本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖,尤其涉及靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物、制備方法、應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、水產(chǎn)養(yǎng)殖作為我國農(nóng)業(yè)的重要組成部分,在保障食物安全和促進農(nóng)民增收方面發(fā)揮著重要作用。隨著環(huán)保意識的增強,如何減少水產(chǎn)養(yǎng)殖對環(huán)境的影響,實現(xiàn)綠色養(yǎng)殖,成為一個重要議題。糖是生物體的重要能量來源,在飼料中使用糖可減少對動物蛋白的依賴,提高飼料利用率,進而顯著降低飼料成本,并且糖主要來源于植物,這些植物能通過農(nóng)業(yè)種植不斷再生。因此,在飼料中使用糖能提高養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益和環(huán)境可持續(xù)性。
2、魚類的糖代謝機制與人類和陸生動物存在顯著差異,飼料中糖類的過量添加會導(dǎo)致魚類出現(xiàn)抗病力低、生長緩慢、死亡率高等現(xiàn)象,這使得魚類對飼料中糖類的利用率相對較低,因此,開發(fā)調(diào)控劑改善魚類的糖代謝,具有顯著的生產(chǎn)實用價值。
3、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激被認為是糖尿病發(fā)生、發(fā)展的重要機制。高血糖會導(dǎo)致胰島細胞內(nèi)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)產(chǎn)生錯誤折疊與未折疊蛋白聚集以及ca2+代謝紊亂,引發(fā)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng),致使胰島細胞凋亡,進而降低胰島素的合成和分泌,引起糖尿病的發(fā)生。肌醇需要酶1(inositol-requiring?enzyme?1,ire1)是一種關(guān)鍵的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激傳感器和信號傳感器,高血糖會使其激活進而導(dǎo)致內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,加劇糖尿病病癥。目前,針對i?re1已經(jīng)開發(fā)出少量通過改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能,提高機體糖代謝的西藥。但是,魚類上尚未見圍繞i?re1所開發(fā)的代謝調(diào)控劑。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為了解決上述背景技術(shù)中的問題,本發(fā)明的目的一,在于提供一種靶向i?re1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,該組合物能抑制i?re1基因表達,提高飼喂高糖飼料大口黑鱸內(nèi)質(zhì)網(wǎng)功能,改善魚體糖代謝能力。
2、為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采取的方案是:一種靶向i?re1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮1~15份;黃皮酰胺3~16份;葫蘆素b4~31份;
3、所述雄蔥黃酮的制備方法包括以下步驟:
4、s1,用蒸餾水清洗雄蔥,隨后在50~75℃下進行烘干,隨后進行粉碎,取10g粉碎后的雄蔥加入10~50ml?mande?l鹽溶液中;
5、s2,將解淀粉芽孢桿菌和纖維素酶混合均勻,獲得菌酶混合物,其中解淀粉芽孢桿菌和纖維素酶的質(zhì)量比為(1~10):(1~7);
6、s3,將菌酶混合物與s1中制得的mande?l鹽溶液混合,菌酶混合物的質(zhì)量和mandel鹽溶液的體積比為1g:2ml;得到培養(yǎng)液,再將培養(yǎng)液的ph調(diào)至7.0~9.0,隨后將培養(yǎng)液放入35℃~55℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h,得到的菌酶發(fā)酵液;
7、s4,將菌酶發(fā)酵液以1000~4000r/min的轉(zhuǎn)速離心15~60min,取上清液,將上清液以85~105℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)制得雄蔥黃酮。
8、優(yōu)選的,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮4~12份;黃皮酰胺5~13份;葫蘆素b8~28份。
9、優(yōu)選的,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮8~10份;黃皮酰胺7~10份;葫蘆素b15~20份。
10、優(yōu)選的,步驟s2中所述菌酶混合菌液中解淀粉芽孢桿菌和纖維素酶的質(zhì)量比為(2.5~3):(1~2.5)。
11、本發(fā)明的目的二,在于提供一種制備成本低、獲得的產(chǎn)品性能穩(wěn)定的靶向i?re1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物的制備方法。
12、包括以下步驟:將雄蔥黃酮、黃皮酰胺和葫蘆素b分別粉碎,粉碎過程中溫度小于40℃,粉碎至80-150目。
13、優(yōu)選的,雄蔥黃酮、黃皮酰胺和葫蘆素b均粉碎至120-150目。
14、本發(fā)明的目的三,在于提供一種增強大口黑鱸糖代謝的飼料,包含上述組合物。
15、優(yōu)選的,所述組合物在飼料中的質(zhì)量百分比為0.2~1.2。
16、本發(fā)明的目的四,在于提供一種飼料在制備增強大口黑鱸糖代謝的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
17、本發(fā)明的目的五,在于提供一種組合物在制備抑制i?re1基因表達的產(chǎn)品中的應(yīng)用。
18、該組合物加入到其它產(chǎn)品中,能顯著降低產(chǎn)品成本,提高大口黑鱸養(yǎng)殖的經(jīng)濟效益。
19、綜上所述,本發(fā)明的有益效果為:
20、本申請結(jié)合酶菌聯(lián)合發(fā)酵技術(shù)生產(chǎn)雄蔥黃酮,并依據(jù)雄蔥黃酮、黃皮酰胺和葫蘆素b三者配伍間的藥理協(xié)同關(guān)系,研制出一種增強大口黑鱸糖代謝的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)組合物;
21、組合物能選定ire1為作用靶點,并抑制該基因表達,從而改善魚體糖代謝能力,提高魚體的飼料利用率。
22、上述說明僅是本發(fā)明的技術(shù)方案的概述,為了能夠更清楚了解本發(fā)明的技術(shù)手段,而可依照說明書的內(nèi)容予以實施,并且為了讓本發(fā)明的上述和其他目的、特征和優(yōu)點能夠更明顯易懂,以下特舉較佳實施例,并配合附圖,詳細說明如下。
1.一種靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,其特征在于,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮1~15份;黃皮酰胺3~16份;葫蘆素b4~31份;
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,其特征在于,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮4~12份;黃皮酰胺5~13份;葫蘆素b8~28份。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,其特征在于,該組合物包括如下重量份數(shù)的原料:雄蔥黃酮8~10份;黃皮酰胺7~10份;葫蘆素b15~20份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物,其特征在于,步驟s2中所述菌酶混合菌液中解淀粉芽孢桿菌和纖維素酶的質(zhì)量比為(2.5~3):(1~2.5)。
5.一種權(quán)利要求1~4任意一項所述的靶向ire1基因增強大口黑鱸糖代謝的組合物的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:將雄蔥黃酮、黃皮酰胺和葫蘆素b分別粉碎,粉碎至120-150目,粉碎過程中的溫度小于40℃。
6.一種增強大口黑鱸糖代謝的飼料,其特征在于,包含權(quán)利要求1~4任一所述的組合物。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種增強大口黑鱸糖代謝的飼料,其特征在于,所述組合物在飼料中的質(zhì)量百分比為0.2~1.2。
8.一種飼料在制備增強大口黑鱸糖代謝的產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,采用如權(quán)利要求6所述的飼料。
9.一種組合物在制備抑制ire1基因表達的產(chǎn)品中的應(yīng)用,其特征在于,采用如權(quán)利要求1~4任意一項所述的組合物。