專利名稱：治療支氣管哮喘的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及支氣管哮喘的治療，特別是提供了一種治療支氣管哮喘的沙美特羅與布地奈德的組合物。新的具有藥學(xué)活性物質(zhì)的沙美特羅與布地奈德的組合物，可以制成復(fù)方吸入氣霧劑與粉霧劑、非吸入氣霧劑與粉霧劑和復(fù)方噴霧劑，有效地治療支氣管哮喘病。
沙美特羅(Salmeterol)是一種公知的強(qiáng)效、長效及高選擇性的β2-受體興奮劑，副作用小，對心血管系統(tǒng)無影響，也不影響骨骼肌震顫等?？捎糜陂L期治療哮喘(包括夜間哮喘和運動誘發(fā)的哮喘)、慢性支氣管炎和肺氣腫中的可逆性氣道阻塞。
布地奈德(Budesonide)是一種市售的非鹵代化糖皮質(zhì)激素，具有很強(qiáng)的局部抗炎作用；能抑制早期的支氣管痙攣和晚期過敏反應(yīng)；對氣道高反應(yīng)患者，可降低組胺及乙酰膽堿引起的氣道高反應(yīng)性；并且由于本品結(jié)構(gòu)上的特點，當(dāng)局部用藥吸收后，約有90％的藥物經(jīng)肝臟迅速轉(zhuǎn)化成無活性代謝產(chǎn)物，血漿藥物濃度較低，因此全身副作用的發(fā)生率遠(yuǎn)小于傳統(tǒng)的糖皮質(zhì)激素類藥物。
上述兩種藥物用于治療支氣管哮喘等呼吸系統(tǒng)的病患有較好的療效，但是一般用藥量較大，療效單一，分別使用時又不方便。
本發(fā)明包括(1)第一個活性成分，它選自沙美特羅，或其可藥用的鹽；(2)第二個活性成分，它是布地奈德；
(3)一種或多種可藥用的非活性成分；其中，在組合物中(1)與(2)的摩爾比是1∶(0.38～20)。優(yōu)選的摩爾比為1∶3。
適合的沙美特羅生理可接受的鹽包括衍生自無機(jī)的和有機(jī)的酸的酸加成鹽，例如氯化物，溴化物，硫酸鹽，磷酸鹽，羥萘酸鹽，馬來酸鹽，富馬酸鹽，酒石酸鹽，檸檬酸鹽，苯甲酸鹽，4-甲氧基苯甲酸鹽，2-或4-羥基苯甲酸鹽，4-氯苯甲酸鹽，對甲苯磺酸鹽，甲苯磺酸鹽，抗壞血酸鹽，乙酸鹽，琥珀酸鹽，乳酸鹽，戊二酸鹽，丙三羧酸鹽，羥基萘甲酸鹽或油酸鹽或其溶劑化物。第一個活性成分優(yōu)選是沙美特羅或沙美特羅羥萘酸鹽。
當(dāng)?shù)谝粋€活性成分是沙美特羅時，第一個活性成分的每日劑量是從40μg至200μg，是沙美特羅羥萘酸鹽時，第一個活性成分的每日劑量是從54μg至290μg，相應(yīng)地第二個活性成分布地奈德的每日劑量是從80μg至800μg。
本發(fā)明的組合物最優(yōu)選包括每次使用劑量50μg的沙美特羅和每次使用劑量160μg的布地奈德，每天施用兩次。
將活性成分同一個或更多的可藥用的非活性成分，如添加劑，稀釋劑或載體，拋射劑等以混合物形式使用，優(yōu)選地每劑量從20μg至30mg。粉霧劑中適合的稀釋劑或載體的實例包括乳糖，葡聚糖，阿拉伯膠，甘露糖醇和葡萄糖。優(yōu)選地使用乳糖。氣霧劑和噴霧劑中適合的溶劑為乙醇或油酸，優(yōu)選地使用乙醇。適合的潛溶劑為甘油，丙二醇或聚乙二醇，優(yōu)選使用甘油。溶劑和潛溶劑在此處亦可統(tǒng)稱為稀釋劑。適合的拋射劑為三氯一氟甲烷(CCl3F)，二氯二氟甲烷(CCl2F2)，二氯四氟乙烷(CClF2-CClF2)，丙烷(C3H8)，異丁烷(iso-C4H10)，正丁烷(n-C4H10)，二氧化碳，一氧化二氮，氮氣。優(yōu)選為二氯二氟甲烷(CCl2F2)。
應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)指出每個活性成分的量的參考量時，它們是計量的量。當(dāng)施用活性成分時，患者吸入的每個成分的量可以不同于計量的量，例如因為活性成分在吸入裝置中的潴留。因此活性成分的施用比例可不同于計量的比例。優(yōu)選地施用的比例是在上述指明的計量比例內(nèi)。
