專利名稱：：Glp－1和基礎(chǔ)胰島素的預(yù)混合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及類胰高血糖素肽(glucagonlikepeptide)和基礎(chǔ)胰島素(basalinsulin)的預(yù)混合制劑。這些預(yù)混合的制劑可被用于治療諸如非胰島素依賴型糖尿病和胰島素依賴型糖尿病的疾病。長(zhǎng)期以來，糖尿病治療的一個(gè)目標(biāo)是施用藥劑以產(chǎn)生一種胰島素分泌模式，該模式模擬在正常個(gè)體中的內(nèi)源胰島素分泌模式。對(duì)胰島素的每日生理需求是變化起伏的，并且可分為兩個(gè)階段(a)吸收期，該階段需要胰島素的脈沖(pulse)以處理飲食相關(guān)的血糖高漲(surge)，以及(b)后吸收期，該階段需要胰島素的持續(xù)供給以調(diào)控用于維持最佳空腹血糖的肝糖輸出(hepaticglucoseoutput)?？诜巹┮坏o法充分地控制II型糖尿病的血糖，那么獲得近似正常的血糖控制并且由此而將同糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥降至最低則至為重要。當(dāng)口服藥物無效時(shí)，唯一的替代方法是以胰島素治療患者，該治療必須針對(duì)飲食相關(guān)的葡萄糖偏移(excursion)以及在空腹期間的肝糖輸出進(jìn)行定劑量和定時(shí)，從而在避免血糖過低的情況下有效地使糖正?；Ｔ诓划a(chǎn)生諸如血糖過低這樣的副作用的情況下，對(duì)涉及到處理飲食相關(guān)的血糖高漲的第一階段進(jìn)行控制通常是最難達(dá)到的。這是因?yàn)樗幬镏委煹膭┝勘仨毷軙r(shí)間控制，以使血液胰島素水平在進(jìn)餐后的葡萄糖水平高漲時(shí)達(dá)到高峰。例如，如果誘導(dǎo)胰島素的藥物治療在進(jìn)餐前的太長(zhǎng)時(shí)間進(jìn)行，則血糖過低的危險(xiǎn)性會(huì)很高，這可能導(dǎo)致昏迷甚至死亡。進(jìn)一步，如果該藥物治療在進(jìn)餐太長(zhǎng)時(shí)間后進(jìn)行，則血糖水平將在進(jìn)餐后維持很高，長(zhǎng)期這樣將導(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥。已經(jīng)開發(fā)了多種胰島素制劑，這些制劑具有不同的時(shí)間效用。但是，對(duì)于II型患者，從涉及口服藥物的治療向涉及胰島素注射的治療進(jìn)行轉(zhuǎn)換通常頗為困難，涉及注射的治療必須根據(jù)進(jìn)餐而進(jìn)行精心的時(shí)間控制以避免諸如血糖過低這樣的并發(fā)癥。由此，需要一種方便的療法，該療法對(duì)于II型糖尿病的這種中間階段進(jìn)行了充分地治療并且降低血糖過低的風(fēng)險(xiǎn)。類胰高血糖素肽-1(GLP-1)很有希望用于治療II型糖尿病，特別是對(duì)于使用口服藥物不再能夠控制血糖的患者。GLP-1具有多種生理上顯著的活性。例如，已經(jīng)顯示GLP-1可促進(jìn)胰島素的釋放、降低胰高血糖素的分泌、抑制胃排空(gastricemptying)以及增強(qiáng)葡萄糖的利用[Nauck，M.A.等，(1993)Diabetologia36741-744；Gutniak，M.等，(1992)NewEnglandJ.ofMed.3261316-1322；Nauck，M.A.等，(1993)J.Clin.Invest.91301-307]。此外，一些動(dòng)物研究表明，GLP-1實(shí)際上可以保護(hù)beta細(xì)胞，抑制beta細(xì)胞的凋亡并且誘導(dǎo)beta細(xì)胞增殖。一個(gè)最令人振奮的發(fā)現(xiàn)為，GLP-1的活性受到血糖水平的控制。當(dāng)血糖水平降至特定的閾值水平時(shí)，GLP-1無活性。因此，不存在與GLP-1治療相關(guān)的血糖過低的風(fēng)險(xiǎn)。但是，與GLP-1肽有關(guān)的單一療法的實(shí)用性受到其快速清除以及半壽期短的限制。盡管已經(jīng)開發(fā)了大量的相對(duì)于天然GLP-1(7-37)OH具有較長(zhǎng)的半壽期的類似物和衍生物，這些分子的活性特征通常不足以充分控制空腹血糖水平，尤其是在兩餐之間和就寢時(shí)間。本發(fā)明克服了這些同使用相對(duì)短地起作用的GLP-1化合物治療II型糖尿病相關(guān)的問題，以及同胰島素治療相關(guān)的血糖過低風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明包括預(yù)先混合的制劑，這些制劑含有GLP-1化合物以及基礎(chǔ)胰島素。該混合物中的GLP-1使與飲食有關(guān)的血糖偏移正?；也痪哂醒沁^低的風(fēng)險(xiǎn)，而基礎(chǔ)胰島素的功能在于控制空腹血糖水平，特別是在就寢時(shí)間。除在降低血糖過低風(fēng)險(xiǎn)的情況下提供了最佳的血糖控制外，使用了本發(fā)明的預(yù)混合制劑的治療方案同單獨(dú)使用胰島素的治療相比更為方便，這是由于不需要根據(jù)就餐而對(duì)用藥劑量進(jìn)行精心地時(shí)間控制，因?yàn)镚LP-1化合物并不導(dǎo)致血糖過低。GLP-1同基礎(chǔ)胰島素作為預(yù)混合的制劑而進(jìn)行的組合尚未受到研究或者甚至未被提出。在本發(fā)明之前，對(duì)于GLP-1和基礎(chǔ)胰島素是否可以共同配制以使兩種藥物均為化學(xué)和物理穩(wěn)定并且保持所需的時(shí)間效能尚屬未知。GLP-1和胰島素之間的分子作用可能會(huì)損害兩種藥物的時(shí)間效能。進(jìn)一步，獲得化學(xué)和物理穩(wěn)定性所必需的條件不同于各藥物單獨(dú)進(jìn)行配制時(shí)的條件。在本發(fā)明之前，本領(lǐng)域的技術(shù)人員不會(huì)認(rèn)同這兩種藥物可被共同配制于一種穩(wěn)定的藥物制劑內(nèi)以獲得最佳的血糖控制。因此，在本發(fā)明中令人驚異的是，預(yù)混合的制劑可被制備以使存在于制劑之中的GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素產(chǎn)生一種作用和生理反應(yīng)特征，該特征類似于使用GLP-1和基礎(chǔ)胰島素分別進(jìn)行注射情況下的特征。本發(fā)明在其一種形式中提供了預(yù)混合的制劑，該制劑含有GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種制備預(yù)混合制劑的方法，該方法包括，將GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素混合于水溶液之中，從而使GLP-1保持促胰島素(insulinotropic)活性，而基礎(chǔ)胰島素保持一種作用特征，該特征與單獨(dú)使用基礎(chǔ)胰島素進(jìn)行治療所產(chǎn)生的特征一致。在優(yōu)選的情況下，預(yù)混合制劑通過將GLP-1化合物的貯存溶液同基礎(chǔ)胰島素在不同的比例下進(jìn)行混合來制備。在優(yōu)選的情況下，可向預(yù)混合的制劑中加入藥學(xué)可接受的緩沖液、防腐劑或者等滲劑。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種方法，該方法以有效量的預(yù)混合制劑進(jìn)行給藥，該預(yù)混合制劑含有GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種方法，該方法使用本文所討論的制劑治療非胰島素依賴型糖尿病、胰島素依賴型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥、功能性消化不良、腸易激綜合征(irritablebowelsyndrome)、術(shù)后分解代謝改變、心肌梗塞或者中風(fēng)。本發(fā)明進(jìn)一步提供了制劑在制備藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于在哺乳動(dòng)物體內(nèi)治療非胰島素依賴型糖尿病、胰島素依賴型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥、人體重治療性降低、功能性消化不良、腸易激綜合征、術(shù)后分解代謝改變、心肌梗塞或者中風(fēng)。圖1為狗體內(nèi)所測(cè)得的葡萄糖輸注速率的圖示，該測(cè)量在以150mg/dl下3小時(shí)高血糖注入(hyperglycemicclamp)的起始以及皮下(SC)給藥后進(jìn)行，所述皮下給藥使用Val8-GLP-1/NPH混合物制劑(混合物)、分開的Val8-GLP-1溶液和胰島素-NPH懸浮物SC給藥(在不同位點(diǎn))或者胰島素-NPH懸浮物SC給藥(NPH)。圖2為狗體內(nèi)的血漿胰島素濃度(μU/mL)的圖示，該圖示為在150mg/dl下3小時(shí)高血糖注入的起始以及皮下(SC)給藥后的結(jié)果，所述皮下給藥使用Val8-GLP-1/NPH混合物制劑(混合物)、分開的Val8-GLP-1溶液和胰島素-NPH懸浮物SC給藥(在不同位點(diǎn))或者胰島素-NPH懸浮物SC給藥(NPH)。圖3為狗體內(nèi)的血漿C-肽濃度(ng/mL)的圖示，該圖示為在150mg/dl下3小時(shí)高血糖注入的起始以及皮下(SC)給藥后的結(jié)果，所述皮下給藥使用Val8-GLP-1/NPH混合物制劑(混合物)、分開的Val8-GLP-1溶液和胰島素-NPH懸浮物SC給藥(在不同位點(diǎn))或者胰島素-NPH懸浮物SC給藥(NPH)。圖4為狗體內(nèi)的免疫反應(yīng)性Val8-GLP-1(pM)的圖示，該圖示為在150mg/dl下3小時(shí)高血糖注入的起始以及皮下(SC)給藥后的結(jié)果，所述皮下給藥使用Val8-GLP-1/NPH混合物制劑(混合物)、分開的Val8-GLP-1溶液和胰島素-NPH懸浮物SC給藥(在不同位點(diǎn))或者胰島素-NPH懸浮物SC給藥(NPH)。本說明中用于氨基酸的三字母縮寫編碼同PCTAdministrativeInstructions的附錄2中的附件C中的表3所含的列表以及37C.F.R.§1.822(d)(1)(2000)相一致。本發(fā)明的術(shù)語“預(yù)混合制劑”指的是兩相的或者可溶的制劑，該制劑含有GLP-1化合物以及基礎(chǔ)胰島素。根據(jù)本領(lǐng)域中的慣例，GLP-1化合物的N-末端殘基被作為第7位。在本文中用于描述GLP-1類似物的命名法中，用于替換的氨基酸及其位置在原結(jié)構(gòu)之前示出。例如，Val8-GLP-1(7-37)OH所指的為一種GLP-1類似物，該類似物中在正常情況下見于GLP-1(7-37)OH第8位的丙氨酸被纈氨酸所替換。出于本發(fā)明的目的，本文所使用的術(shù)語“GLP-1化合物”指的是一些多肽，這些多肽包括天然的截短GLP-1多肽(GLP-1(7-37)OH以及GLP-1(7-36)NH2)、GLP-1片段、GLP-1類似物及它們的衍生物。出于本發(fā)明的目的，GLP-1化合物還包括Exendin-3和Exendin-4，及其類似物和衍生物。本發(fā)明的GLP-1化合物具有同GLP-1受體結(jié)合并且起始一種信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的能力，所述信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路導(dǎo)致了促胰島素活性。適用于本發(fā)明的GLP-1化合物的例子在下文更廣泛地討論。術(shù)語“促胰島素活性”指的是對(duì)提高的葡萄糖水平作出反應(yīng)而刺激胰島素分泌的能力，由此而導(dǎo)致了細(xì)胞對(duì)葡萄糖的攝取以及與之相關(guān)的血漿葡萄糖水平的降低。促胰島素活性可通過本領(lǐng)域的已知方法進(jìn)行估測(cè)，這些方法包括使用體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外分析，這些分析測(cè)量了GLP-1受體結(jié)合活性或者受體激活，例如使用胰島細(xì)胞或者胰島瘤細(xì)胞進(jìn)行的分析，此二者分別根據(jù)Gelfand等人的EP619,322(實(shí)施例1中描述)以及美國(guó)專利No.5,120,712進(jìn)行。在常規(guī)情況下通過測(cè)量胰島素水平或者C-肽水平在人體內(nèi)測(cè)定促胰島素活性。如果胰島細(xì)胞在存在GLP-1化合物的情況下所分泌的胰島素水平高于背景水平,則GLP-1化合物具有促胰島素活性。GLP-1化合物可以以至少兩種不同的形式存在。第一種形式在生理pH(7.4)下具有生理活性并且易于溶解于水溶液中。與之對(duì)比，第二種形式在pH7.4下具有低微的或者無促胰島素活性并且基本不溶于水中。由此，GLP-1化合物應(yīng)在減少GLP-1化合物聚集和生成不溶的無活性復(fù)合物傾向的條件下進(jìn)行配制。特定的GLP-1化合物在給定的配制條件組合下的傾向性可根據(jù)實(shí)施例8的描述通過在350nm下測(cè)量濁度而測(cè)定。在優(yōu)選的情況下，本發(fā)明所涵蓋的預(yù)混合的制劑含有一種具有促胰島素活性的GLP-1化合物，其活性相當(dāng)于或者超過了GLP-1(7-37)OH。更為優(yōu)選的情況下，GLP-1化合物與GLP-1(7-37)OH相比具有較高的促胰島素活性。本發(fā)明所使用的術(shù)語“基礎(chǔ)胰島素”指的是一種具有基礎(chǔ)活性的胰島素類似物或者一種具有基礎(chǔ)活性的胰島素或者胰島素類似物的制劑。一般地，基礎(chǔ)胰島素可在本領(lǐng)域中被識(shí)別，并在標(biāo)準(zhǔn)的糖尿病模型中具有超過8小時(shí)的延長(zhǎng)的時(shí)間效能。在優(yōu)選的情況下，基礎(chǔ)胰島素具有約24小時(shí)的基礎(chǔ)活性。優(yōu)選的情況下，基礎(chǔ)胰島素具有8到14小時(shí)的基礎(chǔ)活性。優(yōu)選的情況下，基礎(chǔ)胰島素所具有的基礎(chǔ)活性類似于NPH、NPL、PZI、Ultralente或者胰島素glargine的商業(yè)化制劑中所觀察到的活性。本發(fā)明中所使用的術(shù)語“兩相(biphasic)制劑”指的是基本上不溶于預(yù)混合制劑的基礎(chǔ)胰島素以及基本上可溶于預(yù)混合制劑的GLP-1化合物。如果在對(duì)混合物進(jìn)行離心之后在上清中幾乎檢測(cè)不到或者檢測(cè)不到胰島素，則基礎(chǔ)胰島素是基本上不可溶的。在優(yōu)選的情況下，制劑中的不可溶胰島素在貯藏條件下長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持不可溶。這些基礎(chǔ)胰島素的延長(zhǎng)的時(shí)間效能部分原因在于注射后胰島素六聚體吸收和解聚成為活性胰島素單體的遲緩速率。本發(fā)明所使用的術(shù)語“溶液制劑”指的是基本上可溶于預(yù)混合制劑的基礎(chǔ)胰島素以及基本上可溶于預(yù)混合制劑的GLP-1化合物?？扇艿幕A(chǔ)胰島素的例子包括等電點(diǎn)(pI)移動(dòng)(shift)的胰島素以及?；囊葝u素。胰島素glargine(Lantus)是pI移動(dòng)的胰島素的一個(gè)例子。通過向正常的人類胰島素中添加和/或替換入堿性氨基酸，pI從約5.5變至較為中性的pH。例如，在B鏈的C-末端加入兩個(gè)精氨酸導(dǎo)致了pI變成約為7。這種pI移動(dòng)的胰島素類似物應(yīng)在酸性或者堿性pH下可溶?；蛘撸赏ㄟ^向正常的人類胰島素中添加和/或替換入酸性氨基酸而使pI變得更酸。這種pI移動(dòng)的胰島素類似物應(yīng)在堿性pH下可溶。由此，通過使用這兩種溶液之一進(jìn)行注射，pH將被調(diào)整為充分接近于胰島素類似物的pI的生理pH，凈電荷將為零，結(jié)果將導(dǎo)致胰島素的沉淀。被沉淀的胰島素將在一段時(shí)間內(nèi)緩慢地溶解并且被吸收入血液，從而獲得所需的基礎(chǔ)活性。?；囊葝u素通常被描述作具有親脂性取代基的胰島素或者胰島素類似物。親脂取代基同血液中的蛋白質(zhì)(例如白蛋白)相互作用。其結(jié)果為胰島素在血液循環(huán)中的較長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)被保護(hù)。另外，親脂取代基可通過保護(hù)胰島素避開降解性酶而提高穩(wěn)定性。進(jìn)一步，親脂性取代基可延緩胰島素從注射位點(diǎn)處被吸收入血液。GLP-1化合物與基礎(chǔ)胰島素的比例應(yīng)使得在以制劑進(jìn)行給藥之后其血漿水平被維持在有效范圍內(nèi)。在優(yōu)選的情況下，具有的促胰島素活性在GLP-1(7-37)OH的活性的兩倍之內(nèi)的GLP-1化合物的血清水平被維持在約30皮摩爾/升到約200皮摩爾/升之間?；钚缘陀贕LP-1(7-37)OH的GLP-1的最佳血清水平應(yīng)更高，而活性高于GLP-1(7-37)OH的GLP-1的最佳血清水平應(yīng)更低。通常情況下，混合物應(yīng)經(jīng)過配制以每天使用約0.1到約5mg的GLP-1化合物進(jìn)行給藥。在優(yōu)選的情況下，GLP-1化合物應(yīng)在0.1到2mg/天的范圍內(nèi)進(jìn)行給藥。更為優(yōu)選的情況下，GLP-1化合物應(yīng)在0.5到2mg/天的范圍內(nèi)進(jìn)行給藥。GLP-1的濃度可根據(jù)所選定的GLP-1化合物的活性而進(jìn)行上下調(diào)整。預(yù)混合制劑中的GLP-1化合物濃度一般在0.1到20mg/ml的范圍內(nèi)。在優(yōu)選的情況下，預(yù)混合制劑中的GLP-1化合物濃度在0.1到10mg/ml的范圍內(nèi)。更為優(yōu)選的情況下，預(yù)混合制劑中的GLP-1化合物濃度在0.1到5mg/ml的范圍內(nèi)。總體上，混合物應(yīng)經(jīng)過配制從而使每天施用約0.01到約1U/kg的基礎(chǔ)胰島素。在優(yōu)選的情況下，基礎(chǔ)胰島素應(yīng)在0.05到0.5U/kg/天的范圍內(nèi)進(jìn)行給藥。更為優(yōu)選的情況下，基礎(chǔ)胰島素應(yīng)在0.05到0.3U/kg/天的范圍內(nèi)進(jìn)行給藥。含有本發(fā)明的GLP-1化合物以及基礎(chǔ)胰島素的多種預(yù)混合的制劑可任選地包括藥學(xué)上可接受的緩沖液。但是，緩沖液的選擇、濃度以及pH應(yīng)當(dāng)使GLP-1化合物保持基本可溶于制劑中并且保持促胰島素活性，并且使基礎(chǔ)胰島素保持延長(zhǎng)的效能特征。藥學(xué)上可接受的緩沖液的例子如磷酸緩沖液(例如二鹽基磷酸鈉(dibasicsodiumphosphate))、TRIS、乙酸鹽(如乙酸鈉)、檸檬酸鹽(如檸檬酸鈉)、酒石酸鈉、堿性氨基酸(例如組氨酸、賴氨酸或者精氨酸)、或者中性氨基酸(例如甘氨酸和甘氨?；拾彼?。其它的藥學(xué)上可接受的緩沖液在本領(lǐng)域中是已知的。在優(yōu)選的情況下，緩沖液選自于乙酸鹽、磷酸鹽和TRIS。