專利名稱：一種治療頸椎病的中藥及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥復(fù)方制劑，特別是涉及一種治療頸椎病的中藥復(fù)方制劑及其制備方法、質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
頸椎病又稱頸椎綜合癥，是一種骨骼的退行性病理改變，其主要病理變化為頸椎間盤退行性變，纖維環(huán)彈力減退而向四周膨出或髓核疝出，壓迫神經(jīng)根、脊髓、椎動(dòng)脈，從而出現(xiàn)多種癥狀。隨著我國白領(lǐng)階層日益增多、人們的生活習(xí)慣發(fā)生改變，長時(shí)間伏案工作學(xué)習(xí)、使用電腦、駕車、睡高枕軟床等諸多因素，都會(huì)令人的頸項(xiàng)部長時(shí)間保持單一姿勢(shì)，使肌肉韌帶疲勞，從而加速了頸椎疾病的發(fā)生。調(diào)查顯示，全國大約有7％～10％的人患有頸椎病，有學(xué)者在2000份樣本中調(diào)查發(fā)現(xiàn)，發(fā)病率竟達(dá)12％。50～60歲年齡段頸椎病的發(fā)病率成倍增加，約20％～30％，60～70歲年齡段可達(dá)50％。不容忽視的是，頸椎病近年有年輕化的趨勢(shì)。有關(guān)調(diào)查顯示，我國青少年的頸椎發(fā)病率已從1997年年底的8.9％，上升到1999年年底的12％，而且其中的87％伴有腦血管痙攣。
頸椎病雖然病位在于頸椎，但其臨床癥狀可表現(xiàn)為多種多樣。如神經(jīng)根型可出現(xiàn)前臂、手指的放射性疼痛麻木、感覺異常、握力減弱，甚至肌肉萎縮。脊髓型可出現(xiàn)單側(cè)或雙下肢麻木無力，步態(tài)笨拙不穩(wěn)，甚至四肢僵硬癱瘓，大小便困難等。椎動(dòng)脈型可出現(xiàn)頭暈、惡心、嘔吐、視物不清等癥狀。交感神經(jīng)型可出現(xiàn)為頭痛、惡心、耳鳴、心慌、胸悶等癥狀。此外，還有一些比較極易造成誤診的癥狀，如頸性吞咽困難、頸性胃炎、高血壓、心絞痛、視力障礙、乳房疼痛、牙痛等。這些都給患者正常的生活和臨床診治帶來了極大的不便。因此加強(qiáng)對(duì)頸椎病的防治，特別是對(duì)青少年發(fā)病具有著非常重要的現(xiàn)實(shí)意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種治療頸椎病的中藥復(fù)方制劑及其制備方法，本發(fā)明另一目的在于提供該中藥復(fù)方制劑的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)本發(fā)明是通過如下原料組成天麻450-600重量份，葛根450-600重量份，川芎450-600重量份，醋制延胡索320-480重量份。
上述原料優(yōu)選配比為天麻520重量份，葛根520重量份，川芎520重量份，醋制延胡索390重量份。
上述原料可制成臨床上可接受的劑型，如片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、口服液體制劑、滴丸及保健食品。
本發(fā)明片劑制備工藝如下取以上四味混合，粉碎成5-20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加3-7倍量60％-80％乙醇回流提取3次，每次0.5-2小時(shí)，濾過，濾液合并；在60-70℃、-0.08Mpa條件下減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度在50℃時(shí)約為1.30-1.35的稠浸膏；在60-70℃、-0.08Mpa條件下稠浸膏減壓干燥，得干膏；干膏粉碎過70-100目篩，加入微晶纖維素40-50重量份，羧甲淀粉鈉8-10重量份，以乙醇制粒，在40-45℃下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂2-3重量份，再補(bǔ)加適量淀粉使其總量達(dá)到350-450重量份，壓制成片，包薄膜衣，包裝，即得。
本發(fā)明中天麻素的含量測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；2-4∶96-100的乙腈—水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為221nm，溫度30℃。理論塔板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取天麻素對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，即得到每1ml含天麻素40μg。
供試品溶液的制備取本發(fā)明片劑10片，去包衣后研細(xì)，取細(xì)粉0.2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入5％甲醇50ml，稱定重量，超聲提取在250w，50kHz條件下靜置30-40分鐘，5％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清夜用微孔濾膜(0.45μm)濾過，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
頸舒片(由本發(fā)明上述制備工藝所得)每片含天麻以天麻素C13H18O7計(jì)，不得少于0.30-1.90mg。
本發(fā)明的鑒別方法A、取頸舒片2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚15ml超聲提取10-20分鐘，濾過，濾渣備用。濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，同法制成川芎對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液6μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶1的正己烷—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
B、取A項(xiàng)的濾渣，揮干乙醚，加甲醇25ml超聲提取10-20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液5ul、對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7∶2.5∶0.25氯仿—甲醇—水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
