專(zhuān)利名稱(chēng)：土霉素混懸乳劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療畜禽疾病的土霉素藥物劑型及其制備方法，特別涉及土霉素混懸乳劑的配方及其制備方法。
背景技術(shù)：
藥物的遞藥系統(tǒng)一直是醫(yī)藥界的熱點(diǎn)研究領(lǐng)域之一。微乳是一種新型的遞藥系統(tǒng)，它是由表面活性劑、輔助表面活性劑、油和水在適當(dāng)比例，自發(fā)形成的一種均勻、低粘度、熱力學(xué)穩(wěn)定的透明或半透明分散體系，該體系具有極高的穩(wěn)定性和對(duì)溶質(zhì)的高度分散性及吸附能力。應(yīng)用微乳研制的藥物制劑能夠提高藥物的生物利用度及機(jī)體的吸收速度，促進(jìn)藥物在機(jī)體內(nèi)的吸收，增加難溶性藥物的溶解度，增強(qiáng)藥物的穩(wěn)定性，并可使藥物濃集在靶向器官，增強(qiáng)藥物的療效。由于微乳具有許多優(yōu)點(diǎn)，因而近年來(lái)備受人們關(guān)注。
微乳的制備工藝簡(jiǎn)單，關(guān)鍵是選擇合適的配方，在選擇了適宜的配方后，將油、水、表面活性劑和輔助表面活性劑混合攪拌即可形成微乳。親水親油平衡值是制備微乳時(shí)選擇表面活性劑的依據(jù)，W/O型微乳需用HLB值在3-6范圍的表面活性劑，O/W型微乳需用HLB值在8-18范圍的表面活性劑；表面活性劑的離子性質(zhì)也是決定微乳形成的關(guān)鍵因素之一，陽(yáng)離子型表面活性劑在pH3-7范圍的介質(zhì)中適用，陰離子型表面活性劑適用于pH8以上的介質(zhì)，而非離子型表面活性劑在pH3-10的介質(zhì)均可使用，此外，油相分子的大小對(duì)微乳的形成也較為重要，原則上油相分子體積越小，溶解力越強(qiáng)，越易形成微乳，而油相分子鏈過(guò)長(zhǎng)則不易形成微乳。
由于微乳具有許多獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)，且其制劑可用于各種給藥途徑，因此，微乳制劑在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用將日趨廣泛。目前，微乳較多用于藥物的遞藥系統(tǒng)，且已有許多制劑用于臨床，在國(guó)外有關(guān)微乳制劑的研究較多，且已有商業(yè)化產(chǎn)品，國(guó)內(nèi)多處在研究階段。如以下文獻(xiàn)中公開(kāi)了微乳作為藥物的載體的技術(shù)[1]中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部.長(zhǎng)效土霉素注射液[M].《進(jìn)口獸藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》，1993，3-4. 徐士新，郭文林，仲鋒，等.土霉素注射液在豬體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)比較[J]中國(guó)獸藥雜志，1998，32(1)10-13. 湯麗娟.微乳遞藥系統(tǒng)[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)-合成藥、生化藥、制劑分冊(cè)，1988，9(5)294-296. 王紅喜.微乳制劑的研究進(jìn)展[J].國(guó)外醫(yī)學(xué)-藥學(xué)分冊(cè)，1996，23(4)206-211. Neumayer HH，F(xiàn)arber L，Haller P，et al.Clinicalexperience transferring kidney transplant patients fromsandimmun to sandimmun neoral-resultsafter 3months[J].ClinNephrol，1995，43(Suppl 1)S27.