本發(fā)明中使用的活性成分可以制成粉霧劑，以干燥粉末的形式，優(yōu)選地為細(xì)碎的，例如微?；母稍锓勰?，含有的粉末物質(zhì)的中間直徑小于10μm，例如從1至5μm，更優(yōu)選地為聚集的微?；母稍锓勰Ｗ鳛榫奂锏囊环N替換，細(xì)碎的活性成分可以與一個或多個可藥用的非活性成分，如添加劑，稀釋劑或載體等形成指定的混合物形式。本發(fā)明中使用的成分可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法得到這些優(yōu)選的形式。
本發(fā)明中使用的活性成分也可制成氣霧劑和噴霧劑，將活性成分與一個或多個可藥用的非活性成分，如添加劑，稀釋劑，拋射劑或抗氧化劑混合形成指定的混合物形式。指定的混合物形式為氣霧劑或噴霧劑。本發(fā)明中使用的成分可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法得到這些優(yōu)選的形式。
根據(jù)本發(fā)明，這里進(jìn)一步提供了按本發(fā)明的組合物來制造用于治療呼吸系統(tǒng)的疾病的藥物，例如哮喘的藥物。本發(fā)明也提供了按照本發(fā)明使用沙美特羅或布地奈德來制造組合物用于治療呼吸系統(tǒng)的疾病，例如哮喘。
本發(fā)明的組合物可以通過口或鼻內(nèi)吸入給藥。成分適合于從干燥粉末吸入器，一種加壓的計量吸入器或噴霧器給藥，也適合于進(jìn)行氣霧給藥。
當(dāng)組合物的成分適合于從加壓的吸入器給藥時，它們優(yōu)選地為微粒化的形式。將它們懸浮或，優(yōu)選地，溶解于液體拋射劑混合物中?？墒褂玫膾伾鋭┌ǘ趸?，一氧化二氮，氮氣，三氯一氟甲烷(CCl3F)，二氯二氟甲烷(CCl2F2)，二氯四氟乙烷(CClF2-CClF)，丙烷(C3H8)，異丁烷(iso-C4H10)，正丁烷(n-C4H10)。尤其優(yōu)選的拋射劑是二氯二氟甲烷(CCl2F2)，其中每個可單獨或與其他拋射劑混合地在組合物中使用。它們?nèi)芜x地與一個或更多種其它的賦形劑，潤滑劑和/或抗氧化劑組合使用。
當(dāng)本發(fā)明的組合物或藥箱的成分適合于通過噴霧給藥時，它們可以以噴霧水懸浮液或溶液形式，有或沒有合適的pH或張度調(diào)節(jié)劑，可作為單位劑量或多重劑量形式。
組合物可以每日1至4次給藥，優(yōu)選為每日兩次。
本發(fā)明中包括對第一個活性成分和第二個活性成分的藥理方面反復(fù)進(jìn)行的研究，其結(jié)果表明沙美特羅和布地奈德的組合物具有寬的重量比范圍，當(dāng)用于治療患有哮喘的患者時，與單獨應(yīng)用第一個活性成分或第二個活性成分時相比，本發(fā)明的活性成分的組合物給出令人吃驚地更好的效果。本發(fā)明用藥量可選范圍較大，療效持續(xù)時間長，綜合效果好，使用方便。
圖2藥物吸入前后肺阻力的變化。
圖3吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德和乳糖前后，乙酰膽堿刺激濃度的變化(mg/ml)。
乙醇750g丙二醇 150g二氯二氟甲烷1500g維生素C 7.5g制備工藝將處方量的沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的維生素C、乙醇和丙二醇內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入二氯二氟甲烷，即得，理論灌裝1000瓶，灌裝收率在85％以上。經(jīng)45-50℃水浴檢漏30分鐘，無泄漏。每瓶50撳，每撳含沙美特羅50μg，布地奈德160μg。實例2沙美特羅2.5g布地奈德10.0g乙醇750g丙二醇 150g二氯二氟甲烷1500g維生素C 7.5g制備工藝將處方量的沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的維生素C、乙醇和丙二醇內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入二氯二氟甲烷，即得，理論灌裝1000瓶，灌裝收率在85％以上。經(jīng)45-50℃水浴檢漏30分鐘，無泄漏。每瓶50撳，每撳含沙美特羅50μg，布地奈德200μg。