專利名稱：一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥新藥，特別涉及一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，以及中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物構(gòu)成，用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
背景技術(shù)：
細(xì)菌性陰道炎是婦科常見病，由于陰道與外界相通，常因經(jīng)期或性生活衛(wèi)生不良，或因分娩及宮腔操作等因素引起陰道感染、甚至可使炎癥侵襲內(nèi)生殖器官，導(dǎo)致盆腔炎癥。此外患有糖尿病、B族維生素缺乏、卵巢功能衰退，某些過(guò)敏或感染性疾病者更易感染。細(xì)菌性陰道炎曾被命名為嗜血桿菌陰道炎、加德納爾菌陰道炎、非待異性陰道炎，現(xiàn)稱細(xì)菌性陰道病。稱細(xì)菌性是由于陰道內(nèi)有大量不同的細(xì)菌，稱陰道病是由于臨床及病理特征無(wú)炎癥改變并非陰道炎。本病實(shí)際是正常寄生在陰道內(nèi)的細(xì)菌生態(tài)平衡(菌群)失調(diào)。生理情況下，陰道內(nèi)有各種厭氧菌及需氧菌，其中以產(chǎn)生過(guò)氧化氫的乳桿菌占優(yōu)勢(shì)。細(xì)菌性陰道病時(shí)，陰道內(nèi)乳桿菌養(yǎng)活而其它細(xì)菌大量繁殖，主要有加德納爾菌、動(dòng)彎村菌及其他厭氧菌，部分患者合并支原體感染，其中以厭氧菌居多，厭氧菌的濃度可以是正常婦女的100～1000倍。厭氧菌繁殖的同時(shí)可產(chǎn)生胺類物質(zhì)，堿化陰道，使阻力道分泌物增多并有臭味。近年來(lái)細(xì)菌性陰道炎發(fā)病率有上升趨勢(shì)。國(guó)外學(xué)者也注意到陰道炎可誘發(fā)其他疾病，如誘發(fā)漿細(xì)胞性子宮內(nèi)膜炎等。目前治療細(xì)菌性陰道炎的中栓劑較多，如鳳香海綿栓、苦參栓、婦寧栓以及復(fù)方沙棘籽油栓等，雖均有一定的治療效果，但中藥復(fù)方的藥味組成眾多，加之制備工藝粗糙，甚至將中藥材直接粉碎后入藥，不僅外觀難以接受，面且作為局部用藥其吸收率更低，療程更長(zhǎng)，容易引發(fā)成慢性疾病，嚴(yán)懲影響著婦女的身心健康和正常工作。所以，患有細(xì)菌性陰道炎的廣大婦女非?？释幸环N有效、快速、方便的治療性藥物面市。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個(gè)目的在于，提供一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
申請(qǐng)人將中藥成分黃柏總生物堿的抗菌消炎作用和蒼術(shù)揮發(fā)油的滲透愈合作用結(jié)合，制成了一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，該栓劑含有重量比為1∶1.6的黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油。
該栓劑還含有作為輔料的栓劑基質(zhì)和冰片。
栓劑基質(zhì)為混合脂肪酸甘油酯或本領(lǐng)域公知的其它栓劑基質(zhì)。
混合脂肪酸甘油酯占栓劑總量的94％，冰片占栓劑總量的0.8％。
其制備方法是取處方量黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油，混合均勻。逐量加入已溶化的栓劑基質(zhì)——混合脂肪酸甘油酯，再加入處方量冰片，攪拌均勻。倒于栓劑模具中，低溫靜置后取出，檢查合格后包裝即得。
根據(jù)申請(qǐng)人完成的主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)(體外抗菌實(shí)驗(yàn)、體外抗真菌實(shí)驗(yàn)、抗陰道毛滴蟲實(shí)驗(yàn)、抗炎實(shí)驗(yàn)、鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)、止癢實(shí)驗(yàn))結(jié)果表明該栓劑各項(xiàng)藥效指標(biāo)與同類化學(xué)藥物相當(dāng)，達(dá)到了對(duì)細(xì)菌性陰道炎的標(biāo)本兼治的效果，而綜合療效顯著高于任何一種化學(xué)藥物；同時(shí)，由于藥效十分明確，作用機(jī)理清楚，藥物量效相關(guān)，完全可以用現(xiàn)代分析技術(shù)控制其質(zhì)量并研究其體內(nèi)過(guò)程。