E)的濃度在1-3％(w/v)的范圍內(nèi)成正比。
表3.對實施例4中的含有2％(w/v)雷巴米特的水性懸浮液的評價

實施例5根據(jù)實施例4的程序，用透析機(jī)(Millipore，PelliconXL50)對通過用CLEARMIX分散制備的含有1％(w/v)HPMC(TC-5E)作為添加劑的試樣濃縮并且除去鹽分。在透析后，向所形成的溶液中加入純凈水來再一次制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液。就透析前和后的懸浮液，用動態(tài)光掃描粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)對它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)進(jìn)行測量，用分光光度計測量在640nm處2％(w/v)懸浮液的透射因數(shù)，并且結(jié)果顯示于表4中。
當(dāng)用透析除去鹽分的時侯，粒徑變小并且與我們的預(yù)期相反，它的透射因數(shù)顯著增加。
表4.在透析之前和之后2％(w/v)雷巴米特懸浮液(包括1％(w/v)HPMC[TC-5E])的平均粒徑以及在640nm的透射因數(shù)

實施例6使12ML 10N鹽酸(14.2g，0.12mol)、68mL純凈水和200mL 5％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向700mL通過將純凈水加入到4.4g氫氧化鈉(0.11mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入20g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用UltrasonicDisrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波下。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.0。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包括雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
由濃縮的并且除去鹽分的試樣制備不含等滲劑的試樣和含有甘油作為等滲劑的試樣。向每一種試樣中加入純凈水來形成兩種2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
(1)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)HPMC(TC-5E)(2)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)HPMC(TC-5E)+2.5％(w/v)甘油將這些試樣中的每一種都分成3種溶液并且將它們儲存在4℃、60℃以及在循環(huán)條件下(在4℃12個小時；在40℃12個小時；重復(fù)進(jìn)行)。用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)測量它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)，并且用分光光度計測量這些2％(w/v)懸浮液在640nm處的透射因數(shù)，并且結(jié)果顯示于表5中。
根據(jù)用透析除去鹽分，有可能顯著地降低了被儲存試樣的粒徑的擴(kuò)大以及透射因數(shù)的降低。另外，還有可能抑制由在60℃下和在循環(huán)條件下儲存所引起的凝膠。
當(dāng)加入非離子等滲劑的時侯，粒徑的擴(kuò)大以及透射因數(shù)的降低都趨向于被抑制。
表5.2％(w/v)雷巴米特懸浮液(包括1％(w/V)HPMC[TC-5E])的平均粒徑以及在640nm的透射因數(shù)隨時間的變化

