專利名稱：β淀粉樣蛋白生成抑制劑含氟和三氟烷基雜環(huán)磺酰胺及其衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及含氟和三氟烷基的雜環(huán)磺酰胺β淀粉樣蛋白(amyloid)生成抑制劑及其衍生物，涉及它們的制備方法、包含它們的組合物和使用它們的治療方法。特別是這些抑制劑具有治療阿爾茨海默病的實(shí)用性。
背景技術(shù)：
阿爾茨海默病(AD)在老年人中為最常見的癡呆(喪失記憶)形式。在腦中發(fā)現(xiàn)AD的主要病理性損傷由細(xì)胞外斑塊形式β淀粉樣蛋白沉積、血管病以及細(xì)胞內(nèi)高磷酸化τ蛋白聚集的神經(jīng)原纖維纏結(jié)(tangles)組成。新近證據(jù)表明腦內(nèi)高β淀粉樣蛋白水平不僅先于τ病變，且還與認(rèn)知能力減退有關(guān)。還提示β淀粉樣蛋白在AD中的病因角色，最近的研究表明在細(xì)胞培養(yǎng)基中聚集的β淀粉樣蛋白毒害神經(jīng)元。
β淀粉樣蛋白主要由39至42個(gè)氨基酸肽組成，由稱為淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)的較大前體蛋白通過β蛋白酶和γ分泌酶的連續(xù)作用產(chǎn)生。盡管罕見，但早期AD發(fā)作的情況歸因于APP中的遺傳突變，該突變導(dǎo)致總β淀粉樣蛋白生成過量或其更多的聚集前(aggregation-prone)42氨基酸同種型。此外，患有唐氏(Down’s)綜合征的人具有含編碼APP的基因的另外染色體，因而具有高β淀粉樣蛋白水平并必然在生命后期發(fā)生AD。
對(duì)可用于抑制β淀粉樣蛋白生成和用于治療與之相關(guān)病癥作用的組合物有不斷的需求。
發(fā)明概述這些化合物用于治療其中β淀粉樣蛋白水平增高的病癥(例如AD、唐氏綜合征)。將這些化合物全身性給予處于這些疾病風(fēng)險(xiǎn)、或患有這些疾病的患者可降低這些患者腦內(nèi)β淀粉樣蛋白水平，并隨后減少毒性β淀粉樣蛋白聚集。
有益的是，出乎意料之外地發(fā)現(xiàn)含三氟烷基和氟的式(I)雜環(huán)磺酰胺化合物具有良好的β-淀粉樣蛋白抑制活性。與無三氟烷基或氟基的相應(yīng)化合物相比，式(I)化合物特征在于增加抗氧化穩(wěn)定性(1期代謝穩(wěn)定性)。此外，與無三氟烷基或氟基的相應(yīng)化合物相比，發(fā)現(xiàn)本文中的式(I)化合物增加代謝穩(wěn)定性和循環(huán)半衰期，因此提高生物活性。
另外，發(fā)現(xiàn)與相應(yīng)的未氟化化合物相比，式(I)含三氟烷基和氟化合物增加效能。因此與現(xiàn)有技術(shù)化合物相比，預(yù)計(jì)本發(fā)明化合物可在減少的劑量下有用。
閱讀以下發(fā)明詳述后，本發(fā)明的這些和其它方面對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的。
發(fā)明詳述在第一方面，本發(fā)明公開式(I)化合物、它們的藥用制劑以及它們?cè)诨颊咧姓{(diào)節(jié)β淀粉樣蛋白生成的用途，所述患者處于由腦內(nèi)高水平β淀粉樣蛋白所致AD或其它疾病風(fēng)險(xiǎn)中或患有這些疾病。因此本發(fā)明提供式(I)化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和/或水合物或前體藥物 其中
T選自CHO、COR8和C(OH)R1R2；R1和R2獨(dú)立選自氫、低級(jí)烷基、取代低級(jí)烷基、CF3、烯基、取代烯基、炔基和取代炔基；R3選自氫、低級(jí)烷基和取代低級(jí)烷基；R4選自(CF3)n烷基、(CF3)n(取代烷基)、(CF3)n烷基苯基、(CF3)n烷基(取代苯基)和(F)n環(huán)烷基；n＝1-3；R5選自氫、鹵素、CF3、Y＝C時(shí)稠合至Y的二烯和Y＝C時(shí)稠合至Y的取代二烯；W、Y和Z獨(dú)立選自C、CR6和N，條件是W、Y或Z中的至少一個(gè)必須為C；R6選自氫、鹵素、低級(jí)烷基和取代低級(jí)烷基；X選自O(shè)、S、SO2和NR7；R7選自氫、低級(jí)烷基、取代低級(jí)烷基、芐基、取代芐基、苯基和取代苯基；和R8選自低級(jí)烷基、CF3、苯基和取代苯基。
在這些化合物中，優(yōu)選的化合物成員為那些其中R4為(CF3)n烷基的化合物，例如CF3、CF3CH2、CH(CH3)CH2CF3、CH(CH2CF3)2或CH(CF3)2。其它優(yōu)選的成員包括其中R4為(F)n環(huán)烷基的化合物，優(yōu)選(F)2環(huán)烷基，更優(yōu)選(F)2環(huán)己烷和雙環(huán)[3.1.0]己烷，以及最優(yōu)選4，4-二氟-環(huán)己烷和4,4-二氟雙環(huán)[3.1.0]-3-己烷。
在一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(OH)R1R2，R1和R2為氫，R3為氫，R4為(CF3)2CH，優(yōu)選R4為S-立體化學(xué)，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，T為CHO，R1和R2為氫，R3為氫，R4為CH(CH3)CH2CF3，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在再一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(O)R8，R1和R2為氫，R3為氫，R4為CF3CH2(CH3)CH，R5為鹵素，R8為CH3，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在還另一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(OH)R1R2，R1和R2為氫，R3為氫，R4為(CH2CF3)2CH，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在仍再一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(OH)R1R2，R1和R2為CH3，R3為氫，R4為CF3CH2(CH3)CH，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(OH)R1R2，R1為CH3，R2為氫，R3為氫，R4為(CF3)2CH，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在還再一個(gè)實(shí)施方案中，T為C(OH)R1R2，R1和R2為氫，R3為氫，R4為(F)2環(huán)烷基，R5為鹵素，和W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
W-X-Y-Z-C雜環(huán)與SO2基團(tuán)的連接點(diǎn)并非對(duì)本發(fā)明的限定。但是，在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，該環(huán)通過碳原子與SO2基團(tuán)連接。但是，該環(huán)可通過N雜原子連接。
本發(fā)明化合物可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱碳原子，并且該化合物中的一些可含有一個(gè)或多個(gè)不對(duì)稱(手性)中心，因此可產(chǎn)生旋光異構(gòu)體和非對(duì)映體。雖然式(I)中顯示沒有考慮立體化學(xué)，但當(dāng)式(I)化合物含一個(gè)或多個(gè)手性中心時(shí)，至少β-氨基醇的手性中心為S-立體化學(xué)。最優(yōu)選與N、R3和R4連接的碳原子為S-立體化學(xué)。因此，本發(fā)明包括這類旋光異構(gòu)體和非對(duì)映體；以及外消旋和拆分對(duì)映異構(gòu)純的立體異構(gòu)體；和R和S立體異構(gòu)體的其它混合物，及其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物和前體藥物。
本文中使用的術(shù)語“烷基”指具有1至10個(gè)碳原子的直鏈和支鏈飽和脂族烴基，優(yōu)選1至8個(gè)碳原子，且最優(yōu)選1至6個(gè)碳原子；本文中使用的術(shù)語“低級(jí)烷基”指具有1至6個(gè)碳原子的直鏈和支鏈飽和脂族烴基；“烯基”將包括具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵和2至8個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基，優(yōu)選2至6個(gè)碳原子；“炔基”將包括具有至少一個(gè)碳-碳三鍵和2至8個(gè)碳原子的直鏈和支鏈烷基，優(yōu)選2至6個(gè)碳原子。
術(shù)語“取代烷基”、“取代烯基”和“取代炔基”指具有1至3個(gè)取代基的上述烷基、烯基和炔基，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自鹵素、CN、OH、NO2、氨基、芳基、雜環(huán)、取代芳基、取代雜環(huán)、烷氧基、取代烷氧基、芳氧基、取代芳氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基和芳硫基。這些取代基可與烷基、烯基或炔基的任何碳連接，條件是該連接構(gòu)成穩(wěn)定的化學(xué)部分。
本文中使用的術(shù)語“環(huán)烷基”描述的是具有3個(gè)以上碳原子并形成穩(wěn)定環(huán)的碳-基飽和環(huán)。術(shù)語環(huán)烷基可包括其中兩個(gè)或多個(gè)環(huán)烷基稠合形成穩(wěn)定多環(huán)的基團(tuán)。優(yōu)選環(huán)烷基指具有約4至約9個(gè)碳原子的環(huán)，且更優(yōu)選約6個(gè)碳原子。
本文中使用的術(shù)語“取代環(huán)烷基”指具有1至5個(gè)取代基的上述環(huán)烷基，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自氫、鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、取代烷基、烯基、取代烯基、炔基、烷氧基、芳氧基、取代烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基、取代烷基氨基、芳硫基、雜環(huán)、取代雜環(huán)、氨基烷基和取代氨基烷基。
本文中使用的術(shù)語“芳基”指碳環(huán)芳族系統(tǒng)，它可以為單環(huán)、或多個(gè)芳環(huán)稠合或連接在一起使該稠合或連接環(huán)的至少一部分形成共軛芳族系統(tǒng)。芳基包括但不限于苯基、萘基、聯(lián)苯基、蒽基、四氫萘基、菲基和茚滿。
術(shù)語“取代芳基”指具有1至4個(gè)取代基的以上定義的芳基，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳氧基、取代烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基和芳硫基。
術(shù)語“二烯”指具有兩個(gè)雙鍵的不飽和烴或二烯。術(shù)語“取代二烯”指被1至2個(gè)取代基取代的二烯，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、取代烷基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、烯基、取代烯基、炔基、取代炔基、烷氧基、取代烷氧基、芳氧基、取代芳氧基、烷基氧基、取代烷基氧基、烷基羰基、取代烷基羰基、烷基羧基、取代烷基羧基、烷基氨基、取代烷基氨基、芳硫基或取代芳硫基。
當(dāng)“二烯”和“取代二烯”用于上下文R5中時(shí)，一個(gè)實(shí)施方案中取代二烯為在R5和Y與噻吩環(huán)稠合形成苯并噻吩的3-氯-1，3-丁二烯。其它合適的二烯包括1，3-丁二烯基-和2-三氟甲基-1，3-丁二烯基。但是，其它合適的取代和未取代二烯可容易地在本文定義的化合物中選擇。
術(shù)語“取代芐基”指在苯環(huán)上被1至5個(gè)取代基取代的芐基，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、環(huán)烷基、烯基、炔基、烷氧基、芳氧基、取代烷氧基、烷基羰基、烷基羧基、烷基氨基和芳硫基。
本文中使用的術(shù)語“雜環(huán)”描述的是飽和、部分不飽和或不飽和的穩(wěn)定4元至7元單環(huán)或穩(wěn)定多環(huán)雜環(huán)，該雜環(huán)包括碳原子和優(yōu)選獨(dú)立選自N、O和S原子的1至4個(gè)雜原子。N和S原子可被氧化。雜環(huán)還包括其中任何以上定義的雜環(huán)與芳環(huán)稠合的任何多環(huán)。雜環(huán)可在任何雜原子或碳原子上連接，條件是所得結(jié)構(gòu)化學(xué)穩(wěn)定。這類雜環(huán)基包括例如四氫呋喃、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌啶基、氮雜基、吡咯烷基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、噁唑基、異噁唑基、嗎啉基、吲哚基、喹啉基、噻吩基、呋喃基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、硫嗎啉基、硫嗎啉基亞砜、異喹啉基和四氫噻喃。
本文中使用的術(shù)語“取代雜環(huán)”描述的是以上定義的具有1至4個(gè)取代基的雜環(huán)，優(yōu)選該取代基獨(dú)立選自鹵素、CN、OH、NO2、氨基、烷基、取代烷基、環(huán)烷基、取代環(huán)烷基、烯基、取代烯基、炔基、取代炔基、烷氧基、取代烷氧基、芳氧基、取代芳氧基、烷基氧基、取代烷基氧基、烷基羰基、取代烷基羰基、烷基羧基、取代烷基羧基、烷基氨基、取代烷基氨基、芳硫基或取代芳硫基。
當(dāng)敘述術(shù)語“取代烷基”或“取代烷基苯基”時(shí)，在烷基或在相應(yīng)的基礎(chǔ)化合物上可發(fā)生取代。
本文中使用的術(shù)語“烷氧基”指OR基團(tuán)，其中R為烷基或取代烷基。
本文中使用的術(shù)語“芳氧基”指OR基團(tuán)，其中R為芳基或取代芳基。
本文中使用的術(shù)語“芳硫基”指SR基團(tuán)，其中R為芳基或取代芳基。
本文中使用的術(shù)語“烷基羰基”指RCO基團(tuán)，其中R為烷基或取代烷基。
本文中使用的術(shù)語“烷基羧基”指COOR基團(tuán)，其中R為烷基或取代烷基。
術(shù)語“氨基烷基”指其中烷基或取代烷基含1至8個(gè)碳原子的仲胺和叔胺，該烷基或取代烷基可以相同或不同且連接點(diǎn)在氮原子上。
術(shù)語“鹵素”指Cl、Br、F或I。
除非環(huán)結(jié)構(gòu)的種類另有說明，否則術(shù)語“環(huán)”結(jié)構(gòu)包括單環(huán)結(jié)構(gòu)、橋環(huán)結(jié)構(gòu)和稠合環(huán)結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明化合物可以從藥學(xué)上或生理上可接受的酸或堿衍生的鹽形式使用。這些鹽包括但不限于與以下有機(jī)和無機(jī)酸成的鹽例如乙酸、乳酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、丙二酸、扁桃酸、mallic、鹽酸、氫溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、甲苯磺酸和類似已知可接受的酸及其混合物。其它鹽包括二乙醇胺鹽、乙二胺鹽和與堿金屬或堿土金屬成的鹽，例如鈉(例如氫氧化鈉)、鉀(例如氫氧化鉀)、鈣(例如氫氧化鈣)或鎂(例如氫氧化鎂)。
這些鹽和其它本發(fā)明化合物可以為酯、氨基甲酸酯和其它常規(guī)“前體藥物”形式，當(dāng)以這類形式給藥時(shí)，它們?cè)隗w內(nèi)轉(zhuǎn)化為活性部分。在一個(gè)當(dāng)前優(yōu)選的實(shí)施方案中，前體藥物為酯。見例如B.Testa和J.Caldwell，"Prodmgs RevisitedThe"Ad Hoc"Approach as aComplement to Ligand Design"(回顧前體藥物作為對(duì)配體設(shè)計(jì)補(bǔ)充的"Ad Hoc"方法)，Medicinal Research Reviews，16(3)233-24l，JohnWiley & Sons編輯(1996)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物為噻吩磺酰胺，且更理想地是5-鹵噻吩磺酰胺，以及最理想地是在伯醇的側(cè)鏈具有β-支鏈的5-鹵噻吩磺酰胺。因此，理想地是本發(fā)明式(I)化合物具有這樣的結(jié)構(gòu)其中R1和R2為氫；R3為氫，R4為S-立體化學(xué)的(CF3)2CH，R5為鹵素，W＝C，X＝S，Y＝CH，Z＝CH，且磺酰胺連接至噻吩環(huán)C-2位。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物為呋喃磺酰胺。因此本發(fā)明式(I)化合物具有這樣的結(jié)構(gòu)其中X為O。在一個(gè)理想的實(shí)施方案中，呋喃磺酰胺的特征在于在伯醇的側(cè)鏈有β-支鏈。
在還另一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物為吡唑磺酰胺。因此式(I)化合物具有這樣的結(jié)構(gòu)其中X為NR7，W為N，且Z和Y為C或CR6，條件是Y或Z中的至少一個(gè)必須為C。
本發(fā)明的這些和其它化合物可按下述流程制備。
合成本發(fā)明化合物可按有機(jī)合成領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的很多方法制備。本領(lǐng)域技術(shù)人員可用下述方法和有機(jī)合成領(lǐng)域中的已知合成方法或這些方法的改變方法制備本發(fā)明化合物。(一般參見Comprehensive Organic Synthesis，"Selectivity，Strategy & Efficiency inModern Organic Chemistry"(現(xiàn)代有機(jī)化學(xué)中的選擇性、策略和效率)，I.Fleming編輯，Pergamon出版社，New York(1991)；ComprehensiveOrganic Chemistry，"The Synthesis and Reactions of OrganicCompounds"(有機(jī)化合物的合成和反應(yīng))，J.F.Stoddard編輯，Pergamon出版社，New York(1979))。優(yōu)選的方法包括但不限于以下所述那些方法。
第一種制備方法由以下步驟組成1，2-氨基醇II與合適的磺酰鹵在堿例如三乙胺(TEA)的存在下和在合適的溶劑中反應(yīng)，得到式III化合物。對(duì)于其中R2和R1為氫的化合物，用氯鉻酸吡啶鎓(PCC)、Dess Martin過碘烷(periodinane)試劑[D.B.Dess，J.C.Martin，J.Org.Chem.，484155(1983)]或在Swern條件下[Omura等，J.Org.Chem.，41957(1976)]氧化N-磺?；迹缓蟮玫较鄳?yīng)的醛IV，醛IV可與格氏試劑(RMgX，其中R為有機(jī)基團(tuán)，且X為鹵素)反應(yīng)，得到仲醇V非對(duì)映體混合物，其可通過高效液相色譜(HPLC)分離(流程1)。
流程1 第二種制備方法涉及α-氨基酸或酯IX與合適的磺酰鹵在堿例如三乙胺的存在下和在合適的溶劑中反應(yīng)，得到式X化合物(流程2)。用標(biāo)準(zhǔn)方法例如氫化鋁鋰(LiAlH4)、B2H6或氰尿酰氯/NaBH4可將中間體N-磺?；醁(Rx＝H)轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的伯醇VIII(R1＝R2＝H)。用標(biāo)準(zhǔn)方法例如LiAlH4也可將中間體N-磺?；(Rx＝烷基，Bn)還原為相應(yīng)的伯醇VIII(R1＝R2＝H)。或者，可用DIBAL將中間體N-磺?；(Rx＝烷基，Bn)轉(zhuǎn)化為醛IV。最后，中間體N-磺酰基酯X(Rx＝烷基，Bn)可與2當(dāng)量的格氏試劑反應(yīng)，得到其中R1＝R2的叔醇III?；蛘?，對(duì)于其中R1不等于R2的叔醇III，可制備N-磺?；岬南鄳?yīng)Weinreb酰胺，然后依次與R1MgX和R2MgX反應(yīng)。
流程2 在制備伯醇的第二種方法的改變方法中，先將α-氨基酸或酯(或其N保護(hù)的衍生物)VI轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的1，2-氨基伯醇VII(用前段所述方法)，隨后(如果需要)脫去保護(hù)后，使該伯醇與合適的磺酰鹵反應(yīng)(流程3)，得到式VIII化合物。
流程3 為制備衍生自氨基酸側(cè)鏈含β支鏈的非天然α-氨基酸的化合物，流程4中概括了根據(jù)Hruby成果的制備方法(Tet.Lett.385135-5138(1997))。該路線需要通過Horner-Emmons反應(yīng)順序由酰溴XI形成Evans手性助劑的α，β-不飽和酰胺XIV，隨后共軛加成有機(jī)銅酸鹽，用N-溴琥珀酰胺(NBS)捕集所得烯醇化陰離子XV，用疊氮化物陰離子(由疊氮化四甲基胍鎓(guanidinium)(TMGA)或疊氮化鈉提供置換溴化物XVI，得到XVII，隨后還原為1，2-氨基醇，然后進(jìn)行磺?；?，得到目標(biāo)化合物XVIII。
流程4 與以上醇中的磺酰胺連接的雜環(huán)為噻吩時(shí)，用3-氯過苯甲酸(MCPBA)氧化噻吩化合物XIX可得到相應(yīng)的砜衍生物XX(流程5)。
流程5 另一種制備衍生自非天然1，2-氨基醇的磺酰胺的方法利用Strecker α-氨基酸合成的Bucherer改良法(流程6)。在該路線中，使醛XXI與氰化物陰離子和碳酸銨反應(yīng)，得到乙內(nèi)酰脲XXII，將XXII水解為α-氨基酸XXIII。然后將該化合物還原為XXIV，并磺?；玫叫枰氖絏XV化合物?；蛘?，可將中間體氨基酸XXIII先磺酰化得到XXVI，然后再將它還原為XXV。本領(lǐng)域技術(shù)人員可用標(biāo)準(zhǔn)方法將外消旋產(chǎn)物XXIII、XXV或XXVI拆分為需要的S對(duì)映體。
流程6 對(duì)于從其中R1＝H和R2＝CF3的仲醇系列中1，2-氨基醇衍生的磺酰胺(化合物XXVII)，設(shè)計(jì)了流程7所示的以醛IV(按流程1制備)為原料的制備方法。
流程7 當(dāng)與以上醇中的磺酰胺連接的雜環(huán)為噻吩時(shí)，可通過將5-溴-噻吩衍生物XXVIII(流程1中得到)轉(zhuǎn)化為5-三烷基錫-噻吩中間體XXIX，用碘化鈉和氯胺T處理將該中間體轉(zhuǎn)化為5-碘-噻吩(XXXI)、或用SELECTFLUOR試劑(Aldrich Chem Co.)處理轉(zhuǎn)化為5-氟-噻吩類似物(XXX)，得到相應(yīng)的5-碘和5-氟-噻吩衍生物(流程8)。
流程8 另一種制備由α-氨基酸衍生的手性純N-磺?；?，2-氨基醇的方法如流程9所示。該方法開始涉及由溴乙酰溴XI通過Horner-Emmons反應(yīng)順序形成Evans手性助劑的α，β-不飽和酰胺XXXIV。共軛加成有機(jī)銅酸鹽和使得到的烯醇化陰離子質(zhì)子化，得到XXXV，然后將它轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的烯醇化物，然后用trisyl疊氮化物親電胺化，得到關(guān)鍵的中間體XXXVI(J.Am.Chem.Soc.1096881-6883(1987))。然后將疊氮化物中間體XXXVI水解為α-疊氮基酸XXXVII，并還原為手性純?chǔ)?氨基酸XXXVIII，通過上述方法(例如流程2或3)可將該氨基酸轉(zhuǎn)化為相應(yīng)的N-磺?；?，2-氨基醇。
流程9
最后，用流程10(J.Org.Chem.61440-441(1996))和11(J.Org.Chem.541055-1062(1989))中概括的Strecker α-氨基酸合成的不對(duì)稱改變方法，也可制備手性N-磺?；?-氨基醇XLIII的一種可能合成前體，即手性純?chǔ)?氨基酸XLI。
流程10
流程11 制備手性純含三氟烷基或氟的式(I)雜環(huán)磺酰胺化合物的方法如流程12和13所示。流程12概括了形成合適氨基酯XLVII的文獻(xiàn)描述方法[W.H.Vine等，J Med Chem.1981，241043-1047和R.Keese等，Synthesis，1996，695-696]。根據(jù)該文獻(xiàn)和本文的論述，本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到依據(jù)需要的氨基酯，在步驟3可容易地選擇另一種三氟甲基醛，這取決于R4’和R3’選擇的取代基，在步驟4可容易地選擇其它手性助劑，或在所示步驟中的任何步驟中使用其它試劑、取代基或其它反應(yīng)條件。但是，如果R4’不等于R4’，那么在流程12的步驟3得到烯烴異構(gòu)體混合物，該混合物在進(jìn)入步驟4前需要分離。
流程12 在流程13中，過濾氨基酯XLVIII；發(fā)現(xiàn)在該步驟中無需文獻(xiàn)中描述的必需重結(jié)晶。用DIBAL-H將中間體氨基酯XLVIII轉(zhuǎn)化為N-芐基氨基醇。使N-芐基氨基醇XLIX在合適的催化劑存在下氫化，得到氨基醇L。過濾除去催化劑，然后濃縮溶液至固體。用BSA/三乙胺/DMAP(或其它合適的試劑，例如TMSCl/胺堿)和所需的雜環(huán)磺酰氯將氨基醇L磺?；?。猝滅反應(yīng)(例如用鹽酸/THF)以除去甲硅烷基醚基團(tuán)，然后過濾(例如用SiO2塞)，用一定比例的乙酸乙酯/己烷使本發(fā)明手性純含三氟甲基的式(I)雜環(huán)磺酰胺結(jié)晶。
