專利名稱：新復(fù)方蝗蟲多肽(nfhp)的抗疲勞功能的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明受2002年日本國NHK播放紀(jì)錄片的啟發(fā)下進行了4年多的研究。該片內(nèi)容根據(jù)英國科學(xué)家在英國權(quán)威《自然》雜志上發(fā)表了大鶴遷飛的文章。英科學(xué)家經(jīng)10年潛心研究。其故事梗概一群候鳥大鶴，每年生活在俄羅斯西伯利亞。在冬季降臨西伯利亞前夕，約每年6月下旬成批的鶴群遷飛至我國內(nèi)蒙古戈壁。那里正好發(fā)生蝗災(zāi)，大鶴在此水草豐盛，飽食蝗蟲，休養(yǎng)生息。它們隨著蝗蟲遷飛，向西南飛行，沿山西河套地區(qū)遷移，經(jīng)甘肅黃土高原、青海、西藏蝗災(zāi)發(fā)生的路線飛行，大約在10月至11月鶴群飛越珠穆朗瑪峰。大批鶴群飛越珠峰至南麓越冬，繁衍生息，而小批鶴群則在珠峰北麓墜落。英科學(xué)家根據(jù)北麓墜落與飛越珠峰的大鶴解剖對比發(fā)現(xiàn)北麓大鶴腹中未發(fā)現(xiàn)蝗蟲翅、大腿殼等殘留物，而南麓的大鶴腹中殘存未消化的蝗蟲大腿殼、翅等殘留物。況且南麓的大鶴的體重、肝糖原、肌糖原、血清尿素氮、血乳酸等生化指標(biāo)均遠遠超過北麓墜落的大鶴。次年春，鶴群經(jīng)新加坡、日本返回西伯利亞避暑、繁衍。由此得到啟發(fā)，蝗蟲蛋白質(zhì)是鶴群取得的唯一能飛越珠峰、長途跋涉的能源。
本發(fā)明在2005年申請的蝗蟲多肽專利(申請?zhí)?00510075075.7，申請名稱蝗蟲的酶解多肽及其生理活性)是我們在初步研究成果的基礎(chǔ)上，研制出的起效快、作用持久的抗疲勞營養(yǎng)保健食品。本發(fā)明屬于營養(yǎng)食品、保健食品、運動食品領(lǐng)域。現(xiàn)就本發(fā)明NFHP的動物實驗、實驗結(jié)果、結(jié)果討論、人群試驗分別敘述如下。
1.材料與方法1.1樣品由北京君陽愛瑪科技有限公司提供。人體推薦量為0.125g/kg×60kg÷5＝1.5g/kg.bw。
1.2動物昆明種雄性小鼠，由北京大學(xué)實驗動物學(xué)部提供。將動物分為四個實驗組，每組64只，每組隨機分為4組，每組16只，實驗一組進行肝糖原測定，實驗二組進行負重游泳實驗，實驗三組進行血清尿素氮測定，實驗四組進行血乳酸測定。
1.3劑量選擇受試物每個試驗項目設(shè)三個劑量組分別為人體推薦量的5倍、10倍、30倍，即0.125/kg.bw(低劑量組)，0.250/kg.bw(中劑量組)，0.750/kg.bw(高劑量組)，陰性對照組用蒸餾水。經(jīng)口灌胃，其灌胃量為0.2ml/10g.bw。連續(xù)灌胃30天后測各相應(yīng)的抗疲勞作用指標(biāo)。
1.4實驗方法1.4.1小鼠負重游泳實驗?zāi)┐谓o予樣品30分鐘后，使小鼠根部負重5％體重的鉛皮在水深約30cm，水溫25℃游泳箱中游泳，記錄小鼠自游泳開始至死亡的時間，作為小鼠游泳時間(秒)。
1.4.小鼠血清尿素氮的測定二乙酰-肟法末次給予樣品30分鐘后，在溫度為30℃的水中游泳90分鐘。游泳后安靜60分鐘后拔眼球采血0.5ml，分離血清測血清尿素氮。
1.4.3小鼠肝糖原測定蒽酮法末次給予樣品30分鐘后，在溫度為30℃的水中游泳90分鐘。立即頸椎脫臼處死取肝臟，經(jīng)生理鹽水漂洗，濾紙吸干，稱取肝臟約200mg(精確記錄實際量)，用4ml 5％的TCA勻漿1分鐘，將勻漿液轉(zhuǎn)移至離心管，以3000r離心15分鐘，上清液移至另一試管中。再在沉淀中加入4ml 5％TCA，勻漿1分鐘，取上清液與第一次的離心液合并，充分混勻。蒽酮法測肝糖原。
1.4.4乳酸測定末次給予樣品30分鐘后，t采血約50μl于抗凝管中，再于尾根部負重4％體重的鉛皮于溫度為30℃水中游泳10分鐘，分別于運動后0分鐘與60分鐘各采血約50μl于抗凝管中，用乳酸測定儀測全血乳酸。
1.5數(shù)據(jù)處理采用STATA軟件進行方差分析。
1.6附加說明本實驗中各項試驗的各組動物數(shù)不等，是因為實驗游泳中個別動物死亡。
2結(jié)果2.1 NFHP對小鼠體重的影響(表1、2、3)表1 NFHP對小鼠初期體重的影響
表2 NFHP對小鼠中期體重的影響
表3 NFHP對小鼠初期體重的影響
