專利名稱：合成制備高效止血藥三七素的方法
技術領域：
本發(fā)明為一種止血藥物的合成制備方法。
三七，又名田七，為五加科人參屬植物三七的干燥根，具有止血散瘀、消腫定痛、舒經活絡等作用，其中尤以止血功能稱著?！侗静菥V目》稱三七為“止血之神藥”；《本草拾遺》稱“三七止血活血，止血不傷新”。歷版《中華人民共和國藥典》對三七的主治功能均界定其“止血散瘀，活血生肌”的特點。數(shù)百年來，歷代醫(yī)家將三七廣泛用于跌打損傷、內傷出血等內外出血癥?，F(xiàn)代科學研究更是對其活血化瘀成份作了深入的探索，對其多種有效成份作了詳細的闡述。但其止血活性成份和止血機理則很少報道。
本發(fā)明專利申請人據(jù)此對三七作了進一步的研究，發(fā)現(xiàn)了其中所含止血活性物質為單體化合物β-N-乙?；?L-α，β二氨基丙酸。而且根據(jù)實驗結果已知這種物質在大量使用的情況下，將顯示神經毒作用，但在少量使用時，則不顯示神經毒的作用而顯示出強力的止血及血小板增加作用，用1-2mg即可充分顯示治療效果。
β-N-乙二?；?L-α，β二氨基丙酸，在現(xiàn)代科學(印度)第32卷153頁(1963年)、生物化學第3卷第三期432頁(1964年)及生物化學第11卷第22期4053頁(1972年)等文獻中是作為山黎豆屬sativus種子中的神經毒而報道的。1980年日本學者小營卓夫首先從三七中分離出β-N-乙二?；?L-α，β二氨基丙酸，正式命名為三七素(dencichine)。
本發(fā)明的目的是提供止血藥三七素的合成制備方法。
三七素的化學結構式為
本發(fā)明制備三七素β-N-乙酰基-L-α，β二氨基丙酸的方法是按以下步驟進行的將L-天冬素與苯磺基鹵化物進行反應，再作霍夫曼重排得到 然后將此化合物加上草?；儆帽椒?25～42％氫溴酸／醋酸水解得到目的物三七素。
上述所說的“苯磺基鹵化物”最好為P-甲苯磺酰氯。所說的“將此化合物加上草?；弊詈脼閷⒋嘶衔锱c草酰氯進行反應。所說的“用苯酚+25～42％氫溴酸／醋酸水解”最好為用占此化合物加上草?；笏梦镏亓康?．5-1．5倍的苯酚、再加上28～34％氫溴酸／醋酸水解。所說的“醋酸”最好為冰醋酸。
本發(fā)明的積極效果是根據(jù)β-N-乙二?；?L-α，β二氨基丙酸這種化合物的結構，采用化學合成方法合成了該化合物，產品純度可達90％以上。該化合物藥理、藥效與天然提取物完全一致，而且化學合成比提取相對性簡單，反應條件溫和，操作簡便，且原料易得，使得成本更加低廉，有利于工業(yè)生產；不像提取須用Sephadex LH-20凝膠樹脂和CM Sephadex C-25離子交換樹脂分離，價格較為昂貴，限制了大規(guī)模生產，不利于工業(yè)化生產。
下面用實施例來對本發(fā)明做進一步的說明。
實施例 步驟把40g L-天冬素溶解于800ml蒸餾水中，加入40g氧化鎂，冰浴冷卻至0℃，在激烈攪拌下加入76g P-甲苯磺酰氯，反應3小時，室溫攪拌過夜。滴加濃HCl調節(jié)PH為2～3，過濾沉淀，甲醇重結晶得49g N-(P-Ts)-L-天冬素晶體。
取NaOH 38g，溶解于288ml蒸餾水中，冰浴冷卻至0℃，滴加10ml Br2；將38．2g N-(P-Ts)-L-天冬素溶解于112ml 10％ NaOH溶液，滴加到上述溶液中，反應15分鐘，迅速升溫至75℃，反應2小時，冷至室溫，加濃HCl調節(jié)PH為7，過濾得22g白色沉淀，用10％水合乙酸重結晶得15．7g白色晶體，為α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸。
把草酰氯20ml溶于干燥二氧六環(huán)250ml中，在此溶液中加入15g α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸，室溫反應6小時后，在反應液中投入少量冰塊，終止反應，濃縮反應液至油狀液，加入二氯甲烷，析出晶體，過濾得13g β-N-乙二?；?α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸。