實例3羥萘酸沙美特羅 5.09g布地奈德10.0g乙醇750g甘油150g三氯一氟甲烷1500g焦亞硫酸鈉 7.5g制備工藝將處方量的羥萘酸沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的焦亞硫酸鈉、乙醇和甘油內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入三氯一氟甲烷，即得，理論灌裝1000瓶，灌裝收率在85％以上。經(jīng)45-50℃水浴檢漏30分鐘，無泄漏。每瓶50撳，每撳含沙美特羅70μg，布地奈德200μg。實例4羥萘酸沙美特羅 3.5g布地奈德8.0g乙醇750g甘油150g二氯四氟乙烷1500g焦亞硫酸鈉 7.5g制備工藝將處方量的羥萘酸沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的焦亞硫酸鈉、乙醇和甘油內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，封接劑量閥門系統(tǒng)，分別再加壓注入二氯四氟乙烷，即得，理論灌裝1000瓶，灌裝收率在85％以上。經(jīng)45-50℃水浴檢漏30分鐘，無泄漏。每瓶50撳，每撳含沙美特羅70μg，布地奈德160μg。實例5沙美特羅50mg布地奈德160mg乳糖25000mg苯甲酸鈉125mg制備工藝將處方量沙美特羅、布地奈德和乳糖、苯甲酸鈉混合，用流能磨對藥物進(jìn)行充分微粉化處理后，將載藥粉末灌裝至膠囊，即可，理論灌裝1000粒膠囊，成品率85％以上。每粒膠囊內(nèi)含微粉化的沙美特羅50μg和布地奈德160μg，乳糖25mg，苯甲酸鈉125μg。實例6沙美特羅50mg布地奈德200mg甘露醇 25000mg苯甲酸鈉125mg制備工藝將處方量沙美特羅、布地奈德和甘露醇、苯甲酸鈉混合，用流能磨對藥物進(jìn)行充分微粉化處理后，將載藥粉末灌裝至膠囊，即可，理論灌裝1000粒膠囊，成品率85％以上。每粒膠囊內(nèi)含微粉化的沙美特羅50μg和布地奈德200μg，甘露醇25mg，苯甲酸鈉125μg。實例7沙美特羅70mg布地奈德160mg
葡聚糖 25000mg硬脂酸鎂125mg制備工藝將處方量沙美特羅、布地奈德和葡聚糖、硬脂酸鎂混合，用流能磨對藥物進(jìn)行充分微粉化處理后，將載藥粉末灌裝至膠囊，即可，理論灌裝1000粒膠囊，成品率85％以上。每粒膠囊內(nèi)含微粉化的沙美特羅70μg和布地奈德160μg，葡聚糖25mg，硬脂酸鎂125μg。實例8沙美特羅70mg布地奈德200mg木糖醇 25000mg硬脂酸鎂125mg制備工藝將處方量沙美特羅、布地奈德和木糖醇、硬脂酸鎂混合，用流能磨對藥物進(jìn)行充分微粉化處理后，將載藥粉末灌裝至膠囊，即可，理論灌裝1000粒膠囊，成品率85％以上。每粒膠囊內(nèi)含微粉化的沙美特羅70μg和布地奈德200μg，木糖醇25mg，硬脂酸鎂125μg。實例9沙美特羅2.5g布地奈德8.0g乙醇1000g丙二醇 250g焦亞硫酸鈉 25g制備工藝如下將處方量的沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的乙醇和丙二醇內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，加入焦亞硫酸鈉，攪拌使溶解混合均勻，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，沖入二氧化碳，即得，理論灌裝1000瓶，實際灌裝收率為85％以上。本品每瓶50噴，每天使用兩次，每噴含沙美特羅50μg、布地奈德160μg。實例10沙美特羅2.5g布地奈德10.0g乙醇1000g甘油250g焦亞硫酸鈉 25g制備工藝如下將處方量的沙美特羅和布地奈德加入攪拌均勻的乙醇和甘油內(nèi)，攪拌，在溫水浴中加熱，使原料溶解，加入焦亞硫酸鈉，攪拌使溶解混合均勻，砂芯漏斗過濾，分劑量灌裝，沖入氮氣，即得，理論灌裝1000瓶，實際灌裝收率為85％以上。本品每瓶50噴，每天使用兩次，每噴含沙美特羅50μg、布地奈德200μg。應(yīng)用實例1 比較布地奈德/沙美特羅與分別服用布地奈德和沙美特羅、單獨用布地奈德、單獨用沙美特羅對組織胺誘導(dǎo)豚鼠哮喘發(fā)作的影響一、實驗?zāi)康膶ふ乙环N更有效、更簡單的治療哮喘的藥物劑型。