流程13 除了用于制備本發(fā)明化合物，流程13方法還可容易地用于制備含三氟烷基包括三氟甲基和氟的化合物。更具體地說，該方法可用于制備其它含三氟烷基、三氟甲基或氟的磺酰胺，由具有至少一個(gè)手性中心和至少一個(gè)通過烷基與至少一個(gè)手性中心連接的三氟烷基或氟基、或至少一個(gè)與環(huán)烷基連接的氟基的氨基酯非對(duì)映體混合物制備。按照本文定義，烷基可直接連接一個(gè)或多個(gè)三氟烷基與手性中心?；蛘?，三氟烷基可位于取代烷基的取代基上。
也可通過使仲醇V與氯鉻酸吡啶鎓(PCC)或Dess Martin過碘烷試劑反應(yīng)制備本發(fā)明化合物[D.B.Dess，J.C.Martin，J.Org.Chem.，484155(1983)]，得到相應(yīng)的醛LI(流程14)。
流程14 制備三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺化合物的另一種方法包括用脫水劑和手性亞磺酰胺處理三氟甲基化或氟化醛，形成三氟甲基化或氟化手性亞磺酰胺。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠容易地確定用于該方法的合適脫水劑，包括但不限于乙醇鈦、硫酸鎂或分子篩例如4分子篩。然后用氰化劑處理三氟甲基化或氟化手性亞磺酰胺，分別形成三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈。選擇用于本發(fā)明的氰化劑在本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)范圍內(nèi)，其中可包括乙基異丙氧基氰化鋁。然后可分離三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈，和任選用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)純化?；蛘?，可用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的技術(shù)和試劑將三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈分別水解為三氟甲基化或氟化α-氨基酸。然后可將三氟甲基化或氟化α-氨基酸分別還原為三氟甲基化或氟化β-氨基醇?？墒谷谆蚍?氨基醇與雜環(huán)磺酰氯反應(yīng)，形成相應(yīng)的本發(fā)明三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種制備三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺化合物的方法，該方法包括以下步驟(a)過濾氨基酯的非對(duì)映體混合物，所述氨基酯具有至少一個(gè)手性中心和至少一個(gè)通過烷基與至少一個(gè)手性中心連接的三氟甲基或氟基；(b)用DIBAL-H的甲苯溶液處理所述氨基酯，得到N-芐基氨基醇；(c)用催化劑氫化該N-芐基氨基醇，并得到氨基醇；(d)用雜環(huán)磺酰氯使(c)的氨基醇磺?；?；和(e)使(d)的磺酰化產(chǎn)物結(jié)晶，得到手性純?nèi)谆蚍s環(huán)磺酰胺化合物。
在還再一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及一種制備三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺化合物的方法，該方法包括以下步驟(a)用脫水劑和手性亞磺酰胺處理三氟甲基化或氟化醛，形成三氟甲基化或氟化手性亞磺酰胺；(b)用氰化劑處理所述三氟甲基化或氟化手性亞磺酰亞胺(sulfinimide)，形成三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈；(c)將所述三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈水解為三氟甲基化α-氨基酸；(d)將所述三氟甲基化或氟化α-氨基酸還原為三氟甲基化或氟化β-氨基醇；和(e)使所述三氟甲基化或氟化β-氨基醇與雜環(huán)磺酰氯反應(yīng)，形成所述三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺。
使用方法式(I)化合物為β淀粉樣蛋白生成抑制劑。在初步的研究中，使用蛋白酶特異性試驗(yàn)，示例性式(I)化合物表明對(duì)蛋白酶活性具有特異性抑制作用。因此，本發(fā)明化合物可用于治療和預(yù)防其中調(diào)節(jié)β淀粉樣蛋白水平可提供治療作用的各種病癥。其中這類病癥包括例如淀粉樣蛋白血管病、腦淀粉樣蛋白血管病、系統(tǒng)性淀粉樣變性、阿爾茨海默病(AD)、伴隨Dutch型淀粉樣變性的遺傳性腦出血、包涵體肌炎、唐氏綜合征、輕度認(rèn)知缺損(MCI)。
另外，式(I)化合物可用于制備診斷與異常β淀粉樣蛋白水平有關(guān)的病癥的試劑。例如可用式(I)化合物制備抗體，其將用于各種診斷試驗(yàn)。制備單克隆、多克隆、重組體和合成抗體或其片斷的方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。(見例如E.Mark和Padlin，"Humanization ofMonoclonal Antibodies"(單克隆抗體的人源化)，第4章，The Handbookof Experimental Pharmacology，第113卷，The Pharmacology ofMonoclonal Antibodies，Springer-Verlag(1994年6月)；Kohler和Milstein及其許多已知的修改；PCT專利申請(qǐng)?zhí)朠CT/GB85/00392；英國專利申請(qǐng)公布號(hào)GB2188638A；Amit等，Science，233747-753(1986)；Queen等，Proc.Nat′l.Acad.Sci.USA，8610029-10033(1989)；國際專利公布號(hào)WO 90/07861；和Riechmann等，Nature，332323-327(1988)；Huse等，Science，2461275-1281(1988))?；蛘?，式(I)化合物本身可用于這類診斷試驗(yàn)。除了所選擇的試劑(例如抗體或式(I)化合物)外，包括例如放射免疫測定和酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISAs)的合適診斷形式為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，并且不限于本發(fā)明的該實(shí)施方案。
用阻抑蛋白(Repressor)釋放試驗(yàn)(RRA)測得許多本發(fā)明化合物的β淀粉樣蛋白抑制活性。見下表5。在RRA中，如果在20μg/mL下，化合物致使螢光素酶活性增加至少1.5倍并且無毒性，那么可認(rèn)為該化合物有活性。
另外，檢測β淀粉樣蛋白生成抑制劑的細(xì)胞、無細(xì)胞和體內(nèi)篩選方法在本領(lǐng)域中為已知的。其中這類測定可包括放射免疫測定和酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)。見例如P.D.Mehta等，Techniques inDiagnostic Patho1ogy，第2卷，Bullock等編輯；Academic出版社，Boston，第99-112頁(1991)；國際專利公布號(hào)WO 98/22493；歐洲專利號(hào)0652009；和美國專利號(hào)5,703,129和5,593,846。選擇合適的體外或體內(nèi)篩選試驗(yàn)并非對(duì)本發(fā)明限定。
藥用制劑考慮到所選擇的具體病癥，本發(fā)明化合物可通過任何理想的途徑給予患者?；颊咧溉魏魏线m的哺乳動(dòng)物包括人、家畜(例如犬科和貓科動(dòng)物)和牲畜，他們被認(rèn)定患有一種或多種需要調(diào)節(jié)β淀粉樣蛋白水平的病癥或具有這些病癥的風(fēng)險(xiǎn)。因此，本發(fā)明化合物可用于治療和/或預(yù)防多種人和獸病癥。本文中使用的“預(yù)防”包括預(yù)防患者的癥狀，這類患者確定已處于病癥風(fēng)險(xiǎn)，但尚未診斷出該病癥和/或患者尚未出現(xiàn)該病癥的任何癥狀。
這些化合物可通過任何合適的釋放途徑釋藥或給藥，其中例如經(jīng)口、注射、吸入(包括口、鼻內(nèi)和氣管內(nèi))、靜脈內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、舌下、顱內(nèi)、硬膜外、氣管內(nèi)、直腸、陰道。最理想地是經(jīng)口、吸入或通過合適的腸胃外途徑釋放化合物?？蓪⒒衔锖蜕砩舷嗳莸某Ｒ?guī)藥用載體組合配制?？扇芜x一種或多種本發(fā)明化合物與其它活性劑混合。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地選擇合適的生理上相容的載體。例如其中合適的固體載體包括一種或多種物質(zhì)，這些物質(zhì)也可作為調(diào)味劑、潤滑劑、增溶劑、懸浮劑、填充劑、助流劑、壓縮助劑、粘合劑或片劑崩解劑或膠囊材料。在散劑中，載體為固體粉末，該載體與活性成分粉末一起混合。在片劑中，使活性成分與具有需要壓縮特性的載體按合適的比例混合，然后壓縮成需要的形狀和尺寸。優(yōu)選散劑和片劑含最高可達(dá)99％的活性成分。合適的固體載體包括例如磷酸鈣或磷酸二鈣、硬脂酸鎂、滑石粉、淀粉、糖(包括例如乳糖和蔗糖)、纖維素(包括例如微晶纖維素、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉)、聚乙烯吡咯烷、低熔點(diǎn)蠟、離子交換樹脂及高嶺土。
液體載體可用于制備溶液劑、混懸劑、乳劑、糖漿劑和酏劑?？蓪⒈景l(fā)明活性成分溶于或懸浮于藥學(xué)上可接受的液體載體例如水、有機(jī)溶劑、兩者的混合物或藥學(xué)上可接受的油或脂肪。液體載體可含有其它合適的藥用添加劑例如增溶劑、乳化劑、緩沖劑、懸浮劑、增稠劑、粘度調(diào)節(jié)劑、穩(wěn)定劑或滲透調(diào)節(jié)劑。用于經(jīng)口和腸胃外給藥的液體載體的合適實(shí)例包括水(尤其含有以上添加劑例如纖維素衍生物，優(yōu)選羧甲基纖維素鈉溶液)、醇(包括一元醇和多元醇例如二醇)及它們的衍生物和油(例如分餾椰子油、落花生油、玉米油、花生油和芝麻油)。對(duì)于腸胃外給藥，載體也可以為油酯例如油酸乙酯和豆蔻酸異丙基酯。無菌液體載體用于腸胃外給藥的無菌液體形式組合物。
可任選通常在制備藥用組合物中使用的添加劑包括在本發(fā)明組合物中。這類組分包括例如甜味劑或其它調(diào)味劑、著色劑、防腐劑和抗氧化劑例如維生素E、抗壞血酸、BHT和BHA。
為無菌溶液或混懸液的液體藥用組合物可通過例如肌內(nèi)、腹膜內(nèi)或皮下注射使用。無菌溶液也可靜脈內(nèi)給藥。經(jīng)口給藥可以為液體或固體組合物形式。
當(dāng)制備吸入劑時(shí)，用本發(fā)明化合物和合適的藥用媒介物按流體單位劑量制備藥用組合物是合適的，以用于通過霧化噴霧泵、或通過吹入用干粉釋放。作氣霧劑使用時(shí)，將本發(fā)明化合物與氣體或液化推進(jìn)劑例如二氯二氟甲烷、二氧化碳、氮?dú)?、丙烷等一起配制并用加壓氣霧劑容器包裝，以及通常組分例如助溶劑和濕潤劑可能是必需或需要的。例如，本發(fā)明提供計(jì)量劑量釋放用于經(jīng)口或鼻內(nèi)一次、兩次或多次吸入。劑量適合按一次或兩次釋放。但是，可容易地確定其它合適的釋放方法。
優(yōu)選藥用組合物為單位劑型例如片劑或膠囊劑。在這類劑型中，組合物以含合適量活性成分的單位劑量亞分；這類單位劑型可以為包裝的組合物，例如包裝的散劑、小瓶、安瓿、預(yù)灌裝注射器或含液體的小藥囊。單位劑型可以為例如膠囊或片劑本身，或其可以為包裝形式的合適數(shù)量的任何這類組合物。
如本文所述，本發(fā)明化合物的治療或預(yù)防有效量為化合物緩解疾病例如AD癥狀、或防止癥狀發(fā)作、或防止更嚴(yán)重癥狀發(fā)作的量。化合物的有效量可改變，這取決于制劑和釋放的途徑。例如經(jīng)口釋放的量比化合物配制成注射劑或吸入劑時(shí)要高，以便釋放生物等效量的藥物。本發(fā)明化合物的單個(gè)劑量(即每單位)為約1μg/kg至約10g/kg為合適。但是，因?yàn)榕c無三氟烷基或氟取代基的本發(fā)明類似化合物相比，本發(fā)明化合物具有提高的生物活性，可從較低區(qū)間合適選擇這些劑量，例如約1μg/kg至約200mg/kg，更優(yōu)選10μg/kg至約10mg/kg，且最優(yōu)選約100μg/kg至約1mg/kg。理想地是以日為基礎(chǔ)提供這些量。但是，用于治療或預(yù)防具體的認(rèn)知缺陷或其它病癥的劑量可由主治醫(yī)師決定。有關(guān)的變量包括具體的認(rèn)知缺陷及患者的體重、年齡和反應(yīng)類型。例如根據(jù)本發(fā)明化合物的活性曲線和效能，起使劑量為約375-500mg/日，然后日劑量逐漸增加至約1000mg/日，可為人提供需要的劑量水平。
或者，可能需要使用緩釋裝置，以便避免患者必須每天用藥?！熬忈尅倍x為延遲釋放活性劑即本發(fā)明化合物，直至置于釋放環(huán)境后，在以后的時(shí)間里持續(xù)釋放藥物。本領(lǐng)域技術(shù)人員知道合適的緩釋裝置。合適緩釋裝置的實(shí)例包括例如水凝膠(見例如美國專利號(hào)5,266,325；4,959,217；和5,292,515)、滲透泵例如其中Alza(美國專利號(hào)4,295,987和5,273,752)或Merck(歐洲專利號(hào)314,206)描述的滲透泵；疏水膜材料例如亞乙基異丁烯酸酯(ethylenemethacrylate)(EMA)和亞乙基乙烯基乙酸酯(EVA)；生物再吸收聚合物系統(tǒng)(見例如國際專利公布號(hào)WO 98/44964，Bioxid和Cellomeda；美國專利號(hào)5,756,127和5,854,388)；其它由例如聚酯、聚酐或乳酸/乙醇酸共聚物組成的生物再吸收植入裝置已有描述(見例如美國專利號(hào)5,817,343(AlkermesInc.))。為用于這類緩釋裝置，可按本文描述方法配制本發(fā)明化合物。
在另一方面，本發(fā)明提供一種釋放產(chǎn)品的藥劑盒。該藥劑盒適合含有含配制成用于需要釋放途徑的化合物的包裝或容器。例如，如果該藥劑盒設(shè)計(jì)為用于吸入給藥，那么它可包含含有本發(fā)明化合物的混懸劑，本發(fā)明化合物配制成通過吸入氣霧或噴霧釋放預(yù)定劑量。藥劑盒含給藥說明和有關(guān)活性劑的植入為合適。任選藥劑盒還含監(jiān)測藥品循環(huán)水平的說明和進(jìn)行這類測定的材料包括例如試劑、孔板、容器、標(biāo)志或標(biāo)簽等。這類藥劑盒可按適用于治療目標(biāo)適應(yīng)征的方式容易地包裝。例如藥劑盒也可含使用噴霧泵或其它釋放裝置的說明。
考慮到目標(biāo)適應(yīng)征和釋放途徑，其它適合這類藥劑盒的組分對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言為顯而易見的。在預(yù)定的時(shí)間范圍內(nèi)或按處方要求，可按日、周或月重復(fù)劑量給藥。
實(shí)施例提供以下實(shí)施例來舉例說明本發(fā)明代表性化合物的制備及活性，并說明它們?cè)诤Y選試驗(yàn)中的性能。本領(lǐng)域技術(shù)人員將認(rèn)識(shí)到盡管在以下的實(shí)施例中概述了具體的試劑和條件，但是這些試劑和條件并不是對(duì)本發(fā)明的限定。
實(shí)施例15-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺A.方法11. 2-甲基-4，4，4-三氟丁醛在0℃下，向2-甲基-4，4，4-三氟-1-丁醇(7.5g，53mmol)的二氯甲烷(CH2Cl2)(125mL)溶液中加入Dess-Martin過碘烷(26.5g，63.3mmol)。加熱該反應(yīng)混合物至25℃，并攪拌20min。向混合物中加入乙醚(Et2O-200mL)，隨后加入Na2S2O3(29.0g，185mmol的碳酸氫鈉(NaHCO3)飽和水溶液(200mL)的溶液和水100mL。攪拌該乳白色混合物直至兩相均勻。分離各相，然后有機(jī)萃取液用飽和NaHCO3水溶液(25mL)和1N Na2S2O3水溶液(25mL)洗滌，用硫酸鎂(MgSO4)干燥。常壓下蒸餾除去溶劑，得到2-甲基-4，4，4-三氟丁醛(6.5g，88％)。1H核磁共振(NMR)圖譜與文獻(xiàn)(J.Fluorine Chem.36163-170(1987)報(bào)告相符。
2. 5-(3，3，3-三氟-1-甲基丙基)咪唑烷-2，4-二酮向氰化納(18.4g，375mmol)和碳酸銨(39.0g，500mmol)的H2O(450mL)溶液中加入2-甲基-4，4，4-三氟丁醛(17.5g，125mmol)的乙醇(450mL)溶液。加熱反應(yīng)混合物至90℃保持17h。冷卻至25℃后，真空除去約500mL溶劑。加入濃鹽酸酸化該混合物至pH約1至約2，形成沉淀。過濾混合物，然后用1N鹽酸洗滌，得到5-(3，3，3-三氟-1-甲基丙基)咪唑烷-2，4-二酮白色固體(15.5g，59％)。
質(zhì)譜(-ESI)309(M-H)-。
分析C7H9F3N2O2計(jì)算值 C，40.01；H，4.32；N，13.33。
實(shí)測值 C，39.91；H，4.10；N，13.20。
3. N-[(5-氯噻吩-2-基)磺酰基]-5，5，5-三氟異亮氨酸將5-(3，3，3-三氟-1-甲基丙基)咪唑烷-2，4-二酮(15.54g，73.95mmol)溶于氫氧化鈉(NaOH-11.83g，295.8mmol)水溶液150mL。在密閉容器中用微波加熱該溶液1小時(shí)。(微波條件在約100％功率、150℃、50psi下15min，然后0％功率5min，然后在約100％功率、150℃、50psi下15min，然后重復(fù)該順序)真空除去反應(yīng)混合物中的水和氫氧化銨，得到的粗氨基酸和NaOH混合物用于下一步反應(yīng)而無需進(jìn)一步純化。
將粗氨基酸和NaOH混合物溶于300mL水。將混合物在冰浴中冷卻至約0℃。將5-氯噻吩-2-磺酰氯(17.6g，81mmol)溶于100mL四氫呋喃(THF)，然后在0.5h內(nèi)，滴加入反應(yīng)混合物中。1h后，使反應(yīng)混合物逐漸升溫至25℃并攪拌16h。真空除去THF，然后用1N鹽酸酸化混合物至pH約1。約15min后，沉淀開始從乳白色混合物中析出。1h后，將混合物冷卻至0℃保持1h，然后過濾。沉淀用1N鹽酸洗滌，得到N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟異亮氨酸白色固體(15.2g，56％)。
質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
分析C10H11F3NO4S2計(jì)算值C，32.84；H，3.03；N，3.83。
實(shí)測值C，32.45；H，2.94；N，3.79。
4. 5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺在0℃下，向N-[(5-氯噻吩-2-基)磺酰基]-5，5，5-三氟異亮氨酸(15.2g，41.6mmol)的THF(500mL)溶液中滴加1M硼烷四氫呋喃絡(luò)合物的THF溶液(208mL，208mmol)。15min后，加熱反應(yīng)混合物至25℃并攪拌18h。然后用10％AcOH的MeOH溶液(100mL)緩慢猝滅。真空除去揮發(fā)物。然后將殘余物溶于乙酸乙酯(EtOAc)(500mL)，用飽和NaHCO3水溶液(3×100mL)洗滌，用硫酸鈉(Na2SO4)干燥，然后濃縮至白色固體(13.3g，91％收率)。非對(duì)映體用HPLC(Luna硅膠柱，3∶7 MTBE-己烷，非對(duì)映體1在10.9min洗脫出，非對(duì)映體2在15.3min洗脫出)分離。非對(duì)映體2用制備型手性SFC[chiralpak AD，異丙醇-二氧化碳3∶7，對(duì)映體1在4.5min洗脫出，且對(duì)映體2在5.6min洗脫出]拆分為純對(duì)映體。
然后對(duì)映體1用EtOAc/庚烷1∶4重結(jié)晶，得到5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺，mp 136-137℃。D25＝+45.62°(c＝1％溶液，MeOH)。
質(zhì)譜(-ESI)350(M-H)-。
分析C10H13CIF3NO3S2計(jì)算值 C，34.14；H，3.72；N，3.98。
實(shí)測值 C，34.12；H，3.45；N，3.88。
B.方法21.(4R)-4-芐基-3-(4，4，4-三氟丁?；?-1，3-噁唑烷-2-酮在-78℃下，向4，4，4-三氟丁酸(10.00g，70.38mmol)的THF(150mL)溶液中加入三乙胺(10.3mL，73.9mmol)和新戊酰氯(9.1mL，74mmol)。使反應(yīng)混合物升溫至0℃，并攪拌1.5h。在10min內(nèi)、-78℃下，在另一個(gè)燒瓶中將n-BuLi溶液(31mL，2.5M的己烷溶液，77mmol)加入(R)-(+)-4-芐基-2-噁唑烷酮(13.7g，77.4mmol)的THF(150mL)溶液中，然后攪拌該混合物1小時(shí)。
將混合酐稠漿狀物冷卻至-78℃，然后通過加料漏斗傾入鋰化噁唑烷酮溶液。使該混合物逐步升溫至25℃過夜。然后混合物用EtOAc(500mL)稀釋，再用1N鹽酸(500mL)、飽和NaHCO3水溶液(500mL)和飽和NaCl水溶液(500mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)，濃縮?？焖賹游?洗脫液EtOAc-己烷1∶4)得到無色油狀(4R)-4-芐基-3-(4，4，4-三氟丁?；?-1，3-嗯唑烷-2-酮(18.29g，86％)。D25＝-89.10°(c＝1％溶液，DMSO)。
質(zhì)譜(-ESI)300(M-H)-。
分析C14H14F3NO3計(jì)算值 C，55.82；H，4.68；N，4.65。
實(shí)測值 C，56.03；H，4.67；N，4.62。
2.(4R)-4-芐基-3-[(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮在-40℃下、15min內(nèi)，向二(三甲基甲硅烷基)氨基化鈉(57mL，1.0M的THF溶液，57mmol)的THF(250mL)溶液中滴加(4R)-4-芐基-3-(4，4，4-三氟丁?；?-1，3-唿唑烷-2-酮(15.60g，51.78mmol)的THF(250mL)溶液。1h后，加入碘代甲烷(4.2mL，67mmol)。3h后，使反應(yīng)混合物升溫至-20℃保持約20min?；旌衔镉蔑柡吐然@(NH4Cl)水溶液(300mL)猝滅，然后用EtOAc(2×300mL)萃取，用Na2SO4干燥，然后濃縮。快速層析(洗脫液EtOAc-己烷1∶9)得到無色油狀(4R)-4-芐基-3-[(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮(12.04g，74％)。D25＝-98.68°(c＝1％溶液，DMSO)。
質(zhì)譜(+EI)315(M+H)+。
分析C15H16F3NO3計(jì)算值 C，57.14；H，5.11；N，4.44。
實(shí)測值 C，57.18；H，5.24；N，4.38。
3.(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁-1-醇在0℃下，向(4R)-4-芐基-3-[(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮(12.9g，40.9mmol)和水(810μL，45.0mmol)的乙醚(200mL)溶液中滴加硼氫化鋰(23mL，2.0M的THF溶液，45mmol)溶液。使該反應(yīng)混合物升溫至25℃，1h后，冷卻至0℃，然后用1N NaOH水溶液(124mL)猝滅。使混合物升溫至25℃并攪拌直至兩層均勻。分離各層，然后有機(jī)萃取液用鹽水洗滌，用MgSO4干燥，再濃縮?？焖賹游?洗脫液乙醚-petether 3∶7)得到無色油狀(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁-1-醇(5.05g，87％)。1H NMR與文獻(xiàn)(J.Med Chem.371282-1297(1994))中發(fā)現(xiàn)的相同。
4.(S)-N-[(3R)-甲基-4，4，4-三氟-亞丁基]-對(duì)-甲苯亞磺酰胺在0℃下，向(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁-1-醇(2.90g，20.4mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中加入Dess-Martin過碘烷(10.24g，24.49mmol)。15min后，使反應(yīng)混合物升溫至25℃并攪拌1h。然后該混合物用乙醚(50mL)稀釋，再加入到溶于飽和NaHCO3水溶液(100mL)的Na2S2O3(11.29g，71.44mmol)中。攪拌該乳白色混合物直至兩層均勻。分離各相，然后干燥(MgSO4)有機(jī)萃取液，過濾，得到(2R)-4，4，4-三氟-2-甲基丁醛溶液，該產(chǎn)物用于下一步驟而無需除去溶劑。
向該粗醛溶液中加入乙醇鈦(IV)(15mL，20％ Ti，82mmol)，隨后加入(S)-㈩-甲苯亞磺酰胺(3.48g，22.4mmol)，加熱溶液至回流保持3h。然后將混合物冷卻至0℃，加入水(75mL)以沉淀鈦鹽。通過Celite試劑過濾懸浮液，濾餅用CH2Cl2洗滌。分離濾液層，水層用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥，然后濃縮。快速層析(洗脫液EtOAc-己烷1∶9)得到黃色油狀(S)-N-[(3R)-甲基-4，4，4-三氟-亞丁基]-對(duì)-甲苯亞磺酰胺(3.03g，54％)。
質(zhì)譜(-ESI)276(M-H)-。