起始時間的平均粒徑(nm)透析之前158nm，透析之后122nm實施例7使12ML 10N鹽酸(14.2g，0.12mol)、68mL純凈水和200mL5％(w/v)PVPK 25水溶液混合來制備鹽酸-PVPK 25溶液。向700mL通過將純凈水加入到4.4g氫氧化鈉(0.11mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入20g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用UltrasonicDisrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波下。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.0。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
由濃縮的并且除去鹽分的試樣制備不含等滲劑的試樣和含有甘油作為等滲劑的試樣。向每一種試樣中加入純凈水來形成兩種2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
(1)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)PVPK 25(2)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)PVPK 25+2.4％(w/v)甘油實施例8使12ML 10N鹽酸(14.2g，0.12mol)、68mL純凈水和200mL 5％(w/v)PVPK 25水溶液混合來制備鹽酸-PVPK 25溶液。向700mL通過將純凈水加入到4.4g氫氧化鈉(0.11mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入20g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用UltrasonicDisrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波下。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.0。
用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分，向其中加入純凈水以至于將溶液的體積恢復(fù)到約900mL。用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)。
由分散的試樣制備不含等滲劑的試樣和含有甘油作為等滲劑的試樣。向每一種試樣中加入純凈水來形成兩種2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
(1)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/V)PVPK 25(2)2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)PVPK 25+2.4％(w/v)甘油通過0.2μm過濾器(Supor，Nihon Pall Ltd.)對所制備的試樣除菌過濾。
實施例9使24ML 10N鹽酸(28.4g，0.24mol)、136mL純凈水和400mL含10％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向1400mL通過將純凈水加入到8.8g氫氧化鈉(0.22mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入40g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用UltrasonicDisrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波下。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.0。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
由濃縮的并且除去鹽分的試樣制備不含等滲劑的試樣和含有甘油作為等滲劑的試樣。向每一種試樣中加入氫氧化鈉溶液來將pH調(diào)節(jié)到6.0，然后加入純凈水來調(diào)節(jié)總量以制備兩種2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
(1)2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC(TC-5E)(2)2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC(TC-5E)+2.35％(w/v)甘油通過0.22μm過濾器(STERIVEXGP 0.22μm Filter，MilliporeJapan)對所制備的試樣除菌過濾。
實施例10使12ML 10N鹽酸(14.2g，0.12mol)、68mL純凈水和200mL 2.5％(w/v)PVPK 25+2.5％(w/v)HPMC(TC-5E)的混合物混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)-PVPK 25溶液。向700mL通過將純凈水加入到4.4g氫氧化鈉(0.11mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入20g雷巴米特(0.054mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，一邊用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌，一邊用UltrasonicDisrupter(TOMY UD201)將鹽酸-添加劑溶液暴露于超聲波下。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-添加劑溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.0。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
由濃縮的并且除去鹽分的試樣制備不含等滲劑的試樣和含有甘油作為等滲劑的試樣。向每一種試樣中加入純凈水來形成兩種2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
(1)2％(w/v)雷巴米特+0.5％(w/v)PVPK 25+0.5％(w/v)HPMC[TC-5E](2)2％(w/v)雷巴米特+0.5％(w/v)PVPK 25+0.5％(w/v)HPMC[TC-5E]+2.4％(w/v)甘油通過0.22μm過濾器(STERIVEXGP 0.22μm Filter，MilliporeJapan)對所制備的試樣除菌過濾。
實施例11使24ML 10N鹽酸(28.4g，0.24mol)、136mL純凈水和400mL包括3％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向1400mL通過將純凈水加入到8.8g氫氧化鈉(0.22mol)中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入40g雷巴米特(0.108mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特-HPMC(TC-5E)溶液。
在冰點(diǎn)溫度下，用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKAKOGYO CO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌該鹽酸-HPMC(TC-5E)。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特-HPMC(TC-5E)溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到5.5。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)。然后，用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
將甘油加入到殘留物中以至于濃縮的并且除去鹽分的試樣變得幾乎是等滲的。向該溶液中加入氫氧化鈉溶液來將pH調(diào)節(jié)到6.0，然后加入純凈水來調(diào)節(jié)總量以制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E]+2.35％(w/v)甘油通過0.22μm過濾器(STERIVEXGP 0.22μm Filter，MilliporeJapan)對所制備的試樣除菌過濾。
實施例12將24ML 10N鹽酸(28.4g，0.24mol)和536mL純凈水混合來制備鹽酸溶液。向1400mL通過將8.8g氫氧化鈉(0.22mol)和40g HPMC(TC-5E)加入到純凈水中所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入40g雷巴米特(0.108mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特-HPMC(TC-5E)溶液。
在冰點(diǎn)溫度下用攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYOCO.，LTD)以1400rpm的速度攪拌該鹽酸溶液。將保持在30-40℃的氫氧化鈉-雷巴米特-HPMC(TC-5E)溶液一點(diǎn)一點(diǎn)加入到該鹽酸溶液中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在沉淀該晶體之后，將攪拌速度提高到3000rpm并且繼續(xù)攪拌20分鐘。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。將該溶液消泡，然后向該消泡的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約6.0。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)。然后，用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
將甘油加入到殘留物中以至于濃縮的并且除去鹽分的試樣變得幾乎是等滲的。向該溶液中加入鹽酸或氫氧化鈉溶液來將溶液的pH調(diào)節(jié)到6.0，然后加入純凈水來調(diào)節(jié)總量以制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液。
2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E]+2.35％(w/v)甘油通過0.22μm過濾器(STERIVEXGP 0.22μm Filter，MilliporeJapan)對所制備的試樣除菌過濾。
實施例13將366ML 10N鹽酸(432g，3.66mol)和7.8L含有7.67％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向21L通過將純凈水加入到132g氫氧化鈉(3.3mol)所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入600g雷巴米特(1.62mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
使冷卻到10℃的鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液在350mL安裝了在線型攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYO CO.，LTD)的容器中循環(huán)。用CLEARMIXS-MOTION將保持在40-50℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)投入到350mL容器中，其中使轉(zhuǎn)子以約1,500rpm轉(zhuǎn)動來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。向該晶體沉淀的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.75。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對1L所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散30分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后，用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
用純凈水稀釋由上述濃縮和除去鹽分所形成的試樣來制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液(2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E])。
測量了所形成的懸浮液在640nm的透射因數(shù)，并且用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)測量了它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)。
表6.平均粒徑和2％(w/v)雷巴米特懸浮液的在640nm處的透射因數(shù)

