專利名稱：酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用。
近年研究表明，以數(shù)個氨基酸結(jié)合而成的低肽具有比多個氨基酸更好的營養(yǎng)和生理功能，其中許多多肽類還具有原蛋白質(zhì)或組成氨基酸所沒有的新功能。因而自80年代國內(nèi)外對肽類的研究不斷深入。現(xiàn)今已有眾多產(chǎn)品廣泛用于食品加工，例如用于特制育兒奶粉、飲料、口服液、流食、運動員等專用飲料和食品、治療食品、過敏反應專用食品、養(yǎng)顏護膚化妝品等領域，隨著研究的不斷深化。新的應用領域還在不斷地被拓展，特別在醫(yī)藥領域。MARUYAMAS等從牛乳酪蛋白的蛋白水解物中獲得了十二肽、七肽、五肽及六肽，這些肽的生理功效現(xiàn)已證實對高血壓的ACE有明顯明顯抑制作用，即作用于產(chǎn)生高血壓的原因，因此它對正常人而言可以長期攝取，起到保健、營養(yǎng)雙重作用，極其安全。1986、88年，Georgi、Hosono等發(fā)現(xiàn)酪蛋白在特定的酸制劑作用下，酪蛋白水解中有抗誘變性的活性肽存在，這些肽如繼續(xù)水解到氨基酸水平將失去抗誘變性。
目前在國外，各種肽的研究在繼續(xù)深化，酪蛋白磷肽的研究最為明朗，并且已有大量的、各類型的保健品上市。酪蛋白活性多肽具有抗過敏性、抗高血壓、抗誘變、免疫調(diào)節(jié)，延緩衰老、激素分泌和細胞繁殖，增強吞噬細胞，保護表皮細胞，防止黑色素沉淀等多種功效。國外酪蛋白復合(活性)多肽在保健品、醫(yī)藥、飲料、嬰兒奶制品、咖哩飯、糖果，營養(yǎng)強化劑、飼料添加劑、家庭副食品、食品添加劑等領域以不同的功效起著特殊的作用。實踐已證實它非常安全，無毒害，其獨特的生理功效等優(yōu)點，顯示出它具有強大的優(yōu)越性。1998年，德國已將酪蛋白磷肽純化后用于醫(yī)藥，并列入德國國家藥典中。在美國，含肽藥物已獲準用來醫(yī)治某些疾病，諸如侏儒癥、不育癥、早熟癥等。還有些肽類可能用來治療癌、抗抑郁、防治失眠等。后天免疫缺乏病及老年性癡呆癥等。
本發(fā)明的公開本發(fā)明的目的是為了提供一種將酪蛋白及多肽添加至中草藥或中成藥中，由肽在中草藥中起導向作用，帶領中草藥中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治療效果、縮短治療時間。
本發(fā)明的目的可通過如下措施來實現(xiàn)一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用是將酪蛋白和/或多肽添加至中草藥/中成藥中。
在中草藥/中成藥中添加其總量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽。所述的酪蛋白及多肽選自市售產(chǎn)品。所述的多肽選自酪蛋白多肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、魚蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一種。
本發(fā)明相比現(xiàn)有技術具有如下優(yōu)點本發(fā)明在中草藥或中成藥中添加酪蛋白及多肽，使在中草藥的植物蛋白基礎上添加大分子多肽類蛋白質(zhì)；使多肽成為中草藥的導向物質(zhì)，帶領中草藥中的有效成份、有方向、有目的地作用于病灶，可有效地提高治療效果，縮短治療時間。
本發(fā)明的實施本發(fā)明還將結(jié)合實施例作進一步詳述實施例1將酪蛋白多肽添加至中成藥貞芪扶正沖劑中。添加酪蛋白復合多肽的扶正沖劑的原料配伍為黃芪30g、女貞子12g、地黃20g、枸杞30g、黨參30g、甘草15g、當歸8g、茯苓10g、柴胡6g、大棗20g、酪蛋白多肽18g。
本實施例，經(jīng)對衰老模型小鼠免疫作用及過氧化作用試驗證實酪蛋白多肽添加至貞芪扶正沖劑中可增強衰老模型小鼠腦組織SOD的活性、降低過氧化脂質(zhì)產(chǎn)物的含量的作用。
本實施例的實驗方法如下1.材料
1.1材料1.1.1動物昆明種小白鼠，雌雄各半，體重20.0±1.0g，由衛(wèi)生部蘭州生物制品研究所提供。動物合格證號醫(yī)動字第14-001號。