5. N-[1S，2R)-1-氰基-4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-4-甲基苯亞磺酰胺在0℃下，向氰化二乙基鋁(16mL，1.0M的甲苯溶液，16mmol)的THF(40mL)溶液中加入異丙醇(i-PrOH)(840μl，11.0mmol)。15mim后，將該溶液在-78℃下加入(S)-N-[(3R)-甲基-4,4，4-三氟-亞丁基]-對(duì)-甲苯亞磺酰胺(3.03g，10.9mmol)的THF(60mL)溶液中。15min后，使反應(yīng)混合物升溫至25℃。1h后，薄層層析(TLC-EtOAc-己烷1∶9)表明原料反應(yīng)完。使混合物冷卻至-78℃，然后加入飽和氯化銨水溶液(100mL)。通過Celite試劑過濾得到的懸浮液，濾墊用EtOAc(100mL)洗滌。分離濾液層，然后水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥，然后濃縮。根據(jù)1H NMR，該粗混合物為非對(duì)映體的1∶3混合物，用乙醚/己烷沉淀，然后收集產(chǎn)物。通過對(duì)濃縮的濾液重復(fù)沉淀過程，又得到兩批產(chǎn)物。得到單一非對(duì)映體N-[(1S，2R)-1-氰基-4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-4-甲基苯亞磺酰胺(2.34g，70％)。D25＝+35.46°(c＝1％溶液，CHCl3)。
質(zhì)譜(+ESI)305(M+H)+。
分析C13H15F3N2OS計(jì)算值 C，51.31；H，4.97；N，9.20。
實(shí)測值 C，51.16；H，4.96；N，9.08。
6. 5，5，5-三氟-L-別異亮氨酸鹽酸鹽將N-[(1S，2R)-1-氰基-4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-4-甲基苯亞磺酰胺(2.34g，7.69mmol)的濃鹽酸(75mL)懸浮液加熱至回流保持18.5h。冷卻至25℃后，反應(yīng)混合物用乙醚洗滌幾次。濃縮水層，得到5，5，5-三氟-L-別異亮氨酸、NH4Cl和甲苯磺酸的混合物(2.35g)。該粗氨基酸用于下一步驟而無需進(jìn)一步純化。質(zhì)譜(-ESI)309(M-H)-。
7.(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇在0℃下，向硼氫化鋰(7.7mL，2.0N的THF溶液，15mmol)的THF(20mL)溶液中加入氯代三甲基硅烷(3.9mL，31mmol)。使反應(yīng)混合物升溫至25℃，30min后，滴加到0℃下的粗氨基酸鹽酸鹽(7.7mmol)的THF(60mL)懸浮液中。使混合物升溫至25℃，21h后，用甲醇(MeOH)猝滅。真空除去揮發(fā)物，得到殘余物，將它溶于約50mL1N NaOH水溶液，用氯仿(CHCl3)(4×75mL)萃取，干燥(Na2SO4)，然后濃縮至黃色油狀(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇(1.07g，81％)。質(zhì)譜(+ESI)172(M+H)+。
8. 5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺在0℃下，向(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇(1.07g，6.25mmol)和三乙胺(0.87mL，6.2mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中滴加5-氯噻吩-2-磺酰氯(1.34g，6.25mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液。使反應(yīng)混合物升溫至25℃并攪拌24h。然后用EtOAc(100mL)稀釋，用0.1N鹽酸(50mL)和鹽水(50mL)洗滌。水層用EtOAc(50mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥，然后濃縮?？焖賹游?洗脫液EtOAc-己烷3∶7)得到5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(1.66g，75％)白色固體。重結(jié)晶(EtOAc-庚烷，1∶4)得到白色針狀結(jié)晶(1.39g，84％回收率)，mp136-137℃。
分析C10H13ClF3NO3S2計(jì)算值 C，34.14；H，3.72；N，3.98。
實(shí)測值 C，34.24；H，3.97；N，3.87。
C.方法31.(4S)-4-芐基-3-(溴乙酰基)-1，3-噁唑烷-2-酮在-78℃下，向S-(-)-4-芐基-2-嗯唑烷酮(20.0g，112.86mmol)的THF(200mL)溶液中滴加nBuLi(2.5M的己烷溶液，47.4mL，118.51mmol)。在-78℃下攪拌該溶液30min，隨后加入溴乙酰溴(25.0g，10.81mL，124.15mmol)。使溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。用乙酸乙酯(200mL)稀釋，然后有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗棕色油(34g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析(洗脫液EtOAc-己烷1∶4)純化，得到無色油狀(4S)-4-芐基-3-(溴乙酰基)-1，3-噁唑烷-2-酮(33.2g，98.6％)。
質(zhì)譜(-ESI)297(M-H)-。
2. 2-[(4S)-4-芐基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二甲酯將(4S)-4-芐基-3-(溴乙?；?-1，3-噁唑烷-2-酮(33.0g，110.68mmol)和亞磷酸三乙酯(39.2mL，33.2mmol)于120℃加熱18h。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。冷卻反應(yīng)至25℃，用乙酸乙酯(200mL)稀釋，然后有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到黃色油狀2-[(4S)-4-芐基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二甲酯粗品(36g，99.3％)。質(zhì)譜(-ESI)326(M-H)-。
3.(4S)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯酰基]1，3-噁唑烷-2-酮在-78℃下，向2-[(4S)-4-芐基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二甲酯(36g，109.97mmol)的THF(200mL)溶液中加入KHMDS(0.5M，242mL，120.97mmol)。在30min內(nèi)，使該溶液升溫至25℃，然后在-20℃下加入3，3，3-三氟丙醛(13.55g，120.97mmol)。使溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)猝滅反應(yīng)。水層用乙酸乙酯(3×100mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到淺棕色油(32.1g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶6，得到無色油狀(4S)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯?；鵠1，3-嗯唑烷-2-酮(17.7g，55.1％)。
質(zhì)譜(-ESI)312(M-H)-。
分析C15H14NF3O3計(jì)算值 C，57.51；H，4.50；N，4.47。
實(shí)測值 C，57.05；H，4.75；N，4.52。
4.(4S)-4-芐基-3-[(3S)-5，5，5-三氟-3-甲基戊酰基]-1，3-噁唑烷-2-酮將在THF(200mL)和甲硫醚(100mL)助溶劑中的溴化銅(I)-甲硫醚絡(luò)合物(9.45g，45.96mmol)漿狀物冷卻至-40℃，然后在10min內(nèi)，滴加甲基溴化鎂(30.64mL，91.93mmol)。攪拌該漿狀物40min，同時(shí)升溫至-15℃。將微綠色漿狀物冷卻至-40℃，然后在-40℃下，滴加(4S)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯?；鵠1，3-噁唑烷-2-酮(12g，38.30mmol)的THF(15mL)溶液。使反應(yīng)升溫至25℃過夜(18h)。用飽和NH4Cl水溶液(20mL)猝滅反應(yīng)。沉淀形成。過濾，母液用EtOAc(250mL)稀釋，然后有機(jī)層用飽和氯化鈉水溶液(NaCl-100mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗半固體。該粗半固體不溶于CH2Cl2、MeOH及EtOAc，部分溶于二甲亞砜(DMSO)。該粗產(chǎn)物用1N HCl(100mL)處理，然后水層用EtOAc(2×150mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油(12.1g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到無色油狀(4S)-4-芐基-3-[(3S)-5，5，5-三氟-3-甲基戊?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮(8.2g，67.8％)。
質(zhì)譜(+ESI)330(M+H)+。
分析C16H18NF3O3計(jì)算值 C，58.36；H，5.51；N，4.25。
實(shí)測值 C，58.36；H，5.70；N，4.19。
5(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊?；鵠-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮將(4S)-4-芐基-3-[(3S)-5，5，5-三氟-3-甲基戊?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮(8.2g，24.90mmol)的THF(100mL)溶液冷卻至-78℃，然后在10min內(nèi)滴加KHMDS(六甲基二硅氨基化(hexamethyldisilazane)鉀-59.7mL，29.88mmol)。在-78℃下攪拌1h后，在10min內(nèi)，通過插管加入預(yù)冷卻(-78℃，50min)的2，4，6-三異丙基苯磺酰基疊氮化物溶液(10.1g，32.37mmol)。再過10min后，在-78℃下通過漏斗一次性加入冰醋酸(6.7mL，112.05mmol)。5min后，在-78℃下加入無水乙酸鉀(9.77g，99.6mmol)。放下-78℃浴，然后使反應(yīng)混合物升溫至25℃過夜(19h)。反應(yīng)混合物用EtOAc(200mL)稀釋，有機(jī)相用飽和磷酸二氫鉀水溶液(2×100mL)和飽和NaCl水溶液(100mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油(9.5g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到無色油狀(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊醇]-4-芐基-1，3-唿唑烷-2-酮(7.2g，73.7％)。
質(zhì)譜(-ESI)342(M-N2)-。
6.(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊酸在氮?dú)夥铡?℃下，向(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊醇]-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮(7.2g，19.44mmol)的THF∶H2O(3∶1，120mL)溶液中加入氫氧化鋰(LiOH)一氫化物(1.63g，38.88mmol)。通過TLC(EtOAc/Hex 1∶2)監(jiān)測反應(yīng)。3h后，加入固體NaHCO3(6.0g)。漿狀物用飽和NaHCO3水溶液(20mL)和H2O(40mL)稀釋，然后用EtOAc(3×100mL)萃取。有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(20mL)萃取。棄去含手性助劑的EtOAc層。將合并的NaHCO3層酸化至pH小于2。酸化的水層用EtOAc(3×100mL)萃取。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油狀(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊酸(3.2g，98％)。
質(zhì)譜(-ESI)183(M-N2)-。
7. 5，5，5-三氟-L-別異亮氨酸在氫氣氛(40psi)下，將(2S，3R)-2-疊氮基-5，5，5-三氟-3-甲基戊酸(3.2g，17.27mmol)、10％披鈀碳(0.79g)、冰醋酸(37mL)和水(90mL)置于Parr氫化器上振搖。20h后，反應(yīng)混合物通過經(jīng)H2O(20mL)充分沖洗的Celite試劑墊過濾。減壓濃縮濾液，得到白色固體。固體用EtOAc(200mL)研磨，過濾，然后用EtOAc(200mL)再洗滌一次，然后風(fēng)干，得到5，5，5-三氟-L-別異亮氨酸白色固體(2.7g，96％)。質(zhì)譜(-ESI)184(M-H)-。
分析C6H10NF3O2+0.12HCl計(jì)算值C，38.13；H，5.50；N，6.94。
實(shí)測值C，38.03；H，5.38；N，7.39。
8.(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇在0℃下、30min內(nèi)，向攪拌下的硼氫化鋰(14.5mL，2M THF溶液，29mmol)溶液中滴加氯代三甲基硅烷(7.38mL，58mmol)。撤去冰浴，然后在25℃下攪拌得到的漿狀物30min。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后在15min內(nèi)分批加入5，5，5-三氟-L-別異亮氨酸(2.7g，16.98mmol)固體。隨著冰浴融化，使反應(yīng)混合物緩慢升溫至25℃。在25℃下3天后，將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，然后在30min內(nèi)小心加入甲醇(22mL)。在25℃下，再攪拌溶液40min，然后在60℃水浴中減壓濃縮。用20％氫氧化鈉(10mL)使得到的漿狀物變?yōu)閴A性。加入水(10mL)，然后全部水層用二氯甲烷(100mL)萃取，經(jīng)MgSO4干燥。過濾有機(jī)相，然后蒸發(fā)，得到油狀(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇粗品(2.6g，89.6％)。
質(zhì)譜(-ESI)170(M-H)-。
9. 5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺向攪拌下的冷卻至0℃的(2S，3R)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇(2.6g，15.18mmol)、三乙胺(4.2mL，30.38mmol)和二氯甲烷(50mL)溶液中滴加5-氯噻吩-2-磺酰氯(4.8g，18.22mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。15min后，撤去冰浴，然后使反應(yīng)達(dá)到25℃過夜。將其傾入飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)和另外的二氯甲烷(150mL)來猝滅反應(yīng)。分離有機(jī)相，然后依次用1N HCl溶液、H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。過濾有機(jī)相，然后蒸發(fā)，得到粗油(6.1g)，通過使用乙酸乙酯-己烷，1-6為洗脫液的快速層析純化。由此得到標(biāo)題化合物5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺白色無定形固體(5.15g，96.4％)。該產(chǎn)物含有雜質(zhì)。使該白色無定形固體通過EtOAc-庚烷1∶4重結(jié)晶進(jìn)一步純化。將溶劑混合物加入5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺中，加熱，得到溶液，使其冷卻至25℃保持3h，然后在0℃下貯存19小時(shí)。過濾白色固體結(jié)晶沉淀，然后用冰凍庚烷洗滌，得到白色結(jié)晶固體(2.7g，40.9％)。該重結(jié)晶物質(zhì)中仍然含有雜質(zhì)。使該白色固體(2.7g)通過制備型手性HPLC[SFC；AD，25×0.46cm；流動(dòng)相，己烷-i-PrOH 8∶2(1mL/min)]進(jìn)一步純化，得到5-氯-N-[(1S,2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺白色結(jié)晶固體，mp132-133℃(0.93g，14.1％，手性純度100％，分析純度100％。
質(zhì)譜(-ESI)350(M-H)-。
分析C10H13ClF3NO3S2計(jì)算值 C，34.14；H，3.72；N，3.98。
實(shí)測值 C，34.44；H，3.70；N，3.74。
在該實(shí)施例化合物與無三氟甲基、C-2中心立體化學(xué)不同但其它相同的類似化合物的對(duì)比研究中，在I期大鼠肝臟微粒體代謝試驗(yàn)中，該實(shí)施例化合物證明代謝穩(wěn)定性顯著較長(～193min對(duì)12.7min半衰期)。
在該實(shí)施例化合物與相應(yīng)的無三氟甲基類似物的對(duì)比研究中，在大鼠(14min對(duì)2min半衰期)、小鼠(10min對(duì)2min半衰期)、人(22min對(duì)13min半衰期)和狗(31min對(duì)4min)的1和2期肝臟微粒體代謝試驗(yàn)中，該實(shí)施例化合物證明代謝穩(wěn)定性顯著較長。
因此，本發(fā)明化合物停留在循環(huán)的時(shí)間周期比其相應(yīng)的無-CF3類似物更長，增加其生物利用度。
實(shí)施例25-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺A.方法11.(4S)-4-芐基-3-[(3S)-3-乙基-5，5，5-三氟戊酰基]-1，3-噁唑烷-2-酮將在THF(20mL)和甲硫醚(10mL)助溶劑中的溴化銅(I)-甲硫醚絡(luò)合物(1.26g，6.13mmol)漿狀物冷卻至-40℃，然后在10min內(nèi)，滴加乙基溴化鎂(3M的乙醚溶液，4.08mL，12.26mmol)。攪拌該漿狀物40min，同時(shí)升溫至-15℃。將微綠色漿狀物冷卻至-40℃，然后在-40℃下，滴加(4S)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯酰基]1，3-噁唑烷-2-酮(按實(shí)施例1方法3，第C部分制備)(1.6g，5.10mmol)的THF(5mL)溶液。使反應(yīng)物升溫至25℃過夜(18h)。用飽和NH4Cl水溶液(20mL)猝滅反應(yīng)。濾除形成的沉淀，母液用EtOAc(250mL)稀釋，然后有機(jī)萃取液用飽和NaCl水溶液(100mL)洗滌。有機(jī)萃取液經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到半固體粗品。該半固體粗品不溶于CH2Cl2、MeOH或EtOAc，但部分溶于DMSO。該粗產(chǎn)物用1N HCl(100mL)處理，然后水溶液用EtOAc(2×150mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油(1.41g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到無色油狀(4S)-4-芐基-3-[(3S)-3-乙基-5，5，5-三氟戊酰基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.96g，55％)。
質(zhì)譜(+ESI)344(M+H)+。
分析C17H20NF3O3計(jì)算值 C，59.47；H，5.87；N，4.08。
實(shí)測值C，59.58；H，5.91；N，4.03。
2.(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊醇]-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮在10min內(nèi)，向冷卻至-78℃的(4S)-4-芐基-3-[(3S)-3-乙基-5，5，5-三氟戊酰基]-1，3-噁唑烷-2-酮(0.9g，2.62mmol)的THF(10mL)溶液中滴加KHMDS(0.5M的甲苯溶液，6.3mL，3.14mmol)。在-78℃下攪拌1h后，在10min內(nèi)，通過導(dǎo)管加入預(yù)冷卻(-78℃，50min)的2，4，6-三異丙基苯磺酰基疊氮化物(1.04g，3.38mmol)的THF(20mL)溶液。在-78℃下，再過10min后，通過漏斗一次性加入冰醋酸(0.7mL，11.79mmol)。5min后，在-78℃下加入無水乙酸鉀(1.07g，10.48mmol)。放下-78℃浴，然后使反應(yīng)混合物升溫至25℃過夜(19h)。反應(yīng)混合物用EtOAc(200mL)稀釋，用飽和磷酸二氫鉀水溶液(2×100mL)和飽和NaCl水溶液(100mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油(1.09g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液1∶4EtOAc-己烷，得到無色油狀(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊醇]-4-芐基-1，3-唿唑烷-2-酮(0.587g，59％)。
質(zhì)譜(-ESI)357(M-N2)-。
3.(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊酸在氮?dú)夥铡?℃下，向(S)-3-[(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊醇]-4-芐基-1，3-嗯唑烷-2-酮(287mg，0.746mmol)的THF∶H2O(3∶1，4mL)溶液中加入LiOH一水合物(62.66mg，1.49mmol)。通過TLC(EtOAc/Hex 1∶2)監(jiān)測反應(yīng)，3h后，加入固體NaHCO3(1.0g)。漿狀物用飽和NaHCO3水溶液(2mL)和H2O(4mL)稀釋，然后用EtOAc(3×50mL)萃取。有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(10mL)萃取。EtOAc層含手性助劑，棄去。將合并的水萃取液酸化至pH小于2，用EtOAc(3×50mL)萃取，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，濃縮，得到黃色油狀(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊酸(130mg，94％)。
質(zhì)譜(-ESI)197(M-N2)-。
4.(2S，3R)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇在5min內(nèi)，0℃下向灰色氫化鋁鋰(LAH-110.6mg，2.91mmol)的THF(2mL)漿狀物中滴加(2S，3R)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊酸(130mg，583mmol)。使得到的漿狀物升溫至25℃保持19h。0℃下依次加入H2O(0.5mL)、1N NaOH(1.5mL)和H2O(0.5mL)猝滅反應(yīng)。5h后，濾除形成的白色沉淀，有機(jī)溶劑經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到油狀(2S，3R)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇粗品(120mg，96％)。質(zhì)譜(+ESI)186(M+H)+。
5. 5-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺向攪拌下的冷卻至0℃的(2S，3R)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇(120mg，0.701mmol)、三乙胺(0.1mL，1.4mmol)和二氯甲烷(50mL)溶液中滴加5-氯噻吩-2-磺酰氯(220mg，0.841mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。15min后，撤去冰浴，然后使反應(yīng)達(dá)到25℃過夜。再加入二氯甲烷(15mL)，然后將反應(yīng)混合物傾入飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)中。分離有機(jī)相，然后依次用1N HCl溶液、H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。過濾有機(jī)相，然后蒸發(fā)，得到粗油(0.36g)，通過快速層析純化，使用乙酸乙酯-己烷，1-4的洗脫液。由此得到油狀標(biāo)題化合物5-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺(125mg，53％)。該油(125mg)通過制備型手性HPLC[SFC；AD，25×0.46cm；流動(dòng)相，己烷-ipa 8∶2(1mL/min)]進(jìn)一步純化，得到5-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺白色結(jié)晶固體(0.15mg，6.4％，手性純度100％，分析純度100％)。
