專(zhuān)利名稱(chēng)：一種治療高脂血癥的藥物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種治療高脂血癥的藥物，具體涉及一種以中草藥為原料制備的治療高脂血癥的中藥，本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。
背景技術(shù)：
高脂血癥是心腦血管疾病的重要危險(xiǎn)因子，是動(dòng)脈粥樣硬化的首要危險(xiǎn)因素，此外，高脂血癥還可導(dǎo)致老年性耳聾、脂肪肝、進(jìn)行性加重腎病綜合癥等。其中動(dòng)脈粥樣硬化所致的心腦血管疾病是當(dāng)前危及人類(lèi)健康和生命的主要疾病之一，美國(guó)心肺血研究院進(jìn)行7年的冠心病防治研究證實(shí)，降脂藥的應(yīng)用可減少心臟病死亡率24％，減少非致死性心臟病發(fā)作率19％，降血脂藥能延緩或減輕動(dòng)脈粥樣硬化病變的發(fā)展，并促進(jìn)其消退。由于生活水平的不斷提高，高脂血癥的發(fā)病率有逐漸增高和向中年人群發(fā)展的趨勢(shì)，因此，高脂血癥已成為近十幾年來(lái)代謝病研究的熱點(diǎn)之一，并取得了一定進(jìn)展，形成了多種有降脂作用的西藥，但長(zhǎng)期應(yīng)用，多有不良反應(yīng)。近年來(lái)，中醫(yī)藥防治高脂血癥的研究深受重視，目前雖有一些降脂的中藥成方制劑形成，但用于痰瘀阻滯，能起到作用的尚少，且療效平平，特別是在升高高密度脂蛋白、降低低密度脂蛋白、甘油三酯、膽固醇等綜合方面，目前尚未見(jiàn)有中成藥能夠達(dá)到。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是克服現(xiàn)有治療高脂血病的西藥長(zhǎng)期應(yīng)用帶來(lái)的不良反應(yīng)、中藥療效不明顯的問(wèn)題，而提供一種治療這類(lèi)病癥的中藥，其副作用小，用藥安全，可以長(zhǎng)期服用，而且效果顯著。
本發(fā)明的另一目的是提供該藥物的制備方法。
本發(fā)明的藥物是由以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)的它是由以下八味原料按重量百分比制成，原料的總量為100％虎杖18％～20％ 昆布18％～20％ 山楂葉18％～20％ 澤瀉8％～10％白芥子8％～10％ 水蛭3％～5％膠股藍(lán)8％～10％ 牛膝8％～10％本發(fā)明藥物的另一重量配比是，原料的總量為100％虎杖19％ 昆布19％山楂葉19％澤瀉9.5％白芥子9.5％ 水蛭5％ 膠股藍(lán)9.5％ 牛膝9.5％將上述各原料制成本發(fā)明藥物的制備方法是取虎杖18％～20％、山楂葉18％～20％、澤瀉8％～10％、絞股藍(lán)8％～10％、牛膝8％～10％加70％乙醇回流提取2次，溶劑倍數(shù)分別為5、5倍，回流時(shí)間分別為1.5、1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣另器保存)回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，備用；按比例取昆布18％～20％、水蛭3％～5％、白芥子8％～10％與上渣混合，加水煎煮2次，加水量分別為8、8倍，每次煎煮1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.15(60℃)，放涼，加入95％乙醇使含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)，回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，與醇提清膏均勻混合，于65℃減壓干燥，粉碎并過(guò)成180目細(xì)粉，備用；取干膏粉1克，輔料(蜂蠟∶大豆色拉油＝3∶97)1.07份充分混合均勻，在37～40℃下過(guò)80目篩，將過(guò)篩后的混懸料在50℃條件下保溫，即得。
本發(fā)明的有益效果是1.本發(fā)明選用中藥材為原料，各組分符合藥政法規(guī)定，利用各味中藥的綜合作用治療高脂血，充分發(fā)揮中藥毒副作用小的優(yōu)勢(shì)，無(wú)毒無(wú)害，可長(zhǎng)期服用。
2.本發(fā)明能升高高密度脂蛋白、降低低密度脂蛋白、甘油三酯和膽固醇，與目前治療高脂血癥的中藥產(chǎn)品相比，本產(chǎn)品還能顯著改善血液流變學(xué)指標(biāo)，從而可以預(yù)防心、腦血管疾病的發(fā)生、發(fā)展和變化，具有明顯的優(yōu)勢(shì)。
3.本發(fā)明無(wú)需煎煮，無(wú)苦澀感，服用方便。
4.本發(fā)明價(jià)格低，可部分取代昂貴的進(jìn)口降脂藥。
具體實(shí)施例方式
以下結(jié)合具體實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。
一、各原料在本藥物中的功能及功能主治1.各種原料在本藥物中的功能虎杖功擅活血化瘀，且能利濕解毒。
昆布消痰軟堅(jiān)，利水消腫。
虎杖、昆布用為君藥。
山楂葉增強(qiáng)君藥活血化瘀之功。
澤瀉增強(qiáng)君藥?kù)钐道麧裰饔谩?br> 山楂葉、澤瀉共用為臣藥。
水蛭功能破血逐瘀，通經(jīng)消癥。
絞股藍(lán)功能養(yǎng)血活血。
水蛭、膠股藍(lán)二味以佐助君、臣藥活血化瘀之功，使活血而不傷正，用為佐藥。
白芥子化痰逐飲，散結(jié)消腫，能增強(qiáng)本產(chǎn)品祛痰之功，且白芥子性溫，亦能反佐君藥之寒，故可兼佐藥之用，使該產(chǎn)品藥性更加平和。