C、取本發(fā)明片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醇25ml，超聲提取25-35分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)蛹铀?0ml使溶解，水液加濃氨試液調(diào)pH＝10-12，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照品溶液1ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶6∶1正己烷—氯仿—甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液顯色，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜中相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明的藥物組合物僅有四味，但配伍精當(dāng)，藥簡而力宏。天麻味辛性平，既可祛痹阻頸項(xiàng)的風(fēng)寒之邪，又可入肝經(jīng)，通調(diào)筋脈氣血之不足。故以之作為君藥?！秱摗分兄委煾惺茱L(fēng)寒，項(xiàng)背強(qiáng)急的名方葛根湯盡人皆知，方中葛根味甘平，能升陽解表，舒筋緩急，與君藥相配，祛風(fēng)寒、行津液，使筋急緩而血脈通。佐藥川芎味辛性溫，功善活血祛風(fēng)止痛。其常被用作“諸經(jīng)頭痛之要藥”關(guān)鍵在于性善上行，能祛太陽、少陽、厥陰經(jīng)諸經(jīng)之風(fēng)邪血滯，止痛效佳，且能引諸藥上行，兼為使藥。佐藥之二延胡索味辛苦性溫，為理氣活血止痛之要藥。兩味佐藥均味辛而性溫，一側(cè)重于祛風(fēng)寒，一側(cè)重于通經(jīng)絡(luò)，二者相合，加強(qiáng)君臣藥祛風(fēng)通絡(luò)，舒筋止痛的作用，使病邪除，筋脈利，諸癥得以解除。
按本發(fā)明上述制備工藝所得的本發(fā)明片劑具有活血化瘀，減輕棉球肉芽腫的肉芽重量，抑制對(duì)角叉菜膠所致的腫脹，抑制毛細(xì)血管通透性增加作用。同時(shí)，本發(fā)明片劑還能顯著提高熱板痛閾值，具有抗炎鎮(zhèn)痛作用。
下述實(shí)驗(yàn)例進(jìn)一步說明本發(fā)明制備工藝的先進(jìn)性及其在治療頸椎病的藥物中的應(yīng)用。
實(shí)驗(yàn)例1提取工藝選擇1、預(yù)試驗(yàn)根據(jù)藥物特性的資料可知，葛根總黃酮、川芎有機(jī)酸及內(nèi)酯、延胡索生物堿醇提為好，而天麻酚類化合物及其苷類水提、醇提均可。為了簡化工藝，設(shè)計(jì)如下試驗(yàn)全方水提、全方水提醇沉及全方醇提三種提取工藝，從藥理試驗(yàn)和藥學(xué)試驗(yàn)兩個(gè)方面進(jìn)行比較。
實(shí)驗(yàn)方法準(zhǔn)確稱取天麻40g 葛根40g 川芎40g 延胡索30g藥材共三份粉碎成粗顆粒(1)全方水提取上述藥材一份加入10倍量水(1500ml)置2000ml圓底燒瓶中提取1.5小時(shí)，用8層紗布濾過，得濾液1130ml，藥渣加8倍量水(1200ml)提取1.5小時(shí)，8層紗布濾過，合并濾液，濃縮，減壓干燥。干膏稱重，計(jì)算得膏率。
(2)全方水提醇沉取上述藥材一份同(1)所述提取后，合并濾液，濃縮至每1ml含1g原藥材時(shí)加入乙醇使含醇量達(dá)70％，放置24小時(shí)。抽濾，取濾液減壓回收乙醇，減壓濃縮，減壓干燥。干膏稱重，計(jì)算得膏率。
(3)全方醇提取上述藥材一份用5倍量75％乙醇(750ml)回流提取1小時(shí)，抽濾，得濾液640ml，再以每次4倍量(600ml)每次1小時(shí)提取兩次，抽濾，合并濾液，減壓回收乙醇，減壓濃縮、干燥。稱重計(jì)算得膏率。
藥理試驗(yàn)結(jié)果疼痛是頸椎病的主要癥狀之一，采用醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)對(duì)提取工藝進(jìn)行選擇。試驗(yàn)方法如下取小鼠40只，隨機(jī)分為五組，每組10只，按表1所示分組并灌胃給藥，給藥劑量為6g生藥/kg，每日1次，連續(xù)3日。末次給藥后1小時(shí)，各鼠依次腹腔注射0.6％醋酸0.1ml/10g，記錄注射后10分鐘內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)。結(jié)果見表1。
表1 醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的結(jié)果表組別 動(dòng)物數(shù)(n)10分鐘內(nèi)扭體反應(yīng)次數(shù)(次；X±SD)蒸餾水組 10 14.1±5.32水提組10 10.3±7.02水提醇沉組10 11.5±7.11醇提組10 9.2±6.23結(jié)果表明，三份提取物均可對(duì)抗醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)，使小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)減少。但以醇提物鎮(zhèn)痛作用最強(qiáng)，水提物次之，水提醇沉物的作用最低。
藥學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表2 藥學(xué)試驗(yàn)吸液量、得膏率試驗(yàn)結(jié)果表濾過情況吸液量(倍)得膏量(g)得膏率(％)水提易濾過 2.5 43.6529.1水提醇沉易濾過 2.5 23.5515.7醇提易濾過 0.7 27.9 18.6
表3 藥學(xué)試驗(yàn)多指標(biāo)成份測(cè)定結(jié)果表天麻素 天麻素阿魏酸 阿魏酸 葛根素 葛根素提取方法(mg) 轉(zhuǎn)移率(mg)轉(zhuǎn)移率 (mg) 轉(zhuǎn)移率水提108.273.1％18.615.8％ 773.562.4％水提醇沉103.870.1％30.625.9％ 753.960.8％醇提123.983.7％82.569.9％ 982.179.2％注天麻藥材中天麻素含量為0.37％；葛根藥材中葛根素含量為3.1％；川芎藥材中阿魏酸含量為0.295％。
