專利名稱：治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，具體地說是一種以中草藥為原料制成的一種治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的中成藥，本發(fā)明還涉及該藥物的制備方法。
背景技術：
風溫肺熱證是一種常見的、多發(fā)的呼吸道疾病，常見于各種肺炎、支氣管炎、肺膿腫和風熱感冒等病。臨床常出現(xiàn)發(fā)熱、咳嗽、氣喘、肺部病變等癥狀。給病人身心帶來極大痛苦，嚴重地危害著人們的身心健康。目前醫(yī)界對于此類疾病多采用西藥抗生素治療，如頭孢曲松鈉、亞胺培南、頭孢呋辛、紅霉素和慶大霉素等。這些藥物在病人出現(xiàn)嚴重感染時進行大劑量控制病情有一定優(yōu)勢，但由于細菌耐藥性使這些抗生素的有效劑量越來越大，因而毒副作用也隨之增大，費用也十分昂貴，我國醫(yī)院的抗生素使用率高達80％，遠遠高于30％的國際平均水平。如果抗生素長期大劑量濫用，將會使其敏感細菌較快地產(chǎn)生耐藥性，從而使抗生素的療效下降、使用壽命提前縮短，從而使死于這些敏感細菌的人大大增加。因此抗生素只適合在病情較重時使用以控制病情，本發(fā)明藥物在早期治療和配合抗生素特別是在病情穩(wěn)定后的治療方面具有很好的優(yōu)勢。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，主要用于治療肺炎、支氣管炎發(fā)作、肺膿腫和風熱感冒等引起的咳嗽、發(fā)熱、氣喘和肺部病變等癥。從多方面和機體整體進行治療。藥理作用具有一定的抑制病原微生物作用，全方有較強的解熱作用，免疫調(diào)節(jié)作用，止咳化痰平喘作用，擴張支氣管作用。見效快，療效高，安全可靠，費用低。本發(fā)明之處方來源于民間祖?zhèn)髅芊?。在民間一直用于肺炎、支氣管炎、細菌病毒性感冒、肺膿腫的治療已有100年歷史。在缺醫(yī)少藥的農(nóng)村為廣大民眾的健康做出了重要貢獻。顯示出很好的療效。該方有較強的創(chuàng)新性和獨到之處，處方藥味不多，只有8味，無堆積之感，無怪、偏、難的藥味。與現(xiàn)有的用于上呼吸道感染的處方完全無類同之處。方中黃荊子這一味藥為民間用藥材，來源于馬鞭草科植物黃荊Vitexnegundo L.的果實，藥源很豐富。
本發(fā)明的另一目的是提供該藥物藥劑的一種制備方法。
本發(fā)明的解決方案是基于中醫(yī)學之溫病對外感風熱(或夾濕邪)襲肺、，痰熱瘀毒阻肺所致之風溫肺熱證的機理認識，從傳統(tǒng)中草藥中篩選出了一組具有清熱燥濕、瀉火解毒、生津止咳的天然藥物組合物而成。陳平伯《外感溫病篇》“風溫為病，春月與冬季居多，或惡風或不惡風，必身熱，咳嗽，煩渴?！背轱L熱挾濕為患，人體發(fā)病的關鍵，取決于機體抗病邪的能力，內(nèi)經(jīng)日“正氣存內(nèi)，邪不可干”“邪之所湊，其氣必虛”當人體寒溫失調(diào)，起居失常，飲食不節(jié)，正氣、津液受損，衛(wèi)外能力下降，風熱病邪，乘虛侵入機體，導致本病發(fā)生。治療多以清熱燥濕、瀉火解毒為主，生津止咳為輔。
本發(fā)明藥物是由含有下列組合藥物的組合物制成的(用量為重量比)黃荊子4％-30％ 黃芩4％-30％ 知母4％-25％天花粉4％-25％款冬花4％-25％ 紫菀2％-25％ 苦杏仁2％-25％ 葶藶子2％-25％制備本發(fā)明藥物的配方優(yōu)選為重量(份)配比范圍是黃荊子10％-20％ 黃芩10％-20％ 知母8％-18％ 天花粉8％-18％款冬花8％-18％ 紫菀6％-16％ 苦杏仁6％-16％ 葶藶子6％-16％本發(fā)明方中君藥黃荊子清熱解毒，祛痰止咳平喘，是民間常用于上呼吸道感染，有抗病原微生物作用，修復肺泡細胞功能作用，對痰、咳、喘均有效，故為君藥之一；；另一君藥黃芩是清熱燥濕、瀉火解毒，清氣分熱，退實熱，清上焦之熱，尤長于清肺熱的第一要藥；天花粉清熱生津，主治熱病傷津、肺熱燥咳之癥，與黃芩相須為用；知母清熱瀉火、滋陰潤燥，用于溫熱病肺熱咳嗽、陰虛燥咳，助黃芩、黃荊子二君藥清熱，助天花粉生津，肺為嬌臟，使清熱瀉火而不留燥，故天花粉、知母共為臣藥；佐以杏仁止咳平喘；佐以紫菀化痰止咳；佐以款冬花潤肺下氣，止咳化痰與紫菀相須為用；葶藶子瀉肺平喘。四佐藥共助黃荊子止咳化痰平喘。諸藥合力，共奏清熱燥濕、瀉火解毒、生津止咳平喘之效；對肺炎、支氣管炎、細菌病毒性感冒、肺膿腫等上呼吸道感染引起的發(fā)熱、咳嗽等癥有很好的治療作用。其藥理作用有具有一定的抑制病原微生物作用，全方有較強的解熱作用，免疫調(diào)節(jié)作用，消炎作用，止咳化痰平喘作用，擴張支氣管作用。
本發(fā)明藥物可按照常規(guī)方法制成各種劑型。其中優(yōu)選顆粒劑、合劑(含口服液)。
顆粒劑制備方法將黃荊子全量制成細粉(過80目篩)，余藥按照制備顆粒劑的煎煮方法，提取濃縮成浸膏，與黃荊子藥粉混合，加入糖粉(浸膏∶糖粉＝1∶0.15)混合均勻，制成混懸性顆粒劑。
本發(fā)明藥物標本兼治，可較快地降低體溫，消除咳嗽和咳痰，止喘、消炎。服用方便，病人易接收，副作用小，費用低，見效快。
下面從動物藥效學試驗研究本發(fā)明的有效性和藥理作用。
本發(fā)明制成的浸膏動物試驗研究1抗細菌作用1.1體外抗菌試驗
1.1.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001。試驗時稱取20克本發(fā)明浸膏，加至55.8ml融化的50℃M-H瓊脂培養(yǎng)基混勻后，即成100mg/ml濃度，再取出40ml該藥液用于試驗。即從40ml中吸出20ml含藥培養(yǎng)基傾倒平皿，余下的20ml含藥培養(yǎng)基中再添加20ml無藥培養(yǎng)基稀釋，混勻后再吸出20ml傾倒平皿，依次類推，即以此二倍稀釋法制備含有本發(fā)明浸膏終濃度(以生藥量計)為1000mg/ml、500、250、125、62.5、31.2、15.6、8、42、1、0.5、0.25、0.125、0.06、0.03mg/ml的一系列含藥平皿待用。
紅霉素規(guī)格0.2g/片，批號65835061，北京第三制藥廠生產(chǎn)。試驗時用無菌水溶解配制，終濃度為128、64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125、0.06、0.03、0.015、0.008μg/ml的系列含藥平皿待用。
