用于污水凈化與垃圾除臭的微生態(tài)制劑及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明提供一種用于污水凈化與垃圾除臭的微生態(tài)制劑，其為包括如下微生物的液體培養(yǎng)物，釀酒酵母、漢遜酵母、沼澤紅假單胞菌、地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、細(xì)黃鏈霉菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌，其中培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基包含糖蜜、氯化鈉、尿素，且微生態(tài)制劑中活菌數(shù)達1×1010cfu/ml以上。將其投入污水或噴灑于垃圾中轉(zhuǎn)站、垃圾填埋場及養(yǎng)殖場等場所，可對環(huán)境起明顯改善作用。
【專利說明】用于污水凈化與垃圾除臭的微生態(tài)制劑及其制備方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于微生態(tài)制劑制備【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種用于污水凈化與垃圾除臭的 微生態(tài)制劑及其制備方法。

【背景技術(shù)】
[0002] 微生態(tài)制劑廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、環(huán)保、醫(yī)療等領(lǐng)域，目前在農(nóng)業(yè)上用量最大，而在環(huán) 保領(lǐng)域使用還不多。現(xiàn)有的一些用于水處理的微生態(tài)制劑，雖然取得了一些處理效果，但普 遍存在激活所需時間長、持續(xù)作用時間短、微生物種類單一等問題，從而導(dǎo)致其處理效果欠 佳等問題。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 鑒于現(xiàn)有環(huán)保領(lǐng)域微生態(tài)制劑的不足，本研發(fā)團隊受"有效微生物群"概念所啟 發(fā)，制備了一種含多種微生物的、能夠凈化污水及除臭的液體劑型微生態(tài)制劑。
[0004] 本發(fā)明的第一方面是一種用于污水凈化與垃圾除臭的微生態(tài)制劑，其為包括如 下微生物的液體培養(yǎng)物，釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae)、漢遜酵母（Hansenula anomala)、沼澤紅假單胞菌（Rhodop seudanonas palustris)、地衣芽抱桿菌（Bacillus licheniformis)、枯草芽抱桿菌[Bacillus subtilis(Ehrenberg) Cohn]、巨大芽抱桿 菌（Bacillus megaterium)、細(xì)黃鏈霉菌（Streptomyces microflavus)、嗜酸乳桿菌 (Lactobacillus acidophilus)、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)、嗜熱鏈球菌 (Streptococcus thermophilus)。其中培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基包含糖蜜、氯化鈉、尿素，且微生 態(tài)制劑中活菌數(shù)達lXl〇1Qcfu/ml以上。
[0005] 本發(fā)明還提供一種制備上述微生態(tài)制劑的方法，包括：
[0006] (1)制備復(fù)合菌種，包括一級種子培養(yǎng)：將各所述微生物的菌落分別接種于所述 液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)16-24小時，溫度30-35°C ;及二級種子培養(yǎng)：一級培養(yǎng)物接種于所述液 體培養(yǎng)物放大混合培養(yǎng)24-48小時，溫度30-35°C，得到作為復(fù)合菌種的二級培養(yǎng)物。
