專利名稱：堿式?jīng)]食子酸鉍在抑制氧化氮合成酶的形成中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及堿式?jīng)]食子酸鉍(bismuth subgallate)在抑制氧化氮合成酶的形成中的新應(yīng)用。
已知的是，已經(jīng)鑒別出三種獨特的同工型NOS可誘導(dǎo)型(iNOS)以及稱為神經(jīng)元NOS(nNOS)和內(nèi)皮NOS(eNOS)的兩種組成型。NOS、特別是iNOS與以下病癥有關(guān)血小板凝聚、體內(nèi)平衡過程(homeostatic processes)、組織損傷、炎性病癥、休克、免疫疾病、胃腸道能動性疾病以及中樞神經(jīng)系統(tǒng)和周圍神經(jīng)系統(tǒng)的疾病、糖尿病(Epstein，The New England Journal of Medicine，1993，329(27)2002-2011；Hobbs等人，Annu.Rev.Pharmacol.Toxicol.，1999，39191-220；Pfeilschfter等人，CellBiology International，1996，20(1)51-58)。據(jù)信，神經(jīng)病與糖尿病性潰瘍密切相關(guān)，并因此認(rèn)為神經(jīng)病是大多數(shù)低端糖尿病性潰瘍的主要促成因素(N.Engl.J.Med.，第343卷(11)，2000年9月14日，第787-793頁；以及J.Fam.Pract.，第49卷(11)增補本，2000年11月，第S40-S48頁)。NOS還與氧化氮導(dǎo)致的病癥有關(guān)，例如組織損傷、腦缺血、癲癇、免疫性以及炎癥(Mulligan等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA，1991，886338-6342)。
假如以上成立，預(yù)期能夠降低NOS的量或者活性的化合物或者藥物可用作治療劑。例如，USP6,030,985公開了可用于治療和預(yù)防其中抑制氧化氮合成酶而對其有益的病癥的脒衍生物，所述病癥例如是休克、精神分裂癥、焦慮、以及疼痛。USP6,071,906提供了包含脒基衍生物的藥物組合物，該脒劑衍生物可用作氧化氮合成酶的抑制劑。USP6,133,306描述了通過給藥有效量的硝基吲唑來治療神經(jīng)變性疾病，該硝基吲唑是神經(jīng)元氧化氮合成酶的抑制劑。USP6,235,747涉及某些具有氧化氮合成酶(NOS)抑制劑活性的6-苯基-吡啶-2-基胺衍生物，其還涉及包含該衍生物的藥物組合物以及在治療和預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中的應(yīng)用。
堿式?jīng)]食子酸鉍是通過沒食子酸、冰醋酸及硝酸鉍之間的反應(yīng)而制得的，其化學(xué)式為C7H5BiO6。已知堿式?jīng)]食子酸鉍可作為口服止瀉劑治療急性或慢性腹瀉，因其可與腸道中由于異常發(fā)酵產(chǎn)生的大量硫化氫形成硫化鉍，減少氣體對大腸刺激所造成的腹瀉及疼痛。堿式?jīng)]食子酸鉍由于屬苯的衍生物，故亦可作為防腐劑。
在USP6,232,341中公開了用于治愈傷口的藥物組合物，其包括堿式?jīng)]食子酸鉍和龍腦(borneol)。但是，現(xiàn)有技術(shù)都沒有教導(dǎo)或者提示堿式?jīng)]食子酸鉍在抑制NOS合成酶方面的應(yīng)用。
因此，本發(fā)明提供堿式?jīng)]食子酸鉍在抑制NOS形成中的新應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是提供在受治療者中抑制氧化氮合成酶(NOS)形成的方法，其包括向需要治療的受治療者給藥有效量的堿式?jīng)]食子酸鉍，其中所述堿式?jīng)]食子酸鉍是以有效抑制NOS形成的量給藥的。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，該方法包括向需要治療的受治療者給藥有效量的堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合，其中所述堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合是以有效抑制NOS形成的量給藥的。
本發(fā)明的再一個目的是提供用于抑制氧化氮合成酶形成的藥物組合物，其包括足以抑制NOS形成的有效量堿式?jīng)]食子酸鉍以及藥物學(xué)上可接受的載體。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，本發(fā)明的藥物組合物進(jìn)一步包括龍腦，對抑制NOS的形成提供協(xié)同作用。
