專利名稱：葫蘆素脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，確切地說它是一種葫蘆素脂質(zhì)體(包括前體脂質(zhì)體)及其制備方法。
背景技術(shù)：
葫蘆素(cucurbitacin)是從中藥甜瓜蒂中提取分離出的成分，具有多種生物活性，有細(xì)胞毒和抗腫瘤，保肝，抗肝炎，提高免疫功能等作用。主要含葫蘆素B、E等，其中含葫蘆素B80％以上，為治療肝炎及肝癌的有效成份。葫蘆素片用于治療慢性肝炎---葫蘆素片藥學(xué)通報1986，21(6)357)，經(jīng)上海、北京、重慶等地十三家醫(yī)院臨床，其有效率為75.2％，顯效率為44.6％中草藥1987，18(10)1984，3(2)21-22，葫蘆素的藥理與臨床應(yīng)用中草藥1992，23(11)，另有文發(fā)現(xiàn)葫蘆素B，E(II)20μg/ml對癌細(xì)胞的殺傷率為82.6％，濃度提高至80μg/ml時，其殺傷率達(dá)94.1％，而對正常人淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率的影響則分別為90.6％及89.5％。浙江中醫(yī)學(xué)院學(xué)報1994，18(4)18～19，有文獻(xiàn)指出，長療程用藥6周能明顯抑制肝纖維組織增生，防止肝脂肪變性以及肝硬變的形成和發(fā)展；RP-HPLC法測定葫蘆素滴丸中葫蘆素B的含量中草藥2003年05期由于葫蘆素B的最大吸收波長為228nm，而色譜純甲醇在230nm的吸光度約為0.15，本底吸收大，不同程度地影響到測定結(jié)果。建立了乙腈0.1mol/LK2HPO4為流動相的色譜系統(tǒng)，使葫蘆素B與其他成分達(dá)到良好分離。葫蘆素BE聚乳酸納米微粒對口腔癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的靶向性評價華西口腔醫(yī)學(xué)雜志2003年06期探討平均粒徑為85nm的葫蘆素BE聚乳酸納米微粒對口腔癌頸淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移灶的靶向性及靶向程度。葫蘆素脂肪乳劑成型性影響因素考察 張利，侯世祥，王昶光 中南藥學(xué)2004年02期以 葫蘆素脂肪乳的外觀、粒徑、藥物含量及穩(wěn)定性為指標(biāo)，分別考察滲透壓、高壓乳勻、pH、空氣置換刑及滅菌等因素對乳劑成型性的影響。四川大學(xué)華西醫(yī)學(xué)院的研究人員研究了葫蘆素聚乳酸毫微粒凍干針劑；生物利用度低，而將葫蘆素制成脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體未見推薦。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供葫蘆素脂質(zhì)體和前體脂質(zhì)體及其制備方法，以改善葫蘆素難溶于水，口服吸收差，且生物利用度低。同時作為膜材的磷脂，本身無毒，而且能增強人體免疫力，具有許多保健功能。
本發(fā)明是由葫蘆素與磷脂加膽固醇，也可不加膽固醇等輔料制備而成的(納米)脂質(zhì)體。制備方法可以采用前體脂質(zhì)體法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、PH梯度法、擠出法、機械法等制備脂質(zhì)體和納米脂質(zhì)體的各種方法。機械法可為乳勻機、高壓乳勻機、納米機、勻漿機、高壓微射流等各種機械設(shè)備制備脂質(zhì)體的方法。制備脂質(zhì)體的磷脂，可以是大豆卵磷脂、氫化大豆磷脂，也可以是合成磷脂，由乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出法、機械法制備葫蘆素脂質(zhì)體，其組成包括葫蘆素磷脂、膽固醇、VE等輔料.其中磷脂與葫蘆素的重量比為0.1∶1～40∶1，膽固醇與磷脂的重量比為0～2∶1。