土霉素為四環(huán)素族廣譜抗生素，對(duì)革蘭氏陽(yáng)性菌、革蘭氏陰性菌、立克次氏體、衣原體、支原體、和螺旋體等均有抑制作用，可用于防治巴氏桿菌病、布氏桿菌病、炭疽、大腸桿菌和沙門(mén)氏桿菌感染、馬鼻疽及豬支原體肺炎等疾病。土霉素屬酸堿兩性晶體物，能與酸和堿結(jié)合而成鹽類(lèi)，在水中溶解極微，易溶于稀酸和稀堿，在酸性水溶液中較穩(wěn)定，堿性水溶液中易遭破壞而失效。
目前，土霉素制劑的劑型主要有粉劑、片劑、膏劑和注射劑，其中注射制劑包括0.5％、5％常規(guī)注射液，10％、20％長(zhǎng)效注射液，25％油制混懸液。由于常規(guī)注射液藥物濃度低，藥效持續(xù)時(shí)間短，因而存在注射劑量大，注射次數(shù)多，需注射2次/天等缺點(diǎn)，因此，人們探索了高濃度長(zhǎng)效注射制劑的研究。國(guó)外在80年代研制成功了具有長(zhǎng)效作用的土霉素注射液，其商品名為特效米先，并已進(jìn)口我國(guó)。近年來(lái)，國(guó)內(nèi)亦研制成了高濃度土霉素注射液，系采用聚乙烯吡咯烷酮、α-吡咯烷酮、丙二醇等不同的溶媒制成的。
雖然注射液和油制混懸液具有注射劑量少，長(zhǎng)時(shí)間維持機(jī)體有效血藥濃度，用藥次數(shù)少等優(yōu)點(diǎn)，但也存在不同程度的缺點(diǎn)，如藥物成本高，穩(wěn)定性差，生產(chǎn)工藝復(fù)雜，有的溶媒制成的注射劑尚需注射2次/天等缺點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明首要目的在于針對(duì)上述問(wèn)題提供一種利用微乳體系作為土霉素遞系統(tǒng)的土霉素混懸乳劑。
本發(fā)明另一目的在于提供一種土霉素混懸乳劑的制備方法。
為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明目的，本發(fā)明的土霉素混懸乳劑包括以重量比計(jì)的組分土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化劑0.5份、防腐劑0.006份，加水至100份。
本發(fā)明土霉素混懸乳劑的生產(chǎn)方法包括步驟準(zhǔn)備按重量比計(jì)的組分土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化劑0.5份、防腐劑0.006份和加至100份的水；按處方量取聚山梨酯、油酸、丙丁醇、置于攪拌缸中混合均勻；緩慢加入水，并不斷攪拌直至混勻；加入處方量的土霉素、抗氧化劑和防腐劑，攪拌均勻，將所獲得的溶液灌裝、密封即為土霉素混懸乳劑成品。
本發(fā)明土霉素混懸乳劑作為治療畜禽疾病的四環(huán)素族廣譜抗生素新型制劑，是利用了微乳形成理論并應(yīng)用常規(guī)攪拌法而制備的一種長(zhǎng)效緩釋制劑。由于它是利用微乳體系作為土霉素的遞藥系統(tǒng)，因此與常規(guī)土霉素注射劑相比所具有以下優(yōu)點(diǎn)可以減少用藥次數(shù)，降低用藥成本，簡(jiǎn)化生產(chǎn)工藝，增加藥物靶向性，提高藥物的生物利用度及機(jī)體的吸收速度，增強(qiáng)藥物的療效。另外，本發(fā)明土霉素混懸乳劑的制備不需要特殊溶媒，因此成本低、生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例20％土霉素混懸乳劑取土霉素20g、油酸5g、聚山梨酯5g、丙丁醇40g、抗氧化劑0.5g、防腐劑0.006g備用，并對(duì)土霉素、油酸、聚山梨酯進(jìn)行滅菌處理；取處方量的油酸、聚山梨酯、丙丁醇、置于攪拌缸中，混合均勻；緩慢加入蒸餾水至100ml，并不斷攪拌直至混勻；加入處方量的土霉素、抗氧化劑和防腐劑，攪拌均勻；將所獲得的溶液灌裝、密封即為土霉素混懸乳劑成品。
土霉素混懸乳劑的質(zhì)量穩(wěn)定性試驗(yàn)1、物理性狀20％土霉素混懸乳劑為黃色至黃褐色、稍粘稠的乳劑，長(zhǎng)期靜置后會(huì)有分層，上清為黃色至黃褐色的液體，下層為黃色沉淀物，振蕩后為均勻的黃色至黃褐色乳液，藥液pH為3-4。