質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
分析C11H15NClF3O3S2+0.24C4H8O2計(jì)算值C，37.50；H，4.08；N，3.73。
實(shí)測值C，37.12；H，4.41；N，3.62。
B.方法21. 2-乙基-4，4，4-三氟丁酸在氮?dú)狻?℃下，攪拌二異丙基胺(17.1g，169mmol)的THF(180mL)溶液。在15min內(nèi)滴加正丁基鋰(n-BuLi-67.6mL，2.5M的己烷溶液)，然后在0℃下攪拌得到的溶液0.5h。然后，將反應(yīng)冷卻至-78℃，在0.5h內(nèi)，滴加4，4，4-三氟丁酸(10.0g，70.4mmol)的THF(20mL)溶液。在-78℃下，再攪拌得到的溶液0.5h。然后，在15min內(nèi)滴加碘乙烷(6.19mL，77.4mmol)。在-78℃下，攪拌得到的溶液15min，然后升溫至25℃保持24h。然后，通過緩慢加入H2O(～20mL)猝滅反應(yīng)混合物。濃縮后，用2N鹽酸酸化殘余物至pH1，然后用Et2O(400mL)萃取。然后有機(jī)層用MgSO4干燥。濃縮后，得到的殘余物在下一步反應(yīng)中直接使用，無需進(jìn)一步純化。
2. 2-乙基-4，4，4-三氟丁醇在氮?dú)狻?℃下，攪拌LAH(2.74g，72.3mmol)的Et2O(230mL)溶液。滴加2-乙基-4，4，4-三氟丁酸(12.3g，72.3mmol)的Et2O(20mL)溶液，然后在0℃下攪拌該溶液15min，然后在25℃下攪拌2h。然后，在有效攪拌下，滴加H2O(2.74mL)、15％NaOH(2.74mL)和H2O(8.22mL)猝滅該溶液。加入固體Na2SO4干燥溶劑，然后攪拌得到的混合物1h。過濾得到的漿狀物，濾餅然后用過量Et2O洗滌。濃縮后，粗產(chǎn)物經(jīng)Biotage FlashTM40色譜儀純化，洗脫液∶Et2O∶PE 20∶80至30∶70，得到油狀2-乙基-4，4，4-三氟丁醇(6.18g，55％兩步收率)。
3. 2-乙基-4，4，4-三氟丁醛在氮?dú)狻?℃下，攪拌2-乙基-4，4，4-三氟丁醇(6.18g，39.6mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(20.16g，47.5mmol)，然后在0℃下攪拌該溶液1h。在25℃下再攪拌5h后，通過NMR確認(rèn)反應(yīng)完成。溶液用Et2O(100mL)稀釋，然后向溶液中加入Na2S2O3(55g)的飽和NaHCO3水溶液(100mL)。攪拌得到的混合物0.5h。分離各液層，有機(jī)層再用飽和NaHCO3水溶液(50mL)和鹽水(50mL)洗滌，然后用Na2SO4干燥。用Vigreux柱蒸餾除去大多數(shù)溶劑(在約50℃至約55℃下加熱燒瓶，頭部溫度約等于38℃)。在反應(yīng)燒瓶中得到的殘余物在下一步反應(yīng)中直接使用，無需進(jìn)一步純化(醛的揮發(fā)性極強(qiáng))。
4. 5-(1-乙基-3，3，3-三氟丙基)-咪唑烷-2，4-二酮在0℃下，攪拌粗2-乙基-4，4，4-三氟丁醛(6.10g，39.6mmol)的H2O(100mL)溶液。向該溶液中加入氰化納(5.82g，119mmol)、碳酸銨(15.2g，158mmol)和EtOH(100mL)。加熱該反應(yīng)混合物至90℃保持3天。冷卻至25℃后濃縮，用濃HCl酸化得到的殘余物至pH約1至約2。過濾形成的固體，用2N HCl和過量H2O洗滌，然后在真空泵下干燥過夜，得到5-(1-乙基-3，3，3-三氟丙基)-咪唑烷-2，4-二酮(2.74g，31％兩步收率)。質(zhì)譜(+ESI)225(M+H)+和(-ESI)223(M-H)-5. 2-[(5′-氯-2′-噻吩基)磺酰氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊酸在密閉容器中，用微波加熱5-(1-乙基-3，3，3-三氟丙基)-咪唑烷-2，4-二-酮(1.76g，7.85mmol)的NaOH(1.26g，31.4mmol)水溶液20mL0.5h(微波條件在約100％功率、150℃、50psi下15min；然后0％功率5min；然后在約100％功率、150℃、50psi下15min)。冷卻至25℃后，真空除去反應(yīng)混合物中的水和氨，然后將得到的粗氨基酸鈉鹽混合物溶于H2O(15mL)。在0℃下，向該溶液加入THF(25mL)，隨后滴加5-氯-噻吩-2-磺酰氯(1.87g，8.64mmol)的THF(5mL)溶液。在25℃下18h后，濃縮反應(yīng)物，然后用2N鹽酸酸化殘余物至pH1。水層用Et2O(2×100mL)萃取，得到的有機(jī)層然后用鹽水(20mL)洗滌，用MgSO4干燥。濃縮后，粗殘余物用EtOAc:己烷重結(jié)晶，除去副產(chǎn)物。濃縮濾液，得到固體產(chǎn)物(1.31g，44％)。質(zhì)譜(+ESI)380(M+H)+和(-ESI)378(M-H)-6. 5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌2-[(5′-氯-2′-噻吩基)磺酰氨基]-3-乙基-5，5，5-三氟戊酸(2.19g，5.77mmol)的THF(60mL)溶液。滴加硼烷·THF絡(luò)合物(23.1mL，1.0M的THF溶液)，然后在25℃下，攪拌得到的溶液18h。然后，通過TLC(MeOH∶CHCl310∶90)確認(rèn)反應(yīng)完成。緩慢加入10％乙酸(HOAc)的MeOH(80mL)溶液猝滅反應(yīng)混合物。濃縮后，使殘余物溶于EtOAc(200mL)，然后用飽和NaHCO3水溶液(3×20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后用Na2SO4干燥。濃縮后，通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化粗產(chǎn)物(2.20g)，洗脫液∶20∶80至30∶70 EtOAc∶PE，得到兩對(duì)外消旋混合物中的一對(duì)(0.623g)。然后該化合物用手性HPLC條件(ChiralcelTMAD柱；25×2.2cm，254nm，進(jìn)樣0.5mL；流動(dòng)相25mL/min 12％ MeCN/己烷；第一個(gè)峰為產(chǎn)物，Rf＝6.7，純度＞99.9％)進(jìn)一步純化，得到對(duì)映體純5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺白色固體，mp128-129℃(0.238g，相關(guān)具體對(duì)映體的收率45％)。
質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-分析C11H15ClF3NO3S2計(jì)算值 C，36.12；H，4.13；N，3.83。
實(shí)測值 C，36.22；H，4.20；N，3.78。
實(shí)施例35′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(1-羥基乙基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺A. 5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(甲?；?丁基]噻吩-2′-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺(按實(shí)施例2制備，0.100g，0.273mmol)的CH2Cl2(4mL)溶液。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(0.151g，0.355mmol)，然后在0℃下，攪拌該溶液1h。在25℃下再攪拌1h后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。溶液用Et2O(50mL)稀釋，然后向溶液中加入Na2S2O3(0.363g)的飽和NaHCO3水溶液(10mL)。攪拌得到的混合物0.5h。分離各液層，有機(jī)層再用飽和NaHCO3水溶液(5mL)和鹽水(5mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，粗產(chǎn)物通過制備板層析純化，洗脫液∶EtOAc∶PE 30∶70，得到5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(甲?；?丁基]噻吩-2′-磺酰胺固體(0.036g，36％)。
B. 5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(甲?；?丁基]噻吩-2′-磺酰胺(0.035g，0.0962mmol)的THF(3mL)溶液。滴加入甲基溴化鎂(0.206mL，1.4M的甲苯∶THF溶液)，然后在25℃下攪拌得到的溶液1h。然后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。溶液用飽和NH4Cl水溶液(2mL)猝滅，然后用Et2O(20mL)萃取。有機(jī)層用鹽水(3mL)洗滌，然后用Na2SO4干燥。濃縮后，粗產(chǎn)物通過制備板層析純化，洗脫液∶EtOAc∶PE 30∶70，得到5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺灰白色固體(0.027g，73％)。
質(zhì)譜(-ESI)378(M-H)-。
分析C12H17ClF3NO3S2計(jì)算值 C，37.94；H，4.51；N，3.69。
實(shí)測值 C，38.35；H，4.32；N，3.29。
實(shí)施例45′-氯-N-[3，3,3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺A. 3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌4，4，4，4′，4′，4′-六氟-DL-纈氨酸(0.500g，2.22mmol)的THF(20mL)溶液。滴加入硼烷·THF絡(luò)合物(6.66mL，1.0M的THF溶液)，在25℃下攪拌得到的溶液4h。然后，通過TLC(EtOAc∶EtOH∶H2O 10∶2∶1)確認(rèn)反應(yīng)完成。緩慢加入10％HOAc的MeOH(23mL)溶液猝滅反應(yīng)混合物。濃縮后，使殘余物溶于Et2O(200mL)，然后用飽和NaHCO3水溶液(3×20mL)和鹽水(20mL)洗滌，用Na2SO4干燥。濃縮后，得到的殘余物在下一步反應(yīng)中直接使用，無需進(jìn)一步純化。
B. 5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(0.400g，1.89mmol)的CH2Cl2(20mL)溶液。滴加入三乙胺(Et3N-0.369mL，2.65mmol)，然后一次性加入5-氯-噻吩-2-磺酰氯(0.492g，2.27mmol)，然后在25℃下攪拌得到的溶液18h。然后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。用MeOH猝滅后，濃縮，使殘余物溶于Et2O(200mL)，然后用1N鹽酸(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(MgSO4)。濃縮后，粗產(chǎn)物通過BiotageFlashTM40色譜系統(tǒng)純化，洗脫液10∶90至30∶70 EtOAc∶PE，得到5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺灰白色固體(0.108g，兩步收率14％，外消旋混合物)。
質(zhì)譜(-ESI)390(M-H)-。
分析C9H8ClF6NO3S2計(jì)算值 C，27.59；H，2.06；N，3.58；實(shí)測值 C，28.24；H，1.90；N，3.48。
實(shí)施例55′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺A. 2-氨基-3-(三氟甲基)-4，4，4-三氟丁酸甲酯在氮?dú)狻?℃下，攪拌4，4，4，4′，4′，4′-六氟-DL-纈氨酸(2.00g，8.89mmol)的CH2Cl2∶MeOH(4∶1，50mL)溶液。滴加入四甲基硅烷(TMS)重氮甲烷(5.33mL，2.0M的己烷溶液)，然后在25℃下，攪拌得到的溶液3h。然后，通過TLC(10％MeOH∶氯仿)確認(rèn)反應(yīng)完成。濃縮后，得到的殘余物(1.34g，63％)在下一步反應(yīng)中直接使用，無需進(jìn)一步純化。
B. 2-[(5′-氯-2′-噻吩基)磺酰氨基]-3-三氟甲基-4，4，4-三氟丁酸甲酯在氮?dú)狻?5℃下，攪拌2-氨基-3-(三氟甲基)-4，4，4-三氟丁酸甲酯(1.34g，5.60mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液。滴加入吡啶(10mL，126mmol)，隨后一次性加入5-氯-噻吩-2-磺酰氯(1.82g，8.40mmol)，然后在25℃下，攪拌得到的溶液72h。然后，通過TLC(EtOAc∶PE 20∶80)確認(rèn)反應(yīng)完成。用H2O猝滅后，混合物用Et2O(200mL)稀釋。有機(jī)層用1N鹽酸(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(20mL)洗滌，然后干燥(MgSO4)。濃縮后，通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化粗產(chǎn)物，洗脫液5∶95至25∶75 EtOAc∶PE，得到2-[(5′-氯-2′-噻吩基)磺?；被鵠-3-三氟甲基-4，4，4-三氟丁酸甲酯固體(1.61g，69％)。質(zhì)譜(-ESI)418(M-H)-。
C. 5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌LAH(0.146g，3.84mmol)的Et2O(17mL)漿狀物。向該混合物中滴加2-[(5′-氯-2′-噻吩基)磺?；被鵠-3-三氟甲基-4，4，4-三氟丁酸甲酯(1.61g，3.84mmol)的Et2O(3mL)溶液。在此溫度下攪拌0.25h后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。滴加H2O(0.146mL)、15％NaOH水溶液(0.146mL)和H2O(0.438mL)猝滅該混合物(有效攪拌下)，然后在25℃下，再攪拌2h。干燥(Na2SO4)得到的漿狀物，然后過濾。濃縮后，通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化粗產(chǎn)物，洗脫液5∶95至40∶60 EtOAc∶PE，得到5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙基]-噻吩-2′磺酰胺固體(0.590g，39％，外消旋混合物)。然后用手性HPLC[ChiralpakAS柱；2×25cm，254nm，0.5mL進(jìn)樣；流動(dòng)相15mL/min 8％IPA的己烷溶液/0.1％TFA(預(yù)混)；第二峰為產(chǎn)物，Rf＝12.3，98.5％純度]分離出活性對(duì)映體5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺(0.185g)灰白色固體(mp 148-150℃)。
質(zhì)譜(-ESI)389.9(M-H)-。
分析C9H8ClF6NO3S2計(jì)算值C，27.59；H，2.06；N，3.58；實(shí)測值 C，27.76；H，1.96；N，3.47。
在該實(shí)施例化合物與無三氟甲基但其它相同的類似化合物間的對(duì)比研究中，在細(xì)胞試驗(yàn)中，證明該實(shí)施例化合物具有顯著的較高效能(約72至約133倍)，并且具有顯著較長的代謝穩(wěn)定性(在轉(zhuǎn)基因小鼠(Tg2576)肝微粒體代謝試驗(yàn)中，半衰期為46min對(duì)10min)。因此與無三氟甲基的相應(yīng)化合物相比，本發(fā)明化合物可以較低劑量使用。
實(shí)施例65-氯-N-[(1R，2S)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺A.(4R)-4-芐基-3-(溴乙?；?-1，3-噁唑烷-2-酮在-78℃下，向R-(-)-4-芐基-2-噁唑烷酮(15.0g，84.65mmol)的THF(200mL)溶液中滴加nBuLi(2.5M的己烷溶液，34mL，84.65mmol)。在-78℃下，攪拌該溶液30min，然后加入溴乙酰溴(18.65g，7.8mL，124.15mmol)。使溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。將其用乙酸乙酯(200mL)稀釋，然后有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗棕色油(24.6g)。該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到無色油狀(4R)-4-芐基-3-(溴乙?；?-1，3-噁唑烷-2-酮(19.9g，79.6％)。
質(zhì)譜(+ESI)300，299(M+H)+。
B. 2-[(4R)-4-芐基-2-氧代-1，3-噁唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二乙酯在120℃下，加熱(4R)-4-芐基-3-(溴乙?；?-1，3-噁唑烷-2-酮(19.7g，66.07mmol)和亞磷酸三乙酯(33.99mL，198.2mmol)18h。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。將反應(yīng)冷卻至25℃，用乙酸乙酯(200mL)稀釋。有機(jī)層用飽和NaHCO3水溶液(2×50mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗黃色油狀2-[(4R)-4-芐基-2-氧代-1，3-嗯唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二乙酯(14.27g，60.77％)。質(zhì)譜(-ESI)326(M-H)-。
C.(4R)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯?；鵠1，3-噁唑烷-2-酮在-78℃下，向2-[(4R)-4-芐基-2-氧代-1，3-唿唑烷-3-基]-2-氧代乙基膦酸二乙酯(14.27g，40.17mmol)的THF(200mL)溶液中加入KHMDS(0.5M，88mL，44.63mmol)。在30min內(nèi)，使該溶液升溫至25℃，然后在-20℃下，加入3，3，3-三氟丙醛(5.0g，44.63mmol)。使溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。加入飽和NaHCO3水溶液(50mL)猝滅反應(yīng)。水層用乙酸乙酯(3×100mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到淺棕色油(32.1g)。粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶6，得到無色油狀(4R)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯酰基]-1，3-噁唑烷-2-酮(3.7g，29.4％)。
質(zhì)譜(+ESI)314(M+H)+。
分析C15H14NF3O3+0.25H2O計(jì)算值C，56.70；H，4.60；N，4.41，實(shí)測值C，56.44；H，4.49；N，4.41。
D.(4R)-4-芐基-3-[(2R，3S)-2-溴-3-乙基-5，5，5-三氟戊?；鵠-1，3-噁唑烷-2-酮將在THF(20mL)和甲硫醚助溶劑(10mL)中的溴化銅(I)-甲硫醚絡(luò)合物(1.57g，7.66mmol)漿狀物冷卻至-40℃，然后在10min內(nèi)滴加入乙基溴化鎂(5mL，15.3mmol)。攪拌該漿狀物40min，同時(shí)升溫至-15℃。將帶綠色的漿狀物冷卻至-40℃，然后在-40℃下，滴加入(4R)-4-芐基-3-[(2E)-5，5，5-三氟戊-2-烯?；鵠1，3-噁唑烷-2-酮(2g，6.38mmol)的THF(5mL)溶液。使反應(yīng)升溫至25℃過夜(20h)。將黑色漿狀物冷卻至-78℃，然后分批加入N-溴代琥珀酰亞胺(2.3g 12.76mmol)。使其升溫至-40℃，然后再攪拌30min。然后，黑色漿狀物變?yōu)槲⒕G色至藍(lán)色。形成沉淀，然后濾除。母液用EtOAc(150mL)稀釋，有機(jī)層用飽和NaCl(50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到(4R)-4-芐基-3-[(2R,3S)-2-溴-3-乙基-5，5，5-三氟戊?；鵠-1，3-嗯唑烷-2-酮綠色半固體(1.6g，59.5％)。
質(zhì)譜(-ESI)421，420(M-H)-。
E.(4R)-3-[(2S，3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊?；鵠-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮向(4R)-4-芐基-3-[(2R，3S)-2-溴-3-乙基-5，5，5-三氟戊?；鵠-1，3-嗯唑烷-2-酮(1.6g，3.79mmol)的DMF(20mL)溶液中加入疊氮化鈉(0.468g，7.199mmol)。在25℃下，攪拌該漿狀物20h，然后真空除去溶劑。將粗產(chǎn)物溶于EtOAc(100mL)，然后有機(jī)相用H2O(3×20mL)和飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到黃色油(1.4g)。粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到無色油狀(4R)-3-[(2S，3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊?；鵠-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮(1.21g，83.2％)。
質(zhì)譜(-ESI)357(M-N2)-，380，381。
F.(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇在-10℃下、5min內(nèi)，向LAH(100mg，2.65mmol)的THF(3mL)灰色漿狀物中滴加(4R)-3-[(2S,3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟戊酰基]-4-芐基-1，3-噁唑烷-2-酮(300mg，0.78mmol)的THF(2mL)溶液。使得到的漿狀物升溫至25℃保持19h。在0℃下，依次加入H2O(0.3mL)、1N NaOH(0.9mL)和H2O(0.3mL)猝滅反應(yīng)。5h后，濾除形成的沉淀。母液經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到淺黃色油狀(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇(145mg，98％)。
質(zhì)譜(-ESI)184(M-H)-。
G.5-氯-N-[(1S，2S)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺向攪拌下的冷卻至0℃的(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟戊-1-醇(145mg，0.78mmol)、三乙胺(0.22mL，1.56mmol)和二氯甲烷(5mL)溶液中滴加5-氯噻吩-2-磺酰氯(225mg，0.861mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液。15min后，撤去冰浴，然后使反應(yīng)混合物達(dá)到25℃過夜。再加入二氯甲烷(15mL)，然后將反應(yīng)物傾入飽和碳酸氫鈉溶液(25mL)猝滅反應(yīng)。分離有機(jī)相，然后依次用1N HCl溶液、H2O、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥。過濾有機(jī)相，然后蒸發(fā)，得到粗油(0.250g)，通過洗脫液乙酸乙酯-己烷1∶6快速層析純化。由此得到標(biāo)題化合物5-氯-N-[(1S，2S)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺(140mg，53.8％)，為油狀物。用EtOAc-庚烷1∶4重結(jié)晶進(jìn)一步純化該粗油。將混合溶劑系統(tǒng)加入5-氯-N-[(1S，2S)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺中，加熱，得到溶液，冷卻至25℃保持3h，然后在0℃保存19h。過濾沉淀的結(jié)晶白色固體，然后用冰凍庚烷洗滌，得到5-氯-N-[(1R，2S)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺白色結(jié)晶固體(50mg，19.2％，91％手性純度，100％分析純度)。
質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
分析C11H15NClF3O3S2+0.10C4H8O2計(jì)算值C，36.55；H，4.25；N，3.74。
實(shí)測值C，36.94；H，4.15；N，3.57。
實(shí)施例75-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺A. 4，4，4-三氟丁醛在氮?dú)夥铡?70℃下，將氫化二異丁基鋁(35mL，35.26mmol)加入4，4，4-三氟丁酸乙酯(5g，29.38mmol)的CH2Cl2(50mL)溶液中。6h后，加入1N HCl(6mL)，然后升溫至-60℃，將反應(yīng)混合物傾入H2O(5mL)中，然后用CH2Cl2(2×50mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用H2O(2×10mL)洗滌。有機(jī)萃取液經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到無色非粘性油狀4，4，4-三氟丁醛(3.7g，100％)。