1.1.2標準測試盒分別由中國人民解放軍總醫(yī)院科技開發(fā)中心放免研究所、北方放免研究所、南京建成生物工程研究所提供標準測試盒，并由蘭州醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院核醫(yī)學科及甘肅中醫(yī)學院檢測。
2.方法及結(jié)果2.1對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及腦組織MDA含量的影響小鼠110只，雌雄各半，體重20.0±1.0g，隨機分為11組，每組10只，生理鹽水組ig等容量生理鹽水6周；余實驗小鼠分別在頸背部皮下注射5％D-半乳糖并同時ig相應的藥物，模型組ig等容量生理鹽水液0.5ML/日，多肽組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg及1.2g/kg、0.6g/kg；復合生命肽I組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg+貞芪扶正沖劑1.95g/kg、多肽1.2g/kg+貞芪扶正沖劑1.3g/kg、多肽0.6g/kg+貞芪扶正沖劑0.65g/kg；復合生命肽II組按大、中、小劑量組ig多肽1.8g/kg+枸杞0.03g/kg、多肽1.2g/kg+枸杞0.02g/kg、多肽0.6g/kg+枸杞0.01g/kg，每日一次，六周末分別取大腦組織制成10％的組織勻漿分別檢測。過氧化物岐化酶活性的檢測應用放射免疫法均按標準測試盒說明測定，丙二醛含量的檢測均應用7220分光度計按標準測試盒說明測定。
2.1.1復合生命肽I組對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表1對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動物數(shù) SODMIDA模型組 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762*26.328±1.222**多肽組(大) 10 28.658±0.878 27.517±0.891(中) 10 28.893±1.198 26.850±0.835*(小) 10 31.233±2.416*26.707±1.271*注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.1.2復合生命肽I組對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表2對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動物數(shù) SOD MDA模型組 10 27.994±0.33727.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762**26.328±1.222**復合生命肽I組(大) 10 31.311±2.753**25.672±1.039**(中) 10 36.340±1.690**24.896±0.764**(小) 10 42.197±1.075**22.655±1.636**注與模型組比較**P＜0.012.1.3復合生命肽II組對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響表3對衰老模型小鼠腦組織SOD活性及MDA含量的影響(X±S)動物數(shù) SODMDA模型組 10 27.994±0.337 27.948±0.967生理鹽水組 10 34.793±1.762**26.328±1.222**復合生命肽II組(大) 10 29.650±1.458*26.931±1.043*(中) 10 41.003±2.809**23.776±0.866**(小) 10 44.334±1.693**22.759±1.318**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2對衰老模型小鼠免疫功能的影響小鼠150只，雌雄各半，實驗分15組及給藥同上，六周末分別取血清檢測白細胞介素2(IL-2)、白細胞介素6(IL-6)含量的檢測均放射免疫法按標準測試盒說明測定。