牛膝增強(qiáng)藥物活血化瘀、祛痰利濕之功效。
白芥子和牛膝二味可使藥效更加強(qiáng)勁有力，藥性更加平和，不傷機(jī)體。
2.功能主治活血散瘀，祛痰利濕，主治高脂血癥。
3.用法用量
口服，一日三次，一次三粒，每粒0.6克。
二、制備方法上述藥物可制成各種劑型，現(xiàn)只列舉一種制備膠囊的方法按比例取虎杖18％～20％、山楂葉18％～20％、澤瀉8％～10％、絞股藍(lán)8％～10％、牛膝8％～10％加70％乙醇回流提取2次，溶劑倍數(shù)分別為5、5倍，回流時(shí)間分別為1.5、1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣另器保存)回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，備用；按比例取昆布18％～20％、水蛭3％～5％、白芥子8％～10％與上渣混合，加水煎煮2次，加水量分別為8、8倍，每次煎煮1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.15(60℃)，放涼，加入95％乙醇使含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)，回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，與醇提清膏均勻混合，于65℃減壓干燥，粉碎并過(guò)成180目細(xì)粉，備用；取干膏粉1克，輔料(蜂蠟∶大豆色拉油＝3∶97)1.07份充分混合均勻，在37～40℃下過(guò)80目篩，將過(guò)篩后的混懸料于50℃保溫下灌封于10#膠囊中，即得。
三、藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)其中的基礎(chǔ)飼料全價(jià)標(biāo)準(zhǔn)營(yíng)養(yǎng)飼料。
高脂飼料配方A、金黃地鼠飼料配方膽固醇3％，雞蛋黃37％，豬油60％。
B、大鼠高脂飼料配方10％蛋黃粉、10％豬油、2％膽固醇、0.5％膽鹽、77.5％基礎(chǔ)飼料。
劑量設(shè)置藥效分1.26g/kg.bw，0.63g/kg.bw，0.315g/kg.bw大、中、小三個(gè)劑量(相當(dāng)原生藥10.4g/kg.bw、5.2g/gk.bw、2.6g/kg.bw)分別相當(dāng)臨床人擬用量的30、15及7.5倍。按10ml/kg·bw灌胃給藥，大、中、小三個(gè)劑量的濃度分別為12.6％、6.3％、3.15％。
1.對(duì)高脂血癥的治療作用健康金黃地鼠80只，♀♂兼用，除11只地鼠喂基礎(chǔ)飼料外，其余地鼠均喂金黃地鼠高脂飼料，飼養(yǎng)9天后禁食，第2天眼球采血1ml，測(cè)膽固醇值。然后根據(jù)膽固醇值剔除TC值低于4mmol/L的地鼠5只，將高血脂地鼠分為五組，分別為模型組、陽(yáng)性對(duì)照組、本藥物大劑量組，中劑量組，小劑量組，加上正常對(duì)照組共六組。然后正常對(duì)照組灌胃生理鹽水，模型組灌胃大豆色拉油，陽(yáng)性對(duì)照組灌胃舒降之10mg/kg.bw(相當(dāng)人用量的30倍)，本藥物大、中、小劑量分別灌胃1.26g/kg.bw，0.63g/kg.bw及0.315g/kg.bw，連續(xù)給藥10天，禁食1天，次日活殺，頸動(dòng)脈取血，用全自動(dòng)生化儀7170A檢測(cè)TC(總膽固醇)、TG(甘油三脂)、HDL-C(高密度脂蛋白)、LDL-C(低密度脂蛋白)、VLDL-C(極低密度脂蛋白)并計(jì)算TC/HDL-C(總膽固醇/高密度脂蛋白)，結(jié)果見(jiàn)表1(附后)。
2.對(duì)高脂血癥的預(yù)防作用(1)對(duì)高血脂金黃地鼠的預(yù)防作用健康金黃地鼠60只，♀♂兼用，分為6組，每組10只，第一組正常對(duì)照組，灌胃生理鹽水10ml/kg.bw，喂基礎(chǔ)飼料，第二組模型組，灌胃大豆色拉油10ml/kg.bw，喂食地鼠高脂飼料；第三組陽(yáng)性對(duì)照組灌胃舒降之10mg/kg.bw，喂食地鼠高脂飼料；第四組大劑量組，灌胃本藥物1.26g/kg.bw，喂食地鼠高脂飼料；第五組中劑量組，灌胃本藥物0.63g/kg.bw，喂食地鼠高脂飼料；第六組小劑量組，灌胃本藥物0.315g/kg.bw，喂食地鼠高脂飼料。連續(xù)灌胃給藥15天，禁食1天，次日活殺，頸動(dòng)脈取血，用全自動(dòng)生化儀7170A檢測(cè)TC(總膽固醇)、TG(甘油三脂)、HDL-C(高密度脂蛋白)、LDL-C(低密度脂蛋白)、VLDL-C(極低密度脂蛋白)并計(jì)算TC/HDL-C(總膽固醇/高密度脂蛋白)，結(jié)果見(jiàn)表2(附后)。
(2)對(duì)高血脂大鼠的預(yù)防作用健康大鼠60只，♀♂兼用，分為6組，每組10只。分組，給藥方式同實(shí)驗(yàn)(1)，高脂飼料為大鼠高脂飼料，連續(xù)給藥20天，禁食1天，次日活殺，頸動(dòng)脈取血，用全自動(dòng)生化儀7170A檢測(cè)TC(總膽固醇)、TG(甘油三脂)、HDL-C(高密度脂蛋白)、LDL-C(低密度脂蛋白)、VLDL-C(極低密度脂蛋白)并計(jì)算TC/HDL-C(總膽固醇/高密度脂蛋白)，結(jié)果見(jiàn)表3(附后)。
