專利名稱：Crf受體拮抗劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及三環(huán)衍生物、其制備方法、含有該化合物的藥物組合物以及其在治療疾病中應(yīng)用。
第一個(gè)促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子(CRF)是從羊下丘腦分離得到并證實(shí)它是一種41個(gè)氨基酸的肽(Vale等，《科學(xué)》(Science)，2131394-397，1981)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，CRF能引起內(nèi)分泌、神經(jīng)和免疫系統(tǒng)功能產(chǎn)生顯著變化。據(jù)信CRF是促腎上腺皮質(zhì)激素(″ACTH″)、β-內(nèi)啡肽及其他阿片促黑細(xì)胞-促腎上腺皮質(zhì)激素原(″POMC″)衍生的肽從垂體前葉的基礎(chǔ)釋放和應(yīng)激-釋放的主要生理調(diào)節(jié)劑(Vale等人，《科學(xué)》(Science)，2131394-397，1981)。
除了刺激ATCH和POMC產(chǎn)生的作用外，CRF似乎是重要的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的神經(jīng)遞質(zhì)之一并在綜合身體對(duì)應(yīng)激的全面反應(yīng)中起著重要作用。
直接向大腦給藥CRF可以引起與在暴露于應(yīng)激環(huán)境的動(dòng)物中所觀察到的相同的行為、生理和內(nèi)分泌反應(yīng)。
因此，臨床資料表明CRF受體拮抗體可能代表新的抗抑郁的和/或抗焦慮的藥物，可用于治療顯示出CRF分泌過多的神經(jīng)精神疾病。
最早的CRF受體拮抗劑是肽(參見，例如Rivier等，美國(guó)專利4,605,642；Rivier等，《科學(xué)》(Science)，224889，1984)。盡管這些肽證實(shí)了CRF受體拮抗劑能夠減弱CRF的藥理學(xué)應(yīng)答，但是CRF肽受體拮抗劑存在著肽療法的常見缺點(diǎn)，包括缺乏穩(wěn)定性和口服活性有限。最近報(bào)道了小分子CRF受體拮抗劑。
WO 00/27846公開了通式(A)結(jié)構(gòu)的CRF受體拮抗劑 其條件是A，B和C中至少一個(gè)為氮原子，A，B和C不都是氮原子且A-B或B-C為雙鍵，A，B和C可以為氮原子或碳原子。
由于CRF的生理學(xué)重要性，開發(fā)具有顯著的CRF受體結(jié)合活性并且可以拮抗CRF受體的生物活性的小分子仍然是向往的目標(biāo)。這些CRF受體拮抗體將可以用于治療內(nèi)分泌、精神病學(xué)和神經(jīng)病學(xué)的病癥或疾病，包括一般的與應(yīng)激相關(guān)的疾病。
雖然通過給藥CRF受體拮抗劑來調(diào)節(jié)CRF已取得很大進(jìn)展，但本領(lǐng)域中仍需要有效的小分子CRF受體拮抗劑。還需要含有所述CRF受體拮抗劑的藥物組合物以及使用該拮抗劑例如治療與應(yīng)激相關(guān)的病癥的方法。本發(fā)明滿足了這些需要，并且具有其它相關(guān)優(yōu)點(diǎn)。
特別地，本發(fā)明涉及新的化合物，它是對(duì)促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子(CRF)受體具有特異性和有效性的拮抗劑。
本發(fā)明提供了通式(I)化合物，包括其立體異構(gòu)體、前藥以及藥學(xué)上可接受的鹽或者溶劑合物 其中R為芳基或者雜芳基，其中每個(gè)上述R基團(tuán)可被1-4個(gè)獨(dú)立地選自如下基團(tuán)取代鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6單或者雙二烷基氨基，硝基，氰基以及基團(tuán)R4；R1為氫，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷基，鹵代C1-C6烷氧基，氨基，鹵代氰基；R2為氫或者C(H)n(R5)q(CH2)pZR6；R3為氫，C2-C6烯基，C2-C6炔基或者[CH(R5)(CH2)p]mZR6；R4為C3-C7環(huán)烷基，其可含有1個(gè)或者多個(gè)雙鍵；芳基；或者5-6員雜環(huán)基；其中，每一上述基團(tuán)R4可以被一個(gè)或者多個(gè)選自如下基團(tuán)取代鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6單或者雙烷基氨基，硝基，以及氰基；
R5為氫，C2-C6烯基，C2-C6炔基或者(CH2)pZR6；R6I為C1-C6烷基，其可被一個(gè)或者多個(gè)選自如下基團(tuán)取代鹵素，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基，C1-C6單或者雙烷基氨基，硝基，氰基以及R4基團(tuán)；Y和X獨(dú)立地選自碳或者氮；m和n獨(dú)立地選自0或者1；p是0或者選自1到4的整數(shù)；q是1或者2；Z是鍵，O，NH或者S。
本發(fā)明中的游離堿氨基化合物的酸加成鹽可通過現(xiàn)有技術(shù)中的眾所周知方法制備，并可從有機(jī)酸或無機(jī)酸形成。適宜的有機(jī)酸包括馬來酸，蘋果酸，富馬酸，苯甲酸，抗壞血酸，琥珀酸，甲磺酸，對(duì)甲苯磺酸，乙酸，草酸，丙酸，酒石酸，水楊酸，檸檬酸，葡糖酸，乳酸，扁桃酸，肉桂酸，天冬氨酸，硬脂酸，棕櫚酸，乙醇酸，谷氨酸，以及苯磺酸。適宜的無機(jī)酸包括鹽酸，氫溴酸，硫酸，磷酸，以及硝酸。因此，式(I)化合物的“藥學(xué)上可接受的鹽”將包括任何和所有可接受的鹽的形式。
溶劑合物可以是，例如，水合物。
下文所述內(nèi)容涉及本發(fā)明化合物包括具有通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物，以及其藥學(xué)上可接受的鹽，以及其藥學(xué)上可接受的溶劑合物。
此外，前藥也包含在本發(fā)明的內(nèi)容中。前藥是指在被給藥病患者后在其體內(nèi)釋放通式I化合物的任何以共價(jià)鍵合的載體。前藥通常是通過裂解修飾，或者常規(guī)處理，或者在體內(nèi)的方式對(duì)其功能基團(tuán)進(jìn)行修飾來制備的。前藥包括，例如，本發(fā)明的化合物，其中羥基、氨基、巰基與任何基團(tuán)鍵合，并且在其被給藥病人后，該基團(tuán)被裂解，形成羥基、氨基、巰基。因此，前藥的代表性化合物包括(但不局限于)化合物(I)中羥基，巰基和氨基官能團(tuán)的乙酸酯，甲酸酯和苯甲酸酯衍生物。更進(jìn)一步，在其為羧酸(-COOH)時(shí)，可使用其酯的形式，例如甲酯，乙酯等。
關(guān)于其立體異構(gòu)體，具有通式(I)結(jié)構(gòu)的化合物可能含有手性中心，并可能存在其內(nèi)消旋體、外消旋體以及獨(dú)立的對(duì)映異構(gòu)體或者非對(duì)映異構(gòu)體。所有這些異構(gòu)體形式及其混合物都包括在本發(fā)明所述的內(nèi)容中。此外，化合物(I)的一些結(jié)晶形式可能以多晶型物存在，包含在本發(fā)明中。
在本發(fā)明中使用的術(shù)語C1-C6烷基作為基團(tuán)或者其中一部分是指含有1到6個(gè)碳原子的直鏈或者支鏈烷基；例如上述基團(tuán)包括甲基，乙基，丙基，異丙基，正丁基，異丁基，叔丁基，戊基或者己基。
術(shù)語C3-C7環(huán)烷基是指含有3至7個(gè)碳原子的非芳香單環(huán)烴環(huán)，例如，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基或者環(huán)庚基；并且不飽和環(huán)烷基包括環(huán)戊烯基和環(huán)己烯基等。
術(shù)語鹵素是指氟原子，氯原子，溴原子或者碘原子。
術(shù)語鹵代C1-C6烷基是指具有一個(gè)或者兩個(gè)碳原子且其中至少一個(gè)氫原子被鹵原子取代的烷基，例如三氟甲基等。
術(shù)語C2-C6烯基定義為含有一個(gè)或者多個(gè)雙鍵以及2到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基，例如，乙烯基，2-丙烯基，3-丁烯基，2-丁烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，3-甲基-2-丁烯基或者3-己烯基等。
術(shù)語C1-C6烷氧基可能包括直鏈或者支鏈烷氧基，例如甲氧基，乙氧基，丙氧基，丙-2-氧基，丁氧基，丁-2-氧基或者甲基丙-2-氧基等。
術(shù)語鹵代C1-C6烷氧基是被至少被一個(gè)鹵素，優(yōu)選氟原子取代的C1-C6烷氧基，例如OCHF2，或者OCF3。
術(shù)語C2-C6炔基定義為含有一個(gè)或者多個(gè)三鍵以及2到6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基，包括乙炔基，丙炔基，1-丁炔基，1-戊炔基，3-甲基-1-丁炔基等。
術(shù)語C1-C6單或雙烷基氨基代表獨(dú)立地被一個(gè)或兩個(gè)如前所定C1-C6烷基取代的氨基。
術(shù)語芳基是指芳香碳環(huán)基團(tuán)，例如苯基、聯(lián)苯基或者萘基。
術(shù)語雜芳基是指5-10員芳香雜環(huán)，且其中至少一個(gè)雜原子選自氮，氧和硫，并且含有至少一個(gè)碳原子，包括單環(huán)或者多環(huán)體系。
代表性雜芳基包括(但不限于)呋喃基，苯并呋喃基，噻吩基，苯并噻吩基，吡咯基，吲哚基，異吲哚，氮雜吲哚基，吡啶基，喹啉基，異喹啉基，噁唑基，異噁唑基，苯并噁唑基，吡唑基，咪唑基，苯并咪唑基，噻唑基，苯并噻唑基，異噻唑基，噠嗪基，嘧啶基，吡嗪基，三嗪基，1，2-二氮雜萘基，2，3-二氮雜萘基和喹唑啉基。
術(shù)語雜環(huán)基是指5-7員單環(huán)或者7-10員多環(huán)雜環(huán)基，可以是飽和的，不飽和的或者芳香性的，并且含有1-4個(gè)獨(dú)立地選自氮、氧和硫的雜原子，并且其中的氮和硫的雜原子可任選地被氧化，并且氮原子可被任選地季銨鹽化，包括與苯環(huán)稠合的二環(huán)或者三環(huán)(或者更多)雜環(huán)。雜環(huán)也可通過任何雜原子和碳原子相連。雜環(huán)還包括如上所定義的雜芳基。因此，除了前面所述的雜芳基外，雜環(huán)還包括(但不限于)嗎啉基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，乙內(nèi)酰脲基，戊內(nèi)酰胺基，環(huán)氧乙烷基，環(huán)氧丁烷基，四氫呋喃基，四氫吡喃基，四氫吡啶基，四氫嘧啶基，四氫噻吩基，四氫噻喃基，四氫嘧啶基，四氫噻吩基，四氫噻喃基等。
根據(jù)上述定義，術(shù)語5-6員雜環(huán)是指，含有1-4個(gè)獨(dú)立地選自N，O，S雜原子，且其中N和S雜原子可任選地被氧化，N雜原子可任選地被季銨鹽化的，飽和、或不飽和或芳香性的5-6員單雜環(huán)。雜環(huán)可通過雜原子與碳原子相連。因此，該術(shù)語包括(但不限于)嗎啉基，吡啶基，吡嗪基，吡唑基，三唑基，咪唑基，噁二唑基，噁唑基，吡咯烷酮基，吡咯烷基，哌啶基，乙內(nèi)酰脲基，戊內(nèi)酰胺基，環(huán)氧乙烷基，環(huán)氧丁烷基，四氫呋喃基，四氫吡喃基，四氫吡啶基，四氫嘧啶基，四氫噻吩基，四氫噻喃基，四氫嘧啶基，四氫噻吩基，四氫噻喃基等。
本發(fā)明具有代表性的化合物包括具有如下通式結(jié)構(gòu)(II)和(III)的化合物 其中，X各自對(duì)應(yīng)以各碳原子或者氫原子。
因此，當(dāng)X為碳原子時(shí)，本發(fā)明代表性化合物包括具有如下通式(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)的化合物 基于X的不同選擇，本發(fā)明具有代表性的化合物還包括具有通式(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)結(jié)構(gòu)的化合物
基于X和Y的不同選擇，本發(fā)明具有代表性的化合物包括，但不限于，具有通式(I-1)，(I-2)，(I-3)和(I-4)結(jié)構(gòu)的化合物。
本發(fā)明更具體的實(shí)施方案包括，但不限于，具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)結(jié)構(gòu)的化合物其中·R2和R3不同時(shí)為氫本發(fā)明還更具體的實(shí)施方案包括，但不限于，具有通式(I)，(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)結(jié)構(gòu)的化合物其中·R1是C1-C3烷基或鹵代C1-C3烷基，優(yōu)選甲基或三氟甲基。
本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方案包括，但不限于，具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)結(jié)構(gòu)的化合物其中·R2和R3不同時(shí)為氫，且，·R1是C1-C3烷基或者鹵代C1-C3烷基，優(yōu)選甲基或者三氟甲基；本發(fā)明更優(yōu)選的實(shí)施方案包括，但不限于具有通式(I)；(II)，(III)，(IIa)，(IIb)，(IIc)，(IId)；(Ia-1)，(Ib-1)，(Ic-1)；(I-1)，(I-2)，(I-3)，(I-4)結(jié)構(gòu)的化合物其中
·R2和R3不同時(shí)為氫；·R1是C1-C3烷基或者鹵代C1-C3烷基，優(yōu)選甲基或者三氟甲基；·R是選自2，4-二氯苯基，2-氯-4-甲基苯基，2-氯-4-三氟甲基，2-氯-4-甲氧基苯基，2，4，5-三甲基苯基，2，4-二甲基-苯基，2-甲基-4-甲氧基苯基，2-甲基-4-氯苯基，2-甲基-4-三氟甲基苯基，2，4-二甲氧基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-氯苯基，3-甲氧基-4-氯苯基，2，5-二甲氧基-4-氯苯基，2-甲氧基-4-異丙基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-異丙基苯基2-甲氧基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-氯苯基，2，4-二-三氟甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲氧基苯基，2-溴-4-異丙基苯基，4-甲基-6-二甲基氨基吡啶-3-基，4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基，6-二甲基氨基-吡啶-3-基以及4-二甲基氨基-吡啶-3-基的芳基。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-1)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-2)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-3)；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-4)；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a(S)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a-(R)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-5)；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊；9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體2)，(2-1-1)；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-1)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-2)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-3)；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-4)；1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-5)；7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-[4-(1，1，2-三氟-乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-6)；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-3二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-7)；4-丁基-5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-8)；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙氧基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-9)；4，5-二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-10)；5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，6，8-三氮雜苊(4-1-1)。
可通過下文所述的一般方法來制備化合物(I)，及其鹽和溶劑合物。在下面的說明書中，除非另有不同說明，基團(tuán)R，R1，R2，R3，R4，R5，R6，X，Y，Z，m，n，p和q與前面化合物(I)具有相同定義。
