專利名稱：亞葉酸鈉注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種亞葉酸鈉注射液及其制備方法。
背景技術(shù)：
亞葉酸(FA)的化學(xué)式是N-[4-(2-氨基-5-甲?；?5，6，7，8-四氫-4-羥基-蝶啶-6-甲基氨基)苯甲酰]-L(+)-谷氨酸，又名5-甲酰四氫葉酸或亞葉酸。亞葉酸鈣已在國內(nèi)外上市多年，臨床主要用于與5-氟尿嘧啶聯(lián)合用藥，增加其治療結(jié)直腸癌的作用，還可作為甲氨蝶呤的過量解救藥。亞葉酸鈣由于有鈣離子的存在，溶解度差，在臨床治療中有一定的局限性。表現(xiàn)為(1)臨床用藥時，需將1％的亞葉酸鈣溶液溶解在0.9％的氯化鈉等滲溶液中，增加了用藥總量及與治療不相關(guān)的離子量；(2)亞葉酸鈣必須緩慢滴注，否則血漿鈣離子濃度的增加會危害健康；(3)鈣易堵塞輸液管使治療無法進行。
由于亞葉酸鈣的活性成分為亞葉酸，鈣離子與藥效作用無關(guān)，故以亞葉酸鈉代替亞葉酸鈣，不僅用量減少且制劑中不相關(guān)雜質(zhì)少，臨床應(yīng)用效果優(yōu)于亞葉酸鈣。由于亞葉酸鈉對溫度、PH值、氧氣等因素敏感，穩(wěn)定性比較差，因此，仍然需要開發(fā)新的亞葉酸鈉注射液產(chǎn)品，滿足臨床需要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對上述現(xiàn)狀，旨在提供一種配方簡單的亞葉酸鈉注射液及其制備方法，避免了亞葉酸鈉因高熱、低pH值和氧氣的存在而導(dǎo)致分解，有利于長期貯存，雜質(zhì)含量低，臨床應(yīng)用安全。
本發(fā)明的注射液中，亞葉酸鈉占注射液總重量的4～6％，用鹽酸或氫氧化鈉將注射液的pH值調(diào)節(jié)至7.8至8.1，其余為注射用水。
亞葉酸鈉注射液的制備方法包括以下步驟
1)在無菌狀態(tài)下，用注射用水和氮氣灌注洗滌混合容器；2)保持充氮氣狀態(tài)下加入亞葉酸，攪拌下加入氫氧化鈉溶液，使其完全溶解成鹽，用NaOH或HCL調(diào)整pH值為7.8至8.1，加入注射用水到規(guī)定量，得到半成品溶液；3)檢測半成品溶液中氧的含量，控制在1ppm以下；4)在無菌和充氮氣狀態(tài)下，半成品溶液經(jīng)過0.22μm的雙層微孔濾膜過濾，裝入瓶中，最后加膠塞和鋁蓋密封。
從開始生產(chǎn)到半成品溶液的過濾滅菌不超過8個小時，從半成品溶液的過濾滅菌結(jié)束到灌裝完畢也不超過8個小時。
本發(fā)明的亞葉酸鈉注射液具有以下優(yōu)點配方簡單，節(jié)約成本；避免了因高溫、PH值和氧氣引起的亞葉酸鈉的降解，提高了穩(wěn)定性。
長期穩(wěn)定性試驗結(jié)果顯示，所有裝量規(guī)格樣品儲存36個月后，含量的下降不超過原來的5％，在95-105％范圍內(nèi)；pH值的降低和溶液吸收度的增強都在規(guī)定范圍內(nèi)；相關(guān)物質(zhì)5-甲酰四氫蝶酸、5，10-二甲酰四氫葉酸和葉酸的含量十分穩(wěn)定，其它雜質(zhì)均未超過限度。
根據(jù)實驗結(jié)果，確定保質(zhì)期為36個月(儲存條件2-8℃，避光保存)。
本發(fā)明的亞葉酸鈉注射液在室溫(20-23℃)日光條件下，用0.9％氯化鈉稀釋的樣品在72小時內(nèi)穩(wěn)定。另外，對存放于不同的輸液袋(PE，PVC，PP)的樣品在室溫(25±2℃)和冰柜(5±2℃)進行了測試，結(jié)果證明各種輸液袋對亞葉酸鈉溶液沒有影響。


