專利名稱：：一種埃坡霉素b脂質(zhì)體制劑及應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種脂質(zhì)體制劑及其應(yīng)用。更具體地說(shuō)，本發(fā)明涉及一種埃坡霉素B的脂質(zhì)體制劑及其制備方法，與在制備抗腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：天然產(chǎn)物埃坡霉素A-F(EpothilonesA-F)為具有細(xì)胞毒作用的十六元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類(lèi)化合物，最早是從SorangiumCellulosumStain90菌株中分離得到。研究表明，埃坡霉素B不僅具有強(qiáng)效的抗腫瘤作用，而且在抑制腫瘤多藥耐藥性方面有較強(qiáng)的作用，其抗腫瘤作用機(jī)制與紫杉醇非常相似，是一類(lèi)新型的微管穩(wěn)定劑，具有促進(jìn)GTP依賴性微管蛋白聚合形成微管的作用，并且對(duì)微管具有穩(wěn)定作用，而通過(guò)穩(wěn)定微管組裝過(guò)程抑制微管的解聚，導(dǎo)致微管束的排列異常，形成星狀體，進(jìn)而抑制了細(xì)胞形成正常的有絲分裂紡錘體，從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，甚至誘導(dǎo)其死亡。在國(guó)外，瑞士Novartis公司研制的埃坡霉素B(EPO906)正在進(jìn)行II期臨床研究。臨床上，在將埃坡霉素B用于治療患者疾病之前，必須將其配制成可給予患者的制劑形式。目前，國(guó)外采用主藥和可藥用溶劑制成注射液或凍干制劑，其中國(guó)專利CN99803672對(duì)此有詳細(xì)描述，而中國(guó)專利CN02806992則公開(kāi)了一種該品口服給藥形式的口服藥用劑型。埃坡霉素B全身用藥后，具有如骨髓抑制、嘔吐、腹瀉等胃腸道反應(yīng)及其他毒性，因此將埃坡霉素B制成脂質(zhì)體制劑給藥，能夠克服其毒性大的難題，降低藥物不良反應(yīng)而保持其藥理學(xué)作用，顯得十分必要。
發(fā)明內(nèi)容針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明要解決的問(wèn)題是提供一種埃坡霉素B的脂質(zhì)體制劑及其制備方法，與在制備抗腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，由治療有效量的埃坡霉素B、磷脂、膽固醇、氨基酸、甘露醇等組分組成，其重量百分比為埃坡霉素B0.1％-2％磷脂10％-50％膽固醇5％-50％氨基酸0.5％-5％甘露醇10％-70％上述埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其組分的優(yōu)選重量百分比為埃坡霉素B0.1％-1％磷脂20％-40％膽固醇5％-30％氨基酸0.5％-3％甘露醇40％-70％上述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其組分的最優(yōu)選重量百分比為埃坡霉素B0.5％磷脂30％膽固醇18％氨基酸1.5％甘露醇50％其中所述的磷脂，是自然類(lèi)磷脂或合成類(lèi)磷脂以及二者的混合物，該混合物的重量比例是9∶1至1∶9。其自然類(lèi)磷脂，優(yōu)選為卵磷脂、腦磷脂或豆磷脂；合成類(lèi)磷脂優(yōu)選為二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、腦磷脂丁二酸單酰胺、二油酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、磷酸卵磷脂、硬脂酰胺、氫化豆磷脂、磷脂酰絲胺酸、磷脂酸等。其中所述的氨基酸優(yōu)選是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑的制備方法，包括但不限于如下操作步驟將磷脂和膽固醇按一定比例混合(磷脂和膽固醇的比例為1∶5至10∶1)，用氯仿溶解后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)膜蒸發(fā)器上，真空蒸發(fā)至呈干燥薄層，備用；用60％叔丁醇水溶液溶解埃坡霉素B，轉(zhuǎn)入上述含有磷脂的容器中，以每分鐘8-20轉(zhuǎn)的速度攪拌，使之充分水合，即有脂質(zhì)體生成，將此混懸液在4℃～6℃條件下放置8-15小時(shí)，即得埃坡霉素B脂質(zhì)體溶液。