細菌臨床分離菌株試驗所用菌株均為2000.1~2002.4從成都華西醫(yī)科大學附一院、附二院收集的臨床致細菌，并經(jīng)常規(guī)檢驗方法重新鑒定。
金黃色葡萄球菌26株，肺炎鏈球炎26株、甲型溶血性鏈球菌10株、乙型溶血性鏈球菌10株、克氏肺炎桿菌10株、大腸桿菌10株、卡它球菌10株(。
標準質(zhì)控菌株金黃色葡萄球菌ATCC25923、大腸桿菌ATCC25922、肺炎鏈球炎NCTC10662為四川抗菌素工業(yè)研究所保存菌株。
培養(yǎng)基M-H培養(yǎng)基水解酪蛋白17.5g、牛肉粉5g、可溶性淀粉1.5g，加蒸餾水1000ml，pH7.2。固體培養(yǎng)基中加15g瓊脂粉。用于革蘭氏陽性、陰性需氧菌。
1.1.2實驗方法采用瓊脂二倍稀釋法測定本發(fā)明浸膏的最低抑菌濃度。用多點接種儀將細菌接種于含不同藥物濃度的瓊脂平皿表面上，每點含菌量約為105CFU/ml，37℃孵育18~20小時觀察結(jié)果，以無細菌生長平皿培養(yǎng)基中所含藥物的最低濃度過藥物對該菌的最低抑菌濃度(MIC值)。
1.1.3實驗結(jié)果實驗結(jié)果見表1。
表1本發(fā)明浸膏體外抗菌活性試驗細菌(株)本發(fā)明浸膏(mg/ml) 紅霉素(μg/ml)MICRange 0.05-60.5 0.06-128金黃色葡萄球菌(26)MIC5015.632MIC9062.564MICRange 0.06-60.5 0.5--64肺炎鏈球炎(26)MIC5015.64MIC90125 32MICRange 2-165 0.5-65甲型溶血性鏈球菌(10) MIC5016.65MIC90135 30MICRange 2-145 0.5-64乙型溶血性鏈球菌(10) MIC5016.66MIC90135 31MICRange 0.06-62.5 0.06--128克氏肺炎桿菌(10) MIC5062.50.5MIC9062.5128MICRange 15.6-62.5 0.5--4大腸桿菌(10) MIC5031.21MIC9062.54MICRange 0.06-65.5 0.5--45卡它球菌(10) MIC5011.22MIC9062.512
MIC質(zhì)控菌株本發(fā)明浸膏(mg/ml) 紅霉素(μg/ml)大腸桿菌ATCC25922 15.60.25肺炎鏈球炎NCTC10662 0.060.5金黃色葡萄球菌ATCC25923 15.6321.1.4結(jié)論由表1中可見，本發(fā)明浸膏對所試革蘭氏陽性、陰性細菌均有一定的抑菌活力。本發(fā)明浸膏對金葡球菌的抑菌活力較強，MIC范圍為0.05-60.5mg/ml；對甲型溶血性鏈球菌MIC值范圍在2-165mg/ml；對乙型溶血性鏈球菌MIC值范圍在2-145mg/ml；本發(fā)明浸膏對肺炎鏈球炎、克氏肺炎桿菌抑菌活力較強，MIC值范圍在0.06~62.5mg/ml；對大腸桿菌的MIC值范圍在15.6-62.5mg/ml；對卡它球菌的抑菌活力較強，MIC值0.06-65.5mg/ml。
1.2體內(nèi)保護試驗1.2.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001。
紅霉素片規(guī)格0.2g/片，批號65835061，北京第三制藥廠生產(chǎn)。
實驗菌種用于感染動物的細菌為金黃色葡萄球菌011915、肺炎連球菌，系2001年從成都地區(qū)收集的臨床分離致病菌。
實驗動物選用健康昆明種小白鼠，體重18-22克，雌雄各半，由四川抗菌素工業(yè)研究所動物繁殖室提供。動物合格證號川飼動第85號。
1.2.2實驗方法試驗菌液的制備將試驗菌株接種于MH肉湯中，37℃培養(yǎng)18小時，用5％滅菌干酵母液適當稀釋備用。
最小致死菌量(MLD)的測定取健康昆明種小鼠，體重18-22克，隨機分組，每組10只小鼠，雌雄各半，吸取上述不同稀釋度的菌液分別腹腔注射入小鼠體內(nèi)，每鼠0.5ml，感染后連續(xù)觀察7天，并記錄小鼠死亡數(shù)，以引起小鼠100％死亡的最低菌量作為最小致死菌量(MLD)。用該菌量作為體內(nèi)保護試驗的感染菌量。
藥液的配制試驗用藥均用0.5％CMC及生理鹽水配制，本發(fā)明浸膏配制成濃度為235.8mg/ml、157.2mg/ml、78.6mg/ml、39.3mg/ml、19.65mg/ml的藥液(以生藥量計)。紅霉素的濃度為2.80mg/ml、2.24mg/ml、1.80mg/ml、1.44mg/ml、1.15mg/ml、0.92mg/ml、0.74mg/ml。
感染及治療實驗將實驗動物按性別、體重隨機均勻分組，雌雄各半，每組10只小鼠，各組分別給藥劑量為5895mg/kg、3930mg/kg、1965mg/ml、983mg/kg、491mg/kg(以生藥量計，分別為臨床成人日用量的30、20、10、5、2.5倍。臨床日用量196.5mg(生藥)/kg，陽性對照藥紅霉素的給藥劑量為70mg/kg、56mg.kg、45mg/kg、36mg/kg、28.8mg/kg、23.0mg/kg、18.5mg/kg。
小鼠灌胃本發(fā)明浸膏粉藥液，每日一次，連續(xù)給藥3天，每只小鼠0.5ml/20g，于第4天給藥后各組小鼠腹腔感染受試菌液，每鼠感染菌量為0.5ml(1MLD)。紅霉素于感染菌液后即刻及4小時后各灌胃給藥一次，同時設感染對照組，繼續(xù)給藥至第10天，記錄感染后七天內(nèi)小鼠死亡數(shù)，根據(jù)感染后七天動物存活數(shù)計算其半數(shù)有效劑量(ED50)及其95％可信限。
實驗數(shù)據(jù)處理本發(fā)明浸膏與對照藥紅霉素對大腸桿菌ATCC25922、肺炎鏈球炎NCTC10662感染小鼠體內(nèi)保護作用的半數(shù)有效劑量ED50及其95％可信限均按Bliss法運用中國醫(yī)學科學院編制的程序軟件，使用計算機和統(tǒng)計學處理。
1.2.3實驗結(jié)果結(jié)果見表2和表3
表2本發(fā)明浸膏和紅霉素對小鼠體內(nèi)感染的保護作用(肺炎鏈球菌)

