一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)材料的設(shè)計(jì)與制造【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由下述材料組成：營養(yǎng)肉湯：5-13g，酪蛋白胨：0.1-0.6g，硫代乙醇酸鈉：0.5-1.5g，注射水800-1000ml。本發(fā)明主要用炭疽桿菌的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)。
【專利說明】一種新型炭疸桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)材料的設(shè)計(jì)與制造【技術(shù)領(lǐng)域】，特別是涉及一種新型炭疽 桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基。

【背景技術(shù)】
[0002] 炭疽桿菌傳統(tǒng)通氣用培養(yǎng)基是采用新鮮黃豆芽經(jīng)過絞碎后煮沸的方式進(jìn)行制作， 由于黃豆芽在制作過程中，黃豆的質(zhì)量、豆芽制作工藝等環(huán)節(jié)都會(huì)對其產(chǎn)生很大的影響，因 此存在著質(zhì)量不穩(wěn)定甚至不達(dá)標(biāo)等一系列問題，本研究以生物化學(xué)原材料作為培養(yǎng)基的制 作原材料，極大的提高了培養(yǎng)基的穩(wěn)定性。
[0003] 本發(fā)明構(gòu)思是用生物化學(xué)原材料代替新鮮黃豆芽制作炭疽桿菌通氣用培養(yǎng)基， 其結(jié)果表明，采用生物化學(xué)原材料代替新鮮黃豆芽來制作是可行的，穩(wěn)定的，有應(yīng)用價(jià)值 的。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于：使用生物化學(xué)原材料制作炭疽通氣用培養(yǎng)基方法，替代了使 用新鮮黃豆芽制作炭疽通氣用培養(yǎng)基的方法，使炭疽通氣用培養(yǎng)基更穩(wěn)定、便于操作。
[0005] 本發(fā)明是這樣實(shí)現(xiàn)的：一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由下述 材料組成：營養(yǎng)肉湯：5_13g，酪蛋白胨：0. 1-0. 6g，硫代乙醇酸鈉：0. 5-1. 5g，注射水 800-1000ml。
[0006] 選用的BR生代試劑購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。營養(yǎng)肉湯為北京中海生物科 技有限公司生產(chǎn)，貨號：20130916.01 ;硫代乙醇酸鈉為北京奧博星生物科技有限責(zé)任公 司生產(chǎn)，貨號：20111018.02 ;酪蛋白胨為北京奧博星生物科技有限責(zé)任公司生產(chǎn)，貨號 20111018. 03。
[0007] 本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明采用生物化學(xué)原材料通過一定量的配比來制作炭疽桿 菌通氣用培養(yǎng)基，與傳統(tǒng)的使用新鮮豆芽來制作炭疽桿菌通氣用培養(yǎng)基的方法相比質(zhì)量穩(wěn) 定，同時(shí)省時(shí)、省力；制作工藝簡單，簡化了程序，縮短時(shí)間，降低了污染幾率，彰顯技術(shù)進(jìn) 止 /J/ 〇
[0008] 本發(fā)明進(jìn)行了 3個(gè)實(shí)驗(yàn)批次的炭疽桿菌通氣培養(yǎng)對比實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，使用 化學(xué)原材料代替新鮮黃豆芽制作的炭疽桿菌通氣用培養(yǎng)基通氣培養(yǎng)活菌數(shù)由平均2. 63億 /ml增長至5. 73億/ml,同時(shí)安全檢驗(yàn)及效力檢驗(yàn)與國家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)相符。

