專利名稱：一種抗老年癡呆癥復(fù)合制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于西藥領(lǐng)域。具體地講，涉及一種治療抗老年癡呆癥的尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的藥物組合及其制備方法。
背景技術(shù)：
目前全球人口老齡化的趨勢(shì)日益明顯。隨著新世紀(jì)的到來，我國老齡化社會(huì)已經(jīng)是活生生的現(xiàn)實(shí)現(xiàn)在我國60歲以上的老人有1.26億，到本世紀(jì)中葉，將達(dá)到4.1億。我國是在社會(huì)、經(jīng)濟(jì)不太發(fā)達(dá)，各地區(qū)發(fā)展水平又不平衡的情況下進(jìn)入老齡社會(huì)的，這種社會(huì)矛盾將給我國帶來比發(fā)達(dá)國家更多更嚴(yán)重的一系列醫(yī)療和社會(huì)問題。目前老齡問題得到了全社會(huì)的廣泛關(guān)注。因而深入研究衰老，特別是腦衰老和其相關(guān)的疾病，例如帕金森綜合癥(Parkinson’s disease，PD)、老年癡呆癥(Alzheimer，AD)和克雅氏癥(Jakob-Creutzfeldt)等疾病，顯得尤為迫切。老年癡呆癥是一種原發(fā)性退行性灰質(zhì)腦病，其特點(diǎn)是形態(tài)學(xué)上出現(xiàn)大腦皮質(zhì)萎縮，并伴有神經(jīng)元纖維纏繞(neurofibrillary tangles，NFTS)及老年斑(senile plaques，SPs)。SPs是沉積在AD病人腦中的淀粉樣蛋白，由42個(gè)氨基酸構(gòu)成，其β折疊處于腦血管壁上，因此稱β淀粉樣蛋白在SP中，沉積周圍有水腫，營養(yǎng)不良性軸索，軸突，樹突，星狀細(xì)胞和小角質(zhì)細(xì)胞。老年癡呆癥患者，記憶力嚴(yán)重喪失，失去自立和生活能力，給病人帶來極大痛苦，給家庭帶來巨大負(fù)擔(dān)。
國內(nèi)外的研究進(jìn)展、目前還沒有一種特效藥物用于治療老年癡呆癥。采取乙酰膽堿前體物和卵磷脂雖然歷史很久，絕大多數(shù)報(bào)道認(rèn)為無效。對(duì)膽堿酯酶抑制劑和乙酰膽堿受體激動(dòng)劑的評(píng)價(jià)是療效輕微，副作用明顯。神經(jīng)肽及其類似物臨床實(shí)驗(yàn)結(jié)果也不佳，僅有改善記憶和提高情緒作用。治療的措施的另外方法是腦血管擴(kuò)張藥物，如長春胺等，存在的問題是只適合部分患者，而且有副作用。目前國內(nèi)外仍然沒有好的解決辦法。

發(fā)明內(nèi)容
鑒于上述的原因，尋求一種新的藥物治療老年癡呆癥的問題當(dāng)前有著迫切的需要。為此，本發(fā)明的目的就是在于提供一種由尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C組成的用于治療老年癡呆癥有效的藥物復(fù)合制劑。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種制備用于臨床治療老年癡呆癥的藥物復(fù)合制劑的方法。
本發(fā)明提供的一種有效的用于臨床治療老年癡呆癥的復(fù)合制劑是由尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C以如下所述的不同比例組成的。
本發(fā)明所述的不同比例組成是指尼古丁∶大豆異黃酮∶維生素E∶維生素C的重量比例組成，其中膠囊，片劑藥物復(fù)合制劑的藥物重量比為尼古丁∶大豆異黃酮∶維生素E∶維生素C1∶3∶3∶3或0.5∶1.5∶3∶5或0.3∶2.7∶3∶4。除有效藥物成分外，膠囊，片劑中還含有添加劑。
具體以每粒膠囊300毫克計(jì)，有效藥物成分為10％，其它添加葛根粉，其尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶3∶3∶3或0.5∶1.5∶3∶5或0.3∶2.7∶3∶4。片劑中所含有的添加劑為淀粉，其有效藥物成分和重量比例與膠囊復(fù)合制劑相同。
復(fù)合制劑口服液的配置是將組合藥物溶解在10％的蜂蜜中，有效成分為10％，其尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶1.7∶0.3∶7或0.3∶2.4∶0.3∶7或0.5∶1.2∶0.3∶8。應(yīng)當(dāng)指出的是，上述重量比例組成是本發(fā)明的各組分之間優(yōu)選的比例、不排除適當(dāng)調(diào)整它們之間的比例也能達(dá)到本發(fā)明的目的。其計(jì)量方式都按重量方式計(jì)算。上述涉及的藥物復(fù)合制劑的組分是市場(chǎng)可以采購到的藥用級(jí)的產(chǎn)品。
本發(fā)明所提供的上述的抗老年癡呆癥藥物復(fù)合制劑，經(jīng)過細(xì)胞和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，探明作用機(jī)理，多次臨床實(shí)驗(yàn)證明，具有以下功能特征和效果1、抗老年癡呆癥組合藥物復(fù)合制劑對(duì)羥基、超氧陰離子自由基有明顯清除作用。
2、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞活性降低有明顯保護(hù)作用。
3、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞凋亡有明顯保護(hù)作用。
4、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧有明顯抑制作用。
5、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)鈣增加有明顯抑制作用。
6、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞caspase-3酶活有明顯抑制作用。
7、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ沉積有明顯抑制作用。
8、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)金屬離子沉積有明顯抑制作用。
至今為止，還未發(fā)現(xiàn)有任何一種與本發(fā)明藥物組合有關(guān)的相同的報(bào)道。


圖1、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)羥基和超氧陰離子自由基的清除作用。
圖2、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞活性的保護(hù)作用。
1、對(duì)照海馬細(xì)胞；2、50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；3、先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；4、先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞。*與Aβ處理海馬細(xì)胞相比P＜0.05。