圖2顯示了龍腦在經(jīng)活化的RAW 264.7細(xì)胞中抑制NO形成的作用。
圖3顯示了堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合在經(jīng)活化的RAW 264.7細(xì)胞中抑制NO形成的作用。
在此所用術(shù)語“龍腦”是指從龍腦香樹(Dryobalanops aromatica)等植物中分離的產(chǎn)物，其化學(xué)式為C10H17OH。
在此所用術(shù)語“有效量”是指足以抑制氧化氮合成酶的形成并在患者中產(chǎn)生改善作用的量。藥物組合物本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了包含堿式?jīng)]食子酸鉍的藥物組合物在抑制氧化氮合成酶形成中的新用途。
本發(fā)明提供用于抑制氧化氮合成酶形成的藥物組合物，其包含足以抑制NOS形成的有效量的堿式?jīng)]食子酸鉍以及藥物學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選包含0.05-40重量％的堿式?jīng)]食子酸鉍。更優(yōu)選的是，堿式?jīng)]食子酸鉍在本發(fā)明藥物組合物中的量為1-20重量％。最優(yōu)選的是，堿式?jīng)]食子酸鉍在本發(fā)明藥物組合物中的量為2-10重量％。
根據(jù)本發(fā)明，藥物組合物中還包含協(xié)同有效地抑制氧化氮合成酶的龍腦。優(yōu)選地，藥物組合物包含1-30重量％的堿式?jīng)]食子酸鉍和0.05-10重量％的龍腦。更優(yōu)選的是，堿式?jīng)]食子酸鉍和龍腦在本發(fā)明藥物組合物中的量分別是3-15重量％和0.1-5重量％。最優(yōu)選的是，堿式?jīng)]食子酸鉍和龍腦在本發(fā)明藥物組合物中的量分別是4-8重量％和0.5-1重量％。
除上述活性成分外，本發(fā)明的藥物組合物還可包含其他有助于抑制氧化氮合成酶的常規(guī)藥物，如以下文獻(xiàn)中公開的化合物WO94/12165、WO94/14780、WO93/13055、EP0446699A1、USP5,132,453、USP6,030,985、USP6,071,906、USP6,133,306、和USP6,235,747。在根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物中加入這些常規(guī)藥物對于本領(lǐng)域技術(shù)人員是容易的。
根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明藥物組合物的合適劑量可由臨床醫(yī)師或者本領(lǐng)域技術(shù)人員通過常規(guī)方法來確定，并且可包括上述公開堿式?jīng)]食子酸鉍和龍腦的現(xiàn)有技術(shù)中所討論的相應(yīng)劑量。這些文獻(xiàn)的內(nèi)容在此并入作為參考。
在任何情況下，醫(yī)師或者本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠確定對于個體患者最合適的實際劑量。該劑量可根據(jù)以下因素變化待治療的病癥、以及具體治療患者的年齡、體重、性別和反應(yīng)。
根據(jù)本發(fā)明，藥物組合物可配制成局部、經(jīng)口、非胃腸道或者其他給藥形式的劑型。在本發(fā)明藥物組合物中所用的合適的藥物學(xué)上可接受的載體包括但不限于水、鹽溶液、醇、聚乙二醇、明膠、糖(如乳糖、直鏈淀粉或者淀粉)、硬脂酸鎂、滑石、硅酸、粘性石蠟、脂肪酸酯、羥甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮等。
在非胃腸道給藥時，可注射的無菌溶液，優(yōu)選油性或者水溶液，以及混懸液、乳劑或者植入劑包括栓劑是特別合適的。安瓿是方便的單元劑量。口服給藥優(yōu)選以膠囊、片劑和/或液體劑型來進(jìn)行。
對于局部給藥，本發(fā)明的藥物組合物優(yōu)選以糊劑、乳膏劑和凝膠糊等劑型給藥。更優(yōu)選的是，藥物組合物可進(jìn)一步包含抗炎藥、收斂劑、潤滑藥或者鎮(zhèn)痛劑。應(yīng)用根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可用于抑制氧化氮合成酶的形成。