技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到，緩沖液的選擇依賴于所需的緩沖液pH和pKa。在優(yōu)選的情況下，當(dāng)pH處于生理范圍內(nèi)時(shí)，緩沖液為磷酸鹽和TRIS。當(dāng)所需的pH處于堿性范圍內(nèi)時(shí)，優(yōu)選的緩沖液為TRIS，當(dāng)所需的pH處于酸性范圍內(nèi)時(shí)，優(yōu)選的緩沖液為乙酸鹽。在優(yōu)選的情況下，緩沖液的濃度介于約1mM和30mM之間。更為優(yōu)選的情況下，緩沖液的濃度介于約4mM和14mM之間。對(duì)預(yù)混合制劑的pH進(jìn)行調(diào)整以提供可接受的穩(wěn)定性，維持GLP-1化合物的溶解度以及促胰島素活性以及基礎(chǔ)胰島素的延長(zhǎng)效能特征，并且對(duì)于注射給藥是可接受的。當(dāng)胰島素不可溶時(shí)，預(yù)混合制劑的pH在優(yōu)選的情況下被調(diào)節(jié)而介于約7.0到約8.5，更為優(yōu)選的情況下pH介于7.4到8.0，更為優(yōu)選的情況下pH介于約7.4到7.8。最為優(yōu)選的情況下，pH介于約7.6到7.8，最優(yōu)選的是7.8。但是，當(dāng)胰島素為一種pI移動(dòng)的胰島素類似物時(shí)，pH經(jīng)調(diào)整而同時(shí)維持GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素類似物在水性介質(zhì)中的溶解度。例如，人類胰島素所具有的pI為約5.5。當(dāng)由于加入了堿性氨基酸而使pI變至約7時(shí)，pH被調(diào)節(jié)至略為堿性或者略為酸性以維持溶解度。pH可被調(diào)節(jié)至低于約6、低于約5、低于約4。pH還可被調(diào)節(jié)至高于約8、高于約9、高于約10?；蛘撸?dāng)pI移動(dòng)的胰島素類似物為胰島素glargine時(shí)，pH可被調(diào)節(jié)至約8。pH還依賴于在預(yù)混合制劑中所使用的GLP-1化合物。一般來說，GLP-1化合物的pH介于約4到約10之間。pH根據(jù)GLP-1化合物的pI而被調(diào)節(jié)至微酸或者微堿以維持溶解度。當(dāng)GLP-1的pI為約7時(shí)，則pH可被調(diào)節(jié)至低于約6、低于約5、低于約4。pH還可被調(diào)節(jié)至高于約8、高于約9、高于約10。例如，在第22位上為谷氨酸的GLP-1化合物可在酸性pH下進(jìn)行配制并且仍然保持可溶。在優(yōu)選的情況下，在第22位上為谷氨酸的GLP-1化合物的pH介于約4到6之間。更為優(yōu)選的情況下pH約為4。在第22位為中性氨基酸的其它GLP-1化合物可在生理pH或者更高的pH下進(jìn)行配制并且仍然保持可溶。在優(yōu)選的情況下，在第22位為中性氨基酸的其它GLP-1化合物的pH介于約7到10之間。更為優(yōu)選的情況下pH介于約7到8.5之間。Exendin-3和Exendin-4可在酸性pH下進(jìn)行配制并且仍然保持可溶。在優(yōu)選的情況下，Exendin-3或Exendin-4的pH介于約4到6之間。更為優(yōu)選的情況下pH約為4。本發(fā)明的預(yù)混合制劑可任選地包括一種防腐劑。但是，防腐劑的選擇和濃度應(yīng)當(dāng)使GLP-1化合物保持基本可溶于制劑中并且保持促胰島素活性，并且使基礎(chǔ)胰島素保持延長(zhǎng)的效能特征。防腐劑指的是一種化合物，化合物被添加至一種藥用制劑中以作為一種抗微生物藥物發(fā)揮作用。為成為一種可商業(yè)化的多用途產(chǎn)品，注射用制劑必須符合防腐效能的準(zhǔn)則。本領(lǐng)域所已知的可在注射制劑中有效用并且可被接受的防腐劑有酚類防腐劑、羥苯甲酸烷基酯(alkylparaben)、芐醇、氯丁醇、間苯二酚以及其它類似的防腐劑及它們的混合物。酚類衍生物的例子包括甲酚和苯酚或者甲酚和苯酚的混合物。甲酚的例子包括間甲酚、鄰甲酚、對(duì)甲酚、氯甲酚或其混合物。羥苯甲酸烷基酯指的是羥苯甲酸C1到C4烷基酯或其混合物。羥苯甲酸烷基酯的例子包括羥苯甲酸甲酯、羥苯甲酸乙酯、羥苯甲酸丙酯或者羥苯甲酸丁酯。防腐劑的濃度為本領(lǐng)域的技術(shù)人員所已知。濃度必須足以通過遲滯微生物生長(zhǎng)而維持防腐效能。在優(yōu)選的情況下防腐劑為苯酚衍生物。更為優(yōu)選的情況下防腐劑為甲酚、苯酚或者甲酚和苯酚的混合物。更為優(yōu)選的情況下防腐劑為間甲酚、苯酚或間甲酚和苯酚的混合物。對(duì)于兩相制劑，優(yōu)選的防腐劑為間甲酚和苯酚的混合物。間甲酚的濃度通常介于約0.1到約4.0mg/mL之間。間甲酚的優(yōu)選濃度約為1.6mg/mL。苯酚的濃度通常介于約0.1到約2.0mg/mL之間。苯酚的優(yōu)選濃度約為0.65mg/mL。對(duì)于溶液制劑，優(yōu)選的防腐劑為間甲酚或者苯酚。間甲酚的濃度通常介于約2.0到約8.0mg/mL、約2.5mg/mL到約4.5mg/mL之間以及約2.0mg/mL到約4.0mg/mL之間。防腐劑在最終混合物中的最佳濃度約為2.7mg/mL。在另一個(gè)實(shí)施方案中，苯酚的濃度介于約2.0mg/mL到約10.0mg/mL之間以及約4.0mg/mL到約8.0mg/mL之間。防腐劑在最終混合物的最為優(yōu)選的濃度約為5.0mg/mL。胰島素通常通過在約為7到8的pH下溶解于一種稀釋劑中并且加入鋅而被轉(zhuǎn)化成為六聚體復(fù)合物，稀釋劑含有適量的防腐劑。但是，防腐劑和鋅的選擇和用量應(yīng)當(dāng)使GLP-1化合物保持基本可溶于制劑中并且保持促胰島素活性，并且使基礎(chǔ)胰島素保持延長(zhǎng)的效能特征。鋅在優(yōu)選的情況下以鋅鹽的形式加入，例如乙酸鋅、溴化鋅、氯化鋅、氟化鋅、碘化鋅和硫酸鋅，但不限于這些。技術(shù)人員應(yīng)認(rèn)識(shí)到，還有其它的鋅鹽可被用于制備胰島素類似物復(fù)合物，該復(fù)合物為本發(fā)明的一部分。在優(yōu)選的情況下，鋅鹽為乙酸鋅、氧化鋅或者氯化鋅。六聚物復(fù)合體通常由每人類胰島素類似物六聚體兩個(gè)鋅離子以及至少三分子的苯酚類防腐劑組成，所述苯酚類防腐劑選自氯甲酚、間甲酚、苯酚及其混合物。本發(fā)明的預(yù)混合的制劑可任選地包括有一種等滲劑。但是，等滲劑的選擇和濃度應(yīng)當(dāng)使GLP-1化合物保持基本可溶于制劑中并且保持促胰島素活性，并且使基礎(chǔ)胰島素保持延長(zhǎng)的效能特征。等滲劑指的是一些可被生理容受并且可使試劑具有合適的滲透壓的化合物，這樣可以防止水跨細(xì)胞膜的凈流動(dòng)。這樣的化合物的例子包括甘油(丙三醇)、鹽(例如NaCl)、還有糖(例如葡萄糖、甘露醇和蔗糖)。這些化合物通常在已知的濃度下用于這樣的目的。可加入一種或者多種等滲劑以調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度或者滲透壓。對(duì)于兩相制劑，優(yōu)選的等滲劑為甘油。甘油的濃度在優(yōu)選的情況下介于約12mg/mL到25mg/mL之間，優(yōu)選的情況下介于12mg/mL到20mg/mL之間，更為優(yōu)選的情況下約為16mg/mL。對(duì)于可溶制劑，優(yōu)選的等滲劑為NaCl。NaCl的濃度在優(yōu)選的情況下介于約10mM到200mM之間，優(yōu)選的情況下介于50mM到150mM之間，更為優(yōu)選的情況下約為100mM。在另一個(gè)實(shí)施方案中，優(yōu)選的等滲劑為甘露醇。甘露醇的濃度在優(yōu)選的情況下介于約1％(重量(w)/體積(v))到10％(w/v)之間，更為優(yōu)選的情況下介于2％(w/v)到8％(w/v)之間。在另一個(gè)實(shí)施方案中，優(yōu)選的等滲劑為甘油。甘油的濃度在優(yōu)選的情況下介于約12mg/mL到25mg/mL之間，優(yōu)選的情況下介于12mg/mL到20mg/mL之間，更為優(yōu)選的情況下約為17mg/mL。本發(fā)明的可溶制劑可任選地含有一種增溶劑。但是，增溶劑的選擇和濃度應(yīng)當(dāng)使GLP-1化合物保持基本可溶于制劑中并且保持促胰島素活性，并且使基礎(chǔ)胰島素保持基本可溶于制劑中并且保持延長(zhǎng)的效能特征。增溶劑為基礎(chǔ)胰島素和GLP-1化合物提供穩(wěn)定性，由此使基礎(chǔ)胰島素和GLP-1化合物在貯存條件下保持較長(zhǎng)時(shí)間可溶。在優(yōu)選的情況下增溶劑為煙酰胺。煙酰胺的濃度通常介于0.01到2M。煙酰胺的其它優(yōu)選范圍為介于0.05M到1.5M；介于0.1M到1.0M；介于0.1M到0.5M；介于0.5M到1.0M；以及介于0.15M到0.25M。其它的添加劑，例如像Tween20(聚氧乙烯(20)山梨聚糖單月桂酸酯)、Tween40(聚氧乙烯(20)山梨聚糖單棕櫚酸酯)、Tween80(聚氧乙烯(20)山梨聚糖單油酸酯)、PluronicF68(聚氧乙烯聚氧丙烯嵌段共聚物)以及PEG(聚乙二醇)這樣的增溶劑均可任選地加入制劑中。盡管這些添加劑并非必需，但它們?cè)谥苿┙佑|塑性材料時(shí)可能會(huì)有用。在優(yōu)選的情況下，當(dāng)被注射時(shí)，本發(fā)明的預(yù)混合制劑所產(chǎn)生的葡萄糖特征(glucoseprofile)等同于或者好于當(dāng)GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素被分別進(jìn)行給藥時(shí)所獲得的葡萄糖特征。本發(fā)明的預(yù)混合制劑適用于治療一些疾病或者癥狀，在這些疾病或者癥狀中使用GLP-1或者胰島素進(jìn)行的給藥將使其有所改善。所包括的有，患有非胰島素依賴型糖尿癥、胰島素依賴型糖尿癥、中風(fēng)(見Efendic的WO00/16797)的患者、心肌梗塞(見Efendic的WO98/08531)、肥胖癥(見Efendic的WO98/16698)、術(shù)后分解代謝改變(見Efendic的美國(guó)專利No.6,006,753)、功能性消化不良以及腸易激綜合征(見Efendic的WO99/64060)的患者。還包括有需要以GLP-1化合物進(jìn)行預(yù)防治療的對(duì)象，例如，具有發(fā)展成為非胰島素依賴型糖尿癥的危險(xiǎn)的對(duì)象(見WO00/07617)。其它的對(duì)象包括，具有受損的葡萄糖耐受或者受損的空腹葡萄糖的患者、體重超過相對(duì)于其身高和體形的正常體重約25％的對(duì)象、具有部分胰切除的患者、具有一名或者多名患有非胰島素依賴型糖尿病的親代的對(duì)象、患有妊娠期糖尿癥的患者以及患有急性或者慢性胰腺炎的患者。本發(fā)明的預(yù)混合制劑可被用于使血糖水平正常化、防止胰β-細(xì)胞損害、誘導(dǎo)β-細(xì)胞增殖、刺激胰島素基因轉(zhuǎn)錄、上調(diào)IDX-1/PDX-1或者其它生長(zhǎng)因子、改善β-細(xì)胞功能、激活休眠的β-細(xì)胞、使細(xì)胞分化成為β-細(xì)胞、促進(jìn)β-細(xì)胞復(fù)制、抑制β-細(xì)胞凋亡、調(diào)節(jié)體重和誘導(dǎo)減重。本文所描述的預(yù)混合的制劑可被用于對(duì)患有多種疾病和癥狀的患者進(jìn)行治療。在本發(fā)明的預(yù)混合制劑中所包括的GLP-1化合物通過作用于一種被稱作為“GLP-1受體”的受體(見Thorens，PNAS89，8641-8645(1992))而發(fā)揮其生物學(xué)效能。因此，患有疾病和/或癥狀的患者在對(duì)GLP-1受體刺激或者GLP-1化合物的給藥產(chǎn)生有利反應(yīng)的情況下可以使用本發(fā)明的GLP-1化合物進(jìn)行治療。這些患者被描述為“需要以GLP-1化合物進(jìn)行治療”或者“需要GLP-1受體刺激”。下文提供了可用于本發(fā)明的預(yù)混合制劑的GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素的更為詳盡的討論?？杀挥糜诒景l(fā)明的預(yù)混合制劑的GLP-1化合物的代表性例子包括本領(lǐng)域所已知的GLP-1化合物，例如，在美國(guó)專利No.5,118,666；5,120,712；5,512,549；6,191,102；5,977,071；5,545,618；5,705,483；6,133,235以及Adelhorst等，(1994)J.Biol.Chem.2696725中所披露的類似物。式I(SEQIDNO1)所示為兩種天然的截短GLP-1多肽SEQIDNO17891011121314151617His-Ala-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-1819202122232425262728Ser-Tyr-Leu-Glu-Gly-Gln-Ala-Ala-Lys-Glu-Phe-293031323334353637Ile-Ala-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-Xaa其中位于第37位的Xaa為甘氨酸或者-NH2。術(shù)語“二肽基肽酶IV(DPPIV)抗性”指的是由于對(duì)內(nèi)源性的酶DPPIV有抗性而具有延長(zhǎng)的代謝穩(wěn)定性和提高的生物活性的GLP-1分子。例如，DPPIV抗性可以使用實(shí)施例2中所描述的方法進(jìn)行測(cè)定。如果GLP-1分子在存在DPPIV的情況下相對(duì)于天然GLP-1而具有延長(zhǎng)的代謝穩(wěn)定性，則GLP-1分子具有DPPIV抗性。具有DPPIV抗性的GLP-1分子可在DPPIV識(shí)別位點(diǎn)(第8位)具有一個(gè)氨基酸變換?；蛘逥PPIV多肽可具有附加基團(tuán)限制了DPPIV對(duì)識(shí)別位點(diǎn)的接近，或者兩種情況兼而有之。“GLP-1片段”為一種多肽，多肽通過將一個(gè)或者多個(gè)氨基酸從GLP-1(7-37)OH或其類似物或衍生物中截除而獲得。用于描述GLP-1(7-37)OH的命名法也適用于GLP-1片段。例如，GLP-1(9-36)OH所表示的GLP-1片段通過從N-末端截除兩個(gè)氨基酸以及從C-末端截除一個(gè)氨基酸而獲得。在該片段中的氨基酸通過與GLP-1(7-37)OH中所對(duì)應(yīng)的氨基酸的編號(hào)進(jìn)行表示。例如，與GLP-1(7-37)OH相同，GLP-1(9-36)OH中的N-末端谷氨酸為第9位；第12位為苯丙氨酸所占據(jù)；第22位為甘氨酸所占據(jù)。對(duì)于GLP-1(7-36)OH，位于GLP-1(7-37)OH的第37位的甘氨酸被去除?！癎LP-1類似物”同GLP-1(7-37)OH或者GLP-1(7-37)OH的片段之間具有足以使該類似物具有促胰島素活性的同源性。在優(yōu)選的情況下，GLP-1類似物具有GLP-1(7-37)OH或其片段的氨基酸序列，其序列經(jīng)修飾而使其在一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或者五個(gè)氨基酸上同GLP-1(7-37)OH或者GLP-1(7-37)OH的片段中的對(duì)應(yīng)位置上有所差異。在本文表示GLP-1化合物的命名法中，所替換的氨基酸及其位置顯示于其源結(jié)構(gòu)之前。例如，Glu22-GLP-1(7-37)OH所表示的GLP-1化合物中，GLP-1(7-37)OH的第22位上正常情況下出現(xiàn)的甘氨酸被谷氨酸替代；Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH所表示的GLP-1化合物中，GLP-1(7-37)OH的第8位上正常情況下出現(xiàn)的丙氨酸以及第22位上正常情況下出現(xiàn)的甘氨酸分別被纈氨酸和谷氨酸替代。本發(fā)明的其它GLP-1化合物包括在N-末端和/或C-末端上添加了一個(gè)或者多個(gè)氨基酸的GLP-1。在優(yōu)選的情況下，一到六個(gè)氨基酸被添加于GLP-1的N-末端并且/或者一到八個(gè)氨基酸被添加于GLP-1的C-末端。這種延長(zhǎng)的GLP-1類似物的氨基酸通過與在GLP-1(7-37)OH中對(duì)應(yīng)的氨基酸相同的編號(hào)進(jìn)行表示。例如，通過添加兩個(gè)氨基酸于GLP-1(7-37)OH的N-末端所獲得的GLP-1類似物的N-末端氨基酸處于第5位；通過添加一個(gè)氨基酸于GLP-1(7-37)OH的C-末端所獲得的GLP-1化合物的C-末端氨基酸處于第38位。延長(zhǎng)的GLP-1類似物的氨基酸1-6在優(yōu)選的情況下與位于GLP-1(7-37)OH的對(duì)應(yīng)位置的氨基酸相同或是其保守替換。延長(zhǎng)的GLP-1化合物的氨基酸38-45在優(yōu)選的情況下與位于Exendin-4的對(duì)應(yīng)位置的氨基酸相同或是其保守替換。保守替換是將一個(gè)氨基酸替換以另一個(gè)具有相同的凈電荷以及在體積和形狀上近似的氨基酸。具有脂肪族或者取代的脂肪族氨基酸側(cè)鏈的氨基酸當(dāng)它們的側(cè)鏈的總碳數(shù)和雜環(huán)原子數(shù)上的差異低于4時(shí)具有近似相同的體積。當(dāng)它們的側(cè)鏈的分支數(shù)上的差異低于1時(shí)具有近似相同的形狀。側(cè)鏈上具有苯基或者取代的苯基基團(tuán)的氨基酸被認(rèn)為具有大致相同的大小和形狀。在優(yōu)選的情況下，GLP-1化合物具有SEQIDNO1的氨基酸序列或者具有經(jīng)修飾的序列以使其與SEQIDNO1在一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)、四個(gè)或者五個(gè)氨基酸上有所差異。式II(SEQIDNO2)所示為Exendin-3和Exendin-4的氨基酸序列。SEQIDNO27891011121314151617His-Xaa-Xaa-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Leu-Ser-1819202122232425262728Lys-Gln-Met-Glu-Glu-Glu-Ala-Val-Arg-Leu-Phe-2930313233343536373839Ile-Glu-Trp-Leu-Lys-Asn-Gly-Gly-Pro-Ser-Ser-404142434445Gly-Ala-Pro-Pro-Pro-Ser其中第8位的Xaa為絲氨酸或者甘氨酸；第9位的Xaa為天冬氨酸或者谷氨酸；并且第45位的Ser為絲氨酸或者絲氨酸-NH2。Exendin-3在第8位為絲氨酸并且在第9位為天冬氨酸。Exendin-3在第8位為甘氨酸并且在第9位為谷氨酸。本發(fā)明的其他GLP-1化合物包括Exendin-3和Exendin-4激動(dòng)劑，這些激動(dòng)劑見WO99/07404、WO99/25727、WO99/25728、WO99/43708、WO00/66629以及US2001/0047084A1中的描述，并且在此引為參考。