以上藥學(xué)試驗(yàn)表明，三種提取方法所得提取液均較容易過濾，水提與水提醇沉的吸液量較大為2.5倍，醇提吸液量為0.7倍。水提得膏率高，有效成分提取率低，若做成制劑服用量大；水提醇沉得膏率低，但有效成分提取率低；醇提得膏率低，有效成分提取率高，制劑服用量小。
根據(jù)以上藥理藥學(xué)試驗(yàn)結(jié)果，選擇醇提作為本方的提取工藝。其中天麻角質(zhì)較多，水煎煮易煎透，醇提不易潤濕，不易煎透，所以醇提時(shí)應(yīng)采用極薄片。
2、正交試驗(yàn)根據(jù)預(yù)試驗(yàn)確定本方采取醇提工藝進(jìn)行提取，設(shè)計(jì)以下正交試驗(yàn)，對(duì)醇提的提取時(shí)間、提取次數(shù)、乙醇濃度、溶劑用量等提取工藝條件進(jìn)行優(yōu)選。
實(shí)驗(yàn)方法分別稱取天麻40g 葛根40g 川芎40g 延胡索30g 藥材共9份，每份150g，粉碎成粗顆粒(5-10目)，按設(shè)計(jì)的正交試驗(yàn)表試驗(yàn)，每份提取液在減壓狀態(tài)下回收乙醇至盡，60℃干燥，計(jì)算得膏率。以HPLC法測(cè)定天麻素、阿魏酸及葛根素的含量。正交試驗(yàn)中以天麻素含量最高者為1，其他天麻素含量與之相比所得的數(shù)值作為得分，阿魏酸及葛根素同樣計(jì)分，各列三者之和作為總得分，進(jìn)行結(jié)果處理，如結(jié)果見表4、表5、表6。
表4 乙醇回流工藝因素水平表因素A B C D水平乙醇濃度(％)溶劑量(倍)提取時(shí)間(h)提取次數(shù)(次)1 60 4 1.012 75 5 1.523 90 6 2.03注溶劑量為每次提取所用溶劑的量。
表5 L9(34)正交試驗(yàn)結(jié)果表天麻素含量 可魏酸含量列號(hào) A B C D 葛根素含量mg 總得分mgmg1 1 1 1 1 71.35 57.19 617.24 1.88982 1 2 2 2 99.62 79.97 887.26 2.66623 1 3 3 3 122.3780.03 971.82.87974 2 1 2 3 127.2479.20 1026.2 2.96095 2 2 3 1 94.29 68.29 946.96 2.49246 2 3 1 2 113.6082.42 989.26 2.85687 3 1 3 2 106.9779.28 911.69 2.69108 3 2 1 3 120.6478.61 996.22 2.87279 3 3 2 1 78.24 69.47 846.32 2.2825K17.436 7.542 7.619 6.665K28.310 8.019 7.910 8.214K37.846 8.031 8.063 8.713R 0.291 0.163 0.148 0.683正交試驗(yàn)中，天麻素最大提取率為85.6％，阿魏酸最大提取率為69.8％，葛根素的最大提取率為80.2％.
表6 方差分析表方差來源離均差平均和自由度均方 F值顯著性A 0.12758948 2 0.063795 3.766809B 0.05195687 2 0.025978 1.533917C 0.03387203 2 0.016936 1D 0.76076635 2 0.380383 22.46002 *
F(0.05，2)＝19.0F(0.01，2)＝99.0實(shí)驗(yàn)結(jié)果由正交表及方差分析表中可以看出D＞A＞B＞C，最佳工藝為A2B3C3D3，由于C因素為誤差項(xiàng)，B2與B3之間相差不大，從節(jié)省生產(chǎn)成本，提高生產(chǎn)效率上考慮，故選A2B2C1D3為最佳工藝。即分別用5倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)。
3藥學(xué)試驗(yàn)多指標(biāo)成份的選擇方中天麻中天麻素、葛根中葛根素為其主要有效成分及指標(biāo)性成分，川芎中阿魏酸為其受熱易破壞的活性成分，故選擇天麻素、阿魏酸及葛根素作為指標(biāo)成分。驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明A2B2C1D3工藝所得天麻素、阿魏酸與A2B3C3D3工藝所得天麻素、阿魏酸、葛根素含量相差無幾(<5％>，所以，選定工藝A2B2C1D3(用5倍量75％乙醇提取3次，每次1小時(shí))作為本方的提取工藝。
實(shí)驗(yàn)例2濃縮干燥工藝研究1、濃縮工藝研究處方中川芎中含有阿魏酸，受熱易破壞。減壓濃縮能減少藥液受熱時(shí)間，降低有效成分的損失；同時(shí)減少生產(chǎn)周期，提高生產(chǎn)效率。所以選擇減壓濃縮。
2、干燥工藝研究對(duì)濃縮液采用常壓干燥、減壓干燥(75±5℃，-0.08MPa)、減壓干燥(65±5℃，-0.08MPa)三種干燥方式進(jìn)行干燥。對(duì)干燥時(shí)間、外觀性狀以及天麻素、阿魏酸、葛根素的含量進(jìn)行HPLC比較，結(jié)果見表7。
表7 干燥方法比較表干燥方式 干燥時(shí)間 外觀性狀 天麻素含量(mg) 阿魏酸含量(mg) 葛根素含量(g)常壓干燥 86h 黑色 116.71 52.89 0.977減壓干燥10h 棕黃色118.67 70.73 0.984(75±5℃-0.08MPa)減壓干燥12h 棕黃色118.78 78.80 0.988(65±5℃-0.08MPa)由上表可看出，常壓干燥較減壓干燥耗費(fèi)時(shí)間長，外觀上看色深。從天麻素、葛根素、阿魏酸含量看，(75±5℃，-0.08MPa)阿魏酸含量明顯降低，而減壓干燥(65±5℃-0.08MPa)三者的含量都最高。所以選擇減壓干燥(65±5℃，-0.08MPa)這種方式進(jìn)行干燥。
實(shí)驗(yàn)例3質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的研究含量測(cè)定1、方法學(xué)考察(1)測(cè)定條件采用安捷倫高效液相色譜儀，選用C18ODS柱ф×L＝4.6×250mm，粒度5μm，流速1.0ml/min，溫度30℃。
流動(dòng)相采用藥典系統(tǒng)，甲醇—磷酸鹽溶液(0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液和0.1mol/L磷酸氫二鈉溶液等量混合)—水(1.5∶3∶95.5)分別在270nm、221nm下測(cè)定，藥材中天麻素峰沒能分開，改用甲醇—水(3∶97)時(shí)，TR＝12min，基線不好，改變流動(dòng)相為甲醇—水(4∶96)分離度不好，TR＝13min，改變流動(dòng)相為乙腈—水(2∶98)分離度較好。最后確定流動(dòng)相為乙腈—水(2∶98)為流動(dòng)相。