與目前市場(chǎng)上常用的中成栓劑相比，在療效的綜合性、質(zhì)量的可控性和工藝的先進(jìn)性方面均具有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)能力。也充分證明了中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合申請(qǐng)人采用中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油制備的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，并結(jié)合申請(qǐng)人給出的該栓劑在治療細(xì)菌性陰道炎的具體實(shí)驗(yàn)，對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)描述。
本發(fā)明的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑由以下原料按重量百分比構(gòu)成黃柏總生物堿2％，蒼術(shù)揮發(fā)油3.2％，混合脂肪酸甘油酯94％，冰片0.8％。該栓劑的命名為“二妙婦炎栓”。
需要說(shuō)明的是，本實(shí)施例以二妙婦炎栓的組方為依據(jù)，進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)和安全性實(shí)驗(yàn)，其中黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的成分是對(duì)于治療細(xì)菌性陰道炎的一種藥效組方，由于實(shí)驗(yàn)成本高昂，在此不一一列舉，但并不局限于該實(shí)施例，從申請(qǐng)人所積累的各實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得知，在其他含有黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的不同組方制備的栓劑也能夠?qū)崿F(xiàn)本發(fā)明的目的，同樣具有抗菌、抗真菌、抗陰道毛滴蟲、抗炎、鎮(zhèn)痛和止癢作用，且藥物是安全的。
本申請(qǐng)的栓劑為中藥復(fù)方制劑，具有清熱燥濕之功效，臨床用于細(xì)菌性陰道炎、宮頸糜爛等的治療。研究結(jié)果表明，該栓劑體外對(duì)陰道感染常見細(xì)菌如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、糞鏈球菌、淋病奈瑟氏菌、陰道加特納菌有較明顯的抑制和滅活作用；體外對(duì)引起霉菌性陰道炎的常見真菌白色念珠菌、近平滑念珠季也蒙念珠菌、副克柔念珠菌、熱帶念珠菌、青霉菌、黃曲霉菌也有一定的抑制和滅活作用；體外可有效地殺滅服道毛滴蟲。栓劑按0.93、1.86、3.72g生藥/Kg對(duì)大鼠局部涂抹給藥，抑制雞蛋清誘發(fā)的大鼠急性炎癥反應(yīng)，抑制棉球刺激的大鼠電性增生性炎癥反應(yīng)；按0.93、1.86、3.72g生藥/Kg對(duì)大鼠服道局部給藥，抑制異物刺激誘發(fā)的大鼠子宮炎癥反應(yīng)。栓劑按1.3、2.6、5.2g生藥/Kg對(duì)小鼠局部涂抹給藥，提高熱刺激引起的小鼠痛閾；按0.93、1.86、3.72g生藥/Kg對(duì)豚鼠局部涂抹給藥，提高組胺對(duì)豚鼠的致癢閾。
實(shí)驗(yàn)一體外抗菌實(shí)驗(yàn)采用微量連續(xù)二倍稀釋法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、糞鏈球菌、淋病奈瑟氏菌的標(biāo)準(zhǔn)株和大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、糞鏈球菌、淋病奈瑟氏菌、陰道加特納菌臨床分離株的最小抑菌濃度(MIC)，采用平板轉(zhuǎn)染法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)上述細(xì)菌的最小殺菌濃度(MBC)。將大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、陰道加特納菌接種于MH肉湯，置普通培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)24h；糞鏈球菌接種于TPY肉湯(厭氧菌營(yíng)養(yǎng)肉湯)，置厭氧培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48h；淋病奈瑟氏菌接種于含5％小牛血清的MH肉湯，置5％CO2培養(yǎng)箱37℃培養(yǎng)48h。
