本發(fā)明涉及生物飼料技術(shù)領(lǐng)域，更具體地說，涉及一種以微切助互作處理的玉米芯為載體的特異性卵黃液卵黃抗體制劑及其制備方法。

背景技術(shù)：

由于抗生素的使用而導(dǎo)致的藥物殘留，已成為制約我國水產(chǎn)產(chǎn)品國際市場競爭力的一個(gè)主要問題。卵黃抗體(igy)具有無毒、無殘留、不產(chǎn)生抗藥性等優(yōu)點(diǎn)，發(fā)展前景備受矚目。此外igy制備成本低、產(chǎn)出率高、提純簡便快捷，并具有耐熱、穩(wěn)定性好等優(yōu)點(diǎn)，已經(jīng)被廣泛地制成產(chǎn)品來進(jìn)行動物疾病的預(yù)防和治療。例如用制成的igy制劑來喂食海參，防治海參腐皮綜合征等。

當(dāng)前的igy產(chǎn)品大都為凍干粉或片狀、膏狀制劑，但是凍干粉以及片狀、膏狀制劑的制備工藝復(fù)雜，成本較高，而且有效成分在制備提純的過程中會有較大損失。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于從節(jié)約成本出發(fā)，將特異性卵黃液與經(jīng)過微切助互作處理過的玉米芯載體直接混合，解決有效成分損失、消耗大量能量的問題，降低生產(chǎn)成本，簡化制備工藝。

為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供了一種以微切助互作處理的玉米芯為載體的特異性卵黃液抗體制劑，所述特異性卵黃液抗體制劑由特異性卵黃液、微切玉米芯載體、山梨酸鉀、乙氧基喹啉、丙酸鈣組成；所述特異性卵黃液質(zhì)量百分比為30％～80％、微切玉米芯載體質(zhì)量百分比為20％～70％，兩者質(zhì)量百分比之和為100％；所述山梨酸鉀、乙氧基喹啉、丙酸鈣占所述特異性卵黃液和微切玉米芯載體總質(zhì)量的百分比分別為0.05％～0.2％、0.01％～0.05％、0.1％～0.5％。

優(yōu)選方式下，所述的微切玉米芯載體采用微切助互作方式進(jìn)行處理，將玉米芯粗粉進(jìn)行超微粉碎5min～15min，超微粉碎時(shí)加入助劑；所述助劑為碳酸鈣或碳酸氫鈣，所述助劑的用量為所述微切玉米芯載體質(zhì)量的1％～8％(w/w)。

優(yōu)選方式下，所述的特異性卵黃液與微切玉米芯載體的質(zhì)量比為1～3:1。

本發(fā)明還提供了一種上述卵黃抗體制劑的制備方法，包括如下步驟：

s1、將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過60～200目篩子，制得玉米芯載體；

s2、按上述比例取特異性卵黃液，先攪拌，再添加山梨酸鉀、丙酸鈣、乙氧基喹啉，攪拌均勻，制得混合卵黃液；

s3、將步驟s1制得的玉米芯載體加入到步驟s2制得的混合卵黃液中，攪拌均勻，制成軟顆粒，20℃～30℃晾干至水分含量達(dá)8％以下；粉碎過篩，制成卵黃抗體制劑。

優(yōu)選方式下，步驟s1所述的微切玉米芯載體由玉米芯粗粉和助劑組成，采用微切助互作方式進(jìn)行處理，將玉米芯粗粉進(jìn)行超微粉碎5min～15min，超微粉碎時(shí)加入助劑；所述助劑為碳酸鈣或碳酸氫鈣，所述助劑的用量為所述微切玉米芯載體質(zhì)量的1％～8％(w/w)。

優(yōu)選方式下，步驟s2所述特異性卵黃液取自經(jīng)過注射滅活細(xì)菌免疫后的高免雞蛋。所述細(xì)菌優(yōu)選為黃海希瓦氏菌、燦爛弧菌或溶藻弧菌。

優(yōu)選方式下，步驟s2所述特異性卵黃液與微切玉米芯載體的質(zhì)量比為1～3:1。

優(yōu)選方式下，步驟s2將特異性卵黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀，再添加山梨酸鉀、丙酸鈣、乙氧基喹啉。經(jīng)過本步驟處理，攪拌更加均勻，融合性更好。

步驟s3攪拌均勻至形成軟硬適中的團(tuán)狀固體后，制成軟顆粒。

本發(fā)明的技術(shù)創(chuàng)新在于：

1、本發(fā)明改變了傳統(tǒng)的制備igy產(chǎn)品的方法，不再將igy制成凍干粉或者提純以后當(dāng)做飼料添加劑加入到飼料當(dāng)中。而是直接將含有富含特異性igy的特異性卵黃液與玉米芯粉進(jìn)行混合加工，與全蛋液相比，卵黃液與載體結(jié)合效果更好，單位質(zhì)量含更多特異性卵黃抗體，此工藝還減少了在分離、提純以及凍干過程中igy的損失，減少了10％以上，而且還簡化了生產(chǎn)工藝，本產(chǎn)品很重要的一點(diǎn)就是，天然的玉米芯載體解決了以往卵黃抗體生產(chǎn)提純過程中需要大量消耗能源的難題，極大的降低了成本。