(2)提取條件①試驗(yàn)中考查了不同溶劑對(duì)結(jié)果的影響，采用甲醇、5％的甲醇、50％的甲醇、50％的乙醇超聲處理得四份樣品，經(jīng)高效液相測(cè)定，結(jié)果表明5％的甲醇提取完全且圖譜效果好，甲醇、50％的甲醇、50％的乙醇對(duì)樣品中的天麻素提取都不完全而且使基線上移。故提取溶劑選擇5％的甲醇。
②試驗(yàn)中考查了不同超聲時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響，稱取樣品0.2602g、0.2546g、0.2551g加5％的甲醇50ml超聲20min，30min，40min，比較差異，結(jié)果表明20min提取不夠完全，30min、40min提取對(duì)含量的影響不大，最后確定樣品超聲提取30min。
實(shí)驗(yàn)例4對(duì)三批樣品進(jìn)行含量測(cè)定表8 含量測(cè)定結(jié)果批次天麻素含量(mg/片)200110051.42200110101.40200110151.35
根據(jù)三批樣品測(cè)定結(jié)果，每片含天麻以天麻素(C13H18O7)計(jì)不得少于0.50mg。
實(shí)驗(yàn)例5川芎的特征鑒別研究參照中國藥典2000年版一部30頁川芎的鑒別方法進(jìn)行鑒別。供試品溶液的制備，取本發(fā)明片劑2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚15ml超聲提取15分鐘，濾過，濾渣備用。濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，同法制成川芎對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液6μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷—乙酸乙酯(15∶1)(9∶1)、(3∶1)為展開劑，分別展開，取出，晾干，置紫外光燈(254nm)下檢視，三種展開劑展開的供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。以正己烷—乙酸乙酯(15∶1)展開，主熒光斑點(diǎn)的比移值太小，約為0.2；(9∶1)主熒光斑點(diǎn)的比移值約為0.5。(3∶1)主熒光斑點(diǎn)的比移值約為0.9，比移值太大。所以選擇，以正己烷—乙酸乙酯(9∶1)為展開劑。
空白溶液的制備是按處方中藥味比例，自配不含川芎的群藥，按制備工藝制成空白制劑，再按正文供試品溶液制備方法制成空白溶液。展開及檢視條件同正文。結(jié)果表明，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好，空白無干擾，。
實(shí)驗(yàn)例6葛根的鑒別曾參照中國藥典2000年版一部273頁葛根項(xiàng)下鑒別方法進(jìn)行鑒別。樣品制備如下取本發(fā)明片劑2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加甲醇25ml超聲提取15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。另葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，結(jié)果樣品色譜有一條白色映光色帶，影響鑒別。對(duì)樣品另行處理。取川芎鑒別中乙醚提取后的濾渣，揮干乙醚，加甲醇25ml提取15分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)?ml甲醇使溶解，作為供試品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，樣品色譜中與對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)處有明顯的斑點(diǎn)，且斑點(diǎn)無干擾。
空白溶液的制備是按處方中藥味比例，自配不含葛根的群藥，按制備工藝制成空白制劑，再按正文供試品溶液制備方法制成空白溶液。展開及檢視條件同正文。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好，空白無干擾。
實(shí)驗(yàn)例7延胡索的鑒別研究曾參照中國藥典2000年版一部108頁延胡索項(xiàng)下鑒別方法進(jìn)行鑒別。方法為取取本發(fā)明片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì)，乙醇超聲提取30分鐘，濾過，濾液蒸干，濾渣加水10毫升使溶解，加氨水調(diào)pH值大于10，堿液用乙醚萃取三次，每次10毫升，合并乙醚液，蒸干，殘?jiān)蛹状?毫升使溶解，作為樣品液。另取延胡索乙素對(duì)招聘1毫克，加甲醇定容至1毫升，作為對(duì)招品溶液。照薄層色譜法(中國藥典2000年版一部附錄VIB)試驗(yàn)，以正己烷-氯仿-甲醇(7.5∶4∶1)，為展開劑展開，晾干后，以飽和碘蒸氣顯色，帶顯色清晰后日光下觀察，樣品色譜中在與對(duì)照品色譜相對(duì)應(yīng)的位置上的下方有一緊挨且顏色相同的斑點(diǎn)，斑點(diǎn)的比移值太大。改變展開劑的比例來改變斑點(diǎn)的比移值。分別以正己烷-氯仿-甲醇(10∶4∶1)與正己烷-氯仿-甲醇(9∶6∶1)為展開劑展開，飽和碘蒸氣顯色后，正己烷-氯仿-甲醇(10∶4∶1)展開的比移值小，約0.2，斑點(diǎn)未分開。正己烷-氯仿-甲醇(9∶6∶1)展開效果較好，比移值0.6左右，且斑點(diǎn)無干擾。但以飽和碘蒸氣顯色后，放置一段時(shí)間后，延胡索乙素斑點(diǎn)由紫色變?yōu)辄S色，由于黃色不利于照相，需摸索顯色條件?？紤]到延胡索乙素為生物堿類，試用碘化鉍鉀來顯色。碘化鉍鉀顯色呈紫紅色，故確定碘化鉍鉀為顯色劑。
空白溶液的制備是按處方中藥味比例，自配不含延胡索的群藥，按制備工藝制成空白制劑，再按正文供試品溶液制備方法制成空白溶液。展開及檢視條件同正文。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，薄層色譜斑點(diǎn)清晰，重現(xiàn)性好，空白無干擾。