B. 5-(3，3，3-三氟丙基)咪唑烷-2，4-二酮將氰化納(4.31g，88.04mmol)和4，4，4-三氟丁醛(3.7g，29.34mmol)加入碳酸銨(9.1g，117.4mmol)的H2O(60mL)溶液中。將該黑色反應(yīng)混合物加熱至90℃。1h后，混合物變均勻，然后在90℃下將其攪拌18h。冷卻至25℃后，真空除去約60mL溶劑。加入濃HCl(4mL)酸化混合物至pH約2，形成沉淀。過濾。母液用EtOAc(3×50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到棕色油狀5-(3，3，3-三氟丙基)咪唑烷-2，4-二酮(3.95g，69.7％)。
質(zhì)譜(-ESI)195(M-H)-。
C. 5，5，5-三氟正纈氨酸將5-(3，3，3-三氟丙基)咪唑烷-2，4-二酮(0.9g，4.59mmol)溶于NaOH(0.734g的10mL H2O溶液，18.35mmol)水溶液10mL。將該溶液分裝在2個(gè)用于微波技術(shù)的特殊容器中。在密閉的容器中，用微波加熱溶液1h。微波條件在約100％功率、150℃、50psi下15min，然后停止5min，0％功率。重復(fù)該順序兩次或直至反應(yīng)完成。真空除去反應(yīng)混合物中的水和氨，然后得到粗5，5，5-三氟正纈氨酸(1.1g，140％)和NaOH混合物，在下一步反應(yīng)中使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。
質(zhì)譜(+ESI)172(M+H)+。
D.N-[5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟正纈氨酸在30min內(nèi)，向粗5，5，5-三氟正纈氨酸(0.785g，4.59mmol)和NaOH混合物溶于THF(10ml)和2N NaOH(10mL)的溶液中滴加5-氯噻吩-2-磺酰氯(1.32g，5.04mmol)的THF(10ml)溶液。60min后，使反應(yīng)混合物逐步升溫至25℃，然后攪拌16h。真空除去THF，然后用1N HCl酸化混合物至pH約2。15min后，沉淀開始從乳白色溶液析出。60min后，冷卻混合物至0℃保持45min，然后過濾。沉淀用1N HCl(10mL)洗滌，得到白色固體。取出該粘性白色固體。將其溶于EtOAc(100mL)。水層用EtOAc(3×50mL)洗滌，且有機(jī)層用飽和NaCl水溶液(50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到深紅色油狀N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟正纈氨酸(1.1g，68.3％)。質(zhì)譜(-ESI)350(M-H)。
E. 5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺在0℃下、30min內(nèi)，將硼烷-THF(1M，15mL，14.21mmol)滴加入N-[(5-氯噻吩-2-基)磺酰基]-5，5，5-三氟正纈氨酸(1.0g，2.84mmol)的THF(10mL)溶液中。使反應(yīng)升溫至25℃保持18h，然后加入10％乙酸的甲醇溶液50mL猝滅。蒸發(fā)溶劑后，將粗產(chǎn)物溶于EtOAc，然后用1N HCl、H2O和飽和NaHCO3洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(0.83g)，通過洗脫液乙酸乙酯-己烷1∶6快速層析純化。由此得到標(biāo)題化合物5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺(0.46g，48％)，為無色油狀物。
質(zhì)譜(-ESI)337(M-H)-。
分析∶C11H15NClF3O3S2+0.30C4H8O2計(jì)算值C，33.64；H，3.71；N，3.85。
實(shí)測值C，34.01；H，3.65；N，3.67。
實(shí)施例8和95-氯-N-{(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-[(1S)-1-羥乙基]-2-甲基丁基}噻吩-2-磺酰胺和5-氯-N-{(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-[(1R)-1-羥乙基]-2-甲基丁基)噻吩-2-磺酰胺在0℃下，向5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例1制備，290mg，0.824mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液中加入Dess-Martin過碘烷(410mg，0.989mmol)。使該反應(yīng)混合物升溫至25℃。10min后，TLC(3∶7 EtOAc-hex.)表明存在原料。再加入Dess Martin過碘烷(410mg，0.989mmol)，15min后，TLC表明原料反應(yīng)完。加入乙醚(30mL)，隨后加入1N Na2S2O3水溶液(25mL)和飽和NaHCO3水溶液(25mL)。劇烈攪拌該乳白色溶液直至兩相均勻。分離各層，水相然后用乙醚萃取。干燥(Na2SO4)合并的有機(jī)萃取液，然后濃縮?？焖賹游?洗脫液EtOAc-己烷3∶7)得到5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(甲酰基-2-甲基丁基)]噻吩-2-磺酰胺(100mg，35％)白色固體。
在0℃下，向5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(甲?；?2-甲基丁基)]噻吩-2-磺酰胺(100mg，0.286mmol)的THF(3mL)溶液中滴加甲基溴化鎂(0.61mL，1.4M的THF/甲苯溶液，0.86mmol)溶液。使反應(yīng)混合物升溫至25℃，然后攪拌3h。然后用飽和氯化銨水溶液猝滅，用EtOAc(2×40mL)萃取，干燥(Na2SO4)，然后濃縮。快速層析(洗脫液EtOAc-己烷3∶7)得到5-氯-N-{(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-[1-羥乙基]-2-甲基丁基}噻吩-2-磺酰胺(75mg，74％)的3∶1非對(duì)映體混合物。通過HPLC(Zorbax硅膠柱，25×5cm，洗脫液∶甲基叔丁基醚(MTBE)-己烷3∶2，非對(duì)映體1在11.4min洗脫出，非對(duì)映體2在14.1min洗脫出)分離非對(duì)映體。
非對(duì)映體1質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
非對(duì)映體2質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
實(shí)施例105-氯-N-[(1S，2S)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺A.5，5，5-三氟-L-異亮氨酸鹽酸鹽向(S)-(-)-α-甲基芐胺鹽酸鹽(0.340g，2.16mmol)的MeOH/H2O(1∶1)溶液20mL中加入氰化鉀(0.139g，2.13mmol)和(2S)-4，4，4-三氟-2-甲基丁醛(0.300g，2.14mmol，按實(shí)施例1方法2中報(bào)告的方法制備，但使用(S)-(-)-4-芐基-2-噁唑烷酮手性助劑)，然后攪拌反應(yīng)混合物17h。真空除去甲醇，然后產(chǎn)物用EtOAc萃取。有機(jī)萃取液用0.1N鹽酸洗滌，干燥(Na2SO4)，然后濃縮?？焖賹游?洗脫液EtOAc-己烷1∶9)得到黃色油狀α-氨基腈(0.224g，39％)。1H-NMR表明該產(chǎn)物為3∶1的非對(duì)映體混合物。
將硫酸(3mL)加入非對(duì)映體混合物(0.224g，0.829mmol)，然后攪拌該溶液22h。然后將反應(yīng)混合物傾入碎冰塊(～10g)上。加入濃氨水來中和酸。混合物用EtOAc萃取，干燥(Na2SO4)，過濾，然后濃縮，得到酰胺(0.224g，94％)，其在下一步使用時(shí)無需純化。
在3個(gè)大氣壓氫(H2)下，在Parr裝置中振搖該酰胺(0.224g，0.777mmol)和5％鈀/C(Pd/C-40mg)混合物2天。通過Celite試劑塞過濾混合物，真空除去溶劑，得到白色固體胺(128mg，90％)，其在下一步反應(yīng)中使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。
加熱回流該胺(128mg，0.695mmol)的濃鹽酸(3mL)溶液24h。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，然后濃縮，得到氨基酸鹽酸鹽(非對(duì)映體比例3∶1)和1當(dāng)量氯化銨混合物白色固體(183mg，95％)。
質(zhì)譜(+ESI)186(M+H)+。
B.(2S，3S)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-甲基戊-1-醇在0℃下，向硼氫化鋰(1.0mL，2.0N的THF溶液，2.0mmol)的THF(5mL)溶液中加入氯代三甲基硅烷(0.51mL，4.01mmol)。使反應(yīng)混合物升溫至25℃，30min后，滴加至0℃下的粗氨基酸鹽酸鹽(184mg，0.669mmol)的THF(5mL)懸浮液中。使混合物升溫至25℃，21h后，用MeOH猝滅。真空除去揮發(fā)物，然后將得到的殘余物溶于1NNaOH水溶液，用CHCl3(4×20mL)萃取，干燥(Na2SO4)，然后濃縮，得到黃色油狀氨基醇(92mg，81％)，根據(jù)其1H NMR圖譜，它為3∶1的非對(duì)映體混合物。質(zhì)譜(+ESI)172(M+H)+。
C. 5-氯-N-[(1S，2S)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲丁基]噻吩-2-磺酰胺向該氨基醇(168mg，0.981mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液中加入三乙胺(170μL，1.20mmol)和5-氯噻吩-2-磺酰氯(256mg，1.18mmol)。在25℃下，攪拌該反應(yīng)混合物21h。用EtOAc(50mL)稀釋溶液，用0.1N HCl洗滌兩次，干燥，然后濃縮。通過快速層析(洗脫液EtOAc-己烷3∶7)小心除去雜質(zhì)和次要的非對(duì)映體，得到5-氯-N-[(1S，2S)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(97mg，28％)，mp 99-100℃。HPLC(Zorbax硅膠柱，洗脫液MTBE-己烷3∶2)表明為97∶3的非對(duì)映體混合物。手性HPLC(AD柱，洗脫液異丙醇-己烷1∶9)表明對(duì)映體純度＞99％。D25＝+8.95°(c＝1％溶液，MeOH)。
質(zhì)譜(-ESI)350(M-H)-。
分析C10H13ClF3NO3S2計(jì)算值 C，34.14；H，3.72；N，3.98。
實(shí)測值 C，34.43；H，3.70；N，3.91。
實(shí)施例11(2S，3S)-2-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-磺?；?-酰氨基-5，5，5-三氟-3-乙基-戊-1-醇A.(R)-4-芐基-3-(2-R-溴-3-S-乙基-5，5，5-三氟-戊?；?-噁唑烷-2-酮向冷卻至-40℃的溴化銅(I)·甲硫醚絡(luò)合物(328mg，1.56mmol)的THF/DMS(2∶1，60mL)溶液中加入乙基溴化鎂(1.06mL，3M的THF溶液，3.2mmol)。攪拌該溶液10min，同時(shí)升溫至-15℃。再將混合物冷卻至-40℃，然后加入(R)-4-芐基-3-(5，5，5-三氟-戊-2-烯?；?-嗯唑烷-2-酮(按實(shí)施例6第C部分制備，416mg，1.3mmol)的THF(15mL)溶液。在25℃下，攪拌溶液16h。再將溶液冷卻至-78℃，然后加入N-溴琥珀酰亞胺(473mg，2.6mmol)的THF(10mL)溶液。使溶液升溫至0℃，然后在0℃下振搖3h。用飽和碳酸銨和0.5N硫酸氫鉀1∶1溶液(15mL)猝滅反應(yīng)。傾出有機(jī)相，然后濃縮，經(jīng)液相色譜質(zhì)譜(LCMS)鑒別，得到(R)-4-芐基-3-(2-R-溴-3-S-乙基-5，5，5-三氟-戊酰基)-噁唑烷-2-酮。
B.3-(2-S-疊氮基-3-S-乙基-5，5，5-三氟-戊?；?-4R-芐基-噁唑烷-2-酮向溶于二甲基甲酰胺(DMF-10mL)的(R)-4-芐基-3-(2R-溴-3S-乙基-5，5，5-三氟-戊?；?-噁唑烷-2-酮溶液中加入疊氮化鈉(172mg，2.6mmol)。攪拌該溶液72h，用水(20mL)稀釋，萃取至乙酸乙酯(2×20mL)，然后濃縮，經(jīng)LCMS鑒別，得到3-(2-S-疊氮基-3-S-乙基-5，5，5-三氟-戊?；?-4R-芐基-噁唑烷-2-酮。
C.(2S，3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊酸在0℃下，使3-(2-S-疊氮基-3-S-乙基-5，5，5-三氟-戊酰基)-4-芐基-噁唑烷-2-酮溶于THF和水2∶1的混合物(20mL)中，然后加入氫氧化鋰一水合物(1.4mmol，60mg)。在0℃下，振搖該溶液1h，然后加入飽和碳酸鈉(20mL)。用乙酸乙酯(20mL)萃取混合物。用2N鹽酸酸化水相，然后用乙酸乙酯(20mL)萃取，經(jīng)LCMS鑒別，得到(2S，3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊酸。
D.(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊-1-醇在0℃下，使(2S，3S)-2-疊氮基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊酸溶于THF(5mL)，然后加入氫化鋁鋰(1M的THF溶液)(1mL，1mmol)。在40℃下，攪拌得到的溶液2h。依次加入水(60μL)、15％氫氧化鈉水溶液(60μL)和水(150μL)猝滅反應(yīng)，在每次加入間隔劇烈攪拌。然后過濾混合物，濃縮，得到(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊-1-醇。
E.(2S，3S)-2-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-磺?；?-酰氨基-5，5，5-三氟-3-乙基-戊-1-醇向(2S，3S)-2-氨基-3-乙基-5，5，5-三氟-戊-1-醇(0.1mmol)的THF(2mL)溶液中加入三乙胺(83.7μL，0.6mmol)和5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-磺酰氯(28mg，0.1mmol)。攪拌該溶液16h，然后濃縮。除去溶劑，將殘余物溶于MeOH(1.5mL)，然后使用以下條件的半制備反相(RP)-HPLC純化。
半制備RP-HPLC條件柱Phenomenex C18 Luna 21.6mm×60mm柱，5μM溶劑A水(0.02％TFA緩沖液)溶劑B乙腈(0.02％TFA緩沖液)溶劑梯度時(shí)間010％B；2.5min10％B；14min90％B。
流速22.5mL/min根據(jù)UV吸收峰，收集產(chǎn)物，然后濃縮，得到標(biāo)題化合物1.7mg，HPLC保留時(shí)間2.97min，觀測離子428(M-H)。
實(shí)施例12(2S，3R)-2-(5-氯-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-磺?；?-酰氨基-5，5，5-三氟-3-苯基-戊-1-醇基本上按照實(shí)施例11的相同方法，但使用苯基溴化鎂和5-氯-1，3-二甲基吡唑-4-磺酰氯，制備(2S，3R)-2-(5-氯-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-磺?；?-酰氨基-5，5，5-三氟-3-苯基-戊-1-醇7.1mg，HPLC保留時(shí)間2.25min，觀測離子424(M-H)。
實(shí)施例13合成含三氟甲基雜環(huán)磺酰胺在一個(gè)實(shí)施方案中，用以下示例性試劑和條件按流程13所示方法進(jìn)行。但是，本領(lǐng)域技術(shù)人員將容易理解某些反應(yīng)條件例如時(shí)間、溫度、催化劑和某些試劑可以改變。
按照流程13，使氨基酯XLVIII(250g，0.64mol)懸浮于甲苯(4L)中，然后用0.4N NaOH(1.6L)中和至pH 7-8。分離各層，有機(jī)相用水(1.6L)洗滌，隨后用Na2SO4(250g)干燥。將甲苯溶液冷卻至-68℃至-62℃，然后用25％氫化二異丁基鋁(DIBAL-H)的甲苯溶液(1278mL，1.9mol，3當(dāng)量)處理，保持溫度低于-60℃。使混合物升溫至室溫，然后攪拌1小時(shí)。依次用10％NaOH水溶液(128mL)、檸檬酸鈉二水合物(500g)和無水硫酸鈉(385g)猝滅反應(yīng)。攪拌1小時(shí)后，通過過濾除去固體，將溶液濃縮至油。將該油溶于乙醚(2.6L)，冷卻至5℃，然后用1N HCl/乙醚溶液(750mL)處理。攪拌30分鐘后，過濾收集固體，用乙醚洗滌，真空干燥，得到189g(85％)芐胺白色固體。在40g 10％Pd/C催化劑的存在下、在40psi下，氫化該芐胺(150g，0.43mol)的甲醇(150mL)溶液。1.5小時(shí)后，過濾除去催化劑，然后將溶液濃縮至固體。該固體用乙醚/己烷研磨，過濾收集，然后干燥，得到94.8g(90％)氨基醇固體。
該氨基醇(100.2g，0.41mol)的CH2Cl2(1150mL)溶液用N，O-二(三甲基甲硅烷基)乙酰胺(BSA-110mL，0.45mol)處理，隨后用三乙胺(152.4mL，1.09mol)和二甲氨基吡啶(DMAP-13g)處理。15分鐘后，加入磺酰氯(105.5g，0.49mol)的CH2Cl2(186mL)溶液，然后在室溫下攪拌該混合物19小時(shí)(過夜)。加入THF(450mL)和5％鹽酸(800mL)，然后攪拌混合物1小時(shí)。分離各層，然后有機(jī)層用5％NaHCO3、隨后用水洗滌。濃縮溶液，得到油，然后通過硅膠塞，用30％EtOAc/己烷洗脫。真空濃縮含產(chǎn)物的流份，促進(jìn)結(jié)晶。加入己烷，過濾收集固體，得到87.1g(55％)目標(biāo)化合物，為白色固體。濃縮母液，得到第二批目標(biāo)化合物12.6g，收率8％。
實(shí)施例145-氯-N-[1-(4，4-二氟環(huán)己基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺 A.{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(4，4-二氟環(huán)己基)乙酸將氨基(4，4-二氟環(huán)己基)乙酸(2.68g，10.973mmol)溶于2N NaOH(20mL)。將該溶液冷卻至0℃，滴加入(5min)5-氯噻吩-2-磺酰氯(3.25g，12.42mmol)的THF(10mL)溶液。使溶液升溫最高至25℃過夜。19h后，真空除去THF，用2N HCl(20mL)酸化混合物至pH約1至約2。水層用EtOAc(4×50mL)洗滌。合并的有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油狀{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(4，4-二氟環(huán)己基)乙酸(3.8g，98.2％)。
質(zhì)譜(-ESI)372(M-H)-。
B. 5-氯-N-[1-(4，4-二氟環(huán)己基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺在0℃下、20min內(nèi)，向LAH(0.406g，10.70mmol)的THF(20mL)漿狀物中滴加{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(4，4-二氟環(huán)己基)乙酸(2.0g，5.35mmol)。
反應(yīng)加熱至70℃保持18h。將漿狀反應(yīng)物(淺棕色)冷卻至0℃，然后用H2O(1.5mL)、1N NaOH(4.5mL)和H2O(1.5mL)猝滅反應(yīng)。攪拌反應(yīng)物4h，得到白色漿狀物。過濾該漿狀物，母液然后經(jīng)MgSO4進(jìn)一步干燥，過濾，然后真空濃縮，得到粗黃色油(1.68g)。粗產(chǎn)物通過洗脫液EtOAc-己烷1∶2用Biotage FlashTM40色譜純化，得到5-氯-N-[1-(4，4-二氟環(huán)己基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺白色無定形固體(0.15g，7.8％)。
質(zhì)譜(-ESI)358(M-H)-。
分析C12H16ClNF2O3S2·0.17EtOAc計(jì)算值C，41.02；H，4.49；N，3.76。
實(shí)測值C，40.63；H，4.67；N，3.74。
實(shí)施例155-氯-N-[1-(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺 A.氨基(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯在0℃下、10min內(nèi)，向氨基(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸(1.0g，5.23mmol)的CH2Cl2∶MeOH(4∶1)溶液中滴加TMSCHN2(10.5mL)直至氖黃色保持。使反應(yīng)混合物升溫至25℃保持19h。真空除去溶劑，得到淺黃色油狀氨基(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯(0.9g，84.11％)。
質(zhì)譜(-ESI)206(M+H)+。
B.{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯將5-氯噻吩-2-磺酰氯(1.26g，4.82mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液滴加(5min)至0℃下的氨基(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯(0.9g，4.38mmol)的CH2Cl2(10mL)/三乙胺(1.22mL，8.77mmol)溶液中。使該溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶4)表明反應(yīng)完成。用CH2Cl2(100mL)稀釋，然后有機(jī)層用1N HCl(20mL)和飽和NaCl水溶液(20mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗淡黃色固體(1.69g)。粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶4通過Biotage FlashTM40色譜儀純化，得到無色油狀{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯(0.230g，12.23％)。質(zhì)譜(-ESI)384(M+H)+。
C. 5-氯-N-[1-(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺在0℃下、20min內(nèi)，向LAH(0.030g，0.78mmol)的THF(5mL)漿狀物中滴加{[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠氨基}(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)乙酸甲酯(0.154g，0.38mmol)。使該漿狀物(灰色)升溫至25℃保持19h。將反應(yīng)漿狀物冷卻至0℃，然后用H2O(0.5mL)、1N NaOH(1.5mL)和H2O(0.5mL)猝滅反應(yīng)。攪拌反應(yīng)物4h，得到白色漿狀物。過濾該漿狀物，然后母液經(jīng)MgSO4進(jìn)一步干燥，過濾，然后真空濃縮，得到粗黃色油(0.162g)。粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶4通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到無色油狀5-氯-N-[1-(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺(0.105g，77.77％)。
質(zhì)譜(-ESI)356(M-H)-。
分析C13H14ClNF2O4S2·0.20EtOAc
計(jì)算值∶C，41.41；H，3.84；N，3.56。
實(shí)測值C，41.08；H，3.90；N，3.47。