實施例14將373ML 10N鹽酸(440g，3.73mol)和14.8L含有4％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向14L通過將純凈水加入到134g氫氧化鈉(3.35mol)所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入600g雷巴米特(1.62mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
將冷卻到約10℃的鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液和保持在50-60℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液以相同的添加速度投入到350mL安裝了攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYO CO.，LTD)的容器中，其中轉(zhuǎn)子以約10,000rpm旋轉(zhuǎn)來生產(chǎn)含有結(jié)晶雷巴米特的懸浮液。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。向該晶體沉淀的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.75。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對3L所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散60分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm反轉(zhuǎn)，然后，用透析機(jī)(Millipore，Pellicon2mini)濃縮該溶液并且除去鹽分。
用純凈水稀釋由上述濃縮和除去鹽分所形成的試樣來制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液(2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E])。
測量了所形成的懸浮液在640nm的透射因數(shù)，并且用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)測量了它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)。
表7.平均粒徑和2％(w/v)雷巴米特懸浮液的在640nm處的透射因數(shù)

實施例15將61ML 10N鹽酸(72g，0.61mol)和1.3L含有7.67％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向3.5L通過將純凈水加入到22g氫氧化鈉(0.55mol)所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入100g雷巴米特(0.27mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
使冷卻到約10℃的鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液在350mL安裝了在線型攪拌器(ROBOMICS，TOKUSHU KIKA KOGYO CO.，LTD)的容器中循環(huán)。用CLEARMIXS-MOTION將保持在40-50℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液投入到350mL容器中，其中使轉(zhuǎn)子以約12,000rpm轉(zhuǎn)動來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。向該晶體沉淀的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.75。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對3L所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散60分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm轉(zhuǎn)動，然后，用透析機(jī)(Millipore，ProFluxM12)濃縮該溶液并且除去鹽分。
用純凈水稀釋由上述濃縮和除去鹽分所形成的試樣來制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液(2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E])。
測量了所形成的懸浮液在640nm的透射因數(shù)，并且用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)測量了它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)。
表8.平均粒徑和2％(w/v)雷巴米特懸浮液的在640nm處的透射因數(shù)

實施例16將183ML 10N鹽酸(216g，1.83mol)和3.9L含有7.67％(w/v)HPMC(TC-5E)的水溶液混合來制備鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液。向10.5L通過將純凈水加入到66g氫氧化鈉(1.65mol)所制備的氫氧化鈉水溶液中，加入300g雷巴米特(0.81mol)并且通過加熱來溶解以形成氫氧化鈉-雷巴米特溶液。
使冷卻到約10℃的鹽酸-HPMC(TC-5E)溶液在其內(nèi)側(cè)是L-形腔室的硅塊中循環(huán)。將保持在40-50℃的氫氧化鈉-雷巴米特溶液一點(diǎn)一點(diǎn)投入到該塊中來沉淀結(jié)晶雷巴米特。在完成結(jié)晶化之后，該溶液的pH為約1.5。向該晶體沉淀的溶液中加入5N氫氧化鈉來將pH調(diào)整到約5.75。
用CLEARMIXW-MOTION(M-TECHNIQUE CO.，LTD.)對3L所形成的包含雷巴米特的水性懸浮液分散60分鐘，其中轉(zhuǎn)子以約18,000rpm旋轉(zhuǎn)并且篩子以約16,000rpm轉(zhuǎn)動，然后，用透析機(jī)(Millipore，ProFluxM12)濃縮該溶液并且除去鹽分。
用純凈水稀釋由上述濃縮和除去鹽分所形成的試樣來制備2％(w/v)雷巴米特懸浮液(2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E])。
測量了所形成的懸浮液在640nm的透射因數(shù)，并且用動態(tài)光散射粒徑分析儀(Malvern Nano-ZS)測量了它們的平均粒徑(Z-平均粒徑)。
表9.平均粒徑和2％(w/v)雷巴米特懸浮液的在640nm處的透射因數(shù)