利用上述制備的埃坡霉素B脂質(zhì)體溶液，可以制備非腸道用制劑，優(yōu)選為非腸道用凍干制劑。上述非腸道用凍干制劑可以采用常規(guī)的冷凍干燥法制備，如將氨基酸與甘露醇以1∶140至1∶2比例混合后加水溶解，然后將上述制備的埃坡霉素B脂質(zhì)體溶液與之混合，用超聲波儀超聲粉碎或高壓勻漿泵進(jìn)行勻漿，采用0.01μm～0.4μm濾膜過(guò)濾，優(yōu)選采用0.1μm～0.22μm微孔濾膜過(guò)濾，將無(wú)菌過(guò)濾后的溶液分裝于藥用玻璃瓶?jī)?nèi)，預(yù)冷至-40℃±2℃，恒溫6至8小時(shí)，再將冷阱溫度降至-55℃±2℃，開(kāi)啟真空系統(tǒng)，冷凍固體升華干燥，20小時(shí)～24小時(shí)后，將溫度升至0℃，保持24小時(shí)進(jìn)行凍干，通入無(wú)菌過(guò)濾的惰性氣體如氮?dú)獾确饪?，即獲得埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑。利用本發(fā)明的制備方法獲得的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，性能穩(wěn)定，全部粒子粒徑在2μm以下，毒性低，符合藥用標(biāo)準(zhǔn)，制作方便，成品率高，能夠滿足人們的需要。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑一般應(yīng)存儲(chǔ)在適合的容器中，如棕色可藥用的玻璃瓶中，更適合于存儲(chǔ)在灌入有惰性氣體，如氮?dú)狻鍤獾?，?yōu)選為氮?dú)獾目伤幱貌Ａ恐小Ｓ捎诎Ｆ旅顾谺對(duì)低pH敏感，對(duì)光敏感，易發(fā)生降解作用，因此在制備、實(shí)驗(yàn)、儲(chǔ)藏、運(yùn)輸過(guò)程中應(yīng)避光操作。本發(fā)明提供的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑的使用方法，如但不限于如下方法使用水性溶液稀釋本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑后，給被治療對(duì)象非胃腸道使用。在本發(fā)明所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑中，埃坡霉素B為一種微管穩(wěn)定劑，具有促進(jìn)GTP依賴性微管蛋白聚合形成微管的作用，并且對(duì)微管具有穩(wěn)定作用，通過(guò)穩(wěn)定微管組裝過(guò)程抑制其解聚，抑制有絲分裂，從而抑制腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)，甚至誘導(dǎo)其死亡。埃坡霉素B具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，能在較低濃度殺死癌細(xì)胞。磷脂為兩性物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)上含有親水親油基團(tuán)，具有兩條疏水鏈，在水中能自發(fā)的形成脂質(zhì)雙分子層，作為成膜材料使用。膽固醇也屬于兩性物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)上亦具有親水親油兩種基團(tuán)，它可以調(diào)節(jié)雙分子層的流動(dòng)性、通透性等。膽固醇和磷脂是共同構(gòu)成脂質(zhì)體的基礎(chǔ)物質(zhì)，二者結(jié)合后形成“U”型排列，將藥物溶于其中的水膜或雙分子層中，從而改變了藥物的部分性質(zhì)。本發(fā)明所用的氨基酸包括賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸，氨基酸系兩性物質(zhì)，在一定pH條件下可以產(chǎn)生帶電性，從而防止聚集，而不會(huì)有埃坡霉素結(jié)晶。且成本低，原料易得。