表1二妙婦炎栓對(duì)標(biāo)準(zhǔn)菌株的MIC和MBC菌株 MIC(mg生藥/mL)MBC(mg藥/mL)大腸桿菌ATCC25922株12.5 25金黃色葡萄球菌ATCC25922株 0.39 0.78綠膿假單胞菌ATCC27853株50100表皮葡萄球菌ATCC26069株0.39 0.78普通變形桿菌49010株2550糞鏈球菌32221株0.39 1.56淋病奈瑟氏菌29106株0.195 0.39陰道加特納菌臨床分離參考株 0.78 1.56由表1可見，二妙婦炎栓對(duì)試驗(yàn)所選用的大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、糞鏈球菌、淋病奈瑟氏菌的標(biāo)準(zhǔn)株和陰道加特納菌臨床分離參考株均有較明顯的抑制和滅活作用，其MBC為MIC的2～4倍。
表2二妙婦炎栓對(duì)405株臨床分離菌株的MIC、MIC50、MIC99和MBC(mg生藥/mL)菌株株數(shù) MIC MIC50MIC99MBC金黃色葡萄球菌 1000.39～1.561.0257 1.3084 0.78～6.25大腸桿菌1206.25～50 18.906323.1657 25～100表皮葡萄球菌50 0.39～3.130.7232 1.5016 1.56～6.25變形桿菌10012.5～50 26.125 34.0726 25～100淋病奈瑟氏菌24 0.195～0.39 0.2438 0.2715 0.195～0.78陰道加特納菌11 0.39～1.560.7800 0.9146 0.78～1.56由表2可見，二妙婦炎栓對(duì)試驗(yàn)所選用的405株臨床分離菌株均有一定的抑制和滅活作用，其MBC為MIC的2～4倍。
實(shí)驗(yàn)二體外抗真菌實(shí)驗(yàn)采用微量連續(xù)二倍稀釋法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)念珠菌的MIC，采用平板轉(zhuǎn)染法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)念珠菌的MBC。采用試管連續(xù)二倍稀釋法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)霉菌的MIC，采用平板轉(zhuǎn)染法測(cè)定二妙婦炎栓對(duì)霉菌的MBC。
表3二妙婦炎栓對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株的MIC和MBC菌株 MIC(mg生藥/mL) MBC(mg生藥/mL)白色念珠菌85021標(biāo)準(zhǔn)參考株3.125 6.25近平滑念珠菌臨床分離株 1.563.125季也蒙臨床分離株 6.256.25副克柔臨床分離株 1.561.56熱帶臨床分離株 3.125 6.25青霉菌臨床分離株 12.525黃曲霉菌臨床分離株 12.525由表3可見，二妙婦炎栓對(duì)試驗(yàn)所選用的白色念珠菌、近平滑念珠菌、季也蒙念珠菌、副克柔念珠菌、熱帶念珠菌、青霉菌、黃曲霉菌標(biāo)準(zhǔn)株或臨訂分離參考株均有較明顯的抑制和滅活作用，其MBC為MIC的2～4倍。
表4二妙婦炎栓對(duì)白色念珠菌臨床分離菌株的MIC、MIC50、MIC99和MBC(mg生藥/mL)株數(shù)MICMIC50MIC99MBC50 1.56～6.25 0.0991 0.1243 6.25～12.5由表4可見，二妙婦炎栓對(duì)變色試驗(yàn)所選用的50株白色念珠菌臨床分離菌珠臨床分離菌株均有一定的抑制和滅活作用。
實(shí)驗(yàn)三抗陰道毛滴蟲實(shí)驗(yàn)采用體外培養(yǎng)法測(cè)定二妙婦火栓對(duì)陰道毛滴蟲的最小殺蟲濃度。陰道毛滴蟲在改良的CPLM培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)48h，滴蟲運(yùn)動(dòng)活潑，生長(zhǎng)良好，自然死亡率＜2％，實(shí)驗(yàn)用陰道毛滴蟲液含蟲密度為1.8～2.5×103/mL。
結(jié)果表明，二妙婦炎栓體外殺滅陰道毛滴蟲的最小有效濃度為25mg生藥/mL。