二、實驗材料1實驗動物選取幼年豚鼠，體重150～200g，由山東省實驗動物中心提供；2實驗儀器空氣壓縮機(jī)、氣霧噴頭、水銀檢壓計、底座、4L的玻璃鐘置；3實驗藥品2％氯化乙酰膽堿、0.1％磷酸組織胺、布地奈德/沙美特羅氣霧劑自制(按實例1摩爾比配制)。布地奈德天衡藥物研究所提供；沙美特羅由山東省醫(yī)藥工業(yè)研究所制劑室提供。
4數(shù)據(jù)處理采用SAS系統(tǒng)的成組t檢驗。
三、實驗方法選取幼年豚鼠，雌雄均可，體重為150～200g，放入5升左右的玻璃罩中，以400mmHg的壓力噴入2％氯化乙酰膽堿和0.1％磷酸組織胺容積混合液15秒鐘。噴霧停止后，觀察豚鼠的引喘潛伏期(即發(fā)生哮喘、呼吸極度困難，直至抽搐跌倒的時間)，引喘潛伏期大于120秒的豚鼠不予選用。取經(jīng)測定引喘潛伏期合格的豚鼠40只，按引喘潛伏期隨機(jī)分為五組，即布地奈德/沙美特羅高、低劑量組，布地奈德和沙美特羅組、布地奈德組、沙美特羅組。次日給予受試藥物，給藥劑量布地奈德/沙美特羅20ug/6ug/kg、10ug/3ug/kg噴霧吸入；布地奈德和沙美特羅組是20ug+6ug/kg噴霧吸入；布地奈德組20ug；沙美特羅組6ug。給藥30分鐘后同上噴霧給予0.25％二鹽酸組織胺，觀察給予藥物前后引喘潛伏期及抽搐發(fā)生率的變化(引喘時動物6分鐘內(nèi)不出現(xiàn)跌倒者以引喘潛伏期為360秒計算)。
四、實驗結(jié)果幾組動物發(fā)生哮喘、直至抽搐跌倒的時間都有不同，見表1表1 對磷酸組織胺噴霧吸入誘導(dǎo)哮喘發(fā)作的影響(n＝10，mean±SD)組別 給藥劑量/kg 引喘潛伏期(秒) 抽搐發(fā)生率藥前 藥后 藥前 藥后bud/sal20/6ug 87.8±10.2350±70.5+**10030bud/sal10/3ug 88.3±11.6289±68**10040bud+sal20ug+6ug89.3±14.8349±85.6+**10030bud20ug90.4±12.5250±69.3**10050sal6ug 89.4±11.3278.6±84.5**10040
**P＜0.01表示用藥后與用藥前的引喘潛伏期具有顯著性的差異；+P＜0.05，表示用藥后布地奈德/沙美特羅與布地奈德、沙美特羅的引喘潛伏期比較有顯著性差異。
由表1及

圖1可見，布地奈德/沙美特羅20/6、10/3ug/kg噴霧吸入可明顯延長磷酸組織胺誘導(dǎo)的豚鼠哮喘發(fā)作潛伏期，減少其抽搐發(fā)生率，與藥前比較差異顯著，與分開服用布地奈德和沙美特羅效果相近，與單獨服用布地奈德和單獨吸入/沙美特羅比較，作用較強(qiáng)。
五、結(jié)論作為單一制劑療法，布地奈德/沙美特羅與同時服用布地奈德和沙美特羅相比，分別為350±70.5、349±85.6，無顯著性差異，療效不變，但使用更加方便，提高了病人的順應(yīng)性；與單獨服用布地奈德、沙美特羅相比，作用有顯著性差異，具體體現(xiàn)為引喘潛伏期(秒)分別為350±70.5、250±69.3、278.6±84.5，明顯延長引喘潛伏期，療效確切，很有臨床使用價值。
應(yīng)用實例2吸入布地奈德/沙美特羅對狗氣道嗜酸性細(xì)胞和過敏原誘發(fā)的氣道高反應(yīng)性的影響一、實驗?zāi)康难芯坎嫉啬蔚?沙美特羅的主要藥效學(xué)作用二、實驗材料1動物種屬、品系雜種狗；體重20～35kg；入選條件皮內(nèi)注射A.suum提取物呈陽性反應(yīng)，有吸入A.suum后氣道高反應(yīng)性史。
2試劑布地奈德/沙美特羅自制(按實例1的配方)布地奈德氣霧劑天衡藥物研究所；沙美特羅氣霧劑天衡藥物研究所豬蛔蟲(A.suum)提取物(過敏原)，0.4％苯酚(過敏原稀釋劑)三、實驗方法取雜種狗，進(jìn)行下述實驗1吸入乳糖后吸入A.suum稀釋劑2吸入乳糖后吸入A.suum過敏原3吸入布地奈德/沙美特羅后吸入A.suum稀釋劑4吸入布地奈德/沙美特羅后吸入A.suum過敏原5吸入布地奈德后吸入A.suum稀釋劑6吸入布地奈德后吸入A.suum過敏原每次實驗需至少間隔4周或4周以上。