本發(fā)明所用的甘露醇為分散性支架劑，以便得到不會(huì)裂開(kāi)或收縮的最終塊狀物，這種塊狀物為多孔材料，易于溶解，并具有優(yōu)良的外觀。通過(guò)以上組分制備的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，可以將埃坡霉素B包封于磷脂雙分子層形成的薄膜中間，穩(wěn)定性好，不易結(jié)晶，且易于溶解，適于臨床使用。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑的應(yīng)用，用于制備治療起源于人及動(dòng)物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝臟、膽囊、胰腺、甲狀腺、肺臟、食管、縱隔、胃、乳腺、子宮、子宮內(nèi)膜、子宮頸、卵巢、輸卵管、前列腺、膀胱、結(jié)直腸、頭頸部、眼睛、鼻咽部、口腔、淋巴結(jié)、淋巴管等淋巴系統(tǒng)、皮膚、粘膜、腺體、血液、血管、骨組織、脂肪的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，一般以治療人體的腫瘤疾病為主，包括減緩腫瘤增長(zhǎng)或使腫瘤消退等。由于埃坡霉素B脂質(zhì)體對(duì)淋巴系統(tǒng)的靶向性和對(duì)癌細(xì)胞的親和性，改變了埃坡霉素B在組織中的分布，使藥物選擇性的殺傷癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞的繁殖，從而提高療效，降低毒性，減輕變態(tài)和免疫反應(yīng)。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑的使用劑量，取決于很多因素，其主要因素為腫瘤的體積以及病理分型、病人的身體狀況、給藥方式、疾病的進(jìn)展情況及治療反應(yīng)等。其常用的劑量以埃坡霉素B計(jì)為0.1mg/m2～300mg/m2(指體表面積)，以0.1mg/m2～100mg/m2為理想，以1mg/m2～50mg/m2為最理想。利用本發(fā)明所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑進(jìn)行動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)，以小鼠抑瘤試驗(yàn)為例，結(jié)果表明接種S180腫瘤細(xì)胞株的小鼠腹腔注射埃博霉素B脂質(zhì)體凍干制劑7天，0.01mg/ml和0.005mg/ml(以埃坡霉素B計(jì))的高、中濃度的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑組的抑瘤率明顯高于常規(guī)埃坡霉素凍干制劑組，相同濃度的埃坡霉素脂質(zhì)體制劑組的抑瘤率高于常規(guī)埃坡霉素陽(yáng)性對(duì)照組，且對(duì)動(dòng)物的體重影響較小，說(shuō)明本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑是一個(gè)比常規(guī)埃坡霉素B制劑更為安全和有效的制劑。圖1埃博霉素脂質(zhì)體制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用劑量反應(yīng)曲線具體實(shí)施例方式實(shí)施例1按如下重量稱取各組分埃坡霉素B0.05gDPPC2.0gDMPC1.5g硬脂酰胺0.5g膽固醇2.0g氨基酸0.6g甘露醇13g將DPPC、DMPC、硬脂酰胺和膽固醇混合均勻，用100ml氯仿溶解后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)膜蒸發(fā)器上，30℃水浴真空蒸發(fā)除去溶媒，使脂質(zhì)在瓶?jī)?nèi)壁均勻成膜，抽干。將埃坡霉素B溶解于20ml60％叔丁醇溶液中，緩緩加入到含磷脂膜的容器中，密封，以18轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌5分鐘，使充分溶脹水合，將此混懸液在4℃低溫下放置10小時(shí)。