圖3、利用熒光技術(shù)測(cè)定的抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用。A對(duì)照；B對(duì)照+抗老年癡呆癥復(fù)合制劑；G對(duì)照+淀粉樣蛋白Aβ；E對(duì)照+淀粉樣蛋白Aβ+抗老年癡呆癥復(fù)合制劑。
圖4、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧的抑制作用。
1、對(duì)照海馬細(xì)胞；2、50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；3、先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；4、先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞。*與Aβ處理海馬細(xì)胞相比P＜0.05。
圖5、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)鈣增加的抑制作用。
1、對(duì)照海馬細(xì)胞；2、50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；3、先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；4、先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞。*與Aβ處理海馬細(xì)胞相比P＜0.05。
圖6、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞caspase-3酶活的抑制作用。
1、對(duì)照海馬細(xì)胞；2、50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；3、先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞；4、先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞。*與Aβ處理海馬細(xì)胞相比P＜0.05。
圖7、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ沉積的抑制作用。A、轉(zhuǎn)基因鼠腦切片；B、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑喂食AD轉(zhuǎn)基因鼠半年腦切片。
圖8、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物膠囊對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)金屬離子沉積的抑制作用。1對(duì)照轉(zhuǎn)基因鼠腦組織銅含量；2尼古丁處理轉(zhuǎn)基因鼠腦組織銅含量；3、對(duì)照轉(zhuǎn)基因鼠腦Aβ沉積斑中銅含量；4尼古丁處理轉(zhuǎn)基因鼠腦Aβ沉積斑中銅含量；5對(duì)照轉(zhuǎn)基因鼠腦組織鐵含量；6尼古丁處理轉(zhuǎn)基因鼠腦組織鐵含量；7、對(duì)照轉(zhuǎn)基因鼠腦Aβ沉積斑中鐵含量；8尼古丁處理轉(zhuǎn)基因鼠腦Aβ沉積斑中鐵含量；*與對(duì)照鼠相比P＜0.05。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施例來進(jìn)一步闡明本發(fā)明組合藥物抗老年癡呆癥復(fù)合制劑的制備方法。
實(shí)施例1、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑膠囊的制備每粒300毫克，有效成分為10％，其它添加葛根粉。尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶3∶3∶30.5∶1.5∶3∶50.3∶2.7∶3∶4實(shí)施例2、老年癡呆癥的組合藥物口服液的制備將組合藥物溶解在10％的蜂蜜中，有效成分為10％。尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶1.7∶0.3∶70.3∶2.4∶0.3∶70.5∶1.2∶0.3∶8實(shí)施例3、老年癡呆癥的組合藥物片劑的制備每片300毫克，有效成分為10％，其它添加劑為淀粉。尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶3∶3∶30.5∶1.5∶3∶50.3∶2.7∶3∶4試驗(yàn)例以下通過具體的試驗(yàn)例進(jìn)一步闡明本發(fā)明組合藥物復(fù)合制劑的效果。
1、老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)自由基的清除作用。
自由基，特別是活性氧自由基，如羥基、超氧陰離子自由基，是引起老年癡呆癥的重要因素?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)羥基、超氧陰離子自由基有明顯清除作用。由圖7可以看出，抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)羥基和超氧陰離子自由基的清除作用的IC50幾乎是一樣的，大約為7μM。從總趨勢(shì)看，抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)超氧陰離子自由基的清除作用比對(duì)羥基的清除作用略強(qiáng)(圖1)。
2、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞活性的保護(hù)作用淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞活性降低是引起老年癡呆癥的重要表現(xiàn)?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞活性有明顯的保護(hù)作用。用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞24小時(shí)細(xì)胞活力只有大約40％；先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞活力恢復(fù)到大約55％；先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞活力恢復(fù)到大約65％。(圖2)。
3、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡的保護(hù)作用淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡是引起老年癡呆癥的重要特征?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡有明顯的保護(hù)作用。用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞24小時(shí)細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡；先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡受到一定抑制；先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞核的斷裂和細(xì)胞凋亡得到明顯抑制。(圖3)。
