本發(fā)明涉及生物飼料發(fā)酵領(lǐng)域，具體為一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑及制備方法。
背景技術(shù)：
隨著養(yǎng)殖業(yè)的快速發(fā)展和生活水平的不斷提高，人們對肉制品的需求已經(jīng)從量到質(zhì)轉(zhuǎn)變。品質(zhì)優(yōu)良、風味鮮美、安全、營養(yǎng)的肉制品是畜牧業(yè)未來發(fā)展的方向。現(xiàn)代飼料工業(yè)中，飼料添加劑是其不可或缺的成分，也是實現(xiàn)飼料工業(yè)化生產(chǎn)和養(yǎng)殖現(xiàn)代化的重要物質(zhì)前提。
安全、高效、營養(yǎng)、健康具有促生長改善肉品質(zhì)和的飼料添加劑不僅能促進動物的生長速度，還能改善肉品質(zhì)，提高風味，縮短出欄時間，降低養(yǎng)殖風險，增加養(yǎng)殖效益，有利于促進飼料和畜牧行業(yè)健康有序的發(fā)展，對提高養(yǎng)殖效益，降低養(yǎng)殖風險具有重要意義。
杜仲葉具有清除體內(nèi)垃圾，加強人體細胞物質(zhì)代謝，防止肌肉骨骼老化，平衡人體血壓，分解體內(nèi)膽固醇，降低體內(nèi)脂肪，恢復血管彈性，利尿清熱，廣譜抗菌，興奮中樞神經(jīng)，提高白血球藥理作用。現(xiàn)代研究進一步證明還有調(diào)節(jié)血壓、降低人體膽固醇含量、預防心腦血管硬化、促進記憶、抗疲勞、抗衰老、抗腫瘤、提高綜合免疫力以及預防老年骨質(zhì)疏松等功效，成為老齡化社會一個受世人關(guān)注的保健用品。
益生菌發(fā)酵杜仲葉粉，采用現(xiàn)代生物工程技術(shù)，在人體外建立一個“工業(yè)化腸胃系統(tǒng)”，采用人體腸道內(nèi)的多種益生菌，對中藥進行預消化、分解和轉(zhuǎn)化，把大分子的中間物質(zhì)，分解轉(zhuǎn)化成為能夠被直接吸收的有效小分子物質(zhì)，發(fā)酵后相藥效提高4-28倍。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑，經(jīng)微生物發(fā)酵，降解杜仲葉粉中的抗營養(yǎng)因子，同時提高有效成分的消化吸收率。經(jīng)微生物發(fā)酵后，單寧和果膠等抗營養(yǎng)因子降解率分別達到99.0%和66.1%，杜仲綠原酸和乳酸菌功能小肽分別提高13~15%和8~10%。通過發(fā)酵改善了適口性和利用率，抗營養(yǎng)因子顯著降低，最大限度提高杜仲葉粉的飼用價值。
本發(fā)明是采用以下技術(shù)方案來實現(xiàn)：
一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑，由以下成分按比例構(gòu)成，按杜仲葉粉60~80%，麩皮10~20%，玉米粉5~10%，豆粕3~8%，木聚糖酶0.01~0.05%，中溫淀粉酶0.005~0.01%，果膠酶0.005~0.01%，輕質(zhì)碳酸鈣0.2~0.5%，水5%比例，混合均勻。
上述飼料添加劑的制備方法，包括粉碎、原料混合、原料酶解及殺菌、接種菌液進行固態(tài)分時發(fā)酵、低溫二級沸騰干燥、包裝。
具體如下：
（1）、粉碎：用粉碎機將杜仲葉粉粉碎成20目粉。
（2）、原料混合：按杜仲葉粉（20目）60~80%，麩皮（大片）10~20%、玉米粉（40目）5~10%、豆粕（40目）3~8%、木聚糖酶0.01~0.05%、中溫淀粉酶0.005~0.01%、果膠酶0.005~0.01%、輕質(zhì)碳酸鈣0.2~0.5%，水5%比例，混合均勻。
（3）、原料酶解及殺菌：將上所述原料放入固體發(fā)酵罐，蒸汽升溫至37~40℃，保溫酶解40min；二次升溫至 68~70℃，保持30min，快速降溫到30℃。