用80ml水溶解氨基酸和甘露醇形成溶液，和上述低溫放置的埃坡霉素B混懸液充分混合后，用高壓勻漿泵勻漿2次，采用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后，經(jīng)檢驗(yàn)粒徑小于2μm，包封率高于80％，即可分裝于藥用西林瓶?jī)?nèi)，冷凍干燥，通入惰性氣體，封口，即得埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑。實(shí)施例2按如下重量稱取各組分埃坡霉素B0.1gMPEG-DSPE5.5g卵磷脂0.5g膽固醇3.6g氨基酸0.3g甘露醇10g將磷脂酰膽堿、磷脂酸和膽固醇混合均勻，用200ml氯仿溶解后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)膜蒸發(fā)器上，30℃水浴真空蒸發(fā)除去溶媒，使脂質(zhì)在瓶?jī)?nèi)壁均勻成膜，抽干。然后將埃坡霉素B溶解于20ml60％叔丁醇溶液中，緩緩加入到含磷脂膜的容器中，密封，13轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌7分鐘，使充分溶脹水合，將此混懸液在5℃低溫下放置12小時(shí)。用50ml水溶解氨基酸和甘露醇形成溶液，和上述低溫放置的埃坡霉素B混懸液充分混合后，用高壓勻漿泵勻漿2次，采用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后，經(jīng)檢驗(yàn)粒徑小于2μm，包封率高于80％，即可分裝于藥用西林瓶?jī)?nèi)，冷凍干燥，通入惰性氣體，封口，即獲得所說(shuō)的凍干制劑。實(shí)施例3按如下重量稱取各組分埃坡霉素B0.15g磷脂酰膽堿2.0g磷脂酸6.0g膽固醇5.5g氨基酸0.2g甘露醇6.0g將MPEG-DSPE、卵磷脂和膽固醇混合均勻，用300ml氯仿溶解后，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)膜蒸發(fā)器上，30℃水浴真空蒸發(fā)除去溶媒，使脂質(zhì)在瓶?jī)?nèi)壁均勻成膜，抽干。然后將埃坡霉素B溶解于30ml60％叔丁醇溶液中，緩緩加入到含磷脂膜的容器中，密封，以10轉(zhuǎn)/分鐘的速度攪拌10分鐘，使充分溶脹水合，將此混懸液在4℃低溫下放置8小時(shí)。將上述重量的氨基酸和甘露醇溶解于40ml水中形成混合物溶液，和上述制備的低溫混懸液充分混合，用高壓勻漿泵勻漿2次，采用0.22μm微孔濾膜過(guò)濾后，經(jīng)檢驗(yàn)粒徑小于2μm，包封率高于80％，即可分裝于藥用西林瓶?jī)?nèi)，冷凍干燥，通入惰性氣體，封口，即得埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑。實(shí)施例4按如下重量稱取各組分埃坡霉素B0.1gMPEG-DSPE0.5g氫化豆磷脂6.0g膽固醇3.0g氨基酸0.3g甘露醇8.0g將按以上重量稱取的MPEG-DSPE、氫化豆磷脂、膽固醇和埃坡霉素B置于100ml燒瓶中，加入60ml氯仿溶解，在氮?dú)饬飨滦D(zhuǎn)蒸發(fā)(速度40-60轉(zhuǎn)/分鐘)，減壓除去有機(jī)溶媒，再真空干燥24-36小時(shí)，得到恒重的脂質(zhì)薄膜，然后加入80ml的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(PH7.0，內(nèi)含磷酸二氫鈉和磷酸氫二鈉)，旋轉(zhuǎn)搖動(dòng)燒瓶，制成脂質(zhì)體懸濁液，靜置24-30小時(shí)后，超聲處30分鐘，以減小脂質(zhì)體粒徑，用葡聚糖凝膠透析除鹽，得埃坡霉素B脂質(zhì)體，然后加入氨基酸和甘露醇的水溶液50ml，經(jīng)冷凍干燥制成凍干制劑。實(shí)施例5、用MTT法檢測(cè)埃博霉素脂質(zhì)體制劑對(duì)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞毒作用通過(guò)MTT法檢測(cè)埃博霉素脂質(zhì)體制劑樣品對(duì)BEL-7402、Hela癌細(xì)胞株的細(xì)胞毒作用。實(shí)驗(yàn)采用96孔板進(jìn)行，首先將在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)48小時(shí)的細(xì)胞接入96孔板中，細(xì)胞培養(yǎng)條件是溫度37℃，含5％CO2的空氣，濕度RH100％，96孔板在此條件下繼續(xù)將細(xì)胞孵育12小時(shí)，細(xì)胞培養(yǎng)液加量100μl/孔。