實(shí)驗(yàn)例8對(duì)小鼠自家血腫消退作用的影響取雄性小鼠50只，隨機(jī)分為五組，每組10只。各鼠在嚴(yán)格消毒情況下剪鼠尾，用微量注射器取血30ul，準(zhǔn)確地注射于小鼠消毒的自身右后足跖皮下，造成微隆起的近似圓形血腫，從造型即日起，各鼠如表1所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3日，每日給藥前用卡尺測(cè)量右后足跖血腫部位最長和最短直徑，并計(jì)算血腫面積變化值，末次給藥后1h，處死小鼠，取小鼠足跖血腫部位組織，剪碎，每100mg組織加0.1NHCl1.0ml浸泡振蕩溶血，取上清液置752-紫外分光光度計(jì)，在540nm處比色，測(cè)OD值。結(jié)果見表9。
表9 本發(fā)明片劑對(duì)小鼠自家血腫消退作用的影響動(dòng)物數(shù) 血腫血積變化(cm2；X±SD) 血腫溶出液血紅蛋組別 g生藥/kgn1d 2d 白值(OD；X±SD)對(duì)照組 10 0.33±0.20 0.91±0.15 0.130±0.0201.56g藥粉頸痛靈膠囊 10 0.61±0.34*1.13±0.26* 0.098±0.015***/kg本發(fā)明片劑12.64 10 1.08±0.31*** 1.36±0.42**0.086±0.022***本發(fā)明片劑6.32 10 0.81±0.49*1.33±0.61* 0.102±0.015**本發(fā)明片劑3.16 10 0.60±0.29*0.91±0.35 0.114±0.012*實(shí)驗(yàn)例9對(duì)大鼠血液流變學(xué)的影響取大鼠50只，雌雄各半，隨機(jī)分為五組，每組10只。按表2所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)10日，對(duì)照組每日灌以等體積水。于末次給藥后1h，各組大鼠以3％戊巴比妥鈉依次麻醉后，經(jīng)腹主動(dòng)脈采血，肝素抗凝，置LBY-N6A自清洗旋轉(zhuǎn)式粘度計(jì)上，測(cè)定全血粘度及血漿粘度。結(jié)果見表10。
表10 本發(fā)明片劑對(duì)正常大鼠血液流變學(xué)的影響(mpa·S；X±SD)動(dòng)物 全血粘度組別 g生藥/kg血漿粘度數(shù)n 10S-140S-1120S-1對(duì)照組 1013.67±1.47 7.56±0.64 5.32±0.36 2.33±0.34頸痛靈膠囊1.08g藥粉/kg 109.76±3.08**5.72±0.59*** 4.20±0.24*** 2.07±0.41本發(fā)明片劑8.75 109.47±1.97*** 5.76±0.95*** 4.34±0.58*** 1.97±0.49本發(fā)明片劑4.37 10010.90±2.33** 6.67±1.10* 4.92±0.67 2.12±0.50本發(fā)明片劑2.19 1012.65±2.27 7.24±1.05 5.15±0.56 1.99±0.23*結(jié)果表明，本發(fā)明片劑能夠降低大鼠的全血粘度，與對(duì)照組比較差異顯著。對(duì)血漿粘度影響不大。
實(shí)驗(yàn)例10對(duì)醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響取雄性小鼠50只，隨機(jī)分為五組，每組10只，按表3所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7日。與末次藥后30min，小鼠依次尾靜脈注射0.5％伊文思藍(lán)生理鹽水溶液0.1ml/10g，隨即依次腹腔注射0.6％醋酸0.2ml/只，20分鐘后脫臼處死，腹腔注射生理鹽水6ml，輕按小鼠腹部，抽取腹腔液3ml，3000rpm離心10min，取上清液置752-紫外光柵分光光度計(jì)上，590nm處測(cè)OD值。結(jié)果見表11。
表11 本發(fā)明片劑對(duì)醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加的影響組別 g生藥/kg動(dòng)物數(shù)nOD值X±SD抑制率％對(duì)照組10 0.215±0.059頸痛靈膠囊1.56g藥粉/kg10 0.166±0.045*22.8本發(fā)明片劑12.64 10 0.155±0.037*28.9本發(fā)明片劑6.3210 0.161±0.044*25.1本發(fā)明片劑3.1610 0.176±0.049 18.1結(jié)果表明，本發(fā)明片劑對(duì)醋酸引起小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加有明顯抑制作用，使OD值降低，與對(duì)照組比較差異顯著。
實(shí)驗(yàn)例11對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響取雄性大鼠50只，在乙醚淺麻醉無菌條件下，將滅菌棉球(10mg)植入各鼠腋窩皮下，手術(shù)后次日，隨機(jī)分為五組，每組10只。按表4所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)7日，末次給藥后1h，將大鼠斷頭處死，剝離并取出棉球肉芽組織，稱重、并減去棉球重量即為肉芽組織濕重。結(jié)果見表12。
表12 本發(fā)明片劑對(duì)大鼠棉球肉芽腫的影響組別 g生藥/kg動(dòng)物數(shù)n 血腫溶出液血紅蛋白值(OD；X±SD)對(duì)照組10 479.2±41.01頸痛靈膠囊1.08g藥粉/kg10 440.4±40.71*本發(fā)明片劑8.7510 438.2±36.91*本發(fā)明片劑4.3710 440.2±36.13*本發(fā)明片劑2.1910 453.7±46.40結(jié)果表明，本發(fā)明片劑各給藥劑量組可明顯抑制肉芽組織的增生，使肉芽棉球重量減輕。
實(shí)驗(yàn)例12對(duì)角叉菜膠所致大鼠足腫脹的影響取大鼠50只，飼養(yǎng)2天后，隨機(jī)分成五組，每組10只。按表5所示劑量灌胃給藥，每日一次，連續(xù)三日，末次給藥后1h，將1％角叉菜膠(0.1ml/只)依次注射大鼠右后足跖腱膜下致炎，每隔1小時(shí)以自制窄帶尺測(cè)量大鼠足跖及踝關(guān)節(jié)圓周，以左后足作對(duì)照，以左右足跖及踝關(guān)節(jié)圓周和之差為腫脹程度。結(jié)果表明，注射角叉菜膠后，本發(fā)明片劑各劑量組均顯示出對(duì)大鼠足腫脹有不同程度的抑制作用，與對(duì)照組比較差異顯著。
實(shí)驗(yàn)例13對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響取小鼠50只，隨機(jī)分為五組，每組10只。按表6所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3日。末次給藥后1h，各鼠依次腹腔注射0.6％醋酸0.1ml/10g，記錄注射后10min內(nèi)小鼠出現(xiàn)扭體反應(yīng)次數(shù)，計(jì)算抑制率。結(jié)果見表13。