每次實驗時，狗每天吸入兩次布地奈德/沙美特羅或布地奈德、沙美特羅或乳糖氣霧劑(上午和下午各一次)，連續(xù)7天，在第8天的上午，最后一次吸入給藥后，將狗靜脈注射30mg/kg戊巴比妥鈉進(jìn)行麻醉，行氣管插管，插管上連接一個恒定體積的呼吸機(jī)，設(shè)定潮氣量為10ml/kg，呼吸速率為30次/分。將一個氣球形食管插管與壓差壓力換能器相連，測定肺阻力值和乙酰膽堿所誘發(fā)的氣道高反應(yīng)性，再過15分鐘進(jìn)行支氣管肺泡灌流(BAL)，測定灌流液中嗜酸性細(xì)胞的數(shù)目。
(1)過敏性攻擊按十倍稀釋法，用生理鹽水將A.suum提取物的貯備液(10-1w/v)稀釋成一系列濃度的溶液(10-610-510-410-3和10-2w/v)。測量基礎(chǔ)肺阻力后，每只狗吸入可引起氣道高反應(yīng)性的一定濃度的A.suum，每個濃度至少間隔10分鐘吸入。A.suum的稀釋劑(0.4％苯酚)也同法吸入，每只狗在所有實驗中均吸入相同濃度的A.suum或其稀釋劑。
(2)BAL灌流中嗜酸性細(xì)胞的測定將BAL灌流液處理后，測定細(xì)胞總數(shù)和巨噬細(xì)胞、嗜中性細(xì)胞、嗜酸性細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和異染性細(xì)胞數(shù)。
將實驗(1)和實驗(3)(5)中所測得的BAL液中嗜酸性細(xì)胞的數(shù)目分別作為吸入乳糖或吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德至過敏原攻擊前氣道嗜酸性細(xì)胞的基礎(chǔ)值。
(3)總肺阻力的測定測定跨肺壓(即口腔和食管之間的壓力差)、流速(用呼吸速率測定器、壓差壓力換能器和壓力放大器測定)，根據(jù)跨肺壓流速，用呼吸分析儀連接測定總肺阻力。
(4)氣道反應(yīng)性測定根據(jù)肺阻力和乙酰膽堿濃度(0.7-80.0ng/ml)之間的量效曲線來確定氣道反應(yīng)性。測定基礎(chǔ)肺阻力后，狗吸入生理鹽水，然后每隔5分鐘吸入一次乙酰膽堿(逐漸增大濃度)，共吸入次，每次3秒鐘，直至肺阻力比基礎(chǔ)值至少增加5cm H2O L-1s所需乙酰膽堿的濃度(即乙酰膽堿刺激濃度)來表示，該值降低代表示氣道反應(yīng)性增高。
四、實驗結(jié)果(1)BAL灌流中嗜酸性細(xì)胞的測定吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德和沙美特羅、布地奈德或乳糖后至過敏原稀釋劑攻擊之前，BAL灌流液中嗜酸性細(xì)胞德平均數(shù)目分別為0.2±0.18×104/ml、0.3±0.22×104/ml，布地奈德/沙美特羅、布地奈德可顯著性減少過敏原稀釋劑攻擊BAL灌流液中嗜酸性細(xì)胞的數(shù)目(P＜0.05)，但不明顯減少其它細(xì)胞的數(shù)目(見表2)。
吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德或乳糖后，過敏原攻擊組與稀釋劑組相比，可顯著增加嗜中性細(xì)胞的數(shù)目(P＜0.05，見表2)，而乳糖組與布地奈德/沙美特羅、布地奈德組相比，嗜中性細(xì)胞數(shù)目無顯著性差異P＞0.05。此外，BAL灌流液的回收量，總細(xì)胞數(shù)、巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞及異染性細(xì)胞的數(shù)目均無明顯差異(見表2)。
表2布地奈德/沙美特羅、布地奈德或乳糖對過敏原及其稀釋劑吸入前后BAL液中細(xì)胞數(shù)目的影響(×104/ml)(means±SE)細(xì)胞類型乳糖 乳糖布地奈德/沙美特羅 布地奈德/沙美特羅 布地奈德布地奈德+稀釋劑 +過敏原 +稀釋劑 +過敏原+稀釋劑 +過敏原巨噬細(xì)胞24.5±4.18 24.7±5.68 31.0±5.23 25.3±4.32 28.9±4.23 23.5±3.52中性粒細(xì)胞 1.7±0.5613.0±3.56+0.4±0.12 17.4±10.2+0.5±0.13 16.6±11.4+淋巴細(xì)胞1.8±0.591.5±0.25 