由表1可見，各組初期體重差別無顯著性意義(P＞0.05)，說明組間體重是一致的。各劑量組與陰性對照組比較，除實驗一組高劑量組的中期體重差別有顯著性意義(P＜0.05)。各組中期體重及末體重差別均無顯著性意義(P＞0.05)，表明對小鼠體重?zé)o明顯影響。2.2NFHP對小鼠負重游泳時間的影響(表4)表4 NFHP對小鼠負重游泳時間的影響
由表4可見，高、中、低劑量組負重游泳時間與陰性對照組比較均有有顯著性意義(P＜0.05)。提示在本實驗條件下NFHP對小鼠負重游泳時間有延長作用。
2.3 NFHP對小鼠血清尿素氮的影響(表5)
表5 NFHP對小鼠血清尿素氮的影響
由表5可見，低劑量組血清尿素氮與陰性對照組比較差異有顯著性意義(P＜0.01)。提示NFHP能降低小鼠運動中血清尿素氮的產(chǎn)生。
2.4 NFHP對小鼠運動后肝糖原的影響(表6)表6 NFHP對小鼠運動后肝糖原的影響
由表6可見，中劑量組肝糖原與陰性對照組比較差異有極顯著性意義(P＜0.01)。提示本實驗條件下NFHP能增加小鼠肝糖原的儲備和/或減少小鼠運動時肝糖原的消耗。
2.5 NFHP對小鼠運動后血乳酸水平的影響(表7)表7 NFHP對小鼠運動10分鐘時血乳酸升高水平的影響
注差值為運動10分鐘后立即采樣(0分鐘)與運動前血乳酸的差值。
由表7可見，低、中、高劑量組血乳酸升高水平與陰性對照組比較差異有顯著性意義(P＜0.01)，提示NFHP能降低小鼠運動時血乳酸的升高水平。
表8 NFHP對小鼠運動后血乳酸清除速率的影響
注差值為運動后立即采樣(0分鐘)與運動后60分鐘采樣測得的血乳酸差值。由表8可見，三個劑量組血乳酸清除速率與陰性對照組比較差異有顯著性意義(P＞0.05)，提示NFHP對小鼠血乳酸的清除速率沒有影響。
3.實驗結(jié)果討論3.1實驗證明NFHP對各組小鼠體重?zé)o明顯影響；3.2實驗表明NFHP高、中、低劑量組與陰性對照組均有極顯著差異(P＜0.05和P＜0.01)；3.3實驗證明NFHP對小鼠運動后或運動中血清尿素氮、肝糖元、血乳酸水平與陰性對照組比較均有顯著或極顯著的差異(P＜0.05和P＜0.01)。且NFHP對小鼠運動后血乳酸的清除速率無影響。因此，NFHP是一個具有開發(fā)價值的產(chǎn)品。
4.人群試驗4.1實施例10。某大學(xué)舉重隊6人每天服用0.7g×2重量的片劑，運動前1h服用一顆，6人中服用NFHP膠囊后在1h或2h不等渾身發(fā)熱有勁。1個月后6人的舉重成績均有不同程度的提高。
4.2實施例11。某企業(yè)馬拉松男子運動隊10人，每天服用0.7g×2NFHP膠囊。經(jīng)過兩個月的服用和科學(xué)訓(xùn)練，平均成績從服用前的2:22′提高到2:18′50″。
4.3實施例12。某高中學(xué)生男子田徑隊百米組5人，每天服用0.7g×2NFHP膠囊，每天下午訓(xùn)練2h，服用前的平均100m成績?yōu)?2″6。經(jīng)科學(xué)訓(xùn)練2個月后，平均100m成績提高到12″07，其中一名男生從服用NFHP前的12″8提高到11″91。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明的新復(fù)方蝗蟲多肽(縮寫NFHP)配方由蝗蟲多肽(HP)噴霧干燥粉、蜂王胎(或蜂蛹)凍干粉、蜂王漿凍干粉三種成分組成，具有極強的抗疲勞功能。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的重量配比為HP噴霧干燥粉∶蜂王胎凍干粉∶蜂王漿凍干粉＝3∶5∶2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述，與動物實驗及人群試驗的劑量表明NFHP起效快，效果持久，其臨床有效安全劑量為0.4g～45g/人/日。
全文摘要
本發(fā)明的新復(fù)方蝗蟲多肽(New Fufang Huang Polypeptide，縮寫NFHP)具有起效快、效果持久的抗疲勞功能，其成分由30％蝗蟲多肽、50％蜂王胎凍干粉、20％王漿凍干粉組成。本發(fā)明的NFHP廣泛適用于營養(yǎng)食品與保健食品領(lǐng)域。
文檔編號A61K35/64GK1977968SQ20051012423
公開日2007年6月13日 申請日期2005年11月29日 優(yōu)先權(quán)日2005年11月29日
發(fā)明者丁慶 申請人:丁慶