3.對(duì)高血粘度的血液流變性的影響健康大鼠60只，雌雄兼用，體重250-300g，隨機(jī)分為六組，分別為正常對(duì)照組，血瘀模型組，陽(yáng)性對(duì)照組，本藥物大劑量組，中劑量組、小劑量組。正常對(duì)照組，每天灌胃生理鹽水10ml/kg.bw，連續(xù)7天，第7天停食，次晨取血檢測(cè)；血瘀模型對(duì)照組，每天灌胃大豆色拉油10ml/kg.bw，連續(xù)7天，于第7天皮下注射鹽酸腎上腺素(Adr)注射液0.1ml/100g.bw共2次，兩次間隔4小時(shí)。在二次注射Adr之間(前后各間隔2小時(shí))將大鼠浸入冰水內(nèi)5分鐘，處置后停食，次晨檢測(cè)。陽(yáng)性對(duì)照組每天灌胃多貝斯1.0g/kg.bw(相當(dāng)人用量的40倍)，連續(xù)7天，于第7天按上述方法，復(fù)制血瘀模型，停食后次晨取血檢測(cè)。本藥物大、中、小劑量組，分別每天灌胃1.26g/kg.bw，0.63g/kg.bw及0.315g/kg.bw，連續(xù)7天，于第七天按上述方法復(fù)制血瘀模型，停食后次晨取血檢測(cè)。上述動(dòng)物取血時(shí)，使血自然流入內(nèi)含少量肝素鈉的試管，邊流邊搖使血抗凝，在全自動(dòng)血液流變分析儀&Outh990上檢測(cè)，室溫28℃，樣品恒溫25℃。結(jié)果見(jiàn)表4(附后)。
4.實(shí)驗(yàn)結(jié)論通過(guò)金黃地鼠、大白鼠二種動(dòng)物，三種高血脂模型，從治療和預(yù)防兩個(gè)方面證明血脂平具有降低總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、極低密度脂蛋白及總膽固醇/高密度脂蛋白值的作用，在血脂平對(duì)高血脂SD大鼠預(yù)防實(shí)驗(yàn)中表1血脂平對(duì)高血脂金黃地鼠的治療作用(x±s)給藥前 給藥后組別 劑量 動(dòng)物數(shù) TC TCTGHDL-C LDL-C VLDL-CTC/HDL-C正常對(duì)照組 - 11 1.67±0.52 1.60±0.56**2.79±1.26**1.40±0.38 0.82±0.28**0.78±0.32**1.14±0.47**模型組 - 13 14.02±7.32 12.18±4.82 5.84±2.711.31±1.60 8.78±3.203.40±1.899.29±3.16舒降之 10mg/kg·bw 12 14.36±7.42 5.73±1.17**2.85±0.75**1.87±0.44 4.81±1.04**0.92±0.40**3.06±0.76**血脂平大劑量組 1.26g/kg·bw 13 14.13±9.13 5.96±1.63**2.37±0.84**1.92±0.66 4.83±0.84**1.13±0.43**3.10±0.84**血脂平中劑量組 0.63g/kg·bw 13 13.69±7.83 7.33±2.19**2.18±1.26**1.75±0.49 5.76±1.13*1.54±1.05**4.18±1.14**血脂平小劑量組 0.315g/kg·bw 13 13.89±7.15 11.78±8.55 2.42±2.64**1.55±1.02 8.62±3.653.16±1.567.60±3.18與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01表2血脂平對(duì)高血脂地鼠預(yù)防作用 (x±s)組別 劑量 動(dòng)物數(shù) TC TGHDL-C LDL-C VLDL-C TC/HDL-C正常對(duì)照組 - 10 1.50±0.27**2.49±0.47**1.56±0.3 0.78±0.29**0.72±0.20**0.96±0.25**模型組 - 10 22.46±4.5514.56±3.67 1.37±0.4515.39±2.81 7.07±2.78 7.22±3.16舒降之 10mg/kg·bw10 3.28±1.27**2.03±0.61**2.08±0.47**2.30±0.74**0.98±0.32**1.58±0.56**血脂平大劑量組 1.26g/kg·bw 10 7.96±2.33**2.79±0.89**2.10±0.83*6.60±1.16**1.36±0.43**3.02±1.34**血脂平中劑量組 0.63g/kg·bw 10 12.55±2.83**5.91±1.72**1.77±0.649.68±1.34**2.87±0.84**4.34±1.85*血脂平小劑量組 0.315g/kg·bw 10 19.01±3.1611.03±2.91 1.50±0.7513.69±2.58 5.32±1.44 5.45±2.85與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01
表3血脂平對(duì)高血脂SD大鼠的預(yù)防作用(x±s)n＝10分組 劑量TCTG HDL-C LDL-C VLDL-CTC/HDL-C正常對(duì)照組 - 1.67±0.27**1.06±0.15*0.63±0.16**0.29±0.09**0.51±0.07**2.73±0.45**模型組 - 5.02±1.801.99±0.33 0.32±0.081.81±0.740.93±0.3616.76±8.27舒降之 10mg/kg·bw 2.96±0.37**1.42±0.47*0.48±0.08**0.78±0.07**0.48±0.16**6.28±0.90**血脂平大劑量組 1.26g/kg·bw2.45±0.35**1.35±0.31*0.60±0.04**0.49±0.16**0.65±0.154.25±0.83**血脂平中劑量組 0.63g/kg·bw2.67±0.55**1.48±0.64*0.58±0.13**0.62±0.36**0.69±0.235.34±1.81**血脂平小劑量組 0.315g/kg·bw 3.17±0.661.91±0.75 0.53±0.17**0.72±0.24**0.76±0.31 5.85±2.4**與模型組比較*P＜0.05**P＜0.01表4血脂平對(duì)高血粘度大鼠血滴流變性的影響(x±s)n＝10組別 