式III(SEQIDNO3)所示為GLP-1類似物的一個(gè)優(yōu)選的群體SEQIDNO37891011121314151617Xaa-Xaa-Xaa-Gly-Xaa-Xaa-Thr-Xaa-Asp-Xaa-Xaa-1819202122232425262728Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Phe-2930313233343536373839Ile-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-404142434445Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa-Xaa其中第7位的Xaa為L(zhǎng)-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、β-羥基-組氨酸、高組氨酸(homohistidine)、α-氟甲基-組氨酸或者α-甲基-組氨酸。第8位的Xaa為丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第9位的Xaa為谷氨酸、天冬氨酸、賴氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、精氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸或者組氨酸；第11位的Xaa為蘇氨酸、丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、組氨酸或者賴氨酸；第12位的Xaa為組氨酸、色氨酸、苯丙氨酸或者酪氨酸；第14位的Xaa為絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第16位的Xaa為纈氨酸、丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、酪氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、組氨酸、苯丙氨酸或者賴氨酸；第17位的Xaa為絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第18位的Xaa為絲氨酸、丙氨酸、甘氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸、脯氨酸、精氨酸或者賴氨酸；第19位的Xaa為酪氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸、半胱氨酸或者賴氨酸；第20位的Xaa為亮氨酸、丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、甲硫氨酸或者賴氨酸；第21位的Xaa為谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第22位的Xaa為甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第23位的Xaa為谷氨酰胺、天冬酰胺、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸或者賴氨酸；第24位的Xaa為丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第25位的Xaa為丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第26位的Xaa為賴氨酸、精氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸或者組氨酸；第27位的Xaa為谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、精氨酸、亮氨酸或者賴氨酸；第30位的Xaa為丙氨酸、甘氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸或者賴氨酸；第31位的Xaa為色氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、精氨酸或者賴氨酸；第32位的Xaa為亮氨酸、甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；第33位的Xaa為纈氨酸、甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸或者賴氨酸；第34位的Xaa為賴氨酸、精氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、天冬酰胺或者組氨酸；第35位的Xaa為甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、精氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、組氨酸或者賴氨酸；第36位的Xaa為精氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸或者組氨酸；第37位的Xaa為甘氨酸、丙氨酸、絲氨酸、蘇氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、組氨酸、賴氨酸、精氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、脯氨酸、脯氨酸-NH2或者該位置被去除；第38位的Xaa為精氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、組氨酸或者該位置被去除；第39位的Xaa為精氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸、組氨酸或者該位置被去除；第40位的Xaa為天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、賴氨酸或者該位置被去除；第41位的Xaa為苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丙氨酸、賴氨酸或者該位置被去除；第42位的Xaa為絲氨酸、脯氨酸、賴氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者該位置被去除；第43位的Xaa為絲氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、賴氨酸或者該位置被去除；第44位的Xaa為甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、脯氨酸、賴氨酸或者該位置被去除；第45位的Xaa為丙氨酸、纈氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸或者賴氨酸，或者丙氨酸-NH2、纈氨酸-NH2、谷氨酸-NH2、天冬氨酸-NH2、絲氨酸-NH2、賴氨酸-NH2或者該位置被去除，或?yàn)橐环NC-1-6酯，或?yàn)轷０?，或?yàn)橐环NC-1-6-烷基酰胺，或?yàn)镃-1-6-二烷基酰胺；如果第37、38、39、40、41、42、43或者44位被去除，則在該氨基酸下游的各氨基酸也被去除。GLP-1的一個(gè)優(yōu)選的群體為HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRG或G-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIDGGPSSGRPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRGSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYIEEQAAKEFIAWLVKGRPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLVKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGGSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGPGSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGSPSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDAPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPAPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPAS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGDAAAS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPH或H-NH2HVEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPSSGDPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDWSSYLEGQAAKEFIAWLIKGGPHSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGRGSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEGQAAKEFIAWLVKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRGSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGRGSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAAKEFIAWLIKGRGSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGRGHSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGRGHSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPHSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDVSWYLEGQAVKEFIAWLIKGGPHSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDWSSYLEEQAVKEFIAWLIKGGPHSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDWSKYLEEQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPSH或H-NH2HVEGTFTSDVSSYLESQAVKEFIAWLIKGGPSSGAPPPRG或G-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLIKGQPSSGAPPPRG或G-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVDGGPSSGRPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVDGGPSSGRPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVDGGPSSGKPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVDGGPSSGRG或G-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLVKGGPSWGAPPPS或S-NH2HVSGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPGPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAAKEFIAWLIKGGPSSGAPPPGPSGPS或S-NH2HVEGTFTSDVSSYLEEQAVKEFIAWLVKGGPSSGAPPPS或S-NH2式IV(SEQIDNO4)所示為GLP-1類似物的另一個(gè)優(yōu)選的群體7891011121314151617His-Xaa-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Val-Ser-1819202122232425262728Ser-Tyr-Leu-Glu-Xaa-Xaa-Ala-Ala-Lys-Xaa-Phe-293031323334353637Ile-Xaa-Trp-Leu-Val-Lys-Gly-Arg-R其中位于第8位的Xaa為甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸或者蘇氨酸；位于第22位的Xaa為天冬氨酸、谷氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、賴氨酸、精氨酸、半胱氨酸或者磺基丙氨酸；位于第23位的Xaa為組氨酸、天冬氨酸、賴氨酸、谷氨酸或者谷氨酰胺；位于第27位的Xaa為丙氨酸、谷氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸、精氨酸或者賴氨酸；位于第30位的Xaa為谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸或者組氨酸；R為賴氨酸、精氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、組氨酸、-NH2。具有替換氨基酸的其它組合的本發(fā)明的GLP-1化合物也是優(yōu)選的。本發(fā)明包括了一種GLP-1化合物，該化合物含有式V(SEQIDNO5)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Xaa12-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Xaa19-Xaa20-Glu-Xaa22-Gln-Ala-Xaa25-Lys-Xaa27-Phe-Ile-Xaa30-Trp-Leu-Xaa33-Lys-Gly-Arg-Xaa37式V(SEQIDNO5)其中Xaa7為L(zhǎng)-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、β-羥基-組氨酸、高組氨酸、α-氟甲基-組氨酸或者α-甲基-組氨酸。Xaa8為丙氨酸、甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸或者蘇氨酸；Xaa12為苯丙氨酸、色氨酸或者酪氨酸；Xaa16為纈氨酸、色氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或者酪氨酸；Xaa18為絲氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、纈氨酸；Xaa19為酪氨酸、色氨酸或者苯丙氨酸；Xaa20為亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸或者色氨酸；Xaa22為甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、賴氨酸；Xaa25為丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸或者亮氨酸；Xaa27為谷氨酸、異亮氨酸或者丙氨酸；Xaa30為丙氨酸或者谷氨酸；Xaa33為纈氨酸或者異亮氨酸；并且Xaa37為甘氨酸、組氨酸、NH2或者不存在。本發(fā)明包括了一種GLP-1化合物，該化合物含有式VI(SEQIDNO6)的氨基酸序列Xaa7-Xaa8-Glu-Gly-Thr-Phe-Thr-Ser-Asp-Xaa16-Ser-Xaa18-Tyr-Leu-Glu-Xaa22-Gln-Ala-Xaa25-Lys-Glu-Phe-Ile-Ala-Trp-Leu-Xaa33-Lys-Gly-Arg-Xaa37式VI(SEQIDNO6)其中Xaa7為L(zhǎng)-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、β-羥基-組氨酸、高組氨酸、α-氟甲基-組氨酸或者α-甲基-組氨酸。Xaa8為甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸或者蘇氨酸；Xaa16為纈氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸或者色氨酸；Xaa18為絲氨酸、酪氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、異亮氨酸、亮氨酸或纈氨酸；Xaa22為甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸或者賴氨酸；Xaa25為丙氨酸、纈氨酸、異亮氨酸或者亮氨酸；Xaa33為纈氨酸或者異亮氨酸；并且Xaa37為甘氨酸、NH2或者不存在。在優(yōu)選的情況下式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1類似物的主鏈在第8位上含有一個(gè)除丙氨酸之外的氨基酸(第8位類似物)。第8位上的優(yōu)選氨基酸為甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。該主鏈還可在第7位上包括L-組氨酸、D-組氨酸或者修飾形式的組氨酸，例如脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、β-羥基-組氨酸、高組氨酸、α-氟甲基-組氨酸或者α-甲基-組氨酸。在優(yōu)選的情況下這些第8位類似物在第12、16、18、19、20、22、25、27、30、33和37位含有同天然GLP-1(7-37)OH的對(duì)應(yīng)氨基酸相比的其它氨基酸。更為優(yōu)選的情況下這些第8位類似物在第16、18、22、25和33含有同天然GLP-1(7-37)OH的對(duì)應(yīng)氨基酸相比的其它氨基酸。更為優(yōu)選的是一些式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1類似物，這些類似物中最多有6個(gè)氨基酸不同于天然GLP-1(7-37)OH、GLP-1(7-36)NH2或者Exendin-4的對(duì)應(yīng)氨基酸。最為優(yōu)選是一些式I、II、II和IVGLP-1類似物，這些類似物中有1到5個(gè)氨基酸不同于天然GLP-1(7-37)OH、GLP-1(7-36)NH2或者Exendin-4的對(duì)應(yīng)氨基酸。其它的優(yōu)選的GLP-1類似物具有GLP-1(7-37)OH的序列，其不同之處在于第8位的氨基酸在優(yōu)選的情況下為甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸并且在更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸，同時(shí)在優(yōu)選的情況下第22位為谷氨酸、賴氨酸、天冬氨酸或者精氨酸，更為優(yōu)選的情況下為谷氨酸或者賴氨酸。