表3本發(fā)明浸膏和紅霉素對小鼠體內(nèi)感染的保護作用(大腸桿菌)

結(jié)果表明本發(fā)明浸膏、紅霉素分別灌胃給給藥對肺炎鏈球炎NCTC10662感染小鼠的ED50值分別為2027mg/kg和28.67mg/kg，對大腸桿菌9912感染小鼠的ED50分別為4162mg/kg和45.87mg/kg。
1.2.4結(jié)論從以上的實驗結(jié)果可看出，本發(fā)明浸膏也呈現(xiàn)出一定的體內(nèi)抗菌作用，對肺炎鏈球炎和大腸桿菌感染小鼠的ED50分別為2027mg(生藥)/kg和4162mg(生藥)/kg。
2本發(fā)明浸膏體外抗病毒實驗研究實驗報告2.1實驗材料2.1.1受試藥本發(fā)明浸膏。棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001。
2.1.2陽性對照藥病毒唑(三氮唑核苷)注射液規(guī)格100mg/ml/支，批號為2003101；宜昌市三峽制藥廠生產(chǎn)，購于成都西部醫(yī)藥集團公司。
2.1.3病毒株肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)，分別由首都兒科研究所和本室(臨床分離株)提供。
1.4細胞株2.1.4Hep-2細胞由汕頭市永恒輝生物工程公司提供，生長營養(yǎng)液為10％小牛血清Eagles液，實驗前我室復蘇、傳代、分裝試管。
2.2實驗方法2.2.1藥物毒性測定用Hanks液將本發(fā)明浸膏及陽性對照藥病毒唑分別從1∶10-1∶80作倍比稀釋，取以上2種藥液及1∶10-1∶80藥液為0.1ml分別接種Hep-2細胞管各2支，待吸附45分鐘后，加2％小牛血清Eagles液0.9ml，同步設細胞對照、空白對照，置37℃溫箱。每天觀察細胞毒性反應，并記錄結(jié)果。
2.2.2病毒毒力測定用Hanks液將肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)從10-1-10-6稀釋。取以上10倍稀釋的各種濃度的病毒液分別接種0.1ml于4支Hep-2細胞管中，待吸附45分鐘后，加2％小牛血清Eagles液0.9ml，同步設細胞對照，置37℃溫箱。每天觀察細胞病變(CPE)，以高濃度病毒管出現(xiàn)≥3+細胞病變(CPE)，細胞對照正常，可終止試驗。以最低濃度病毒管出現(xiàn)≥2+細胞病變(CPE)為病毒毒力終點，計算該病毒TCID50。
2.2.3抗病毒試驗取100 TCID50/0.1ml肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)感染Hep-2細胞管各2支，待吸附60分鐘后，洗去病毒液，分別加入0.1ml本發(fā)明浸膏及陽性對照藥病毒唑滴眼液的原液及1∶10-1∶80稀釋藥液，待吸附45分鐘后，分別于各病毒Hep-2細胞管加2％小牛血清Eagles液0.8ml，同步設細胞對照、病毒對照及空白對照(以Hanks液代替藥液)，置37℃溫箱。每天觀察細胞病變，并記錄結(jié)果。
2.3實驗結(jié)果2.3.1細胞毒性試驗結(jié)果本發(fā)明浸膏及陽性對照藥病毒唑的原液及1∶10-1∶80藥液對Hep-2細胞均無任何毒性反應。結(jié)果見表4表4細胞毒性試驗結(jié)果藥液 細胞原液1∶101∶201∶401∶80細胞對照空白對照本發(fā)明浸膏Hep-20/2 0/2 0/2 0/2 0/20/2 0/2病毒唑 Hep-20/2 0/2 0/2 0/2 0/20/2 0/2注“0”表示細胞無病變；“2”表示細胞管數(shù)。
2.3.2病毒毒力測定結(jié)果病毒選用敏感的易感細胞，分別加入10倍稀釋的不同濃度的病毒液，根據(jù)細胞病變結(jié)果用Reed、Muench法，計算病毒半數(shù)感染細胞量(TCID50)。結(jié)果見表5表5各類病毒TCID50結(jié)果病毒 肺炎病毒(F.m100)呼吸道合胞病毒(RSV)TCID5010-4.6610-8.222.3.3抗病毒試驗結(jié)果本發(fā)明浸膏的原液(1∶1)及其他濃度藥液對肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)均有抑制細胞內(nèi)病變作用。
陽性對照藥，病毒唑原液(1∶1)對肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)均有抑制細胞內(nèi)病變作用。
結(jié)果見表6表6本發(fā)明浸膏及病毒唑注射液抗病毒結(jié)果藥液濃度細胞病毒藥液病毒對照對照原液1∶10 1∶201∶401∶80F.m1000/2 0/2 0/2 2/2 2/2 0/2 2/2本發(fā)明浸膏RSV 0/2 0/2 0/2 2/2 2/2 0/2 2/2F.m1000/2 2/2 2/2 2/2 2/2 0/2 2/2病毒唑RSV 0/2 2/2 2/2 2/2 2/2 0/2 2/2注0/2表示2管細胞無病變。2/2表示2管細胞均有病變。
根據(jù)本發(fā)明浸膏及對照藥病毒唑在細胞內(nèi)的抗病毒結(jié)果，按Reed、Muench法，計算抑制細胞病毒感染量(TCID50)，最小有效濃度(MTC)、半數(shù)有效濃度(IC50)和治療指數(shù)(TI)，結(jié)果見表7。
表7本發(fā)明浸膏及病毒唑有關數(shù)據(jù)結(jié)果藥液病毒 TCID50MTC IC50TI
本發(fā)明浸膏F.m100 10-4.661∶20 1∶28.16 20RSV 10-4.661∶20 1∶28.16 20F.m100 10-4.661∶1 1∶1.4 1病毒唑RSV 10-8.221∶1 1∶1.4 12.4結(jié)論本發(fā)明浸膏及對肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)均有不同程度的抑制作用。陽性對照藥病毒唑的原液(1∶1)對肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)型有抑制作用。本發(fā)明浸膏對肺炎病毒(F.m100)及呼吸道合胞病毒(RSV)的抑制作用均優(yōu)于病毒唑.