2、藥物含量測(cè)定(1)工作曲線(xiàn)的繪制精確稱(chēng)取土霉素對(duì)照品10mg，置于100ml容量瓶中，用0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，制成土霉素濃度為100μg/ml儲(chǔ)備液，再精取儲(chǔ)備液適量分置100mL容量瓶中，用0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至刻度，制成濃度為2、4、6、8、10、12、15、17μg/ml的標(biāo)準(zhǔn)液，在268nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。結(jié)果土霉素濃度在4-15μg/ml范圍內(nèi)，吸收度與濃度呈良好的線(xiàn)性關(guān)系，以吸收值A(chǔ)值對(duì)濃度C值進(jìn)行回歸，得回歸方程C＝24.0904A+0.2406，r＝0.9998。
(2)回收率測(cè)定制備濃度分別為190、195、200和205mg/ml的四種土霉素混懸乳劑，分取不同濃度的混懸乳劑適量，用0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋?zhuān)雇撩顾氐臐舛仍?-15μg/ml范圍內(nèi)，在268nm波長(zhǎng)處測(cè)定每個(gè)濃度樣品的吸收度，并計(jì)算其回收率。結(jié)果其平均回收率為100.62％，RSD為0.48％。
(3)藥物含量測(cè)定隨機(jī)抽取5批不同保存時(shí)間的土霉素混懸乳劑5瓶，分別精確移取1.0ml混懸劑樣品，用0.1mol/L的鹽酸溶液稀釋至土霉素濃度為10μg/ml的溶液，以0.1mol/L的鹽酸溶液作空白對(duì)照，在268nm波長(zhǎng)處測(cè)定稀釋樣品上清液的吸收度，由回歸方程計(jì)算混懸劑樣品中土霉素的含量。結(jié)果測(cè)定的土霉素含量分別為實(shí)際量的99.79％、98.46％、100.75％、100.82％、99.90％，符合質(zhì)量要求。
3、穩(wěn)定性試驗(yàn)(1)粘度測(cè)定取出口內(nèi)徑為1.2mm，上口內(nèi)徑為2.7mm的1ml玻璃吸管，分別吸取不同批次的混懸乳劑1ml，在室溫條件下，記錄微乳從1ml刻度垂直下降至0.4ml刻度，即流出0.4ml混懸乳劑所需要的時(shí)間(s)，結(jié)果混懸乳劑的粘稠度為3-4s。
(2)光加速試驗(yàn)將制備的不同批次的土霉素混懸乳劑樣品，分裝于無(wú)色透明的玻璃瓶中，密封后，置光照度為4500LX左右的環(huán)境中放置10d，并在放置的0、5、7、10d采取樣品，觀(guān)察土霉素混懸乳劑的性狀、藥物絮凝情況、并測(cè)定沉降體積比、藥物顆粒大小，藥物含量。結(jié)果3批混懸乳劑樣品除上清液顏色稍有加深外，其它性狀，如混懸乳劑的pH值、沉降體積比、藥物顆粒大小及藥物含量等指標(biāo)均未見(jiàn)明顯變化，表明混懸乳劑對(duì)光具有穩(wěn)定性。
(3)加溫加濕試驗(yàn)將制備的不同批次的土霉素混懸乳劑樣品，置于水套式電熱恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，調(diào)整培養(yǎng)箱溫度為30±1℃，相對(duì)濕度為60％±5％，定期觀(guān)察3個(gè)月，每月取樣1次，檢查土霉素混懸乳劑樣品的物理性狀、沉降體積比、藥物絮凝情況、顆粒大小，并測(cè)定藥物含量。結(jié)果混懸乳劑樣品定期觀(guān)察3個(gè)月，其質(zhì)量指標(biāo)均未見(jiàn)明顯變化，說(shuō)明土霉素混懸乳劑對(duì)溫度、濕度的穩(wěn)定性良好。
(4)重分散性在室溫環(huán)境中，將土霉素混懸乳劑靜止放置30d后，用力上下振蕩數(shù)次，然后檢查混懸乳劑的重分散性、物理性狀、絮凝性，結(jié)果表明土霉素混懸乳劑經(jīng)過(guò)3-5次振蕩，即可均勻分散，且瓶底無(wú)沉淀，混懸劑中無(wú)凝塊，混懸劑的重散性良好。
4、通針性取土霉素混懸乳劑振蕩均勻后，分別用6-10號(hào)針頭抽取混懸劑樣品，測(cè)定不同型號(hào)針頭抽取混懸劑的難易程度和速度，結(jié)果除用6號(hào)針頭抽取速度較慢外，其余7-10號(hào)針頭均可順利抽取混懸乳劑，這說(shuō)明混懸乳劑具有良好的通針性。