實(shí)驗(yàn)四抗炎實(shí)驗(yàn)(一)對(duì)大鼠急性炎癥的影響(大鼠足爪水腫法)大鼠50只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給二妙婦炎栓的基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯0.1mL/100g；第二組為陽(yáng)性對(duì)照組，給氫化可的松注射液30mg/Kg；第三、四、五組為二妙婦炎栓小、中、大劑量組，分別給二妙婦炎栓0.93、1.86、3.72g生藥/Kg。大鼠足爪局部涂抹給藥1次，0.1mL/100g。給藥60min后，每鼠右后足跖皮內(nèi)注射10％雞蛋清0.1mL致炎。然后再同法涂藥1次。致炎前及致炎后30in、1h、2h、4h用游標(biāo)卡尺測(cè)量大鼠右后足爪厚度，以致炎前后足爪厚度之差作為腫脹度，以腫脹度代表急性炎癥程度。
表5二妙婦炎栓對(duì)大鼠急性炎癥的影響(x±s)劑量 動(dòng)物數(shù) 腫脹度組別(g/Kg)(只)30min 1h 2h 4h陰性對(duì)照組10 0.90±0.39 0.83±0.23 0.95±0.30 0.93±0.30
氫化可的松注射液0.03100.66±0.210.48±0.21**0.41±0.15**0.32±0.23**二妙婦炎栓小劑量0.93100.97±0.340.89±0.220.57±0.29**0.36±0.25**二妙婦炎栓中劑量1.86100.80±0.250.82±0.250.68±0.300.59±0.34*二妙婦炎栓大劑量3.72100.41±0.20**0.41±0.17**0.20±0.28**0.19±0.27**與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01由表5可見，二妙婦炎栓局部給藥可明顯抑制雞蛋清誘發(fā)的大鼠急性炎癥的發(fā)生和發(fā)展，與陰性對(duì)照組比較，小劑量組給藥后2h、4h有顯著性差異(P＜0.01)，中劑量組給藥后4h有顯著性差異(P＜0.05)，大劑量組給藥后30min、1h、2h、4h均有顯著性差異(P＜0.01)。說(shuō)明二妙婦炎栓有抗大鼠急性滲出性炎癥作用。陽(yáng)性對(duì)照藥氫化可的松注射液也能抑制雞蛋清誘發(fā)的大鼠急性滲出性炎癥反應(yīng)。
(二)對(duì)大鼠慢性炎癥實(shí)驗(yàn)的影響大鼠50只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給二妙婦炎栓的基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯0.1mL/100g；第二組為陽(yáng)性對(duì)照組，給氫化可的松注射液30mg/Kg；第三、四、五組為二妙婦炎栓小、中、大劑量組，分別給二妙婦炎栓0.93、1.86、3.72g生藥/Kg。在乙醚淺麻下，剪毛消毒，于下腹部正中切開皮膚，將重50mg的滅菌棉球植入兩側(cè)腹股溝皮下，然后縫合皮膚，流水線，整個(gè)過(guò)程為無(wú)菌操作。從手術(shù)前3天開始局部涂藥，固定，每天1次，連續(xù)10天。第11天處死大鼠，小心剝離取出棉球及包裹的肉芽組織，60℃干燥12小時(shí)后稱重，減去原棉球重量即為肉芽組織重量，結(jié)果表示為每100g體重所含肉芽組織重量(雙側(cè))。以肉芽組織重量代表慢性炎癥程度。
表6二妙婦炎栓對(duì)大鼠慢性增生性炎癥的影響(x±s)肉芽組織重量組別劑量(g/Kg)動(dòng)物數(shù)(只)(mg/100g體重)
陰性對(duì)照組 1050.3±10.7氫化可的松注射液0.031033.6±6.9**二妙婦炎栓小劑量0.931047.7±11.6二妙婦炎栓中劑量1.861041.7±11.2二妙婦炎栓大劑量3.721037.1±7.3**與陰性對(duì)照組比較，**P＜0.01由表6可見，二妙婦炎栓抑制棉球刺激的大鼠肉芽組織增生，減輕肉芽組織的重量，與陰性對(duì)照組比較，大劑量組有顯著性差異(P＜0.01)，說(shuō)明二妙婦炎栓對(duì)大鼠電性增生性炎癥有抑制作用。陽(yáng)性對(duì)照藥氫化可的松注射液也能抑制棉球刺激的大鼠肉芽增生。
(三)對(duì)大鼠子宮炎癥的影響大鼠50只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給二妙婦炎栓的基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯0.021mL/100g；第二組為陽(yáng)性對(duì)照組，給氫化可的松注射液30mg/Kg；第三、四、五組為二妙婦炎栓小、中、大劑量組，分別給二妙婦炎栓0.93、1.86、3.72g生藥/Kg。在乙醚淺麻下，剪毛消毒，于下腹部正中切開皮膚和腹壁，暴露子宮，沿左側(cè)子宮角上1cm處做一橫切口，將一酒精消毒的塑料管(管徑2mm，長(zhǎng)0.5cm)放置在子宮內(nèi)，與子宮切口縫合固定，以防脫落。然后縫合腹壁，消毒，局部涂抹青霉素預(yù)防感染。手術(shù)當(dāng)天陰道給藥，每天1次，連續(xù)7天，0.02mL/100g。7天后處死動(dòng)物，取出兩側(cè)子宮稱重，二者之差為腫脹度。以腫脹度代表子宮炎癥程度，并按下式計(jì)算藥物抑制率。
