專利名稱：防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬藥物和醫(yī)療器械領(lǐng)域，涉及防治支架內(nèi)再狹窄的藥物洗脫支架，具體涉及一種防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架。
背景技術(shù)：
冠狀動(dòng)脈介入治療(PCI)是冠心病的重要治療方法。目前支架置入術(shù)已經(jīng)取代了球囊擴(kuò)張術(shù)成為PCI的主要手段。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年大約有1500000以上的患者需要做PCI治療，但支架后再狹窄率高達(dá)15～30％。因此防治支架后再狹窄成為PCI研究領(lǐng)域的重點(diǎn)和熱點(diǎn)。據(jù)報(bào)道，臨床常用的切割球囊擴(kuò)張、定向旋切、激光成形、基因治療、全身給藥等治療再狹窄療效均不甚滿意。血管內(nèi)放療雖然取得了較好的療效，但是易引起“邊緣效應(yīng)”和血栓形成。近年來隨著載藥支架防治再狹窄臨床試驗(yàn)結(jié)果的發(fā)布，使人們看到了這種技術(shù)的美好前景，高度評(píng)價(jià)這種技術(shù)標(biāo)志著PCI進(jìn)入了“藥物洗脫支架時(shí)代”，是心血管病介入學(xué)的“第三次革命”。其中冠狀動(dòng)脈介入治療術(shù)后再狹窄是困擾此項(xiàng)技術(shù)發(fā)展的難題，藥物洗脫支架有望成為解決支架植入后再狹窄的有效途徑。
目前世界上最引人矚目的紫杉醇和雷帕霉素涂層支架大規(guī)模的臨床試驗(yàn)還在進(jìn)一步的研究中。我國尚無自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的藥物洗脫支架進(jìn)入臨床研究。
莪術(shù)油是從中藥莪術(shù)中提取的揮發(fā)油，含有莪術(shù)酮、莪術(shù)醇、β-欖香烯、姜黃素、莪術(shù)二酮等多種活性成分。研究表明，莪術(shù)油具有抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡、抑制血小板聚集、抗血小板粘附、改善血液流變學(xué)、抗血栓形成、抗炎、抗脂質(zhì)過氧化等作用，但尚無用于支架涂層的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種防治支架內(nèi)再狹窄的藥物洗脫支架，具體涉及一種防止冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架。
本發(fā)明采用莪術(shù)油原料液(浙江瑞安制藥廠，批號(hào)980908)，噴涂于聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅涂層不銹鋼支架的表面，涂層厚度12～30um，支架表面藥物含量1.8-3.6μg/mm2。
本發(fā)明采用聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料作為藥物控制釋放涂層(CN 02136332.3)。其制備方法是，配制1％的聚甲基丙烯酸丁酯的四氫呋喃溶液，其中含有聚合物量25-30％的納米二氧化硅，作為控制釋放涂層。將莪術(shù)油藥物加入上述溶液，使藥物與聚甲基丙烯酸丁酯的重量比為1∶1，攪拌使藥物懸浮在溶液中，用噴槍將上述懸浮液均勻地噴涂在支架上，40℃烘干，精確稱重，使每平方毫米支架表面的藥物含量為1.8-3.6μg，涂層厚度12～30um。將藥物洗脫支架安裝在球囊上，環(huán)氧乙烷消毒后備用。單純涂層支架的制備則直接將控制釋放涂層噴涂在支架上，其余過程與藥物洗脫支架相同。
本發(fā)明支架其中的莪術(shù)油液，具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抗炎、抗血栓形成、抑制膠原合成作用，而且莪術(shù)油為脂溶性藥物，易通過細(xì)胞膜，持續(xù)作用于病變局部，即使短暫的、極小的劑量也可以產(chǎn)生長(zhǎng)久的持續(xù)的抗增生作用，結(jié)合聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅涂層控制釋放的特點(diǎn)，植入冠脈后的組織相容性和安全性良好，冠脈內(nèi)新生內(nèi)膜程度明顯減少，管腔顯著增大及凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增多，比紫杉醇和雷帕霉素涂層支架單一作用于某一環(huán)節(jié)有明顯優(yōu)勢(shì)，能防治支架術(shù)后再狹窄。