實(shí)驗(yàn)設(shè)置本底空白對(duì)照(包含完全培養(yǎng)基和MTT，無(wú)細(xì)胞)和藥物空白對(duì)照(包含完全培養(yǎng)基和不同濃度的埃博霉素制劑以及MTT，無(wú)細(xì)胞)以及細(xì)胞對(duì)照組，完全培養(yǎng)基使用無(wú)血清的MEM，本底空白組按照100μl/孔加入MEM。然后將實(shí)施例1的方法制備的埃博霉素脂質(zhì)體制劑中配制成濃度梯度為10nM，50nM，100nM，300nM，500nM(以埃博霉素計(jì))的溶液，各取20μl加入96孔板中受試藥物組和藥物空白組對(duì)應(yīng)的孔中，每個(gè)藥物濃度做3個(gè)平行孔。將MTT用PBS緩沖液配成2mg/ml的溶液加入96孔板中，每孔加量50μl，繼續(xù)孵育4小時(shí)，使MTT還原為Formazan顆粒，吸出并棄掉上清液，每孔加入150μl二甲基亞砜(DMSO)使Formazan顆粒溶解。最后用酶標(biāo)儀(Bio-Red13550型)在560nm處檢測(cè)每個(gè)孔的光密度值OD560，將各測(cè)試孔的OD值減去本底OD值或藥物空白孔OD值，各重復(fù)孔的OD值取平均數(shù)±SD。相對(duì)抑制率以T/C％(T加藥細(xì)胞的OD值，C對(duì)照細(xì)胞的OD值)，求出T/C％為50％的藥物濃度即IC50值。埃博霉素脂質(zhì)體制劑對(duì)BEL-7402、Hela癌細(xì)胞株的IC50值以埃坡霉素計(jì)分別為50nM和77nM，其細(xì)胞毒作用劑量反應(yīng)曲線如圖1所示。實(shí)施例6、埃博霉素B脂質(zhì)體制劑治療腫瘤的體內(nèi)試驗(yàn)本實(shí)施例提供了實(shí)施例2埃博霉素B脂質(zhì)體凍干制劑用于治療腫瘤的動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)情況。具體步驟如下1、材料1.1試驗(yàn)動(dòng)物成年健康KM小鼠60只，合格證號(hào)200008001，雌雄各半，體重20±2克，購(gòu)于山東魯抗醫(yī)藥集團(tuán)有限公司。1.2試驗(yàn)樣品本發(fā)明實(shí)施例2所述的埃博霉素B脂質(zhì)體凍干制劑。1.3陽(yáng)性對(duì)照埃坡霉素B、順鉑。1.4腫瘤細(xì)胞株S180，購(gòu)于山東省醫(yī)科院藥物研究所。2、方法2.1動(dòng)物稱重，編號(hào)，隨機(jī)分為6組，每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。2.2樣品處理精密稱取埃博霉素B脂質(zhì)體凍干粉適量，分別用注射用生理鹽水溶解并稀釋成0.01mg/ml、0.005mg/ml、0.001mg/ml(以埃坡霉素B計(jì))三個(gè)濃度的溶液，分別作為高、中、低濃度樣品組。2.3埃坡霉素B陽(yáng)性對(duì)照組精密稱取5mg埃坡霉素B純品，用注射用生理鹽水配制成0.005mg/ml埃坡霉素B對(duì)照溶液。2.4順鉑陽(yáng)性對(duì)照組將順鉑凍干粉用注射用生理鹽水配成0.01mg/ml混懸液，現(xiàn)用現(xiàn)配。2.5陰性對(duì)照注射用生理鹽水2.6接種腫瘤于每只小鼠右腹股溝皮下注射0.2mlS180稀釋液。2.7給藥及觀察48小時(shí)后腹腔注射給藥，樣品組與對(duì)照組的每只小鼠均注射0.2ml，連續(xù)注射7天，觀察小鼠特征變化，包括行為活動(dòng)、被毛、精神狀態(tài)、口腔、鼻腔、耳道、肛門(mén)、生殖器官是否正常，以及腫瘤生長(zhǎng)及小鼠死亡的情況。第14天稱重后脫椎處死，解剖剝離瘤塊，稱瘤重，計(jì)算腫瘤抑制率。