1.0±0.22 0.7±0.23 1.1±0.33 1.0±0.25嗜酸性細(xì)胞 3.6±2.325.7±3.69 0.2±0.18*0.6±0.45 0.3±0.22*0.7±0.48異染性細(xì)胞 0.2±0.020.2±0.04 0.2±0.03 0.1±0.02 0.2±0.03 0.1±0.03總計31.8±7.67 45.1±13.2 32.8±5.7844.1±15.2 31±4.94 41.9±15.68*P＜0.05，表示吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德或乳糖后，過敏原攻擊組與稀釋組相比，可顯著減少嗜酸性細(xì)胞的數(shù)目。+P＜0.05，表示吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德或乳糖后，過敏原攻擊組與稀釋組相比，可顯著增加嗜中性細(xì)胞的數(shù)目(2)肺阻力的測定經(jīng)布地奈德/沙美特羅，吸入過敏原可明顯提高肺阻力，與治療前相比，差異顯著(P＜0.01)；經(jīng)布地奈德治療后，吸入過敏原可明顯提高肺阻力，與治療前相比，差異顯著(P＜0.01)；經(jīng)乳糖治療后，與治療前相比，差異也非常顯著，但布地奈德/沙美特羅、布地奈德和乳糖三治療組間過敏原誘發(fā)肺阻力的增加無顯著性差異(見圖2，圖2是藥物吸入前后肺阻力的變化圖)，但有增加趨勢。
表3藥物吸入前后的肺阻力變化(cm H2O/s，means±SD)抑制劑 乳糖乳糖 布地奈德/沙美特羅 布地奈德/沙美特羅 布地奈德布地奈德+稀釋劑 +過敏原 +稀釋劑+過敏原+稀釋劑 +過敏原前 1.20±0.18 0.80±0.080.93±0.13 0.81±0.17 0.75±0.18 0.87±0.17后 1.05±0.08 8.68±2.15**0.92±0.157.92±3.19**0.90±0.12 6.90±0.16****P＜0.01，表示吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德和乳糖前后，肺阻力有顯著性差異。
(2)氣道反應(yīng)性測定吸入布地奈德/沙美特羅并不改變基本的氣道反應(yīng)性，然而，它可顯著但不能完全減弱吸入過敏原誘發(fā)的氣道反應(yīng)性增高。吸入布地奈德/沙美特羅后，乙酰膽堿刺激濃度的平均值從過敏原吸入前的3.62±1.09mg/ml降至吸入后的1.48±1.23mg/.ml，二者有顯著性差異(**P＜0.01)；吸入布地奈德后，乙酰膽堿刺激濃度的平均值從過敏原吸入前的3.60±1.19mg/ml降至吸入后的1.56±1.48mg/.ml，二者有顯著性差異(*P＜0.05)；乳糖組乙酰膽堿刺激濃度的平均對數(shù)差值為0.78±0.13，顯著高于布地奈德/沙美特羅組0.38±0.13，二者差異顯著(*P＜0.05)。(見表4和圖3)表4吸入布地奈德/沙美特羅、布地奈德和乳糖前后，乙酰膽堿刺激濃度的變化(mg/ml)抑制劑 乳糖乳糖 布地奈德/沙美特羅 布地奈德/沙美特羅 布地奈德 布地奈德+稀釋劑 +過敏原 +稀釋劑+過敏原+稀釋劑 +過敏原前 3.55±1.35 3.65±1.233.60±1.05 3.62±1.09 3.60±1.143.63±1.19后 3.57±1.54 0.78±1.12**3.60±1.14 1.48±1.23*3.58±1.241.56±1.48***P＜0.01，*P＜0.05，表示氣道反應(yīng)性有顯著性變化。
五、結(jié)論哮喘特征性的氣道過敏是由嗜酸細(xì)胞和肥大細(xì)胞等釋放的各種化學(xué)介質(zhì)所引起。存在于氣道組織的單核/巨噬細(xì)胞、肥大細(xì)胞等炎癥細(xì)胞在特異性抗原刺激后激活，均可釋放IL-8，IL-8可趨化、激活中性粒細(xì)胞，聚集于支氣管組織，對氣道非特異性炎癥形成產(chǎn)生重要影響。IL-8可做為這些炎癥細(xì)胞的標(biāo)識物。