[0007] (2)初始發(fā)酵：將二級培養(yǎng)物接入所述液體培養(yǎng)基放大培養(yǎng)24-48小時，溫度 15-30°C ;然后再添加基于初始發(fā)酵開始時0. 8-1. 2倍量的所述液體培養(yǎng)基，在30-35°C下 培養(yǎng)，其中保持PH不低于4. 2,對液面進行光照，4-12小時攪勻一次，培養(yǎng)至出現(xiàn)漂浮物。
[0008] (3)高糖發(fā)酵：再加入基于初始發(fā)酵開始時0. 8-1. 2倍量的額外添加了 3?5%糖 蜜的所述液體培養(yǎng)基，在28?30°C下培養(yǎng)，其中保持pH不低于3. 9,繼續(xù)提供光照，4-12小 時攪勻一次，培養(yǎng)4?8天，至pH不再明顯下降；
[0009] (4)靜默發(fā)酵：停止保溫、攪拌、光照，在保持pH 3. 9-4. 4的情況下，繼續(xù)培養(yǎng)至活 菌數(shù)達IX 101Qcfu/mL以上。
[0010] 本發(fā)明的微生態(tài)制劑的優(yōu)點在于：
[0011] 將其投入污水，如生活污水、食品加工廢水、畜牧養(yǎng)殖廢水、受污染河道及水產(chǎn)養(yǎng) 殖水體等中，可降低污水化學(xué)需氧量、總氮、懸浮物等指標(biāo)，從而使水體變得清澈；將其噴 灑于垃圾中轉(zhuǎn)站、垃圾填埋場及養(yǎng)殖場等場所，可對空氣中的氨、硫化氫等惡臭物質(zhì)起到吸 附、酶解等作用。從而起到對環(huán)境的改善作用。

【具體實施方式】
[0012] 本發(fā)明的微生態(tài)制劑由復(fù)合菌種經(jīng)發(fā)酵得到。
[0013] 本發(fā)明中復(fù)合菌種制備及其發(fā)酵所需的液體培養(yǎng)基的組成為：
[0014] 糖蜜8?10% ;食鹽1. 5?2% ;
[0015] 尿素0· 5?1 % ;復(fù)合生長因子1?3% ;
[0016] 及余量的水。
[0017] 各組分以重量百分比計。調(diào)配好后用氫氧化鈉或碳酸氫鈉調(diào)pH至5. 8?6. 0,巴 氏消毒。
[0018] 上述糖蜜、食鹽、尿素為市購產(chǎn)品。
[0019] 復(fù)合生長因子為自配，由20%磷酸氫二鉀、40%硫酸鎂、25%過濾番茄汁、5%酵母 浸提物、10%電解多維。其中，磷酸氫二鉀、硫酸鎂、酵母浸提物、電解多維為市購產(chǎn)品，過濾 番茄汁為自制。
[0020] 復(fù)合菌種按如下方法制備。
[0021] 復(fù)合菌種的微生物組分包括釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae)、漢遜酵母 (Hansenula anomala)、沼澤紅假單胞菌（Rhodop seudanonas palustris)、地衣芽抱桿菌 (Bacillus licheniformis)、枯草芽抱桿菌[Bacillus subtilis (Ehrenberg) Cohn]、巨大 芽抱桿菌（Bacillus megaterium)、細(xì)黃鏈霉菌（Streptomyces microflavus)、嗜酸乳桿 菌（Lactobacillus acidophilus)、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)、嗜熱鏈球菌 (Streptococcus thermophilus)。各微生物組分為市購試管種。
[0022] 復(fù)合菌種的制備方法分為一級與二級兩步。
[0023] 上述"一級"為各組分的純培養(yǎng)。挑取各微生物的菌落，分別接種至100?200mL 液體培養(yǎng)基中，置于恒溫振蕩器中30?35°C、100?200r/min培養(yǎng)16?24h ;但嗜酸乳桿 菌與植物乳桿菌不振蕩，靜置培養(yǎng)。各微生物接種量基本相同。