通過前體脂質(zhì)體法制備脂質(zhì)體的處方為葫蘆素、支持劑、磷脂、膽固醇、VE等。磷脂與葫蘆素的重量比為0.1∶1～40∶1，膽固醇與磷脂的重量比為0～2∶1，支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～400∶1。支持劑可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等所用可用于凍干支持劑的藥用材料或藥用輔料。制備前脂質(zhì)體的方法，可以采用減壓旋轉(zhuǎn)薄膜法、噴霧干燥法、流化床法或凍干法等各種造粒方法和干燥及包衣方法。前體脂質(zhì)體使用前加水或緩沖液通過振搖、攪拌、超聲水化形成脂質(zhì)體，或制備成膠囊劑、片劑、顆粒劑等。在消化道中遇水直接自發(fā)形成脂質(zhì)體。
用葫蘆素脂質(zhì)體(或前體脂體)可以制成片劑、口服液、口服乳、膠囊劑、顆粒劑、注射液、凍干粉針、輸液乳劑、微乳劑、粉針劑等劑型。
本發(fā)明的優(yōu)點是改善葫蘆素口服吸收差，生物利用度低的不足，利用磷脂作膜材，將葫蘆素制成脂質(zhì)體，磷脂能與葫蘆素發(fā)揮協(xié)同和輔助作用，提高葫蘆素的療效。
具體實施例方式本發(fā)明的具體制備方法，由下列實施實例舉例說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍，不局限于此。
實施例1乙醇注入法制備葫蘆素脂質(zhì)體取大豆磷脂，膽固醇，VE加無水乙醇溶解后注入葫蘆素水溶液中，恒溫高速攪拌，減壓蒸發(fā)除去乙醇，過微孔濾膜整粒，即得葫蘆素脂質(zhì)體，包封率可達(dá)62.8％。
實施例2薄膜分散法制備葫蘆素脂質(zhì)體取大豆磷脂，膽固醇，VE用15ml氯仿溶解于150ml茄形瓶中，在旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)器上減壓成膜并除盡有機溶劑，加10ml葫蘆素水溶液水化，過微孔濾膜整粒，得葫蘆素脂質(zhì)體，包封率可達(dá)60.1％。
實施例3反相蒸發(fā)法制備葫蘆素脂質(zhì)體稱取大豆磷脂、膽固醇、VE加5ml氯仿使溶解，再加入10ml乙醚，然后加入15ml葫蘆素的磷酸鹽緩沖液中，浴式超聲使形成均一單相體系，減壓蒸發(fā)去除氯仿乙醚至凝膠形成，繼續(xù)減壓蒸發(fā)5～10分鐘，渦旋振蕩至水性懸濁液即脂質(zhì)體形成。包封率可達(dá)27.5％。
實施例4減壓旋轉(zhuǎn)薄膜法制備葫蘆素前體脂質(zhì)體取山梨醇和葫蘆素以等量遞加法混合均勻后置于100ml茄形瓶中，于一經(jīng)改良的旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓預(yù)熱30分鐘，取大豆磷脂、膽固醇、VE適量溶于乙醇液，真空旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)。在乙醇液全部加完后繼續(xù)減壓蒸發(fā)30～40分鐘，將粉末取出置于干燥器中過夜后過篩(40目，450μm)，即得葫蘆素前體脂質(zhì)體。包封率可達(dá)22.8％。
實施例5流化床法制備葫蘆素前體脂質(zhì)體山梨醇和葫蘆素以等量遞加法混合均勻后置于流化床中，取大豆磷脂、膽固醇、VE適量溶于無水乙醇中，通過流化床沸騰一步制粒，過篩，即得葫蘆素前體脂質(zhì)體。
實施例6流化床法制備葫蘆素前體脂質(zhì)體葫蘆素加蒸餾水，再加0.1N NaOH調(diào)PH使溶解，用蒸餾水調(diào)整體積(A液)；另取大豆磷脂、膽固醇、VE溶于無水乙醇中，通過流化床沸騰一步制粒，過20目和60目篩，即得葫蘆素前體脂質(zhì)體顆粒。
實施例7噴霧干燥法制備葫蘆素前體脂質(zhì)體葫蘆素加水，0.1N NaOH調(diào)PH使溶解，加入乳糖和EDTA并使溶解(A液)。另取大豆磷脂、膽固醇、VE溶于100ml無水乙醇中(B液)。將B液在攪拌下緩慢加入A液中，噴霧干燥制粒，過篩，即得葫蘆素脂質(zhì)體。
實施例8乙醇注入法、薄膜分散法制備的脂質(zhì)體，噴霧干燥，即得葫蘆素前體脂質(zhì)體。
實施例9由前體脂質(zhì)體制備葫蘆素脂質(zhì)體。取實施例7制得的前體脂質(zhì)體2g，，加水10ml振搖10分鐘并水化，即得葫蘆素脂質(zhì)體，顯微鏡放大1000倍觀察可看到脂質(zhì)體。
實施例10冷凍干燥法制備葫蘆素前體脂質(zhì)體大豆磷脂、膽固醇、適量VE加無水乙醇溶解后在高速攪拌緩慢注入葫蘆素水溶液中，減壓蒸發(fā)除去乙醇。冷凍干燥24小時，得葫蘆素前體脂質(zhì)體。
實施例11將葫蘆素脂質(zhì)體過0.22μm微孔濾膜滅菌，充氮氣，灌封，得葫蘆素脂質(zhì)體注射液。
