山蒼子渣的應(yīng)用以及一種復(fù)合飼料添加劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于復(fù)合飼料添加劑領(lǐng)域，具體涉及山蒼子渣在作為改善動物腸道微生物 菌群的飼料添加劑中的應(yīng)用以及一種復(fù)合飼料添加劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著"回歸自然"熱潮的興起，植物提取物行業(yè)迅速成長起來，植物提取物行業(yè)是 專為飼料、食品飲料、營養(yǎng)添加劑、化妝品、日化及醫(yī)藥行業(yè)提供純天然植物提取物原料的 新興行業(yè)。我國植物資源豐富，是植物提取物大國，目前，我國從事植物提取物的廠家已 1000多家，2006年出口額達(dá)到4. 77億美元，并且每年增長率穩(wěn)步在15%以上。然而，隨著 我國植物提取業(yè)的發(fā)展，也隨之產(chǎn)生一個不容忽視的問題，即加工生產(chǎn)過程中產(chǎn)生的植物 提取剩余物日益增多。目前，我國植物提取剩余物通常采用堆放、填埋和焚燒等處理方式 進(jìn)行處理，這種處理方式，不僅是資源的巨大浪費，同時也會造成極大的環(huán)境污染，因此植 物加工剩余物的生態(tài)利用研究勢在必行。植物提取剩余物的生態(tài)利用，將提高植物資源的 利用效率，減少環(huán)境污染，增加企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，同時也促進(jìn)"低碳-循環(huán)經(jīng)濟(jì)"型社會的發(fā) 展。
[0003] 我國是世界上重要的飼料生產(chǎn)國，2010年飼料產(chǎn)量1.62億噸，位居世界第一。玉 米和豆柏是飼料的重要原料，僅玉米在飼料中占比高達(dá)40-70%，然而，由于玉米和豆柏等 原料價格的持續(xù)上漲，致使整個配合飼料行業(yè)的利潤率不到4%，甚至很多中小飼料企業(yè)虧 損。同時我國飼料原料短缺明顯，預(yù)計到2030年中國將有16億人口，屆時預(yù)計需要7. 43 億噸糧食，而根據(jù)目前產(chǎn)量推算，只能提供7. 1億噸糧食。因此，為保障我國糧食安全，開辟 新的飼料原料是飼料工業(yè)面臨的重要挑戰(zhàn)。
[0004] 我國植物資源非常豐富，在提取有效成分等加工利用過程中產(chǎn)生大量的剩余物。 植物提取剩余物還含有大量的粗脂肪、粗蛋白、多糖和微量元素等營養(yǎng)成分，如何高效利用 植物提取物這部分營養(yǎng)成分已成為研究者研究解決的熱點研究課題。秦嶺（秦嶺等，食品 與生物技術(shù)學(xué)報，2008, 27 (4): 122-128)研究了中藥渣（麥冬、五味子、黨參、山楂等）開發(fā) 蛋白飼料，采用康寧木霉、產(chǎn)黃纖維單胞菌、產(chǎn)朊假絲酵母和黑曲霉多菌種混合發(fā)酵生產(chǎn)蛋 白飼料，篩選出的纖維素降解多菌種組合進(jìn)行固態(tài)發(fā)酵，有效地提高了中藥渣中的真蛋白 質(zhì)量分?jǐn)?shù)，對粗纖維也有一定的降解效果。張登輝（張登輝，豬與禽，2008, 28 (2) :77-78)研 究了黃芪藥渣作為飼料添加劑對白羽肉仔雞表觀代謝率的影響，結(jié)果表明黃芪藥渣可提高 肉雞粗蛋白表觀代謝率，顯著降低了粗脂肪的表觀代謝率，且隨著添加量的提高而逐漸降 低。在基礎(chǔ)日糧中添加黃芪藥渣，與對照組相比，添加量為5%的黃芪藥渣組能顯著提高肉 雞的日增重，料肉比降低，日糧中粗蛋白質(zhì)的表觀代謝率顯著提高；而添加3個不同水平的 黃芪藥渣，其日糧中粗脂肪的表觀代謝率均降低。