當(dāng)R3不為氫且m為1時(shí)，化合物(I)相當(dāng)于化合物(IV)，其中G對(duì)應(yīng)前述R3的定義且其不為氫，并可通過由化合物(V)反應(yīng)制備。
其中R7是C1-C4鏈狀或者支鏈的烷基并且m為1，相當(dāng)于化合物(VI)?；衔?VI)可與有機(jī)金屬化合物GM任選地在路易斯酸如三氟化硼醚合物存在下反應(yīng)，形成化合物(IV)， 其中M是金屬。該反應(yīng)中適宜的金屬包括鋰，銅和錳。
當(dāng)R3為氫時(shí)，化合物(I)相當(dāng)于通式(Ia)化合物，它可以通過在有機(jī)酸(如三氟乙酸)存在下通過還原化合物(V)來制備，化合物(V)中R7是氫，相當(dāng)于化合物(Va)。本反應(yīng)常用的還原試劑是三烷基硅烷(如三乙基硅烷)。該反應(yīng)優(yōu)選在非質(zhì)子溶劑如二氯甲烷中進(jìn)行。
當(dāng)R3為氫時(shí)，化合物(IIb)相當(dāng)于化合物(II)，它可通過如下一般圖解所示的方法由化合物(VII)來制備 其中L是離去基，選自鹵素優(yōu)選氯和磺酸(例如甲磺酸，三氟甲磺酸)的活性殘基，以及La代表能夠使OLa成為良好的離去基的合適的活性基團(tuán)(例如甲磺酸(mesylate)，三氟甲磺酸(triflate))。
在加熱條件下，使用過量R2NH2(IX)，優(yōu)選其作為溶劑進(jìn)行反應(yīng)。
可通過將化合物(VIII)中的烯丙基氧化為相應(yīng)的醛化合物，接著進(jìn)行原地環(huán)化并將其中的羥基轉(zhuǎn)化成烷氧基來制備化合物(VI)，該反應(yīng)將在后面的內(nèi)容中詳細(xì)描述。
該氧化反應(yīng)可以在N-甲基嗎啉氧化物(NMO)存在的條件下使用四氧化鋨進(jìn)行，然后使用過氧化鈉處理。反應(yīng)通常在水溶混的有機(jī)的溶劑，如丙酮、四氫呋喃中，并任選地在水存在的條件下進(jìn)行。
可以通過羥基與C1-C4醇在適宜的無機(jī)酸，如鹽酸存在的條件下反應(yīng)將羥基轉(zhuǎn)化為C1-C4烷氧基。
可通過通式化合物(X)與有機(jī)胺化合物R2NH2(IX)反應(yīng)制備化合物(VIII)。
另一種可選擇的方法是，化合物(IIa)可以通過化合物(XI)， 并且，當(dāng)m為1時(shí)，它相當(dāng)于化合物(XIa)，
在適宜的還原劑存在下與胺化合物(IX)反應(yīng)，然后原地結(jié)晶來制備。
本反應(yīng)適合的還原劑包括氫化物，如硼烷，或者金屬氫化物配合物，如氫化鋰鋁，硼氫化物，或者有機(jī)金屬配合物，例如甲基硼烷硫化物，9-硼二環(huán)壬烷(9-BBN)，三乙基硅烷，三乙酰氧基硼氫化鈉，氰基硼氫化鈉。
可選擇地，可通過在碘，無機(jī)酸(如硫酸)或有機(jī)酸如甲酸、三氟乙酸、乙酸或者甲磺酸存在條件下由硼氫化鈉反應(yīng)制備硼烷。
該反應(yīng)適宜的溶劑是醇(如乙醇)，醚(如四氫呋喃)，或者鹵代烴(如二氯甲烷)或者酰胺(例如，N，N-二甲基甲酰胺)，反應(yīng)溫度為從室溫到反應(yīng)混合物回流溫度的范圍內(nèi)。
當(dāng)Y為氮，X為碳時(shí)，通式(X)化合物相當(dāng)于化合物(Xa)，它可由化合物(XIIa)來制備， 相當(dāng)于化合物(XII)化合物 其中X為碳，La是能夠使OLa成為良好離去基(例如甲磺酸基)的合適活性基團(tuán)，且Ra對(duì)應(yīng)于氫或者必要時(shí)是一個(gè)適宜的氮保護(hù)基。
化合物(XIIa)可進(jìn)行如下反應(yīng)i)任選地去除氮保護(hù)基Ra；并且ii)在如叔胺，如三乙胺的有機(jī)堿存在下進(jìn)行環(huán)化。
這些反應(yīng)優(yōu)選在非質(zhì)子溶劑，如醚(例如四氫呋喃)，鹵代烴例如二氯甲烷或者胺，如N，N-二甲基甲酰氨中進(jìn)行。
當(dāng)X為碳且n為0時(shí)，化合物(XII)相當(dāng)于化合物(XIIa)，它可通過在化合物(XIII)上引入適宜的活性基團(tuán)La來制備，其中Hal，Ra，n，如前定義。
可通過化合物(XV)，其中Rb是適宜的羥基保護(hù)基，與胺化合物(XIV)反應(yīng)，然后保護(hù)其中的氮基(如果必要)并脫去羥基保護(hù)基，制備化合物(XIII)。
與胺的反應(yīng)可以在適宜的非質(zhì)子溶劑如DMF(二甲基甲酰氨)和強(qiáng)堿(如氫化鈉)存在下進(jìn)行。
可通過使用適宜的還原劑如二異丁基氫化鋁將酯化合物(XVI)還原成相應(yīng)的羥基化合物，然后使用適宜的羥基保護(hù)基保護(hù)其中的羥基來制備化合物(XV)。
可以通過化合物(XVII)與烯丙基鹵化物(如烯丙基碘)反應(yīng)制備化合物(XVI)。該反應(yīng)可以在有機(jī)堿如六甲基二硅氮烷基鋰條件下在低溫和非質(zhì)子溶劑(如四氫呋喃)中進(jìn)行。
當(dāng)n為1且X為碳時(shí)，化合物(XII)相當(dāng)于化合物(XIIb)，它可通過用適宜的還原劑如硼氫化鈉在溶劑如醇溶劑(例如甲醇)中還原化合物(XVIII)來制備。
可通過化合物(XX)與磷內(nèi)鎓鹽(XIX)的Wittig反應(yīng)，其中R8為苯基衍生物，然后使用酸(例如鹽酸)水解制備化合物(XVIII)。反應(yīng)可在非質(zhì)子溶劑如乙氰或醚如四氫呋喃中進(jìn)行。
也可通過氧化化合物(XIII)來制備化合物(XX)。氧化反應(yīng)可以使用已知的通用方法將羥基轉(zhuǎn)化成醛基。因此，例如，可以在Swern反應(yīng)條件下進(jìn)行該反應(yīng)。
當(dāng)Y為碳且X為碳時(shí)，化合物(X)相當(dāng)于化合物(Xb)，它可通過鹵化化合物(XXI)來制備 其中，當(dāng)X和Y都為碳時(shí)，相當(dāng)于化合物(XXIb)化合物。
可以使用現(xiàn)有技術(shù)中的常用方法來進(jìn)行鹵化反應(yīng)。因此，反應(yīng)可以用PO(Hal)3處理進(jìn)行。其中鹵原子優(yōu)選氯原子。
可以通過式(XXIII)的環(huán)己酮，其中R7如前定義，與式(XXII)的乙脒的鹽(鹽酸鹽)反應(yīng)制備化合物(XXIb)。
該反應(yīng)可在堿性C1-C4烷醇鹽(例如甲醇鈉)存在下和諸如甲醇等溶劑中進(jìn)行。
當(dāng)n為1時(shí)，化合物(XXIII)相當(dāng)于化合物(XXIIIa)，它可通過化合物(XXIV)與式(XXV)的硅烷衍生物反應(yīng)來制備，其中R7如前定義。該反應(yīng)在路易斯酸和有機(jī)溶劑中進(jìn)行。
當(dāng)n為0時(shí)，化合物(XXIII)相當(dāng)于化合物(XXIIIb)，它可通過化合物(XXVI)，其中R7如前定義且R7不同時(shí)與R7具有相同含義，與有機(jī)金屬化合物(R9)2M(XXVII)，其中R9為烯丙基且M是金屬，任選在如三氟化硼的醚合物等路易酸存在下反應(yīng)來制備。
該反應(yīng)適宜的金屬包括鋰、銅和錳。
當(dāng)X為氮時(shí)化合物(X)相當(dāng)于化合物(Xc)，它可通過化合物(XXVIII)與烯丙基鹵(例如烯丙基溴)反應(yīng)來制備。該反應(yīng)在低溫條件下在無機(jī)堿如氫化鈉存在下和非質(zhì)子溶劑(例如四氫呋喃或者N，N-二甲基甲酰氨)中進(jìn)行。
當(dāng)n為0和Y為碳時(shí)，化合物(XXVIII)相當(dāng)于化合物(XXVIIIa)，它可通過由化合物(XXIX)反應(yīng)來制備，其中q如前定義， 當(dāng)q為1且Y為碳時(shí)，化合物(XXIXa)相當(dāng)于化合物(XXIX)，可以進(jìn)行如下反應(yīng) i)將其中的羥基轉(zhuǎn)化為適宜的離去基，例如甲磺酸基；ii)在Na2S2O4和無機(jī)堿如碳酸鉀存在下將其中的硝基還原成氨基，和原地環(huán)化。
可通過還原酯化合物(XXX)制備通式化合物(XXIXa)。該反應(yīng)可在非質(zhì)子溶劑(如甲醇或乙醇)中和優(yōu)選在40-100℃加熱使用硼氫化鈉方便地進(jìn)行?；衔?XXX)可以通過由化合物(XXXI)與酯化合物(XXXII)反應(yīng)制備。該反應(yīng)可以在非質(zhì)子溶劑如DMF中和無機(jī)堿(如氫化鈉)存在下進(jìn)行。
當(dāng)n為2且Y為碳時(shí)，化合物(XXIX)相當(dāng)于化合物(XXIXb)，它可通過使用常用的還原劑將化合物(XXXIII)還原制備，將醛轉(zhuǎn)化成醇。因此，該反應(yīng)適宜的還原劑是硼氫化鈉。
可以通過水解化合物(XXXIV)的烯醇醚得到化合物(XXXXIII)。反應(yīng)優(yōu)選在無機(jī)酸例如鹽酸存在下進(jìn)行?？梢酝ㄟ^化合物(XXXV)與內(nèi)鹽(XIX)在適宜的有機(jī)堿如正丁基鋰存在下經(jīng)Wittg反應(yīng)制備化合物(XXXIV)。反應(yīng)在如乙氰的非質(zhì)子溶劑或者如四氫呋喃的醚類溶劑中進(jìn)行。當(dāng)Y對(duì)應(yīng)為碳時(shí)，可使用通用的將醇轉(zhuǎn)化為醛的方法氧化化合物(XXIXa)制備化合物(XXXV)。
當(dāng)R3不為氫時(shí)，化合物(XI)相當(dāng)于化合物(XIb)，它可通過R3為氫的化合物(XI)(相當(dāng)于化合物(XIc))與有機(jī)金屬化合物GMgBr(XXXXVI)反應(yīng)，得到醇化合物(XXXVII)，然后它可按照下面的圖解將其氧化成酮化合物(XIb)。
當(dāng)m為1時(shí)，化合物(XIc)相當(dāng)于化合物(XId)，它可通過氧化化合物(X)來制備。
氧化反應(yīng)可以在臭氧存在下，在低溫，例如-78℃，和在有機(jī)溶劑如二氯甲烷中方便地進(jìn)行。
或者，也可在N-甲基嗎啉氧化物(NMO)存在下使用四氧化鋨進(jìn)行反應(yīng)，隨后用過碘酸鈉處理來進(jìn)行氧化。反應(yīng)可在易溶于水的有機(jī)溶劑，如丙酮和四氫呋喃中有水或無水條件下進(jìn)行。
當(dāng)X和Y為碳，m為0且n為1時(shí)，化合物(XIc)相當(dāng)于化合物(XIe)，它可通過在溶劑如醇中，使用無機(jī)堿如氫氧化鉀處理化合物(XXXVIII)，然后與高錳酸鉀反應(yīng)來制備。該反應(yīng)適合在水中進(jìn)行。
可通過鹵化化合物(XXXIX)來制備化合物(XXXVIII)。鹵化反應(yīng)可按照上述方法進(jìn)行。
也可通過在上述反應(yīng)條件下，由化合物(XL)與乙酰胺(XXII)的鹽(如鹽酸鹽)反應(yīng)制備化合物(XXXIX)?；衔?XL)可通過化合物(XXIV)與硝基甲烷反應(yīng)得到，其中R7如上定義。
當(dāng)X為碳，M為0，n為1且Y為氮時(shí)，化合物(XIc)相當(dāng)于化合物(XIf)，它可通過使用已知的氧化方法將化合物(XLI)氧化來制備，將羥基轉(zhuǎn)化為醛。
化合物(XLI)可由化合物(XLII)經(jīng)下述反應(yīng)得到，其中La是適宜的離去基，如甲磺酰基，Ra和Rb如前定義i)可任選地去除氮保護(hù)基；ii)環(huán)化，以及iii)去除羥基保護(hù)基Rb。
可以按照前面討論過的方法，氧化化合物(XLIII)，然后還原成羥基并將其轉(zhuǎn)化為離去基制備化合物(XLII)。
氧化反應(yīng)可以在臭氧，低溫，例如-78℃，和在溶劑如二氯甲烷中方便地進(jìn)行。還原反應(yīng)使用硼氫化鈉作為還原劑來進(jìn)行。
可以通過化合物(XV)與胺(XIV)反應(yīng)，然后保護(hù)其中的氮基團(tuán)來制備化合物(XLIII)。
可以通過已知方法將化合物(XLI)轉(zhuǎn)化為化合物(VIIa)，其相當(dāng)于X為碳，Y為氮，m和n為1時(shí)的化合物(VII)。
根據(jù)前面的圖解，化合物(VIIa)可以轉(zhuǎn)化為化合物(I-1a)，其相當(dāng)于R3為氫時(shí)的化合物(I-1)。
當(dāng)X和Y為氮，且n為1時(shí)，化合物(Xc)相當(dāng)于化合物(Xc′)，它可在有機(jī)或無機(jī)堿存在下，由化合物(XLIV)與二氯甲烷反應(yīng)得到。反應(yīng)適合在諸如N，N-二甲基甲酰氨或乙氰的非質(zhì)子溶劑中進(jìn)行。
化合物(XLIV)可通過化合物(XLV)用鐵和無機(jī)酸，例如鹽酸處理來制備?；衔?XLV)可以通過化合物(XXXI)與胺化合物(XIV)反應(yīng)來制備。
化合物(XVII)，(XXIV)，(XXVI)和(XXXI)或者是已知化合物，或者可通過那些所述已知化合物的相似方法來制備總之，化合物(I-1a)，可按照下面圖解1的方法來制備。
圖1 其中Hal，R，R1，R7，R2，La，Ra和Rb如前定義，并且優(yōu)選R7為甲基，Hal是氯，Ra是叔丁基羰基，R是t-BuPh2Si衍生物，Ola是甲磺酰基(mesyl)并且步驟a代表在0℃和堿條件下(如LiHMDS)使用烯丙基碘進(jìn)行烯丙基化；其起始物料可通過Wayne GC.等在，J.Prakt.Chem.，(2000)，342(5)，504-7中所述的類似方法來制備；步驟b代表在通常條件下(CH2Cl2，0℃到室溫)，使用適宜的還原劑，如DIBAl-H，還原酯基；步驟c代表對(duì)羥基進(jìn)行保護(hù)，優(yōu)選在DMF中以DMAP為催化劑(0℃至室溫)使用t-BuPh2SiCl；步驟d代表如上所述的與胺RNH2(XIV)的反應(yīng)；步驟e代表使用適宜的保護(hù)基保護(hù)氨基，例如在DMAP存在下使用(BOC)2O進(jìn)行處理；步驟f代表，i)在丙酮/水中使用OsO4進(jìn)行氧化，然后，ii)在THF/水中使用NaIO4處理，以及最后iii)在適宜的溶劑(例如EtOH)中使用NaBH4進(jìn)行還原；步驟g代表脫去氨基保護(hù)基(例如在CH2Cl2中使用CF3CO2H)；步驟h代表分子內(nèi)環(huán)化，例如通過在堿性(如Et3N)條件下的羥基的甲磺?；?；步驟i代表脫去羥基保護(hù)基(如在40℃和DMF中使用Et3N-3HF)；步驟j代表將羥基轉(zhuǎn)化成適宜的離去基(例如甲磺?；?；步驟k代表與胺(IX)進(jìn)行如上所述的反應(yīng)。
作為選擇，合成方法可以按照?qǐng)D樣2所示的下述步驟進(jìn)行改進(jìn)(從已描述的中間體開始)圖解2 其中步驟l代表前面步驟f的最初的兩步反應(yīng)，并且步驟m代表在BF3-Et2O存在下使用Et3SiH處理。
然后按照?qǐng)D解1所示完成合成。
作為另一種選擇，也可按照?qǐng)D解2a所示的下述步驟(從已經(jīng)描述的中間體開始)避免對(duì)氨基進(jìn)行保護(hù)圖2a 其中步驟n對(duì)應(yīng)前面的步驟f)；步驟o對(duì)應(yīng)前面的步驟j)；步驟p代表如上所述與胺RNH2(XIV)進(jìn)行反應(yīng)；然后按照?qǐng)D解1所示完成合成。
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，化合物(I-2)，其中R3為氫時(shí)相當(dāng)于化合物(I-2a)，可以通過如下圖解3的方法來制備圖解3 其中Hal，R，R1，R2，R7，Rb定義如前且優(yōu)選R7為甲基，Hal為氯，Rb是t-BuPh2Si衍生物，OLa甲磺酰基并且步驟a′代表在通常條件下(R7OH，酸催化，回流)進(jìn)行酯化；步驟b′代表使用適宜的烷基化試劑進(jìn)行烷基化(例如在LiHMDS存在下5-碘戊酸甲基酯)；步驟c′代表在堿條件下(例如MeONa，回流甲苯)分子內(nèi)環(huán)化；步驟d′代表苯基硒化，然后使用H2O2氧化隨后消除；步驟e′代表在TiCl4催化條件下使用適宜的硅烷，如烯丙基三甲基硅烷進(jìn)行1，4-羰基加成；
步驟f代表如上所述的與胺(XXII)進(jìn)行反應(yīng)；步驟g′代表羥基的鹵化反應(yīng)(例如使用POCl3回流下處理)；步驟h′代表雙鍵的氧化裂解，如臭氧化；步驟i′代表在NaBH3CN存在下與胺(IX)進(jìn)行還原胺化，隨后進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化；在本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施方案中，R3為氫時(shí)化合物(I-3)相當(dāng)于化合物(I-3a)，可通過如圖解4所示的方法制備圖解4 其中步驟a″代表使用適宜的保護(hù)基對(duì)氨基進(jìn)行保護(hù)，如在DMAP存在下使用(BOC)2O處理；步驟b″對(duì)應(yīng)前面的步驟i)；步驟c″代表在堿條件下(如Et3N)對(duì)羥基進(jìn)行甲磺?；徊襟Ed″代表脫去氨基保護(hù)基，如使用TFA處理，隨后在堿條件如Et3N下進(jìn)行分子內(nèi)環(huán)化；步驟e″對(duì)應(yīng)于前面的步驟h′)或者前面的步驟1)；步驟f″對(duì)應(yīng)于前面的步驟i′)；在另一個(gè)可供選擇方案中，可以按照如圖解5所示的完成合成的最后步驟，且當(dāng)其中R3不為氫時(shí)，化合物(I-3)對(duì)應(yīng)于化合物(I-3b)。
圖解5 其中步驟a對(duì)應(yīng)于前面的步驟k)；步驟b對(duì)應(yīng)于前面的步驟1)；步驟c代表使用Et3SiH，TFA處理進(jìn)行還原；步驟d代表醚基團(tuán)的形成，例如在PTSA存在下使用甲醇處理；步驟e代表與有機(jī)金屬化合物，如R3Cu在BF3.Et2O.存在下反應(yīng)。
可選擇地，當(dāng)不需要保護(hù)氨基時(shí)，可以從已知的中間體按照下面圖解6所示的方法制備化合物(I-3a)圖解6 其中步驟a″″對(duì)應(yīng)于前面的步驟i)；步驟b″″對(duì)應(yīng)于前面的步驟j)，隨后進(jìn)行原地分子間環(huán)化；步驟c″″對(duì)應(yīng)于前面的步驟f)；步驟d″″對(duì)應(yīng)于前面的步驟j)和k).