劑量 纖維蛋白原(g/L) 全血高切粘度(200/s) 全血中切粘度(30/s) 全血低切粘度(1/s) 血漿粘度(mPa.s)對(duì)照組 - 3.65±0.56**5.98±0.72**7.68±1.04*19.65±3.47 1.57±0.22*模型組 - 5.15±0.56 7.07±0.70 8.84±0.88 21.09±0.962.05±0.41多貝斯 1g/kg·bw 3.75±1.49**5.53±0.43**6.93±0.60**17.28±1.77**1.58±0.66*血脂平大劑量組 1.26g/kg·bw 4.26±0.83*6.05±1.20*7.84±1.69 18.26±2.25*1.70±0.22*血脂平中劑量組 0.63g/kg·bw 4.22±0.93*6.37±0.80 8.15±0.12 20.28±1.941.75±0.30血脂平小劑量組 0.315g/kg·bw 4.45±0.95 6.55±0.39 8.49±0.58 20.45±3.711.81±0.41組別 劑量 紅細(xì)胞壓積(Hct) 全血還原粘度(l/s)紅細(xì)胞聚集指數(shù)(AI) 紅細(xì)胞電泳時(shí)間(s) 血沉(mm/h)對(duì)照組 - 0.525±0.025*17.06±3.06*3.16±0.21 20.94±2.51**1.90±0.99模型組 - 0.563±0.030 22.21±4.08 3.38±0.46 24.74±2.442.00±1.05多貝斯 1g/kg·bw 0.529±0.024*19.85±7.92 3.11±1.22 19.34±1.51**1.78±1.09血脂平大劑量組 1.26g/kg·bw0.513±0.049*19.01±5.20 2.89±0.38*21.52±4.182.10±1.98血脂平中劑量組 0.63g/kg·bw0.528±0.037*20.12±7.45 3.23±0.24 22.30±2.791.30±0.67血脂平小劑量組 0.315g/kg·bw 0.553±0.051 20.86±4.24 3.28±0.46 22.93±1.351.60±0.84與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01。
尚有升高高密度脂蛋白的作用。并對(duì)高血粘度大鼠有一定改變血液流變性的作用。
四、毒性試驗(yàn)1.急性毒性試驗(yàn)(1)預(yù)試取小鼠9只，體重18-20g，給藥前禁食6小時(shí)，分3組，劑量分別為30％濃度0.3ml/10g/kg·bw，0.2ml/10g·bw，0.1ml/10g·bw，24小時(shí)內(nèi)灌藥2次，間隔6小時(shí)，給藥后觀察小鼠一般情況。見(jiàn)小鼠活動(dòng)自如，進(jìn)食、飲水正常，大便呈濕潤(rùn)顆粒狀，3個(gè)劑量小鼠72小時(shí)內(nèi)無(wú)1只死亡，也無(wú)明顯中毒反應(yīng)，提示本品難以測(cè)出LD50，故選擇最大受試藥物量試驗(yàn)。
(2)最大受試藥物量試驗(yàn)取小鼠20只，♀♂各半，體重18-20g，給藥前禁食6小時(shí)，以30％濃度的本藥物懸液24小時(shí)內(nèi)分2次灌藥，每次給藥0.3ml/10g·bw，間隔6小時(shí)，給藥后再禁食3小時(shí)，連續(xù)觀察一周，詳細(xì)記錄小鼠行為活動(dòng)、狀態(tài)、飲食、大小便及毛色、分泌物等。
(3)試驗(yàn)結(jié)果20只小鼠外觀體征未見(jiàn)異常，活動(dòng)自如，進(jìn)食、飲水、糞便均正常，皮毛光潔，口、鼻、眼及肛門(mén)清潔無(wú)分泌物，連續(xù)觀察一周，體重有增加，給藥前體重見(jiàn)表5，均值18.95±0.58g，第七日體重見(jiàn)表6，均值為21.75±0.92g，20只小鼠全部存活，無(wú)明顯中毒反應(yīng)，解剖所見(jiàn)胸腔，腹腔未見(jiàn)異常液體，腸管未見(jiàn)脹氣，心、肝、脾、肺、腎等重要臟器未見(jiàn)顏色、形態(tài)異常，沒(méi)有出血點(diǎn)或其它病理改變，胃粘膜顏色紅潤(rùn)，無(wú)出血點(diǎn)或潰瘍，尸檢無(wú)異常。
表5給藥前小鼠體重

表6給藥后1周小鼠體重

(4)試驗(yàn)結(jié)論本藥物給品系小鼠灌胃未測(cè)出LD50，其最大受試藥物量為18g/kg·bw，相當(dāng)生藥149.4g/kg·bw，約為臨床人擬用量的428.6倍。故本試驗(yàn)提供小鼠急性毒性安全用量為18g/kg·bw。
2.長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)(1)試驗(yàn)分組共分為四組，對(duì)照組灌胃大豆色拉油，給藥組灌胃本藥物2.94g/kg·bw，1.47g/kg·bw及0.735g/kg·bw，分別相當(dāng)臨床人擬用量的70、35及17.5倍。給藥或油的體積均為10ml/kg·bw。
(2)動(dòng)物數(shù)每組20只大鼠，雌雄各10只。
(3)給藥途徑及時(shí)間采用灌胃的方式。連續(xù)給藥3個(gè)月，每天9-10點(diǎn)給藥。
觀測(cè)項(xiàng)目1.一般觀察給藥期間每周稱(chēng)體重一次，量飲水食量一次，無(wú)死亡或?yàn)l死動(dòng)物，大鼠毛色光潔，行為活動(dòng)、腺體分泌、呼吸、糞便性狀、食量均正常，體重增長(zhǎng)，與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異，見(jiàn)表7，表8，表9。