[0024] 上述"二級"為混合培養(yǎng)，具體方法為：準(zhǔn)備5?10L液體培養(yǎng)基，接種一級培養(yǎng) 后的釀酒酵母、漢遜酵母、沼澤紅假單胞菌、細(xì)黃鏈霉菌培養(yǎng)物，30?32°C間歇攪拌（60? 120r/min機械攪拌，每3?5h -次，每次1?2min)培養(yǎng)12?24h ;之后接種地衣芽孢 桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌，繼續(xù)培養(yǎng)16? 24h。培養(yǎng)完畢后，發(fā)臭的視為染雜菌，應(yīng)舍棄；氣味為酸味的為正常。
[0025] 發(fā)酵培養(yǎng)過程分為初始發(fā)酵、高糖發(fā)酵、靜默發(fā)酵三個階段，其條件如下所述：
[0026] 初始發(fā)酵
[0027] 將已制備好的復(fù)合菌種泵入含上述液體培養(yǎng)基的種子罐，不設(shè)條件地自然培養(yǎng) (自然溫度15?30°C ) 24?48h，然后泵入裝有約四分之一體積液體培養(yǎng)基的發(fā)酵罐，使 發(fā)酵罐中培養(yǎng)物體積為罐總體積的約二分之一。在發(fā)酵罐中以30?32°C，pH下限4. 2， 每8?12h攪拌lmin，提供光照（例如以高壓氣體放電燈，如金屬鹵化物燈、氙氣燈等，在 發(fā)酵罐上部照射于液面，作用為促進沼澤紅假單胞菌生長并成為優(yōu)勢菌，通常照度不低于 1000LUX ;)，培養(yǎng)至出現(xiàn)漂浮物（類菌苔物）。通常此階段發(fā)酵時間為1?3天。
[0028] 高糖發(fā)酵
[0029] 向發(fā)酵罐中泵入再添加了 2?5%糖蜜的所述液體培養(yǎng)基至大致四分之三體積， 攪拌均勻。以28?30°C，pH下限3. 9,每8?12h攪拌lmin，繼續(xù)提供光照，培養(yǎng)至pH不 再明顯下降。通常此階段發(fā)酵時間為4?8天。
[0030] 靜默發(fā)酵
[0031] 不再加熱、攪拌、光照，在pH下限3. 9, pH上限4. 4的情況下，繼續(xù)培養(yǎng)，當(dāng)pH值低 于下限，則加入氫氧化鈉或碳酸氫鈉調(diào)整；當(dāng)PH值高于上限，則加入硫酸或冰乙酸調(diào)整。至 漂浮物大部分（80 %以上）下沉，且顏色呈鮮紅色或橙黃色，氣味呈酸味或酯味，活菌數(shù)達 I X 101(lCfu/mL以上即可放罐。通常此階段發(fā)酵時間為5?10天。
[0032] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步說明。
[0033] 其中，各實施例所用微生物菌株及來源如下：

【權(quán)利要求】
1. 一種用于污水凈化與垃圾除臭的微生態(tài)制劑，其特征在于，所述微生態(tài)制劑為包括 如下微生物的液體培養(yǎng)物：釀酒酵母（Saccharomyces cerevisiae)、漢遜酵母（Hansenula anomala)、沼澤紅假單胞菌（Rhodop seudanonas palustris)、地衣芽抱桿菌（Bacillus licheniformis)、枯草芽抱桿菌[Bacillus subtilis(Ehrenberg) Cohn]、巨大芽抱桿 菌（Bacillus megaterium)、細(xì)黃鏈霉菌（Streptomyces microflavus)、嗜酸乳桿菌 (Lactobacillus acidophilus)、植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum)、嗜熱鏈球菌 (Streptococcus thermophilus)， 其中微生物培養(yǎng)用液體培養(yǎng)基包含糖蜜、氯化鈉、尿素，且微生態(tài)制劑中活菌數(shù)達 lX101Qcfu/ml 以上。
2. 如權(quán)利要求1所述的微生態(tài)制劑，所述液體培養(yǎng)基包含以重量百分比計的8?10% 糖蜜、1. 5?2%氯化鈉及0. 5?1%尿素。
3. 如權(quán)利要求1所述的微生態(tài)制劑，所述液體培養(yǎng)基包含以重量百分比計的8?10% 糖蜜、1.5?2%氯化鈉、0.5?1%尿素、1?3%復(fù)合生長因子及余量的水，且pH 5. 8? 6.0,其中復(fù)合生長因子包括20%磷酸氫二鉀、40%硫酸鎂、25%過濾番茄汁、5%酵母浸提 物、10%電解多維。