在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，其中當(dāng)R3為氫時(shí)化合物(1-4)對(duì)應(yīng)化合物(I-4a)，可按照?qǐng)D解7所示的方法制備
圖解7 其中步驟a″代表在通常條件下與硝基甲烷反應(yīng)；步驟b″代表如上所述的與胺(XXII)進(jìn)行反應(yīng)；步驟c″對(duì)應(yīng)于前面的步驟g′)；步驟d″代表醛基的形成，例如在甲醇中使用KOH處理然后使用KMnO4進(jìn)行氧化；步驟e″對(duì)應(yīng)于前面的步驟i′).
適宜的氮保護(hù)基的例子包括烷氧基羰基如叔丁氧基羰基以及芳基磺?；绫交酋；?。
在上述任一反應(yīng)中，可通過常用的除去氮保護(hù)基的方法來除去氮保護(hù)基。(例如在J F W McOmie編著的《有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基》(Protective Groupsin Organic Chemistry)第46-119頁(1973年P(guān)lenum Press出版)所述的保護(hù)基)。因此，當(dāng)Ra是烷氧基羰基時(shí)可使用酸，例如三氟乙酸水解除去該基團(tuán)。
適宜的羥基保護(hù)基的例子包括三烴基甲硅烷基醚例如三甲基甲硅烷基醚或者叔丁基二甲基甲硅烷基醚。
也可使用熟知的標(biāo)準(zhǔn)方法脫去羥基保護(hù)基(例如在J F W McOmie編著的《有機(jī)化學(xué)中的保護(hù)基》(Proteetive Groups Organic Chemistry第46-119頁(1973年P(guān)lenum Press出版)所述的保護(hù)基)。例如Rb為叔丁基二甲基甲硅烷基時(shí)，可使用三乙基氨基三氫氟化物來進(jìn)行處理。
藥學(xué)上可接受的鹽也可通過常用的方法由化合物(I)其他的鹽，包括其他藥學(xué)上可接受的鹽來制備。
通過結(jié)晶或者蒸發(fā)合適的溶劑可以方便地將與溶劑分子結(jié)合的化合物(I)分離出來，并得到相應(yīng)的溶劑合物。
當(dāng)需要得到通式(I)化合物的某一特定的對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，可以通過用例如使用常用方法將通式(I)化合物相應(yīng)的對(duì)映體混合物拆分得到。因此可以使用手性HPLC方法從通式(I)外消旋化合物得到所需的對(duì)映異構(gòu)體。
本發(fā)明還包括同位素標(biāo)記化合物，它們與通式I化合物及下面的化合物是相同的，但實(shí)際上其中的一個(gè)或者多個(gè)原子被與他們?cè)谧匀唤缰写嬖诘木哂胁煌淤|(zhì)量或者質(zhì)量數(shù)的原子所替換。可結(jié)合于本發(fā)明化合物中的同位素包括氫，碳，氮，氧，磷，氟，碘合氯的同位素，如3H，11C，14C，18F，123I和125I。
包含上述同位素和/或其他原子的其他同位素的本發(fā)明的化合物以及所述化合物藥學(xué)上可接受的鹽都被包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)。本發(fā)明中摻入放射性同位素如3H，14C的同位素標(biāo)記化合物在藥物和/或基層組織分布化驗(yàn)中是有用的。特別優(yōu)選氚，3H和碳-14，14C同位素因?yàn)樗鼈円子谥苽浜蜋z測(cè)。11C和8F同位素在PET(正電子發(fā)射X射線層析照相技術(shù))中特別有用，而125I同位素在SPECT(單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)化X射線層析照相技術(shù))中特別有用，所有這些都被用于大腦成像。此外，由于具有更長(zhǎng)的代謝穩(wěn)定性，例如提高體內(nèi)半衰期或降低必需的劑量，更重的同位素替代物，如氘，2H具有一定的治療優(yōu)勢(shì)，因此，在某些環(huán)境下它們優(yōu)選。一般可以通過下面圖解中和/或?qū)嵤├械姆椒ㄊ褂萌菀椎玫降耐凰貥?biāo)記試劑取代非同位素標(biāo)記試劑來制備本發(fā)明的同位素標(biāo)記化合物I及后面的化合物。
本發(fā)明的CRF受體拮抗劑在包括CRF1受體和CRF2受體的CRF受體位點(diǎn)具有活性并且它可用于治療由CRF或CRF受體介導(dǎo)條件下的疾病。
一個(gè)化合物作為CRF受體拮抗劑的效力可以通過各種試驗(yàn)方法進(jìn)行測(cè)定。本發(fā)明適宜的CRF拮抗劑可以抑制CRF與其受體的特異性結(jié)合并拮抗與CRF相關(guān)的活性。通式(I)化合物可以通過一種或多種被一般為此可接受的試驗(yàn)來檢測(cè)其作為CRF拮抗劑的活性，包括(但不限于)DeSouza等(《神經(jīng)科學(xué)雜志》(J.Neuroscience)788，1987)和Battaglia等(《突觸》(Synapse)1572，1987)所公開的方法。
可以使用類似的閃爍近似技術(shù)(SPA)來進(jìn)行CRF-受體結(jié)合測(cè)試。配體連接在用來表達(dá)CRF受體的重組體膜上，CFR受體又連接在涂有麥桿菌凝集素的SPA珠上。在試驗(yàn)部分將公開試驗(yàn)的具體內(nèi)容。
就CRF受體結(jié)合親和性而言，本發(fā)明的CRF受體拮抗劑具有小于10μm的Ki值。在本發(fā)明一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，CRF受體拮抗劑具有小于10μm的Ki值。
在一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案中具有小于1μm的Ki值和一個(gè)更優(yōu)選的實(shí)施方案具有小于0.1μm的Ki值。如下面更具體描述的那樣，本發(fā)明中的代表性的化合物的Ki值都通過實(shí)施例5中所述的方法進(jìn)行了測(cè)定。
具有小于1μm的Ki值的優(yōu)選的化合物是編號(hào)為3-1-3和3-1-10的化合物。
具有小于0.1μm的Ki值的更優(yōu)選的化合物是編號(hào)為1-1-1，1-1-4，1-1-5，1-2-1，3-1-5和3-1-6的化合物。
本發(fā)明的化合物可用來治療與CRF受體相關(guān)的中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病。特別地，它可用于治療和預(yù)防伴隨有或者不伴隨有精神病癥、緊張癥、抑郁癥、非典型病癥或產(chǎn)后發(fā)作癥特征的包括雙極性抑郁、多極性抑郁、單發(fā)性和復(fù)發(fā)性抑郁等主要的抑郁疾病，用于治療焦慮癥和恐慌癥。其他的情緒疾病涵蓋了主要的抑郁疾病，包括伴隨有或者不伴隨有非典型特征的有早期和后期發(fā)作的精神抑郁癥，神經(jīng)壓抑癥、外傷性抑郁癥和社會(huì)恐懼癥、伴隨早期和后期發(fā)作特征并伴隨情緒低落的早老性癡呆(Alzheimer氏癡呆)；由情緒沮喪引起的心血管異常；由酒精、安非他明、可卡因、迷幻劑、鴉片、苯環(huán)己哌啶、鎮(zhèn)靜劑、催眠劑、抗焦慮劑和其他藥劑所引起的精神疾??；抑郁性精神分裂癥；以及抑郁型調(diào)節(jié)紊亂。主要的抑郁病癥還可能引起一般的疾病，包括但不限于，心肌梗塞、糖尿病、流產(chǎn)或早產(chǎn)等。
本發(fā)明的化合物還是一種有用的止痛劑。特別地，它們可用于治療外傷疼痛如術(shù)后疼痛；撕裂性外傷疼痛如鰓狀神經(jīng)叢；慢性疼痛如骨關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、或者psoriatic關(guān)節(jié)炎等；神經(jīng)疼痛如后皰疹神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、部分或脈間神經(jīng)痛、纖維神經(jīng)痛、灼痛、外神經(jīng)痛、糖尿病神經(jīng)疾病、化療引起的神經(jīng)疾病、與艾滋病相關(guān)的神經(jīng)疾病、枕骨神經(jīng)痛、膝狀神經(jīng)痛、舌咽神經(jīng)痛、反射性交叉神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)不良、幻肢疼痛；各種頭痛如偏頭痛、急性或慢性緊張性頭痛、顳下頜疼痛、上頜竇疼痛、集束性頭痛；牙痛；癌痛；源于內(nèi)臟的疼痛；腸胃痛；神經(jīng)誘發(fā)痛；運(yùn)動(dòng)傷痛；痛經(jīng)；月經(jīng)痛；腦膜炎；蛛網(wǎng)膜炎；肌肉骨骼痛；背部輕微疼痛，如脊髓狹窄；圓盤脫落；坐骨神經(jīng)痛；咽痛；脊椎骨愈合；痛風(fēng)；燒傷；結(jié)疤痛；騷癢；以及丘腦痛如中風(fēng)性丘腦痛。
本發(fā)明的化合物還被用于治療進(jìn)食和食欲功能紊亂以及食欲減退、神經(jīng)性食欲缺乏和易餓癥等疾病。
本發(fā)明的化合物還被用于治療睡眠疾病，包括dysomnia，失眠，睡眠窒息，嗜睡和生理節(jié)奏紊亂(circadian ritmic disorders)。
本發(fā)明的化合物也用于治療和預(yù)防認(rèn)知疾病。認(rèn)知疾病包括癡呆癥，健忘癥以及其他沒有特別具體說明的認(rèn)知疾病。
此外，本發(fā)明的化合物還用作那些沒有認(rèn)知和/或記憶缺陷的健康人的認(rèn)知和/或記憶加強(qiáng)劑。
本發(fā)明的化合物還被用于治療對(duì)一些物質(zhì)的依賴性和耐受性。例如，它們可用于對(duì)煙堿，酒精，咖啡因，苯環(huán)己基哌啶(苯環(huán)己基哌啶類似化合物)的依賴性的治療；或者用于治療對(duì)鴉片劑(如大麻，海洛因，嗎啡)或者苯并二氮雜庚因的依賴性和耐受性治療；也可用于古柯堿，鎮(zhèn)靜劑(sedativeipnotic)，安非他明或安非他明相關(guān)藥物(如右旋安非他明，甲基安非他明)或其組合物的成癮性疾病治療。
本發(fā)明的化合物還有用作抗炎制劑，特別地，它用于哮喘，流感，慢性支氣管炎和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等炎癥；胃腸道炎癥疾病如節(jié)段性回腸炎(Crohn)病、大腸潰瘍、腸炎(IBD)以及非甾族抗炎藥物引起的疾??；皮膚疾病如皰疹和濕疹；膀胱炎癥如膀胱炎和嚴(yán)重的失禁癥；以及眼部和牙部炎癥的治療。
本發(fā)明的化合物還用于治療過敏性疾病的治療，特別地用于皮膚過敏如風(fēng)疹和氣道過敏如鼻炎。
本發(fā)明的化合物還被用于治療嘔吐，例如反胃，惡心和嘔吐。嘔吐包括急性嘔吐，延時(shí)嘔吐和定時(shí)嘔吐。本發(fā)明的化合物可用于由任何原因所引起的嘔吐。例如，嘔吐可以是由于藥物引起的，例如腫瘤化療劑，例如烷基化試劑如環(huán)磷酰胺、亞硝基脲氮芥、洛莫司汀和苯丁酸氮芥；細(xì)胞毒抗生素如更生霉素、多柔比星、絲鏈霉素C和爭(zhēng)光霉素；抗代謝物如阿糖胞苷、甲胺喋啉、和5-氟尿嘧啶；長(zhǎng)春花生物堿如依托泊苷，長(zhǎng)春堿和長(zhǎng)春新堿；以及其他諸如順鉑，達(dá)卡巴嗪，甲芐肼和羥基脲；以及它們的組合物；放射治療如胸腔和腹部的放射治療，如癌癥的治療；中毒；毒素如由代謝紊亂或者感染引起的疾病，如胃炎或細(xì)菌傳播或者濾過性毒菌引起的胃腸感染；懷孕；前庭疾病如運(yùn)動(dòng)疾病，眩暈，頭昏眼花，梅尼爾(Meniere)；術(shù)后疾??；；腸胃阻塞；腸胃動(dòng)力消退；內(nèi)臟疼痛如心肌梗塞或者腹膜炎；偏頭痛；頭蓋間壓力增加；頭蓋間壓力降低(如恐高癥)；阿片止痛劑如嗎啡；和胃-食道逆呃，酸消化不良，飲食過度，胃泛酸，胃灼熱/反胃，心絞痛如偶發(fā)性心絞痛，夜間心絞痛，以及飲食所引起的心絞痛和胃弱的治療。
本發(fā)明的化合物特別用于胃腸疾病如腸躁動(dòng)綜合癥(IBS)；皮膚疾病如牛皮癬，騷癢和曬斑；血管疾病如咽痛，血管頭痛以及雷尼爾(Reynaud′s)病；大腦缺血如大腦血管痙攣伴隨蛛網(wǎng)膜下出血；纖維組織和膠原質(zhì)疾病如硬化病和嗜曙紅細(xì)胞纖維化；與免疫系統(tǒng)增強(qiáng)或減弱相關(guān)的疾病例如全身紅斑性肢痛病和風(fēng)濕疾病如纖維組織炎；和咳嗽的治療。
本發(fā)明的化合物被用于伴隨腦中風(fēng)、血栓中風(fēng)、出血性中風(fēng)、大腦缺血、大腦血管痙攣、血糖過低、組織缺氧、缺氧癥、圍產(chǎn)期暈厥心博停止的神經(jīng)毒素引起的損傷的治療。
因此，本發(fā)明提供了用于治療疾病，尤其是用于人藥的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物。
另一方面，本發(fā)明提供了通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物在制備治療由CRF介導(dǎo)的疾病的藥物制劑中的用途。
另一方面，本發(fā)明提供治療哺乳動(dòng)物，包括人的特別是由CRF介導(dǎo)的疾病的方法，包括給藥有效劑量的通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物。
所述的治療方法還包括緩解或預(yù)防上述癥狀。
化合物(I)可以以原料藥形式，優(yōu)選作為藥物制劑中的活性成為給藥。
因此，本發(fā)明還提供了一種包括了至少一種通式(I)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或其溶劑合物的藥物組合物并做成可通過任意常規(guī)途徑給藥的制劑。優(yōu)選將上述化合物制成適合給藥的形式，特別地是作為人藥，并且能夠通過常用的方法使用一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑制成相應(yīng)的制劑。
化合物(I)可以配制成口服給藥、口腔含化給藥、腸道外給藥、局部給藥(包括眼部和鼻腔)、長(zhǎng)效制劑或直腸給藥或者一種適宜的通過吸入或吹入(通過口或鼻)方式給藥的合適形式。
對(duì)口服給藥，藥物組合物可以是以通過常用方法添加藥學(xué)上可接受的賦形劑如粘結(jié)劑(例如預(yù)膠化玉米淀粉、聚乙烯吡咯或羥基丙基甲基纖維素)，填充劑(如乳糖、微晶纖維素或者磷酸氫鈣)，潤(rùn)滑劑(如硬脂酸鎂、滑石或硅土)，分散劑(如馬鈴薯淀粉或乙醇酸鈉粉)，或者濕潤(rùn)劑(如月桂基磺酸鈉)所制成的片劑或膠囊。可以使用本領(lǐng)域熟知的方法制作片劑。液體口服制劑可以是例如溶液、糖漿或懸浮液的形式，也可以是干藥在服用前與水或者其他合適賦形劑配制成使用形式。上述液體制劑可以是通過常用方法添加藥學(xué)上可接受的添加劑制備。所述添加劑有如懸浮劑(如山梨醇糖漿、纖維素衍生物或者氫化食用脂肪)，乳化劑(如卵磷酯或阿拉伯樹脂)，非水賦形劑(如杏仁油、油脂、乙醇或者分餾植物油)，以及防腐劑(如-對(duì)-羥基苯甲酸甲基或丙基酯或者山梨酸)。在合適情況下制劑中也可含有緩沖鹽、香料、色素和甜味劑。
口服制劑可以制成合適的形式以控制活性化合物的釋放。
口腔含化給藥時(shí)該組合物可以制成片劑或其他通用的形式。
本發(fā)明化合物可以通過藥丸注射或者連續(xù)灌注的方式制成腸道外給藥的形式。注射用制劑可以是單位劑量形式如在安碚瓶或者在多劑量容器中加入適量的防腐劑。該組合物可以是以在水狀或油狀賦形劑中的懸浮液、溶液或者乳液，并且可能含有某種配制劑如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑。作為選擇，活性成分可以是粉末狀，在使用前和適宜的賦形劑如無菌熱原質(zhì)-水混合。
本發(fā)明的化合物也可以配制成藥膏、藥霜、藥膠、洗液、陰道栓、氣溶膠或滴劑(例如眼、耳或鼻滴劑)的局部給藥形式。藥膏和藥霜可以在水狀或油狀賦形劑中加入合適的增稠劑和/或膠凝劑制成。對(duì)眼部給藥的藥膏可以是以無菌方式使用無菌成分制得的。
洗液可用水或油性基質(zhì)配制，一般還包含一種或多種鹵化劑、穩(wěn)定劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑或著色劑。滴劑可以用水或非水賦形劑配制，還包含一種或多種分散劑、穩(wěn)定劑、助溶劑或懸浮劑。它們還可含有防腐劑。
本發(fā)明的化合物還可以制成直腸給藥的形式，如栓劑或者保留灌腸劑，例如含有常用栓劑賦形劑如可可油和其他甘油酯。
本發(fā)明的化合物還可制成長(zhǎng)效制劑。這些長(zhǎng)效制劑可以通過植入方式(例如皮下或者肌內(nèi))或者通過肌肉注射方式給藥。因此，本發(fā)明的化合物可以與合適的聚合物或者憎水材料(例如在可接受的油中以乳劑形式)或離子交換樹脂，或以微溶性衍生物例如微溶性鹽一起制成制劑。
對(duì)鼻內(nèi)給藥，本發(fā)明的化合物可以制成通過合適計(jì)量的單一劑量設(shè)備給藥的溶液，或者配制成用合適的傳送設(shè)備給藥的與合適的載體的粉末混合物。
本發(fā)明化合物的建議劑量為1至約1000mg/天。應(yīng)當(dāng)知道必須根據(jù)病人的年齡和狀況來按照規(guī)律調(diào)整日常的用量。而精確的劑量應(yīng)遵照主治醫(yī)生或獸醫(yī)的判斷。還應(yīng)根據(jù)給藥途徑和所特別選定的藥物來確定劑量。
因此，腸道外給藥每日的劑量通常在1至約100mg，優(yōu)選1至80mg每天。對(duì)口服給藥，每天的劑量通常在1至300mg范圍內(nèi)，如1至100mg。
實(shí)施例在下面的中間體和實(shí)施例中，除非另有說明熔點(diǎn)(m.p.)使用Gallenkamp熔點(diǎn)儀測(cè)定且未經(jīng)校正，所有溫度以℃為單位。紅外光譜使用FT-IR儀測(cè)定。質(zhì)子核磁共振(1H-NMR)波譜是400MHz下記錄，化學(xué)位移記錄的是相對(duì)內(nèi)標(biāo)Me4Si的低磁場(chǎng)(d)的ppm值，并且被標(biāo)記為單峰(s)，雙峰(d)，雙雙重峰(dd)，三重峰(t)，四重峰(q)或多重峰(m)。柱色譜是在硅膠柱上進(jìn)行的(Merck AG Darmstaadt，德國(guó))。在下面的內(nèi)容中還使用了如下縮寫EtOAc＝乙酸乙酯，cHex＝環(huán)己烷，CH2Cl2＝二氯甲烷，Et2O＝乙醚，DMF＝N，N-二甲基甲酰氨，DIPEA＝N，N-二異丙基乙胺，MeOH＝甲醇，Et3N＝三乙胺，TFA＝三氟乙酸，THF＝四氫呋喃，DIBAL-H＝二異丁基氫化鋁，DMAP＝二甲基氨基吡啶，LHMDS＝六甲基二硅氮烷基鋰；Tlc表示在硅膠薄板上的薄層色譜，以及干燥指使用無水硫酸鈉干燥溶液；r.t.(RT)指室溫。
中間體1(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-乙酸甲酯在0℃和N2氣氛下向無水MeOH(60mL)中分批加入鈉(1.74g)。在金屬鈉被消耗完后，加入鹽酸乙脒(7.06g)。攪拌20分鐘后，濾除其中的NaCl沉淀。向游離乙脒溶液中加入2-乙氧基羰基-琥珀酸二乙酯(6.04g)的無水MeOH(20mL)溶液并將混合物在室溫下攪拌2天。真空濃縮反應(yīng)混合物至干并將得到的黃色泡沫狀物質(zhì)(8.69g)，與POCl3(70mL)混合，并回流加熱3.5小時(shí)。所得的溶液冷卻至室溫并將其緩慢倒入冰/水(600mL)和NH4OH(50mL)中，同時(shí)劇烈攪拌。所得產(chǎn)物使用EtOAc(3×50mL)萃取，然后使用Et2O(3×20mL)萃取。使用H2O(60mL)和鹽水(40mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。使用快速色譜純化粗油(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(4.27g)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.85(m，1H)，5.15(dq，1H)，5.11(dq，1H)，3.61(dt，2H)，2.67(s，3H)。
MS(m/z)202[M]+.2Cl；167[MH-Cl]+，1Cl。
中間體22-(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-戊-4-烯酸甲酯在0℃和N2氣氛下中間體1(1.33g，5.68mmol)的無水THF(8mL)溶液與雙(三甲基甲硅基)氨基鋰(1M己烷溶液，11.5mL，2eq)反應(yīng)15分鐘，然后加入烯丙基溴(0.99mL，2eq)。在室溫下攪拌化合物4小時(shí)然后用水(20mL)淬滅反應(yīng)。使用EtOAc(2×15mL)萃取產(chǎn)物然后分別用H2O(2×15mL)和鹽水(1×15mL)沖洗有機(jī)相，Na2SO4干燥，真空濃縮。使用快速色譜(硅膠，EtOAc/cHex 1∶9)純化粗產(chǎn)物得到白色固體狀標(biāo)題化合物(673.8mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.77(m，1H)，5.03(m，2H)，4.43(dd，1H)，3.76(s，3H)，3.12(m，1H)，2.78(m，1H)，2.73(s，3H)。