3免疫調(diào)節(jié)作用3.1本發(fā)明對環(huán)磷酰胺小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)吞噬功能的影響3.1.1試驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
空白對照品生理鹽水。
陽性對照品鹽酸左旋咪唑，25mg/片，由桂林制藥廠生產(chǎn)。批號980901，配制成0.025％的濃度，劑量5mg/kg。
環(huán)磷酰胺上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，批號981120。劑量80mg/kg。
試劑Na2CO3(AR)，由天津市天達進化材料精細化工廠生產(chǎn)，批號010604。
一得閣墨水，由北京墨水廠生產(chǎn)。
儀器UVIKON-N型紫外可見分光光度計，由BIO-TEK公司制造。
動物昆明種小鼠，體重18-20g，雌雄各半。由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供，合格證醫(yī)動字第24101102號。
3.1.2試驗方法昆明種小鼠60只，組隨機分為6組(見表8)，每組10只，分為空白對照組、模型組、鹽酸左旋咪唑組和本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組。其中空白對照組和模型組灌胃給予生理鹽水；本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，每日一次，連續(xù)給藥10天；鹽酸左旋咪唑組灌胃5mg/kg，連續(xù)給藥7天。同時于第6、7兩天除空白對照組外其余均腹腔注射環(huán)磷酰胺(劑量80mg/kg)。于末次給藥30min，稱體重，尾靜脈注射一得閣墨水(16mg炭粒/ml)0.1ml/10g.bw，分別在注入墨水后5、10min用特制取血吸管從小鼠眼眶后靜脈叢取血0.025ml，并立即吹入0.1％NaCO3液2ml中，吸管反復吸取，以免血液附于管壁，在紫外可見分光光度計上于675nm處比色。剖腹，取脾肝稱重，按下式計算吞噬指數(shù)K及吞噬系數(shù)(校正吞噬指數(shù))α。
K=LogOD1-logOD2T2-T1=LogOD1-logOD210-1=LogOD1-logOD29]]>OD1、OD2為不同時間所取血樣的光密度，T2-T1為取血樣的時間差， 3.1.3試驗結(jié)果試驗結(jié)果見表8
表8本發(fā)明對環(huán)磷酰胺小鼠網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)(RES)吞噬功能的影響(x±SD)劑量動物數(shù)組別 吞噬指數(shù)(K)×10-2吞噬系數(shù)(α)(g生藥/kg) (只)空白對照 等容量蒸餾水 10 5.11±1.02*6.58±0.84*模型組 等容量蒸餾水 10 3.10±1.124.48±0.74左旋咪唑 5mg/kg 10 6.18±1.67*7.02±1.10*本發(fā)明低劑量組98.2 10 6.31±1.17*7.16±0.83*本發(fā)明中劑量組196.3 10 6.51±0.98*7.98±0.85*本發(fā)明高劑量組393.0 10 6.23±2.01*7.09±1.44*注與模型組比較*P＜0.05.
表8結(jié)果顯示經(jīng)測定OD值計算得K和α，左旋咪唑和本發(fā)明低、中、高劑量組的K值與α值均有增加，與模型組相比有顯著性差異p＜0.05。
3.1.4試驗結(jié)論小白鼠經(jīng)口灌服本發(fā)明后，可增加小鼠吞噬指數(shù)K及吞噬系數(shù)α。說明本發(fā)明有增強網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬能力作用。
3.2顆粒劑對雞紅細胞作免疫原的溶血素產(chǎn)生的影響3.2.1試驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
空白對照品生理鹽水。
陽性對照品鹽酸左旋咪唑，25mg/片，由桂林制藥廠生產(chǎn)。批號980901，配制成0.025％的濃度，劑量5mg/kg。
環(huán)磷酰胺上海華聯(lián)制藥有限公司生產(chǎn)，批號981120。劑量80mg/kg。
試劑Na2CO3(AR)，由天津市天達進化材料精細化工廠生產(chǎn)，批號010604。
一得閣墨水，由北京墨水廠生產(chǎn)。
Alsever’s溶液枸櫞酸三鈉，2H2O 8.0g、枸櫞酸0.5g、無水葡萄糖18.7g、氯化鈉4.2g、蒸餾水加至1000ml。
雞紅細胞在4℃冰箱于Alsever氏液中保存，臨用時用生理鹽水洗三次，配成5％混懸液即可。
補體以豚鼠血清用生理鹽水配成10％。恒溫箱中保溫30min，0℃冰箱中中止反應儀器UV-75型分光光度計。
動物昆明種小鼠，體重18-20g，雌雄各半。由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供，合格證醫(yī)動字第24101102號。
3.2.2試驗方法將60只小鼠隨機分為6組(見表9)，每組10只，分為空白對照組、模型組、鹽酸左旋咪唑組和本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組。第一天每組每只動物ip5％雞紅細胞原液0.2ml/只進行免疫。1小時后給藥，其中空白對照組和模型組灌胃給予生理鹽水；本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，每日一次，連續(xù)給藥10天；鹽酸左旋咪唑組灌胃5mg/kg，連續(xù)給藥7天。于第7天開始除空白對照組外其余在給藥半小時后同時每天皮下注射0.1％的環(huán)磷酰胺(劑量80mg/kg)。