[0005] 吳華（吳華等，黑龍江畜牧獸醫(yī)（科技版），2010,（6) :80_81)在嶺南黃雞基礎(chǔ)日 糧中加入紅景天藥渣，其屠宰性能和蛋白質(zhì)含量有所提高，試驗組雞肉中蛋白含量均高于 對照組，這說明紅景天藥渣在一定程度上可改善肉的風(fēng)味。李湘洲（李湘洲等，一種肉雞用 飼料添加劑，ZL201110059638. 5)采用姜黃渣、人參渣和茶葉渣開發(fā)的禽用飼料添加劑，該 飼料添加劑均可不同程度提高肉雞生長性能，降低料重比，4%姜黃渣組的料重比為2. 47， 比對照組低4. 63%，同時可在一定程度上改善黃羽肉雞屠宰性能，7組試驗組的屠宰性能 均優(yōu)于對照組，并不同程度地提高胸、腿肌中脂肪和氨基酸的含量。
[0006] 山蒼子是我國南方特色芳香植物資源，主要成分是山蒼子油，山蒼子油具有抗菌、 抗細(xì)菌、抗過敏、平喘及抗心律失常等多種作用，同時也是一種食品調(diào)料和香料、以及合成 香料的原料，因此，山蒼子油的利用具有重要的經(jīng)濟(jì)價值和社會意義。然而，山蒼子中只含 有4~6%的揮發(fā)油，提取山蒼子油后的還有大量的山蒼子渣，目前處理的方法大多直接當(dāng) 作廢棄物處理，不僅對環(huán)境造成污染，同時也造成資源的巨大浪費。山蒼子渣中除殘留的山 蒼子油外，還含有大量脂肪酸、粗蛋白、氨基酸以及鈣、磷等微量元素，是一種潛在的飼料原 料，因此，以山蒼子渣代替部分傳統(tǒng)飼料原料，開發(fā)山蒼子渣飼料，不僅可緩解我國飼料資 源的不足，提高飼料企業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益，同時可提高山蒼子加工企業(yè)的資源利用效率和經(jīng)濟(jì) 效益，減少環(huán)境污染。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明公開了山蒼子渣在作為改善動物腸道微生物菌群的 飼料添加劑中的應(yīng)用，并提供了一種由山蒼子渣和復(fù)合酶制劑組成的復(fù)合飼料添加劑。所 述山蒼子渣是提取山蒼子油后的剩余物。所述復(fù)合飼料添加劑能顯著提高禽類后腸道微生 物群落的多樣性和豐富度，同時可一定程度上促進(jìn)禽類生長。本發(fā)明開辟山蒼子渣的新的 功效，解決山蒼子渣廢棄所造成的環(huán)境污染，緩解我國飼料資源的不足。
[0008] 為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：
[0009] 山蒼子渣在作為改善動物腸道微生物菌群的飼料添加劑中的應(yīng)用，所述山蒼子渣 是提取山蒼子油后的剩余物。
[0010] 所述山蒼子渣的添加量優(yōu)選占飼料質(zhì)量的2% -6%。所述山蒼子渣的添加量優(yōu)選 占飼料質(zhì)量的4%。
[0011] -種復(fù)合飼料添加劑，由山蒼子渣和復(fù)合酶制劑組成，所述山蒼子渣與復(fù)合酶制 劑的用量質(zhì)量比例為20-60:0. 15 ;所述復(fù)合酶制劑由蛋白酶、纖維素酶和木聚糖酶組成。
[0012] 所述山蒼子渣與復(fù)合酶制劑的用量質(zhì)量比例優(yōu)選為40:0. 15。
[0013] 所述復(fù)合酶制劑中優(yōu)選蛋白酶的酶活力為5000U/g-6000U/g，纖維素酶的酶活力 為 1000U/g-2000U/g，木聚糖酶的酶活力為 11000U/g-12000U/g。
[0014] 下面對本發(fā)明做進(jìn)一步解釋和說明
[0015] (1)山蒼子渣常規(guī)養(yǎng)分、總能和氨基酸測定