3、結(jié)果與結(jié)論結(jié)果如下表所述<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="750">組別小鼠外觀變化處死平均體重g(X±SD)平均瘤重g(X±SD)腫瘤抑制率(％)高濃度樣品組中濃度樣品組低濃度樣品組常規(guī)埃坡霉素陽(yáng)性對(duì)照組順鉑陽(yáng)性對(duì)照組陰性對(duì)照組正常正常2只腹圍增大明顯，其余稍增大2只腹圍增大明顯，其余稍增大3只腹圍增大明顯，其余稍增大2只死亡，3只腹圍增大明顯35.58±1.0431.49±0.8527.25±1.4828.57±2.7227.57±2.7225.38±0.950.264±0.0670.469±0.0580.656±0.1630.556±0.1460.622±0.1761.273±0.14079.2163.1448.4356.351.1</table></tables>P＜0.05結(jié)論由以上結(jié)果可以看出，對(duì)接種S180瘤株的小鼠腹腔注射埃博霉素脂質(zhì)體凍干制劑7天，高、中濃度樣品組(以埃坡霉素B計(jì)分別為0.01mg/ml、0.005mg/ml)小鼠均生長(zhǎng)發(fā)育正常，被毛濃密而有光澤，運(yùn)動(dòng)活潑，鼻腔、口腔、耳道、眼、肛門(mén)及生殖器官未見(jiàn)異常，且抑瘤率明顯高于陽(yáng)性對(duì)照組，相同濃度的埃坡霉素脂質(zhì)體制劑組的抑瘤率高于常規(guī)埃坡霉素陽(yáng)性對(duì)照組，且對(duì)動(dòng)物的體重影響較小，說(shuō)明本發(fā)明的埃博霉素脂質(zhì)體凍干制劑具有抑制腫瘤的良好效果和較低的副作用。實(shí)施例7埃博霉素B脂質(zhì)體制劑治療腫瘤的體內(nèi)試驗(yàn)本實(shí)施例提供了實(shí)施例3埃博霉素B脂質(zhì)體凍干制劑用于治療腫瘤的動(dòng)物體內(nèi)試驗(yàn)情況。給雄性6-8周齡小鼠接種5×106人激素頑固性前列腺腫瘤細(xì)胞(PC-3)，每周檢測(cè)2次腫瘤生長(zhǎng)情況，直到腫瘤體積在60-100mm2的范圍為止。然后將動(dòng)物分成數(shù)組并通過(guò)尾靜脈靜脈注射0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.5mg/kg、1.0mg/kg(以埃坡霉素B計(jì))劑量的常規(guī)埃坡霉素B凍干制劑進(jìn)行治療，隔天一次，持續(xù)4天。同時(shí)配制成0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、5.0mg/kg劑量(以埃坡霉素B計(jì))的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑如上述方法尾靜脈注射，對(duì)照組動(dòng)物接受生理鹽水或空白脂質(zhì)體，計(jì)算平均存活時(shí)間并在第34天處死所有存活的動(dòng)物。應(yīng)用0.1mg/kg、0.2mg/kg、0.5mg/kg和1.0mg/kg劑量的常規(guī)埃坡霉素B凍干制劑的小鼠到第34天時(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物存活率為100％、100％、76％和34％，然而使用埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，0.5mg/kg、1.0mg/kg、2.0mg/kg、5.0mg/kg劑量組的存活率分別為100％、98％、53％和0％。遵循相同的給藥方案，使用0.1mg/kg、0.2mg/kg劑量的常規(guī)埃坡霉素B凍干制劑和0.5、1.0mg/kg劑量的埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑重復(fù)本治療試驗(yàn)，每周通過(guò)三個(gè)長(zhǎng)軸對(duì)腫瘤的體積進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果0.5mg/kg、1.0mg/kg劑量的脂質(zhì)體制劑治療組較常規(guī)制劑治療組腫瘤體積明顯減少，且對(duì)動(dòng)物的毒性相對(duì)減少。因此埃坡霉素B脂質(zhì)體凍干制劑比常規(guī)埃坡霉素B凍干制劑是更為安全和有效的抗腫瘤藥物制劑。權(quán)利要求1.一種埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，由埃坡霉素B、磷脂、膽固醇、氨基酸和甘露醇組分組成，其重量百分比為埃坡霉素B0.1％-2％磷脂10％-50％膽固醇5％-50％氨基酸0.5％-5％甘露醇10％-70％2.