專利名稱：一種蜘蛛毒注射液及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及醫(yī)用制劑，特別是一種蜘蛛毒注射液及其制備方法。
背景技術：
長期以來，人們認為疼痛只是疾病的癥狀，只要疾病治好，疼痛就會消失，所以很多患者經(jīng)常忍受疼痛的折磨。但是實際上，疼痛不僅會對人的中樞、循環(huán)、呼吸、內(nèi)分泌、消化和自主神經(jīng)系統(tǒng)等多方面，造成不良影響，疼痛本身就是一種疾病。
在我國有1億多疼痛患者，每3位門診病人中就有2位伴有各種疼痛癥狀。由于疼痛的普遍性和重要性，它已成為繼呼吸、脈搏、體溫和血壓之后人類第五大生命指征。疼痛分為急性和慢性兩種。急性痛的意義在于其“警示”作用，因此可稱為是“好痛”，這種疼痛容易被人重視，治療起來也相對容易。有些疼痛會持續(xù)3個月以上，很難得到治療，并長期影響身心健康和生活質(zhì)量，這種疼痛被稱為慢性疼痛，也被認定為“壞痛”，是醫(yī)學界努力攻克的難題。慢性疼痛包括頸肩腰腿痛；各種慢性頑固性神經(jīng)痛，如三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛；癌痛，70％的癌癥患者在中晚期時會出現(xiàn)疼痛；另外像糖尿病、肩周炎等也都會引起慢性疼痛，手術后出現(xiàn)的急性疼痛，如控制不當也會轉(zhuǎn)成頑固性慢性疼痛。據(jù)統(tǒng)計，有30％至35％的人長期被慢性疼痛困擾，全世界每天有550萬人忍受慢性癌痛折磨。
蜘蛛早在《本草綱目》中就有入藥的記載，在《爾雅》中叫次 《方言》中稱 蝓，又叫蝃 氣味微寒，有小毒。主要用于“主口蝸，脫肛，瘡腫，狐臭，蠹齒。”《名醫(yī)別錄》記載能治療大人、小兒潰疝，以及小兒大腹丁奚，三年不能行走?！缎滦薇静荨分^“主蛇毒溫瘧，霍亂，止嘔逆。”《千金方》中有用火取蜘蛛摩擦側(cè)頰，用于治療中風口蝸斜?，F(xiàn)代醫(yī)學研究證明，臨床應用方面有治療鵝口瘡、小兒口瘡、鼻息肉、毒蛇咬傷等。
蜘蛛毒液可以抑制鈣離子通道，是一種神經(jīng)毒素。其主要成分是多肽和蛋白質(zhì)，包括多肽神經(jīng)毒素、細胞毒素、酶、激肽類似物、凝集活性肽和抗菌肽等，此外還含有多胺類及ATP、核苷酸、氨基酸、單胺類低分子量物質(zhì)和無機鹽等。蜘蛛毒素是一種神經(jīng)毒素，對心臟、血管及骨骼肌均有明顯的興奮作用。少量蜘蛛毒素不但對人體無害，而且呈現(xiàn)出一種良性調(diào)節(jié)作用，可使局部組織器官功能由亢進或減弱狀態(tài)恢復到正常狀態(tài)。蜘蛛毒素還具有良好的消炎、止痛、消腫、解痙、祛風等作用，對人體免疫功能具有雙向調(diào)節(jié)作用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種對風濕、類風濕和神經(jīng)性疼痛具有鎮(zhèn)痛作用的蜘蛛毒注射液。
本發(fā)明的另一個目的在于提供一種上述蜘蛛毒注射液的制備方法。
本發(fā)明的蜘蛛毒注射液中含有活性蜘蛛毒素和注射用溶液，其中活性蜘蛛毒素的含量為0.5mg～5mg/100ml。
本發(fā)明所用的活性蜘蛛毒素為活性虎紋捕鳥蛛毒素或活性敬釗纓毛蛛毒素，還可為活性智利蜘蛛毒素、活性黑寡婦蜘蛛毒素、活性美國漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性黑腹櫛足蛛毒素或活性狼蛛毒素。
本發(fā)明所用注射用溶液可為蒸餾水、生理鹽水或注射用葡萄糖溶液。
本發(fā)明的蜘蛛毒注射液的制備方法包括以下步驟1)活蜘蛛體內(nèi)誘導取毒方法提取活性蜘蛛毒液，具體步驟為a)將成年蜘蛛從飼養(yǎng)筒內(nèi)用較長的鑷子、夾子或筷子取出置于普通塑料水桶或普通塑料洗衣盆內(nèi)；b)用上述鑷子、夾子或筷子為挑逗物在蜘蛛頭部前方對其進行挑逗，蜘蛛會抬起前身并會張開毒螯，對挑逗物進行攻擊，此時，避免蜘蛛直接咬住挑逗物可能直接釋放毒液；c)待可觀察到蜘蛛明顯的3-5次攻擊動作后，可用挑逗物輕壓其身體，用帶軟質(zhì)皮手套的手直接從蜘蛛身體中部將其提起；d)將蜘蛛毒螯對準磨口瓶或硬質(zhì)膠口瓶瓶口，蜘蛛咬住瓶口后即刻會放出毒液，可觀察到毒液為透明液體；e)另一人用微型注射器在瓶口及時吸取毒液，并將毒液注入試管或細胞管，細胞管或試管及時放入裝有冰塊的保溫杯，防止提取過程時間較長使毒液溫度升高。