2.2.1多肽組對衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表4對衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動物數(shù)IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**多肽組(大) 10 1.002±0.076(中) 10 1.002±0.060(小) 10 1.167±0.116*注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2.2復合生命肽I組對衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表5對衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動物數(shù) IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**復合生命肽I組(大) 10 1.190±0.095**(中) 10 1.241±0.068**(小) 10 1.330±0.125**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.012.2.3復合生命肽II組對衰老模型小鼠血清IL-2含量的影響表6對衰老模型小鼠含量的血清IL-2含量的影響(X±S)動物數(shù) IL-2模型組 10 0.949±0.068生理鹽水組 10 1.211±0.076**復合生命肽I組(大) 10 1.050±0.082*(中) 10 1.174±0.101**(小) 10 1.260±0.086**注與模型組比較*P＜0.05**P＜0.013、討論衰老是生命過程中正常而又復雜的生理現(xiàn)象，是機體內(nèi)各種生化反應的綜合過程。隨著年齡的增長，自由基產(chǎn)生增多而清除自由基的相關酶活性下降以及機體免疫功能下降等多種因素均是機體發(fā)生衰老的重要機理。超氧化物岐化酶(SOD)可催化氧自由基的岐化反應，是機體清除氧自由基的重要酶，而機體隨著年齡的增長，氧自由基產(chǎn)生增加，同時組織SOD活性降低，導致氧自由基堆積。自由基(如O2、-OOH等)可通過過氧化作用攻擊細胞膜、RNA和蛋白質(zhì)等成分，引起脂質(zhì)過氧化和促進分子交聯(lián)、DNA基因突變和DNA復制異常；促進細胞膜上的不飽和脂肪酸產(chǎn)生過氧化反應，形成丙二醛(MDA)等，同時可形成大分子脂褐素(Lipofascin，LK)在酶體中沉積，導致細胞功能嚴重受損，機體因而逐漸趨于衰老。
人到中年以后，正常免疫功能隨著年齡增長而逐漸衰退，免疫功能衰退是人體衰老的原因之一。IL-2的主要生物活性是促進CTL和NK細胞增殖；促進B細胞分化和增殖，促進抗體生成，誘導生成淋巴因子激活的殺傷細胞。LI-2和IL-2受體系統(tǒng)，是T細胞轉(zhuǎn)化和混合淋巴細胞反應的介質(zhì)。老年人產(chǎn)生IL-2能力，IL-2受體表達能力及自身混合淋巴細胞反應能力降低，是T細胞分裂能力降低的主要原因。IL-2在免疫應答、免疫調(diào)節(jié)，在抗腫瘤免疫中具有重要作用，因而IL-2產(chǎn)生減少可加速人體衰老的過程。
應用中醫(yī)藥防治惡性腫瘤及延緩衰老亦是近年來研究的熱點，并取得了長足進展。傳統(tǒng)醫(yī)學從整體觀點出發(fā)，如《素問、生氣通天論》曰“陰平陽秘，精神乃治；陰陽離決，精氣乃絕”，指出機體的衰老以及死亡的根本原因在于六淫外邪，五臟虛損所致的陰陽失調(diào)或離決，扶正固體、協(xié)調(diào)陰陽乃延緩衰老之關鍵。惡性腫瘤屬中醫(yī)“癌”、“巖”、“惡腫”、“積聚”等范疇，系正氣虛弱、留滯客邪、氣滯血瘀、邪毒積聚、蘊郁成塊所致，其治療法則有扶正固本法、通經(jīng)活絡法、活血化瘀法、軟堅散結(jié)法、疏肝理氣法等。如枸杞等為延緩衰老、抗腫瘤的要藥。