其它的優(yōu)選的GLP-1類似物具有GLP-1(7-37)OH的序列，其不同之處在于第8位的氨基酸在優(yōu)選的情況下為甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸并且在更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸，同時(shí)在優(yōu)選的情況下第30位為谷氨酸、天冬氨酸、絲氨酸或者組氨酸，更為優(yōu)選的情況下為谷氨酸。其它的優(yōu)選的GLP-1類似物具有GLP-1(7-37)OH的序列，其不同之處在于第8位的氨基酸在優(yōu)選的情況下為甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸并且在更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸，同時(shí)在優(yōu)選的情況下第37位為組氨酸、賴氨酸、精氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸，更為優(yōu)選的情況下為組氨酸。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第12位的氨基酸選自色氨酸或者酪氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第12位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第12位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第16位的氨基酸選自色氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸或者酪氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第16位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第16位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第16位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第16位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第18位的氨基酸選自色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、賴氨酸、亮氨酸或者異亮氨酸，優(yōu)選的情況下選自色氨酸、酪氨酸和異亮氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第18位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第18位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第18位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第18位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第19位的氨基酸選自色氨酸或者苯丙氨酸，優(yōu)選的情況下選自色氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第19位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第19位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第19位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第19位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第20位的氨基酸選自苯丙氨酸、酪氨酸或者色氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第20位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第20位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第20位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第20位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第25位的氨基酸選自纈氨酸、異亮氨酸和亮氨酸，優(yōu)選的情況下選自纈氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第25位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第25位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第25位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第25位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第27位的氨基酸選自異亮氨酸或者丙氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第27位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第27位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第27位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第27位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，GLP-1類似物為GLP-1(7-37)OH，其中第33位的氨基酸為異亮氨酸。更為優(yōu)選的情況下，除第33位的替換之外，第8位的氨基酸被替換以甘氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、絲氨酸、蘇氨酸或者甲硫氨酸，更為優(yōu)選的情況下為纈氨酸或者甘氨酸。愈加優(yōu)選的情況下，除第33位和第8位的替換之外，第22位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第33位和第8位的替換之外，第30位的氨基酸被替換以谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，除第33位和第8位的替換之外，第37位的氨基酸被替換以組氨酸。在優(yōu)選的情況下，式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1類似物同天然GLP-1(7-37)OH中的對(duì)應(yīng)氨基酸相比較具有6個(gè)或者更少的變化。更為優(yōu)選的類似物同天然GLP-1(7-37)OH中的對(duì)應(yīng)氨基酸相比較具有5個(gè)或者更少的變化，或者同天然GLP-1(7-37)OH中的對(duì)應(yīng)氨基酸相比較具有4個(gè)或者更少的變化，或者同天然GLP-1(7-37)OH中的對(duì)應(yīng)氨基酸相比較具有3個(gè)或者更少的變化。具有多個(gè)替換的優(yōu)選的式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1化合物包括一些GLP-1(7-37)OH，其中第8位為纈氨酸或者甘氨酸，第22位為谷氨酸，第16位為酪氨酸、亮氨酸或者色氨酸，第18位為酪氨酸、色氨酸或者異亮氨酸，第25位為纈氨酸并且第33位為異亮氨酸。其它的優(yōu)選的GLP-1化合物包括以下Val8-Tyr16-GLP-1(7-37)OH、Val8-Tyr12-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Tyr16-Phe19-GLP-1(7-37)OH、Val8-Tyr16-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Trp16-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Leu16-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Ile16-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Phe16-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Trp18-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Tyr18-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Phe18-Glu22-GLP-1(7-37)OH、以及Val8-Ile18-Glu22-GLP-1(7-37)OH。本文所披露的位置上的替換產(chǎn)生的GLP-1化合物同Val8-GLP-1(7-37)OH相比較具有提高的性能。本發(fā)明的GLP-1化合物比Val8-GLP-1(7-37)OH的效能一般高出3到6倍。例如，表8和表9提供了GLP-1化合物的列表，附以同GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH相比較的這些化合物的體外效能。表8和9中所披露的體外效能一般代表了相對(duì)于GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH的體內(nèi)效能。進(jìn)一步，這些更為高效的類似物中的許多種都具有較低的聚集傾向性，并且由此而具有提高的穩(wěn)定性。GLP-1可以至少兩種不同的形式存在。第一種形式有生理活性并且在生理pH(7.4)下易溶于水溶液中。當(dāng)水溶液被攪拌、暴露于疏水表面或者具有很大的氣水界面時(shí)容易產(chǎn)生第二種形式。轉(zhuǎn)化成為不溶形式的傾向性相當(dāng)程度上使活性GLP-1化合物的商業(yè)規(guī)模的生產(chǎn)復(fù)雜化。由此，在溶液中具有較低的聚集傾向性并且比GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH更為高效的GLP-1化合物較為優(yōu)選。例如，GLP-1化合物Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH、Val8-Glu30-GLP-1(7-37)OH以及Val8-His37-GLP-1(7-37)OH同GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH(見表8和9)在溶液中表現(xiàn)出了顯著降低的聚集傾向性。由此，除在諸如12、16、18、19、20、25、27和33這樣的位置上的替換之外，本發(fā)明的優(yōu)選的GLP-1化合物或者在第22位上具有谷氨酸，或者在第30位上具有谷氨酸，或者在第37位上具有組氨酸或具有這些替換的組合。式I、II、III、IV、V和VI的優(yōu)選的實(shí)施方案包括一些GLP-1化合物，這些GLP-1化合物同GLP-1(7-37)OH或者GLP-1(7-36)NH2的差異不超過6個(gè)氨基酸、不超過5個(gè)氨基酸、不超過4個(gè)氨基酸或者不超過3個(gè)氨基酸。同樣優(yōu)選的情況還有，式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1化合物在第8位為纈氨酸或者甘氨酸并且在第22位為谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1化合物在第8位為纈氨酸或者甘氨酸并且在第30位為谷氨酸。同樣優(yōu)選的情況還有，式I、II、III、IV、V和VI的GLP-1化合物在第8位為纈氨酸或者甘氨酸并且在第37位為組氨酸。同GLP-1(7-37)OH相比較已經(jīng)表現(xiàn)出顯著降低的聚集傾向的GLP-1類似物的例子在實(shí)施例8和表9中有所描述。同GLP-1(7-37)OH相比較已經(jīng)表現(xiàn)出顯著提高的GLP-1受體激活的GLP-1類似物的例子在實(shí)施例8和表8和9中有所描述。本發(fā)明的GLP-1類似物在優(yōu)選的情況下在表8和9中描述。本發(fā)明的GLP-1化合物還包括GLP-1衍生物?！癎LP-1衍生物”指的是在天然的情況下被截短的GLP-1化合物、GLP-1片段或者GLP-1類似物的一種氨基酸序列，但該序列額外地在一個(gè)或者多個(gè)氨基酸側(cè)鏈基團(tuán)、α碳原子、末端氨基基團(tuán)或者末端羧基基團(tuán)上具有的化學(xué)修飾?；瘜W(xué)修飾包括，添加化學(xué)結(jié)構(gòu)團(tuán)、產(chǎn)生新鍵和除去化學(xué)結(jié)構(gòu)團(tuán)，但不限于這些。氨基側(cè)鏈上的化學(xué)修飾包括，賴氨酸ε-氨基基團(tuán)的?；彼?、組氨酸或者賴氨酸的N-烷基化，天冬氨酸羧基側(cè)鏈的烷基化以及谷氨酰胺或者天冬酰胺的去氨基化，但不限于這些。末端氨基基團(tuán)的修飾包括，脫氨基、N-低級(jí)烷基、N-二-低級(jí)烷基以及N-酰化修飾，但不限于這些。末端羧基基團(tuán)的的修飾包括，酰胺、低級(jí)烷基酰胺、二烷基胺以及低級(jí)烷基酯修飾，但不限于這些。進(jìn)一步，一個(gè)或者多個(gè)側(cè)鏈基團(tuán)或者末端基團(tuán)可通過保護(hù)性基團(tuán)進(jìn)行保護(hù)，這些保護(hù)性基團(tuán)為普通的蛋白質(zhì)化學(xué)家所知。氨基酸的α-碳可以被單甲基化或者雙甲基化。優(yōu)選的GLP-1衍生物在美國(guó)專利No.6,268,343B1中有所描述。更為優(yōu)選的GLP-1衍生物為Arg34Lys26-(N-εp28-13-(γ-Glu(N-α-hexadecanoyl)))-GLP-1(7-37)?？杀谎苌膬?yōu)選的GLP-1化合物包括一些GLP-1類似物，這些類似物在以下位置中的一個(gè)或者多個(gè)中具有修飾8、12、16、18、19、20、22、25、27、30、33和37，并且這些類似物表現(xiàn)出同Val8-GLP-1(7-37)相比較提高的效能?？杀谎苌钠渌鼉?yōu)選的GLP-1化合物為Exendin-3或者Exendin-4。這些GLP-1化合物在WO99/07404、WO99/25727、WO99/25728、WO99/43708、WO00/66629以及US2001/0047084A1中有所描述，并且在此引為參考?？捎糜诒景l(fā)明的基礎(chǔ)胰島素的代表性例子在本領(lǐng)域中是已知的并且已經(jīng)商業(yè)化。基礎(chǔ)胰島素的一個(gè)例子為胰島素-NPH。胰島素-NPH通過本領(lǐng)域中所廣泛接受的技術(shù)進(jìn)行制備，并且在美國(guó)專利No.5,547,929以及Hagedorn，H.C.等，(1936)J.Am.Med.Assn.106，177-180中有所描述，并且在此引為參考?；A(chǔ)胰島素的一個(gè)例子為單體胰島素類似物的一種類胰島素-NPH制備物，該制備物被稱之為單體胰島素類似物-NPD，在本領(lǐng)域中更常見被稱為“NPL”。NPL為L(zhǎng)ysB28-ProB29的一種中性魚精蛋白制劑，其中該制劑含有一種胰島素復(fù)合物以及處于水介質(zhì)中的鋅，該復(fù)合物含有同魚精蛋白相復(fù)合的LysB28-ProB29。NPL在美國(guó)專利No.5,461,031、5,650,486和5,747,642中有所描述。用于本發(fā)明的胰島素類似物可通過多種被認(rèn)可的肽合成工藝進(jìn)行制備，這些工藝包括經(jīng)典的溶液法、固相法、半合成法以及重組DNA方法。1996年5月7日公開的Chance等人的美國(guó)專利No.5,514,646披露了多種胰島素類似物的制備，該專利具有充分的細(xì)節(jié)以使本領(lǐng)域的技術(shù)人員可對(duì)本發(fā)明所使用的任何胰島素類似物進(jìn)行制備。AspB28魚精蛋白胰島素晶體為另一種基礎(chǔ)胰島素。根據(jù)Balschmidt的AspB28魚精蛋白胰島素晶體制劑在美國(guó)專利No.5,840,680中有所描述。該制劑含有一些晶體，這些晶體中含有Asp28、魚精蛋白胰島素以及以下成分之一苯酚、間甲酚或者它們的組合，任選地還可進(jìn)一步含有處于水介質(zhì)中的鋅。另外，還可能有一種基礎(chǔ)胰島素制劑，該制劑含有可用于本發(fā)明的不同的胰島素。在WO99/32116中Brader描述了一些共晶體，這些晶體含有衍生化的胰島素、未衍生化的胰島素、鋅、魚精蛋白以及苯酚防腐劑，這些共晶體在糖動(dòng)力學(xué)反應(yīng)特征的持續(xù)時(shí)間和形態(tài)上提供了控制上的彈性?？捎糜诒景l(fā)明的還有多種其它的胰島素制劑。這些制劑包括，胰島素鋅懸浮物(Ultralente(UL)和Semilente胰島素)和魚精蛋白鋅胰島素(PZI)，但不限于這些。這些基礎(chǔ)胰島素的制備物在本領(lǐng)域中為人所熟知并且由Brange在GalenicsofInsulinThePhysico-chemicalandPharmaceuticalAspectofInsulinandInsulinPreparation，Springer-VerlagBerlinHeidelbert(1987)中進(jìn)行了描述?？捎糜诒景l(fā)明的其它的胰島素制劑一般情況下被描述為可溶的酰化基礎(chǔ)胰島素。這些制劑包括了在LysB29的ε氨基基團(tuán)上被脂肪酸酰化的胰島素，但不限于此。這些基礎(chǔ)胰島素的制備物在本領(lǐng)域中為人所熟知并且由Meyers等，(1997)Diabates46，637-642，Markussen等，(1996)Diabetology39，281-288以及Havelund等，WO95/07931進(jìn)行了描述。酰化的胰島素或者胰島素類似物在美國(guó)專利No.6,011,007中被進(jìn)一步描述。這些可溶的基礎(chǔ)胰島素含有一種在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上具有親脂取代基。在一個(gè)實(shí)施方案中，酰化的胰島素類似物可在A鏈第21位具有除Lys、Arg和Cys之外的任何氨基酸，可在B鏈第3位具有除Lys、Arg和Cys之外的任何氨基酸，并且在B鏈第1位的苯丙氨酸可被去除或者保存。B鏈第30位可以為(a)一種具有10到24個(gè)碳原子的非編碼親脂氨基酸，在該情況下最多具有5個(gè)碳原子的某種羧酸的?