（4）、先接入枯草芽孢桿菌，維持30℃發(fā)酵8~12h；接入釀酒酵母菌，維持28℃發(fā)酵6~8h；接入糞腸球菌，維持37℃發(fā)酵24~32h。
（5）、低溫二級沸騰干燥：
一級干燥：物料放出后分批進入干燥塔，保持進風溫度70~75℃，風量220m3/min，品溫30℃，干燥20~30min，水分15~20%放出，至二級干燥塔；
二級干燥：物料分批進入干燥塔，保持進風溫度60~65℃，風量150m3/min，品溫36℃以下，干燥30min，水分8%以下放出，粉碎30目。
步驟（4）中，枯草芽孢桿菌液接種量5~10%，枯草芽孢桿菌液的制備如下：
（1）、菌種斜面制備：將保存的菌種DY-98-M1取兩環(huán)菌膜于10ml生理鹽水中，100℃水浴2min，自來水激冷，涂布到牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基平板上，30℃培養(yǎng)24h；挑取單菌落接入牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基斜面上，30℃培養(yǎng)36h，置入4℃冰箱備用；其中，牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基配方為：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化鈉 0.2%，瓊脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃滅菌30min。
（2）、種子液制備：取無菌生理鹽水，加入菌種斜面，用刮刀將菌種剝離，傾入接種瓶中。
（3）、一級種子罐種子培養(yǎng)：按照0.5%的接種量將種子液接種到一級種子罐，種子罐裝液量為總體積70%（500L裝液350L），在30℃，攪拌轉(zhuǎn)速180r/min，通風量0.6vvm，罐壓0.05Mpa條件下培養(yǎng)16小時，鏡檢，菌數(shù)合格時，轉(zhuǎn)入二級種子罐培養(yǎng)。其中一級種子罐培養(yǎng)基配方為：豆餅粉1.5%，玉米粉3.5%，麩皮5.5%，磷酸二氫鉀0.03%，磷酸氫二鈉0.3%，碳酸鈉0.135%，泡敵適量（0.02%）。消前pH7.0，實消40min，消后pH6.0。
（4）、二級發(fā)酵罐培養(yǎng)：將一級種子罐菌液全部接入二級發(fā)酵罐中，二級發(fā)酵罐裝液量50%，在30℃，攪拌轉(zhuǎn)速180r/min條件下，罐壓0.05Mpa，培養(yǎng)時間4h，第5h開始每小時升溫2℃，最高至38℃，第9h后每小時降溫2℃，第13h后保持30℃培養(yǎng)；通氣量前6個小時0.4vvm，后6個小時0.6vvm；鏡檢，菌數(shù)達到20億CFU/ml時，轉(zhuǎn)入暫存罐。其中二級發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方為：豆餅粉2.4%，玉米粉5.6%，麩皮8.8%，磷酸二氫鉀0.03%，磷酸氫二鈉0.3%，碳酸鈉0.135%，泡敵適量（0.02%）。消前pH7.0，實消40分鐘，消后pH6.0。
步驟（4）中，釀酒酵母菌液接種量5~10%；釀酒酵母菌液的制備如下：
（1）、菌種制備：將保存的菌種DY-38-M2取菌膜涂布到PDA培養(yǎng)基平板上，30℃培養(yǎng)3d，挑取單菌落接入PDA試管培養(yǎng)基，28℃培養(yǎng)3~5d。其中PDA培養(yǎng)基配方為：馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15~20g，水1000ml自然pH；制法：馬鈴薯去皮后，切成小塊，加水煮爛（煮沸20-30min），用4層紗布過濾，再加糖和瓊脂，加熱溶化后在補足水分至1000 ml，121℃滅菌40min。