末次給藥后并皮下注射0.1％的環(huán)磷酰胺后1h，每只動物摘眼球取血1ml，離心，取血清用生理鹽水稀釋100倍，取稀釋血清1ml，與5％雞紅細胞懸液0.5ml，10％補體0.5ml混合，在37℃水浴保溫半小時，再置0攝氏度冰箱中終止反應，離心，取上清液于分光光度計540nm處比色，測光密度(OD)，計算溶血素值(OD值×100)，并摘取脾臟，計算脾臟指數(shù)(脾重/體重×10)。另設不加血清的空白對照組。比較各組的差異。
3.2.3試驗結(jié)果結(jié)果見表9表9顆粒劑對雞紅細胞作免疫原的溶血素產(chǎn)生的影響(n＝10，x±SD)組 別劑量(g生藥/kg) 溶血素含量 脾臟指數(shù)(mg/10g)空白組 等量生理鹽水 4.78±0.49**65.14±7.34**模型組 等量生理鹽水 3.18±0.65 40.20±8.92鹽酸左旋咪唑 5mg/kg 4.12±0.54**53.08±10.1.9*本發(fā)明浸膏低劑量組 98.2 3.94±0.69 53.36±8.02*本發(fā)明浸膏中劑量組196.3 4.23±0.70**53.10±8.13**本發(fā)明浸膏高劑量組393.0 4.75±0.35**64.39±5.98**注與模型組比較*P＜0.05，**P＜0.01結(jié)果顯示空白組、鹽酸左旋咪唑和本發(fā)明中、高劑量組的溶血素含量現(xiàn)模型組比較，經(jīng)t檢驗，有顯著性差異(P＜0.01)；脾臟指數(shù)脾臟指數(shù)與模型組比較鹽酸左旋咪唑、和本發(fā)明低劑量組，經(jīng)t檢驗，有差異(P＜0.05)，空白組和本發(fā)明中、高劑量組經(jīng)t檢驗，有差異P＜0.01。
3.2.4試驗結(jié)論本發(fā)明對環(huán)磷酰胺致免疫低下的小鼠溶血素含量和脾臟指數(shù)具有明顯升高作用。說明本發(fā)明能增強體液免疫功能。
4止咳作用本發(fā)明對小鼠氨水引起咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)的影響4.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
磷酸可待因注射液規(guī)格為30mg/支，批號20010601，由沈陽第一制藥廠生產(chǎn)。
濃氨水分析純，批號20001211，成都化學試劑廠生產(chǎn)。
動物昆明種小鼠，體重18-20g，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第24101102號。
4.2實驗方法實驗前選取對氨水刺激咳嗽敏感的小鼠50只，隨機分為5組(見表10)，每組10只，本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替，每日一次，連續(xù)給藥10天。磷酸可待因組給藥劑量為0.03g/kg，給藥途徑為腹腔注射，給藥時間為后3天。于末次給藥30分鐘將小鼠置500ml干燥廣口瓶內(nèi)，瓶內(nèi)置一棉球，向棉球注入濃氨水0.5ml/只，立即密封瓶口，5秒鐘后將小鼠迅速取出，觀察小鼠咳嗽潛伏期(自注入濃氨水開始，到發(fā)生咳嗽所經(jīng)時間為潛伏期)和自注入濃氨水開始5分種內(nèi)咳嗽次數(shù)(小鼠咳嗽表現(xiàn)為腹肌收縮，同時張大嘴，有時發(fā)生咳聲)。以各組小鼠咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)與陰性對照組進行組間比較。
4.3實驗結(jié)果結(jié)果見表10表10本發(fā)明對小鼠氨水引起咳嗽潛伏期和咳嗽次數(shù)的影響藥物劑量 咳嗽潛伏期5分種內(nèi)咳嗽次數(shù)組別 動物數(shù)(mg生藥/kg)(秒，x±s)(x±s)蒸餾水組 10 等容量蒸餾水 31.6±17.2 17.4±6.8磷酸可待因組10 0.03g/kg215.8±71.2**2.6±1.8**本發(fā)明浸膏低劑量組10 98.2 208.2±57.4**3.4±2.5**本發(fā)明浸膏中劑量組10196.3 155.2±52.6**6.5±3.9**本發(fā)明浸膏高劑量組10393.0 133.2±58.4**9.5±5.4**注與蒸餾水組比較**P＜0.01.
表中結(jié)果表明磷酸可待因組、本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組對濃氨水所致小鼠咳嗽均有明顯止咳作用。
4.4結(jié)論本發(fā)明浸膏對濃氨水所致小鼠咳嗽有明顯止咳作用。
5祛痰作用5.1本發(fā)明對小鼠氣管段酚紅排泌的影響5.1.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
氯化銨規(guī)格0.3g/片，批號980409，由重慶制藥六廠生產(chǎn)。
酚紅分析純，批號980327，天津化學試劑一廠。
分光光度計UVIKON-N型紫外可見分光光度計，由BIO-TEK公司制造。
動物昆明種小鼠，體重18-20g，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第24101102號。
5.1.2實驗方法昆明種小鼠50只，組隨機分為5組(見表11)，每組10只，本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替，每日一次，連續(xù)給藥10天；氯化銨組灌胃1.0g/kg，連續(xù)給藥3天。于末次給藥60分鐘，腹腔注射5％酚紅溶液0.2ml/只，注射后30分鐘脫頸椎處死小鼠。將其仰臥固定于手術板上，剪開頸正中皮膚，分離氣管，于喉頭下將磨平的7號針頭插入氣管內(nèi)約0.3cm，以絲線結(jié)扎固定后，用1ml注射器吸取5％NaHCO3溶液0.5ml，通過針頭來回灌氣管3次，收集并混合3次灌洗液，然后置試管中離心，取上清液于分光光度計546nm波長處測定OD值。同時用酚紅作一標準曲線，根據(jù)標準曲線計算酚紅含量(m/ml)。將各組酚紅含量與陰性對照組進行組間比較。
5.1.3實驗結(jié)果結(jié)果見表11表11本發(fā)明對小鼠氣管段酚紅排泌的影響(N＝10，秒，x±s)

注與蒸餾水組比較**P＜0.01.