表13 本發(fā)明片劑對(duì)醋酸所致小鼠扭體反應(yīng)的影響10min內(nèi)扭體反應(yīng)次數(shù)組別 g生藥/kg動(dòng)物數(shù)n抑制率％(次；X±SD)正常對(duì)照組10 14.5±6.29頸痛靈膠囊1.56g藥粉/kg10 4.0±2.98***72.4本發(fā)明片劑12.64 10 8.7±6.09* 40.0本發(fā)明片劑6.3210 10.5±8.06* 27.6本發(fā)明片劑3.1610 12.7±7.36* 12.4結(jié)果表明，本發(fā)明片劑可對(duì)抗醋酸引起的小鼠扭體反應(yīng)，使小鼠扭體反應(yīng)次數(shù)減少。
實(shí)驗(yàn)例14對(duì)小鼠熱板痛閾值的影響取經(jīng)篩選痛閾值在5-30S的雌性小鼠50只，隨機(jī)分為五組，按表7所示劑量灌胃給藥，每日1次，連續(xù)3日，分別于末次給藥后30’、60’、90’、120’、150’、180’、240’，將各組小鼠置GJ一8402熱板測(cè)痛儀熱板上(55±0.5℃)測(cè)痛閾值，結(jié)果表明，本發(fā)明片劑可明顯提高小鼠熱板痛閾值。
實(shí)施例1片劑的制備取天麻520g，葛根520g，川芎520g，延胡索(醋制)390g，按上述方法制得本發(fā)明片劑1000片，每片重0.40g。口服，一日3次，一次4片。
實(shí)施例2膠囊劑的制備取天麻520g，葛根520g，川芎520g，延胡索(醋制)390g，按上述方法制得頸舒膠囊1000粒，每粒重0.40g?？诜?，一日3次，一次4粒。
實(shí)施例3藥物組合物的制備方法取天麻520g，葛根520g，川芎520g，醋制延胡索390g；混合，粉碎成5-20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加5倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并；在60℃、-0.08Mpa條件下，濾液減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度60℃時(shí)約為1.30的稠浸膏；在65±5℃、-0.08Mpa條件下，稠浸膏減壓干燥，得干膏；干膏粉碎過80目篩，加入微晶纖維素45g，羧甲淀粉鈉9g，以乙醇制粒，40℃條件下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂3g，再補(bǔ)加適量淀粉使其總量達(dá)到380g，壓制成1000片，包薄膜衣，包裝，即得。
實(shí)施例4藥物組合物的制備方法取天麻500g，葛根500g，川芎500g，醋制的延胡索370g；混合，粉碎成5-20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加4倍量70％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并；在60℃、-0.08Mpa條件下，濾液減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度60℃時(shí)約為1.30的稠浸膏；在65±5℃-0.08Mpa條件下，稠浸膏減壓干燥，得干膏；干膏粉碎過80目篩，加入微晶纖維素55g，羧甲淀粉鈉12g，以乙醇制粒，在45℃條件下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂3g，再補(bǔ)加適量淀粉使其總量達(dá)到400g，壓制成1000片，包薄膜衣，包裝，即得。
實(shí)施例5取天麻520g，葛根520g，川芎520g，醋制延胡索390g；混合，粉碎成5-20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加5倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并；在60℃、-0.08Mpa條件下，濾液減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度60℃時(shí)約為1.30的稠浸膏；在65±5℃、-0.08Mpa條件下，稠浸膏減壓干燥，得干膏，常規(guī)工藝制成膠囊1000粒。
實(shí)施例6本發(fā)明片劑質(zhì)量控制方法含量測(cè)定天麻素的測(cè)定方法色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；2∶98乙腈-水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為221nm，溫度30℃。理論塔板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于1500。
對(duì)照品溶液的制備精密稱取天麻素對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，即得到每1ml含天麻素40μg。
供試品溶液的制備取本發(fā)明片劑10片，除去薄膜衣，研細(xì)，取細(xì)粉0.2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入5％甲醇50ml，稱定重量，在250w，50kHz條件下超聲提取30分鐘，靜置，5％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清夜用0.45μm微孔濾膜濾過，即得。
測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
本實(shí)施例每片本發(fā)明片劑中天麻素含量不少于0.50mg川芎的鑒別A、取本發(fā)明片劑2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚15ml超聲提取15分鐘，濾過，濾渣備用。濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取川芎對(duì)照藥材1g，同法制成川芎對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液6μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷—乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