5、藥物粒徑測(cè)定應(yīng)用顯微鏡法測(cè)定土霉素顆粒粒徑形狀、大小及分布。取土霉素混懸乳劑樣品用蒸餾水100倍稀釋?zhuān)浞謸u勻，取1滴稀釋樣品滴于載玻片上，在400倍視野下觀(guān)察土霉素微粒的形狀、測(cè)定微粒的大小與分布。鏡檢可見(jiàn)混懸乳劑中的土霉素微粒呈球形，粒徑大小在2-5μm之間的顆粒占藥物總數(shù)的96％以上，晶型一致，粒徑大小相對(duì)比例符合正態(tài)分布，混懸劑室溫放置30d，未見(jiàn)藥物顆粒增長(zhǎng)、轉(zhuǎn)型和凝結(jié)現(xiàn)象。未制成混懸劑的土霉素微粒為長(zhǎng)柱形，粒徑大小在2-3×35-95μm之間的顆粒占藥物總數(shù)的90％以上。
6、藥代動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)(1)試驗(yàn)動(dòng)物試驗(yàn)動(dòng)物為5頭體重30-50kg的健康哈白豬，按照常規(guī)方式飼養(yǎng)，飼料中未添加任何藥物。
(2)用藥方法豬耳后深部肌肉一次注射20％土霉素混懸乳劑0.1ml/kg體重，即注射土霉素20mg/kg體重。
(3)血樣采集在用藥后1、2、4、8、12、24、36、48、60、72h分別采取血樣5ml，注入裝有1％肝素的離心管中，3000r/min離心15min，制備血漿，置-20℃冰箱保存待測(cè)。
(4)血藥濃度測(cè)定取血漿1ml，加20％三氯乙酸0.25ml，沉淀蛋白，置-4℃冰箱冷藏15min，4000r/min離心15min，吸取上清液適量，過(guò)已經(jīng)活化的C18柱，待流盡后，用水1-2ml洗滌液洗滌，至流出液為中性，吹干。用洗脫液以上洗脫樣品，收集洗脫液，取20μl用高壓液相色譜測(cè)定。
將樣品測(cè)定所得峰面積代入回歸方程，計(jì)算出固相萃取洗脫液中的土霉素濃度，然后按下述公式計(jì)算注藥后不同時(shí)間血樣的血藥濃度C(μg/ml)＝X×V2×V4/V1×V3×R。
(5)血藥濃度測(cè)定結(jié)果在注射20％土霉素混懸乳劑后不同時(shí)間，豬血樣的血藥濃度測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。
表1 20％土霉素混懸乳劑在豬體內(nèi)的的血藥濃度(μg/ml)

以血漿土霉素濃度0.5μg/ml為最小有效濃度，從表1可知，20％土霉素混懸乳劑能夠維持有效血藥濃度的時(shí)間為72h，因此，按每3天注藥一次，即可達(dá)到理想療效。
由此可見(jiàn)，20％土霉素混懸乳劑用藥后吸收緩慢，可顯著延長(zhǎng)療效，一次用藥可維持有效血藥濃度的時(shí)間為72h，每3天用藥1次即可。
權(quán)利要求
1.一種土霉素混懸乳劑，包括以重量比計(jì)的組分土霉素20份、油酸3-8份、聚山梨酯3-8份、丙丁醇30-50份、抗氧化劑0.5份和防腐劑0.0006份，加水至100份。
2.如權(quán)利要求1所述的土霉素混懸乳劑，其中所述油酸為5份，所述聚山梨酯為5份，所述丙丁醇為40份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的土霉素混懸乳劑的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)按照所述配比準(zhǔn)備土霉素、油酸、聚山梨酯、丙丁醇、抗氧化劑、防腐劑和水；(2)按處方量取聚山梨酯、油酸、丙丁醇置于攪拌缸中混合均勻；(3)緩慢加入水，并不斷攪拌直至混勻；(4)加入處方量的土霉素、抗氧化劑和防腐劑，攪拌均勻；(5)將獲得的溶液灌裝、密封即為土霉素混懸乳劑成品。
全文摘要
本發(fā)明提供一種長(zhǎng)效緩釋的土霉素混懸乳劑，以重量比計(jì)的組分土霉素20份、油酸3－8份、聚山梨酯3－8份、丙丁醇30－50份、抗氧化劑0.5份和防腐劑0.0006份，加水至100份。本發(fā)明土霉素混懸乳劑采用攪拌法制備，其性狀為黃色至黃褐色、稍粘稠的乳劑。本發(fā)明制劑能夠緩慢釋放藥物有效成分，提高藥物的生物利用度，增強(qiáng)藥物的療效，一次用藥能維持高效血藥濃度的時(shí)間可達(dá)72小時(shí)，本混懸乳劑每3天用藥1次，制劑的生產(chǎn)不需要特殊溶媒，成本低，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單，易于實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化。
文檔編號(hào)A61K31/65GK1706391SQ20051001169
公開(kāi)日2005年12月14日 申請(qǐng)日期2005年5月9日 優(yōu)先權(quán)日2005年5月9日
發(fā)明者史同瑞 申請(qǐng)人:史同瑞