本發(fā)明采用的涂層聚甲基丙烯酸丁酯/二氧化硅(納米)復(fù)合控制釋放材料與藥物莪術(shù)油液混合涂于不銹鋼支架的表面，具有如下優(yōu)點(diǎn)1.聚甲基丙烯酸丁酯和二氧化硅之間形成互穿網(wǎng)絡(luò)或二氧化硅粒子均勻地分散在聚甲基丙烯酸丁酯之中，因此涂層具備高分子材料優(yōu)良的柔韌性；2.二氧化硅和聚甲基丙烯酸丁酯之間存在共價(jià)聯(lián)接，使得聚甲基丙烯酸丁酯更致密，有利于藥物的長(zhǎng)期釋放，并且比使用有機(jī)交聯(lián)劑更安全、無毒，3.所采用藥物莪術(shù)油液，具有長(zhǎng)久的持續(xù)的抗增生作用。


圖1是莪術(shù)油控釋洗脫支架體外控制釋放測(cè)試結(jié)果。
圖2涂層組支架植入后4w損傷冠脈組織病理學(xué)變化(HE×14)內(nèi)膜明顯增厚。
圖3莪術(shù)油組支架植入后4w損傷冠脈組織病理學(xué)變化(HE×14)內(nèi)膜厚度較涂層組減小。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1制備莪術(shù)油控釋洗脫支架采用不銹鋼材料支架，聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料作為藥物控制釋放涂層。首先配制1％的聚甲基丙烯酸丁酯的四氫呋喃溶液，其中含有聚合物量25-30％的納米二氧化硅，將所述莪術(shù)油藥物加入溶液，使藥物與聚甲基丙烯酸丁酯的重量比為1∶1，攪拌使藥物懸浮在溶液中，用噴槍將上述懸浮液均勻地噴涂在支架上，40℃烘干，精確稱重，計(jì)算每平方毫米支架表面的藥物含量。涂層厚度12～30μm，支架表面藥物含量1.8-3.6μg/mm2。將藥物洗脫支架安裝在球囊上，環(huán)氧乙烷消毒后備用。
對(duì)莪術(shù)油控釋洗脫支架進(jìn)行體外控制釋放測(cè)試，結(jié)果表明藥物在初始的約2周內(nèi)快速釋放，然后釋放速度逐漸趨緩，4個(gè)月后，仍有超過一半的藥物沒有釋放出來，與同種單純聚合物的釋放時(shí)間相比顯著減緩，保證了藥物的持續(xù)作用。同時(shí)，通過簡(jiǎn)單調(diào)整藥物和涂層的比例，以及涂層中聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅的比例，能在很大程度上調(diào)整釋放曲線的形狀。表明復(fù)合涂層中的納米二氧化硅有延長(zhǎng)釋放時(shí)間的效果。
實(shí)施例2動(dòng)物實(shí)驗(yàn)測(cè)試莪術(shù)油控釋洗脫支架對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物犬支架術(shù)后內(nèi)膜增生的作用，評(píng)價(jià)莪術(shù)油控釋洗脫支架防治支架術(shù)后再狹窄的安全性與療效。
健康雜種成年犬隨機(jī)分為2組按支架直徑、冠脈直徑1.2～1.3∶1的比例分別將單純涂層支架、實(shí)施例1的莪術(shù)油控釋洗脫支架，其涂層厚度12μm，支架表面藥物含量1.8μg/mm2隨機(jī)植入回旋支和前降支合適的血管段，為涂層組、莪術(shù)油組，每組10只，術(shù)前1天開始服用阿司匹林250mg，直至30天處死，取支架植入段血管，涂層組和用藥組再各取其中2只動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎、胃、腦、骨骼肌、睪丸等重要器官，固定。
光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡觀察各組支架血管段及重要器官組織病理學(xué)變化。計(jì)算機(jī)圖像定量分析支架血管段新生內(nèi)膜面積、腔面積和平均內(nèi)膜厚度。免疫組化法測(cè)定支架血管段α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SM actin)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)并圖像半定量分析，TUNEL法結(jié)合圖像分析、流式細(xì)胞儀技術(shù)、透射電鏡觀察和檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
結(jié)果顯示，1.光鏡及掃描電鏡觀察支架段血管無炎癥，無血栓形成，無動(dòng)脈壁變薄，無動(dòng)脈瘤形成，無中膜、外膜壞死，心、肝、脾、肺、腎、腦等組織無病理性損害。表明莪術(shù)油控釋洗脫支架植入犬冠脈后的組織相容性和安全性良好。
2.支架植入后4w莪術(shù)油組較涂層組新生內(nèi)膜程度明顯減少，管腔顯著增大。表明莪術(shù)油控釋洗脫支架能防治犬冠脈支架內(nèi)再狹窄。