MS(m/z)374[M]+2Cl。
中間體32-(4，6-二氯-2-甲基-吡啶-5-基)-戊-4-烯-1-醇在-78℃和N2氣氛下向中間體2(257mg)的無水CH2Cl2(9.3mL)溶液中加入DIBAl-H(1M己烷溶液，5.6mL，6eq)。滴加完畢后反應(yīng)混合物在在-78℃下攪拌1小時(shí)然后在0℃下攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物倒入0.5N HCl冰水(20mL)溶液中，然后使用CH2Cl2(3×10mL)萃取。使用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，過濾，真空濃縮得到透明油狀標(biāo)題化合物(200mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.76(m，1H)，5.12(m，1H)，5.01(m，1H)，4.16(m，1H)，4.06(m，1H)，3.91(m，1H)，2.8-2.6(m，2H)，2.70(s，3H)，1.50(t，1H)。
MS(m/z)247[M]+，2Cl。
中間體4
5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-4，6-二氯-2-甲基嘧啶在0℃和N2氣氛下向中間體3(200mg)的無水DMF(12mL)加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(245mg，2eq)和咪唑(553mg，10eq)。在室溫下反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)然后再加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯(61mg，0.5eq)。1小時(shí)后，加入飽和NH4Cl(15mL)水溶液和EtOAc(15mL)，然后使用EtOAc(2×15mL)萃取水相。用H2O(10mL)沖洗合并的萃取液，無水Na2SO4干燥，過濾，真空濃縮。使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 19∶1)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物(237mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ5.72(m，1H)，5.10(d，1H)，4.98(d，1H)，4.11(m，1H)，3.94(m，2H)，2.69(s，3H)，2.6-2.7(m，2H)，0.82(s，9H)，0.05(s，3H)，0.01(s，3H)。
MS(m/z)361[M]+，2Cl。
中間體5{5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)胺在0℃和N2氣氛下將2，4-二氯苯胺(192mg)的無水THF(12mL)與氫化鈉(80％)，礦物油溶液，393mg)反應(yīng)15分鐘，然后加入中間體4(434mg，1.19mmol)的無水THF(4mL)溶液?；旌衔锛訜峄亓?小時(shí)然后用水(20mL)淬滅反應(yīng)。用EtOAc(2×20mL)萃取產(chǎn)物，無水Na2SO4干燥，真空濃縮。用快速色譜(硅膠，EtOAc/cHex 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到黃色油狀標(biāo)題化合物(419mg)。
NMR(1H，CDCl3)，T＝55℃δ8.35(bs，1H)，8.13(bd，2H)，7.42(d，1H)，7.25(dd，1H)，5.73(m，1H)，5.03(m，2H)，4.10(dd，1H)，3.99(dd，1H)，3.65(bm，1H)，2.75(m，2H)，2.47(s，3H)，0.82(s，9H)，0.01(s，3H)，0.00(s，3H)。
MS(m/z)486[MH]+，3Cl。
中間體6{5-[1-(叔丁基二甲基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在N2氣氛下向中間體5(419mg)的無水CH2Cl2(17mL)溶液加入(Boc)2O(376mg，2eq)和DMAP(催化量)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。用水(10mL)稀釋溶液然后使用EtOAc(3×15mL)萃取。無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，過濾，干燥、真空濃縮?？焖偕V純化粗產(chǎn)物(硅膠，cHex/EtOAc9∶1)得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(420mg)。
NMR(1H，CDCl3，40℃)δ7.47(d，1H)，7.30(d，1H)，7.14(dd，1H)，5.66(m，1H)，5.03-4.89(m，2H)，3.98-3.8(m，2H)，3.43(b，1H)，2.8-2.6(m，2H)，2.56(bs，3H)，1.41(s，9H)，0.77(s，9H)，-0.02(s，3H)，-0.10(s，3H)。
IR(液體石蠟，cm-1)1716。
MS(m/z)588[MH]+，3Cl。
中間體7[6-氯-5-(1-羥基甲基-丁-3-烯基)-2-甲基-吡啶-4-基]-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在N2氣氛下向中間體6(50mg)的無水DMF(1mL)溶液加入TEA·3HF(21μl，1.5eq)。室溫下攪拌反應(yīng)混合物18小時(shí)。用水(10mL)稀釋溶液然后使用EtOAc(3×15mL)萃取。無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，過濾，真空濃縮至干燥。使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物(30mg)。
NMR(1H，DMSO，T＝70℃)δ7.69(d，1H)，7.43-7.33(m，2H)，5.64(m，1H)，5.00-4.88(m，2H)，4.54(1H，m)，3.71(m，2H)，3.29(m，1H)，2.66(m，2H)，2.5(s，3H)，1.31(s，9H)。
MS(m/z)472[MH]+，3Cl。
中間體8甲磺酸2-{4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氯苯基)-氨基]-6-氯-2-甲基-吡啶-5-基}-戊-4-烯酯在室溫和N2氣氛下向中間體7(130mg)的無水CH2Cl2(5.52mL)溶液中加入Et3N(192μl，5eq)和CH3SO2Cl(43μl，2eq)。室溫下攪拌反應(yīng)混合物18小時(shí)。用水(20mL)稀釋反應(yīng)混合物并用EtOAc(3×25mL)萃取。無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，過濾，真空濃縮。用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物(148mg)。
NMR(1H，DMSO，T＝70℃)δ7.72(d，1H)，7.36(dd，1H)，7.28(d，1H)，5.56(m，1H)，5.00(d，1H)，4.92(d，1H)，4.46(m，2H)，3.51(m，1H)，3.02(s，3H)，2.65(m，1H)，2.54(s，3H)，2.50(m，1H)，1.38(s，9H)。
IR(cm-1)1725，1641，1362。
MS(m/z)550[MH]+，3Cl。
中間體95-烯丙基-4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶中間體8(120mg)的TFA 20％/CH2Cl2(7mL)溶液在室溫下攪拌2小時(shí)。為除去其中的TFA，真空蒸發(fā)反應(yīng)混合物中的溶劑然后重復(fù)加入CH2Cl2并蒸發(fā)。將粗中間體溶解在無水THF(5mL)中，然后加入Et3N(284μl，5eq)。室溫下攪拌1小時(shí)后加入向其中H2O，然后使用EtOAc(3×10mL)萃取水層。用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，過濾，真空濃縮至干燥并得到透明油狀標(biāo)題化合物(124mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.49(dd，1H)，7.30(d+s，2H)，5.77(m，1H)，5.16-5.12(m，2H)，4.00(t，1H)，3.77(m，1H)，3.57(m，1H)，2.7(m，1H)，2.47(m，1H)，2.45(s，3H)。
MS(m/z)354[MH]+，3Cl。
中間體10[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3d]吡啶-5-基]-乙醛在-78℃下中間體9(30mg)的CH2Cl2(4mL)溶液臭氧氧化(5g.h-1)5分鐘。當(dāng)所有起始物料耗盡后(根據(jù)TLC，cHex/EtOAc 75/25)，向反應(yīng)混合物用氧氣然后用氮?dú)鉀_洗20分鐘。向冷卻的反應(yīng)混合物加入(CH3)2S(25μl，4eq)和加熱至室溫。溶液在室溫下攪拌18小時(shí)。真空除去溶劑，以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 3∶1)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物(8mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ9.87(s，1H)，7.48(t，1H)，7.30(m，2H)，4.23(t，1H)，3.90(m，1H)，3.60(dd，1H)，3.29(dd，1H)，2.90(dd，1H)，2.42(s，3H)。
MS(m/z)356[MH]+，3Cl。
中間體115-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-4，6-二氯-2-甲基-嘧啶在℃和N2氣氛下，向中間體3(152mg)的無水DMF(4mL)溶液中加入DMAP(3.8mg)，咪唑(420mg)和Ph2tBuSiCl(0.32mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。向該溶液中加入5mL飽和NH4Cl水溶液，然后以Et2O(2×15mL)萃取混合物，以水、飽和食鹽水各沖洗合并的有機(jī)萃取液一次，然后以Na2SO4干燥，濾去固體，蒸去溶劑和以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗黃色油狀物，并得到透明油狀標(biāo)題化合物(270mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.65(dd，2H)，7.56(dd，2H)，7.49-7.36(m，6H)，5.67(m，1H)，5.03(dd，1H)，4.94(dd，1H)，4.17(m，1H)，4.00(m，2H)，2.70(s，3H)，2.69(m，1H)，2.55(m，1H)，0.98(s，9H)。
MS(m/z)485[MH]+，2Cl。
中間體12{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-胺在0℃和N2氣氛下，向2，4-二氯苯胺(80mg)的無水THF(1mL)溶液中加入NaH(80％，礦物油溶劑，31mg)，室溫下反應(yīng)30分鐘。冷卻至0℃的該混合物加入中間體11(227mg，0.467mmol)的無水THF(2mL)溶液。反應(yīng)混合物回流下攪拌5小時(shí)。然后用水(20mL)淬滅反應(yīng)。用Et2O(4×20mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗一次，在用鹽水洗一次，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗橙黃色油，得到黃色油狀標(biāo)題化合物(131.6mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ8.2-7.7(d，1H)，7.55(d，2H)，7.50(d，2H)，7.40-7.20(m，9H)，5.70(m，1H)，5.07(dd，1H)，4.94(dd，1H)，4.06(m，2H)，3.70(m，1H)，2.71(m，2H)，2.50(m，3H)，0.95(s，9H)。
MS(m/z)610[MH]+，3Cl。
中間體13{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯在室溫和N2氣氛下向中間體12(128mg)的無水CH2Cl2(2mL)加入Boc2O(61mg)和DMAP(3mg)。反應(yīng)混合物室溫下攪拌16小時(shí)。加入新的Boc2O(58mg+46mg)和催化量DMAP 2天后原料完全轉(zhuǎn)化。用水稀釋反應(yīng)混合物然后用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液水洗一次，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，然后用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗黃色油狀物，得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(138mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.67(d，1H)，7.54-7.30(m，5H+5H)，7.19(m，2H)，5.51(m，1H)，4.87(d，1H)，4.82(d，1H)，3.94(m，1H)，3.84(bm，1H)，3.53(m，1H)，2.57(s，3H)，2.62(m，1H)，2.35(m，1H)，1.35(s，9H)，0.90(s，9H)。
IR(液體石蠟，cm-1)1732。
MS(m/z)710[MH]+，3Cl，722[M+Na]+，610[MH-Boc+H]+。
中間體14{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-3-羥基-丙基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二氯苯基)-氨基甲酸叔丁酯中間體13(108mg)的3mL CH2Cl2/CH3OH(9∶1)溶液被冷卻至-78℃。在磁攪拌下向溶液中通入O330分鐘。然后在低溫和N2氣氛下加入NaBH4(23.1mg)。室溫下反應(yīng)混合物攪拌3小時(shí)。用水淬滅反應(yīng)然后使用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用飽和NH4Cl水溶液沖洗一次，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑然后用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物黃色油得到透明油狀標(biāo)題化合物(59mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.65(d，1H)，7.48-7.34(m，5H+5H)，7.28(d，1H)，7.12(bd，1H)，5.51(m，1H)，4.18(t，1H)，4.02(bt，1H)，3.82(bm，1H)，3.51(m，1H)，3.29(bm，2H)，2.55(s，3H)，2.05(m，1H)，1.84(bm，1H)，1.35(s，9H)，0.89(s，9H)。
IR(film，cm-1)1733。
MS(m/z)714[MH]+，3Cl，736[M+Na]+，3Cl，678[MH-HCl]+，2Cl，614[MH-Boc+H]+。
中間體15甲磺酸3-{4-[叔丁氧基羰基-(2，4-二氯苯基)-氨基]-6-氯-2-甲基-吡啶-5-基}-4-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基)-丁基酯在室溫和N2氣氛下向中間體14(57mg)的無水CH2Cl2(1mL)溶液中加入Et3N(55μl)和MsCl(13μl)。反應(yīng)混合物攪拌5小時(shí)，用水稀釋然后用CH2Cl2(2×5mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗一次，鹽水洗一次，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑得到粗產(chǎn)物無色標(biāo)題化合物(60mg)。
NMR(1H，DMSO，70℃)δ7.65(d，1H)，7.50-7.34(m，5H+5H)，7.24(bd，1H)，7.15(bd，1H)，4.20-4.00(m，3H)，3.80-3.60(m，2H)，3.02(s，3H)，2.56(s，3H)，2.30-2.10(m，2H)，1.35(s，9H)，0.89(s，9H)。
IR(液體石蠟，cm-1)1725。
MS(m/z)794[MH]+，3 Cl，694[MH-Boc+H]+。
中間體16甲磺酸4-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基)-3-[4-氯-6-(2，4-二氯苯基氨基)-2-甲基-吡啶-5-基]-丁酯在室溫和N2氣氛下向中間體15(58mg)的無水CH2Cl2(1mL)溶液中加入TFA(200μl，35eq)。反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，減壓蒸發(fā)，用CH2Cl2稀釋幾次然后再次蒸發(fā)得到粗產(chǎn)物黃色油狀標(biāo)題化合物(64mg)。
MS(m/z)694[MH]+，3Cl。
中間體175-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-8-(2-4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶在0℃和N2氣氛下向中間體16(64mg)的無水THF(1mL)溶液中加入Et3N(100μl)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后用水稀釋，Et2O(2×20mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗一次，鹽水洗一次，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑然后使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗油得到透明油狀標(biāo)題化合物(26.4mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.74-6.98(m，5H+5H+1H+2H)，4.10-3.90，3.76-3.55，3.48-3.28(m，5H)，2.58-2.38(m，1H)，2.24，2.22(s，3H)，2.1-1.9(m 1H)，1.07(s，9H)。
MS(m/z)598[MH]+，3Cl。
中間體18[4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基]-甲醇在室溫和N2氣氛下向中間體17(22mg)的無水DMF(2mL)溶液中加入Et3N3HF(20μl)。在40℃下反應(yīng)混合物攪拌4小時(shí)，然后用水稀釋，Et2O(3×20mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗一次，鹽水洗一次，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑然后用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 2∶1)純化粗油得到透明油狀標(biāo)題化合物(13mg)。
NMR(1H，DMSO，90℃)δ7.66(bs，1H)，7.50-742(m，2H)，4.66(m，1H)，3.82(bt，1H)，3.68(m，1H)，3.66-3.36(m，2H)，3.20(m，1H)，2.33(m，1H)，2.14(s，3H)，1.94(m，1H)。
MS(m/z)358[MH]+，3Cl，360。