；鶊F(tuán)可結(jié)合于B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上，(b)除Lys、Arg和Cys之外的任何氨基酸，在該情況下B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上具有一種親脂取代基，或者(c)被去除，該情況下B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上具有一種親脂取代基；同時(shí)為該胰島素的任何一種同Zn++形成的復(fù)合物，倘若在B鏈的第30位為Thr或者Ala、A鏈的第21位和B鏈的第3位均為Asn，并且B鏈的第1位為苯丙氨酸的情況下，則該酰化的胰島素類似物為一種Zn++復(fù)合物。?；囊葝u素類似物的例子在表1中描述。表1.NεB29-三癸?；?B30)人類胰島素，NεB29-四癸?；?B30)人類胰島素，NεB29-癸?；?B30)人類胰島素，NεB29-十二酰基脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lyA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-四癸酰基GlyA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lyA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lyA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lyA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-十二酰基GlyA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸酰基AlaA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸酰基AlaA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21GlnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lnB3脫(B30)人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lyA21人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lyA21人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lyA21人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lyA21GlnB3人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lyA21GlnB3人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21GlnB3人類胰島素，NεB29-十二酰基GlyA21GlnB3人類胰島素，NεB29-三癸酰基AlaA21人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21人類胰島素，NεB29-三癸?；鵄laA21GlnB3人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21GlnB3人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21GlnB3人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21GlnB3人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lnB3人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lnB3人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lnB3人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lnB3人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊luB30人類胰島素，NεB29-四癸酰基GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵊luB30人類胰島素，NεB29-十二酰基GluB30人類胰島素，NεB29-三癸酰基GlyA21GluB30人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lyA21GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21GluB30人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lyA21GluB30人類胰島素，NεB29-三癸?；鵊lyA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-四癸?；鵊lyA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lyA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lyA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-三癸酰基AlaA21GluB30人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21GluB30人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21GluB30人類胰島素，NεB29-三癸?；鵄laA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-四癸?；鵄laA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵄laA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-十二?；鵄laA21GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-三癸酰基GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-四癸酰基GlnB3GluB30人類胰島素，NεB29-癸?；鵊lnB3GluB30人類胰島素，NεB29-十二?；鵊lnB3GluB30人類胰島素，可用于本發(fā)明的其它胰島素制劑一般被描述為可溶的pI移動(dòng)的胰島素類似物。pI移動(dòng)的類似物在美國(guó)專利No.5,656,722中有所描述。這些類似物具有的pI介于約5到約8.5之間，這是由于對(duì)氨基酸序列的堿性修飾所導(dǎo)致的。它們?cè)谶m當(dāng)制劑的弱酸pH值下可穩(wěn)定較長(zhǎng)時(shí)間。人類胰島素的pI移動(dòng)的類似物在B鏈的C-末端具有堿性修飾、在A鏈的第21位有一個(gè)精氨酸替換，并且在適當(dāng)?shù)那闆r下，在B鏈的第10位有一個(gè)組氨酸替換。優(yōu)選的情況下，該pI移動(dòng)的胰島素類似物在A鏈的第21位上為Gly并且在B鏈的第31位上為Arg-Arg-OH。pI移動(dòng)的胰島素類似物在表2中描述。表2AspA21-人類胰島素-ArgB31-OHGluA21-人類胰島素-ArgB31-OHGlyA21-人類胰島素-ArgB31-OHSerA21-人類胰島素-ArgB31-OHThrA21-人類胰島素-ArgB31-OHAlaA21-人類胰島素-ArgB31-OHAspA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHGluA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHGlyA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHSerA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHThrA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHAlaA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHAspA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHGluA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHGlyA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHSerA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHThrA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHAlaA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-OHAspA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHGluA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHGlyA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHSerA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHThrA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OHAlaA21-AsnB10-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OH可用于本發(fā)明的其它可溶pI移動(dòng)基礎(chǔ)胰島素類似物在Markussen等，(1988)2157中描述。Markussen等人所描述的一種優(yōu)選的類似物為GlyA21ArgB27ThrB30-NH2。這種類似物通常稱為NovoSolBasal。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為Arg，并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Arg-B29Lys-Nε-Arg)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為Arg，在A鏈的第21位以任何一種氨基酸替換了Asn并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Arg-A21Xaa-B29Lys-Nε-Arg)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為Arg，在B鏈的第0位為Arg，并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為Arg，在A鏈的第21位以任何一種氨基酸替換了Asn，在B鏈的第0位為Arg，并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Arg-A21Xaa-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為L(zhǎng)ys，該Lys的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg，并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Lys-Nε-Arg-B29Lys-Nε-Arg)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，該pI移動(dòng)的胰島素類似物為人類胰島素，該胰島素在A鏈的第0位為L(zhǎng)ys，該Lys的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg，在A鏈的第21位以任何一種氨基酸替換了Asn，并且在B鏈的第29位賴氨酸的ε-氨基基團(tuán)上連著Arg(A0Lys-Nε-Arg-A21Xaa-B29Lys-Nε-Arg)。其它的pI移動(dòng)的基礎(chǔ)胰島素類似物在Beal等人的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)中描述，該申請(qǐng)名稱為InsulinMoleculeHavingProtractedTimeAction，于2002年8月2日在美國(guó)專利商標(biāo)局提交。這些pI移動(dòng)的基礎(chǔ)胰島素類似物的例子在表3中描述。表3A0ArgB0Arg-胰島素；A0ArgB0ArgA21Xaa-胰島素；A0ArgB0ArgA21Gly-胰島素；A0ArgB0ArgA21ser-胰島素；A0LysB0Lys-胰島素；A0LysB0LysA21Xaa-胰島素；A0LysB0LysA21Gly-胰島素；A0LysB0LysA21ser-胰島素；A0ArgB0Lys-胰島素；A0ArgB0LysA21Xaa-胰島素；A0ArgB0LysA21Gly-胰島素；A0ArgB0LysA21ser-胰島素；A0LysB0Arg-胰島素；A0LysB0ArgA21Xaa-胰島素；A0LysB0ArgA21Gly-胰島素；A0LysB0ArgA21ser-胰島素；A0ArgB0ArgB28Lys-Nε-ArgB29Pro-胰島素；A0ArgA21XaaB28Lys-Nε-ArgB29Pro-胰島素；A0ArgA21GlyB28Lys-Nε-ArgB29Pro-胰島素；A0ArgA21GlyB28Lys-Nε-ArgB29Pro-胰島素；A0ArgB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0LysA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0LysA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0LysA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0LysA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0LysA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0LysA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1LysA0LysA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1LysA0LysA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1LysA0LysA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1LysA0LysA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1LysA0LysA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1LysA0LysA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0ArgA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0ArgA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0ArgA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A-1ArgA0ArgA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0ArgA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A-1ArgA0ArgA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-ArgA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21XaaB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21GlyB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21SerB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21XaaB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21GlyB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0Lys-Nε-LysA21SerB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgB0ArgB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21XaaB0ArgB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21GlyB0ArgB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgA21SerB0ArgB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0ArgB0ArgB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21XaaB0ArgB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21GlyB0ArgB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0ArgA21SerB0ArgB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0LysB0LysB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0LysA21XaaB0LysB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0LysA21GlyB0LysB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0LysA21SerB0LysB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0LysB0LysB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0LysA21XaaB0LysB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0LysA21GlyB0LysB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0LysA21SerB0LysB29Lys-Nε-Lys-胰島素；A0gHRB0gHRB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0gHRA21XaaB0gHRB29Lys-Nε-Arg-胰島素；A0gHRA21GlyB0gHRB29Lys-Nε-Arg-胰島素；以及A0gHRA21SerB0gHRB29Lys-Nε-Arg-胰島素；GLP-1化合物和胰島素均可在C-末端具有酸或者酰胺。