（2）、種母瓶制備：配制YEPD培養(yǎng)基，150ml培養(yǎng)基分裝到500ml三角瓶中，121℃滅菌25min，用PDA試管斜面菌種接入種母瓶，28℃培養(yǎng)12h。其中YEPD培養(yǎng)基：酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸餾水1000mL，pH6.0，121℃濕熱滅菌20min。
（3）、一級種子罐：按照0.5%的接種量將種母菌液接種到一級種子罐，種子罐裝液量為總體積80%，在28℃，通風量0.2vvm，罐壓0.05Mpa條件下培養(yǎng)24h。其中一級種子罐培養(yǎng)基配方為YEPD培養(yǎng)基；酵母粉10g，蛋白胨20g，葡萄糖20g，蒸餾水1000mL，pH6.0，121℃濕熱滅菌20min。
（4）、二級發(fā)酵罐： 按照1%的接種量將種母菌液接種到發(fā)酵罐，裝液量為總體積80%，在28℃，通風量0.2vvm，罐壓0.05Mpa條件下培養(yǎng)24h，菌數(shù)達到10億CFU/ml時，轉(zhuǎn)入暫存罐。其中二級發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方為：糖蜜8%，尿素0.05%，磷酸二氫鉀0.05%。
步驟（4）中，糞腸球菌液接種量5~10%；糞腸球菌液的制備如下：
（1）、菌種的制備：將斜面保存的糞腸球菌在蛋白胨加富培養(yǎng)基平板上活化3次，挑取平板上透明圈較大的單菌落，接入液體試管，37℃培養(yǎng)12~16h后，以1%接種量接入種母液體培養(yǎng)基，培養(yǎng)18~24h作為種子液；其中蛋白胨加富培養(yǎng)基配方為：蛋白胨 1%，牛肉膏 0.3%，酵母膏0.2%，氯化鈉 0.2%，輕質(zhì)碳酸鈣1%，瓊脂 2%，pH 7.0～7.2，121℃滅菌30min；種母液體培養(yǎng)基配方為：蛋白胨4%，牛肉膏0.5%，氯化鈉0.5%，葡萄糖4%，豬肝粉0.3%，牛心粉0.3%，碳酸鈣0.5%。
（2）、搖瓶種子培養(yǎng)：種母液體培養(yǎng)液按照5~10%的接種量接入到一級種子罐培養(yǎng)基中，在37℃培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)16~20h；
按照2~5%接種量將一級種子罐種子液接到二級種子罐培養(yǎng)基中，在37℃，罐壓0.03~0.05MPa，攪拌60r/min條件下培養(yǎng)12~18h，待總菌數(shù)達到1~3×109CFU/ml以上時，轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐培養(yǎng)；其中種子罐培養(yǎng)基配方同種母液體培養(yǎng)基。
（3）、發(fā)酵罐培養(yǎng)：按照5~10%的接種量將二級種子罐種子液轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐；在37℃，罐壓0.03~0.05MPa，攪拌60r/min條件下培養(yǎng)12~18h，待總菌數(shù)達到30億CFU/ml以上時，轉(zhuǎn)入暫存罐。其中發(fā)酵罐培養(yǎng)基配方為：蛋白胨3.7%，豬肝浸粉0.5%，氯化鈉0.5%，葡萄糖4%，杜仲提取物0.5%，碳酸鈣0.5%。
所述葡萄糖溶液中葡萄糖含量為發(fā)酵液總量的2~4%。
本發(fā)明所提供的方法發(fā)酵后，飼料添加劑中活菌數(shù)達20億CFU/g，小肽≥10%，綠原酸含量≥0.1%。
該飼料添加劑使用時的添加比例為2~5kg/t。
為了驗證效果，分別在安徽，山東，河南、河北，陜西等地做動物實驗。安徽區(qū)試驗結(jié)果如下：
1、安徽蚌埠，試驗，共21天。養(yǎng)殖規(guī)模110頭母豬，800頭育肥豬。試驗豬品種為三元豬。詳細試驗結(jié)果見表1。
表1