[0016] 主要測總能、干物質(zhì)、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗纖維、中性洗滌纖維、粗灰分、鈣和磷。
[0017] 山蒼子渣中天冬氨酸、蘇氨酸、絲氨酸、谷氨酸、甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、異亮氨 酸、亮氨酸、酪氨酸和脯氨酸等氨基酸測定。
[0018] (2)養(yǎng)分、能量和氨基酸利用率測定
[0019] 測定不同家禽對蒼子渣常規(guī)養(yǎng)分和能量的表觀利用率，以及氨基酸表觀利用率。
[0020] (3)提高禽類后腸道微生物群落多樣性的山蒼子渣飼料配方設(shè)計
[0021] 山蒼子渣添加量為2-6%。復(fù)合酶制劑的添加量為150mg/kg。復(fù)合酶制劑系由蛋 白酶（6000U/g)、纖維素酶（lOOOU/g)和木聚糖酶（12000U/g)的混合物。
[0022] (4)提高禽類后腸道微生物群落多樣性的山蒼子渣飼料的制備
[0023] 將山蒼子渣粉碎，過20目篩，保存?zhèn)溆谩８鶕?jù)配方制備山蒼子渣飼料。
[0024] (5)提高禽類后腸道微生物群落多樣性的山蒼子渣飼料在臨武鴨生產(chǎn)中的應(yīng)用
[0025] 設(shè)4個實驗組，山蒼子渣添加量分別為2%，4%，6%和對照組（不添加山蒼子渣和 復(fù)合酶），分別測定日增重，日采食量和量重比。
[0026] 本發(fā)明添加一定量的山蒼子渣，根據(jù)實施例，日增重有一定程度提高，不會影響禽 類的生長，可以節(jié)省飼料成本，具有顯著的經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益。且可以明顯改善禽類后腸 道微生物群落的多樣性，更有利于禽類的飼養(yǎng)。
[0027] (6)臨武鴨后腸道菌群多樣性分析
[0028] 在屠宰時，分別取空腸和回腸食糜放入已滅菌的離心管，并立即帶回實驗室提取 菌群DNA。對基因組DNA樣品進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并取3yL16SPCR產(chǎn)物于1%瓊脂糖凝膠電 泳檢測，對合格產(chǎn)物作PCR-DGGE變性凝膠電泳檢測。采用Quantity-One軟件對凝膠電泳 圖進(jìn)行生物群落多樣性分析，根據(jù)DGGE電泳的原理，位于同一水平線的條帶為同一物種， 參照標(biāo)準(zhǔn)樣品，對DGGE條帶分布計算生物群落多樣性指數(shù)并進(jìn)行聚類分析。
[0029] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)勢在于：
[0030] 本發(fā)明添加的山蒼子渣所含有的山蒼子油、糖類是有益微生物生長繁殖的有益底 物，改善了禽類后腸道微生物群落的多樣性，不僅僅有益于禽類生長，而且使得禽類免疫力 增強，更健康，更有利于禽類的飼養(yǎng)。
[0031] 本發(fā)明所用原料系山蒼子提取山蒼子油后的剩余物，以期實現(xiàn)資源利用的最大 化，充分利用山蒼子渣的營養(yǎng)成分和保健成分，解決加工剩余物廢棄所造成的環(huán)境污染，同 時緩解飼料資源的不足。
【附圖說明】
[0032] 圖1是臨武鴨空腸內(nèi)容物16SrRNA基因V3區(qū)的PCR-DGGE圖譜；其中：泳道 CS1-1~CS1-3為對照組，CS2-1~CS2-3為2%山蒼子渣組，CS3-1~CS3-3為4%山蒼子 渣組，CS4-1~CS4-3為6%山蒼子渣組。
[0033] 圖2是PCR-DGGE條帶檢測圖；其中：泳道編號1~3為對照組，4~6為