【具體實(shí)施方式】
[0009] 下面將結(jié)合實(shí)施例對發(fā)明作進(jìn)一步說明。
[0010] 實(shí)施例1、一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由下述材料組成：營養(yǎng)肉 湯：5g，酪蛋白胨：0. Ig,硫代乙醇酸鈉：0. 5g，注射水800ml。 實(shí)施例2、一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由下述材料組成：營養(yǎng)肉湯： 13g，酪蛋白胨：0. 6g，硫代乙醇酸鈉：1. 5g，注射水1000ml。 實(shí)施例3、一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，該培養(yǎng)基由下述材料組成：營養(yǎng)肉湯： 8g，酪蛋白胨：0. 35g，硫代乙醇酸鈉：1. 0g，注射水900ml。
[0011] 實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 實(shí)驗(yàn)流程：菌種制作；培養(yǎng)基制作、接種、通氣培養(yǎng)；毒力檢驗(yàn)步驟； (1)菌種制作 將原代菌種啟封移植至普通肉湯斜面培養(yǎng)基，在36?37°C條件下培養(yǎng)18?24小時(shí)， 將培養(yǎng)物劃線接種于普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基平皿若干付，在36?37°C條件下培養(yǎng)18?24小 時(shí)。選取普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基平皿上生長出的單個(gè)菌落，在低倍鏡45度折射光下，挑選5 個(gè)以上菌落邊緣不整齊，呈波紋狀結(jié)構(gòu)的菌落。然后用普通肉湯液體培養(yǎng)基將選取的菌落 混合均勻，劃線移植于普通肉湯瓊脂斜面。在36?37°C條件下培養(yǎng)18?24小時(shí)為一級種 子。
[0012] (2)培養(yǎng)基制作、接種、通氣培養(yǎng)： (3)本發(fā)明的培養(yǎng)基：營養(yǎng)肉湯：13g，酪蛋白胨：0. 6g，硫代乙醇酸鈉：1. 5g，注射水 1000ml。以上配方將生物化學(xué)原材料充分溶解，KKTC煮沸10分鐘后，118-121°C高壓滅菌 40分鐘后降溫至37°C。按照《中華人名共和國獸用生物制品生產(chǎn)工藝規(guī)程2010版》之方 法進(jìn)行通氣培養(yǎng)及菌液收獲保存。
[0013] (3)毒力檢驗(yàn)： 皮下注射體重18?22g小白鼠4只，每只0. 25ml ;皮下注射體重300?400g豚鼠4只 及1. 5?2kg家兔2只，每只各0. 5ml。注射后，上述動(dòng)物可引起劇烈水腫，小白鼠應(yīng)至少死 亡3只，豚鼠至少3只存活，家兔應(yīng)2/2存活。
[0014] 選用的BR生代試劑購自中國獸醫(yī)藥品監(jiān)察所。營養(yǎng)肉湯為北京中海生物科技 有限公司生產(chǎn)，貨號：20130916.01 ;硫代乙醇酸鈉為北京奧博星生物科技有限責(zé)任公司 公司生產(chǎn)，貨號：20111018.02 ;酪蛋白胨為北京奧博星生物科技有限責(zé)任公司公司生產(chǎn)， 貨號：20111018. 03;大豆蛋白胨為北京奧博星生物科技有限責(zé)任公司公司生產(chǎn)，貨號： 20120120. 04〇
[0015] 試驗(yàn)結(jié)果見下表1。
[0016] ⑴炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基與黃豆芽湯通氣培養(yǎng)及保存期活菌計(jì)數(shù)結(jié)果見表1。
[0017] 表1.復(fù)合干粉培養(yǎng)基與黃豆芽湯通氣培養(yǎng)及保存期活菌計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果

【權(quán)利要求】
1. 一種新型炭疽桿菌復(fù)合干粉培養(yǎng)基，其特征在于：該培養(yǎng)基由下述材料組成：營養(yǎng) 肉湯：5-13g，酪蛋白胨：0. 1-0. 6g，硫代乙醇酸鈉：0. 5-1. 5g，注射水800-1000ml。
【文檔編號】C12N1/20GK104388359SQ201410719175
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年12月2日 優(yōu)先權(quán)日:2014年12月2日
【發(fā)明者】孟建國, 岳華 申請人:新疆天康畜牧生物技術(shù)股份有限公司