天然的GLP-1為一種酰胺，因此在優(yōu)選的情況下本發(fā)明的GLP-1化合物也為一種酰胺。但是，天然的人類胰島素為一種酸，因此在優(yōu)選的情況下本發(fā)明的胰島素也是酸。本發(fā)明進(jìn)一步提供了一種制備預(yù)混合的制劑的方法，該制劑的制備通過將GLP-1化合物同基礎(chǔ)胰島素進(jìn)行混合而進(jìn)行。基礎(chǔ)胰島素可作為一種固體加入至含有GLP-1化合物的溶液之中，或者固體GLP-1化合物可被溶解于一種含有基礎(chǔ)胰島素的懸浮物或者溶液之中。在替代的情況下基礎(chǔ)胰島素和GLP-1化合物可以以任何順序加入至某種緩沖液中。在一個(gè)實(shí)施方案中，GLP-1化合物以及基礎(chǔ)胰島素的儲(chǔ)存液被分別制備而成并且根據(jù)所需的比例加至一起。在優(yōu)選的情況下，用GLP-1儲(chǔ)存溶液對(duì)100單位/ml的基礎(chǔ)胰島素懸浮物或者溶液進(jìn)行稀釋，從而使最終的預(yù)混合制劑具有介于30單位/ml到70單位/ml的基礎(chǔ)胰島素。在另一個(gè)實(shí)施方案中，固體GLP-1化合物被溶解于一種含有基礎(chǔ)胰島素的懸浮物或者溶液之中。在優(yōu)選的情況下，該固體GLP-1被溶解于100單位/ml的基礎(chǔ)胰島素懸浮物或者溶液中，從而在混合物制劑中維持100單位/ml的基礎(chǔ)胰島素濃度。在優(yōu)選的情況下，該預(yù)混合制劑被緩沖處理并且含有一種防腐劑和等滲劑。該GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素的混合方式必須保護(hù)它們的生物活性和時(shí)間效能。例如，含有NPH或者NPL的預(yù)混合制劑可通過將一種GLP-1化合物溶解于NPH或者NPL稀釋液中而進(jìn)行制備。可對(duì)賦形劑和該稀釋液的pH進(jìn)行調(diào)整從而將該GLP-1維持在溶液中。但是，緩沖液的pH或者濃度或者其它的賦形劑在GLP-1加入至NPH或者NPL之時(shí)不應(yīng)使該胰島素的其中部分或者全部溶解。由此，在優(yōu)選的情況下，含有NPH或者NPL的預(yù)混合制劑的最終pH應(yīng)介于約7到約8，優(yōu)選的情況下介于7.2到7.8。不同體積的GLP-1化合物溶液可隨后被加入至NPH或者NPL，由此而獲得GLP-1化合物同胰島素的所需比例。以下的實(shí)施例僅僅為了進(jìn)一步闡明本發(fā)明的預(yù)混合制劑的制備而提供。本發(fā)明的范圍不應(yīng)被解釋為僅僅由以下的實(shí)施例組成。實(shí)施例1促胰島素活性的測(cè)定在Ficoll梯度(于Hank’s平衡鹽溶液中，27％，23％，20.5％和11％，pH7.4)上對(duì)胰腺組織的膠原酶消化物進(jìn)行分離。在20.5％/11％的介面上收集胰島，洗滌并且在立體顯微鏡下手工除去外分泌物和其它組織。將這些胰島在RPMI1640培養(yǎng)基中于37℃和95％空氣/5％CO2下保溫過夜，該培養(yǎng)基中補(bǔ)充以10％胎牛血清并且含有11mM葡萄糖。在補(bǔ)充以10％胎牛血清并且含有16.7mM葡萄糖的RPMI1640培養(yǎng)基中制備用于研究的GLP-1化合物，其濃度在優(yōu)選的情況下介于3納摩到30納摩。通過微量移液器將約8到10個(gè)被分離的胰島轉(zhuǎn)移至96孔微滴度板中的總體積為250μl的含GLP-1化合物的培養(yǎng)基內(nèi)。隨后在存在GLP-1化合物的情況下，于37℃、95％空氣和5％CO2中將這些胰島保溫90分鐘。隨后收集等份的無胰島培養(yǎng)基并且對(duì)其100μl分析存在的胰島素的量，該分析通過放射性免疫分析使用EquateInsulinRIA試劑盒進(jìn)行(Binax，Inc.，Portland，ME)。實(shí)施例2Val8-GLP-1溶液的制備制備了幾種Val8-GLP-1溶液以在防腐劑系統(tǒng)存在的情況下測(cè)定維持Val8-GLP-1溶解度的條件，該防腐劑系統(tǒng)用于典型的基礎(chǔ)胰島素制劑。這些樣品通過反相HPLC層析進(jìn)行分析以測(cè)定總蛋白濃度以及可溶蛋白質(zhì)濃度。表4對(duì)來自于各種Val8-GLP-1溶液的數(shù)據(jù)進(jìn)行了概述。表4實(shí)施例3胰島素復(fù)合物根據(jù)Krayenbühl和RosenbergCrystallineProtamineInsulin60-73，(1951)所提供的為人所接受的實(shí)踐而制備了人類胰島素-NPH?；蛘?，EliLillyandCompany，Indianapolis，IN所制造的名為Humulin-NTM的懸浮制劑可被購(gòu)買作為人類胰島素-NPH。在這些實(shí)驗(yàn)中用作為儲(chǔ)存供應(yīng)物的NPH的單位劑量和濃度為3.5mg/ml下U100。使用HCl或者NaOH將NPH的商業(yè)化藥瓶pH調(diào)整至7.2-8.5。這些樣品通過反相HPLC層析進(jìn)行分析以測(cè)定可溶蛋白質(zhì)濃度。表5對(duì)來自于各種NPH懸浮液的數(shù)據(jù)進(jìn)行了概述。表5實(shí)施例4Val8-GLP-1/NPH混合物通過將160mg的Val8-GLP-1溶解于50mL水中而制備Val8-GLP-1溶液，此時(shí)保持pH范圍為10到10.5。加入等份的Val8-GLP-1并且檢測(cè)pH并用堿進(jìn)行調(diào)節(jié)。在Val8-GLP-1溶解之后，使用HCl將該pH調(diào)節(jié)至8。隨后將該溶液稀釋成為缺磷酸鹽緩沖液的100mL2×NPH稀釋液(3.2mg/mL間甲酚、1.30mg/mL苯酚以及32mg/mL甘油，pH7.4)，Val8-GLP-1終濃度為1.6mg/mL。使用HCl或者NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.8。將該Val8-GLP-1溶液同商業(yè)化的胰島素-NPH懸浮液(U100，3.5mg/mL)以Val8-GLP-1∶NPH為30∶70、50∶50和70∶30的比例(體積∶體積)進(jìn)行混合。該Val8-GLP-1∶NPH混合物含有最終濃度為1.6mg/mL的間甲酚、0.65mg/mL的苯酚，并且對(duì)于30∶70、50∶50和70∶30的比例分別含有10mM、7mM和4mM的磷酸鹽緩沖液，并且含有16mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.8。這些樣品通過反相HPLC層析進(jìn)行分析以測(cè)定總蛋白濃度以及可溶蛋白質(zhì)濃度。表4對(duì)來自于各種Val8-GLP-1/NPH混合物的數(shù)據(jù)進(jìn)行了概述。表6Val8-GLP-1的低可溶蛋白濃度意味著Val8-GLP-1同NPH相互作用。但是，盡管該GLP-1同NPH晶體進(jìn)行附著，Val8-GLP-1的促胰島素活性未受影響。見圖4。實(shí)施例5Exendin-4/NPH混合物通過將20mg的Exendin-4溶解于5mL水中而制備了Exendin-4的溶液。使用HCl或者NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.4或者7.6。隨后將該溶液稀釋成為缺磷酸鹽緩沖液的10mL2×NPH稀釋液(3.2mg/mL間甲酚、1.30mg/mL苯酚以及32mg/mL甘油，pH7.4)，Exendin-4終濃度為2.0mg/mL。使用HCl或者NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.8。將該Exendin-4溶液同商業(yè)化的胰島素-NPH懸浮液(U100，3.5mg/mL)以Exendin-4∶NPH為30∶70、50∶50和70∶30的比例(體積∶體積)進(jìn)行混合。該Exendin-4∶NPH混合物含有最終濃度為1.6mg/mL的間甲酚、0.65mg/mL的苯酚，并且對(duì)于30∶70、50∶50和70∶30的比例分別含有10mM、7mM和4mM的磷酸鹽緩沖液，并且含有16mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將pH調(diào)節(jié)至7.8。這些樣品通過反相HPLC層析進(jìn)行分析以測(cè)定總蛋白濃度以及可溶蛋白質(zhì)濃度。表7對(duì)來自于各種Exendin-4/NPH混合物的數(shù)據(jù)進(jìn)行了概述。表7實(shí)施例6Exendin-4/Lantus混合物通過將10mg的Exendin-4溶解于5mL水中而制備了Exendin-4的溶液。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4。隨后使用5mL2×稀釋液(5.4mg/mL間甲酚、2.5mg/mL乙酸鈉以及32mg/mL甘露醇)稀釋該溶液，Exendin-4終濃度為1.0mg/mL。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4。將該Exendin-4溶液同商業(yè)化的Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)以Exendin-4∶Lantus為30∶70、50∶50和70∶30的比例(體積∶體積)進(jìn)行混合。Exendin-4∶Lantus的30∶70混合物含有終濃度0.3mg/mL的Exendin-4、70IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、0.75mg/mL的乙酸鈉、9.6mg/mL的甘露醇、21μg/ml的鋅以及11.9mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。Exendin-4∶Lantus的50∶50混合物含有終濃度0.5mg/mL的Exendin-4、50IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、1.25mg/mL的乙酸鈉、16mg/mL的甘露醇、15μg/ml的鋅以及8.5mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。Exendin-4∶Lantus的70∶30混合物含有終濃度0.7mg/mL的Exendin-4、30IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、1.75mg/mL的乙酸鈉、22.4mg/mL的甘露醇、9μg/ml的鋅以及5.1mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。實(shí)施例7Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH/Lantus混合物通過將10mg的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH溶解于5mL水中而制備了Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH的溶液。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4。隨后使用5mL2×稀釋液(5.4mg/mL間甲酚、2.5mg/mL乙酸鈉以及32mg/mL甘露醇)稀釋該溶液，Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH終濃度為0.5mg/mL。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4。將該Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH溶液同商業(yè)化的Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)以Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH∶Lantus為30∶70、50∶50和70∶30的比例(體積∶體積)進(jìn)行混合。Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH∶Lantus的30∶70混合物含有終濃度0.15mg/mL的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH、70IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、0.75mg/mL的乙酸鈉、9.6mg/mL的甘露醇、21μg/ml的鋅以及11.9mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH∶Lantus的50∶50混合物含有終濃度0.25mg/mL的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH、50IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、1.25mg/mL的乙酸鈉、16mg/mL的甘露醇、15μg/ml的鋅以及8.5mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH∶Lantus的70∶30混合物含有終濃度0.35mg/mL的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH、30IU的Lantus、2.7mg/mL的間甲酚、1.75mg/mL的乙酸鈉、22.4mg/mL的甘露醇、9μg/ml的鋅以及5.1mg/mL的甘油。使用HCl或者NaOH將最終pH調(diào)節(jié)至4。實(shí)施例8GLP聚集分析可就GLP肽在溶液中的能力進(jìn)行分析。溶液中的肽通常在合適的緩沖液中在略有提高的溫度下進(jìn)行攪拌，同時(shí)記錄在350nm下的濁度作為時(shí)間的函數(shù)。對(duì)直至聚集開始的時(shí)間進(jìn)行了測(cè)量以對(duì)給定的GLP分子在這些條件之下聚集的能力進(jìn)行定量。GLP-1化合物首先在堿性條件(pH10.5)下溶解30分鐘以將任何聚集的物質(zhì)溶解。隨后將該溶液調(diào)節(jié)至pH7.4并且進(jìn)行過濾。具體來說，將4mg的凍干GLP-1化合物溶解于3ml的10mM磷酸鹽/10mM檸檬酸鹽之中。將該pH調(diào)節(jié)至10.0-10.5并且保持30分鐘。使用HCl將該溶液調(diào)節(jié)至pH7.4并且通過適當(dāng)?shù)臑V器進(jìn)行過濾，如MillexGV針頭濾器(MillporeCorporation，Bedford，MA)。將該溶液稀釋成為最終樣品，該樣品在10mM的檸檬酸鹽、10mM磷酸鹽、150mMNaCl之中含有0.3mg/mL蛋白質(zhì)，并且被調(diào)節(jié)至pH7.4到7.5。在石英比色皿中保溫該樣品于37℃下。每5分鐘測(cè)量350nm下該溶液的濁度，該測(cè)量在AVIVModel14DSUV-VIS分光光度計(jì)(Lakewood，NJ)下進(jìn)行。使測(cè)量之前30秒內(nèi)以及測(cè)量過程中使用磁力攪拌棒攪拌該溶液，該磁力攪拌棒來自于StarnaCells，Inc.(Atascadero，CA)。350nm下OD值的提高顯示了該GLP-肽的聚集。到聚集發(fā)生的時(shí)間通過對(duì)生長(zhǎng)前期和生長(zhǎng)期進(jìn)行的線性擬合的截距進(jìn)行估計(jì)，該擬合根據(jù)Drake的方法進(jìn)行(ArvinteT，CuddA，andDrakeAF.(1993)J.Bio.Chem.268，6415-6422)。在實(shí)驗(yàn)之間使用苛性皂溶液(例如，Contrad-70)清洗比色皿。多種GLP-1化合物所對(duì)應(yīng)的結(jié)果在表8中以化合物聚集所需的小時(shí)時(shí)間進(jìn)行報(bào)道?？梢园l(fā)現(xiàn)，這些化合物相對(duì)其它GLP-1化合物表現(xiàn)出顯著提高的聚集時(shí)間。實(shí)施例9GLP-1受體激活使用體外分析對(duì)本發(fā)明的GLP-1化合物激活GLP-1受體的能力進(jìn)行了估測(cè)，該體外分析的例子如Gelfand等人的EP619,322以及美國(guó)專利No.5,120,712。這些參考文獻(xiàn)的全部?jī)?nèi)容被引為參考。體外效能是一種肽在基于細(xì)胞的分析中激活GLP-1受體的能力的測(cè)量值。體外效能以“EC50”進(jìn)行表達(dá)，該值是化合物在單藥劑反應(yīng)實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生50％活性的有效濃度。出于本發(fā)明的目的，體外效能通過使用一種熒光分析進(jìn)行測(cè)定，該熒光分析使用穩(wěn)定表達(dá)人類GLP-1受體的HEK-293AuroraCRE-BLAM細(xì)胞。這些HEK-293細(xì)胞被穩(wěn)定地整合入了一種DNA載體，該DNA載體具有受到cAmp反應(yīng)元件(CRE)驅(qū)動(dòng)的β-內(nèi)酰胺酶(BLAM)基因表達(dá)。GLP-1激動(dòng)劑同該受體的相互作用起始了一種信號(hào)，該信號(hào)導(dǎo)致了該cAmp反應(yīng)元件的激活以及β-內(nèi)酰胺酶的隨后表達(dá)?？蓪ⅵ?內(nèi)酰胺酶CCF2/AM底物加入暴露于特定量的GLP-1激動(dòng)劑的細(xì)胞以提供GLP-1激動(dòng)劑效能的測(cè)量，該底物在被β-內(nèi)酰胺酶切割后發(fā)射熒光(AuroraBiosciencesCorp.)。該分析在Zlokarnik等，(1998)Science27984-88中有進(jìn)一步的描述(亦見于實(shí)施例1)。使用上述的BLAM分析，利用從0.00003納摩到30納摩的稀釋度而產(chǎn)生劑量反應(yīng)曲線，從而對(duì)該EC50值進(jìn)行測(cè)定。通過以GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH作為參照并且將該參照設(shè)定為1而產(chǎn)生了相對(duì)體外效能值。