中間體19甲磺酸4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基甲基酯在0℃和N2氣氛下向中間體18(13mg)的無水CH2Cl2(1mL)溶液中加入Et3N(20.0μl)和MsCl(6.0μl)。室溫下反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，然后用水稀釋，CH2Cl2(3×10mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用水洗一次，鹽水洗一次，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑得到粗產(chǎn)物透明油狀標(biāo)題化合物(14.7mg)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.50(dd，1H)，7.40-7.15(m，2H)，4.50-4.15(m，2H)，3.90-3.70(m，1H)，3.65-3.30(m，2H)，3.05(s，3H)，2.45-2.2(m，1H)，2.25(s，3H)，2.2-2.0(m，1H)。
MS(m/z)438[MH]+，3Cl。
中間體205-碘-戊酸甲酯向4-溴戊酸甲基酯(14g)的丙酮(63mL)溶液中加入NaI(11.5g)，混合物回流2小時(shí)。然后冷卻至室溫，濾去沉淀。蒸發(fā)濾液并向殘液中加入醚。過濾所得的懸浮液，然后使用5％NaHSO3(3×100mL)水溶液和鹽水(1×100mL)沖洗醚相，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑得到黃色油狀粗標(biāo)題化合物(15.85g)。
NMR(1H，CDCl3)δ3.68(s，3H)，3.19(t，2H)，2.34(t，2H)，1.86(m，2H)，1.74(m，2H)。
MS(m/z)242[M]+，211[M-OMe]+，115[M-I]+。
中間體212-(2，4-二氯苯基)-壬二酸二甲酯在-78℃和N2氣氛下向2，4-二氯苯基醋酸甲基酯(2g)的無水THF(27mL)溶液中逐滴加入1M LHMDS的THF(10.04mL)溶液并攪拌30分鐘，然后在-78℃下逐滴膠乳純凈的中間體20(2.87g，1.3eq)，然后使用無水THF(2mL)沖洗滴液漏斗。移去冷卻浴然后在室溫下攪拌混合物3.5小時(shí)。減壓蒸發(fā)溶劑。將殘液溶解于乙醚中，水洗(3×30mL)和鹽水(1×30mL)洗。無水Na2SO4。干燥。濾去固體，使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(2.7g)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.39(d，1H)，7.30(d，1H)，7.22(dd，1H)，4.10(t，1H)，3.67(s，3H)，3.65(s，3H)，2.29(t，2H)，2.05(m，1H)，1.74(m，1H)，1.64(m，2H)，1.40-1.20(m，2H)。
IR(薄膜，cm-1)1738。
MS(m/z)332[M]+，300[M-CH3OH]+，159。
中間體223-(2，4-二氯苯基)-2-羥基-環(huán)己-1-烯酸甲酯在-78℃和N2氣氛下向無水MeOH(26mL)分批加入鈉(0.7g)，同時(shí)劇烈攪拌。當(dāng)金屬鈉消耗完后，向其中加入無水甲苯(100mL)。然后使用Dean-Stark裝置蒸餾出MeOH/甲苯混合物(36mL)。在加入中間體21(2.52g)的無水甲苯(15mL)溶液前先將混合物冷卻至室溫。在使用AcOH酸化前，混合物回流3.5小時(shí)后冷卻至室溫。用水洗有機(jī)相，EtOAc(2×20mL)萃取水相并且合并的有機(jī)萃取液用水(2×20mL)洗，鹽水(2×20mL)沖洗，無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑。用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到標(biāo)題化合物(透明油狀物1.8g)。
NMR(1H，CDCl3)δ12.19(s，1H)，7.40(d，1H)，7.19(dd，1H)，7.08(d，1H)，4.07(t，1H)，3.81(s，3H)，2.35(m，2H)，2.01(m，1H)，1.73(m，1H)，1.60(m，2H)。
MS(m/z)300[M]+，265，233。
中間體235-(2，4-二氯苯基)-6-氧代-環(huán)己-1-烯酸甲酯苯基硒酰氯(2.44g)在氮?dú)獗Ｗo(hù)下加入雙頸燒瓶中，然后用無水CH2Cl2(21mL)溶解。棕色溶液冷卻至0℃然后加入無水吡啶(0.9mL)，在0℃攪拌30分鐘后得到黃色溶液。在0℃下分批加入中間體22(1.5g)的無水CH2Cl2(12mL)溶液，反應(yīng)混合物室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物倒入分液漏斗并用1M HCl(2×10mL)和水(3×10mL)沖洗。然后將CH2Cl2層轉(zhuǎn)入燒瓶中并冷卻至0℃。向混合物中加入H2O2水溶液(30％w/w，3mL)，并在0℃下攪拌10分鐘，然后向其中第二次加入H2O2水溶液(3mL)。反應(yīng)混合物變?yōu)闊o色并生產(chǎn)白色固體。0℃下20分鐘后用飽和NaHCO3(2×10mL)水溶液和鹽水(1×10mL)沖洗混合物，無水Na2SO4干燥，濾去固體，蒸發(fā)溶劑得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(1.45g)，冷卻后變成固體。
NMR(1H，CDCl3)δ7.77(m，1H)，7.43(d，1H)，7.24(dd，1H)，7.11(d，1H)，4.12(dd，1H)，3.83(s，3H)，2.70(m，2H)，2.40-2.20(m，2H)。
IR(薄膜，cm-1)1737，1673。
MS(m/z)298[M]+，263[M-Cl]+，126。
中間體245-烯丙基-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫喹唑啉-4-醇在-78℃下向中間體23(690mg)的無水CH2Cl2(6.5mL)溶液中加入TiCl4(0.255mL)。所得的棕色溶液在-78攪拌5分鐘，然后加入烯丙基三甲基硅烷(0.440mL)的無水CH2Cl2(6.5mL)溶液。在-78℃下攪拌1.5小時(shí)后，用水淬滅反應(yīng)，用CH2Cl2稀釋，然后可將混合物加熱至室溫。使用CH2Cl2萃取水層，然后使用鹽水(1×10mL)沖洗有機(jī)相，并用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，得到淺黃色油狀以非對(duì)映異構(gòu)體烯醇酯和酮酯混合物形式存在的烯丙基化化合物(676mg)。
在N2氣氛下向無水MeOH(6mL)分批加入鈉(140mg，3eq)，當(dāng)金屬鈉消耗完之后，加入鹽酸乙脒(600mg)。攪拌10分鐘后，濾去NaCl沉淀并以無水MeOH(2mL)沖洗。向粗產(chǎn)物烯丙基化產(chǎn)物(676g)加入游離乙脒溶液然后混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。蒸發(fā)溶劑和粗產(chǎn)物用快速色譜(硅膠，CH2Cl2/MeOH 98∶2→97∶3)純化得到標(biāo)題化合物的兩種非對(duì)映異構(gòu)體的3∶1混合物(538mg)。
NMR(1H，CDCl3)，(反式異構(gòu)體)δ11.82(bs，1H)，7.42(d，1H)，7.10(dd，1H)，6.58(d，1H)，5.87(m，1H)，5.06(m，2H)，4.34(d，1H)，3.01(m，1H)，2.68(m，1H)，2.37(s，3H)，2.20(m，1H)，2.07(m，1H)，1.80(m，1H)，1.70(m，1H)，1.49(m，1H)。
NMR(1H，CDCl3)，(順式異構(gòu)體)δ11.70(bs，1H)，7.36(d，1H)，7.12(dd，1H)，6.81(d，1H)，5.83(m，1H)，5.02(m，2H)，4.23(bt，1H)，2.98(m，1H)，2.66(m，1H)，2.28(s，3H)，2.20(m，1H)，2.02-1.80(m，2H)，1.62-1.47(m，2H)。
MS(m/z)348[M]+，307[M-allyl]+。
中間體25反-5-烯丙基-4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫喹唑啉(異構(gòu)體1)和順5-烯丙基-4-氯-8-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫喹唑啉(異構(gòu)體2)中間體24(538mg)溶解于POCl3(5mL)，然后將混合物回流2小時(shí)。蒸發(fā)POCl3并將殘留物溶解于CH2Cl2，然后以NH4OH處理。兩相分離后用CH2Cl2(3×10mL)萃取水相。用鹽水(2×10mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液然后用Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物的異構(gòu)體1(262mg)和標(biāo)題化合物的異構(gòu)體2(94mg)。
異構(gòu)體1NMR(1H，CDCl3)δ7.44(d，1H)，7.06(dd，1H)，6.20(d，1H)，5.86(m，1H)，5.14(m，2H)，4.63(d，1H)，3.16(m，1H)，2.60(m，1H)，2.59(s，3H)，2.30(m，1H)，2.16(m，1H)，1.89(m，1H)，1.80(m，1H)，1.64(m，1H)。
MS(m/z)367[M+H]+。
異構(gòu)體2NMR(1H，CDCl3)δ7.36(d，1H)，7.15(dd，1H)，6.83(bd，1H)，5.82(m，1H)，5.10-5.06(m，2H)，4.35(m，1H)，3.12(m，1H)，2.62(m，1H)，2.48(s，3H)，2.25(m，1H)，2.22-2.00(m，2H)，1.90-1.78(m，2H)。
MS(m/z)367[M+H]+。
中間體26[5-烯丙基-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-4-基]-環(huán)丙基甲基-胺加熱中間體9(160mg，0.451mmol)的環(huán)丙基甲基胺(0.5mL)溶液至130℃(螺旋蓋瓶)4小時(shí)。然后蒸發(fā)胺并使用快速色譜(硅膠，梯度CH2Cl2/EtOAc 9∶1-7∶3)純化殘留物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(162mg，0.416mmol，92％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.43(d，1H)，7.36(d，1H)，7.24(dd，1H)，5.86(m，1H)，5.20-5.13(m，2H)，4.39(bt，1H)，3.88(dd，1H)，3.71(dd，1H)，3.40-3.30(m，3H)，2.46(m，1H)，2.35(m，1H)，2.36(s，3H)，1.08(m，1H)，0.60-0.27(m，4H)。
MS(m/z)389[M+H]+(2Cl)。
中間體275-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜-苊-4-醇向中間體26(160mg，0.411mmol)的丙酮/水8∶1(8mL)混合物的溶液中加入N-甲基嗎啉-N-氧化物(100mg，2eq)，隨后加入4％的OsO4(0.260mL，0.1eq)水溶液，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3.5小時(shí)。然后減壓濃縮該溶液，加入飽和Na2SO3(50mL)水溶液。使用EtOAc(3×10mL)萃取水相，用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，粗產(chǎn)物油被溶解在THF和水的1∶1的混合物(8mL)中，然后加入NaIO4(132mg，1.5eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌45分鐘。用水稀釋并用EtOAc(3×10mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水沖洗一次然后使用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，用快速色譜(硅膠，cHex/FtOAc1∶1)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(111mg，0.284mmol，69％)。
NMR(1H，DMSO-d6)δ7.68(d，1H)，7.44(m，2H)，5.92(d，1H)，5.17(m，1H)，4.13(t，1H)，3.79(m，1H)，3.76(dd，1H)，3.50(m，1H)，3.15(dd，1H)，2.24(m，1H)，2.21(s，3H)，1.43(dt，1H)，1.06(m，1H)，0.50-0.20(m，4H)。
MS(m/z)391[M+H]+(2Cl)。
中間體285-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-4-甲氧基-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊將PTSA(1.5mg，0.042eq)的無水MeOH(1.5mL)溶液加入純凈的中間體27(73mg，0.187mmol)中并將所得溶液在室溫下攪拌18小時(shí)。然后蒸發(fā)溶劑并將殘留物溶解在CH2Cl2(10mL)中。加入用水(1∶1，10mL)稀釋飽和NaHCO3水溶液得到的溶液，然后用CH2Cl2(2×10mL)萃取水相。用水(1×10mL)和飽和NaCl水溶液(1×10mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，得到黃色油狀標(biāo)題化合物(68mg，0.168mmol，90％)，無需進(jìn)一步純化而用于后續(xù)步驟中。
NMR(1H，丙酮-d6)δ7.53(d，1H)，7.47(d，1H)，7.35(dd，1H)，4.93(t，1H)，4.23(t，1H)，4.05(dd，1H)，3.78(dd，1H)，3.51(m，1H)，3.39(s，3H)，3.13(dd，1H)，2.53(dddd，1H)，2.25(s，3H)，1.40(dt，1H)，1.09(m，1H)，0.50-0.20(m，4H)。
MS(m/z)405[MH]+2Cl)。
中間體29中間體22-[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-5-基]-乙醇的另一種制備方法在0℃和N2氣氛下向中間體10(93mg，0.261mmol)在無水CH2Cl2/MeOH2∶1混合物(3mL)中的溶液中加入NaBH4(20mg，2eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后用水(10mL)淬滅反應(yīng)，減壓濃縮。用EtOAc(3×10mL)萃取水相并用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，得到白色固體狀標(biāo)題化合物(80mg，0.223mmol，85％)，無需進(jìn)一步純化而用于后續(xù)步驟中。
NMR(1H，CDCl3)δ7.54(d，1H)，7.40-7.30(m，2H)，4.20(t，1H)，3.93(dd，1H)，3.87(m，2H)，3.75(m，1H)，2.57(s，3H)，2.27(m，1H)，1.99(m，1H)。
MS(m/z)358[MH]+(3Cl)。
中間體30甲磺酸2-[4-氯-7-(2，4-二氯苯基)-2-甲基-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]吡啶-5-基]-乙基酯在室溫和N2氣氛下向中間體29(80mg，0.223mmol)的無水CH2Cl2(2mL)溶液加入三乙胺(155μl，5eq)然后加入甲磺酰氯(35μl，2eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。然后用水(10mL)淬滅反應(yīng)并用CH2Cl2(3×10mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用鹽水沖洗一次，用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 1∶1)純化粗產(chǎn)物得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(71mg，0.163mmol，73％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.48(m，1H)，7.32(m，2H)，4.38(m，2H)，4.09(t，1H)，3.82(dd，1H)，3.66(m，1H)，3.00(s，3H)，2.46(m，1H)，2.42(s，3H)，2.14(m，1H)。
MS(m/z)436[MH]+(3Cl)。
中間體31{5-[1-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-丁-3-烯基]-6-氯-2-甲基-吡啶-4-基}-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-胺在0℃和N2氣氛下向2，4-雙(三氟甲基)苯胺(2.11g，9.21mmol)的無水DMF(45mL)溶液中加入80％NaH/油(608mg，2.2eq)。30分鐘后反應(yīng)混合物被升溫至室溫，加入中間體11(4.46g，9.21mmol.)的無水DMF(30mL)溶液。反應(yīng)混合物在室溫下放置15分鐘，然后冷卻至0℃并用水稀釋。用EtOAc(3×50mL)萃取水相，然后用水(50mL)，鹽水(50mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 97∶3)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀得標(biāo)題化合物(4.546g，6.71mmol，73％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.34(s，1H)，7.97(s，1H)，7.53(d，1H)，7.48(d，1H)，7.54-7.31(m，10H)，5.7(m，1H)，4.97(d，1H)，4.90(d，1H)，4.11(m，1H)，3.99(m，1H)，3.72(m，1H)，2.56(m，2H)，2.18(s，3H)，0.91(s，9H)。
MS(m/z)678[MH]+。
中間體325-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]吡啶-7-醇在室溫下向中間體31(2g，2.95mmol)在丙酮/H2O的8∶1混合物(36mL)中的溶液加入N-甲基-嗎啉-N-氧化物(716mg，2eq)和OsO44％/H2O(1.8mL，0.1eq)。3.5小時(shí)后溶劑被蒸發(fā)然后加入飽和Na2SO3溶液。用EtOAc(2×20mL)萃取產(chǎn)物，然后用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。將油溶解于THF/H2O 9∶1混合物(45mL)中并加入NaIO4(947mg，1.5eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。用水稀釋然后用EtOAc(3×20mL)萃取產(chǎn)物。用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑，得到標(biāo)題化合物，兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(1.932g，2.85mmol，96％)。
NMR(1H，丙酮)異構(gòu)體1δ8.15(m，2H)，7.72(m，5H)，7.44(m，6H)，6.19(d，1H)，5.27(m，1H)，4.41(t，1H)，4.08(dd，1H)，3.52(m，1H)，2.81(m，1H)，2.35(m，1H)，2.15(s，3H)，1.07(s，9H)。
異構(gòu)體2δ8.15(m，2H)，7.72(m，5H)，7.44(m，6H)，5.8-5.4(m，2H)，4-3.8(m，2H)，3.6-3.4(m，1H)，3-2.8(m，1H)，2.35(m，1H)，2.15(s，3H)，1.07(s，9H)。
MS(m/z)680[MH]+。