2.每組取10只大鼠，♀♂各5只，取尿測(cè)尿常規(guī)，然后用0.35％戊巴比妥鈉1ml/100g/kg·bw腹腔注射麻醉，做心電圖，頸總動(dòng)脈取血，采用F820做血液學(xué)檢測(cè)、采用7170A做血液生化檢測(cè)，最后取大鼠臟器及組織稱(chēng)重，做病理組織檢查。
3.尿常規(guī)檢測(cè)將尿液滴在三聯(lián)試紙上觀察顏色變化，結(jié)果表明，尿蛋白、尿糖均為陰性，尿pH值大劑量為6.52±0.19，中劑量為6.54±0.10，小劑量為6.49±0.15，對(duì)照組為6.50±0.17，各劑量組與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異。
4.心電圖檢測(cè)大鼠在淺麻醉狀態(tài)下，心電圖II導(dǎo)檢測(cè)，心律整齊，無(wú)異常波形，大劑量心率為432±35，中劑量為438±35，小劑量為432±39，對(duì)照組為437±32，各劑量組心率與對(duì)照組比較無(wú)顯著性差異。
5.血液學(xué)指標(biāo)采用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀F820測(cè)紅細(xì)胞、血紅蛋白、白細(xì)胞總數(shù)及其分類(lèi)、血小板，手工計(jì)數(shù)網(wǎng)織紅細(xì)胞及測(cè)定凝血時(shí)間。各劑量組血液學(xué)指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表10(附后)。
6.血液生化指標(biāo)采用全自動(dòng)生化儀7170A檢測(cè)天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(AST)、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)換酶(ALT)、堿性磷酸酶(ALP)、尿素氮(BUN)、總蛋白(TP)、白蛋白(ALb)、球蛋白(G)、血糖(GLU)、總膽紅素(T-BIL)、肌酐(Crea)、總膽固醇(T-CHO)、甘油三酯(TG)共十二項(xiàng)。給藥組三個(gè)劑量與對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表11(附后)。
7.系統(tǒng)尸解和病理組織學(xué)檢查計(jì)算心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、睪丸、前列腺、子宮、卵巢、腦的臟器系數(shù)，給藥組三個(gè)劑量與對(duì)照組比較均無(wú)顯著性差異。見(jiàn)表12(附后)。
先對(duì)高劑量組和對(duì)照組大鼠進(jìn)行病理組織學(xué)檢查，內(nèi)容包括心、肝、脾、肺、腎、腎上腺、胸腺、甲狀腺、睪丸、前列腺、子宮、卵巢、腦、腦垂體、胰腺、胃、十二指腸、小腸、結(jié)腸、胸骨、腸系膜淋巴結(jié)、膀胱主動(dòng)脈共23個(gè)臟器和組織。各臟器與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。
8、恢復(fù)性觀察停藥正常飼養(yǎng)2周，觀察內(nèi)容及檢測(cè)項(xiàng)目與給受試物期間相同。結(jié)果各項(xiàng)檢測(cè)正常，與對(duì)照組比較無(wú)明顯差異，見(jiàn)表13、表14、表15(附后)。
四、試驗(yàn)結(jié)論本藥物粉劑，2.94g/kg·bw，1.47g/kg·bw及0.735g/kg·bw(相當(dāng)原生藥24.4g/kg·bw，12.2g/kg·bw，6.1g/kg·bw)，用大豆油配成29.4％、14.7％及7.35％三個(gè)濃度，給大鼠連續(xù)灌胃三個(gè)月，劑量分別相當(dāng)臨床人擬用量的70、35、17.5倍。每周稱(chēng)體重一次，測(cè)飼料量、飲水量一次，每周給藥7天。最后一次給受試藥物后24小時(shí)，每組活殺10只大鼠，雌雄各半，進(jìn)行相關(guān)檢查，結(jié)果大鼠一般狀況良好，體重均增加，飲水及進(jìn)食均正常，心電圖、尿常規(guī)、血液學(xué)各項(xiàng)檢查、臟器指數(shù)給藥組與對(duì)照組比較均無(wú)明顯差異。血液生化檢查中，大劑量組總膽固醇顯著低于對(duì)照組，其他生化指標(biāo)與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異。停藥2周后，再活殺留下的大鼠，檢查項(xiàng)目同上，給藥組各指標(biāo)與對(duì)照組比較均無(wú)顯著差異。據(jù)此，在大鼠灌胃給藥3個(gè)月的長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中，未發(fā)現(xiàn)明顯的毒性反應(yīng)及延遲性毒性反應(yīng)，本實(shí)驗(yàn)提供大鼠安全用量為2.94g/kg，相當(dāng)原生藥24.4g/kg，為臨床人擬用量的70倍。