2、本發(fā)明將微切助互作技術(shù)用于飼料添加劑的制備，破碎細(xì)胞壁和改性天然活性物質(zhì)，使得粉碎過程中，固體原料顆粒團(tuán)經(jīng)過微切變，細(xì)胞壁破碎，細(xì)胞表面產(chǎn)生新鮮切面，化學(xué)助劑與有效成分之間發(fā)生基團(tuán)或分子間的相互吸附或作用，改變植物有效成分的微觀性能，表面能增加，比表面積增大，吸附性、極性增加，改變其溶解性，進(jìn)而提高目標(biāo)有效成分的生物利用度。

3、本發(fā)明的產(chǎn)品適于直接喂食刺參、大菱鲆、奶牛和仔豬等動物，可以用來防治細(xì)菌感染或者其他免疫疾病，大大的提高了動物的存活率和免疫力。另外，本發(fā)明產(chǎn)品的生產(chǎn)工藝大為簡化，生產(chǎn)成本大為降低，更適合大規(guī)模生產(chǎn)。

附圖說明

圖1為普通玉米芯顆粒圖；

圖2為微切助互作技術(shù)處理的玉米芯載體；

圖3為標(biāo)準(zhǔn)igy曲線；

圖4為不同時(shí)期igy制劑的吸光值；

圖5為本發(fā)明生產(chǎn)該特異性卵黃液抗體制劑的流程圖。

具體實(shí)施方式

下述非限制性實(shí)施例可以使本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員更全面地理解本發(fā)明，但不以任何方式限制本發(fā)明。

實(shí)施例1

將玉米芯粗粉進(jìn)行超微粉碎，超微粉碎時(shí)加入助劑，使用的助劑為碳酸鈣，助劑用量為5％(w/w)，粉碎時(shí)間10min。

通過掃描電鏡照片進(jìn)行對比，可以發(fā)現(xiàn)采用微切助互作技術(shù)處理后的玉米芯載體其表面更加粗糙，表面積變得更大，相應(yīng)的其結(jié)合吸附能力更強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)表明，相對于普通玉米芯載體(見圖1)，采用微切助互作技術(shù)處理后的玉米芯載體(見圖2)吸附能力可增加30％～100％。

將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過100目篩子，稱取300g備用；將經(jīng)過注射滅活黃海希瓦氏菌免疫后的高免蛋，用蛋黃分離器取蛋黃600g打入容器中，攪拌；將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀；添加0.9g山梨酸鉀、2.7g丙酸鈣、0.23g乙氧基喹啉，攪拌均勻；將備用的300g玉米芯粉加入到卵黃液中，攪拌至均勻，形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體；然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒；室溫下晾干；用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子，包裝；制成飼料添加劑。

實(shí)施例2

微切玉米芯載體的制備方法與實(shí)施例1相同。

將玉米芯粉用微切助互作技術(shù)處理后，過60目篩子，稱取500g備用；將經(jīng)過注射滅活燦爛弧菌免疫后的高免蛋，用蛋黃分離器取蛋黃900g打入容器中，攪拌；將蛋黃液攪拌到體積膨脹，顏色變淺，呈濃稠狀；添加1.5g山梨酸鉀、4.5g丙酸鈣、0.38g乙氧基喹啉，攪拌均勻；將備用的500g玉米芯粉加入到卵黃液中，攪拌至均勻，形成軟硬度適中的團(tuán)塊狀固體；然后用制粒機(jī)制成直徑3mm軟顆粒；室溫下晾干；用粉碎機(jī)粉碎后過100目篩子，包裝；制成飼料添加劑。

igy含量檢測

稱取實(shí)施例1制得的igy制劑1g加30ml包被液，超聲波震蕩15min，稀釋100倍后，每孔加100ul包被96孔酶標(biāo)板，4℃過夜。用洗滌液洗滌酶標(biāo)板3次，每孔加100ul封閉液，37℃溫育2h后甩干、洗滌3次，再向各孔加兔抗雞igg-hrp100ul，37℃反應(yīng)lh；洗滌液洗滌各孔5次，每孔加100ultmb底物緩沖液，室溫下顯色20min，每孔加50ul2m硫酸終止反應(yīng)，用酶標(biāo)儀測od450/630nm。然后與標(biāo)準(zhǔn)igy曲線(見圖3)對比，算出不同時(shí)期樣品里的特異性igy含量(見圖4)。

由圖4可以看出，本產(chǎn)品在半年內(nèi)特異性igy含量并無明顯降低并維持在較高的狀態(tài)，說明本產(chǎn)品可在較長的時(shí)間內(nèi)持續(xù)有效。

本發(fā)明生產(chǎn)特異性卵黃液抗體制劑的流程圖如圖5所示。

將各種方法生產(chǎn)igy制劑進(jìn)行比較，具體結(jié)果如表1所示：

表1各種方法生產(chǎn)igy制劑綜合比較

從表1可以看出，在不考慮人工成本及設(shè)備折舊等因素的情況下，本方法前期投入的設(shè)備成本最低，單位能耗降到了原來的1/5甚至更多，節(jié)能效果顯著，而且生產(chǎn)過程簡單，生產(chǎn)方式靈活，制約因素較少，具有很強(qiáng)的實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。