表7二妙婦炎栓對(duì)大鼠子宮炎癥的影響(x±s)組別劑量(g/Kg)動(dòng)物數(shù)(只)腫脹度(mg) 抑制率(mg)陰性對(duì)照組10125.8±54.7
氫化可的松注射液0.0310 83.5±29.3*33.6二妙婦炎栓小劑量0.9310 92.3±40.2 26.6二妙婦炎栓中劑量1.8610 80.9±37.2*35.7二妙婦炎栓大劑量3.7210 79.9±39.2*36.5由表7可見，二妙婦炎栓抑制異物質(zhì)刺激誘發(fā)的大鼠子宮炎癥反應(yīng)，使腫脹度減小，與陰性對(duì)照組比較，中、大劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，說(shuō)明二妙婦炎栓有抗大鼠子宮炎癥作用。陽(yáng)性對(duì)照藥氫化可的松注射液也能抑制異物刺激誘發(fā)的大鼠子宮炎癥。
實(shí)驗(yàn)五鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn)用YD-4型生理藥理實(shí)驗(yàn)多用儀恒定水溫55℃，以小鼠舔后足作為疼痛表現(xiàn)，從小鼠接觸熱板到舔后足所需時(shí)間為痛閾指標(biāo)。預(yù)先測(cè)定二次痛閾，取平均痛閾為10～30s的小鼠參加實(shí)驗(yàn)。取雌性ICR種小鼠50只，隨機(jī)分為5組，每組10只。第一組為陰性對(duì)照組，給二妙婦炎栓的基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯；第二組為陽(yáng)性對(duì)照組，腹腔注射哌替啶注射液50mg/Kg；第三、四、五組為二妙婦炎栓小、中、大劑量組，分別給二妙婦炎栓1.3、2.6、5.2g生藥/Kg。除陽(yáng)性對(duì)照組外，各組小鼠兩后足跖局部涂抹給藥1次，0.01mL/10g。給藥前及給藥后30、60、90、120min分別測(cè)定小鼠痛閾，如痛閾大于60s，以60s計(jì)算。
表8二妙婦炎栓對(duì)小鼠痛閾的影響(x±s)劑量動(dòng)物數(shù)給藥前痛給藥后痛閾(s)組別(g/Kg) (只) 閾(s) 30min60min 90min 120min陰性對(duì)照組 1017.2±6.0 20.5±8.320.7±10.323.5±6.5 26.3±11.5哌替啶注射液0.051019.7±4.8 57.5±6.9**46.6±10.7**43.6±15.4**40.7±14.3*二妙婦炎栓小1.3 1017.1±7.8 30.5±7.5*40.7±11.2**42.3±13.3**25.1±7.9劑量二妙婦炎栓中2.61016.7±4.4 29.7±9.4*37.8±8.5**34.7±11.9*25.1±9.5劑量二妙婦炎栓大5.51016.0±2.8 31.6±14.2*49.1±14.5**39.6±16.4**28.8±13.7劑量與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05，**P＜0.01由表8可見，二妙婦炎栓可提高小鼠痛閾，與陰性對(duì)照組比較，各劑量組給藥后30in、60min和90min各時(shí)間點(diǎn)均有顯著性差異(P＜0.05或P＜0.01)，提示二妙婦炎栓對(duì)小鼠熱刺激引起的疼痛有鎮(zhèn)痛作用，作用可持續(xù)90min左右。陽(yáng)性對(duì)照藥哌替啶注射液也能提高小鼠痛閾。
實(shí)驗(yàn)六止癢實(shí)驗(yàn)雌性豚鼠40只，隨機(jī)分為5組，每組8只。第一組為陰性對(duì)照組，給二妙婦炎栓的基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯；第二組為陽(yáng)性對(duì)照組，給鹽酸苯海拉明注射液0.4mg/Kg；第三、四、五組為二妙婦炎栓小、中、大劑量組，分別給二妙婦炎栓0.93、1.86、3.72g生藥/Kg。實(shí)驗(yàn)前1天給各組豚鼠右后足背剃毛，局部涂藥1次，0.1mL/足。實(shí)驗(yàn)當(dāng)日，用粗砂紙將去毛處輕輕擦傷，面積約1cm2，局部再涂藥1次。末次給藥10min后，每隔3min依次由低濃度到高濃度，向每只豚鼠創(chuàng)面涂抹組胺0.05mL/只，組胺濃度依次為1.0×10-4，2.0×10-4，3.0×10-4，4.0×10-4……13×10-4，14×10-4，15×10-4。當(dāng)豚鼠出現(xiàn)瘙癢反應(yīng)，即舔右后足創(chuàng)面部位，或至最高濃度仍未出現(xiàn)瘙癢反應(yīng)為止。累積每只豚鼠舔右后足時(shí)所給予的組胺總量(即豚鼠耐受的組胺量)作為豚鼠的致癢閾。