結(jié)果分析：試驗組初始重稍低于對照組，但日增重和采食量高于對照組，而且料肉比低于對照組。試驗結(jié)果說明產(chǎn)品提高了飼料利用率、采食量和日增重。每頭豬每天多長二兩三（115克），料肉比降低5.9%。
2、安徽安慶宿松試驗，共32天。規(guī)模經(jīng)產(chǎn)母豬260，后備母豬60頭。育肥2400頭左右。品種為三元豬，含有一定太湖體系。詳細試驗結(jié)果見表2。
表2
結(jié)果分析：試驗組平均初始重較高，平均日增重增加110g。
3、山東菏澤市巨野縣共28天試驗，規(guī)模：母豬62頭，育肥360頭。品種為三元。詳細試驗結(jié)果見表3。
表3
結(jié)果分析：上述可知試驗組初始重略低于對照組，但末重高于對照組，且料肉比低于對照組。每頭豬每天多長三兩八（190克），料肉比降低25.1%。
本發(fā)明產(chǎn)品的作用是，通過有益菌發(fā)酵降低抗營養(yǎng)因子，同時改善該飼料適口性和利用率，并利用乳酸菌調(diào)節(jié)動物腸道菌群平衡，最大限度提高杜仲葉粉綠原酸、桃葉珊瑚苷等有效成分的釋放與吸收，從而達到促生長提品質(zhì)的效果。
本發(fā)明設(shè)計合理，具有生產(chǎn)成本低，效果好、安全，無殘留，抗應激，促生長，提高肉蛋奶品質(zhì)等作用。
具體實施方式
下面對本發(fā)明的具體實施例進行詳細說明。
實施例1
一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑，由如下比例的組分制得：杜仲葉粉75%，麩皮15%、玉米粉5%、豆粕8%、木聚糖酶0.05%、中溫淀粉酶0.005%、果膠酶0.01%、輕質(zhì)碳酸鈣0.5%，水5%比例，混合均勻。
上述飼料添加劑的制備方法包括如下步驟：
（1）、粉碎：用粉碎機將杜仲葉粉粉碎成20目粉。
（2）、原料混合：將杜仲葉粉、麩皮、玉米粉、豆粕、木聚糖酶、中溫淀粉酶、果膠酶、輕質(zhì)碳酸鈣混合，加入水，混合均勻。
（3）、原料酶解及殺菌：將上所述原料放入固體發(fā)酵罐，蒸汽升溫至37~40℃，保溫酶解40min。二次升溫至 68℃~70℃，保持30min，快速降溫到30℃。
（4）、先接入枯草芽孢桿菌液5~10%，維持30℃發(fā)酵8~12h。接入釀酒酵母菌液5~10%，維持28℃發(fā)酵6~8h。接入糞腸球菌液5~10%維持37℃發(fā)酵24~32h。
（5）、低溫二級沸騰干燥：
一級干燥：物料放出后分批進入干燥塔，保持進風溫度70~75℃，風量220m3/min，品溫30℃，干燥20~30min，水分15~20%放出，至二級干燥塔。
二級干燥：物料分批進入干燥塔，保持進風溫度60~65℃，風量150m3/min，品溫36℃以下，干燥30min，水分8%以下放出，粉碎30目。
實施例2
一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑，由如下比例的組分制得：杜仲葉粉80%，麩皮20%、玉米粉10%、豆粕5%、木聚糖酶0.03%、中溫淀粉酶0.01%、果膠酶0.005%、輕質(zhì)碳酸鈣0.5%，水5%比例，混合均勻。
其制備方法同實施例1。
實施例3
一種促生長提品質(zhì)飼料添加劑，由如下比例的組分制得：杜仲葉粉60%，麩皮10%、玉米粉8%、豆粕3%、木聚糖酶0.01%、中溫淀粉酶0.01%、果膠酶0.01%、輕質(zhì)碳酸鈣0.2%，水5%比例，混合均勻。
其制備方法同實施例1。
最后所應說明的是，以上實施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制，盡管參照本發(fā)明實施例進行了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應當理解，對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，都不脫離本發(fā)明的技術(shù)方案的精神和范圍，其均應涵蓋權(quán)利要求保護范圍中。