表中結(jié)果表明氯化銨組、本發(fā)明浸膏粉中、高劑量組對小鼠氣管段酚紅排泌的量有明顯促進作用。
5.1.4結(jié)論本發(fā)明浸膏中、高劑量對小鼠氣管段酚紅排泌的量有明顯促進作用，因而具有祛痰作用。
5.2本發(fā)明對家兔離體氣管纖毛黏液流運動的影響5.2.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
氯化銨規(guī)格0.3g/片，批號980409，由重慶制藥六廠生產(chǎn)。
動物家兔50只，體重2.1-2.2kg，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第24101102號。
5.2.2實驗方法取家兔50只，隨機分為5組(見表12)，每組10只，本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替，每日一次，連續(xù)給藥10天；氯化銨組灌胃1.0g/kg，連續(xù)給藥3天。于末次給藥1小時后，用錘子擊昏兔子，股動脈放血處死，迅速剝離并取出喉頭至氣管分叉處的整段氣管，立即放入充氧的臺氏液中，剪取一段氣管，縱向分為兩段，取一段放入37℃臺氏液濕潤的棉花上，氣管內(nèi)膜向上，氣管同棉花一起放在培養(yǎng)液中，保持30°傾斜，喉端向上，外周以37℃水浴恒溫，其上用冷光源照射，穩(wěn)定5分鐘，以針頭蘸少許印度墨汁放于下端，用放大20倍的解剖鏡對準氣管，觀察墨汁顆粒運行2mm所需的時間。每個樣本觀察3次，取3次時間的平均值。每次觀察完畢，將氣管段置臺氏液中漂洗，以除去墨汁，5分鐘后再測1次，對運行時間進行統(tǒng)計處理。
5.2.3實驗結(jié)果結(jié)果見表12表12對家兔離體氣管纖毛黏液流運動的影響(N＝10，秒，x±s)組別 劑量(g/kg) 運行時間(秒)蒸餾水組 等容量蒸餾水0.2ml/10g260.00±50.62氯化銨組 1.0g/kg 37.50±8.20**本發(fā)明低劑量組 98.2 39.00±15.55**本發(fā)明中劑量組196.3 26.12±10.03**本發(fā)明高劑量組393.0 23.00±5.15**注與蒸餾水組組比較，**P＜0.01表中結(jié)果表明氯化銨組、本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組對家兔離體氣管纖毛黏液流運動有明顯促進加快的作用。
5.2.1結(jié)論本發(fā)明浸膏低、中、高劑量具有祛痰作用。
6平喘作用6.1本發(fā)明對氯化乙酰膽咸和磷酸組胺引起豚鼠哮喘的影響6.1.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
氨茶堿規(guī)格0.3g/片，批號001017，四川省德陽華康藥業(yè)有限公司生產(chǎn)。
致喘液2％氯化乙酰膽咸和0.1％磷酸組胺1∶1混合液自配。
動物豚鼠，體重150-200g，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第25103102號。
6.1.2實驗方法實驗前將豚鼠逐一置密閉鐘罩內(nèi)，以53kPa恒壓通過射流噴霧化器向鐘罩內(nèi)噴致喘液(2％氯化乙酰膽咸和0.1％磷酸組胺1∶1混合液)15秒，噴霧停止后，觀察豚鼠2.5分鐘內(nèi)是否出現(xiàn)喘息性抽搐，若不出現(xiàn)視為不敏感動物，棄之。共選50只符合要求的敏感豚鼠，隨機分為5組(見表13)，每組10只，本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替，每日一次，連續(xù)給藥10天。氨茶堿組給藥劑量為86mg/kg，給藥途徑為灌胃，給藥時間為后3天。于末次給藥30分鐘將豚鼠置4L容積的密閉鐘罩內(nèi)，用WM-6型氣體壓縮機，以53kPa恒壓通過射流噴霧化器向鐘罩內(nèi)噴致喘液(2％氯化乙酰膽咸和0.1％磷酸組胺1∶1混合液)15秒，噴霧停止后，觀察豚鼠5分鐘，記錄各豚鼠自停止噴霧后至出現(xiàn)喘息性抽搐為哮喘潛伏期，若超過5分種不發(fā)生喘息性抽搐，則其咳嗽潛伏期仍按300秒計。以各組豚鼠哮喘潛伏期時間與陰性對照組進行組間比較。
6.1.3實驗結(jié)果結(jié)果見表13表13本發(fā)明對氯化乙酰膽咸和磷酸組胺引起豚鼠哮喘潛伏期的影響(N＝10，秒，x±s)組別藥物劑量(mg生藥/kg) 喘息性抽搐哮喘潛伏期蒸餾水組等容量蒸餾水0.2ml/10g 142.6±28.8氨茶堿組0.086g/kg 267.6±32.6**本發(fā)明浸膏粉低劑量組98.2 221.3±46.9**本發(fā)明浸膏粉中劑量組 196.3 239.0±48.8**
本發(fā)明浸膏粉高劑量組 393.0 280.9±20.5**注與蒸餾水組比較**P＜0.01.
表中結(jié)果表明氨茶堿組、本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組對氯化乙酰膽咸和磷酸組胺引起豚鼠哮喘潛伏期有延長作用。
6.1.4結(jié)論本發(fā)明浸膏對氯化乙酰膽咸和磷酸組胺引起豚鼠哮喘有明顯的平喘作用。
6.2本發(fā)明浸膏對乙酰膽堿引起支氣管收縮的影響6.2.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
陽性藥川貝枇杷膏，九寨溝天然藥物制藥廠生產(chǎn)，批號010408，100ml/瓶。
試藥乙酰膽堿上?；瘜W試劑總廠出品。
K-H(Krebs-Henseleit)液，(95％O2+5％CO2)混合氣體，儀器XWTD-264臺式平衡記錄儀，上海大華儀器廠生產(chǎn)超級恒溫器重慶實驗設備廠生產(chǎn)動物豚鼠，體重150-200g，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第28103002號。
6.2.2實驗方法取400-500g豚鼠50只，分為5組(見表14)，擊斃，分離出氣管，于K-H(Krebs-Henseleit)營養(yǎng)液中制備氣管螺旋條，置于盛有15ml K-H(Krebs-Henseleit)營養(yǎng)液恒溫37℃麥氏浴槽中，下端固定，上端通過張力換能器連接臺式自動平衡記錄儀，持續(xù)通入(95％O2+5％CO2)混合氣體，氣管條負荷3g，標本平衡90min，穩(wěn)定后開始試驗，先加入乙酰膽堿，終濃度為10-5mol，待作用達峰值后，分別加入不同濃度的本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，川貝枇杷膏組給藥劑量為QQQmg/kg，陰性組以等容積量的蒸餾水代替(使浴槽終濃度分別為27、54、108mg生藥/ml)，觀察藥物對氣管平滑肌的解痙作用，6.2.3試驗結(jié)果結(jié)果見表14表14本發(fā)明浸膏對乙酰膽堿引起支氣管收縮的影響(N＝10，x±s)組別 劑量(g/kg)解痙百分率(％)蒸餾水組 等量蒸餾水 2.52±0.82川貝枇杷膏組 12.3mg膏重/ml82.55±7.04**本發(fā)明浸膏粉低劑量組98.2 27.89±5.17**本發(fā)明浸膏粉中劑量組196.3 50.39±10.64**本發(fā)明浸膏粉高劑量組393.0 72.57±10.33**注與蒸餾水組組比較，**P＜0.01結(jié)果表明川貝枇杷膏組和本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量組均可濃度依賴性的拮抗乙酰膽堿的收縮支氣管作用P＜0.01。而蒸餾水組無此作用。