表9二妙婦炎栓對(duì)小鼠皮膚瘙癢的止癢作用(x±s)組別 劑量(/Kg)動(dòng)物數(shù)(只) 致癢閾(磷酸組胺總量μg)陰性對(duì)照組 8 18.91±19.42苯海拉明注射液0.4mg8 69.38±53.07*
二妙婦炎栓小劑量 0.93g838.60±31.82二妙婦炎栓中劑量 1.86g856.52±38.90*二妙婦炎栓大劑量 3.72g877.25±57.01*與陰性對(duì)照組比較，*P＜0.05由表9可見，二妙婦炎栓能明顯提高豚鼠致癢閾，與陰性對(duì)照組比較，中、大劑量組有顯著性差異(P＜0.05)，說(shuō)明二妙婦炎栓有較好的止癢作用。陽(yáng)性對(duì)照藥鹽酸苯海拉明注射液也能明顯提高豚鼠致癢閾。
實(shí)驗(yàn)七急性毒性(一)灌胃給藥急性毒性試驗(yàn)雌性小鼠20只，禁食12小時(shí)后，灌胃給二妙婦炎栓(7.5g生藥/ml)0.4ml/10g，一日2次，間隔8小時(shí)。一日內(nèi)累計(jì)給藥量為0.8ml/10g，觀察七天。觀察期間，小鼠毛發(fā)光澤，活動(dòng)自如，進(jìn)食及大、小便正常，未發(fā)現(xiàn)有毒性反應(yīng)，7天后動(dòng)物體重增加，由給藥前的19.82±1.21g增至21.91±1.73g，無(wú)一只死亡。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)頸椎脫臼處死小鼠，解剖肉眼觀察主要臟器顏色及形態(tài)學(xué)改變，結(jié)果心、肝、脾、肺、腎、胃、腸等主要臟器未見異常改變。結(jié)果說(shuō)明，二妙婦炎栓小鼠灌胃一日最大給藥量為600g生藥/kg，未見明顯急性毒性反應(yīng)。
(二)陰道黏膜給藥急性毒性試驗(yàn)雌性白色家兔12只，隨機(jī)分為3組，每組4只。第一組為基質(zhì)對(duì)照組，給二妙婦炎栓基質(zhì)混合脂肪酸甘油酯0.5g/只；第二組為二妙婦炎栓低劑量組，給二妙婦炎栓0.5g/只(10倍于臨床制劑濃度)；第三組為二妙婦炎栓高劑量組，給二妙婦炎栓0.5g/只(10倍于臨床制劑濃度)。各組家兔陰道給藥，低劑量組給藥1次，0.5g/次；高劑量組一日內(nèi)給藥2次，間隔6h，0.5g/次，共1g/只；基質(zhì)對(duì)照組涂藥方法與高劑量組相同。給藥后24h、48h及第七天，觀察記錄家兔一般狀況，皮膚毛發(fā)，眼和黏膜的變化，呼吸、循環(huán)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)及四肢活動(dòng)的變化等；同時(shí)局部觀察陰道黏膜有無(wú)充血、水腫、糜爛等。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，觀察期間家兔毛發(fā)光澤，活動(dòng)正常，進(jìn)食及大、小便正常，體重?zé)o明顯變化，眼及口腔無(wú)分泌物，呼吸、循環(huán)及中樞神經(jīng)系統(tǒng)未發(fā)現(xiàn)異常表現(xiàn)，無(wú)一只死亡。陰道未見充血、水腫、糜爛等。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)擊頭處死家兔，解剖肉眼觀察主要臟器顏色及形態(tài)學(xué)改變，結(jié)果心、肝、脾、肺、腎、胃、腸、膀胱等主要臟器未見異常改變。結(jié)果說(shuō)明，二妙婦炎栓家兔陰道黏膜給藥未見明顯急性毒性反應(yīng)。
實(shí)驗(yàn)八動(dòng)物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)用二妙婦炎栓高、低二個(gè)劑量(分別相當(dāng)于成人用量的40倍、20倍)給雌性大鼠連續(xù)陰道黏膜局部給藥三個(gè)月，對(duì)大鼠的一般狀況、血液學(xué)、血液生化學(xué)、尿常規(guī)、心電圖、系統(tǒng)解剖、臟器系數(shù)和組織病理學(xué)均無(wú)明顯影響，未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)，恢復(fù)期亦無(wú)延遲性毒性反應(yīng)，提供大鼠無(wú)毒性反應(yīng)用量為8g生藥/kg。