取5g β-N-乙?；?α-N-(P-Ts)-L-α，β二氨基丙酸、5．2g苯酚、溶解100ml 32％ HBr／HAc中，85℃反應8小時，冷至室溫，加入600ml乙醚中，過濾沉淀物，用少量乙醚洗滌，將此沉淀溶于少量蒸餾水中，注入二乙胺乙基葡聚糖凝膠柱上，用1000ml蒸餾水沖洗，再用2．5％甲酸洗脫，收集洗脫液呈茚三酮陽性反應部分，濃縮，低溫放置，析出結晶，過濾，干燥，得到1．38g目的產物β-N-乙二?；?L-α，β二氨基丙酸。
m．p．206℃(分解)[α]24D-17°(c=2，4NHCl)元素分析值(設定C5H8N2O5·H2O)C N H理論值30．9314．435．19實際值30．8814．3g5．15以下內容是測定由以上實施例得到的β-N-乙二酰基-L-α，β二氨基丙酸的止血作用及增加血小板數(shù)量作用。
1．止血作用將生理鹽水注入體重18-22g小鼠腹腔內，30分鐘后斷尾取血，分別采用玻片法和毛細管法，每隔15秒鐘，觀察有無凝血，測量凝血時間，作為對照組的止血時間。
將β-N-乙?；?L-α，β二氨基丙酸溶于蒸餾水中，注入小鼠腹腔內，與對照組一樣，測量凝血時間。
與對照組的凝血時間的差，即為出血縮短時間。結果如下實驗用化合物／生理 對照組試驗組縮短出血時間鹽水(mg／ml)1mg／ml 6′30″ 1′09″ 5′24″6′21″ 1′03″ 5′18″0．5mg／ml 6′10″ 2′48″ 3′22″6′19″ 2′54″ 3′25″0．25mg／ml 6′13″ 3′28″ 2′45″6′25″ 3′34″ 2′51″2．血小板增加作用將本發(fā)明的化合物β-N-乙二?；?L-α，β二氨基丙酸1mg溶解于0．5ml生理鹽水中，注入體重為18-22g小鼠腹腔中，30分鐘后摘除一側眼球并采血，然后用直接法測量血小板數(shù)量。
對照組以0．5ml生理鹽水腹腔注射。結果如下血小板增加數(shù)目(萬個／ml)對照組54．6±3．52試驗組68．5±7．61試驗組血小板約比對照組增加30％。
通過實驗證明，本發(fā)明方法制得的化合物能夠有效縮短出血時間和增加血小板數(shù)量。
以上實施例僅為了對本發(fā)明作進一步的說明，而本發(fā)明的范圍不受所舉實施例的局限。
權利要求
1.一種合成制備高效止血藥三七素的方法，其特征是按以下步驟進行將L-天冬素與苯磺基鹵化物進行反應，再作霍夫曼重排得到 然后將此化合物加上草?；儆帽椒?25～42％氫溴酸／醋酸水解得到目的物三七素。
2.如權利要求1所說的合成制備高效止血藥三七素的方法，其特征是所說的苯磺基鹵化物為P-甲苯磺酰氯。
3.如權利要求1所說的合成制備高效止血藥三七素的方法，其特征是所說的“將此化合物加上草?；睘閷⒋嘶衔锱c草酰氯進行反應。
4.如權利要求1所說的合成制備高效止血藥三七索的方法，其特征是所說的“用苯酚+25～42％氫溴酸／醋酸水解”為用占此化合物加上草?；笏梦镏亓康?．5-1．5倍的苯酚、再加上28～34％氫溴酸／醋酸水解。
5.如權利要求1所說的合成制備高效止血藥三七素的方法，其特征是所說的醋酸為冰醋酸。
全文摘要
本發(fā)明為一種止血藥物的合成制備方法,包括以下步驟:將L－天冬素與苯磺基鹵化物進行反應,再作霍夫曼重排得到(見右式)，然后將此化合物加上草酰基,再用苯酚+25～42%氫溴酸/醋酸水解得到目的物三七素。產品純度可達90%以上,藥理、藥效與天然提取物完全一致,能夠有效縮短出血時間和增加血小板數(shù)量。化學合成比提取相對簡單,反應條件溫和,操作簡便,且原料易得,使得成本低廉,有利于工業(yè)生產。
文檔編號A61P7/04GK1292376SQ0010999
公開日2001年4月25日 申請日期2000年8月10日 優(yōu)先權日2000年8月10日
發(fā)明者藍桂華, 方松, 陳蓬, 藍鋒 申請人:昆明南國生物資源開發(fā)研究所