實(shí)施例165-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-甲?；?2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺 在氮?dú)狻?℃下，攪拌5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例1制備，3.0g，8.53mmol)的水飽和CH2Cl2溶液(30mL)。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(7.59g，17.90mmol)。在25℃下，攪拌得到的懸浮液，通過TLC分析(EtOAc/己烷1∶2)監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)原料的轉(zhuǎn)化率減少時(shí)，再加入每批2mL的水飽和CH2Cl2(15min內(nèi)，三批)。在25℃下、19h后，TLC表明反應(yīng)完成。溶液用Et2O(50mL)稀釋，并加入硫代硫酸鈉Na2S2O3(93.83mmol，14.8g，11當(dāng)量)的80％飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)的溶液?？焖贁嚢柙摶旌衔?0min直至兩相澄清。分離各層，水相然后用乙醚(30mL)萃取。合并的有機(jī)層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(2.67g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM60色譜系統(tǒng)純化，得到無色油狀5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-甲?；?2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(2.65g，88.93％)。
質(zhì)譜(+ESI)350(M+H)+。
分析C10H11ClNF3O3S2·0.35H2O計(jì)算值C，33.34；H，2.83；N，3.87。
實(shí)測值C，33.74；H，3.31；N，3.93。
實(shí)施例17N-[(1S，2R)-1-乙酰基-4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-5-氯噻吩-2-磺酰胺 A. 5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5-氯N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-甲?；?2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例16制備，1.0g，2.86mmol)的THF(10mL)溶液。滴加入甲基溴化鎂(3.0M的乙醚溶液，1.9mL，5.71mmol)，然后在25℃下攪拌得到的溶液1h。然后，TLC(EtOAc/己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。溶液用飽和NH4Cl水溶液(10mL)猝滅，然后用乙醚(40mL)萃取。有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，得到粗油(0.867g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM60色譜系統(tǒng)純化，得到無色油狀5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(0.495g，49.5％)。
質(zhì)譜(-ESI)364(M-H)-。
B. N-[(1S，2R)-1-乙酰基-4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-5-氯噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺(0.390g，1.06mmol)的水飽和CH2Cl2溶液(30mL)。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(0.95g，2.23mmol)。在25℃下，攪拌得到的懸浮液，通過TLC分析(EtOAc/己烷1∶2)監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)原料的轉(zhuǎn)化率減小時(shí)，再加入每批1mL的水飽和CH2Cl2(15min內(nèi)，三批)。在25℃下、19h后，TLC表明反應(yīng)完成。溶液用Et2O(50mL)稀釋，并加入硫代硫酸鈉Na2S2O3(11.83mmol，4.8g，11當(dāng)量)的80％飽和碳酸氫鈉水溶液(40mL)的溶液中?？焖贁嚢柙摶旌衔?0min直至兩相澄清。分離各層，然后水相用乙醚(20mL)萃取。合并的有機(jī)層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(0.38g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到N-[(1S，2R)-1-乙?；?4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-5-氯噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.265g，73.10％)。
質(zhì)譜(-ESI)362(M-H)-。
分析C11H13ClNF3O3S2計(jì)算值 C，36.32；H，3.6；N，3.85。
實(shí)測值 C，36.08；H，3.2；N，3.74。
實(shí)施例185-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥基-1-甲基乙基)2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺 在氮?dú)狻?℃下，攪拌N-[(1S，2R)-1-乙?；?4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-5-氯噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例17制備，0.100g，0.275mmol)的THF(5mL)溶液。滴加甲基溴化鎂(3.0M的乙醚溶液，0.266mL，0.824mmol)，然后在25℃下，攪拌得到的溶液19h。然后，TLC(EtOAc/己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。溶液用飽和NH4Cl水溶液(10mL)猝滅，然后用乙醚(40mL)萃取。有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，得到粗油(0.110g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶4通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥基-1-甲基乙基)2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.049g，46.6％)。
質(zhì)譜(-ESI)378(M-H)-。
分析C12H17ClNF3O3S2計(jì)算值 C，37.94；H，4.51；N，3.69。
實(shí)測值C，37.45；H，4.03；N，3.68。
實(shí)施例194-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A. 4，4，4，4′4′4′-六氟-dl-纈氨酸甲酯在氮?dú)狻?℃下，攪拌4，4，4，4′，4′，4′-六氟-dl-纈氨酸(1.1g，4.88mmol)的CH2Cl2-MeOH(4∶1，25mL)溶液。滴加入TMS-重氮甲烷(2.0M的己烷溶液，20mL，19.55mL)，然后在25℃下，攪拌得到的氖綠色溶液19h。然后，TLC(10％MeOH的氯仿溶液)表明反應(yīng)完成。濃縮后，得到的殘余物4，4，4，4′，4′，4′-氟-dl-纈氨酸甲酯(1.1g)在下一步中直接使用，無需進(jìn)一步純化。質(zhì)譜(-ESI)238(M-H)-。
B. N-[(4-溴-5-氯噻吩-2-基)磺酰基]-4，4，4，4′4′4′-六氟-dl-纈氨酸甲酯在氮?dú)夥铡?5℃下，攪拌4，4，4，4′，4′，4′-六氟纈氨酸甲酯(1.0g，4.18mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液。滴加入吡啶(0.81mL，10.04mmol)，隨后一次性加入4-溴-5-氯噻吩-2-磺酰氯(1.486g，5.05mmol)，然后在25℃下，攪拌得到的溶液19h。然后，TLC(EtOAc-己烷1∶4)表明反應(yīng)完成。用水(1.0mL)猝滅后，混合物用CH2Cl2(30mL)稀釋。有機(jī)層依次用1N鹽酸(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(2.1g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到N-[(4-溴-5-氯-噻吩-2-基)磺?；鵠-4，4，4，4′，4′，4′-六氟-dl-纈氨酸甲酯白色固體(1.62g，83.07％)。
質(zhì)譜(-ESI)497(M-H)-。
C. 4-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)夥铡?℃下，向N-[(4-溴-5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-4，4，4，4′，4′，4′-六氟纈氨酸甲酯(1.45g，2.907mmol)的THF(20mL)溶液中加入硼氫化鋰(LiBH4)(5.82mL，11.64mmol)。使反應(yīng)升溫至25℃保持19h。將反應(yīng)冷卻至0℃，用2N HCl猝滅(緩慢加入)，用乙醚(40mL)稀釋，有機(jī)層依次用1N鹽酸(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(1.3g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到4-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(1.13g，84.32％)。
質(zhì)譜(-ESI)469(M-H)-。
分析C9H7ClBrNF6O3S2計(jì)算值C，22.97；H，1.50；N，2.98。
實(shí)測值 C，23.11；H，1.16；N，2.78。
實(shí)施例204-溴-5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 將4-溴-5-氯噻吩-2-磺酰氯(0.193g，0.654mmol)的CH2Cl2(1.0mL)溶液滴加(5min)到0℃下的(2S)-2-氨基-3，3，3-三氟-3-(三氟甲基)丁-1-醇(按實(shí)施例13方法制備，0.115g，0.548mmol)的CH2Cl2(10mL)和吡啶(0.9mL，1.09mmol)溶液中。使該溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶1)表明反應(yīng)完成。反應(yīng)混合物用CH2Cl2(100mL)稀釋，然后有機(jī)層用1N HCl(2×50mL)和飽和NaCl水溶液(50mL)洗滌。經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗灰白色固體(0.270g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到4-溴-5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(39mg，15.11％)。質(zhì)譜(-ESI)469(M-H)-。
實(shí)施例215-氯4-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺
A. 5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基]噻吩-4-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺將二(三丁基錫)(0.939g，2.87mmol)和四(三苯基膦)合鈀(0)(0.221g，0.191mmol)加入4-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2磺酰胺(按實(shí)施例19制備，0.9g，1.91mmol)的1，4-二噁烷(42mL)溶液中。加熱該棕色溶液至回流過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶1)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，真空除去溶劑，得到黃色油(1.31g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-4-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺白色固體(0.220g，18.86％)。
質(zhì)譜(-ESI)554(M-H)-。
B. 5-氯-4-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-4-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺(0.220g，0.396mmol)的無水乙腈(10mL)溶液。一次性加入Selectfluor試劑(0.147g，0.416mmol)，然后在25℃下，攪拌溶液19h。3h后，開始出現(xiàn)白色沉淀。19h后，取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)沒有完成。存在大部分原料。加熱反應(yīng)物至80℃保持6h。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，然后真空除去溶劑，得到黃色油(0.11g)。該粗產(chǎn)物通過制備RP-HPLC(PrimesphereTM2×25cm柱，洗脫液55％MeCN/0.01％三氟乙酸(TFA)水溶液，流速＝25mL/min，Rt，4.401min)純化，得到5-氯4-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺無定形白色固體(0.004g，24.69％)。
質(zhì)譜(-ESI)408(M-H)-。
實(shí)施例225-溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A. N-[(5-溴噻吩-2-基)磺?；鵠-4，4，4，4′，4′，4′-六氟-dl-纈氨酸乙酯在氮?dú)夥铡?5℃下，攪拌按(J.Med Chem.1981，24，1043-1047)所述方法制備4，4，4，4′，4′，4′-六氟-dl-纈氨酸乙酯(1.64g，6.48mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液。滴加入吡啶(0.81mL，10.04mmol)，隨后一次性加入5-溴噻吩-2-磺酰氯(2.034g，7.77mmol)，然后25℃下，攪拌得到的溶液19h。然后，TLC(EtOAc-己烷1∶4)表明反應(yīng)完成。用水(2.0mL)猝滅后，混合物用CH2Cl2(40mL)稀釋。有機(jī)層依次用1N鹽酸(20mL)、飽和NaHCO3水溶液(20mL)和鹽水(15mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(3.3g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到N-[(5-溴噻吩-2-基)磺酰基]-4，4，4，4′，4′，4′-六氟-dl-纈氨酸乙酯白色固體(2.40g，80.0％)。
質(zhì)譜(-ESI)477(M-H)-。
B. 5-溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)夥铡?℃下，向N-[(5-溴-噻吩-2基)磺?；鵠-4，4，4，4′，4′，4′-六氟纈氨酸乙酯(2.4g，5.02mmol)的THF(20mL)溶液中加入LiBH4(20mL，20.07mmol)。使反應(yīng)升溫至25℃保持19h。將反應(yīng)冷卻至0℃，然后用2N HCl(緩慢加入)猝滅，用乙醚(50mL)稀釋，然后有機(jī)層依次用1N鹽酸(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(2.31g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到5-溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(1.3g，59.63％)。
質(zhì)譜(-ESI)435(M-H)-。
分析C9H8BrNF6O3S2計(jì)算值C，24.78；H，1.85；N，3.21。
實(shí)測值C，24.74；H，1.32；N，3.11。
實(shí)施例235-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A. N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺將二(三丁基錫)(1.36g，4.13mmol)和四(三苯基膦)合鈀(O)(0.32g，0.275mmol)加入5-溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例22制備，1.2g，2.75mmol)的1，4-二噁烷(40mL)溶液中。加熱該棕色溶液至回流過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，真空除去溶劑，得到黃色油(1.4g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺白色固體(0.400g，27.97％)。質(zhì)譜(-ESI)520(M-H)-。
B. 5-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺(0.400g，0.76mmol)的無水乙腈(10mL)溶液。一次性加入Selectfluor試劑(0.285g，0.806mmol)，然后在25℃下，攪拌溶液19h。3h后，開始出現(xiàn)白色沉淀。19h后，取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)沒有完成。存在大部分原料。加熱反應(yīng)物至80℃保持6h。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，然后真空除去溶劑，得到黃色油(0.191g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到5-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺無定形白色固體(0.010g，34.72％)。
質(zhì)譜(-ESI)374(M-H)-。
實(shí)施例245-溴-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 將5-溴噻吩-2-磺酰氯(0.149g，0.568mmol)的CH2Cl2(1.0mL)溶液滴加(5min)到0℃下的(2S)-2-氨基-4，4，4-三氟-3-(三氟甲基)丁-1-醇(0.100g，0.474mmol)的CH2Cl2(10mL)和吡啶(0.1mL，0.95mmol)溶液中。使該溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。用CH2Cl2(10mL)稀釋，然后有機(jī)層用1N HCl(2×10mL)、飽和NaCl水溶液(10mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗灰白色固體(0.120g)。該粗產(chǎn)物用CH2Cl2己烷(1∶7)重結(jié)晶，得到5-溴-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色蓬松固體(0.0541g，27.05％)。質(zhì)譜(-ESI)435(M-H)-。
實(shí)施例255-氟-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A. N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺將二(三丁基錫)(1.36g，4.13mmol)和四(三苯基膦)合鈀(O)(0.32g，0.275mmol)加入5-溴-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例24制備，1.1g，2.52mmol)的1,4--二唿烷(40mL)溶液中。加熱該棕色溶液至回流過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，真空除去溶劑，得到黃色油(1.05g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過BiotageFlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺白色固體(0.350g，26.7％)。質(zhì)譜(-ESI)520(M-H)-。
B. 5-氟-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-5-(三丁基甲錫烷基)-2-磺酰胺(0.400g，0.76mmol)的無水乙腈(10mL)溶液。一次性加入Selectfluor試劑(0.285g，0.806mmol)，然后在25℃下，攪拌溶液19h。3h后，開始出現(xiàn)白色沉淀。19h后，取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)沒有完成。存在大部分原料。加熱反應(yīng)物至80℃保持6h。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。然后過濾漿狀物，然后真空除去溶劑，得到黃色油(0.078g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過BiotageFlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到5-氟-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺無定形白色固體(0.0061g，2.8％)。
質(zhì)譜(-ESI)374(M-H)-。
實(shí)施例265-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]噻吩-2-磺酰胺 A.碘化(3，3，3-三氟丙基)-三苯基鏻在23℃下，向1-碘-3，3，3-三氟丙烷(19.3g，86.1mmol)的甲苯(50mL)溶液中加入三苯基膦(25.8g，98.5mmol)。使反應(yīng)混合物升溫至回流，并攪拌28h。在冰浴中將得到的混合物冷卻至0℃，然后過濾，收集白色固體產(chǎn)物。該產(chǎn)物用甲苯洗滌(3×)，然后風(fēng)干，得到純產(chǎn)物(33.4g，80％)，為白色固體。
B. 4，4，4-三氟-2-(三苯基-l5-亞磷烷基(phosphanylidene))-丁酸乙酯在-78℃、氮?dú)庀拢ㄟ^加料漏斗向碘化(3，3，3-三氟丙基)-三苯基鏻(23.5g，48.4mmol)的THF(100mL)懸浮液中緩慢加入二(三甲基甲硅烷基)氨基化鉀(0.5M的甲苯溶液，175mL)溶液。在-78℃下，攪拌得到的混合物45min，隨后滴加入氯代甲酸乙酯(純，5.0mL)。然后在攪拌下，使該反應(yīng)混合物在3h內(nèi)升溫至-20℃。然后傾入鹽水(100mL)中猝滅反應(yīng)，然后用乙酸乙酯(100mL×2)萃取。干燥(Na2SO4)有機(jī)萃取液，然后減壓濃縮。通過硅膠柱(120g)用乙酸乙酯-己烷(0-100％)快速層析，得到淺黃色固體產(chǎn)物。用Et2O重結(jié)晶該物質(zhì)，得到純產(chǎn)物(6.7g，32％)，為白色固體。質(zhì)譜(+ESI)431[M+H]+C. 4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)-丁-2-烯酸乙酯向4，4，4-三氟-2-(三苯基-λ5-亞磷烷基)-丁酸乙酯(2.0g，4.65mmol)的THF(5mL)溶液中加入1mL三氟乙醛水合物(tech.)。將該混合物密封在壓力管中，然后在100℃下加熱3.5h。冷卻至23℃后，反應(yīng)混合物通過硅膠(100g)和Na2SO4墊用Et2O(100mL)洗脫，除去副產(chǎn)物氧化三苯基膦和水。蒸餾洗脫液除去Et2O，得到無色液體產(chǎn)物(1.0g，86％)。
D. 4，4，4-三氟-2-(2，2,2-三氟乙基)-丁酸乙酯在25℃下，用Pd/C(2.5g，5％)和H2(1大氣壓)處理4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)-丁-2-烯酸乙酯(5.0g，20.0mmol)的THF(20mL)溶液17h。通過Celite試劑墊過濾反應(yīng)混合物，用Et2O(50mL)沖洗，然后蒸餾濾液，除去Et2O和THF，得到無色液體產(chǎn)物(5.0g，99％)。
E. 4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)-丁-1-醇在25℃下，向LAH(1.0g)的Et2O(100mL)懸浮液中緩慢加入4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)-丁酸乙酯(5.0g，19.8mmol)?；亓飨聰嚢璧玫降幕旌衔?h。冷卻后的反應(yīng)混合物依次用水(1.0mL)、15％NaOH水溶液(1.0mL)和水(3.0mL)猝滅。在25℃下，攪拌得到的混合物17h后，加入Na2SO4(20g)。然后在25℃下繼續(xù)攪拌1h。通過Celite試劑和Na2SO4墊過濾得到的懸浮液。蒸餾濾液，除去所有溶劑，得到需要的產(chǎn)物(1.7g，41％)，為無色液體。質(zhì)譜(-ESI)269[M+OAc]-F. 4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟-乙基)-丁醛在氮?dú)狻?℃下，攪拌4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)丁-1-醇(1.5g，7.14mmol)的水飽和CH2Cl2(30mL)溶液。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(6.35g，14.99mmol)。在25℃下，攪拌得到的懸浮液，通過TLC分析(1∶2 EtOAc/己烷)監(jiān)測反應(yīng)進(jìn)程。當(dāng)原料的轉(zhuǎn)化率減小時(shí)，再加入一批2mL的水飽和CH2Cl2溶液(15min內(nèi)，三批)。在25℃下、19h后，TLC表明反應(yīng)完成。溶液用Et2O(50mL)稀釋，并加入硫代硫酸鈉Na2S2O3(73.33mmol，11.6g，11當(dāng)量)的80％飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)的溶液?？焖贁嚢柙摶旌衔?0min直至兩相澄清。分離各層，然后水相用乙醚(30mL)萃取。合并的有機(jī)層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮至其原體積的50％，得到4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟-乙基)-丁醛溶液(20mL)。質(zhì)譜(+ESI)(M+H)+。