表7♀大鼠給藥三個(gè)月及恢復(fù)期體重變化(g，x±s)n＝10給藥周數(shù)對(duì)照組 大量組 中量組 小量組0 104.4±7.88 104.2±9.26 101.2±8.12103.4±7.721 122.0±7.60 123.8±10.17123.2±12.80 127.4±9.092 144.6±9.39 148.2±16.12143.2±16.14 145.4±17.693 163.4±12.58157.6±14.57142.6±18.01 164.8±23.424 168.4±12.39170.8±17.44177.6±19.02 170.3±18.295 180.2±10.13183.2±17.57189.8±21.51 192.4±32.716 192.6±12.40192.6±19.44202.4±18.99 204.2±34.927 201.2±12.19203.0±20.66207.8±19.26 212.8±37.348 207.2±11.63211.6±20.61214.8±18.07 230.6±39.639 210.8±11.28215.4±24.44220.2±18.00 232.8±42.0510 217.9±13.39224.2±24.01226.8±18.98 240.8±43.1511 221.2±15.03231.2±31.44230.4±20.04 245.8±43.6912 224.6±17.31239.0±31.10240.2±19.33 254.0±43.6313 229.2±15.58244.4±30.18239.8±20.56 257.8±48.8214 235.4±19.21248.6±35.11248.2±20.67 258.6±48.9015 249.6±10.5 253.2±37.49249.6±16.15 255.6±47.7216 240.0±8.72 252.8±31.89246.0±19.34 252.0±42.97注第15、16周為恢復(fù)期，動(dòng)物數(shù)每組為5。
表8♂大鼠給藥三個(gè)月及恢復(fù)期體重變化(g，x±s)n＝10給藥周數(shù)對(duì)照組 大量組 中量組 小量組1 129.2±12.3132.6±15.3133.6±15.4135.6±11.72 143.6±10.5153.4±18.9156.3±22.0156.2±9.73 169.6±15.7172.0±18.0176.9±29.6181.0±16.44 194.6±21.6199.0±26.4189.6±36.5205.8±21.05 212.2±32.2211.0±33.3201.1±46.9227.0±21.96 240.8±40.2234.6±34.9212.6±32.5257.0±19.57 258.6±50.2258.2±37.9250.0±55.1284.0±22.18 294.6±47.2282.8±36.5268.4±67.2305.4±22.39 307.6±50.6293.6±36.8283.2±67.7314.8±22.110 325.6±52.4313.6±46.9300.4±69.8335.6±24.611 333.6±56.2315.6±47.0327.5±69.2343.2±26.912 353.4±57.8337.2±47.5354.6±69.7352.6±29.113 358.2±52.4348.0±47.0357.8±68.8363.8±32.714 386.8±54.1358.0±44.0369.5±72.4383.6±29.115 388.8±64.0360.0±48.9377.6±35.1393.2±30.816 388.8±62.2366.4±45.1364.8±37.8391.6±32.1注第15、16周為恢復(fù)期，動(dòng)物數(shù)每組為5。
表9大鼠給藥三個(gè)月飼料及水消耗量(g/天·20只ml/天·20只)n＝20對(duì)照組 大量組 中量組 小量組周數(shù)飼料飲水飼料飲水飼料飲水飼料飲水1 224 360 241 367 238 387 272 3922 238 380 251 387 248 417 292 4873 292 420 243 438 241 515 324 4954 287 448 265 435 258 428 279 4855 283 395 205 338 245 403 290 4406 322 410 320 395 313 423 352 4937 340 450 357 415 332 423 356 3808 340 400 360 455 361 458 371 4149 360 389 360 360 361 458 370 41510 389 419 388 470 392 472 397 44311 420 467 400 478 393 473 406 43312 445 490 414 488 416 473 423 42413 453 497 426 470 414 451 434 44714 460 485 440 480 427 457 448 47515 219 230 198 225 225 233 215 24016 230 238 208 235 238 240 224 250注第15、16周為恢復(fù)期，動(dòng)物數(shù)每組為10。
表10大鼠給藥三個(gè)月血液學(xué)檢查(x±s)n＝10項(xiàng)目 單位 對(duì)照組 大量組 中量組 小量組RBC ×1012/L 8.13±0.97 7.96±0.79 7.92±0.68 7.95±1.23Hbg/L 174.30±17.22 164.40±9.31159.80±11.77 160.90±9.45WBC ×109/L 11.79±3.32 11.05±3.06 12.10±6.48 10.67±2.99PLT ×109/L 844.13±181.33 752.90±114.69 734.00±190.08 770.70±146.38淋巴 ％70.09±5.96 73.33±6.15 74.38±6.14 73.80±4.70中性 ％29.01±5.96 26.67±6.15 25.62±6.14 26.20±4.70凝血時(shí)間 s 58.50±17.3257.45±21.1659.21±13.2360.66±14.32網(wǎng)織紅細(xì)胞‰ 36.5±8.61 36.30±9.41 36.20±8.43 35.4±7.57