4. 一種制備權(quán)利要求1-3任一項所述的微生態(tài)制劑的方法，包括： (1) 制備復(fù)合菌種： 一級種子培養(yǎng)：將各所述微生物的菌落分別接種于所述液體培養(yǎng)基純培養(yǎng)16-24小 時，溫度30-35°C ; 二級種子培養(yǎng)：一級培養(yǎng)物接種于所述液體培養(yǎng)物放大混合培養(yǎng)24-48小時，溫度 30-35°C，得到作為復(fù)合菌種的二級培養(yǎng)物； (2) 初始發(fā)酵：將二級培養(yǎng)物接入所述液體培養(yǎng)基放大培養(yǎng)24-48小時，溫度15-30°C; 然后再添加基于初始發(fā)酵開始時〇. 8-1. 2倍量的所述液體培養(yǎng)基，在30-35°C下培養(yǎng)，其中 保持pH不低于4. 2,對液面進行光照，4-12小時攪勻一次，培養(yǎng)至出現(xiàn)漂浮物； (3) 高糖發(fā)酵：再加入基于初始發(fā)酵開始時0. 8-1. 2倍量的額外添加了 3?5%糖蜜的 所述液體培養(yǎng)基，在28?30°C下培養(yǎng)，其中保持pH不低于3. 9,繼續(xù)提供光照，4-12小時攪 勻一次，培養(yǎng)4?8天，至pH不再明顯下降； (4) 靜默發(fā)酵：停止保溫、攪拌、光照，在保持pH 3. 9-4. 4的情況下，繼續(xù)培養(yǎng)至活菌數(shù) 達 lX10lclcfu/mL 以上。
5. 如權(quán)利要求4所述的制備方法，其中在一級種子培養(yǎng)過程，所述微生物中的嗜酸乳 桿菌與植物乳桿菌靜置培養(yǎng)，其余微生物振蕩培養(yǎng)。
6. 如權(quán)利要求4所述的制備方法，其中在二級種子培養(yǎng)過程，所述地衣芽孢桿菌、枯草 芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌的一級培養(yǎng)物在混合培養(yǎng) 時間過半時接種。
7. -種制備權(quán)利要求1-3所述的微生態(tài)制劑的方法，包括： (1)制備復(fù)合菌種： 一級種子培養(yǎng)：將所述液體培養(yǎng)基分裝至200ml三角燒瓶中，從各所述微生物試管種 斜面上挑取菌落，分別接種至各瓶培養(yǎng)基中，并置于恒溫振蕩器中32°C振蕩培養(yǎng)24小時， 但嗜酸乳桿菌與植物乳桿菌靜置培養(yǎng)； 二級種子培養(yǎng)：取10L所述液體培養(yǎng)基，接入釀酒酵母、漢遜酵母、沼澤紅假單胞菌、細(xì) 黃鏈霉菌的一級培養(yǎng)物，32°C培養(yǎng)，培養(yǎng)期間每4小時攪拌均勻一次，培養(yǎng)24小時之后再接 種地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、巨大芽孢桿菌、嗜酸乳桿菌、植物乳桿菌、嗜熱鏈球菌，攪 拌均勻后繼續(xù)靜置培養(yǎng)24小時得到二級培養(yǎng)物作為復(fù)合菌種； (2) 初始發(fā)酵：將二級培養(yǎng)物接入3噸所述液體培養(yǎng)基培養(yǎng)48小時，溫度15-30°C ;然 后再添加2. 5噸所述液體培養(yǎng)基，在32°C下培養(yǎng)，其中保持pH不低于4. 2,每8小時攪拌1 分鐘，提供光照，培養(yǎng)至出現(xiàn)漂浮物。 (3) 高糖發(fā)酵：再加入3噸額外添加了 5%糖蜜的所述液體培養(yǎng)基，在28?30°C下培 養(yǎng)，其中保持pH不低于3. 9,繼續(xù)提供光照，每12小時攪拌1分鐘，培養(yǎng)4?8天，至pH不 再明顯下降； (4) 靜默發(fā)酵：停止保溫、攪拌、光照，在保持pH 3. 9-4. 4的情況下，繼續(xù)培養(yǎng)至80%的 漂浮物下沉，培養(yǎng)物顏色呈鮮紅色或橙黃色，氣味呈酸味或酯味，活菌數(shù)達1 X 101〇CfU/mL 以上。
【文檔編號】C12R1/46GK104388348SQ201410669244
【公開日】2015年3月4日 申請日期:2014年11月21日 優(yōu)先權(quán)日:2014年11月21日
【發(fā)明者】劉宮介, 張顯忠, 葛文 申請人:上海寄綠生物環(huán)?？萍加邢薰?br>