中間體335-(叔丁基二苯基-甲硅烷氧基甲基)-4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶在-78℃下向中間體32(1.93g，2.84mmol)的無水CH2Cl2(50mL)溶液中加入Et3SiH(1.82mL，4eq)和BF3·Et2O(1.58mL，4.4eq)。反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌1小時(shí)然后加熱至室溫并攪拌18小時(shí)。加入NaHCO3的飽和溶液并以CH2Cl2(3×50mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液用無水Na2SO4干燥，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到白色固體狀標(biāo)題化合物(0.607g，9.16mmol，32％)。
NMR(1H，CDCl3)δ7.98-7.94(d，1H)，7.88-7.80(dd，1H)，7.7-7.58 7.44-7.32(m，10H)，7.35-7.14(d，1H)，3.98-3.94(dd，1H)，3.73-3.55(m，1H)，3.63-3.59(m，1H)，3.44-3.36 3.38-3.3(2m，2H)，2.55-2.4(m，1H)，2.17-2.15(s，3H)，2.04-1.9(m，1H)，0.98(s，9H)。
MS(m/z)664[MH]+。
中間體34{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5-基}-甲醇在室溫和N2氣氛下向中間體33(600mg，0.91mmol)的無水DMF(15mL)溶液中加入Et3N·3HF(1.25mL，8.4eq)并將反應(yīng)混合物在40℃加熱6.5小時(shí)。然后冷卻至室溫并用水稀釋。用Et2O(3×20mL)萃取產(chǎn)物，用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 6∶4)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(337mg，0.8mmol，88％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.26-8.12(m，2H)，7.9-7.8(d，1H)，5.08-4.98(t，1H)，3.9-3.6(2H)，3.7-3.3(2H)，3.24-3.10(1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.0-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
中間體35甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]吡啶-5-基甲酯在0℃和N2氣氛下向中間體34(200mg，0.47mmol)的無水CH2Cl2(10mL)溶液中加入Et3N(0.26mL，4eq)和MsCl(73μl，2eq)。反應(yīng)混合物加熱至室溫并攪拌18小時(shí)。然后用水稀釋并用CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物，用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。然后用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 6∶4)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(203mg，0.4mmol，86％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3 8.14(m，2H)，7.95-7.8(d+d，1H)，4.56-4.20(2H)，3.9-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.2-1.9(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
中間體36{4-氯-2-甲基-7-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基}-乙醛在室溫和N2氣氛下向中間體31(0.6g，0.886mmol)的無水DMF(15mL)溶液中加入Et3N·3HF(1.22mL，8.4eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物并以Et2O(3×20mL)萃取。用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化粗產(chǎn)物得到醇中間體(346mg，89％)，將其溶解于無水CH2Cl2(15mL)中并冷卻0℃。加入Et3N(0.44mL，4eq)和MsCl(0.122mL，2eq)，加熱反應(yīng)混合物至室溫并攪拌18小時(shí)。用水稀釋反應(yīng)混合物并用CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物。用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化粗產(chǎn)物得到環(huán)吡咯烷中間體(276mg，83％)。將該中間體溶解于丙酮/H2O 8∶1的混合物(18mL)中，并加入N-甲基-嗎啉-N-氧化物(230mg，2eq)和OsO4(403μl，0.1eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)。蒸發(fā)溶劑并加入飽和Na2SO3。以EtOAc(3×20mL)萃取產(chǎn)物并用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液。濾去固體，蒸發(fā)溶劑。將粗產(chǎn)物溶解于THF/H2O9∶1混合物(15mL)中并加入NaIO4(210mg，1.5eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，用水稀釋，然后以EtOAc(3×20mL)萃取產(chǎn)物。用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，得到透明油狀的標(biāo)題化合物(250mg，0.59mmol，90％)。
NMR(1H，CDCl3)δ9.86(s，1H)，8.05(s，1H)，7.93(d，1H)，7.5(d，1H)，4.24(m，1H)，3.93(m，1H)，3.65(dd，1H)，3.25(dd，1H)，2.93(dd，1H)，2.4(s，3H)。
MS(m/z)424[MH]+。
中間體37甲磺酸2-{4-氯-2-甲基-7-(2.4-二-三氟甲基-苯基)-6，7二氫-5H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基}-乙酯在0℃和N2氣氛下向中間體36(250mg，0.59mmol)在CH2Cl2/MeOH的9∶1混合物(15mL)中的溶液中加入NaBH4(44mg，2eq)。在0℃下反應(yīng)混合物攪拌30分鐘。加入濃HC直至pH＝7。用水稀釋反應(yīng)混合物然后以CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物。用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并用無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，得到白色固體(醇中間體，231mg，0.54mmol，93％)，將其溶解于無水CH2Cl2(15mL)中。反應(yīng)混合物冷卻至0℃然后加入Et3N(302μl，4eq)和MsCl(85μl，2eq)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，然后用水稀釋并用CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物，合并的有機(jī)萃取液以無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑。然后粗產(chǎn)物以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc6∶4)純化得到透明油狀的標(biāo)題化合物(252mg，0.50mmol，93％)。
NMR(1H，CDCl3)δ8.05(bs，1H)，7.94(bd，1H)，7.53(bd，1H)，4.42(m，2H)，4.07(t，1H)，3.83(dd，1H)，3.71(m，1H)，3.04(s，3H)，2.46(m，1H)，2.43(s，3H)，2.13(m，1H)。
MS(m/z)504[MH]+。
中間體38和39(S)-2-乙酰氧基-丙酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基甲酯和(S)-2-乙酰氧基-丙酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基甲酯在0℃和N2氣氛下向中間體34(320mg，0.753mmol)的CH2Cl2(7mL)溶液中加入DMAP(230mg，2.5eq)，Et3N(0.73mL，7eq)和(S)-2-乙酰氧基丙酰氯(0.61mL，6.4eq)。反應(yīng)混合物在0℃下攪拌30分鐘，加熱至室溫并以飽和NaHCO3溶液稀釋。以CH2Cl2(3×30mL)萃取產(chǎn)物并用無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液。濾去固體，蒸發(fā)溶劑。然后粗產(chǎn)物以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化，并以制備手性高效液相色譜(HPLC)分離得到兩種白色固體狀非對(duì)映異構(gòu)體中間體38(97mg，0.18mmol，d.e.＝97％)和中間體39(89.7mg，0.17mmol，d.e.＞99％)。
NMR(1H，丙酮)中間體38δ8.22-8.13(m，2H)，7.96-7.8(d+d，1H)，5.06(m，1H)，4.56-4.34(m，2H)，4.07-3.54(m，3H)，2.34-2.05(m，2H)，2.7(s，3H)，2.06(s，3H)，1.48(d+d，3H)。
中間體39δ8.22-8.14(m，2H)，7.96-7.81(d+d，1H)，5.06(m，1H)，4.5-4.3(m，2H)，4.1-3.54(m，3H)，2.7(s，3H)，2.3-2.0(m，2H)，2.13(s，3H)，1.47(d，3H)。
MS(m/z)540[MH]+。
HPLC制備型前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 Daicel CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 2
注射體積[μl] 500移動(dòng)相 正己烷-IPA 90/10v/v流速[mL/min] 6.5檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225，292中間體38 21.8，r.t.(min)中間體39 26.5，r.t.(min)分析型前置柱/保護(hù)柱 FilterRhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6粒徑[μm] 5柱溫[] 室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度[] 室溫注射體積[μl] 20移動(dòng)相 正己烷/異丙醇90/10v/v流速[mL/min] 1.0檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225中間體38 6.88，r.t.(min)前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6柱溫[℃] 室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度[℃] 室溫移動(dòng)相 正己烷/2-丙醇90/10v/v流速[mL/min] 1.0
檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 220-350中間體39 8.29，r.t.(min)中間體40{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基}-甲醇在0℃下下向中間體38(90mg，0.167mmol)在THF/H2O的4∶1混合物(5mL)中的溶液中加入LiOH(14mg，2eq)然后反應(yīng)混合物攪拌50分鐘。用水稀釋并用Et2O(2×10mL)和EtOAc(1×10mL)萃取產(chǎn)物。合并的有機(jī)萃取液以無水Na2SO4干燥，濾去固體，蒸發(fā)溶劑，用快速色譜(硅膠，cHex/AcOEt 6∶4)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(65mg，0.15mmol，92％，e.e.＝97％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.1(m，2H)，7.88-7.81(d+d，1H)，5.00(broad，1H)，3.9-3.6(m，2H)，3.7-3.3(m，2H)，3.2-3.1(m，1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.00-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 Daicel CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 0.46柱溫[] 室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度[] 室溫注射體積[μl] 20移動(dòng)相 正己烷/IPA/EtOH步驟1 時(shí)間-保留A-保留B95/3.5/1.5流速[mL/min] 1.0檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225中間體40 10.28，r.t.(min)
中間體41甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(S)-基甲酯在0℃和N2氣氛下向中間體40(62mg，0.145mmol)的無水CH2Cl2(5mL)溶液中加入Et3N(80μl，4eq)和MsCl(23μl，2eq)。反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)。然后用水稀釋并以CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物，然后用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并以無水Na2SO4干燥，濾去固體，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 6∶4)純化得到透明油狀的標(biāo)題化合物(67mg，0.13mmol，92％，e.e.＝95％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.14(m，2H)，7.94-7.83(d，1H)，4.55-4.20(2H)，3.94-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.25-1.94(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6粒徑[μm] 5柱溫[] 室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度[] 室溫注射體積[μl] 20移動(dòng)相 正己烷/EtOH/IPA 73.5/1.5/25v/v流速[mL/min] 1.0檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225中間體41 6.52，r.t.(min)
中間體42{4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基}-甲醇在0℃向中間體39(83mg，0.154mmol)在THF/H2O 4∶1的混合物(5mL)中的溶液中加入LiOH(14mg，2eq)并將反應(yīng)混合物攪拌20分鐘。然后用水稀釋并以Et2O(2×10mL)和EtOAc(1×10mL)萃取產(chǎn)物，合并的有機(jī)萃取液以無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑。粗產(chǎn)物用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc7∶3)純化得到標(biāo)題化合物(61mg，0.14mmol，93％，e.e.＞99％)透明油狀的。
NMR(1H，DMSO)δ8.26-8.12(m，2H)，7.9-7.8(d，1H)，5.08-4.98(t，1H)，3.9-3.6(m，2H)，3.7-3.3(m，2H)，3.24-3.1(m，1H)，2.3(m，1H)，2.09(s，3H)，2.00-1.8(m，1H)。
MS(m/z)426[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 15內(nèi)徑[mm] 4.6注射體積[μl]10移動(dòng)相 正己烷/乙醇/IPA步驟1保留時(shí)間A-保留B95/1.5/3.5v/v流速[mL/min] 1.0檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225中間體42 9.417，r.t.(min)中間體43甲磺酸4-氯-2-甲基-8-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-5，6，7，8-四氫-吡啶并[2，3-d]嘧啶-5(R)-基甲酯在0℃下和N2氣氛中，向中間體42(58mg，0.136mmol)的無水CH2Cl2(5mL)溶液加入Et3N(76μl，4eq)和MsCl(21μl，2eq)。反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌1小時(shí)，然后用水稀釋。以CH2Cl2(3×20mL)萃取產(chǎn)物。用鹽水沖洗合并的有機(jī)萃取液并以無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，然后以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 7∶3)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(57.6mg，0.11mmol，85％，e.e.＞99％)。
NMR(1H，DMSO)δ8.3-8.14(m，2H)，7.95-7.8(d，1H)，4.56-4.20(2H)，3.9-3.4(m，3H)，3.25(s，3H)，2.11(s，3H)，2.2-1.9(m，2H)。
MS(m/z)504[MH]+。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Filter Rhodyne柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6粒徑[μm] 3注射體積[μl] 10移動(dòng)相 正己烷/乙醇/IPA步驟1時(shí)間-保留A-保留B75/1.5/23.5v/v流速[mL/min] 1.0檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)[nm] 225中間體43 4.703，r.t.(min)中間體443-(2，4-二氯-苯基)-2-羥基-6-硝基甲基-環(huán)己-1-烯酸甲酯向中間體23(26mg，0.087mmol)在Et2O/THF無水混合物(0.5mL/0.1mL)中的溶液中加入硝基甲烷(0.005mL，1.1eq)和大孔樹脂A21(弱堿性樹脂260mg)。無需攪拌在室溫下緩揮發(fā)溶劑。2.5小時(shí)后，以Et2O沖洗干的樹脂然后傾析。進(jìn)一步使用Et2O(7x)沖洗并蒸發(fā)合并的有機(jī)部分。使用快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc，9∶1)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(25mg，80％)。