因此，本發(fā)明的藥物組合物對于在包括人的哺乳動物中治療與NO合成酶有關(guān)的病癥是有效的，所述病癥例如是血小板凝聚缺乏、體內(nèi)平衡過程疾病、組織損傷、偏頭痛、炎性疾病(如哮喘)、中風(fēng)、急性和慢性疼痛、循環(huán)血容量減少性休克、外傷休克、再灌注損傷、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、膿毒性休克、多發(fā)性硬化、與AIDS有關(guān)的癡呆、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)元毒性、阿爾茨海默氏病、化學(xué)品依賴和成癮病(如對藥物、酒精和尼古丁的依賴性)、嘔吐、癲癇、焦慮、精神病、頭部創(chuàng)傷、成人呼吸壓力綜合癥(ARDS)、嗎啡誘導(dǎo)的成隱性以及戒斷癥狀、炎性腸疾病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、擴(kuò)張性心肌病、急性脊索損傷、亨庭頓氏舞蹈病、帕金森氏病、青光眼、斑疹變性、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性潰瘍、以及癌癥。
更優(yōu)選的是，本發(fā)明的藥物組合物用于治療與血小板凝聚、體內(nèi)平衡過程以及組織損傷有關(guān)的病癥。治療血小板凝聚對于快速止血具有作用。
以下實施例將進(jìn)一步說明本發(fā)明，但不應(yīng)被理解為是對本發(fā)明范圍的限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的改進(jìn)和替代仍在本發(fā)明的范圍和精神之內(nèi)。實施例實施例1堿式?jīng)]食子酸鉍對氧化氮形成的作用測試中使用得自于Cell Culture Research Center，F(xiàn)ood IndustryResearch and Development Institute，Hsinchu，Taiwan的小鼠巨噬細(xì)胞系RAW264.7細(xì)胞(保藏編號CCRC 60001)。
RAW 264.7細(xì)胞溫育在96孔組織培養(yǎng)板(Falcon)上。24小時后，在有以及沒有100ng/ml LPS、100U/ml IFN-γ以及各種濃度(10μM、20μM、50μM、100μM、和200μM)的堿式?jīng)]食子酸鉍存在下，用Dulbecco′s Modified Eagle Medium(DMEM，2014，GibcoBRL)活化細(xì)胞(Hwang等人，1994，J.Biol.Chem.269，711-715)。24小時后，由各孔取1μl上清液，通過Griess反應(yīng)的Saville改良法(Green等人，Analytical Biochem，1982，126131-138)分析是否存在亞硝酸鹽。結(jié)果用三次測量值的平均值加標(biāo)準(zhǔn)偏差值(平均值±SE)表示。
如

圖1所示，未用LPS和IFN-γ活化的細(xì)胞不產(chǎn)生NO。相反地，用LPS和IFN-γ活化的細(xì)胞產(chǎn)生最高65μM的NO。另外，在有堿式?jīng)]食子酸鉍存在時溫育的細(xì)胞表明亞硝酸鹽濃度降低，反映NO的產(chǎn)生下降。NO的產(chǎn)生與堿式?jīng)]食子酸鉍濃度的增加成反比。實施例2龍腦對NO形成的作用按照與實施例1相同的實驗方法測試龍腦對NO合成酶的抑制作用。用各種濃度(0μM、40μM、80μM、160μM、320μM和640μM)的龍腦替代實施例1中的堿式?jīng)]食子酸鉍。結(jié)果用三次測量值的平均值加標(biāo)準(zhǔn)偏差值(平均值±SE)表示。如圖2所示，NO的形成被龍腦顯著抑制。實施例3堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦組合對NO形成的協(xié)同作用按照與實施例1相同的實驗方法測試堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合對NO合成酶的抑制作用。以下濃度的堿式?jīng)]食子酸鉍0μM、12.5μM、25μM、50μM和100μM，分別與以下濃度的龍腦組合0μM、10μM、20μM、和40μM，得到替代實施例1中的堿式?jīng)]食子酸鉍的組合。結(jié)果用三次測量值的平均值加標(biāo)準(zhǔn)偏差值(平均值±SE)表示。如圖3所示，用堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦組合治療，顯著地降低了NO的形成。該組合對NO形成的作用顯著高于單獨使用堿式?jīng)]食子酸鉍時的作用。換言之，堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合對于抑制NO合成酶具有協(xié)同作用。
權(quán)利要求
1.堿式?jīng)]食子酸鉍在制備用于抑制氧化氮合成酶(NOS)的藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述藥物是用于治療涉及氧化氮形成的疾病。