4、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧的抑制作用細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧是引起老年癡呆癥的重要因素?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧有明顯的抑制作用?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧有明顯抑制作用。用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞24小時(shí)細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧增加大約100％；先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧降低大約15％；先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧降低大約25％。(圖4)5、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)鈣增加的抑制作用細(xì)胞內(nèi)鈣增加是Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞凋亡的重要表現(xiàn)?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞內(nèi)鈣積累有明顯抑制作用。用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞24小時(shí)細(xì)胞內(nèi)鈣積累增加大約100％；先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)鈣積累降低大約38％；先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)產(chǎn)生活性氧降低大約50％。(圖5)6、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞凋亡蛋白酶(caspase-3)酶活的抑制作用caspase-3酶激活是細(xì)胞凋亡重要步驟?？估夏臧V呆癥復(fù)合制劑對(duì)淀粉樣蛋白Aβ誘導(dǎo)海馬細(xì)胞caspase-3酶活有明顯的抑制作用。用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理海馬細(xì)胞24小時(shí)細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白酶(caspase-3)酶活增加大約100％；先用1μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白酶(caspase-3)酶活降低大約28％；先用10μM尼古丁預(yù)處理再用50μM淀粉樣蛋白Aβ處理，細(xì)胞內(nèi)凋亡蛋白酶(caspase-3)酶活降低大約35％。(圖6)7、抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ沉積的抑制作用。
腦內(nèi)Aβ沉積是AD的重要標(biāo)志和特征，我們用抗老年癡呆癥復(fù)合制劑喂食AD轉(zhuǎn)基因鼠半年，抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)Aβ沉積有明顯的抑制作用。(圖7)。
8、抗老年癡呆癥尼古丁組合藥物膠囊對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)金屬離子沉積的抑制作用。
腦內(nèi)銅、鐵沉積是AD的重要特征，我們用抗老年癡呆癥復(fù)合制劑喂食AD轉(zhuǎn)基因鼠半年，抗老年癡呆癥復(fù)合制劑對(duì)轉(zhuǎn)基因鼠腦內(nèi)銅、鐵沉積有明顯的抑制作用，尤其是老年斑中的銅、鐵沉積減少更明顯。(圖8)
權(quán)利要求
1.一種用于臨床治療老年癡呆癥的藥物復(fù)合制劑，其特征在于含有尼古丁、大豆異黃酮、維生素E、維生素C和添加物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的藥物復(fù)合制劑，其特征在于復(fù)合制劑為膠囊或片劑或口服液。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物復(fù)合制劑，其特征在于其中膠囊，以每粒膠囊300毫克計(jì)，有效成分為10％，其它添加葛根粉，其尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶3∶3∶3或0.5∶1.5∶3∶5或0.3∶2.7∶3∶4。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物復(fù)合制劑，其特征在于其中片劑，以每片300毫克，有效成分為10％，其它添加劑為淀粉，其尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶3∶3∶3或0.5∶1.5∶3∶5或0.3∶2.7∶3∶4。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的藥物復(fù)合制劑，其特征在于其中口服液，將組合藥物溶解在10％的蜂蜜中，有效成分為10％，其尼古丁、大豆異黃酮和維生素E和C的重量比例為1∶1.7∶0.3∶7或0.3∶2.4∶0.3∶7或0.5∶1.2∶0.3∶8。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5所述的藥物復(fù)合制劑，任選其中之一項(xiàng)在制備用于臨床治療老年癡呆癥的藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供一種由尼古丁、大豆異黃酮、維生素E和維生素C組成的用于治療老年癡呆癥有效的復(fù)合制劑藥物和提供一種治療老年癡呆癥的藥物復(fù)合制劑的方法。本發(fā)明藥物復(fù)合制劑的特征在于含有尼古丁、大豆異黃酮、維生素E、維生素C和添加物，按照其不同比例組成的一種用于臨床治療老年癡呆癥的復(fù)合制劑藥物。
文檔編號(hào)A61K31/465GK1704055SQ20041004277
公開日2005年12月7日 申請(qǐng)日期2004年5月26日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月26日
發(fā)明者趙保路 申請(qǐng)人:中國科學(xué)院生物物理研究所