吸入性布地奈德可抑制器官壁中T細(xì)胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，減少上皮嗜酸性細(xì)胞和淋巴細(xì)胞以及固有層中肥大細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的數(shù)目，減少支氣管肺泡灌洗液中嗜酸性細(xì)胞陽離子蛋白的釋放以及血漿向支氣管中的滲漏。哮喘患者長期吸入布地奈德后肺活檢結(jié)果顯示炎性細(xì)胞數(shù)目減少。常規(guī)吸入布地奈德后可降低器官高反應(yīng)性，改善臨床癥狀，停藥后，布地奈德降低氣道高反應(yīng)性作用的維持時間取決于用藥的時間和劑量。
布地奈德/沙美特羅的吸入并沒有改變布地奈德的抗炎作用，且對肺阻力的影響與氣道炎性反應(yīng)的影響更有利于哮喘癥狀的治療，作用增加，且療效確切。
吸入布地奈德/沙美特羅可顯著減少氣道嗜酸性細(xì)胞，顯著增加嗜中性細(xì)胞，同時不誘發(fā)肺阻力的增加。吸入布地奈德/沙美特羅并不改變基本的氣道反應(yīng)性，然而，它可顯著但不能完全減弱吸入過敏原誘發(fā)的氣道反應(yīng)性增高。布地奈德/沙美特羅的療效得到確切的證明，作用明顯優(yōu)于單獨服用布地奈德、沙美特羅，且與同時服用布地奈德和沙美特羅效果相同特羅效果相同，但其服用更方便，是治療哮喘的一種很有臨床使用價值的復(fù)方制劑。應(yīng)用實例3毒理學(xué)研究一、急性毒性試驗昆明小鼠吸入布地奈德的最小致死劑量為80mg/kg(約為最大推薦人用每日吸入劑量的250倍)。Wistar大鼠一次吸入布地奈德68mg/kg(約為最大推薦人用每日吸入劑量的345倍)，未出現(xiàn)死亡。小鼠和大鼠口服本品的最小致死劑量分別為200mg/kg和小于100mg/kg(約為最大推薦人用每日吸入劑量的500倍)。
沙美特羅小鼠腹腔注射給藥的LD50＝269.55mg/kg；小鼠灌胃給藥的LD50＝1024.61mg/kg；大鼠噴霧給藥劑量達(dá)人用量的833.34倍，動物未見毒性反應(yīng)；以上結(jié)果表明本藥臨床應(yīng)用是安全的。
二、局部毒性研究采用大耳白家兔，研究布地奈德/沙美特羅氣霧劑的局部刺激毒性。結(jié)果表明，家兔氣霧吸入布地奈德/沙美特羅160/50μg/天，連續(xù)一周，無局部刺激作用。
三、特殊毒性研究(一)致癌作用昆明小鼠口服布地奈德/沙美特羅100/25μg/kg/天(約為1/2最大推薦人用每日吸入劑量)，連續(xù)91周，未見致癌作用。在Sprague-Dawley大鼠104周的致癌研究中，接受口服劑量50/10μg/kg/天(約為1/4最大推薦人用每日吸入劑量)的雄性大鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤的發(fā)生率明顯增加，并有統(tǒng)計學(xué)意義；而對接受口服劑量10/5、15/10μg/kg/天(分別約為最大推薦人用每日吸入劑量的1/20和1/8)的雄性大鼠及口服劑量為25/10μg/kg/天(約為1/4最大推薦人用每日吸入劑量)的雌性大鼠均無致癌作用。
(二)致突變作用經(jīng)Ames實驗、小鼠微核實驗、小鼠淋巴瘤實驗、人淋巴細(xì)胞染色體畸變實驗、黑腹果蠅隱性致死實驗及大鼠肝細(xì)胞培養(yǎng)物DNA修復(fù)實驗研究證實，布地奈德/沙美特羅無致突變作用和誘裂作用。
(三)生殖毒性研究皮下給予Wistar大鼠布地奈德/沙美特羅10/5μg/kg/天(約為最大推薦人用每日吸入劑量的1/10)，母體增重、產(chǎn)前成活率、產(chǎn)時和哺乳期幼仔成活率下降，在5/2μg/kg(約為最大推薦人用每日吸入劑量的1/40)劑量下無此作用。
家兔和大鼠分別皮下給予布地奈德/沙美特羅15/10、400/100μg/kg/天(分別約為最大推薦人用每日吸入劑量的1/4和2倍)可致死胎、幼仔體重下降、骨骼畸形。
大鼠吸入布地奈德/沙美特羅100～250/20～50μg/kg/天(約為最大推薦人用每日吸入劑量的1/2～1/4)劑量時未見致畸和致死胎作用。
結(jié)論小鼠、大鼠、家兔的急性、局部、特殊毒性研究結(jié)果顯示，布地奈德/沙美特羅并沒有因為聯(lián)合用藥，而毒性有所增加。