NMR(1H，CDCl3)δ12.72(s，1H)，7.41(d，1H)，7.24(dd，1H)，7.03(d，1H)，4.64(dd，1H)，4.50(t，1H)，4.07(bm，1H)，3.87(s，3H)，3.58(m，1H)，2.08(bm，1H)，1.85(bm，3H)。
MS(m/z)359[MH]+(2Cl)。
中間體458-(2，4-二氯-苯基)-2-甲基-5硝基甲基-5，6，7，8-四氫-喹唑啉4-醇在N2條件下向無水MeOH(1.5mL)中分批加入鈉(21mg，3.1eq)。當(dāng)金屬鈉消耗完后，加入鹽酸乙脒(96mg，3.3eq)。攪拌10分鐘后，濾去NaCl沉淀并以無水MeOH(2mL)沖洗。向中間體44(106mg，0.294mmol)中加入游離乙脒溶液，混合物在室溫下攪拌18小時(shí)。蒸去溶劑，然后粗產(chǎn)物以快速色譜(硅膠，EtOAc/cHex 8∶2)純化并得到透明油狀的標(biāo)題化合物(81mg，75％)。
MS(m/z)368[MH]+(2Cl)。
中間體464-氯-8-(2 4-二氯-苯基)-2-甲基-5硝基甲基-5，6，7，8-四氫-喹唑啉間體45(73mg，0.198mg)的POCl3(2mL)溶液回流加熱2.5小時(shí)。蒸發(fā)除去POCl3并且將剩余物溶解在CH2Cl2中，以濃NH4OH沖洗有機(jī)相，分離有機(jī)相和水相，并以CH2Cl2(3×10mL)萃取水層。以NaCl飽和水溶液沖洗合并的有機(jī)萃取液并以無水Na2SO4干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，得到粗產(chǎn)物標(biāo)題化合物(68mg，89％)并被用于下面的步驟。
MS(m/z)386[MH]+(3Cl)。
中間體474-氯-8-(2，4-二氯-苯基)-2-甲基-5，6，7，8-四氫-喹唑啉-5-甲醛在-10℃和N2氣氛下向攪拌過的中間體46(64mg，0.166mmol)的無水MeOH(1mL)溶液，逐滴加入KOH的甲醇溶液(0.1M，2.3mL)，在-10℃下攪拌15分鐘后，逐滴加入KMnO4(18mg，0.7eq)和MgSO4(20mg，1eq)在H2O(2.5mL)中的溶液，(反應(yīng)溫度保持在0℃以下)。在0℃攪拌反應(yīng)混合物24小時(shí)。然后用塞力特硅藻土過濾，以CH2Cl2沖洗硅藻土。蒸發(fā)溶劑并以CH2Cl2(3×10mL)萃取水相。以無水Na2SO4干燥合并的有機(jī)萃取液，濾去固體，蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAC 9∶1→8∶2)純化粗油得到標(biāo)題化合物65∶35非對(duì)映異構(gòu)體的混合物(27mg，46％，透明油狀物)。
MS(m/z)355[MH]+(3Cl)。
實(shí)施例1代表性通式(I-1)結(jié)構(gòu)混合物的合成5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基-丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-1)在120℃下中間體19(14mg)的純3-戊基胺(60μl)溶液攪拌8小時(shí)。然后以水稀釋反應(yīng)混合物并以Et2O(3×10mL)萃取。合并的有機(jī)萃取液水洗一次，鹽水洗一次然后用無水Na2SO4進(jìn)行干燥。濾去固體，蒸發(fā)溶劑，然后以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 8∶2)純化粗產(chǎn)物淺黃色油得到淺黃色油狀的標(biāo)題化合物(5.9mg)。
5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基-丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-2)中間體19(10.0mg)的純2-乙基-正丁基胺(100μl)溶液在密封瓶中在120℃攪拌7小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至在室溫下并直接以快速色譜(硅膠，甲苯/EtOAc 95∶5)純化得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(1.9mg)。
5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基-乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-3)中間體19(16.5mg)的純2-甲氧基-1-(甲氧基甲基)乙基胺(52.6mg)溶液在150℃下(螺旋蓋瓶)攪拌4小時(shí)。反應(yīng)混合物冷卻至室溫并直接以快速色譜(硅膠，甲苯/EtOAc 6∶4)純化得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(4.2mg)。
7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-4)中間體35(135mg，0.27mmol)和4-氨基庚烷(0.5mL，12eq)被在130℃(螺旋蓋瓶)加熱3小時(shí)。然后冷卻反應(yīng)混合物至室溫下并以CH2Cl2稀釋。蒸發(fā)除去溶劑并以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到黃色固體狀標(biāo)題化合物(29.4mg，0.06mmol，23％)。
對(duì)映體拆分第一對(duì)映體7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a(S)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊中間體41(60mg，0.119mmol)和4-氨基庚烷(178μl，10eq)在130℃(螺旋蓋瓶)被加熱3小時(shí)。以CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物然后蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(19.4mg，0.04mmol，33％，e.e.＝95％)。
HPLC分析型柱型 CHIRALPAK OD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6柱溫[] 35注射體積[μl] 10移動(dòng)相CO2/EtOH(0.15％Ipa)85/15流速[mL/min] 2.5檢測(cè)器類型 UV波長(zhǎng)[nm] 225柱壓[bar] 150標(biāo)題化合物2.55，r.t.(min)1H-NMR和MS與下表1所給出的化合物I-1-4的數(shù)據(jù)是相同的。
第二個(gè)對(duì)映體7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a(R)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊中間體43(55mg，0.109mmol)和4-氨基庚烷(163μl，10eq)在130℃(螺旋蓋瓶)被加熱3小時(shí)。以CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物然后蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(25.7mg，0.053mmol，49％，e.e.＞99％)。
HPLC分析型柱型 CHIRALPAK OD柱長(zhǎng)[cm] 25內(nèi)徑[mm] 4.6柱溫[]35注射體積[μl] 10移動(dòng)相 CO2/EtOH(0.15％Ipa)85/15流速[mL/min] 2.5檢測(cè)器類型UV波長(zhǎng)[nm] 225柱壓[bar]150標(biāo)題化合物 2.12，r.t.(min)1H-NMR和MS與下表1所給出的化合物I-1-4的數(shù)據(jù)是相同的。
5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(I-1-5)中間體19(20mg，0.046mmol)的4-氨基庚烷(100μl)溶液在130℃(螺旋蓋瓶)加熱18小時(shí)。蒸發(fā)除去胺并以快速色譜(硅膠，甲苯/EtOAc，9∶1→8∶2)純化殘留物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(7mg，0.017mmol，36％)。
對(duì)映體拆分第一個(gè)對(duì)映體5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊中間體47(120mg，0.276mmol)和4-氨基壬烷(163μl，10eq)在130℃(螺旋蓋瓶)加熱18小時(shí)。以CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物然后蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(62mg，53％，ee％＞99％)。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Rheodyne filter柱型CHIRALPAK AD柱長(zhǎng) 25內(nèi)徑(mm)4.6粒徑(μm) 5柱溫(℃)室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度(℃)室溫注射體積(μl) 20移動(dòng)相 正己烷/叔丁醇90/10a/a流速(mL/min)1檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)(nm)220-350標(biāo)題化合物 10.2r.t.(min)1H-NMR和MS與下表1所給出的化合物I-1-5的數(shù)據(jù)是相同的。
第二個(gè)對(duì)映體5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊中間體49(130mg，0.298mmol)和4-氨基庚烷(0.342mL，10eq)在130℃(螺旋蓋瓶)加熱3小時(shí)。以CH2Cl2(5mL)稀釋反應(yīng)混合物然后蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9.5∶0.5)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀的標(biāo)題化合物74mg，59％，ee％＝90％)。
HPLC分析型前置柱/保護(hù)柱 Rheodyne filter柱型 CHIRALPAK AD柱長(zhǎng)(cm) 25內(nèi)徑(mm) 4.6
粒徑(μm) 5柱溫(℃)室溫自動(dòng)進(jìn)樣器溫度(℃)室溫注射體積(μl) 20移動(dòng)相 正己烷/叔丁醇90/10a/a流速(mL/min)1檢測(cè)器類型 DAD波長(zhǎng)(nm)220-350標(biāo)題化合物 7.5，r.t.(min)，90％1H-NMR和MS與下表1所給出的化合物I-1-5的數(shù)據(jù)是相同的。
所有的分析數(shù)據(jù)在下表1中給出。
表1
實(shí)施例2代表性通式(I-2)結(jié)構(gòu)混合物的合成9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體2)，(2-1-1)中間體25(異構(gòu)體1)溶解于無水CH2Cl2(6mL)中并在-78℃下以O(shè)3(5g/hr)處理20分鐘。加入二甲基硫(1mL)并將混合物加熱至室溫?cái)嚢柽^夜。使用Na2SO4干燥反應(yīng)混合物，濾去固體，蒸發(fā)溶劑。得到粗產(chǎn)物醛的兩種非對(duì)映異構(gòu)體1∶1混合物(106mg)并且未經(jīng)進(jìn)一步純化而使用。
向上述制備的醛(30mg)的無水MeOH(1mL)溶液中加入1-乙基-丙基胺(0.010mL)然后反應(yīng)混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。加入1M的NaBH3CN的THF(0.162mL)溶液，混合物在室溫下攪拌65小時(shí)。加入另一部分的1MNaBH3CN的THF(0.162mL)溶液并在室溫下攪拌反應(yīng)3小時(shí)。蒸發(fā)溶劑并在水和EtOAc之間分配殘留液。用EtOAc(4×10mL)萃取水層，然后用鹽水(2×10mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，無水Na2SO4干燥，濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，CH2Cl2/EtOAc 7∶3)純化粗產(chǎn)物得到標(biāo)題化合物(16mg)的兩種非對(duì)映異構(gòu)體的混合物。
使用制備TLC(1％NH4OH in甲苯/EtOAc 95∶5)分離這兩種非對(duì)映異構(gòu)體，得到黃色油狀異構(gòu)體1(5.4mg)和異構(gòu)體2(5.6mg)。
所有分析數(shù)據(jù)在下表2中給出。
表2
實(shí)施例3代表性通式(I-3)結(jié)構(gòu)混合物的合成5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-1)向中間體10(20mg)的無水CH3OH(1mL)溶液中加入(氨基甲基)環(huán)丙烷(5μl，1eq).室溫下攪拌反應(yīng)混合物90分鐘然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(113μl)?；旌衔镌谑覝叵略贁嚢?8小時(shí)然后用H2O(10mL)淬滅反應(yīng)。用EtOAc(2×15mL)萃取產(chǎn)物，以無水Na2SO4干燥合并的萃取液，過濾，真空濃縮至干燥。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到無色油狀標(biāo)題化合物(5mg)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-2)向中間體10(16mg)的無水THF(1mL)溶液中加入2-甲氧基-乙基胺(4μl)。室溫下攪拌反應(yīng)混合物90分鐘然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(90μl)?；旌衔镌僭谑覝叵聰嚢?8小時(shí)然后用H2O(10mL)淬滅反應(yīng)。用EtOAc(2×15mL)萃取產(chǎn)物。以無水Na2SO4干燥合并的萃取液。過濾并真空濃縮至干燥。粗產(chǎn)物溶解于無水THF(2mL)中并加入TEA(30μl)。反應(yīng)混合物加熱回流10小時(shí)然后用H2O淬滅反應(yīng)。以EtOAc(2×10mL)萃取產(chǎn)物。無水Na2SO4干燥合并的萃取液，過濾并真空濃縮至干燥。使用制備TLC(eluted 3 times1cHex100％，2cHex/EtOAc 75∶25，3cHex/EtOAc 50∶50)純化得到淺褐色油狀標(biāo)題化合物2mg(12％)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-3)向中間體10(20mg)的無水THF(1mL)溶液中加入1-乙基-丙基胺(6.5μl)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌90分鐘然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(112μl)。混合物再在室溫下攪拌18小時(shí)然后用水(10mL)淬滅反應(yīng)。以EtOAc(2×10mL)萃取產(chǎn)物。無水Na2SO4干燥合并的萃取液，過濾并真空濃縮至干燥。粗產(chǎn)物溶解于無水甲苯(2mL)中然后加熱回流18小時(shí)。以H2O(10mL)稀釋反應(yīng)混合物并用EtOAc(3×10mL)萃取。無水Na2SO4干燥合并的萃取液，過濾并真空濃縮至干燥，以制備TLC(cHex/EtOAc 75∶25)純化得到無色油狀標(biāo)題化合物(1.6mg，7％)。
1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-4)在室溫和N2氣氛下向中間體10(35.5mg)的無水MeOH(2mL)溶液中加入2-乙基丁基胺(0.014mL)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌90分鐘。然后在室溫下加入NaBH3CN(1N THF溶液，0.2mL)并將反應(yīng)混合物在70℃加熱至3小時(shí)。然后將其冷卻至室溫并加入H2O(5mL)。減壓蒸發(fā)有機(jī)溶劑后用EtOAc(3×5mL)萃取水懸浮液。使用飽和NaCl水溶液(5mL)沖洗混合有機(jī)層，然后用無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex100％→cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到黃色固體標(biāo)題化合物(0.018g)。
1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-5)中間體30(20mg，0.046mmol)的4-氨基庚烷(100μl)在130℃(螺旋蓋瓶)加熱6.5小時(shí)，然后置于室溫18小時(shí)。蒸發(fā)胺，以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc，9∶1)直接純化殘留物得到透明油狀的標(biāo)題化合物(9mg，0.021mmol，47％)。
7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-(2，4-二-三氟甲基-苯基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-6)中間體37(230mg，0.457mmol)和4-氨基庚烷(0.68mL，10eq)在130℃(螺旋蓋瓶)加熱14小時(shí)。使用CH2Cl2稀釋反應(yīng)混合物然后蒸去溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 95∶5)純化粗產(chǎn)物得到白色固體狀標(biāo)題化合物(54mg，0.11mmol，24％)。
5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-7)在-50℃和N2氣氛下向CuBr Me2S(48mg，5eq)的無水Et2O(0.8mL)懸浮液逐滴加入PrMgBr 1M/THF(0.188mL，4eq)同時(shí)劇烈攪拌。深黃色混合物在-50℃下攪拌45分鐘然后冷卻至-78℃。加入BF3Et2O(0.024mL，4eq)，反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌20分鐘后，加入中間體28(19mg，0.047mmol)的無水THF(0.5mL)溶液，然后將反應(yīng)溫度升至室溫3小時(shí)。當(dāng)總的反應(yīng)時(shí)間4小時(shí)后，加入1∶1的濃NH4OH和NH4Cl(2mL)飽和水溶液的混合物并攪拌15分鐘。加入水和EtOAc進(jìn)行分層后然后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水洗合并的有機(jī)萃取液后以無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(3mg，0.007mmol，15％)。
4-丁基-5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-8)在-50℃和N2氣氛下向CuBr Me2S(72mg，4.3eq)的無水Et2O(1mL)懸浮液逐滴加入n-BuLi 1.6M/己烷(0.21mL，4.15eq)同時(shí)劇烈攪拌。深棕色混合物在-50℃下攪拌40分鐘然后冷卻至-78℃。加入BF3Et2O(0.043mL，4.15eq)。反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌15分鐘后，加入中間體28(33mg，0.081mmol)的無水THF(0.5mL)溶液，然后可將反應(yīng)溫度升至室溫3小時(shí)。當(dāng)總的反應(yīng)時(shí)間3.5小時(shí)后，加入1∶1的濃NH4OH和NH4Cl(2mL)飽和水溶液的混合物并攪拌混合物15分鐘。加入水和EtOAc，進(jìn)行分層后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水沖洗合并的有機(jī)萃取液然后以無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物得到淺黃色油狀標(biāo)題化合物(異構(gòu)體1順式)，(16mg，0.037mmol，46％)。也分離得到一小部分反式異構(gòu)體2。