G. 5-(3，3，3-三氟-1-(2，2，2-三氟乙基)丙基)咪唑烷-2，4-二酮向氰化納(0.425g，8.65mmol)和碳酸銨(0.9g，11.54mmol)的H2O(30mL)溶液中加入4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)丁醛(0.6g，2.88mmol)的乙醇(30mL)溶液。加熱該黑色反應(yīng)混合物至90℃。1h后，混合物變均勻，然后在90℃下攪拌18h。冷卻至25℃后，真空除去約40mL溶劑。加入濃HCl(4mL)酸化混合物至pH 1-2，沉淀形成。過濾。母液用EtOAc(3×50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到棕色油狀5-(3，3，3-三氟-1-(2，2，2-三氟乙基)丙基)咪唑烷-2，4-二酮(1.01g，100％)。質(zhì)譜(+ESI)279，280(M+H)+。
H. 5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸將5-(3，3，3-三氟-1-(2，2，2-三氟乙基)丙基)咪唑烷-2，4-二酮(1.0g，3.59mmol)溶于10mL NaOH水溶液(0.575g溶于10mL H2O中，14.38mmol)。將該溶液分裝于2個(gè)用于微波技術(shù)的特殊容器中。在密閉的容器中，用微波加熱溶液1h。微波條件在150℃、50psi下、約100％功率15min，然后停止5min，0％功率。重復(fù)進(jìn)行該順序直至反應(yīng)完成。真空除去反應(yīng)混合物中的水和氨，得到粗5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸(0.92g，100％)和NaOH混合物，在下一步反應(yīng)中使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。
質(zhì)譜(+ESI)254(M+H)+。
I. N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸將粗5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸(0.92g，3.56mmol)和NaOH混合物溶于水(10ml)。在冰浴中冷卻該混合物至0℃。將5-氯噻吩-2磺酰氯(0.852g，3.9mmol)溶于THF(10mL)，然后在10min內(nèi)滴加至反應(yīng)混合物中。60min后，使反應(yīng)混合物逐步升溫至25℃，然后攪拌16h。真空除去THF，然后用1N HCl酸化混合物至pH＜2。15min后，沉淀開始從乳白色混合物中析出。60min后，將混合物在冰箱中冷卻45min，然后過濾。沉淀用1N HCl(10mL)洗滌，得到粘性白色固體并取出。將其溶于EtOAc(100mL)。水層用EtOAc(3×50mL)洗滌，然后有機(jī)層用飽和NaCl水溶液(50mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到棕色油狀N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸(1.3g，86.3％)。
質(zhì)譜(+ESI)434(M+H)+。
J. N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸甲酯在0℃下、10min內(nèi)，向N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸(1.3g，5.23mmol)的CH2Cl2∶MeOH(4∶1)溶液中滴加TMSCHN2(6mL，12mmol)直至氖黃色保持。滴加結(jié)束后，使反應(yīng)混合物升溫至25℃保持19h。真空除去溶劑，得到N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸甲酯(0.5g，37.31％)。質(zhì)譜(-ESI)445(M-H)-。
K. 5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)夥铡?℃下，向N-[(5-氯噻吩-2-基)磺?；鵠-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-dl-正纈氨酸甲酯(0.5g，1.11mmol)的THF(10mL)溶液中加入LiBH4(2.28mL，4.46mmol)。使反應(yīng)升溫至25℃保持19h。將反應(yīng)冷卻至0℃，然后用2N HCl(緩慢加入)猝滅，用乙醚(40mL)稀釋，有機(jī)層依次用1N鹽酸(10mL)、飽和NaHCO3水溶液(10mL)和鹽水(15mL)洗滌，然后經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(0.362g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM12色譜系統(tǒng)純化，得到無色油狀5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]噻吩-2-磺酰胺(0.001g，2.36％)。質(zhì)譜(-ESI)418(M-H)-。
實(shí)施例275-氯-N-[(1S)-(4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基)]噻吩-2-磺酰胺 A. 4-甲基-N-[(1Z)-4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)亞丁基)苯亞磺酰胺向4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)丁醛(按實(shí)施例26第F部分制備，0.6g，2.88mmol)的乙醚(5mL)溶液粗有機(jī)萃取液中加入乙醇鈦(IV)(2.63g，11.54mmol)，隨后加入(S)-(+)-甲苯亞磺酰胺(0.537g，3.46mmol)，然后加熱該溶液至回流5h。然后冷卻混合物至0℃，然后加入水(35mL)沉淀鈦鹽。通過Celite試劑墊過濾懸浮液，濾餅用CH2Cl2洗滌。分離濾液層，然后水層用CH2Cl2萃取。合并的有機(jī)萃取液用Na2SO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗黃色油(1.05g)。該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶9通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到黃色油狀4-甲基-N-[(1Z)-4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)亞丁基]苯亞磺酰胺(0.41g，41.2％)。質(zhì)譜(-ESI)344(M-H)-。
B. 4-甲基-N-[(1S)-4，4，4-三氟1-異氰基-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]苯亞磺酰亞胺在0℃下，向氰化二乙基鋁(0.223mL，1.73mmol)的THF(10mL)溶液加入異丙基醇(76mg，1.27mmol)。15min后，將該溶液加入-78℃下的4-甲基-N-[(1Z)-4，4，4-三氟-2-(2，2，2-三氟乙基)亞丁基]苯磺酰胺(0.4g，1.158mmol)的THF(10mL)溶液中。15min后，使該反應(yīng)混合物升溫至25℃。5h后，TLC(1∶4 EtOAc-己烷)表明原料反應(yīng)完。冷卻混合物至-78℃，然后加入飽和NH4Cl水溶液(30mL)。通過Celite試劑墊過濾所得懸浮液，濾墊用EtOAc(2×50mL)洗滌。分離濾液層，然后水層用EtOAc萃取。合并的有機(jī)萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗油(0.360g)。
該粗產(chǎn)物用洗脫液EtOAc-己烷1∶6通過Biotage FlashTM40色譜系統(tǒng)純化，得到4-甲基-N-[(1S)-4，4，4-三氟-1-異氰基-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]苯亞磺酰亞胺(0.065g，15.18％)，為無色油狀物。
質(zhì)譜(-ESI)371(M-H)-。
C. 5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-L-正纈氨酸將4-甲基-N-[(1S)-4，4，4-三氟-1-異氰基-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]苯亞磺酰亞胺(0.065g，0.170mmol)的濃HCl(10mL)溶液加熱至100℃保持19h。將混合物冷卻至25℃后，用乙醚洗滌幾次。真空濃縮水層，得到5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-L-正纈氨酸、NH4Cl和4-甲基苯亞磺酸的混合物(0.045g，100％)。該粗氨基酸在下一步驟使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。質(zhì)譜(+ESI)255(M+H)+。
D.(2S)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)戊-1-醇在0℃下，向LiBH4(0.35mL，0.71mmol)的THF(5mL)溶液中加入氯代三甲基硅烷(0.112mL，0.885mmol)。將該反應(yīng)混合物升溫至25℃，30min后，滴加至0℃下的粗5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)-L-正纈氨酸鹽酸鹽(0.045g，0.177mmol)的THF(1mL)懸浮液中。使混合物升溫至25℃，21h后，用MeOH猝滅。真空除去揮發(fā)物，得到殘余物，將它溶于1N NaOH水溶液(5mL)，然后用CH2Cl2(4×10mL)萃取。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗(2S)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)戊-1-醇(0.046g，100％)，為淺黃色油狀物。該粗氨基醇在下一步驟使用時(shí)無需進(jìn)一步純化。
質(zhì)譜(+ESI)240(M+H)+。
E. 5-氯-N-[(1S)-(4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基)]噻吩-2-磺酰胺將5-氯噻吩-2-磺酰氯(0.193g，0.654mmol)的CH2Cl2(1.0mL)溶液滴加(5min)至0℃下的(2S)-2-氨基-5，5，5-三氟-3-(2，2，2-三氟乙基)戊-1-醇(0.042g，0.175mmol)的CH2Cl2(1.0mL)和吡啶(0.1mL，1.09mmol)溶液中。使該溶液升溫至25℃過夜(19h)。取等分試樣，TLC(EtOAc-己烷1∶2)表明反應(yīng)完成。用CH2Cl2(10mL)稀釋，然后有機(jī)層用1N HCl(2×5mL)、飽和NaCl水溶液(5mL)洗滌。有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥，過濾，然后濃縮，得到粗灰白色固體(0.014g)。粗產(chǎn)物通過BiotageFlashTM12色譜系統(tǒng)純化，洗脫液EtOAc-己烷1∶4，得到5-氯-N-[(1S)-(4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基)]噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.003g，4.1％)。質(zhì)譜(+ESI)420(M+H)+。
實(shí)施例284，5-二氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A. 3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺在25℃下，將硼氫化鋰溶液(2M THF，19.8mL)加入按(J.MedChem.1981，24，1043-1047)所述方法制備的2-氨基-4，4，4-三氟-3-三氟甲基-丁酸乙酯(5g，19.8mmol)的THF(80mL)溶液中，然后攪拌4h。非常小心地將2M HCl加入該反應(yīng)混合物中直至pH小于2。真空除去有機(jī)溶劑，然后水層用飽和NaHCO3中和直至pH＝7。水層用EtOAc(2×50mL)萃取，然后有機(jī)萃取液經(jīng)Na2SO4干燥，濃縮，得到黃色油狀3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(3.2g，77％收率)。該粗油具有足夠的純度可在隨后的反應(yīng)中使用。
B. 4，5-二氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，攪拌3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(0.192g，0.9mmol)的THF(1mL)溶液。加入吡啶(0.147mL，1.82mmol)，隨后加入4，5-二氯噻吩-2-磺酰氯(0.226g，0.391mmol)的THF(1mL)溶液，然后在25℃下攪拌得到的溶液18h。濃縮后，將殘余物溶于EtOAc(15mL)，然后用1N鹽酸(10mL)、鹽水(10mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，粗產(chǎn)物通過制備型TLC純化，洗脫液EtOAc∶己烷 30∶70，得到4，5-二氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.037g，9％收率，外消旋混合物)。質(zhì)譜(-ESI)423.9(M-H)-。
實(shí)施例29N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺 在氮?dú)狻?5℃下，攪拌(1S)-3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(按實(shí)施例13方法制備，0.100g，0.4mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液。加入吡啶(0.097mL，1.2mmol)，隨后加入3-噻吩磺酰氯(0.072g，0.4mmol)的CH2Cl2(0.5ml)溶液，然后在25℃下攪拌得到的溶液18h。將粗反應(yīng)混合物裝填在TsOH SyntageTMsamplet上，濃縮后通過Biotage FlashTM12色譜系統(tǒng)純化，洗脫液EtOAc∶己烷30∶70，得到N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺白色固體(0.053g，35％收率)。
質(zhì)譜(-ESI)355.9(M-H)-。
分析C9H8ClF6NO3S2計(jì)算值 C，30.25；H，2.54；N，3.92；實(shí)測值 C，30.55；H，2.27；N，3.77。
實(shí)施例302，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺 除了使用2，5--二氯噻吩-3-磺酰氯外，其余按照實(shí)施例29中所述方法，得到2，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺白色固體(0.026g，17％收率)。
質(zhì)譜(-ESI)423.8(M-H)-。
實(shí)施例31N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 除了使用2-噻吩磺酰氯外，其余按照實(shí)施例29中所述方法，得到N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.024g，17％收率)。質(zhì)譜(-ESI)355.9(M-H)-。
實(shí)施例324，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 除了使用4，5-二氯噻吩-2-磺酰氯外，其余按照實(shí)施例29中所述方法，得到4，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺白色固體(0.050g，29％收率)。
質(zhì)譜(-ESI)423.8(M-H)-。
實(shí)施例33N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-2-三氟甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺
向3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(按實(shí)施例28第A部分方法制備，105mg，0.5mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入吡啶(100μL)和2-噻吩磺酰氯(90.5mg，0.5mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液。在25℃下，攪拌該溶液約8h至約16h，然后濃縮。加入EtOAc(1mL)，然后溶液用1M HCl(1mL)、鹽水(1mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，然后濃縮。粗產(chǎn)物通過Biotage FlashTM12色譜系統(tǒng)純化，用EtOAc/己烷(2∶3)洗脫，得到N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-2-三氟甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺白色固體(26.5mg)。
按實(shí)施例33中所述方法，用2-噻吩磺酰氯、3-噻吩磺酰氯和2，5-二氯噻吩-3-磺酰氯制備以下化合物(實(shí)施例33-35，表1)。
表1 (LCMS數(shù)據(jù)*分子離子和保留時(shí)間)
*Hewlett Packard系列1100HPLC/MS，Luna C18 2×30mm柱，洗脫梯度3分鐘內(nèi)，40％乙腈/水(0.1％HCOOH)至100％乙腈(0.1％HCCOH)，流速0.6mL/min。
實(shí)施例36二溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 向3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-(羥甲基)丙胺(按實(shí)施例28第A部分方法制備，105mg，0.5mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入吡啶(100μL)和4，5-二溴噻吩-2-磺酰氯(170mg，0.5mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液。在25℃下，攪拌該溶液約8h至約16h，然后濃縮。加入EtOAc(1mL)，然后溶液用1M HCl(1mL)、鹽水(1mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥，然后濃縮。將粗固體溶于DMSO(0.5mL)，并通過反相HPLC(GilsonHPLC儀，LunaC18 100×30mm柱，洗脫梯度15min內(nèi)，40％乙腈/水(0.075％TFA)至100％乙腈(0.075％TFA)，流速20mL/min)純化，得到標(biāo)題化合物(13.8mg)白色固體。
按照實(shí)施例36中所述方法，用4，5-二溴噻吩-2-磺酰氯、2-溴-5-氯噻吩-2-磺酰氯、3-溴-2，5-二氯噻吩-3-磺酰氯和苯并噻吩-2-磺酰氯制備以下化合物(實(shí)施例36-39，表2)。

表2 (LCMS數(shù)據(jù)*分子離子和保留時(shí)間)
*Hewlett Packard系列1100HPLC/MS，Luna C182×30mm柱，洗脫梯度3分鐘內(nèi)40％乙腈/水(0.1％HCOOH)至100％乙腈(0.1％HCCOH)，流速0.6mL/min。
實(shí)施例40氯-N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺
A.2-氨基-4，4，4-三氟-丁-1-醇在25℃下，將三甲基氯硅烷(1.38g，12.73mmol)溶液加入硼氫化鋰(3.2mL，2.0M THF溶液)的THF(5mL)溶液中。攪拌5min后，在5min內(nèi)分批加入2-氨基-4，4，4-三氟-丁酸(0.50g，3.18mmol)。攪拌反應(yīng)物48h。小心滴加MeOH(5mL)來猝滅反應(yīng)。蒸發(fā)溶劑，殘余物用氫氧化鉀(KOH)溶液(20％，6mL)處理。水相用二氯甲烷萃取3次(每次10mL)。合并有機(jī)相，然后經(jīng)無水硫酸鈉干燥。過濾后，蒸發(fā)溶劑，得到油狀2-氨基-4，4，4-三氟-丁-1-醇(0.174g，38％)。該油直接在下一步反應(yīng)中使用無需進(jìn)一步純化。
B.5-氯-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?5℃下，向2-氨基-4，4，4-三氟-丁-1-醇(0.161g，1.12mmol)的無水CH2Cl2(4mL)溶液中滴加入Et3N(0.17mL，1.23mmol)，隨后滴加入5-氯噻吩-2-磺酰氯(0.243g，1.12mmol)的二氯甲烷(1mL)溶液。在25℃下攪拌反應(yīng)物18h。將其傾入含有飽和NaHCO3溶液的分液漏斗中猝滅反應(yīng)。再加入CH2Cl2(15mL)。萃取后，有機(jī)層用1NHCl溶液、蒸餾水和鹽水洗滌。然后有機(jī)相經(jīng)MgSO4干燥，然后濃縮至粗固體。濃縮后，該粗產(chǎn)物通過快速層析純化，洗脫液己烷∶EtOAc，4∶1至2∶1，得到5-氯-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺(0.191g，53％)，為澄清油狀物，真空下結(jié)晶，質(zhì)譜(-ESI)321.9(M-H)-。
分析C8H9ClF3NO3S2計(jì)算值 C，29.68；H，2.80；N，4.33；實(shí)測值 C，29.75；H，2.72；N，4.10。
實(shí)施例415-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-[(1R)-1-羥乙基]-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺 A.5-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(甲酰基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(羥甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺(按實(shí)施例5制備，0.200g，0.511mmol)的CH2Cl2(10mL)溶液。一次性加入Dess-Martin過碘烷試劑(0.325g，0.767mmol)，然后在0℃下攪拌該溶液1h。在25℃下，再攪拌1h后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。溶液用Et2O(100mL)稀釋，然后向該溶液中加入Na2S2O3(1.10g)的飽和NaHCO3水溶液(10mL)的溶液。攪拌得到的混合物0.5h。分離液層，然后有機(jī)層再用飽和NaHCO3水溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，得到的殘余物(0.190g，95％)直接在下一步反應(yīng)中使用無需進(jìn)一步純化。
B.5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-[(1R)-1-羥乙基]-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺在氮?dú)狻?℃下，攪拌5-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(甲?；?丙基]噻吩-2-磺酰胺(0.188g，0.482mmol)的THF(5mL)溶液。滴加入甲基溴化鎂(0.482mL，3.0M的Et2O溶液)，在25℃下攪拌得到的溶液2h。然后，通過TLC(EtOAc∶PE 30∶70)確認(rèn)反應(yīng)完成。溶液用飽和NH4Cl水溶液(10mL)猝滅，然后用Et2O(100mL)萃取。有機(jī)層用鹽水(10mL)洗滌，然后干燥(Na2SO4)。濃縮后，粗產(chǎn)物通過制備板層析純化，洗脫液EtOAc∶PE 30∶70，隨后通過手性HPLC[ChiralcelOJ柱；2×25cm，254nm，0.6mL進(jìn)樣；流動(dòng)相10mL/min10％EtOH/7200；第一峰為產(chǎn)物，Rf＝6.106，99.9％純度]純化，得到主要的非對(duì)映體5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1- [(1R)-1-羥乙基]-2-(三氟甲基)-丙基]噻吩-2-磺酰胺灰白色固體(0.043g，22％)。