圖1為本發(fā)明的亞葉酸鈉注射液的生產(chǎn)工藝流程圖
具體實施例方式本發(fā)明的亞葉酸鈉注射液的制備方法為將混合容器用蒸氣滅菌，然后在20℃下加入相當(dāng)于最終制備量80％的注射用水于已滅菌的混合容器中，保持真空狀態(tài)10分鐘開始充氮氣至少10分鐘，并在整個混合過程中保持充氮氣狀態(tài)；攪拌下(150轉(zhuǎn)/分)將亞葉酸加入混合容器中，攪拌(150-200轉(zhuǎn)/分)混懸液10分鐘，加入20％的NaOH溶液使亞葉酸完全溶解成鹽，同時用20％的NaOH調(diào)節(jié)PH值為7.8-8.1，每次加入混合2分鐘以保證溶液均勻，如有必要，加入3.7％的鹽酸調(diào)節(jié)PH值為7.8-8.1，加入余下的注射用水達到規(guī)定量，如果需要，加入氯化鈉調(diào)節(jié)溶液的滲透壓，繼續(xù)混合溶液9-12分鐘，確保溶液均勻，用經(jīng)滅菌的移液管或燒瓶吸取2份20ml混合液，進行微生物檢查，在氮氣流下密封混合反應(yīng)器，即得到半成品溶液；檢測半成品溶液中氧的含量，控制在1ppm以下；在無菌和充氮氣狀態(tài)下，半成品溶液經(jīng)過0.22μm的雙層微孔濾膜過濾，裝入瓶中，最后加膠塞和鋁蓋密封；從開始生產(chǎn)到半成品溶液的過濾滅菌不超過8個小時，從半成品溶液的過濾滅菌結(jié)束到灌裝完畢也不超過8個小時。無菌灌裝、加膠塞和鋁蓋密封采用自動灌裝生產(chǎn)線，灌裝、加膠塞和鋁蓋密封設(shè)備完全處于水平層流狀態(tài)，通過加氮氣壓使灌裝液從混合容器中轉(zhuǎn)移到灌裝機。
下面以實施例的方式進一步解釋本發(fā)明的內(nèi)容，但不應(yīng)理解為對本發(fā)明的限制。
實施例1將混合容器用蒸氣滅菌，然后在20℃下加入32.5-35.8L注射用水于已滅菌的混合容器中，保持真空狀態(tài)10分鐘開始充氮氣至少10分鐘，并在整個混合過程中保持充氮氣狀態(tài)；攪拌下(150轉(zhuǎn)/分)將2239g亞葉酸加入混合容器中，攪拌(150-200轉(zhuǎn)/分)混懸液10分鐘，加入20％的NaOH溶液使亞葉酸完全溶解成鹽，同時用20％的NaOH調(diào)節(jié)PH值為7.8-8.1，每次加入混合2分鐘以保證溶液均勻，如有必要，加入3.7％的鹽酸調(diào)節(jié)PH值為7.8-8.1，加入余下的注射用水達到規(guī)定量45.5kg，如果需要，加入氯化鈉調(diào)節(jié)溶液的滲透壓，繼續(xù)混合溶液9-12分鐘，確保溶液均勻，用經(jīng)滅菌的移液管或燒瓶吸取2份20ml混合液，進行微生物檢查，在氮氣流下密封混合反應(yīng)器，即得到半成品溶液；檢測半成品溶液中氧的含量，控制在1ppm以下；在無菌和充氮氣狀態(tài)下，半成品溶液經(jīng)過0.22μm的雙層微孔濾膜過濾，裝入瓶中，最后加膠塞和鋁蓋密封；灌裝時分為100mg，200mg，300mg(以亞葉酸鈉計)三個規(guī)格。從開始生產(chǎn)到半成品溶液的過濾滅菌不超過8個小時，從半成品溶液的過濾滅菌結(jié)束到灌裝完畢也不超過8個小時。無菌灌裝、加膠塞和鋁蓋密封采用自動灌裝生產(chǎn)線，灌裝、加膠塞和鋁蓋密封設(shè)備完全處于水平層流狀態(tài)，通過加氮氣壓使灌裝液從混合容器中轉(zhuǎn)移到灌裝機。
穩(wěn)定性研究為了評估pH值(6.0-8.5)、較高溫度和氧氣對亞葉酸鈉溶液穩(wěn)定性的影響，進行了長期穩(wěn)定性研究和加速穩(wěn)定性研究。結(jié)果顯示高溫、氧的存在和低于PH6，可以加速亞葉酸的降解。避免高溫滅菌、加入保護氣體和使pH值大于7.3，均可使含量降低的趨勢減慢。因此成品的pH值限制在7.5-8.0之間，滅菌方式采用雙層微孔濾膜(0.22μm)過濾，半成品溶液的灌裝和儲存需充氮氣保護。
1、加速穩(wěn)定性研究亞葉酸鈉50mg/ml注射液規(guī)格100mg/瓶儲存條件25±2℃，相對濕度60％±5％(n.c.＝無變化)(n.d.＝檢測不出)(n.t.＝?jīng)]有檢測)