實(shí)驗(yàn)九局部用藥安全性試驗(yàn)二妙婦炎栓多次給家兔正常和破損皮膚，用藥局部未見紅斑、水腫及其它異常反應(yīng)，皮膚刺激反應(yīng)平均分值為0，組織病理學(xué)亦未見對(duì)家兔正常和破損皮膚有刺激性。二妙婦炎栓多次家兔陰道局部給藥，肉眼未見陰道黏膜有充血、水腫、出血、潰瘍或糜爛等，組織病理學(xué)亦未見對(duì)陰道黏膜有刺激性。二妙婦炎栓豚鼠皮膚給藥，皮膚未見紅斑、水腫及其它過(guò)敏反應(yīng)，皮膚過(guò)敏反應(yīng)平均分值為0，致敏率為0％。結(jié)果說(shuō)明，二妙婦炎栓對(duì)家兔皮膚和陰道無(wú)刺激性，對(duì)豚鼠皮膚無(wú)致敏性。
綜上所述，能夠證明中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
權(quán)利要求
1.一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，其特征在于該栓劑含有重量比為1∶1.6的黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油。
2.如權(quán)利要求1所述的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，其特征在于，該栓劑中還含有作為輔料的栓劑基質(zhì)和冰片。
3.如權(quán)利要求2所述的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，其特征在于所述的栓劑基質(zhì)為混合脂肪酸甘油酯或本領(lǐng)域公知的其它栓劑基質(zhì)。
4.如權(quán)利要求3所述的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，其特征在于所述混合脂肪酸甘油酯占栓劑總量的94％，冰片占栓劑總量的0.8％。
5.權(quán)利要求1所述的用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑制備方法，其特征在于，包括以下步驟1)按配比取處方量的黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油，混合均勻；2)將混合后的黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油中逐量加入已溶化的栓劑基質(zhì)即混合脂肪酸甘油酯中，再加入處方量的冰片，攪拌均勻；其中混合脂肪酸甘油酯占栓劑總量的94％，冰片占栓劑總量的0.8％；3)倒于栓劑模具中，常規(guī)低溫靜置后取出即得。
6.中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種用于治療細(xì)菌性陰道炎的栓劑，該栓劑含有重量比為1∶1.6的黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油。該栓劑具有抗菌、抗真菌、抗陰道毛滴蟲、抗炎、鎮(zhèn)痛和止癢作用，達(dá)到了對(duì)細(xì)菌性陰道炎的標(biāo)本兼治的效果，根據(jù)完成的主要藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該栓劑各項(xiàng)藥效指標(biāo)與同類化學(xué)藥物相當(dāng)，而綜合療效顯著高于任何一種化學(xué)藥物；體外對(duì)陰道感染常見細(xì)菌如大腸埃希氏菌、金黃色葡萄球菌、綠膿假單胞菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌、糞鏈球菌、淋病奈瑟氏菌、陰道加特納菌有較明顯的抑制和滅活作用。并證明了中藥成分黃柏總生物堿和蒼術(shù)揮發(fā)油的組合物用于治療細(xì)菌性陰道炎的藥物用途。
文檔編號(hào)A61P15/02GK1616004SQ200410073090
公開日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2004年9月17日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月17日
發(fā)明者賀浪沖, 梁明金, 魯云博, 季龍鳳, 盧聞, 黃沂, 李西玲 申請(qǐng)人:西安交通大學(xué)