表11大鼠給藥三個(gè)月生化檢查(x±s)n＝10項(xiàng)目 單位 對(duì)照組 大量組中量組 小量組ALT U/L53.9±12.99 52.70±13.98 49.50±13.92 51.90±18.36AST U/L146.6±38.09150.00±28.71147.40±22.23143.00±27.44ALP U/L131.3±40.24116.00±60.52147.90±67.36119.00±36.91T-BIL mol/L 0.52±0.24 0.58±0.40 0.58±0.24 0.61±0.28TPg/L67.7±2.20 66.23±3.82 67.47±4.30 64.33±2.93ALB g/L30.4±2.50 30.37±2.08 29.97±2.48 28.98±2.76G g/L37.3±3.31 36.00±3.06 37.50±3.14 36.40±1.96T-CHO mmol/L 1.77±0.45 1.38±0.28* 1.60±0.18 1.57±0.25TGmmol/L 0.92±0.22 0.82±0.18 0.97±0.33 0.84±0.27BUN mmol/L 6.37±1.37 6.32±1.26 5.54±1.47 5.84±1.50Crea μmol/L35.80±7.47 36.80±8.36 34.20±5.94 33.74±5.10GLU mmol/L 6.46±1.26 6.92±1.24 5.54±1.47 5.96±0.81與對(duì)照組比較*P＜0.05表12大鼠給藥三個(gè)月重要臟器指數(shù)(x±s)n＝10項(xiàng)目 臟器數(shù)(個(gè))單位對(duì)照組大量組中量組小量組心臟 10％ 0.34±0.020.34±0.040.36±0.040.35±0.05肝臟 10％ 2.65±6.282.68±0.262.56±0.342.66±0.35肺臟 10％ 0.63±0.100.59±0.140.62±0.130.70±0.15脾臟 10％ 0.36±0.030.33±0.040.35±0.120.36±0.05腎臟 10％ 0.67±0.060.72±0.160.65±0.060.61±0.11腦10％ 0.67±0.160.70±0.160.63±0.190.67±0.13胸腺 10‰1.02±0.280.88±0.210.99±0.201.02±0.43腎上腺10‰0.23±0.070.23±0.080.25±0.060.22±0.11前列腺5 ％ 0.19±0.020.19±0.020.18±0.010.19±0.04睪丸 5 ％ 1.44±0.091.54±0.111.53±0.241.43±0.11子宮 5 ％ 0.30±0.110.27±0.130.32±0.100.27±0.06
卵巢 5 ‰0.69±0.070.66±0.060.71±0.130.68±0.10表13血脂平恢復(fù)期大鼠血液生化檢查(x±s)n＝10項(xiàng)目 單位 對(duì)照組 大劑量組 中劑量組小劑量組ALT U/L 38.8±5.53 38.3±12.8842.8±14.41 41.2±11.19AST U/L 218.4±32.65233.7±34.86 235.9±40.04212.4±42.34ALP U/L 91±32.84 98±23.27 108.5±47.16112.2±51.97T-BILmol/L 0.61±0.19 0.50±0.24 0.67±0.24 0.59±0.21TP g/L 67.94±1.97 69.09±4.3968.69±3.16 67.74±2.13ALB g/L 28.22±2.08 29.75±2.8529.29±2.09 28.74±1.92Gg/L 39.8±1.93 39.3±2.75 39.5±2.84 39.1±1.60T-CHOmmol/L1.47±0.40 1.39±0.18 1.48±0.32 1.41±0.24TG mmol/L0.69±0.17 0.62±0.14 0.71±0.10 0.77±0.38BUN mmol/L5.96±1.17 6.24±1.69 6.22±1.77 6.25±1.86Crea μmol/L 29.1±4.67 30.1±7.58 32.5±4.03 29.8±2.81GLU mmol/L4.78±0.80 4.43±1.12 4.65±0.73 4.03±1.46表14恢復(fù)期大鼠血液學(xué)檢查(x±s)n＝10項(xiàng)目單位對(duì)照組 大劑量 中劑量 小劑量WBC ×109/L12.66±2.13 12.78±3.68 13.90±2.07 12.35±2.33RBC ×1012/L 8.71±1.78 9.71±1.56 9.17±0.87 8.54±1.37Hb g/L 186.4±28.70198±24.98 185.6±15.65 174.3±28.46PLT ×109/L749±207.50 728.4±195.42839.9±211.02715.6±185.87淋巴％ 67.56±5.74 69.8±4.84 71.96±4.43 63.15±8.59中性％ 33.44±5.74 30.2±4.84 29.04±4.43 36.85±8.59凝血時(shí)間s 58.85±15.4258.32±18.31 57.68±14.21 58.96±15.96網(wǎng)織紅細(xì)胞 ‰ 49.60±15.1457.40±15.01 50.00±16.69 46.60±12.00