這些多肽相對(duì)于GLP-1(7-37)OH或者Val8-GLP-1(7-37)OH的活性在表8和9中進(jìn)行報(bào)道。表8GLP-1多肽GIP-1受體激活(相對(duì)于GLP-1(7-37)OH)GLP-1(7-37)OH1.0Val8-GLP-1(7-37)OH0.47Gly8-His11-GLP-1(7-37)OH0.282Val8-Ala11-GLP-1(7-37)OH0.021Val8-Lys11-GLP-1(7-37)OH0.001Val8-Tyr12-GLP-1(7-37)OH0.81Val8-Glu16-GLP-1(7-37)OH0.047Val8-Ala16-GLP-1(7-37)OH0.112Val8-Tyr16-GLP-1(7-37)OH1.175Val-Lys20-GLP-1(7-37)OH0.33Gln22-GLP-1(7-37)OH0.42Val8-Ala22-GLP-1(7-37)OH0.56Val8-Ser22-GLP-1(7-37)OH0.50Val8-Asp22-GLP-1(7-37)OH0.40Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH1.29Val8-Lys22-GLP-1(7-37)OH0.58Val8-Pro22-GLP-1(7-37)OH0.01Val8-His22-GLP-1(7-37)OH0.14Val8-Lys22-GLP-1(7-36)NH20.53Val8-Glu22-GLP-1(7-36)NH21.0Gly8-Glu22-GLP-1(7-37)OH1.07Val8-Lys23-GLP-1(7-37)OH0.18Val8-His24-GLP-1(7-37)OH0.007Val8-Lys24-GLP-1(7-37)OH0.02Val8-His26-GLP-1(7-37)OH1.6Val8-Glu26-GLP-1(7-37)OH1.5Val8-His27-GLP-1(7-37)OH0.37Val8-Ala27-GLP-1(7-37)OH0.47Gly8-Glu30-GLP-1(7-37)OH0.29Val8-Glu30-GLP-1(7-37)OH0.29Val8-Asp30-GLP-1(7-37)OH0.15Val8-Ser30-GLP-1(7-37)OH0.19Val8-His30-GLP-1(7-37)OH0.19Val8-Glu33-GLP-1(7-37)OH0.039Val8-Ala33-GLP-1(7-37)OH0.1Val8-Gly33-GLP-1(7-37)OH0.01Val8-Glu34-GLP-1(7-37)OH0.17Val8-Pro35-GLP-1(7-37)OH0.094Val8-His35-GLP-1(7-37)OH0.41Val8-Glu35-GLP-1(7-37)OH0.15Val8-Glu36-GLP-1(7-37)OH0.11Val8-His36-GLP-1(7-37)OH0.22Val8-His37-GLP-1(7-37)OH0.33Val8-Leu16-Glu26-GLP-1(7-37)OH0.23Val8-Lys22-Glu30-GLP-1(7-37)OH0.37Val8-Lys22-Glu23-GLP-1(7-37)OH0.35Val8-Glu22-Ala27-GLP-1(7-37)OH1.02Val8-Glu22-Lys23-GLP-1(7-37)OH1.43Val8-Lys33-Val34-GLP-1(7-37)OH0.08Val8-Lys33-Asn34-GLP-1(7-37)OH0.09Val8-Gly34-Lys35-GLP-1(7-37)OH0.34Val8-Gly36-Pro37-GLP-1(7-37)NH20.53表9實(shí)施例10狗體研究體內(nèi)比較樣品1根據(jù)實(shí)施例4的描述制備了30∶70的Val8-GLP-1∶NPH混合物。該混合物含有終濃度為0.48mg/ml的Val8-GLP-1、2.45mg/ml的胰島素-NPH、1.6mg/mL的間甲酚、0.65mg/mL的苯酚、10mM磷酸鹽緩沖液以及16mg/ml的甘油。該pH經(jīng)調(diào)節(jié)為終pH7.8。樣品2通過以1×NPH稀釋液溶解U100商業(yè)化胰島素-NPH而制備了U70的商業(yè)化的胰島素-NPH懸浮液。該U70的商業(yè)化的胰島素-NPH懸浮液含有終濃度為2.45mg/ml的胰島素-NPH、1.6mg/mL的間甲酚、0.65mg/mL的苯酚、10mM磷酸鹽緩沖液以及16mg/ml的甘油。該pH經(jīng)調(diào)節(jié)為終pH7.4。樣品3根據(jù)實(shí)施例4的描述制備了Val8-GLP-1的溶液，但是沒有進(jìn)行同商業(yè)化的胰島素-NPH懸浮液的混合，取而代之的是使用1×NPH稀釋液以30∶70(體積∶體積)的Val8-GLP-1∶稀釋液的比例對(duì)該Val8-GLP-1溶液進(jìn)行了稀釋。該30％的Val8-GLP-1溶液含有終濃度為0.48mg/ml的Val8-GLP-1、1.6mg/mL的間甲酚、0.65mg/mL的苯酚、10mM磷酸鹽緩沖液以及16mg/ml的甘油。該pH經(jīng)調(diào)節(jié)為終pH7.8。在狗體內(nèi)比較上述樣品而進(jìn)行了一種三方面(threearm)初步研究。在該初步研究的第一個(gè)方面中，在四只不同的狗的頸部上的單一位點(diǎn)上以0.74U/kgNPH(1.5nmol/kgVal8-GLP-1)的劑量使用樣品1進(jìn)行注射。對(duì)一個(gè)3小時(shí)的高血糖注入(150mg/dl)進(jìn)行起始并且對(duì)葡萄糖輸注速度進(jìn)行連續(xù)記錄。定期收取血樣以進(jìn)行血糖、胰島素、C-肽以及免疫反應(yīng)性GLP-1濃度的測(cè)定。在研究當(dāng)天測(cè)定血糖濃度。隨后將剩余樣品凍存(-80℃)并且在稍后的時(shí)間對(duì)激素濃度進(jìn)行定量分析。在該初步研究的第二個(gè)方面中，在同樣四只的狗的頸部上的一個(gè)位點(diǎn)上以0.74U/kgNPH的劑量使用樣品2進(jìn)行注射。與此同時(shí)，在同樣四只的狗的頸部上的第二個(gè)位點(diǎn)上以1.5nmol/kgVal8-GLP-1的劑量使用樣品3進(jìn)行注射。同樣，對(duì)一個(gè)3小時(shí)的高血糖注入(150mg/dl)進(jìn)行起始并且對(duì)葡萄糖輸注速度進(jìn)行連續(xù)記錄。定期收取血樣以進(jìn)行血糖、胰島素、C-肽以及免疫反應(yīng)性GLP-1濃度的測(cè)定。在研究當(dāng)天測(cè)定血糖濃度。隨后將剩余樣品凍存(-80℃)并且在稍后的時(shí)間對(duì)激素濃度進(jìn)行定量分析。在該初步研究的第三個(gè)方面中，在同樣四只的狗的頸部上的一個(gè)位點(diǎn)上以0.74U/kgNPH的劑量?jī)H僅使用樣品2進(jìn)行注射。同樣，對(duì)一個(gè)3小時(shí)的高血糖注入(150mg/dl)進(jìn)行起始并且對(duì)葡萄糖輸注速度進(jìn)行連續(xù)記錄。定期收取血樣以進(jìn)行血糖、胰島素、C-肽以及免疫原性GLP-1濃度的測(cè)定。在研究當(dāng)天測(cè)定血糖濃度。隨后將剩余樣品凍存(-80℃)并且在稍后的時(shí)間對(duì)激素濃度進(jìn)行定量分析。在圖1-4中出示的狗體內(nèi)研究的結(jié)果顯示，當(dāng)Val8-GLP-1被注射時(shí)，糖動(dòng)力學(xué)活性上相對(duì)于僅僅注射胰島素-NPH的情況具有明顯的提高(見圖1)。出人意料的是，對(duì)于該研究的第一方面，糖動(dòng)力學(xué)活性的提高同該研究的第二方面相比更為強(qiáng)勁和一致(見圖1和2)。但是，第一方面的C-肽和免疫反應(yīng)性GLP-1濃度同第二方面相去不遠(yuǎn)(分別見圖3和4)。同樣還觀察到Val8-GLP-1在研究的第一方面中的吸收同Val8-GLP-1在研究的第二方面中的吸收相比有所延長(zhǎng)(見圖4)。實(shí)施例11Exendin-4/Lantus混合物在100μL的商業(yè)化Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)中溶解Exendin-4(160μg)。用手輕輕振蕩混合物直至固體溶解并且獲得澄清的溶液。在5℃下保存該溶液。18小時(shí)后該溶液亦然澄清未見沉淀。pH為4.0。經(jīng)反相HPLC測(cè)定的Exendin-4和Lantus終濃度為0.9mg/mLExendin-4以及3.5mg/mLLantus。根據(jù)Lantus商業(yè)化制劑中的已知賦形劑濃度，混合物中的賦形劑最終濃度如下2.7mg/mL間甲酚、30μg/ml鋅以及17mg/ml甘油。實(shí)施例12Exendin-4/Lantus混合物在100μL的商業(yè)化Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)中溶解Exendin-4(290μg)。用手輕輕振蕩該混合物直至固體溶解并且獲得澄清的溶液。使用NaOH調(diào)節(jié)pH為4.0。經(jīng)反相HPLC測(cè)定的Exendin-4和Lantus終濃度為1.6mg/mLExendin-4以及3.5mg/mLLantus。根據(jù)Lantus商業(yè)化制劑中的已知賦形劑濃度，混合物中的賦形劑最終濃度如下2.7mg/mL間甲酚、30μg/ml鋅以及17mg/ml甘油。實(shí)施例13Exendin-4/Lantus混合物在500μL的商業(yè)化Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)中溶解Exendin-4(529μg)。用手輕輕振蕩該混合物直至固體溶解并且獲得澄清的溶液。使用NaOH調(diào)節(jié)pH為4.0。經(jīng)反相HPLC測(cè)定的Exendin-4和Lantus終濃度為1mg/mLExendin-4以及3.5mg/mLLantus。根據(jù)Lantus商業(yè)化制劑中的已知賦形劑濃度，混合物中的賦形劑最終濃度如下2.7mg/mL間甲酚、30μg/ml鋅以及17mg/ml甘油。實(shí)施例14Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH/Lantus混合物通過將2.1mg的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH溶解于1ml的0.01NNaOH中而制備了Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH的儲(chǔ)存溶液。使用NaOH將pH調(diào)節(jié)至11.3從而獲得澄清的溶液。隨后使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4.0并且保持澄清。將Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH(300μL儲(chǔ)存液)加入至700μL商業(yè)化的Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)中。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至3.3從而獲得澄清的溶液，并且使用NaOH調(diào)節(jié)至4.2，該溶液保持澄清。經(jīng)反相HPLC測(cè)定的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH和Lantus終濃度為0.5mg/mLVal8-Glu22-GLP-1(7-37)OH以及2.4mg/mLLantus。根據(jù)Lantus商業(yè)化制劑中的已知賦形劑濃度，該混合物中的賦形劑最終濃度如下1.9mg/mL間甲酚、21μg/ml鋅以及11.9mg/ml甘油。實(shí)施例15Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH/Lantus混合物通過將2.0g的合成甘油、0.3g的間甲酚以及120μL的25mg/mL氧化鋅溶液溶解于100mL無菌水中而獲得儲(chǔ)存液A。該溶液使用MilliporeSterivex-GV0.22μm濾器進(jìn)行過濾。通過將4.8mg的Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH溶解于1.5ml的儲(chǔ)存液A中而制備了Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH的儲(chǔ)存溶液。使用NaOH將pH調(diào)節(jié)至11。隨后使用HCl將pH調(diào)節(jié)至4.0并且保持澄清。將Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH(300μL儲(chǔ)存液)加入至700μL商業(yè)化的Lantus胰島素(U100，3.6378mg/mL)中。使用HCl將pH調(diào)節(jié)至2.7從而獲得澄清的溶液，并且隨后使用NaOH調(diào)節(jié)至3.5。Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH和Lantus終濃度據(jù)計(jì)算為0.96mg/mLVal8-Glu22-GLP-1(7-37)OH以及2.5mg/mLLantus。根據(jù)Lantus商業(yè)化制劑中的已知賦形劑濃度，該混合物中的賦形劑最終濃度如下1.9mg/mL間甲酚、21μg/ml鋅以及11.9mg/ml甘油。實(shí)施例16Exendin-4/A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg混合物過將2.0g的合成甘油、0.3g的間-甲酚以及120μL的25mg/mL氧化鋅溶液溶解于100mL無菌水中而獲得儲(chǔ)存液A。該溶液使用MilliporeSterivex-GV0.22μm濾器進(jìn)行過濾。將A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg(人類胰島素，在A鏈第0位為Arg，在A鏈第21位為Gly，在B鏈第0位為Arg并且在B鏈第29位的Lys的ε氨基基團(tuán)之上連有Arg)(384μg)溶解于100μL儲(chǔ)存溶液A。使用NaOH將pH調(diào)節(jié)至4.0。將Exendin-4(197μg)溶解于A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg溶液。使用NaOH將該溶液的pH調(diào)節(jié)至4.1。經(jīng)反相HPLC測(cè)定的Exendin-4和A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg終濃度為1.1mg/mLExendin-4以及2.4mg/mLA0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg。實(shí)施例17Exendin-4/A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg混合物過將2.0g的合成甘油、0.3g的間-甲酚以及120μL的25mg/mL氧化鋅溶液溶解于100mL無菌水中而獲得儲(chǔ)存液A。該溶液使用MilliporeSterivex-GV0.22μm濾器進(jìn)行過濾。將A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg(人類胰島素，在A鏈第0位為Arg，在A鏈第21位為Gly，在B鏈第0位為Arg并且在B鏈第29位的Lys的ε氨基基團(tuán)之上連有Arg)(1.84mg)溶解于500μL儲(chǔ)存溶液A。使用NaOH將pH調(diào)節(jié)至4.1。將Exendin-4(568μg)溶解于A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg溶液。使用NaOH將該溶液的pH調(diào)節(jié)至4.2。終濃度經(jīng)計(jì)算為1.1mg/mLExendin-4以及3.68mg/mLA0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg。序列表<110>依萊利利公司<120>GLP-1和基礎(chǔ)胰島素的預(yù)混合物<130>X-14314<150>60/315460<151>2001-08-28<150>60/385266<151>2002-05-31<150>60/386061<151>2002-06-04<160>6<170>PatentInVersion3.1<210>1<211>31<212>PRT<213>人<220><221>MISC_特征<222>(31)..(31)<223>第31位的Xaa是Gly或-NH2<400>1HisAlaGluGlyThrPheThrSerAspValSerSerTyrLeuGluGly151015GlnAlaAlaLysGluPheIleAlaTrpLeuValLysGlyArgXaa202530<210>2<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成構(gòu)建體<220><221>MISC_特征<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Ser或Gly；<220><221>MISC_特征<222>(39)..(39)<223>第39位的Ser是Ser或Ser-NH2；<220><221>MISC_特征<222>(3)..(3)<223>第3位的Xaa是Asp或Glu；<400>2HisXaaXaaGlyThrPheThrSerAspLeuSerLysGlnMetGluGlu151015GluAlaValArgLeuPheIleGluTrpLeuLysAsnGlyGlyProSer202530SerGlyAlaProProProSer35<210>3<211>39<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成構(gòu)建體<220><221>MISC_特征<222>(1)..(1)<223>第1位的Xaa是L-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、beta-羥基-組氨酸、高組氨酸、alpha-氟甲基-組氨酸或alpha-甲基-組氨酸；<220><221>MISC_特征<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Ala、Gly、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(3)..(3)<223>第3位的Xaa是Glu、Asp、Lys、Thr、Ser、Arg、Trp、Phe、Tyr或His；<220><221>MISC_特征<222>(5)..(5)<223>第5位的Xaa是Thr、Ala、Gly、Ser、Leu、Ile、Val、Glu、Asp、Arg、His或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(6)..