權(quán)利要求
1.一種治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的組合物包括(1)第一個活性成分，它選自沙美特羅或其可藥用的鹽；(2)第二個活性成分，它是布地奈德；(3)一種或多種可藥用的非活性成分；其中，在組合物中(1)與(2)的摩爾比是1∶(0.38～20)。
2.按照權(quán)利要求1所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的沙美特羅可藥用鹽為合適的沙美特羅生理可接受的鹽，包括衍生自無機(jī)的和有機(jī)的酸的酸加成鹽，包括氯化物、溴化物、硫酸鹽、磷酸鹽、羥萘酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、4-甲氧基苯甲酸鹽、2-或4-羥基苯甲酸鹽、4-氯苯甲酸鹽、對甲苯磺酸鹽、甲苯磺酸鹽、抗壞血酸鹽、乙酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、戊二酸鹽、丙三羧酸鹽、羥基萘甲酸鹽或油酸鹽。
3.按照權(quán)利要求1-2所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的第一個活性成分是沙美特羅或沙美特羅羥萘酸鹽。
4.按照權(quán)利要求1所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的非活性成分包括溶劑、潛溶劑、拋射劑、抗氧化劑、稀釋劑或潤滑劑中的任一種或多種的組合物。
5.按照權(quán)利要求1所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于它是氣霧劑，其非活性成分為溶劑、潛溶劑、抗氧化劑和拋射劑。
6.按照權(quán)利要求5所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的溶劑為乙醇或油酸，潛溶劑為甘油、丙二醇或聚乙二醇，抗氧化劑為維生素C或焦亞硫酸鈉，拋射劑為三氯一氟甲烷、二氯二氟甲烷、二氯四氟乙烷、丙烷、異丁烷或正丁烷。
7.按照權(quán)利要求1所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于它是粉霧劑，其非活性成分為稀釋劑和潤滑劑。
8.按照權(quán)利要求7所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在所述的稀釋劑為乳糖、阿拉伯膠、葡聚糖、甘露糖醇或葡萄糖，所述的潤滑劑為苯甲酸鈉或硬脂酸鎂。
9.按照權(quán)利要求1所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于它是噴霧劑，其非活性成分為溶劑、潛溶劑、拋射劑和抗氧化劑。
10.按照權(quán)利要求9所述的治療支氣管哮喘的組合物，其特征在于所述的溶劑為乙醇或油酸，潛溶劑為甘油、丙二醇或聚乙二醇，拋射劑為二氧化碳、一氧化二氮或氮氣，抗氧化劑為維生素C或焦亞硫酸鈉。
11.按照權(quán)利要求5、7或9所述的治療支氣管哮喘的組合物，所述的第一活性成分與所述的第二活性成分的摩爾比為1∶3。
全文摘要
本發(fā)明涉及支氣管哮喘的治療，特別是提供了一種治療支氣管哮喘的沙美特羅與布地奈德的組合物。本發(fā)明組合物包括選自活性成分沙美特羅或其可藥用的鹽與布地奈德；以及可藥用的非活性成分溶劑、潛溶劑、拋射劑、抗氧化劑、稀釋劑或潤滑劑中的任一種或多種；其中，在組合物中(1)與(2)的摩爾比是1∶0.38～20。本發(fā)明用藥量可選范圍較大，療效持續(xù)時間長，綜合效果好，可以制成復(fù)方吸入氣霧劑與粉霧劑、非吸入氣霧劑與粉霧劑和復(fù)方噴霧劑，使用方便，可有效地治療支氣管哮喘病。
文檔編號A61P11/06GK1425378SQ0310043
公開日2003年6月25日 申請日期2003年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月14日
發(fā)明者孫勇 申請人:魯南制藥股份有限公司