測試1用Beckman L7-Ultracentrifuge(50,000rpm，for 60minutes，10℃)對上述實施例6(1)和實施例7(1)的試樣超離心來沉淀細(xì)晶粒。在用純凈水對其沖洗后，再次進(jìn)行相同的操作。除去上層清液并且在40℃將所形成的沉淀物空氣干燥4天。
測量干燥的細(xì)晶粒的X-射線衍射光譜、IR光譜和DTA-TG光譜。干燥細(xì)晶粒的光譜與在OTSUKA PHARMACEUTICAL CO.，LTD的第二工廠中所制備的并且被用于治療胃潰瘍和胃炎活性成分的光譜相同。這些結(jié)果表明，本發(fā)明中所給出的細(xì)微粒晶體具有與用于治療胃潰瘍和胃炎的普通活性成分相同的晶體形狀。
測試2用透射電子顯微鏡測量了上述實施例6(1)和實施例7(1)的試樣的晶體形狀(圖2，圖3)。當(dāng)用透射電子顯微鏡觀察上述實施例6(1)中的2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)HPMC[TC-5E]的時侯，所形成的晶體的晶體形狀是長標(biāo)距不少于300nm至少于1000nm，短標(biāo)距為約15nm，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之間的比例大于20的規(guī)則超-針狀晶體。當(dāng)形成這樣的超-針狀晶體的時侯，預(yù)計所獲得的懸浮液將具有高的透明度。
當(dāng)用透射電子顯微鏡觀察上述實施例7(1)中的2％(w/v)雷巴米特+1％(w/v)PVPK 25的時侯，所形成的晶體的晶體形狀是長標(biāo)距為約200nm，短標(biāo)距為約40nm，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之間的比是約5的規(guī)則針狀晶體。當(dāng)形成這樣的超-針狀晶體的時侯，預(yù)計所獲得的懸浮液將具有高分散性和通過0.2μm過濾器的優(yōu)異過濾性。
測試3用透射電子顯微鏡測量了上述實施例13的試樣的晶體形狀(圖4)。當(dāng)用透射電子顯微鏡觀察上述實施例13中的2％(w/v)雷巴米特+2％(w/v)HPMC[TC-5E]的時侯，所形成的晶體的晶體形狀是長標(biāo)距不少于50nm至少于400nm，短標(biāo)距約15nm，并且長標(biāo)距與短標(biāo)距之間的比例大于8的規(guī)則超-針狀晶體。當(dāng)形成這樣的超-針狀晶體的時侯，預(yù)計所獲得的懸浮液將具有高的透明度和通過0.2μm過濾器的優(yōu)異過濾性。
權(quán)利要求
1.一種結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其包括至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含有雷巴米特水溶性鹽的水溶液的混合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水性懸浮液，其中使該混合物暴露于超聲波下。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水性懸浮液，其中所述的選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物是羥丙基甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、聚氧乙烯-聚氧丙烯二醇或者聚山梨酸酯80。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的水性懸浮液，其中所述的選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物是羥丙基甲基纖維素。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其中所述結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液是酸性的。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液，其中用堿將pH調(diào)節(jié)到5-7。
7.一種結(jié)晶雷巴米特的水性眼科懸浮液，其可以通過向權(quán)利要求1或5所述的水性懸浮液中加入堿將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)來生產(chǎn)。
8.一種結(jié)晶雷巴米特的無菌水性眼科懸浮液，其可以通過向權(quán)利要求1或5所述的水性懸浮液中加入堿將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)，并且過濾該混合物用來滅菌而生產(chǎn)的。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的水性懸浮液，其中采用純凈水將通過透析濃縮的懸浮液中的雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的水性懸浮液，其中濃度為0.5-5％(w/v)的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液在640nm處具有不少于20％的透射因數(shù)。
11.根據(jù)權(quán)利要求7所述的水性懸浮液，其中結(jié)晶雷巴米特的形狀是規(guī)則的針狀晶體，其長標(biāo)距少于1000nm并且短標(biāo)距少于60nm，并且長標(biāo)距和短標(biāo)距之比不少于4。
12.一種制備結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液的方法，其包括使至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物、水性酸溶液和含有雷巴米特水溶性鹽的水溶液混合。
13.一種制備結(jié)晶雷巴米特的水性眼科懸浮液的方法，其包括通過向由權(quán)利要求12的方法制備的水性懸浮液中加入堿來將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)。
14.一種制備結(jié)晶雷巴米特的無菌水性眼科懸浮液的方法，其包括通過向權(quán)利要求1或5的水性懸浮液中加入堿來將pH調(diào)節(jié)到3-7，分散并且/或透析該混合物，然后將pH調(diào)節(jié)到5-7并且將雷巴米特的濃度調(diào)節(jié)到0.5-5％(w/v)，并且過濾該混合物用于滅菌。
全文摘要
本發(fā)明提供了含有雷巴米特的眼科產(chǎn)品，其在使用時具有足夠的愜意感覺并且具有不傷害受干眼之苦病人的角膜結(jié)膜的中性至弱酸性pH。通過將用堿例如氫氧化鈉溶解的雷巴米特水溶液或者雷巴米特鹽的水溶液加入到含有至少一種選自水溶性聚合物和表面活性劑的化合物的水性酸溶液例如鹽酸中，并且將它們混合而提供了具有改進(jìn)的透明性的結(jié)晶雷巴米特的水性懸浮液。
文檔編號A61P27/02GK101056636SQ20058003878
公開日2007年10月17日 申請日期2005年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月15日
發(fā)明者松田貴邦, 平岡祥吾, 友平裕三, 石川真一 申請人:大塚制藥株式會社