2)活性蜘蛛毒素制備，真空度為0.1個標準大氣壓條件下，采用常規(guī)凍干手段，凍干溫度-45℃，將活性蜘蛛毒液制成白色活性蜘蛛毒素晶體；3)注射液制備，在溫度為1～6℃的無菌室中，取活性蜘蛛凍干粉加入適量注射用溶液，輕輕振搖溶解，然后加入注射用溶液稀釋至0.5mg～5mg/100ml；4)將制備好的注射液分裝于滅菌過的容器中，在1～6℃的低溫環(huán)境中保存?zhèn)溆谩?br> 本發(fā)明蜘蛛毒注射液主要用于治療各種原因引起的集體免疫機能減退及多種癌癥，還可用于治療風濕、類風濕性關節(jié)炎及三叉神經(jīng)痛、坐骨神經(jīng)痛等神經(jīng)疼痛。經(jīng)對中樞神經(jīng)和外周神經(jīng)的抑制試驗證明，對于神經(jīng)性疼痛具有很好的鎮(zhèn)痛作用。
本發(fā)明蜘蛛毒注射液保留了蜘蛛毒的活性，為臨床治療各種疾病開創(chuàng)了一條新途徑。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例進一步描述本發(fā)明。
實施例1從活捕鳥蛛科虎紋捕鳥蛛(Selenocosmia Huwena)體內(nèi)用誘導取毒法提取活性虎紋捕鳥蛛毒液，具體步驟為1)將成年虎紋捕鳥蛛從飼養(yǎng)筒內(nèi)用較長的鑷子取出置于普通塑料水桶或普通塑料洗衣盆內(nèi)；2)用上述鑷子為挑逗物在蜘蛛頭部前方對其進行挑逗，蜘蛛會抬起前身并會張開毒螯，對挑逗物進行攻擊，此時，避免蜘蛛直接咬住挑逗物可能直接釋放毒液；3)待可觀察到蜘蛛明顯的3-5次攻擊動作后，可用挑逗物輕壓其身體，用帶軟質(zhì)皮手套的手直接從蜘蛛身體中部將其捉起；4)將蜘蛛毒螯對準磨口瓶，蜘蛛咬住瓶口后即刻會放出毒液，可觀察到毒液為透明液體；5)另一人用微型注射器在瓶口及時吸取毒液，將毒液注入試管管，試管及時放入裝有冰塊的保溫杯，防止提取過程時間較長使毒液溫度升高。
活性虎紋捕鳥蛛毒液在真空條件下，0.1個大氣壓，采用常規(guī)凍干手段制成白色活性虎紋捕鳥蛛毒素晶體，凍干溫度-45℃。
在室溫為1～6℃的無菌室中，將5mg活性虎紋捕鳥蛛毒素晶體加入適量蒸餾水中溶解，再加入蒸餾水稀釋到500ml，然后分裝到經(jīng)滅菌處理的安瓿管中，封口。每支裝量為1ml，含10ug活性虎紋捕鳥蛛毒素。制成成品應在1～6℃的低溫環(huán)境中保存。
實施例2從活狒蛛科棒刺蛛亞科敬釗纓毛蛛(Chilobrachys jingzhao)體內(nèi)誘導取毒，具體操作方法同實施例1，但選用的是狒蛛科棒刺蛛亞科敬釗纓毛蛛(Chilobrachys jingzhao)?；钚跃瘁摾t毛蛛毒液在真空條件下，0.1個大氣壓，采用常規(guī)凍干手段制成白色活性敬釗纓毛蛛毒素晶體，凍干溫度-45℃。
在室溫為1～6℃的無菌室中，將2.5mg活性敬釗纓毛蛛毒素晶體加入適量蒸餾水中溶解，再加入蒸餾水稀釋到500ml，然后分裝到經(jīng)滅菌處理的安瓿管中，封口。每支裝量為1ml，含5ug活性敬釗纓毛蛛毒素。制成成品應在1～6℃的低溫環(huán)境中保存。
利用上述方法還可制備活性智利蜘蛛毒素、活性黑寡婦蜘蛛毒素、活性美國漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性黑腹櫛足蛛毒素或活性狼蛛毒素注射液，所用注射用溶液為蒸餾水、生理鹽水或葡萄糖溶液。
通過下面的試驗說明本蜘蛛毒注射液的活性。
試驗例1虎紋捕鳥蛛毒注射液對于關節(jié)炎的效果試驗方法先采用甲醛致炎法，用2％的甲醛0.1ml，注射到大鼠右后腿的第三第四關節(jié)之間，導致關節(jié)炎產(chǎn)生，24小時后，關節(jié)腫脹達到最大值。然后分空白組和給藥組進行對比，分別記錄關節(jié)的周長和關節(jié)炎消失的時間，并計算關節(jié)周長的平均值。給藥組的給藥方式為皮下注射，給藥量為每天一次，每次1ml虎紋捕鳥蛛毒注射液，該注射液的濃度為0.01mg/ml，注射用溶液為無菌蒸餾水。空白組皮下注射無菌蒸餾水，每天一次，每次1ml。本實驗采用三周齡大鼠，體重在180～220g，每組8只。