實施例12將葫蘆素脂質(zhì)體加入10％蔗糖，過0.22μm微孔濾膜滅菌，分裝，冷凍干燥，得粉針劑。
實施例13將葫蘆素前體脂質(zhì)體過篩，分裝，得葫蘆素脂質(zhì)體顆粒劑。
實施例14將葫蘆素前體脂質(zhì)體過篩，裝膠囊，得葫蘆素脂質(zhì)體膠囊劑。
實施例15將葫蘆素前體脂質(zhì)體過篩，壓片，得葫蘆素脂質(zhì)體片劑。
本發(fā)明不限于以上所述的實施例。
權(quán)利要求
1.葫蘆素脂質(zhì)體及其制備方法，其特征在于由葫蘆素與磷脂等輔料制備而成的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葫蘆素脂質(zhì)體，其特征在于其中可以加入膽固醇和支持劑。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葫蘆素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于膜材磷脂可以采用天然磷脂，也可以是采用氫化大豆磷脂和合成磷脂等。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葫蘆素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于磷脂與藥物的重量比為0.1∶1～40∶1.
5.根據(jù)權(quán)利要求2述的葫蘆素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于支持劑可以山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、甜菊糖、葡萄糖、乳糖等，其中支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～400∶1。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葫蘆素脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其特征在于用該脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體可制得膠囊劑、片劑、顆粒劑、注射液、口服液、凍干粉針、輸液等劑型。
7.一種如權(quán)利要求1所述的葫蘆素脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于制備方法可以采用前體脂質(zhì)體法、乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出儀、機械法，PH梯度法等；機械法包括使用均質(zhì)機、乳勻機、擠出機、納米機、勻漿機、高壓微射流等各種機械設(shè)備制備脂質(zhì)體的方法。
8.一種如權(quán)利要求7所述的葫蘆素前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于采用前體脂質(zhì)體法制備葫蘆素脂質(zhì)體，先制備前體脂質(zhì)體，由制備的前體脂質(zhì)體在使用前形成脂質(zhì)體，或前體脂質(zhì)體制備成膠囊劑、片劑、顆粒劑等，在消化道中遇水直接自發(fā)形成脂質(zhì)體。
全文摘要
本發(fā)明是葫蘆素脂質(zhì)體及其制備方法，它克服了葫蘆素口服吸收差，生物利用度低的缺點，提高了制劑的穩(wěn)定性。由葫蘆素與磷脂、膽固醇等輔料制備而成的脂質(zhì)體或前體脂質(zhì)體，其中還可加入支持劑等輔料。膜材磷脂可以采用天然磷脂或合成磷脂，磷脂與藥物的重量比為0.1∶1～40∶1。制備方法可以采用乙醇注入法、薄膜分散法、反相蒸發(fā)法、擠出法、機械法，支持劑可以是山梨醇、甘露醇、蔗糖、氯化鈉、水溶性淀粉、右旋糖苷、葡萄糖、乳糖等。支持劑與磷脂的比例為0.01∶1～400∶1。葫蘆素具有多種生物活性，有細(xì)胞毒和抗腫瘤，保肝，抗肝炎，提高免疫功能等作用。
文檔編號A61P1/16GK1723906SQ200410054739
公開日2006年1月25日 申請日期2004年7月19日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月19日
發(fā)明者胡才忠 申請人:胡才忠