質(zhì)譜(-ESI)404(M-H)-。
分析C10H10ClF6NO3S2計(jì)算值 C，29.60；H，2.48；N，3.45。
實(shí)測值 C，29.59；H，2.40；N，3.41。
實(shí)施例42Aβ40/42酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)試驗(yàn)A.該試驗(yàn)簡述在細(xì)胞培養(yǎng)基中，用DMSO貯備液將化合物稀釋至2μM以及2μM以下。然后將化合物施用于帶有APP-REP-NL質(zhì)粒的CHO細(xì)胞[Sudhir等，J.Biolog.Chem.26725602-25608(1992)]22小時(shí)。該條件作用期后，收集培養(yǎng)基，用含蛋白的測定緩沖液稀釋，然后在制備ELISA板上溫育樣品、對(duì)照品及合成肽標(biāo)準(zhǔn)品。使用具有特異性直接抗β淀粉樣蛋白40或42羧基末端的抗體的夾心ELISA[與Haugabook等，J.Neurosci.Methods 108171-179(2001)報(bào)告的方法類似，但使用山羊抗小鼠IgGl(來源Southern Biotech)作錨鉤，6E10作捕捉抗體(來源SENETEK)、兔抗Aβ40和抗Aβ42(來源QCB)及APL-驢抗兔IgG(H+L，來源Southern Biotech)作檢查抗體]，將化合物處理細(xì)胞生成細(xì)胞外β淀粉樣蛋白的效果定量。隨后將經(jīng)化合物處理的細(xì)胞在含MTS-甲膚的細(xì)胞培養(yǎng)基中溫育。短暫溫育后，在分光光度計(jì)上閱讀含有MTS/培養(yǎng)基的板，以確定化合物毒性影響細(xì)胞代謝和合成β淀粉樣蛋白能力的程度。
B.試驗(yàn)材料(i)試樣化合物樣品以20mM貯備溶液提供，用100％DMSO溶液制備。
(ii)APP-REP-NL細(xì)胞用1∶100稀釋液使合格細(xì)胞系按星期傳代(carried)，并在用1×抗生素/抗霉菌劑、200μg/ml G418抗生素以及10％合格胎牛血清補(bǔ)加的DMEM中培養(yǎng)。細(xì)胞還用液氮貯存。定期評(píng)價(jià)β淀粉樣蛋白生成，細(xì)胞保存在培養(yǎng)基中，或用完全表達(dá)的祖細(xì)胞(progenitors)替換。
(iii)抗體來自合格批號(hào)，在本試驗(yàn)中證明合格。將抗體在-80℃下以小等分試樣冷凍保存，使用時(shí)解凍。
(iv)試劑具備現(xiàn)有的最高質(zhì)量。某些試劑為“特定批”，且只可使用來自那個(gè)特定制造商的試劑和批。
(v)塑料制品具備現(xiàn)有的最高質(zhì)量。
C.活性標(biāo)準(zhǔn)如果化合物減少Aβ40的EC50＜100μM，并且在EC50附近的劑量下無毒性，可認(rèn)為化合物有活性。
D.標(biāo)準(zhǔn)β淀粉樣蛋白抑制劑按WO 98/22494中所述方法制備參比γ分泌酶(secretase)抑制劑DAPT(LY374973、AN37124Dovey H.F.等，J.Neurochem.76173-181(2001))，在Ab40/42 ELISA中測試，得到Aβ40EC50＝171nM和Aβ42EC50＝128nM。
實(shí)施例43阻抑蛋白釋放試驗(yàn)(RRA)根據(jù)[Shuey，D.J.，Sheiffele，P.，Jones，D.，Cockett，M.I.和Quinet，E.M.(1999)，"Repressor releasea useful tool for monitoring amyloidprecursor protein(APP)proteolysis in mammalian cells"(阻抑蛋白釋放用于監(jiān)測哺乳動(dòng)物細(xì)胞中淀粉樣蛋白前體蛋白(APP)蛋白水解的有用工具)，Society for Neuroscience Abstracts，第25卷，第29屆神經(jīng)科學(xué)學(xué)會(huì)年度大會(huì)，Miami Beach，F(xiàn)lorida，1999年10月23-28日]公布的技術(shù)，用RRA測試按以上實(shí)施例中所述方法生成的化合物。簡而言之，該試驗(yàn)按如下方法進(jìn)行。
A.細(xì)胞培養(yǎng)在37℃、5％ CO2下，在完全DMEM培養(yǎng)基(DMEM-高濃度葡萄糖及10％胎牛血清、1％非必需氨基酸和1％青霉素-鏈霉素)中培養(yǎng)CHO-K1細(xì)胞。在轉(zhuǎn)染前24hr，將2百萬細(xì)胞置于10-cm皿中。
按Gibco BRL推薦的方法，用他們的Lipofectamine Plus系統(tǒng)完成瞬時(shí)轉(zhuǎn)染。首先，將構(gòu)建DNA的6μg pRSVO-1uc和6μg APP-1acI加入到460μL Opti-Mem轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中，然后和30μL Plus試劑一起溫育15分鐘。然后將40μL Lipofectamine Plus試劑和460μLOpti-Mem轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基的脂質(zhì)混合物與DNA-Plus試劑混合物一起溫育15分鐘。DNA-脂質(zhì)溫育期間，洗滌CHO-Kl細(xì)胞一次，用5.0mL無青霉素-鏈霉素的DMEM培養(yǎng)基覆蓋。然后將該DNA-脂質(zhì)制劑分層鋪在這些細(xì)胞上，并在37℃下溫育過夜。
將150萬轉(zhuǎn)染細(xì)胞/孔(總體積100μL)置于無菌、不透明的Packard96孔Cultur-PlatesTM中的澄清DMEM完全培養(yǎng)基(DMEM-無酚紅)中，并在37℃、5％ CO2下溫育3-5小時(shí)。
B.化合物稀釋用兩個(gè)不同方案稀釋化合物；一個(gè)方案用于提供純的化合物(小瓶中稱重粉末)，另一個(gè)方案用于以溶液提供化合物(在96孔板中，20mM的DMSO溶液)。對(duì)于兩個(gè)方案，新鮮制備25mM Hepes和25mMHepes/l％DMSO，作為稀釋液使用。在所有的試驗(yàn)板中，Hepes/DMSO均作為對(duì)照稀釋液使用。
下表描述的是稀釋化合物的步驟(請(qǐng)注意最后步驟為將化合物加至組織培養(yǎng)板中的細(xì)胞/培養(yǎng)基)表3
因?yàn)槟承┗衔镆?0mM加至96孔格式中，以下代表它們的稀釋方案(注意用這些化合物的平均分子量計(jì)算這些稀釋度，且如上所述最后步驟為在組織培養(yǎng)板中將化合物加入細(xì)胞/培養(yǎng)基)
表4
一旦化合物稀釋，將它們一式二份施用于組織培養(yǎng)板中的細(xì)胞(制備如上)。在37℃、5％ CO2下，使細(xì)胞和化合物一起再溫育36-48小時(shí)。
C.測定進(jìn)行螢光素酶測定(LucLite試劑，Packard)，然后在PackardTopCount儀器上讀數(shù)。從每個(gè)96孔板中除去培養(yǎng)基，且用100μLPBS/孔(有Mg2+和Ca2+)替換。向各孔中加入等體積(100μL)LucLite溶胞/底物緩沖液，然后密封這些板，在暗處、室溫下，在旋轉(zhuǎn)震動(dòng)器上混合約15至約30分鐘。然后在TopCount儀器上讀取螢光素酶讀數(shù)。測定以相對(duì)光單位(RLU)表示，且用MS Excel程序計(jì)算和分析如下。
D.數(shù)據(jù)分析有關(guān)本文中例舉化合物的測定結(jié)果見下表。如果化合物在20μg/mL下導(dǎo)致螢光素酶活性至少增加1.5倍且無毒性，則認(rèn)為化合物在RRA中有活性，通過信號(hào)損失確定(≤0.75倍增加)。增加倍數(shù)為螢光素酶活性(測量的相對(duì)光單位)比稀釋對(duì)照的量。SEM代表平均增加倍數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)誤差(未顯示)。發(fā)現(xiàn)所有測試化合物均無毒性。
E.標(biāo)準(zhǔn)β淀粉樣蛋白抑制劑按國際專利公布號(hào)WO 98/22494所述方法制備參比γ分泌酶抑制劑DAPT(LY374973，AN37124Dovey，H.F等，J.Neurochem.76173-181(2001))，且在20μg/mL在RRA中測試，表明螢光素酶活性增加18.5-28.1倍。
表5-本發(fā)明示例性化合物
*APPI增加的倍數(shù)，所有化合物均在20μg/mL測試。
本說明書中引用的所有出版物通過引用結(jié)合到本文中。雖然根據(jù)特別優(yōu)選的實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了描述，但將認(rèn)識(shí)到可進(jìn)行各種修改而不偏離本發(fā)明的宗旨。這類修改將落入權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或前體藥物 其中T選自CHO、COR8和C(OH)R1R2；R1和R2獨(dú)立選自氫、低級(jí)烷基、取代低級(jí)烷基、CF3、烯基、取代烯基、炔基和取代炔基；R3選自氫、低級(jí)烷基和取代低級(jí)烷基；R4選自(CF3)n烷基、(CF3)n(取代烷基)、(CF3)n烷基苯基、(CF3)n烷基(取代苯基)和(F)n環(huán)烷基；n＝1-3；R5選自氫、鹵素、CF3、Y＝C時(shí)稠合至Y的二烯和Y＝C時(shí)稠合至Y的取代二烯；W、Y和Z獨(dú)立選自C、CR6和N，條件是W、Y或Z中的至少一個(gè)必須為C；R6選自氫、鹵素、低級(jí)烷基和取代低級(jí)烷基；X選自O(shè)、S、SO2和NR7；R7選自氫、低級(jí)烷基、取代低級(jí)烷基、芐基、取代芐基、苯基和取代苯基；和R8選自低級(jí)烷基、CF3、苯基和取代苯基。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R5為鹵素。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中R5為氯、溴或氟。
4.權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)的化合物，其中R1和R2各自為氫。
5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中W為C，且Z為CR6。
6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的化合物，其中X為S，且W、Y和Z獨(dú)立選自C或CR6，條件是W、Y或Z中的一個(gè)為C。
7.權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)的化合物，其中R4選自S-立體化學(xué)的(CF3)n低級(jí)烷基、(CF3)n(取代低級(jí)烷基)、(CF3)n低級(jí)烷基苯基和(CF3)n低級(jí)烷基(取代苯基)。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中X為S，W為C，Y為CH，Z為CH，R5為氯，R4為CF3CH2CHCH3，R3、R1和R2各自為氫，所述化合物具有1S、2R立體化學(xué)。
9.權(quán)利要求1的化合物，其中X為S，W為C，Y為CH，Z為CH，R5為氯，R4為CF3CHCF3，R3、R1和R2各自為氫，所述化合物具有1S立體化學(xué)。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中W為N，且X為NR7。
11.權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或前體藥物，所述化合物選自1)5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺；2)5-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺；3)5′-氯-N-[(1S，2R)-2-乙基，4，4，4-三氟-1-(1-羥乙基)丁基]噻吩-2′-磺酰胺；4)5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺；5)5′-氯-N-[3，3，3-三氟-2-(三氟甲基)-1-S-(羥甲基)丙基]噻吩-2′-磺酰胺；6)5-氯-N-[(1R，2S)-2-乙基-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺；7)5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)丁基]噻吩-2-磺酰胺；8)5-氯-N-{(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-[(1S)-1-羥乙基]-2-甲基丁基}噻吩-2-磺酰胺；9)5-氯-N-{(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-[(1R)-1-羥乙基]-2-甲基丁基}噻吩-2-磺酰胺；10)5-氯-N-[(1S，2S)-4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺；11)(2S，3S)-2-(5-氯-3-甲基苯并[b]噻吩-2-磺酰基)-酰氨基-5，5，5-三氟-3-乙基-戊-1-醇；12)(2S，3R)-2-(5-氯-1，3-二甲基-1H-吡唑-4-磺?；?-酰氨基-5，5，5-三氟-3-苯基-戊-1-醇；13)5-氯-N-[1-(4，4-二氟環(huán)己基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺；14)5-氯-N-[1-(6，6-二氟雙環(huán)[3.1.0]己-3-基)-2-羥乙基]噻吩-2-磺酰胺；15)5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-甲酰基-2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺；16)N-[(1S，2R)-1-乙?；?4，4，4-三氟-2-甲基丁基]-5-氯噻吩-2-磺酰胺；17)5-氯-N-[(1S，2R)-4，4，4-三氟-1-(1-羥基-1-甲基乙基)2-甲基丁基]噻吩-2-磺酰胺；18)4-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；19)4-溴-5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；20)5-氯4-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；21)5-溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；22)5-氟-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；23)5-溴-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；24)5-氟-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；25)5-氯-N-[4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基]噻吩-2-磺酰胺；26)5-氯-N-[(1S)-(4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基)]噻吩-2-磺酰胺；27)4，5-二氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；28)N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺；29)2，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-3-磺酰胺；30)N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；31)4，5-二氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；32)N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-2-三氟甲基-丙基)噻吩-2-磺酰胺；33)N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-2-三氟甲基-丙基)噻吩-3-磺酰胺；34)2，5-二氯-N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-2-三氟甲基-丙基)噻吩-3-磺酰胺；35)4，5-二溴-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；36)3-溴-5-氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；37)4-溴-2，5-二氯-N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺；38)N-[3，3，3-三氟-1-(羥甲基)-2-(三氟甲基)丙基]苯并[b]噻吩-2-磺酰胺；39)5-氯-N-(3，3，3-三氟-1-羥甲基-丙基)-噻吩-2-磺酰胺；和40)5-氯-N-[(1S)-3，3，3-三氟-1-[(1R)-1-羥乙基]-2-(三氟甲基)丙基]噻吩-2-磺酰胺。
12.權(quán)利要求1的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽、水合物或前體藥物，所述化合物為5-氯-N-[(1S)-(4，4，4-三氟-1-(羥甲基)-2-(2，2，2-三氟乙基)丁基)]噻吩-2-磺酰胺。
13.權(quán)利要求1的化合物，其中X為O，且W、Y和Z獨(dú)立選自C和CR6，條件是W、Y或Z中的一個(gè)為C。
14.權(quán)利要求13的化合物，其中R5為鹵素，R4選自S-立體化學(xué)的(CF3)n低級(jí)烷基、(CF3)n(取代低級(jí)烷基)、(CF3)n低級(jí)烷基苯基、(CF3)n低級(jí)烷基(取代苯基)，且R3、R1和R2均為H。
15.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為(F)n環(huán)烷基。
16.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為(CF3)n烷基。
17.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1為CH3，R2為H，R3為H，且R4為(CF3)n烷基。
18.權(quán)利要求1的化合物，其中T為CHO，R3為H，且R4為(CF3)n烷基。
19.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為S-立體化學(xué)的(CF3)2CH。
20.權(quán)利要求1的化合物，其中T為CHO，R3為H，且R4為S-立體化學(xué)的CH(CH3)CH2CF3。
21.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(O)R8，R3為H，R4為S-立體化學(xué)的CH(CH3)CH2CF3，且R8為CH3。
22.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為S-立體化學(xué)的CH(CH2CF3)2。
23.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為S-立體化學(xué)的CH(CH3)CH2CF3。
24.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1為CH3，R2和R3為H，且R4為S-立體化學(xué)的CH(CF3)2。
25.權(quán)利要求1的化合物，其中T為C(OH)R1R2，R1、R2和R3為H，且R4為(F)n環(huán)烷基。
26.權(quán)利要求1的化合物，其中所述藥學(xué)上可接受的鹽選自有機(jī)酸鹽、無機(jī)酸鹽、堿鹽及其混合物。
27.權(quán)利要求26的化合物，其中所述有機(jī)酸鹽和無機(jī)酸鹽選自乙酸、乳酸、檸檬酸、酒石酸、琥珀酸、富馬酸、馬來酸、丙二酸、扁桃酸、蘋果酸、鹽酸、氫溴酸、磷酸、硝酸、硫酸、甲磺酸、甲苯磺酸及其混合物。
28.權(quán)利要求26的化合物，其中所述堿鹽選自氫氧化鈉、氫氧化鋰和氫氧化鉀及其混合物。
29.一種藥用組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物和生理上相容的載體。
30.一種藥用組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)化合物的前體藥物和生理上相容的載體。
31.一種抑制患者β3淀粉樣蛋白生成的方法，所述方法包括釋放權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求29或30的藥用組合物的步驟。
32.權(quán)利要求31的方法，其中所述化合物經(jīng)口、通過注射或吸入釋放。
33.一種治療患者疾病的方法，所述疾病選自阿爾茨海默病、淀粉樣蛋白血管病、腦淀粉樣蛋白血管病、系統(tǒng)性淀粉樣變性、伴隨Dutch型淀粉樣變性的遺傳性腦出血、包涵體肌炎、輕度認(rèn)知缺損(MCI)和唐氏綜合征，所述方法包括步驟以足以緩解所述疾病癥狀或發(fā)展的量給予所述患者權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求29或30的組合物。
34.一種藥劑盒，所述藥劑盒包含含權(quán)利要求29或30的藥用組合物的容器。
35.一種制備三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺化合物的方法，所述方法包括步驟(a)過濾氨基酯的非對(duì)映體混合物，所述氨基酯具有至少一個(gè)手性中心和至少一個(gè)通過烷基與至少一個(gè)手性中心連接的三氟甲基或氟基；(b)用DIBAL-H的甲苯溶液處理所述氨基酯，得到N-芐基氨基醇；(c)用催化劑氫化該N-芐基氨基醇，并得到氨基醇；(d)用雜環(huán)磺酰氯使(c)的氨基醇磺酰化；和(e)使(d)的磺?；a(chǎn)物結(jié)晶，得到手性純?nèi)谆蚍s環(huán)磺酰胺化合物。
36.權(quán)利要求35的方法，其中所述三氟甲基化雜環(huán)磺酰胺化合物為權(quán)利要求1的化合物。
37.權(quán)利要求36的方法，其中所述結(jié)晶步驟用乙酸乙酯和己烷進(jìn)行。
38.一種制備三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺化合物的方法，所述方法包括步驟(a)用脫水劑和手性亞磺酰胺處理三氟甲基化或氟化醛，形成三氟甲基化或氟化手性亞磺酰胺；(b)用氰化劑處理所述三氟甲基化或氟化手性亞磺酰亞胺，形成三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈；(c)將所述三氟甲基化或氟化非對(duì)映體α-氨基腈水解為三氟甲基化α-氨基酸；(d)將所述三氟甲基化或氟化α-氨基酸還原為三氟甲基化或氟化β-氨基醇；和(e)使所述三氟甲基化或氟化β-氨基醇與雜環(huán)磺酰氯反應(yīng)，形成所述三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺。
39.權(quán)利要求38的方法，所述方法還包括(f)萃取所述三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺。
40.權(quán)利要求38或39的方法，所述方法還包括純化所述三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺。
41.權(quán)利要求40的方法，其中所述三氟甲基化或氟化雜環(huán)磺酰胺使用層析法純化。
42.權(quán)利要求38的方法，其中所述脫水劑為乙醇鈦、鎂、硫酸鹽或4分子篩。
43.權(quán)利要求38的方法，其中所述手性亞磺酰胺為S-(+)-甲苯亞磺酰胺或叔丁烷亞磺酰胺。
44.權(quán)利要求38的方法，其中所述氰化劑為乙基異丙氧基氰化鋁。
45.權(quán)利要求38的方法，其中所述脫水劑為乙醇鈦，所述手性磺酰胺為S-(+)-甲苯亞磺酰胺，且所述氰化劑為乙基異丙氧基氰化鋁。
46.權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物或其所述可接受的鹽或權(quán)利要求29或30的組合物在制備藥物中的用途。
47.權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求29或30的組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于給予哺乳動(dòng)物患者以抑制β淀粉樣蛋白生成。
48.權(quán)利要求47的用途，其中所述化合物經(jīng)口、通過注射或吸入給藥。
49.權(quán)利要求1-28中任一項(xiàng)的化合物或權(quán)利要求29或30的組合物在制備藥物中的用途，所述藥物用于治療選自以下的疾病阿爾茨海默病、淀粉樣蛋白血管病、腦淀粉樣蛋白血管病、系統(tǒng)性淀粉樣變性、伴隨Dutch型淀粉樣變性的遺傳性腦出血、包涵體肌炎、輕度認(rèn)知缺損(MCI)和唐氏綜合征。
全文摘要
提供式(I)化合物，其中T為CHO、COR
文檔編號(hào)A61K31/381GK1780829SQ200480008781
公開日2006年5月31日 申請(qǐng)日期2004年3月26日 優(yōu)先權(quán)日2003年3月31日
發(fā)明者A·F·克雷夫特, L·雷斯尼克, S·C·邁爾, G·迪亞曼蒂迪斯, D·C·科爾, 王聽中, R·J·加蘭特, M·霍克, B·L·哈里森, 張民生 申請(qǐng)人:惠氏公司