如權(quán)利要求1所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述組分的重量百分比為埃坡霉素B0.1％-1％磷脂20％-40％膽固醇5％-30％氨基酸0.5％-3％甘露醇40％-70％。3.如權(quán)利要求2所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述組分的重量百分比為埃坡霉素B0.5％磷脂30％膽固醇18％氨基酸1.5％甘露醇50％。4.如權(quán)利要求1～3之一所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的磷脂是自然類(lèi)磷脂或合成類(lèi)磷脂以及二者的混合物，該混合物的重量比例是9∶1至1∶9。5.如權(quán)利要求4所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的自然類(lèi)磷脂為卵磷脂、腦磷脂或豆磷脂。6.如權(quán)利要求4所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的合成類(lèi)磷脂為二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰磷脂酰膽堿、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿、聚乙二醇二硬脂酰磷脂酰乙醇胺、腦磷脂丁二酸單酰胺、二油酰磷脂酰甘油、二油酰磷脂酰膽堿、二油酰磷脂酰乙醇胺、磷酸卵磷脂、硬脂酰胺、氫化豆磷脂、磷脂酰絲胺酸、磷脂酸。7.如權(quán)利要求1～3之一所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的氨基酸是賴氨酸、蘇氨酸或蛋氨酸。8.權(quán)利要求1～3之一所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑為非腸道用制劑。9.如權(quán)利要求8所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，其特征在于，所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑為非腸道用凍干制劑。10.權(quán)利要求1～3之一所述之埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑的應(yīng)用，用于制備治療起源于人及動(dòng)物大腦、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、腎臟、肝臟、膽囊、胰腺、甲狀腺、肺臟、食管、縱隔、胃、乳腺、子宮、子宮內(nèi)膜、子宮頸、卵巢、輸卵管、前列腺、膀胱、結(jié)直腸、頭頸部、眼睛、鼻咽部、口腔、淋巴結(jié)、淋巴管等淋巴系統(tǒng)、皮膚、粘膜、腺體、血液、血管、骨組織、脂肪的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。全文摘要本發(fā)明公開(kāi)了一種埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑，是由埃坡霉素B、磷脂、膽固醇、氨基酸和甘露醇組分組成，其重量百分比為埃坡霉素B0.1％～2％，磷脂10％～50％，膽固醇5％～50％，氨基酸0.5％～5％，甘露醇10％～70％。本發(fā)明所述的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑為非腸道用制劑，用于制備治療起源于人及動(dòng)物組織或器官的原發(fā)或繼發(fā)的癌、肉瘤或癌肉瘤的藥物。本發(fā)明的埃坡霉素B脂質(zhì)體制劑穩(wěn)定性好，不易結(jié)晶，且易于溶解，臨床使用可提高埃坡霉素B的治療效果，降低毒性，減輕變態(tài)和免疫反應(yīng)。文檔編號(hào)A61P35/00GK1813721SQ20051004519公開(kāi)日2006年8月9日申請(qǐng)日期2005年11月22日優(yōu)先權(quán)日2005年11月22日發(fā)明者彭繼先申請(qǐng)人:菏澤睿鷹制藥集團(tuán)有限公司