試驗結(jié)果如表1所示。
表1

結(jié)論從試驗結(jié)果看出，給藥組效果非常明顯，大約3到4天基本好轉(zhuǎn)，而對照組在10天才出現(xiàn)好轉(zhuǎn)。所以，該虎紋捕鳥蛛毒注射液用于關節(jié)炎效果明顯。
試驗例2虎紋捕鳥蛛毒注射液的鎮(zhèn)痛效果試驗方法采用小鼠扭體試驗0.6％的醋酸0.2ml用直接灌胃方法讓小鼠致痛，致痛5分鐘后給藥。空白組皮下注射蒸餾水，每天一次，每次注射1ml；給藥組皮下注射虎紋捕鳥蛛毒注射液，該注射液濃度為0.01mg/ml，注射用溶液為無菌蒸餾水，每天一次，每次注射1ml。然后觀察60分鐘內(nèi)的扭體次數(shù)，并計算平均數(shù)。本試驗采用成年雄性小鼠，體重在18～22g，每組8只。
試驗結(jié)果見表2。
表2

結(jié)論通過試驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)，空白組3分鐘后發(fā)生扭體現(xiàn)象而給藥組15分鐘后才有扭體現(xiàn)象發(fā)生，并且空白組60分鐘內(nèi)的扭體平均數(shù)為36次而給藥組60分鐘內(nèi)的扭體平均數(shù)為8次，說明虎紋捕鳥蛛毒注射液有較好的鎮(zhèn)痛效果。
權(quán)利要求
1.一種蜘蛛毒注射液，其特征在于包括活性蜘蛛毒素和注射用溶液，所述活性蜘蛛毒素的含量為0.5mg～5mg/100ml。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜘蛛毒注射液，其特征在于所述活性蜘蛛毒素為活性虎紋捕鳥蛛毒素、活性海南捕鳥蛛毒素、活性敬釗纓毛蛛毒素、活性智利蜘蛛毒素、活性黑寡婦蜘蛛毒素、活性美國漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性漏斗網(wǎng)蛛毒素、活性黑腹櫛足蛛毒素或活性狼蛛毒素。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜘蛛毒注射液，其特征在于所述活性蜘蛛毒素為活性虎紋捕鳥蛛毒素或活性敬釗纓毛蛛毒素。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2或3所述的蜘蛛毒注射液，其特征在于所述活性蜘蛛毒素的含量為1mg/100ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蜘蛛毒注射液，其特征在于所述注射用溶液為蒸餾水、生理鹽水或注射用葡萄糖溶液。
6.一種蜘蛛毒注射液的制備方法，其特征在于包括以下步驟1)在1～6℃的無菌室中，取活性蜘蛛毒素加入適量注射用溶液，輕輕振搖溶解，然后加入注射用溶液稀釋至0.5mg～5mg/100ml；2)分裝于滅菌過的容器中。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種蜘蛛毒注射液，它含有活性蜘蛛毒素和注射用溶液。制備時包括以下步驟1)取活性蜘蛛凍干粉加入適量注射用溶液，輕輕振搖溶解，然后加入注射用溶液稀釋至0.5mg～5mg/100ml；2)分裝于滅菌過的容器中，1～6℃的低溫保存?zhèn)溆谩１景l(fā)明蜘蛛毒注射液主要用于治療風濕和類風濕、三叉神經(jīng)痛和坐骨神經(jīng)痛等神經(jīng)疼痛，還可用于各種原因引起的機體免疫機能減退及多種癌癥。
文檔編號A61P35/00GK1839888SQ200510120779
公開日2006年10月4日 申請日期2005年12月22日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日
發(fā)明者張旭旭 申請人:清華大學深圳研究生院, 佳寶科技有限公司