葛根的鑒別B、取A項(xiàng)濾渣，揮干乙醚，加甲醇25ml超聲提取15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液5ul、對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7∶2.5∶0.25氯仿—甲醇—水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。
延胡索的鑒別取本發(fā)明片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醇25ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)蛹铀?0ml使溶解，水液加濃氨試液調(diào)pH＝10-12，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照品溶液1ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶6∶1正己烷—氯仿—甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液顯色，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜中相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
權(quán)利要求
1.一種具有治療頸椎病的藥物組合物，其特征在于該組合物由如下原料制成的天 麻450-600重量份 葛 根450-600重量份川 芎450-600重量份 醋制延胡索320-480重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的治療頸椎病的藥物組合物，其特征在于該組合物由如下原料制成的天 麻520重量份 葛 根520重量份川 芎520重量份 醋制延胡索390重量份。
3.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物，其特征在于該組合物可制成臨床上或藥學(xué)上可接受的劑型，如片劑、丸劑、膠囊劑、顆粒劑、混懸劑、口服液體制劑、滴丸。
4.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的片劑制備方法，其特征在于該方法為取天麻450-600重量份，葛根450-600重量份，川芎450-600重量份，醋制延胡索320-480重量份，四味混合，粉碎成5-20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加3-7倍量60％-80％乙醇回流提取3次，每次0.5-2小時(shí)，濾過，濾液合并；在60-70℃、-0.08Mpa條件下減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度在50℃時(shí)約為1.30-1.35的稠浸膏；在60-70℃、-0.08Mpa條件下稠浸膏減壓干燥，得干膏；干膏粉碎過70-100目篩，加入微晶纖維素40-50重量份，羧甲淀粉鈉8-10重量份，以乙醇制粒，在40-45℃下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂2-3重量份，再補(bǔ)加適量淀粉使其總量達(dá)到350-450重量份，壓制成片，包薄膜衣，包裝，即得。
5.如權(quán)利要求4所述的片劑制備方法，其特征在于該方法為取天麻520重量份，葛根520重量份，川芎520重量份，醋制延胡索390重量份；混合，粉碎成20目的粗顆粒；取以上粗顆粒，分別加5倍量75％乙醇回流提取3次，每次1小時(shí)，濾過，濾液合并；在60℃、-0.08Mpa條件下，濾液減壓回收乙醇，并繼續(xù)濃縮至相對(duì)密度60℃時(shí)約為1.30的稠浸膏；在65±5℃、-0.08Mpa條件下，稠浸膏減壓干燥，得干膏；干膏粉碎過80目篩，加入微晶纖維素45重量份，羧甲淀粉鈉9重量份，以乙醇制粒，在40℃條件下干燥，整粒，加入硬脂酸鎂3重量份，再補(bǔ)加適量淀粉使其總量達(dá)到380重量份，壓制成片，包薄膜衣，包裝，即得。
6.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的含量測(cè)定為包括如下含量測(cè)定方法天麻素的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；2-4∶96-100的乙腈-水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為221nm，溫度30℃；理論塔板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于1500；對(duì)照品溶液的制備 精密稱取天麻素對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，即得到每1ml含天麻素40μg；供試品溶液的制備 取本發(fā)明片劑10片，去包衣后研細(xì)，取細(xì)粉0.2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入5％甲醇50ml，稱定重量，超聲提取在250w，50kHz條件下靜置30-40分鐘，5％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清夜用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；每片含天麻以天麻素C13H18O7計(jì)，不得少于0.30-1.90mg。
7.如利要求6所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的含量測(cè)定為包括如下含量測(cè)定方法天麻素的含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；2∶98乙腈-水為流動(dòng)相，檢測(cè)波長為221nm，溫度30℃；理論塔板數(shù)按天麻素峰計(jì)算應(yīng)不低于1500；對(duì)照品溶液的制備 精密稱取天麻素對(duì)照品10mg，置50ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加5％甲醇至刻度，搖勻，即得到每1ml含天麻素40μg；供試品溶液的制備 取本發(fā)明片劑10片，除去薄膜衣，研細(xì)，取細(xì)粉0.2g，精密稱定，置錐形瓶中，精密加入5％甲醇50ml，稱定重量，在250w，50kHz條件下超聲提取30分鐘，靜置，5％甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，離心，取上清夜用0.45μm微孔濾膜濾過，即得；測(cè)定法 分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各20μl注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；每片中天麻素含量不少于0.50mg。