5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-9)在-60℃和N2氣氛下向CuBr Me2S(27mg，2eq)的無水Et2O(0.2mL)懸浮液加入丙基溴化鎂溶液(0.2mL，2eq在室溫下和N2氣氛中將Mg(27mg，1.1mmol)和丙基溴加入無水Et2O(1.5mL)中反應(yīng)1小時(shí)制備的)。再以0.2mL無水Et2O稀釋黃色不均勻的反應(yīng)混合物并在-60℃下攪拌30分鐘。然后冷卻至-78℃并加入BF3·Et2O(17μl，2eq)。在-78℃下10分鐘后，加入中間體28(27mg，0.067mmol)的無水THF(0.4mL)溶液，反應(yīng)混合物緩慢加熱至室溫(4小時(shí))。然后使用1∶1的濃NH4OH/飽和水溶液NH4Cl混合物稀釋并在室溫下攪拌10分鐘。使用CH2Cl2(4×20mL)萃取水相然后以H2O(2×20mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液并以無水Na2SO4進(jìn)行干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，9∶1→7∶3 cHex/EtOAc)純化粗產(chǎn)物得到透明油狀標(biāo)題化合物(4mg，0.009mmol，14％)。
4，5二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊(3-1-10)在N2氣氛下向冷卻至-50℃的CuBr Me2S(65mg，4.3eq)的無水Et2O(1mL)懸浮液加入，然后逐滴加入1.6M BuLi(0.184mL，0.295mmol，4eq)溶液同時(shí)劇烈攪拌。深棕色混合物在-50℃至-40℃下攪拌40分鐘然后冷卻至-78℃，加入BF3Et2O(0.037mL，4eq)。反應(yīng)混合物在-78℃下攪拌15分鐘后，加入中間體28(30mg，0.074mmol)的無水THF(0.5mL)溶液，然后將反應(yīng)溫度升至室溫3小時(shí)。當(dāng)總的反應(yīng)時(shí)間3.5小時(shí)后，加入1∶1的濃NH4OH和飽和NH4Cl水溶液(1mL)的混合物并攪拌15分鐘。加入水和EtOAc進(jìn)行分層后用EtOAc(3×10mL)萃取水相。用水沖洗合并的有機(jī)萃取液后以無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(cHex/EtOAc 9∶1)純化粗產(chǎn)物(28mg)得到無色油狀標(biāo)題化合物(12mg，0.028mmol，37％)。
所有分析數(shù)據(jù)在下表3中給出。
表3
實(shí)施例4代表性通式(1-4)結(jié)構(gòu)化合物的合成方法5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，6，8-三氮雜苊(4-1-1)在室溫和N2氣氛下向中間體47(22mg，0.062mmol)的無水MeOH(1mL)溶液中加入1-乙基丙胺(9μl，1.25eq)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1.25小時(shí)。然后加入NaBH3CN 1.0M/THF(0.15mL，2.4eq)和反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)，然后在-18℃下攪拌4天。蒸發(fā)溶劑后殘留物以EtOAc/H2O進(jìn)行分配。相分離后以EtOAc(3×5mL)萃取水相。以飽和NaCl水溶液(1×5mL)沖洗合并的有機(jī)萃取液，以無水Na2SO4干燥。濾去固體并蒸發(fā)溶劑。以快速色譜(硅膠，cHex/EtOAc 9∶1→8∶2)純化得到透明油狀的標(biāo)題化合物(3mg，0.008mmol，12％)。
所有分析數(shù)據(jù)在下表4中給出。
表4 實(shí)施例5CRF結(jié)合活性通過CRF1和CRF2 SPA實(shí)驗(yàn)中，化合物在體外從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢(CHO)細(xì)胞膜所表達(dá)的重組人類CRF受體中分別取代125I-oCRF和125I-Sauvagine的能力來測(cè)定CRF結(jié)合親和性。為了制備膜，先將CHO細(xì)胞從融合T形燒瓶收集到裝有SPA緩沖液中(HEPES/KOH 50mM，EDTA 2mM；MgCl210mM，pH7.4.)的50ml離心試管中，在與Polytron均勻混合后進(jìn)行離心分離(在4℃下50′000g，5minBeckman離心分離機(jī)，JA20轉(zhuǎn)子)。將小片重新懸浮、混合均勻，然后按照前面的方式離心分離。
SPA試驗(yàn)是在孔板(Optiplate)的每個(gè)孔中將100μL反應(yīng)試劑混合物加入到1μL化合物的稀釋液(100％DMSO溶液)中進(jìn)行。可將SPA緩沖劑、WGASPA珠(2.5mg/mL)、BSA(1mg/mL)和膜(每毫升CRF1、CRF2各50、5μg蛋白質(zhì))以及50pM放射配體混合來制備測(cè)試用的混合物。該孔板在室溫下溫育過夜(＞18小時(shí))，然后用帶有WGA-SPA125I計(jì)數(shù)器的Packard Topcount讀取數(shù)據(jù)。
實(shí)施例6CRF功能測(cè)試通過抑制效果功能測(cè)試來表征本發(fā)明的化合物。以CRF刺激人類CRF-CHO細(xì)胞并且通過測(cè)量cAMP的累積來評(píng)估受體活化作用。
從融合T形燒瓶取出CHO細(xì)胞，然后與不含G418的培養(yǎng)基重新混合并將其分裝在96-孔孔板，25′000c/孔，100μL/孔并溫育過夜。溫育完成后以100μL 37℃的cAMP IBMX緩沖液(5mM KCl，5mM NaHCO3，154mM NaCl，5mM HEPES，2.3mM CaCl2，1mM MgCl2；1g/L葡萄糖，pH7.4加上1mg/mLBSA和1mM IBMX)以及1μL拮抗劑的純DMSO稀釋液替換該介質(zhì)。在37℃無CO2條件下在板培養(yǎng)箱中再溫育10分鐘后，加入1μL拮抗劑的純DMSO稀釋液。按照前面的步驟，在板溫育10分鐘后，以Amersham RPA 538成套儀表測(cè)試cAMP細(xì)胞的含量。
本說明書所有引用的出版物，包括但不限于專利和專利申請(qǐng)，都用作參考文獻(xiàn)，就象每份個(gè)別出版物具體和單獨(dú)全文用作參考文獻(xiàn)。
可以理解，本發(fā)明包括特定的或優(yōu)選的上述種類的所有組合。
本申請(qǐng)的說明書和權(quán)利要求書部分可以作為任何后續(xù)申請(qǐng)要求優(yōu)先權(quán)的基礎(chǔ)。上述后續(xù)申請(qǐng)的權(quán)利要求可以涉及這里所述任何特征或它們的組合。它們可以是化合物、組合物，方法或用途權(quán)利要求、或?qū)嵤├男问剑也皇芷湎拗啤?br>
權(quán)利要求
1.通式(I)的化合物，包括其立體異構(gòu)體，前藥及其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物 其中R是芳基或雜芳基，其中每個(gè)上述基團(tuán)R可被1到4個(gè)獨(dú)立地選自如下基團(tuán)的基團(tuán)所取代鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6單或雙烷基氨基，硝基，氰基以及基團(tuán)R4；R1是氫，C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷基，鹵代C1-C6烷氧基，NH2，鹵素或氰基；R2是氫或C(H)n(R5)q(CH2)pZR6；R3是氫，C2-C6烯基，C2-C6炔基或[CH(R5)(CH2)p]mZR6；R4是可包含一個(gè)或多個(gè)雙鍵的C3-C7環(huán)烷基；芳基；或5-6員雜環(huán)；其中每個(gè)上述基團(tuán)R4可被一個(gè)或多個(gè)選擇選自如下基團(tuán)所取代鹵素，C1-C6烷基，C1-C6烷氧基，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6單或雙烷基氨基，硝基，以及氰基；R5是氫，C2-C6烯基，C2-C6炔基或(CH2)pZR6；R6是可被一個(gè)或多個(gè)選擇選自如下基團(tuán)所取代的C1-C6烷基鹵素，鹵代C1-C6烷基，C2-C6烯基，C2-C6炔基，鹵代C1-C6烷氧基，C1-C6烷氧基，C1-C6單或雙烷基氨基，硝基，氰基以及基團(tuán)R4；Y和X獨(dú)立地為碳或氮原子；M和n獨(dú)立地為0或1；p是0或1到4的整數(shù)；q是1或2；Z是鍵或，O，NH或S。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，具有通式(II)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，m，n和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的化合物，具有通式(III)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，m，n和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，具有通式(IIa)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，n和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，具有通式(IIb)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，n和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，具有通式(IIc)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，m和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物，具有通式(IId)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3，m和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，具有通式(Ia-1)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，具有通式(Ib-1)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的化合物，具有通式(Ic-1)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3和Y根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
11.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，具有通式(I-1)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
12.根據(jù)權(quán)利要求8所述的化合物，具有通式(I-2)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
13.根據(jù)權(quán)利要求7所述的化合物，具有通式(I-3)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
14.根據(jù)權(quán)利要求9所述的化合物，具有通式(I-4)結(jié)構(gòu) 其中R，R1，R2，R3根據(jù)權(quán)利要求1所定義。
15.根據(jù)權(quán)利要求1至14任一項(xiàng)所述的化合物，其中R2和R3不同時(shí)為氫。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至15任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1是C1-C3烷基或鹵代C1-C3烷基。
17.根據(jù)權(quán)利要求1至16任一項(xiàng)所述的化合物，其中R是芳基，選自2，4-二氯苯基，2-氯-4-甲基苯基，2-氯-4-三氟甲基苯基，2-氯-4-甲氧基苯基，2，4，5-三甲基苯基，2，4二甲基-苯基，2-甲基-4-甲氧基苯基，2-甲基-4-氯苯基，2-甲基-4-三氟甲基苯基，2，4二甲氧基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-氯苯基，3-甲氧基-4-氯苯基，2，5二甲氧基-4-氯苯基，2-甲氧基-4-異丙基苯基，2-甲氧基-4-三氟甲基苯基，2-甲氧基-4-異丙基苯基2-甲氧基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-氯苯基，2，4-二-三氟甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲基苯基，2-三氟甲基-4-甲氧基苯基，2-溴-4-異丙基苯基，4-甲基-6二甲基氨基吡啶-3-基，4-二甲基氨基-6-甲基-吡啶-3-基，6二甲基氨基-吡啶-3-基和4-二甲基氨基-吡啶-3-基。
18.根據(jù)權(quán)利要求1至17任一項(xiàng)所述的化合物，選自如下化合物5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-十氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(2-甲氧基-1-甲氧基甲基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a(S)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；7-甲基-1-(1-丙基丁基)-5-[4-(1，1，2-三氟乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a-(R)，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(S)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1-(1-丙基丁基)-1，2，2a-(R)，3，4，5，5a，8b-八氫-1，5，6，8-四氮雜苊；9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體1)和9-(2，4-二氯苯基)-4-(1-乙基丙基)-2-甲基-5，6，6a，7，8，9-六氫-4H-1，3，4-三氮雜非那烯(異構(gòu)體2)；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-甲氧基乙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；1-(2，4-二氯苯基)-5-(2-乙基丁基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；1-(2，4-一氯苯基)-7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；7-甲基-5-(1-丙基丁基)-1-[4-(1，1，2-三氟-乙基)-2-三氟甲基苯基]-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；4-丁基-5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-環(huán)丙基甲基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-4-丙氧基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；4，5二丁基-1-(2，4-二氯苯基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，5，6，8-四氮雜苊；5-(2，4-二氯苯基)-1-(1-乙基丙基)-7-甲基-1，2，2a，3，4，5-六氫-1，6，8-三氮雜苊。
19.一種制備根據(jù)權(quán)利要求1所述的通式(I)化合物的方法，其中R3不為氫且m是1，其中包括化合物(VI)，其中R7是C1-4直鏈或支鏈烷基， 與有機(jī)金屬化合物GM的反應(yīng)，其中G是根據(jù)權(quán)利要求1中所定義的C2-C6烯基，C2-C6炔基或[CH(R5)(CH2)p]mZR6，且M為金屬；一種制備通式(I)化合物的方法，其中R3是氫，包括還原式(Va)化合物 或者一種制備式(I)化合物的方法，其中X是碳，包括通過加熱式(VII)化合物產(chǎn)生的反應(yīng)， 其中L是選自鹵素，和磺酸活性殘基的離去基，和La代表能夠在有胺R2NH2(IX)時(shí)使OLa成為良好離去基的適宜的活性基團(tuán)。
20.根據(jù)權(quán)利要求1到18任一項(xiàng)所述化合物在制備治療由CRF(促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子)介導(dǎo)的疾病的藥物中的用途。
21.根據(jù)權(quán)利要求20所述的化合物用途，它用于制備治療抑郁癥和焦慮癥的藥物。
22.根據(jù)權(quán)利要求20所述的化合物用途，它用于制備治療IBS(刺激性腸道疾病)和IBD(炎性腸道疾病)的藥物。
23.根據(jù)權(quán)利要求1到18任一項(xiàng)所述化合物，它用于治療由CRF(促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子)介導(dǎo)的疾病。
24.根據(jù)權(quán)利要求1-18任一項(xiàng)所述的化合物，它用于治療抑郁癥和焦慮癥。
25.根據(jù)權(quán)利要求1-18任一項(xiàng)所述的化合物，它用于治療IBS(刺激性腸道疾病)和IBD(炎性腸道疾病)。
26.一種藥物組合物，包括根據(jù)權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)所述的化合物和一種或多種藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑。
27.一種治療哺乳動(dòng)物，包括人，特別是治療由CRF介導(dǎo)的疾病的方法，包括給藥有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)所述的化合物。
28.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，用于治療抑郁癥和焦慮癥，包括給藥有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)所述的化合物。
29.根據(jù)權(quán)利要求27所述的方法，用于IBS(刺激性腸道疾病)和IBD(炎性腸道疾病)，包括給藥有效量的根據(jù)權(quán)利要求1至18任一項(xiàng)所述的化合物。
30.根據(jù)權(quán)利要求1至18任一所述的化合物，用于治療疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式(I)的三環(huán)嘧啶化合物，包括其立體異構(gòu)體，前藥和藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物，其中R是芳基或雜芳基，其中每個(gè)上述基團(tuán)R可被1到4個(gè)獨(dú)立地選自包括如下基團(tuán)所取代鹵素，C
文檔編號(hào)A61P25/24GK1512883SQ02810745
公開日2004年7月14日 申請(qǐng)日期2002年4月30日 優(yōu)先權(quán)日2001年4月30日
發(fā)明者羅馬諾·迪法比奧, 法布里齊奧·米歇利, 亞歷山德拉·帕斯奎里洛, 伊維斯·圣丹尼斯, 圣丹尼斯, 德拉 帕斯奎里洛, 羅馬諾 迪法比奧, 齊奧 米歇利 申請(qǐng)人:葛蘭素集團(tuán)有限公司