現(xiàn)代藥理研究發(fā)現(xiàn)枸杞子對KATO-III細胞有明顯的抑制作用，主要表現(xiàn)為抑制DNA合成、干擾細胞分裂增殖；超微結(jié)構顯示細胞變化、細胞器受不同程度的破壞。枸杞多糖注射可顯著促進脾細胞增殖，LAK細胞抗瘤活性升高，體外IL-2用量減少75％。尤以提高快速LAK活性為明顯。枸杞子的丙酮提取液對致癌劑誘導的突變株TA98、TA100有抑制突變作用，抑制率分別為91.8％、82.6％。說明枸杞子有抗突變物質(zhì)和具有抗御、阻斷致突變作用。枸杞提取液在試管內(nèi)及體內(nèi)試驗均有明顯抑制小鼠肝過氧化脂質(zhì)(LPO)的生成作用，并呈劑量反應關系；并使活體小鼠血中谷肽過氧化物酶(GSH-PX)活力和紅細胞超氧化物岐化酶(SOD)活力增高人體試驗顯示可明顯抑制血清LPO生成，使血中GSH-PX活力增高。預先口服枸杞，可以明顯降低誘變劑絲裂霉素C誘發(fā)的老年人姐妹染色單體互換頻率，說明枸杞能提高老年人DNA修復能力，對遺傳物質(zhì)損傷有保護作用，提示枸杞提取液具有延緩衰老作用。葛根有效成分S86019對人急性早幼粒細胞白血病細胞株HL-60細胞增殖有明顯抑制作用，是一個有效的HL-60細胞分化誘導劑。有研究證實，葛根有明顯誘生腫瘤壞死因子(TNF)作用。
將中醫(yī)藥與多肽類物質(zhì)有機結(jié)合研制的復合生命肽保健、治療效果更佳，應用于人們保健治療中，適應人類醫(yī)療“回歸大自然”的趨勢，可以滿足綠色天然藥品的社會需要，為人類身體的健康開拓一片新的保健、治療天地。
本實驗過程觀察了多肽組、復合生命肽I組(多肽+扶正沖劑)、復合生命肽II組(多肽+枸杞)對D-半乳糖所致衰老小鼠腦組織SOD活性的影響作用，實驗結(jié)果發(fā)現(xiàn)復合生命肽I組、復合生命肽II組、復合生命肽III組均有一定的增強衰老模型小鼠腦組織SOD的活性、降低過氧化脂質(zhì)產(chǎn)物(MDA)含量的作用，且I、II組強與I組，并與劑量呈正相關，表明該制劑具有抗過氧化作用，此作用可能為該制劑的抗衰老作用機理之一。
另外，多肽I組、復合生命肽I組、復合生命肽II組勻可增加衰老模型小鼠血清白細胞介素2(IL-2)含量的作用，且I、II組強與多肽組，并與劑量呈正相關。
綜上所述，復合生命肽可增強衰老模型小鼠抗過氧化作用以及免疫功能，從而可發(fā)揮延緩衰老過程。
實施例二將酪蛋白添加至傳統(tǒng)中成藥香砂養(yǎng)胃丸中。其配伍為黨參20g、白術10g、茯苓8g、蒼術5g、甘草5g、半夏曲6g、陳皮5g、砂仁25g、木香20g、香附10g、枳殼10g、厚樸15g、六神曲10g、南山楂20g、麥芽15g、菜菔子10g、酪蛋白36g。
實施例三將大豆糖聚肽添加至傳統(tǒng)中成藥朱砂安神丸中。其配伍為朱砂200g、黃蓮300g、生地黃200g、當歸200g、甘草200g、大豆糖聚肽44g。
實施例四將白蛋白肽添加至傳統(tǒng)中成藥牛黃解毒片中。其配伍為牛黃5g、大黃200g、黃芩150g、石膏200g、桔梗100g、雄黃50g、冰片25g、甘草50g、白蛋白肽200g。
權利要求
1.一種酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用；其特征在于將酪蛋白和/或多肽添加至中草藥/中成藥中。
2.如權利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用，其特征在于在中草藥/中成藥中添加其總量的0.1-40％的酪蛋白和/或多肽。
3.如權利要求1所述的酪蛋白及多肽在中草藥/中成藥中的應用，其特征在于所述的多肽選自酪蛋白肽、大豆糖聚肽、白蛋白肽、魚蛋白肽、谷物蛋白肽中的至少一種。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酪蛋白及其復合多肽在中草藥/中成藥中的應用，其特征在于將酪蛋白及其復合多肽添加至中草藥/中成藥中。
文檔編號A61K47/42GK1401391SQ0211444
公開日2003年3月12日 申請日期2002年2月5日 優(yōu)先權日2002年2月5日
發(fā)明者陸曉民, 丁亞鋒 申請人:陸曉民