3.透射電鏡形態(tài)學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)莪術(shù)油組凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯多于其余各組。流式細(xì)胞儀定量分析發(fā)現(xiàn)莪術(shù)油組細(xì)胞凋亡百分率明顯高于涂層組。莪術(shù)油組凋亡指數(shù)明顯高于涂層組，莪術(shù)油組最顯著。
4.免疫組化法檢測(cè)PCNA，莪術(shù)油組陽性表達(dá)明顯少于涂層組，表明莪術(shù)油控釋洗脫支架對(duì)犬冠脈PCNA有影響。
5.免疫組化法檢測(cè)α-SM actin，莪術(shù)油組陽性表達(dá)明顯少于涂層組，表明莪術(shù)油控釋洗脫支架對(duì)犬冠脈α-SM actin有影響。
結(jié)果證實(shí)1.本發(fā)明聚甲基丙烯酸丁酯/二氧化硅(納米)復(fù)合控釋涂層支架具有很好的生物相容性。
2.本發(fā)明聚甲基丙烯酸丁酯/二氧化硅(納米)復(fù)合控釋涂層支架植入犬冠狀動(dòng)脈安全、可行。
3.本發(fā)明莪術(shù)油聚甲基丙烯酸丁酯/二氧化硅(納米)復(fù)合控釋涂層支架可有效防治犬冠脈支架內(nèi)再狹窄。
4.本發(fā)明莪術(shù)油聚甲基丙烯酸丁酯/二氧化硅(納米)復(fù)合控釋涂層支架防治支架內(nèi)再狹窄的作用機(jī)制主要是誘導(dǎo)新生內(nèi)膜和中膜平滑肌細(xì)胞凋亡，并且抑制平滑肌細(xì)胞增生。
實(shí)施例3健康雜種成年犬隨機(jī)分為2組按支架直徑、冠脈直徑1.2～1.3∶1的比例分別將單純涂層支架、實(shí)施例1的莪術(shù)油控釋洗脫支架，其涂層厚度30μm，支架表面藥物含量3.6μg/mm2，隨機(jī)植入回旋支和前降支合適的血管段，為涂層組、莪術(shù)油組，每組10只，術(shù)前1天開始服用阿司匹林250mg，直至30天處死，取支架植入段血管，再各取其中2只動(dòng)物的心、肝、脾、肺、腎、胃、腦、骨骼肌、睪丸等重要器官，固定。
光學(xué)顯微鏡和掃描電鏡觀察各組支架血管段及重要器官組織病理學(xué)變化。計(jì)算機(jī)圖像定量分析支架血管段新生內(nèi)膜面積、腔面積和平均內(nèi)膜厚度。免疫組化法測(cè)定支架血管段α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SM actin)、增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)表達(dá)并圖像半定量分析，TUNEL法結(jié)合圖像分析、流式細(xì)胞儀技術(shù)、透射電鏡觀察和檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果同實(shí)施例2。
權(quán)利要求
1.防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架，其特征是以莪術(shù)油液體為藥物有效成分，以不銹鋼材料為支架，控釋涂層為聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料，所述的支架涂層厚度12～30μm，支架表面藥物含量1.8-3.6μg/mm2。
2.按權(quán)利要求1所述的防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架，其特征是所述涂層厚度為12μm，支架表面藥物含量1.8μg/mm2。
3.按權(quán)利要求1所述的防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架，其特征是所述涂層厚度為30μm，支架表面藥物含量3.6μg/mm2。
全文摘要
本發(fā)明屬藥物和醫(yī)療器械領(lǐng)域，涉及防治支架內(nèi)再狹窄的藥物洗脫支架，具體涉及一種防治冠脈支架內(nèi)再狹窄的莪術(shù)油控釋洗脫支架。本支架以莪術(shù)油液體為藥物有效成分，以不銹鋼材料為支架，控釋涂層為聚甲基丙烯酸丁酯/納米二氧化硅復(fù)合材料，本發(fā)明支架具有抑制細(xì)胞生長(zhǎng)和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、抗炎、抗血栓形成、抑制膠原合成及長(zhǎng)久的持續(xù)的抗增生作用，植入冠脈后的組織相容性和安全性良好，冠脈內(nèi)新生內(nèi)膜程度明顯減少，管腔顯著增大及凋亡細(xì)胞數(shù)量明顯增多，能防治支架術(shù)后再狹窄。
文檔編號(hào)A61M29/00GK1647776SQ20051002371
公開日2005年8月3日 申請(qǐng)日期2005年1月31日 優(yōu)先權(quán)日2005年1月31日
發(fā)明者孫寶貴, 趙軍禮, 鐘偉 申請(qǐng)人:上海市第一人民醫(yī)院