表15恢復(fù)期大鼠各重要臟器指數(shù)(x±s)n＝10項(xiàng)目 臟器數(shù)(個(gè))單位對(duì)照組大量組中量組小量組心臟 10％ 0.36±0.050.36±0.050.34±0.050.37±0.05肝臟 10％ 2.42±0.192.45±0.282.35±0.392.48±0.16脾臟 10％ 0.33±0.080.33±0.100.31±0.060.36±0.10肺臟 10％ 0.55±0.110.59±0.090.57±0.100.55±0.11腎臟 10％ 0.56±0.030.55±0.050.55±0.070.57±0.05腦10％ 0.60±0.120.61±0.120.56±0.060.62±0.14胸腺 10‰1.05±0.341.03±0.311.07±0.331.07±0.30腎上腺10‰0.22±0.070.23±0.310.22±0.060.27±0.11睪丸 5 ％ 1.29±0.201.34±0.161.41±0.211.31±0.09前列腺5 ％ 0.17±0.030.18±0.030.19±0.050.19±0.05子宮 5 ％ 0.22±0.070.22±0.100.22±0.070.26±0.06卵巢 5 ‰0.53±0.050.60±0.100.53±0.090.55±0.11實(shí)施例1按下述配比稱(chēng)取原料(克)虎 杖285昆 布285山楂葉315澤 瀉158白芥子158水 蛭80 膠股藍(lán)158牛 膝158制法如下取虎杖285克、山楂葉315克、澤瀉158克、絞股藍(lán)158克、牛膝158克加70％乙醇回流提取2次，溶劑倍數(shù)分別為5、5倍，回流時(shí)間分別為1.5、1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣另器保存)回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，備用；取昆布285克、水蛭80克、白芥子158克與上渣混合，加水煎煮2次，加水量分別為8、8倍，每次煎煮1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.15(60℃)，放涼，加入95％乙醇使含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)，回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，與醇提清膏均勻混合，于65℃減壓干燥，粉碎并過(guò)成180目細(xì)粉，備用；取干膏粉1克，輔料(蜂蠟∶大豆色拉油＝3∶97)1.07份充分混合均勻，在37～40℃下過(guò)80目篩，將過(guò)篩后的混懸料于50℃保溫下灌封于10#膠囊中，即得。
實(shí)施例2按下述配比稱(chēng)取原料(克)虎 杖315昆 布315山楂葉285澤 瀉125白芥子125水 蛭45 膠股藍(lán)125牛 膝125制法如實(shí)施例1。
實(shí)施例3按下述配比稱(chēng)取原料(克)虎 杖300昆 布300山楂葉300澤 瀉150白芥子150水 蛭75 膠股藍(lán)150牛 膝150制法如實(shí)施例1。
權(quán)利要求
1.一種治療高脂血癥的藥物，其特征在于它是由以下原料按重量百分比制成虎杖18％～20％昆布18％～20％ 山楂葉18％～20％ 澤瀉8％～10％白芥子8％～10％ 水蛭3％～5％ 膠股藍(lán)8％～10％ 牛膝8％～10％原料的總量為100％。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的治療高脂血癥的藥物，其特征在于各原料的重量百分比是虎杖19％ 昆布19％ 山楂葉19％ 澤瀉9.5％白芥子9.5％ 水蛭5％ 膠股藍(lán)9.5％ 牛膝9.5％原料的總量為100％。
3.一種治療高脂血癥藥物的制備方法，其特征在于取虎杖18％～20％、山楂葉18％～20％、澤瀉8％～10％、絞股藍(lán)8％～10％、牛膝8％～10％加70％乙醇回流提取2次，溶劑倍數(shù)分別為5、5倍，回流時(shí)間分別為1.5、1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣另器保存)回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，備用；按比例取昆布18％～20％、水蛭3％～5％、白芥子8％～10％與上渣混合，加水煎煮2次，加水量分別為8、8倍，每次煎煮1.5小時(shí)，合并2次濾液(藥渣棄)，減壓濃縮至相對(duì)密度為1.06～1.15(60℃)，放涼，加入95％乙醇使含醇量達(dá)60％，冷藏24小時(shí)，回收乙醇，溶液減壓濃縮至相對(duì)密度為1.32～1.35(60℃)的清膏，與醇提清膏均勻混合，于65℃減壓干燥，粉碎并過(guò)成180目細(xì)粉，備用；取干膏粉1克，輔料(蜂蠟∶大豆色拉油＝3∶97)1.07份充分混合均勻，在37～40℃下過(guò)80目篩，將過(guò)篩后的混懸料在50℃條件下保溫，即得。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療高脂血癥的藥物及其制備方法，該藥為純中藥藥物，它是由虎杖、昆布、山楂葉、澤瀉、白芥子、水蛭、絞股藍(lán)、牛膝為原料，按照比例，根據(jù)每味中藥的不同特性，經(jīng)回流提取、濾液濃縮、混合煎煮，濃縮、放涼、再經(jīng)干燥處理制得。本發(fā)明的藥物在治療高脂血癥方面，副作用小，用藥安全，可以長(zhǎng)期服用，其制作方法獨(dú)特，治療效果顯著。
文檔編號(hào)A61P3/00GK1616000SQ200410073058
公開(kāi)日2005年5月18日 申請(qǐng)日期2004年9月8日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月8日
發(fā)明者王小莉 申請(qǐng)人:楊凌華盛生物制藥有限公司