(6)<223>第6位的Xaa是His、Trp、Phe或Tyr；<220><221>MISC_特征<222>(8)..(8)<223>第8位的Xaa是Ser、Ala、Gly、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(10)..(10)<223>第10位的Xaa是Val、Ala、Gly、Ser、Thr、Leu、Ile、Tyr、Glu、Asp、Trp、His、Phe或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(11)..(11)<223>第11位的Xaa是Ser、Ala、Gly、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(12)..(12)<223>第12位的Xaa是Ser、Ala、Gly、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp、His、Pro、Arg或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(13)..(13)<223>第13位的Xaa是Tyr、Phe、Trp、Glu、Asp、Gly、Gln、Asn、Arg、Cys或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(14)..(14)<223>第14位的Xaa是Leu、Ala、Gly、Ser、Thr、Ile、Val、Glu、Asp、Met或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(15)..(15)<223>第15位的Xaa是Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(16)..(16)<223>第16位的Xaa是Gly、Ala、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(17)..(17)<223>第17位的Xaa是Gln、Asn、Arg、Glu、Asp、His或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(18)..(18)<223>第18位的Xaa是Ala、Gly、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Arg、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(19)..(19)<223>第19位的Xaa是Ala、Gly、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(20)..(20)<223>第20位的Xaa是Lys、Arg、Gln、Glu、Asp、Trp、Tyr、Phe或His；<220><221>MISC_特征<222>(21)..(21)<223>第21位的Xaa是Glu、Asp、Ala、His、Phe、Tyr、Trp、Arg、Leu或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(24)..(24)<223>第24位的Xaa是Ala、Gly、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp、His或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(25)..(25)<223>第25位的Xaa是Trp、Phe、Tyr、Glu、Asp、Ser、Thr、Arg或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(26)..(26)<223>第26位的Xaa是Leu、Gly、Ala、Ser、Thr、Ile、Val、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(27)..(27)<223>第27位的Xaa是Val、Gly、Ala、Ser、Thr、Leu、Ile、Glu、Asp、Arg或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(28)..(28)<223>第28位的Xaa是Lys、Arg、Glu、Asp、Asn或His；<220><221>MISC_特征<222>(29)..(29)<223>第29位的Xaa是Gly、Ala、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp、Arg、Trp、Tyr、Phe、Pro、His或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(30)..(30)<223>第30位的Xaa是Arg、Lys、Glu、Asp、Thr、Ser、Trp、Tyr、Phe、Gly或His；<220><221>MISC_特征<222>(31)..(31)<223>第31位的Xaa是Gly、Ala、Ser、Thr、Leu、Ile、Val、Glu、Asp、His、Lys、Arg、Trp、Tyr、Phe、Pro、Pro-NH2或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(32)..(32)<223>第32位的Xaa是Arg、Lys、Glu、Asp、Ser或His或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(33)..(33)<223>第33位的Xaa是Arg、Lys、Glu、Asp、Ser或His或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(34)..(34)<223>第34位的Xaa是Asp、Glu、Gly或Lys或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(35)..(35)<223>第35位的Xaa是Phe、Trp、Tyr、Glu、Asp、Ala或Lys或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(36)..(36)<223>第36位的Xaa是Ser、Pro、Lys、Glu或Asp或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(37)..(37)<223>第37位的Xaa是Ser、Glu、Asp、Pro或Lys或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(38)..(38)<223>第38位的Xaa是Gly、Glu、Asp、Pro或Lys或被去除；<220><221>MISC_特征<222>(39)..(39)<223>第39位的Xaa是Ala、Val、Glu、Asp、Ser、Lys、Ala-NH2、Val-NH2、Glu-NH2、Asp-NH2、Ser-NH2、Lys-NH2或被去除、或C-1-6酯、或酰胺、或C-1-6烷基酰胺、或C-1-6二烷基酰胺；<400>3XaaXaaXaaGlyXaaXaaThrXaaAspXaaXaaXaaXaaXaaXaaXaa151015XaaXaaXaaXaaXaaPheIleXaaXaaXaaXaaXaaXaaXaaXaaXaa202530XaaXaaXaaXaaXaaXaaXaa35<210>4<211>31<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成構(gòu)建體<220><221>MISC_特征<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser或Thr；<220><221>MISC_特征<222>(16)..(16)<223>第16位的Xaa是Asp、Glu、Gln、Asn、Lys、Arg、Cys或磺基丙氨酸；<220><221>MISC_特征<222>(17)..(17)<223>第17位的Xaa是His、Asp、Lys、Glu或Gln；<220><221>MISC_特征<222>(21)..(21)<223>第21位的Xaa是Ala、Glu、His、Phe、Tyr、Trp、Arg或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(24)..(24)<223>第24位的Xaa是Glu、Asp、Ser或His；<220><221>MISC_特征<222>(31)..(31)<223>第31位的R是Lys、Arg、Thr、Ser、Glu、Asp、Trp、Tyr、Phe、His、-NH2；<400>4HisXaaGluGlyThrPheThrSerAspValSerSerTyrLeuGluXaa151015XaaAlaAlaLysXaaPheIleXaaTrpLeuValLysGlyArgArg202530<210>5<211>31<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成構(gòu)建體<220><221>MISC_特征<222>(1)..(1)<223>第1位的Xaa是L-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、beta-羥基-組氨酸、高組氨酸、alpha-氟甲基-組氨酸或alpha-甲基-組氨酸；<220><221>MISC_特征<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Ala、Gly、Val、Leu、Ile、Ser或Thr；<220><221>MISC_特征<222>(6)..(6)<223>第6位的Xaa是Phe、Trp或Tyr；<220><221>MISC_特征<222>(10)..(10)<223>第10位的Xaa是Val、Trp、Ile、Leu、Phe或Tyr；<220><221>MISC_特征<222>(12)..(12)<223>第12位的Xaa是Ser、Trp、Tyr、Phe、Lys、Ile、Leu或Val；<220><221>MISC_特征<222>(13)..(13)<223>第13位的Xaa是Tyr、Trp或Phe；<220><221>MISC_特征<222>(14)..(14.)<223>第14位的Xaa是Leu、Phe、Tyr或Trp；<220><221>MISC_特征<222>(16)..(16)<223>第16位的Xaa是Gly、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(19)..(19)<223>第19位的Xaa是Ala、Val、Ile或Leu；<220><221>MISC_特征<222>(21)..(21)<223>第21位的Xaa是Glu、Ile或Ala；<220><221>MISC_特征<222>(24)..(24)<223>第24位的Xaa是Ala或Glu；<220><221>MISC_特征<222>(27)..(27)<223>第27位的Xaa是Val或Ile；<220><221>MISC_特征<222>(31)..(31)<223>第31位的Xaa是Gly、His、NH2或不存在<400>5XaaXaaGluGlyThrXaaThrSerAspXaaSerXaaXaaXaaGluXaa151015GlnAlaXaaLysXaaPheIleXaaTrpLeuXaaLysGlyArgXaa202530<210>6<211>31<212>PRT<213>人工序列<220><223>合成構(gòu)建體<220><221>MISC_特征<222>(1)..(1)<223>第1位的Xaa是L-組氨酸、D-組氨酸、脫氨基-組氨酸、2-氨基-組氨酸、beta-羥基-組氨酸、高組氨酸、alpha-氟甲基-組氨酸或alpha-甲基-組氨酸；<220><221>MISC_特征<222>(2)..(2)<223>第2位的Xaa是Gly、Ala、Val、Leu、Ile、Ser或Thr；<220><221>MISC_特征<222>(10)..(10)<223>第10位的Xaa是Val、Phe、Tyr或Trp；<220><221>MISC_特征<222>(12)..(12)<223>第12位的Xaa是Ser、Tyr、Trp、Phe、Lys、Ile、Leu或Val；<220><221>MISC_特征<222>(16)..(16)<223>第16位的Xaa是Gly、Glu、Asp或Lys；<220><221>MISC_特征<222>(19)..(19)<223>第19位的Xaa是Ala、Val、Ile或Leu；<220><221>MISC_特征<222>(27)..(27)<223>第27位的Xaa是Val或Ile；<220><221>MISC_特征<222>(31)..(31)<223>第31位的Xaa是Gly、NH2或不存在<400>6XaaXaaGluGlyThrPheThrSerAspXaaSerXaaTyrLeuGluXaa151015GlnAlaXaaLysGluPheIleAlaTrpLeuXaaLysGlyArgXaa202530權(quán)利要求1.一種預(yù)混合制劑，該制劑含有GLP-1化合物和基礎(chǔ)胰島素。2.權(quán)利要求1的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物選自SEQIDNO1、SEQIDNO2、SEQIDNO3、SEQIDNO4、SEQIDNO5和SEQIDNO6的GLP-1化合物。3.權(quán)利要求2的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物具有SEQIDNO2的氨基酸序列。4.權(quán)利要求1的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物選自表8或者表9的GLP-1化合物。5.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑，其中基礎(chǔ)胰島素選自NPH、NPL、PZI、Ultralente以及Semilente。6.權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑，其中基礎(chǔ)胰島素為?；幕A(chǔ)胰島素或者pI移動(dòng)的基礎(chǔ)胰島素。7.權(quán)利要求6的預(yù)混合制劑，其中基礎(chǔ)胰島素選自表1、表2或者表3的基礎(chǔ)胰島素。8.權(quán)利要求7的預(yù)混合制劑，其中基礎(chǔ)胰島素為GlyA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OH。9.權(quán)利要求6的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物選自SEQIDNO2和SEQIDNO3的GLP-1化合物，并且基礎(chǔ)胰島素選自表2或者表3的基礎(chǔ)胰島素。10.權(quán)利要求9的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物具有SEQIDNO2的氨基酸序列，并且基礎(chǔ)胰島素為GlyA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OH。11.權(quán)利要求5的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物具有SEQIDNO2的氨基酸序列，并且基礎(chǔ)胰島素為NPH。12.權(quán)利要求5的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物為Val8-GLP-1(7-37)OH，并且基礎(chǔ)胰島素為NPH。13.權(quán)利要求1的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物為Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH，并且基礎(chǔ)胰島素為GlyA21-人類胰島素-ArgB31-ArgB32-OH。14.權(quán)利要求1的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物為Val8-Glu22-GLP-1(7-37)OH，并且基礎(chǔ)胰島素為A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg。15.權(quán)利要求1的預(yù)混合制劑，其中GLP-1化合物具有SEQIDNO2的氨基酸序列，并且基礎(chǔ)胰島素為A0Arg-B0Arg-B29Lys-Nε-Arg。16.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑，該制劑進(jìn)一步含有等滲劑。17.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑，該制劑進(jìn)一步含有防腐劑。18.一種制備權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑的方法，該方法包括以下步驟將GLP-1化合物同基礎(chǔ)胰島素在水介質(zhì)中進(jìn)行混合。19.一種施用權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑的方法，該方法包括對(duì)有需要的患者施用有效量的制劑。20.一種治療病癥的方法，所述病癥選自非胰島素依賴型糖尿病、胰島素依賴型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥、功能性消化不良、腸易激綜合征、術(shù)后分解代謝改變、心肌梗塞以及中風(fēng)，所述方法包括對(duì)有需要的患者施用有效量的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的預(yù)混合制劑。21.權(quán)利要求20的方法，其中病癥為非胰島素依賴型糖尿病。22.權(quán)利要求20的方法，其中病癥為胰島素依賴型糖尿病。23.權(quán)利要求20的方法，其中病癥為肥胖癥。24.對(duì)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述應(yīng)用是用于制備治療哺乳動(dòng)物的病癥的藥物，所述病癥選自非胰島素依賴型糖尿病、胰島素依賴型糖尿病、高血糖癥、肥胖癥、人體重治療性降低、功能性消化不良、腸易激綜合征、術(shù)后分解代謝改變、心肌梗塞以及中風(fēng)。25.權(quán)利要求24中的應(yīng)用，其中藥物的制備是為了用于非胰島素依賴型糖尿病的治療。26.權(quán)利要求24中的應(yīng)用，其中藥物的制備是為了用于胰島素依賴型糖尿病的治療。27.權(quán)利要求24中的應(yīng)用，其中藥物的制備是為了用于人體重治療性降低。28.任一個(gè)實(shí)施例中所描述的預(yù)混合制劑。全文摘要本發(fā)明涉及預(yù)混合制劑，該制劑含有GLP－1多肽以及基礎(chǔ)胰島素。文檔編號(hào)A61K38/26GK1635900SQ02817117公開日2005年7月6日申請(qǐng)日期2002年8月23日優(yōu)先權(quán)日2001年8月28日發(fā)明者M(jìn)·R·德菲利皮斯,R·D·迪馬基,K·吳申請(qǐng)人:伊萊利利公司