6.2.4結(jié)論 本發(fā)明藥物具有平喘作用。
7解熱作用7.1本發(fā)明對三聯(lián)菌苗所致家兔發(fā)熱的影響7.1.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
阿司匹林腸溶片白色片劑，0.3g/片，西北第二合成制藥廠生產(chǎn)，批號981201，用蒸餾水配制成0.06g/ml備用。
傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)菌苗由成都生物制品研究所提供，劑量1.0ml/kg體重。
儀器WMZ-03溫度指示儀，上海醫(yī)用儀表廠。
動物家兔50只，體重2.1-2.2kg，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第24101102號7.1.2實驗方法實驗前以溫度指示儀選擇肛溫38.5-39.6℃，而溫差不超過0.3℃家兔若干只，在室溫20℃條件下，各兔耳緣靜脈注射傷寒、副傷寒甲、乙三聯(lián)菌苗1.0ml/kg體重，1小時后測肛溫，選取升溫在0.6℃以上的發(fā)熱家兔50只，按升溫情況隨機分為5組，每組10只，一次性給藥本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替。阿斯匹林組給藥劑量為86mg/kg，給藥途徑為灌胃，給藥后0.5、1、2、3、4、5、6小時測肛溫，記錄各時間段動物肛溫，與陰性組進行組間比較7.1.3實驗結(jié)果結(jié)果見表15
表15本發(fā)明對三聯(lián)菌苗所致家兔發(fā)熱的影響(N＝10，℃x±SD)給藥后體溫劑 正常 致熱組別量 體溫 體溫0.5h 1h 2h3h 4h5h6h空白39.2±40.039.9± 39.8± 40.0± 40.0± 39.3± 39.4± 39.3±水對照 0.3±0.3 0.30.70.3 0.40.5 0.6 0.5阿斯 39.2±40.239.4± 39.4± 39.6± 39.6± 39.2± 38.7± 38.7±0.6匹林組 0.3±0.4 0.5*0.3*0.5*0.5*0.4*0.6*0.6*本發(fā)明低39.0±40.039.3± 39.4± 39.5± 39.4± 39.0± 38.9± 39.0±98.2劑量組 0.3±0.2 0.6*0.6*0.5*0.4*0.5*0.8*0.8*本發(fā)明中 196. 39.0±40.139.3± 39.3± 39.4± 39.4± 39.1± 38 6± 39.1±劑量組30.3±0.2 0.5*0.4*0.3*0.4*0.5*0.4*0.7*本發(fā)明高 393. 39.1±40.239.1± 39.1± 39.2± 39.2± 39.0± 38.2± 39.0±劑量組00.3±0.3 0.5*0.4*0.2*0.2*0.4*0.2*0.3*注與蒸餾水組組比較，*P＜0.05結(jié)果表明阿斯匹林組、本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量與空白對照組比較有顯著性差異，P＜0.057.1.4結(jié)論本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量具有顯著抑制三聯(lián)菌苗所致家兔發(fā)熱的作用，此解熱作用可持續(xù)3小時以上。
7.2本發(fā)明對新鮮啤酒酵母致大鼠發(fā)熱作用的影響7.2.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
阿司匹林腸溶片白色片劑，0.3g/片，西北第二合成制藥廠生產(chǎn)，批號981201，用蒸餾水配制成0.06g/ml備用。
新鮮啤酒酵母成都啤酒有限公司提供。用生理鹽水反復洗滌離心，以上清液的酵母濕重計算，用生理鹽水配制成15％的懸溶液于4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?br> 動物Wistar大鼠，雄性，140-250g，由成都中醫(yī)藥大學實驗動物中心提供，合格證號川實動管質(zhì)第8號。
儀器歐姆龍MC-3B型電腦數(shù)字式體溫計，歐姆龍大連有限公司生產(chǎn)。
7.2.2實驗方法實驗前測大鼠肛溫兩次(溫度指示儀探頭插入肛門2cm處)，選擇正常體溫大鼠背部皮下注射15％的新鮮啤酒酵母1ml/100g致熱，選取致熱后6小時升溫超過0.8℃的大鼠50只依體重隨機分為5組(見表16)，每組10只，隨即按以下一次性給藥本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替；陽性藥阿司匹林0.6g/kg(相當于人臨床日用量的20倍)，給藥體積為1ml/100g，分別測定給藥后0.5、1、2、3、4小時肛溫，計算與正常肛溫的差值，比較各組與陰性組的差異。
7.2.3實驗結(jié)果結(jié)果見表16表16本發(fā)明對新鮮啤酒酵母致大鼠發(fā)熱作用的影響(n＝10，℃，x±SD)劑量正常致熱6h 給藥后肛溫差值組別g/kg體溫 后的溫差 0.5h 1h 2h 3h 4h蒸餾等容量 36.9 1.5 1.6 1.8 1.5 1.4 1.1水組蒸餾水 ±0.4±0.6±0.4±0.4±0.4±0.6±0.5
阿司匹 37.0 1.3 0.80.30.20.1 0.20.6林組 ±0.4±0.2±0.3**±0.4***±0.5***±0.5***±0.5**供試品低 36.9 1.3 0.90.50.20.2 0.198.2劑量組 ±0.5±0.6±0.5*±0.7**±0.9***±0.7***±0.7***供試品 36.9 1.4 0.90.70.30.3 0.2196.3中劑量組 ±0.4±0.4±0.6*±0.6**±0.4***±0.6***±0.5***供試品高 36.9 1.5 1.00.9 0.5 0.4 0.2393.0劑量組 ±0.5±0.4±0.4**±0.6**±0.7***±0.4***±0.6***注與蒸餾水組比較*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001結(jié)果顯示阿司匹林能使新鮮啤酒酵母致熱后的大鼠肛溫顯著降低，表現(xiàn)出明顯的解熱作用，本發(fā)明浸膏高、中、低劑量也能使新鮮啤酒酵母致熱后的大鼠肛溫顯著降低，表現(xiàn)出明顯的解熱作用。