8.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中的鑒別方法包括如下鑒別方法中的一種或幾種A、取本發(fā)明片劑2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚15ml超聲提取10-20分鐘，濾過，濾渣備用；濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，同法制成川芎對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液6μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10∶1的正己烷—乙酸乙酯為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B、取A項(xiàng)的濾渣，揮干乙醚，加甲醇25ml超聲提取10-20分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液5ul、對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7∶2.5∶0.25氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取本發(fā)明片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醇25ml，超聲提取25-35分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)蛹铀?0ml使溶解，水液加濃氨試液調(diào)pH為10-12，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照品溶液1ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶6∶1正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液顯色，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜中相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
9.如權(quán)利要求8所述的質(zhì)量控制方法，其特征在于該方法中鑒別方法含有如下鑒別方法中的一種或幾種A、取本發(fā)明片劑2片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醚15ml超聲提取15分鐘，濾過，濾渣備用；濾液揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材1g，同法制成川芎對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照藥材溶液6μl分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B、取A項(xiàng)濾渣，揮干乙醚，加甲醇25ml超聲提取15分鐘，濾過，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，分別吸取上述供試品溶液5ul、對(duì)照品溶液2ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以7∶2.5∶0.25氯仿-甲醇-水為展開劑，展開，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；C、取本發(fā)明片劑5片，除去薄膜衣，研細(xì)，加乙醇25ml，超聲提取30分鐘，濾過，濾液揮干，殘?jiān)蛹铀?0ml使溶解，水液加濃氨試液調(diào)pH＝10-12，用乙醚提取3次，每次10ml，合并乙醚液，揮干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照品，加醋酸乙酯制成每1ml含0.1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液5μl，對(duì)照品溶液1ul，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以9∶6∶1正己烷-氯仿-甲醇為展開劑，展開，取出，晾干，噴以碘化鉍鉀試液顯色，供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜中相應(yīng)的位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)。
10.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物在制備治療頸椎病的藥物中的應(yīng)用。
11.如權(quán)利要求10所述的藥物組合物的應(yīng)用，其特征在于該藥物組合物具有活血化瘀，減輕棉球肉芽腫的肉芽重量，抑制對(duì)角叉菜膠所致的腫脹，抑制毛細(xì)血管通透性增加，提高熱板痛閾值，抗炎鎮(zhèn)痛作用。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種治療頸椎病的中藥復(fù)方制劑及其制備方法、質(zhì)量控制方法。它主要由天麻、葛根、川芎、醋制延胡索原料藥制成。本發(fā)明組合物治療頸椎病菌效果顯著，無副作用。
文檔編號(hào)A61P19/08GK1634210SQ200310123838
公開日2005年7月6日 申請(qǐng)日期2003年12月31日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月31日
發(fā)明者張紅 申請(qǐng)人:張紅