3.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中還與其他NOS抑制劑組合使用。
4.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述藥物是通過局部、口服或者非胃腸道途徑給藥。
5.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述堿式?jīng)]食子酸鉍的量為0.05-40重量％。
6.根據(jù)權(quán)利要求5的應(yīng)用，其中所述堿式?jīng)]食子酸鉍的量為1-20重量％。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的應(yīng)用，其中所述堿式?jīng)]食子酸鉍的量為2-10重量％。
8.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其中所述藥物進(jìn)一步包括協(xié)同有效量的龍腦。
9.根據(jù)權(quán)利要求8的應(yīng)用，其中堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的量分別是1-30重量％和0.05-10重量％。
10.根據(jù)權(quán)利要求9的應(yīng)用，其中堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的量分別是3-15重量％和0.1-5重量％。
11.根據(jù)權(quán)利要求10的應(yīng)用，其中堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的量分別是4-8重量％和0.5-1重量％。
12.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中還與其他NOS抑制劑組合使用。
13.根據(jù)權(quán)利要求7的應(yīng)用，其中所述藥物是通過局部、口服或者非胃腸道途徑給藥。
14.根據(jù)權(quán)利要求1-13之一的應(yīng)用，其中所述藥物是用于治療以下疾病血小板凝聚缺乏、體內(nèi)平衡過程疾病、組織損傷、偏頭痛、炎性疾病、中風(fēng)、急性和慢性疼痛、循環(huán)血容量減少性休克、外傷休克、再灌注損傷、局限性回腸炎、潰瘍性結(jié)腸炎、膿毒性休克、多發(fā)性硬化、與AIDS有關(guān)的癡呆、神經(jīng)變性疾病、神經(jīng)元毒性、阿爾茨海默氏病、化學(xué)品依賴和成癮病、嘔吐、癲癇、焦慮、精神病、頭部創(chuàng)傷、成人呼吸壓力綜合癥(ARDS)、嗎啡誘導(dǎo)的成隱性以及戒斷癥狀、炎性腸疾病、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、擴(kuò)張性心肌病、急性脊索損傷、亨庭頓氏舞蹈病、帕金森氏病、青光眼、斑疹變性、糖尿病性神經(jīng)病、糖尿病性潰瘍、以及癌癥。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中，所述疾病是血小板凝聚缺乏癥。
16.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中所述疾病是體內(nèi)平衡過程疾病。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的應(yīng)用，其中治療體內(nèi)平衡過程疾病對于快速止血有作用。
18.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中所述疾病是組織損傷。
19.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中所述疾病是炎性疾病。
20.根據(jù)權(quán)利要求19的應(yīng)用，其中所述炎性疾病是哮喘。
21.根據(jù)權(quán)利要求14的應(yīng)用，其中所述疾病選自于以下組中糖尿病性神經(jīng)病和糖尿病性潰瘍。
全文摘要
本發(fā)明涉及堿式?jīng)]食子酸鉍在制備用于抑制氧化氮合成酶的藥物以及用于治療涉及氧化氮形成的疾病中的新應(yīng)用。本發(fā)明還涉及堿式?jīng)]食子酸鉍與龍腦的組合在制備用于抑制氧化氮合成酶的藥物以及用于治療涉及氧化氮形成的疾病中的新應(yīng)用。
文檔編號A61P1/04GK1401317SQ0210606
公開日2003年3月12日 申請日期2002年4月11日 優(yōu)先權(quán)日2001年8月27日
發(fā)明者蔡英杰, 吳思惠, 許承先 申請人:友合生化科技股份有限公司