7.2.4結(jié)論本發(fā)明浸膏高、中、低劑量能使新鮮啤酒酵母致熱后的大鼠肛溫顯著降低，具有顯著的解熱作用。
8抗炎作用本發(fā)明對腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響8.1實驗材料藥物本發(fā)明浸膏粉，棕色粉末，每克相當于2.789g生藥，由成都中醫(yī)藥大學藥學院制劑教研室代為制備。批號021001，用蒸餾水配制35.2、70.4、140.9mg/ml(分別相當于98.2、196.3、393.0mg生藥/ml)供低、中、高劑量組使用。
阿司匹林腸溶片白色片劑，0.3g/片，西北第二合成制藥廠生產(chǎn)，批號981201，用蒸餾水配制成0.06g/ml備用。
伊文思藍上海試劑三廠，以生理鹽水配制成0.5％的溶液備用。
0.6％的醋酸液用無水醋酸加生理鹽水配制。
儀器UVIKON-N型紫外可見分光光度計，由BIO-TEK公司制造動物昆明種小鼠，體重18-20g，雌雄各半，由四川省醫(yī)學科學院實驗動物中心提供。合格證醫(yī)動字第24101102號。
8.2實驗方法選擇健康小鼠50只依性別體重隨機分為5組(見表17)，每組10只，本發(fā)明浸膏粉低、中、高劑量分別灌胃給予98.2、196.3、393.0mg生藥/kg(分別相當于人臨床日用量的5倍、10倍、20倍)，給藥容積均為0.2ml/10g動物體重，陰性組以等容積量的蒸餾水代替，每天一次，連續(xù)給藥10天；陽性藥阿司匹林0.6g/kg(相當于人臨床日用量的20倍)，給藥體積為1ml/100g，。陽性藥阿司匹林0.6g/kg(相當于人臨床日用量的20倍)，給藥體積為1ml/100g，給藥周期為3天，于末次給藥后半小時，每只尾靜脈注射0.5％的伊文思藍0.1ml/10g，隨即腹腔注射0.6％的醋酸液(劑量0.2ml/只)，20分鐘后脫頸椎處死，用6ml生理鹽水(分三次，2ml/次)洗滌腹腔，用吸管吸出洗液于試管中(已編號)，加生理鹽水定溶至10ml，3000rpm離心15分鐘取上清液于590nm處分光光度計比色，比較各組光密度值(OD)與陰性組的差異。
8.3實驗結(jié)果結(jié)果見表17表17本發(fā)明對腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高的影響(N＝10，x±SD)組別藥物劑量(mg生藥/kg) 光密度值(OD)蒸餾水組 等容量蒸餾水 0.370±0.137阿司匹林組 0.06g/kg 0.211±0.111**本發(fā)明浸膏粉低劑量組 98.2 0.214±0.102**本發(fā)明浸膏粉中劑量組 196.3 0.190±0.106**本發(fā)明浸膏粉高劑量組 393.0 0.196±0.112**注與蒸餾水組比較*P＜0.05；**P＜0.01.
結(jié)果顯示阿司匹林和本發(fā)明浸膏高、中、低劑量均對腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛細血管通透性增高具有明顯的抑制作用。
8.4結(jié)論本發(fā)明浸膏高、中、低劑量具有明顯的抗炎作用。
下面舉例制備方面的實施例進一步說明本發(fā)明，該實施例僅用于說明本發(fā)明而對本發(fā)明并沒有任何限制。
具體實施例方式
實施實例按下述配比稱取原料制成一天成人日用量黃荊子20g 黃芩20g 知母15g 天花粉15g款冬花15g 紫菀12g 苦杏仁12g葶藶子12g生產(chǎn)方法如下將黃荊子全量制成細粉(過80目篩)，余藥按照制備顆粒劑的煎煮方法，提取濃縮成浸膏，與黃荊子藥粉混合，加入糖粉(浸膏∶糖粉＝1∶0.15)混合均勻，制成混懸性顆粒劑。
權利要求
1.一種治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其物征在于它是由含有下述組合物及其重量配比的原料制成的藥劑。黃荊子4％-30％ 黃芩4％-30％ 知母4％-25％天花粉4％-25％款冬花4％-25％ 紫菀2％-25％ 苦杏仁2％-25％ 葶藶子2％-25％
2.根據(jù)權利要求1.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其中各原料的重量配比是黃荊子10％-20％ 黃芩10％-20％ 知母8％-18％天花粉8％-18％款冬花8％-18％ 紫菀6％-16％ 苦杏仁6％-16％ 葶藶子6％-16％
3.根據(jù)權利要求1.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其中各原料的重量配比是黃荊子16.53％黃芩16.53％知母12.40％ 天花粉12.40％款冬花12.40％紫菀9.92％ 苦杏仁9.91％葶藶子9.91％
4.根據(jù)權利要求1.、2.或3.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其特征在于所說的藥劑是任何一種藥劑學上所說的劑型。
5.根據(jù)權利要求1.、2.或3.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其特征在于組合物中同時含有黃荊子、黃芩兩藥物，并以黃荊子、黃芩兩藥物為基本組合加味所有中藥書上所記載藥味。
6.根據(jù)權利要求1.、2.或3.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其特征在于所說的中醫(yī)風溫肺熱證包括各種肺炎、支氣管炎、肺膿腫和風熱感冒等病屬中醫(yī)風溫肺熱證者。
7.根據(jù)權利要求4.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其特征在于所說的藥劑是顆粒劑、合劑(含口服液)。
8.根據(jù)權利要求6.所述的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，其特征在于將黃荊子研成過80目篩的細粉，另將黃芩、知母、天花粉、苦杏仁、紫菀、款冬花、葶藶子加水煮提三次，將三次煎液合并后濃縮成稠膏；將黃荊子細粉加入稠膏中混勻，制粒，整粒，干燥，分裝。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種新的治療屬中醫(yī)風溫肺熱證的藥物，主要是用于治療肺炎、支氣管炎、肺膿腫和風熱感冒等屬風溫肺熱證者，它是以含有黃荊子、黃芩、知母、天花粉、苦杏仁、紫菀、款冬花、葶藶子組合物為原料，按比例配制，按各味藥物的不同特性分別加以處理后制成各種制劑，例如顆粒劑、合劑(含口服液)等。本發(fā)明配方新穎，創(chuàng)新性高，組方精煉，標本兼治，療效顯著，安全性好，老少皆宜。
文檔編號A61P11/00GK1513517SQ0313557
公開日2004年7月21日 申請日期2003年8月11日 優(yōu)先權日2003年8月11日
發(fā)明者陳明元 申請人:陳明元