2、長期穩(wěn)定性試驗試驗條件貯存條件溫度5±2℃包裝無色玻璃瓶裝，直立或倒置。
測定時間0、3、6、9、12、18、24、36個月分別取樣按穩(wěn)定性試驗質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)表試驗。
5±2℃下高中低三規(guī)格存放36個月后檢測結(jié)果范圍表


4、滴注用稀釋產(chǎn)品的穩(wěn)定性試驗亞葉酸鈉注射液滴注前需經(jīng)稀釋后置輸液袋中，因此，研究了其稀釋產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
試驗結(jié)果顯示，亞葉酸鈉溶液經(jīng)0.9％ NaCl稀釋后(亞葉酸稀釋到4-9mg/ml)，在室溫(20-23℃)、不避光的條件下，72小時內(nèi)穩(wěn)定。
因為塑料不吸附亞葉酸，因此稀釋液不僅可以存放在玻璃瓶中，也可存放在PVC、PP或PE輸液袋中。
25℃，相對濕度60％條件下，5-FU和50mg/ml亞葉酸鈉注射液存放在各試驗容器中沒有明顯的降解。研究過程中其雜質(zhì)含量與0時一致；不同容器中雜質(zhì)含量與玻璃瓶中一致，可見，50mg/ml亞葉酸鈉注射液可用0.9％的氯化鈉稀釋，與5-FU溶液相容。
5、保護性氣體對注射液的穩(wěn)定性研究整個制備亞葉酸鈉注射液過程都在充氮氣環(huán)境中進行，我們進行了充氮氣和不充氮氣的比較研究，并進行了加速實驗，結(jié)果證明保護性氣體氮氣的加入避免了因高溫、PH值和氧氣引起的亞葉酸鈉的降解，提高了穩(wěn)定性。
充氮氣環(huán)境亞葉酸鈉50mg/ml注射液規(guī)格100mg/瓶儲存條件25±2℃，相對濕度60％±5％(n.c.＝無變化) (n.d.＝檢測不出) (n.t.＝?jīng)]有檢測)


不充氮氣環(huán)境亞葉酸鈉50mg/ml注射液規(guī)格100mg/瓶儲存條件25±2℃，相對濕度60％±5％(n.c.＝無變化) (n.d.＝檢測不出) (n.t.＝?jīng)]有檢測)

權(quán)利要求
1.一種亞葉酸鈉注射液，其中亞葉酸鈉占注射液總重量的4～6％，用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)注射液的pH值為7.8至8.1，其余為注射用水。
2.如權(quán)利要求1所述的亞葉酸鈉注射液，其中亞葉酸鈉占注射液總重量的5％。
3.如權(quán)利要求1或2所述的亞葉酸鈉注射液的制備方法，包括以下步驟1)在無菌狀態(tài)下，用注射用水和氮氣灌注洗滌混合容器；2)保持充氮氣狀態(tài)下加入亞葉酸，攪拌下加入氫氧化鈉溶液，使亞葉酸完全溶解成鹽，用NaOH或HCL溶液調(diào)整pH值為7.8至8.1，加入注射用水到規(guī)定量，得到半成品溶液；3)檢測半成品溶液中氧的含量，控制在1ppm以下；4)在無菌和充氮氣狀態(tài)下，半成品溶液經(jīng)過0.22μm的雙層微孔濾膜過濾，裝入瓶中，最后加膠塞和鋁蓋密封；從開始生產(chǎn)到半成品溶液的過濾滅菌不超過8個小時，從半成品溶液的過濾滅菌結(jié)束到灌裝完畢也不超過8個小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及亞葉酸鈉注射液及其制備方法。亞葉酸鈉注射液中含有亞葉酸鈉和注射用水。制備方法是使亞葉酸與氫氧化鈉水溶液反應(yīng)生成亞葉酸鈉水溶液，用氫氧化鈉或鹽酸調(diào)節(jié)pH值為7.8～8.1，制得半成品溶液，半成品溶液經(jīng)過雙層微孔濾膜(0.22μm)過濾，裝入瓶中，最后用橡膠塞密封，整個制備過程在充氮氣環(huán)境中進行。本發(fā)明的亞葉酸鈉性能穩(wěn)定，有利于長期貯存，微粒物質(zhì)少，污染機會少，臨床應(yīng)用效果好。
文檔編號A61P35/00GK1799546SQ20051007677
公開日2006年7月12日 申請日期2005年6月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月14日
發(fā)明者周志強 申請人:凱基貿(mào)易有限公司